एरशोवा आय.बी., Osychnyuk L.M., मोचालोवा ए.ए., राज्य संस्था "Lugansk राज्य वैद्यकीय विद्यापीठ", बालरोग विभाग, बालपण संक्रमण.
लेख "वास्तविक संसर्गशास्त्र", क्रमांक 2 (3), 2014 या जर्नलमध्ये प्रकाशित झाला होता.
माहिती संसाधन "झास्लाव्स्की पब्लिशिंग हाऊस" www.mif-ua.com

लेखात हेलमिन्थ संसर्गाचे निदान करण्याच्या पद्धतींची रूपरेषा दिली आहे: सूक्ष्मदर्शक, एन्झाइम इम्युनोसे, सेरोलॉजिकल, पॉलिमरेज चेन रिअॅक्शन, बायोरेसोनन्स डायग्नोस्टिक्स, हेमोस्कॅनिंग, तसेच इन्स्ट्रुमेंटल (अल्ट्रासाऊंड आणि क्ष-किरण तपासणी, गणना टोमोग्राफी) आणि प्रयोगशाळा, ज्याचा अप्रत्यक्ष अर्थ आहे ( क्लिनिकल विश्लेषणरक्त, यकृत कार्य चाचण्यांसाठी रक्त चाचणी, डिस्बैक्टीरियोसिससाठी स्टूल चाचणी). पद्धतींचे फायदे, त्यांचे तोटे आणि प्राप्त केलेल्या डेटाची विश्वासार्हता वर्णन केली आहे. हेल्मिन्थ संसर्गाचा धोका ओळखण्यासाठी रुग्णांसाठी प्रश्नावली प्रस्तावित आहे. पद्धतींचे फायदे, त्यांचे तोटे आणि प्राप्त केलेल्या डेटाची विश्वासार्हता वर्णन केली आहे. हेल्मिन्थ संसर्गाचा धोका ओळखण्यासाठी रुग्णांसाठी प्रश्नावली प्रस्तावित आहे.

हेल्मिंथ्सचा मानवी शरीरावर नकारात्मक प्रभाव पडतो. ते ऍलर्जी, पॉलीहायपोविटामिनोसिस, मॅक्रो- आणि मायक्रोइलेमेंटोसिस, अशक्त हेमॅटोपोइसिस ​​आणि रक्तवहिन्यासंबंधी पारगम्यता, हार्मोनल असंतुलन. हेल्मिन्थ संक्रमण निर्मितीमध्ये योगदान देतात जुनाट रोग(पित्ताशयाचा दाह, पित्ताशयाचा दाह, स्वादुपिंडाचा दाह, कोलायटिस, मधुमेह, श्वासनलिकांसंबंधी दमा, atopic dermatitis), मानसिक-भावनिक विकार ( तीव्र थकवा, चिडचिड, चिंता, मुलांमध्ये अतिक्रियाशीलता), अशक्तपणा, इ. दीर्घकाळापर्यंत हेल्मिंथचा प्रादुर्भाव झाल्यास, ते विकसित होऊ शकते दुय्यम इम्युनोडेफिशियन्सी.

लोकसंख्येमध्ये हेल्मिंथ संसर्गाबाबत डॉक्टरांची सतर्कता सध्या अपुरी आहे आणि ओळखल्या गेलेल्या संक्रमित रूग्णांच्या उपचारांमध्ये प्रतिबंध कमी केला जातो.

हेल्मिन्थियासिसचे निदानक्लिनिकल, एपिडेमियोलॉजिकल आणि प्रयोगशाळा डेटावर आधारित आहे. अशी चिन्हे asthenic सिंड्रोम, वारंवार येणारी अर्टिकेरिया, त्वचा आणि श्लेष्मल त्वचेची बिघडलेली पुनरुत्पादन, एटोपिक डर्माटायटीस आणि ब्रॉन्को-ऑब्स्ट्रक्टिव्ह सिंड्रोम, पॉलीलिम्फॅडेनोपॅथी आणि हेपेटोस्प्लेनोमेगाली, II-III डिग्रीच्या एडिनॉइड वनस्पती, "भौगोलिक, निवडक किंवा कमी" , अस्थिर खुर्ची, हेल्मिंथ्सची उपस्थिती दर्शवू शकते.

येथे सेरोलॉजिकल अभ्यासहेल्मिंथ्समध्ये ऍन्टीबॉडीजची उपस्थिती निश्चित करा (विश्वसनीयता - सुमारे 60%): जर इचिनोकोकोसिस, सिस्टीरकोसिस, ट्रायचिनोसिस, टॉक्सोकेरियासिसचा संशय असेल तर, अप्रत्यक्ष हेमॅग्लुटिनेशन प्रतिक्रिया, लेटेक्स एग्ग्लुटिनेशन, कॉम्प्लिमेंट फिक्सेशन आणि इम्युनोफ्लोरेसेन्स मोठ्या प्रमाणावर वापरले जातात.
सर्व प्रकरणांमध्ये नाही, विशिष्ट ऍन्टीबॉडीज निर्धारित करण्याच्या पद्धतींमध्ये पुरेशी विशिष्टता आणि विश्वासार्हता असते. हेलमिंथची प्रतिजैविक रचना केवळ प्रजातींवरच नव्हे तर स्टेजवर देखील अवलंबून असते; अंड्यापासून ते एका जटिल विकास चक्रातून जात आहे प्रौढ, हेल्मिंथ्स त्यांची प्रतिजैविक रचना बदलतात. याव्यतिरिक्त, इम्युनोडायग्नोस्टिक प्रतिक्रियांमध्ये सोमॅटिक ऍन्टीबॉडीजचा वापर केला जातो आणि यजमानाच्या शरीरात ऍन्टीबॉडीज मुख्यतः हेलमिंथच्या मलमूत्र आणि स्रावांमध्ये तयार होतात. शरीराचे गैर-विशिष्ट संवेदना, ट्रेमेटोड्स, प्रोटोझोआ आणि मानवांच्या काही प्रतिजनांची समानता, विश्वासार्ह निदानाच्या खाली असलेल्या टायटर्समध्ये खोट्या-सकारात्मक प्रतिक्रियांचे उच्च प्रमाण तयार करतात.

वापरून helminths निश्चित करण्यासाठी पद्धत पॉलिमरेज साखळी प्रतिक्रिया हे अत्यंत विशिष्ट आणि अतिसंवेदनशील आहे, परंतु त्याची उच्च किंमत आणि जटिलतेमुळे ते स्क्रीनिंगसाठी वापरले जाऊ शकत नाही, उदाहरणार्थ, आपल्याला मुलांच्या संस्थेतील मुलांच्या गटाची तपासणी करणे आवश्यक आहे.

शरीरातील हेल्मिंथ्सच्या उपस्थितीवर रोगप्रतिकारक शक्ती नेहमीच प्रतिक्रिया देत नाही (ओळखते आणि नष्ट करते). याचे कारण असे की काही हेलमिंथमध्ये टिकाऊ आणि रासायनिक प्रतिरोधक कॅप्सूल असते किंवा ते ओळखले जात नसलेल्या पदार्थाने लेपित केलेले असते. रोगप्रतिकार प्रणाली; दाहक प्रतिक्रियांपासून सर्वाधिक संरक्षित असलेल्या ऊतींमध्ये स्थानिकीकृत, उदाहरणार्थ पाठीच्या कण्यामध्ये; त्यातील अनेक प्रकार पाचक मुलूखअँटी-एंझाइम स्राव करतात, जे त्यांना मृत्यूपासून वाचवतात; दीर्घायुष्य (वर्षे, आणि कधीकधी व्यक्तीच्या मृत्यूपर्यंत); नेट कार्बोहायड्रेट्सच्या ग्लायकोलिसिसवर आहार द्या; सक्शन कप, हुक इ. सारखी उपकरणे आहेत जी शरीरात फिक्सेशन सुलभ करतात; अनेक प्रजाती आहेत लैंगिक पुनरुत्पादन, ज्यामध्ये जनुक माहितीची देवाणघेवाण केली जाते, ज्यामुळे विषम लोकसंख्येमध्ये वाढ होते आणि असुरक्षितता कमी होते; आहे उच्चस्तरीयप्रजनन क्षमता

येथे प्रचंड कंपनसंख्या असलेल्या (ध्वनिलहरी) , अवयवांची एक्स-रे तपासणी उदर पोकळी , गणना टोमोग्राफी ओळखले जाऊ शकते अप्रत्यक्ष चिन्हेहेल्मिंथियासिस: हेपॅटोस्प्लेनोमेगाली, यकृताची असमानता आणि लहान हायपरकोइक सिग्नलमुळे प्लीहा पॅरेन्कायमा, वाढ लिम्फ नोड्सप्लीहा आणि स्वतः हेल्मिंथ्सच्या गेट्समध्ये (इचिनोकोकी, आतड्यांसंबंधी हेल्मिंथचे गोळे इ.).

हेमोस्कॅनिंग - शक्तिशाली डार्क-फील्ड मायक्रोस्कोप वापरून गुणात्मक रक्त तपासणी, आपण रक्त पेशींची स्थिती (आकार, आकार, क्रियाकलाप, रंग इ.), विशिष्ट नसलेले घटक आणि पदार्थांची उपस्थिती पाहू शकता - हे सर्व प्रत्यक्ष किंवा अप्रत्यक्षपणे पेशींची उपस्थिती दर्शवते. शरीरात helminths. मायक्रोस्कोपमध्ये अंगभूत व्हिडिओ कॅमेरा वापरून मॉनिटर स्क्रीनवर प्रतिमा प्रदर्शित केली जाते. ही निदान पद्धत अत्यंत विश्वासार्ह आहे.

अप्रत्यक्ष प्रयोगशाळा चिन्हे हेल्मिंथियासिसअशक्तपणा, बेसोफिलिया, इओसिनोफिलिया, एस्पार्टेट एमिनोट्रान्सफेरेजची वाढलेली पातळी असू शकते. अशा प्रकारे, टॉक्सोकेरियासिससह, इओसिनोफिल्सची ल्युकेमॉइड प्रतिक्रिया (20% पेक्षा जास्त) पर्सिस्टंटच्या पार्श्वभूमीवर आढळून येते. ऍलर्जी सिंड्रोम(गंभीर खाज सुटणे आणि प्रतिकारासह atopic dermatitis पारंपारिक थेरपी, गंभीर ब्रोन्कियल दमा). सामान्यांचा जुलूम कोलीडिस्बॅक्टेरियोसिससाठी स्टूल चाचणी देखील संभाव्य हेल्मिंथियासिस दर्शवू शकते.

हेल्मिन्थियासिसचा प्रसार लक्षात घेऊन, आम्ही ऑफर करतो प्रश्नावलीहेल्मिन्थ संसर्गाचा धोका निश्चित करण्यासाठी.

• गोड्या पाण्यातील पाण्याच्या शरीरात पोहणे.
• साबण आणि गरम पाण्याने खाण्यापूर्वी हात धुवू नका.
• असत्यापित स्त्रोतांकडून पाणी प्या.
• तुम्ही मांसाच्या रेट्यासह घरगुती स्वयंपाकात वापरतात.
• तुम्ही हलके खारवलेले मासे खातात का?
• तुम्ही मध्यम शिजवलेले मांस (रक्तासह) खाता.
• तुम्ही हलके खारट, नॉन-फॅक्टरी तयार केलेले कॅविअर खाता का?
• धुवू नका चिकन अंडीसाबणाने.
• खाण्यापूर्वी केळी, संत्री, टेंगेरिन धुवू नका.
• आपल्या बागेला खत घालून खत द्या.
• सरळ बागेतून भाज्या खा.
• तुम्ही सरळ बागेतून फळे आणि बेरी खाता.
• पडलेली फळे खा.
• सॅलड बनवण्यासाठी आपल्या सर्व हिरव्या भाज्यांवर उकळते पाणी ओतू नका.
• यार्डमधून घेतलेल्या वाळूमध्ये गाजर साठवा.
• गवतावर अनवाणी चालावे.
• कुटुंबातील सदस्यांना हेल्मिंथिक संसर्ग झाला होता.
• कुटुंबात कुत्रा किंवा मांजर आहे.

प्रत्येक उत्तरासाठी " होय"- 2 गुण, " कधी कधी"- 1, " नाही" - 0. 0-5 गुणांसह, संसर्गाची संभाव्यता नगण्य आहे, 6-12 - संसर्ग शक्य आहे, 13-25 - उच्च संभाव्यता, 25 पेक्षा जास्त गुण - खूप जास्त. शेवटच्या दोन परिणामांसह, नियमित तपासणी आणि शक्यतो प्रतिबंधात्मक उपचार आवश्यक आहेत.

कारण द क्लिनिकल प्रकटीकरणहेल्मिंथ इन्फेक्शन नेहमीच विशिष्ट नसतात आणि सुरुवातीच्या टप्प्यात - विशिष्ट नसतात, आम्ही रुग्णांसाठी एक प्रश्नावली ऑफर करतो स्व-निदान हेल्मिंथियासिस.

• सकाळी गुदद्वारात खाज सुटते.
• सकाळी दात घासताना मळमळ होते.
• त्वचेच्या थरांच्या सोलणेसह बोटे किंवा बोटे सोलणे.
• ऍलर्जीक त्वचेवर पुरळ, त्वचेवर खाज सुटणे.
• पापण्यांच्या क्षेत्रामध्ये सोलणे आणि सूज येणे.
• वाढलेली थकवा, सुस्ती, तंद्री.
• भुकेची वाढलेली भावना.
• पोटात अस्वस्थतेची भावना.
• शरीराचे वजन कमी होणे.
• अनेक जुनाट अवयव रोगांची उपस्थिती अन्ननलिका, सांधे, ब्रॉन्कोपल्मोनरी प्रणाली.
• खराब आरोग्य, अधिकृत निदानाचा अभाव, दीर्घकालीन अप्रभावी उपचार.
• तापमानात वेळोवेळी वाढ, स्नायू आणि सांधेदुखीसह.

उत्तर " होय» किमान 2-3 प्रश्नांबद्दल बोलतो उच्च संभाव्यताहेल्मिन्थ संक्रमण.

निष्कर्ष

1. चालू आधुनिक टप्पा 100% विश्वासार्ह असलेल्या हेल्मिन्थ संसर्गाच्या चाचणीसाठी प्रयोगशाळा पद्धती नाहीत.

2. हेल्मिंथियासिसचे निदान करण्यासाठी पॉलिमरेझ चाचणीची सर्वात जास्त विश्वासार्हता आहे साखळी प्रतिक्रियाआणि बायोरेसोनन्स डायग्नोस्टिक्स.

ग्रंथलेखन

हेल्मिंथोलॉजिकल संशोधनाची एक प्रभावी आणि सोयीस्कर पद्धत आहे काटो नुसार जाड स्मीअरचा अभ्यास, ज्याचे सार म्हणजे विष्ठेच्या जाड स्मीयरमध्ये हेलमिन्थ अंडी शोधणे, ग्लिसरीनने साफ केलेले आणि मॅलाकाइट हिरव्या रंगाने टिंट केलेले. काटो मिश्रणाची रचना मॅलाकाइट ग्रीनच्या 3% जलीय द्रावणाच्या 6 मिली, ग्लिसरीन 500 मिली, 6% फिनॉल द्रावणाच्या 500 मिली. समाधान स्थिर आहे आणि खोलीच्या तपमानावर साठवले जाऊ शकते. तयारी तयार करण्यासाठी, मटारच्या आकाराचे विष्ठेचे तुकडे एका काचेच्या स्लाइडवर लावले जातात, काटो मिश्रणात 24 तास भिजवलेल्या हायड्रोफिलिक सेलोफेनच्या फिल्मने झाकले जातात आणि सामग्री समान रीतीने वितरित करण्यासाठी काचेवर दाबली जाते. 40-60 मिनिटांसाठी साफ केलेल्या स्मीअरची सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासणी केली जाते. सापडलेल्या हेलमिन्थ अंडी मोजल्या जातात आणि मॉर्फोलॉजिकल वैशिष्ट्येत्यांची प्रजाती निश्चित करा. ही पद्धत तुम्हाला राउंडवर्म्स, व्हिपवर्म्स, सेस्टोड्स, ट्रेमेटोड्स आणि काही प्रमाणात हुकवर्म्स आणि ड्वार्फ टेपवर्म्सची अंडी ओळखण्याची परवानगी देते.

तसेच मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाते संवर्धन पद्धती. फ्लोटेशन पद्धतींचे तत्त्व म्हणजे खारट द्रावणात विष्ठा निलंबित करणे, ज्याची हेल्मिंथ अंड्याच्या तुलनेत जास्त सापेक्ष घनता असते, परिणामी ते पृष्ठभागावर तरंगतात. पृष्ठभागावरील चित्रपटाची सामग्री सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासली जाते. संवर्धन मिश्रण म्हणून खालील उपाय वापरले जातात: टेबल मीठ - 1 लिटर पाण्यात 400 ग्रॅम (फुलबॉर्न -1.18 नुसार सापेक्ष घनता); सोडियम नायट्रेट - 1 लिटर पाण्यात 1 किलो ("कलंतारयन-1.38 नुसार सापेक्ष घनता); सोडियम नायट्रेट - 900 ग्रॅम आणि पोटॅशियम नायट्रेट - 1 लिटर पाण्यात 400 ग्रॅम (ब्रुडास्टोव्ह आणि क्रॅस्नोसनुसार सापेक्ष घनता - 1.48 प्रीड). द्रावण उकडलेले आणि थंड केले जातात.
संशोधनासाठी, एका काचेच्या किंवा मातीच्या ग्लासमध्ये 5-10 ग्रॅम विष्ठा घाला, त्यात 100-200 मि.ली. खारट द्रावणआणि नीट ढवळून घ्यावे. मग तरंगणारे मोठे कण लाकडी स्पॅटुला किंवा कागद किंवा पुठ्ठ्याने बनवलेल्या स्कूपने काढले जातात आणि लगेचच पृष्ठभागाच्या फिल्मवर एक विस्तृत स्लाइड लावली जाते जेणेकरून खारट द्रावण आणि स्लाइड पूर्ण संपर्कात असतील. मिश्रणाला 30-40 मिनिटे बसू दिल्यानंतर, स्लाइड काढली जाते, सूक्ष्मदर्शकाखाली फिल्मला तोंड देऊन ठेवली जाते आणि संपूर्ण पृष्ठभाग काळजीपूर्वक तपासला जातो. कोरडे होऊ नये म्हणून, आपण 50% ग्लिसरीन द्रावणाचे 2-3 थेंब जोडू शकता. वायर लूपसह पृष्ठभागाची फिल्म देखील काढली जाऊ शकते. ब्राइन सोल्यूशनची सापेक्ष घनता वाढल्याने फ्लोटेशन पद्धतींची कार्यक्षमता वाढते. या पद्धतींचा वापर करून, नेमाटोड्स, सेस्टोड्स आणि ट्रेमेटोड्सची अंडी शोधणे शक्य आहे.

विष्ठेतील अंडी शोधण्यासाठी, क्रॅसिलनिकोव्ह अवसादन पद्धत वापरली जाते. निलंबन तयार होईपर्यंत विष्ठा 1% डिटर्जंट द्रावणात (लोटस वॉशिंग पावडर, इ.) 1:10 च्या प्रमाणात मिसळली जाते. डिटर्जंटच्या प्रभावाखाली, विष्ठेचे विविध घटक (प्रथिने, चरबी, ऊतक घटक) विरघळतात. 30 मिनिटांनंतर, ट्यूबची सामग्री 1-2 मिनिटांसाठी हलविली जाते, त्यानंतर ते 5 मिनिटांसाठी सेंट्रीफ्यूज केले जातात. गाळापासून तयारी तयार केली जाते आणि सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासली जाते.
शेताच्या स्थितीत, तसेच हेल्मिंथच्या प्रादुर्भावासाठी लोकसंख्येच्या सामूहिक सर्वेक्षणादरम्यान, काटो जाड स्मीअर पद्धत वापरणे सोयीचे आहे. IN आंतररुग्ण परिस्थितीरुग्णांची तपासणी करताना, सर्वात प्रभावी फ्लोटेशन पद्धती वापरणे श्रेयस्कर आहे. मायक्रोस्कोपी दरम्यान या पद्धती वापरताना, तयारीमध्ये सापडलेल्या अंडी मोजण्याचा सल्ला दिला जातो. जर विष्ठेच्या अभ्यासासाठी घेतलेला नमुना किंवा मात्रा प्रमाणित असेल (उदाहरणार्थ, 1 चमचे किंवा चमचे), आणि खारट द्रावणांचे एकसमान प्रमाण, आक्रमणाच्या तीव्रतेचा अंदाजे अंदाज लावता येईल. हे परिमाणात्मक लेखांकन विहित उपचारांना न्याय्य ठरवण्यासाठी आणि जंतनाशकाच्या परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी उपयुक्त ठरू शकते. याव्यतिरिक्त, इतर अधिक अचूक परिमाणात्मक पद्धती, विशेषतः स्टॉल पद्धत, संसर्गाची तीव्रता स्थापित करण्यासाठी वापरली जाऊ शकते.

टेनिअर्हिन्कोसिस आणि एन्टरोबियासिसच्या निदानासाठीपेरिअनल-रेक्टल स्क्रॅपिंगचा अभ्यास करण्याची पद्धत वापरली जाते. 50% ग्लिसरीन द्रावणात भिजवलेले लाकडी स्पॅटुला वापरून, परिघामध्ये शौचास जाण्यापूर्वी सकाळी पेरिअनल फोल्ड्स खरवडून घ्या. गुद्द्वारआणि खालचे विभागगुदाशय परिणामी सामग्री, कव्हर ग्लासच्या काठासह स्पॅटुलापासून साफ ​​केली जाते, काचेच्या स्लाइडवर 50% ग्लिसरॉल द्रावणाच्या थेंबात ठेवली जाते, कव्हर ग्लासने झाकलेली असते आणि सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासली जाते. तुम्ही सेल्युलोज टेपची एक पट्टी देखील तपासू शकता, जी प्रथम पेरिनानल फोल्ड्सवर चिकटलेल्या बाजूने दाबली जाते, नंतर काचेच्या स्लाइडवर ठेवली जाते आणि सूक्ष्मदर्शकाने तपासली जाते.

बर्मन पद्धतीचा वापर करून विष्ठेमध्ये नेमाटोड अळ्या शोधणे. ही पद्धत अळ्यांच्या थर्मोट्रॉपिक गुणधर्मावर आधारित आहे. संशोधनासाठी, 1 चमचे विष्ठा घ्या आणि ते एका वायरच्या चौकटीवर धातूच्या जाळीत किंवा कापसाचे अनेक थर असलेल्या जाळीमध्ये ठेवा. ट्रायपॉडवर बसवलेल्या फनेलमध्ये जाळी स्थापित केली जाते. फनेलला क्लॅम्प असलेली रबर ट्यूब जोडलेली आहे. जाळी वर केल्यावर, फनेल पाण्याने भरले जाते (तापमान +40° ... 50°C) जेणेकरून तळाचा भागजाळी पाण्यात बुडवली होती. विष्ठेतील अळ्या सक्रियपणे स्थलांतर करतात उबदार पाणीआणि, सेटलिंग, फनेलच्या खालच्या भागात जमा होते. 2-4 तासांनंतर, क्लॅम्प उघडला जातो, पाणी सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये काढून टाकले जाते आणि 2-3 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज केले जाते. नंतर सुपरनेटंट द्रव काढून टाकला जातो, गाळ एका काचेच्या स्लाइडवर हस्तांतरित केला जातो आणि सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासला जातो, जेथे स्ट्राँगलोइडायसिसच्या कारक एजंटच्या मोबाइल अळ्या आढळतात.

हरडा पद्धत आणि मोरीमुळे हुकवर्म आणि नेकेटर अळ्या यांच्यात फरक करणे शक्य होते. हुकवर्म अळ्या फिल्टर पेपरवर संवर्धन करतात. या उद्देशासाठी, शौच केल्यानंतर 1 तासानंतर रुग्णाकडून घेतलेली 0.5 ग्रॅम ताजी विष्ठा, 12X1.5 सेमी मापाच्या फिल्टर पेपरच्या पट्ट्यांवर लावली जाते, ज्यामुळे पट्टीचे दोन्ही टोक स्वच्छ राहतात. पट्टीचे एक टोक चाचणी ट्यूबमध्ये बुडविले जाते, ज्याचा एक चतुर्थांश भाग पाण्याने भरलेला असतो आणि दुसरा स्टॉपरने चिकटलेला असतो. चाचणी ट्यूब थर्मोस्टॅटमध्ये +26... + 28°C तापमानात ठेवल्या जातात. अंड्यांतून विकसित होणाऱ्या अळ्या फिल्टर पेपरमधून खाली येतात आणि टेस्ट ट्यूबच्या तळाशी स्थिरावतात. 5-6 दिवसांनंतर, कागदाची पट्टी काढून टाकली जाते आणि चाचणी ट्यूबमध्ये उरलेले द्रव भिंग किंवा सेंट्रीफ्यूज अंतर्गत तपासले जाते. सेंट्रीफ्यूगेशन दरम्यान तयार होणारा अवक्षेप प्रकाश सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासला जातो. चाचणी नळ्यांऐवजी टेट्राहेड्रल काचेच्या जार (15xxx7 सेमी आकाराचे) वापरताना, भिंतींना 4 कागदी पट्ट्या जोडल्या गेल्यास, विश्लेषणाची कार्यक्षमता वाढते (G.M. Maruashvili et al., 1966).

शिस्टोसोमियासिससाठी चाचणी पद्धती . विष्ठेची तपासणी - विष्ठेचा एक भाग 250 मिली पाण्यात मिसळला जातो, गॉझच्या 3 थरांमधून शंकूच्या आकाराच्या भांड्यात फिल्टर केला जातो, जो पाण्याने शीर्षस्थानी भरला जातो. 30 मिनिटांनंतर, द्रव थर काढून टाकला जातो आणि गाळात पाण्याचा ताजे भाग जोडला जातो. एक स्पष्ट सुपरनॅटंट प्राप्त होईपर्यंत आणि सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासणी होईपर्यंत अवक्षेप धुतला जातो.

लार्वोस्कोपी पद्धत - 20-25 ग्रॅम विष्ठा एका एर्लेनमेयर फ्लास्कमध्ये ठेवली जाते आणि बाजूला सोल्डर केलेली काचेची नळी वरच्या दिशेने निर्देशित केली जाते आणि नळाच्या पाण्याने धुतली जाते. नंतर फ्लास्क गडद कागदाने झाकलेला असतो, सोल्डर केलेल्या काचेच्या ट्यूबला +25...30°C तापमानात प्रकाशात सोडतो. हॅच्ड मिरासिडिया लॅटरल ट्यूबमधील मेनिस्कसमध्ये केंद्रित असतात, जेथे ते भिंगाने किंवा उघड्या डोळ्यांनी पाहिले जाऊ शकतात. मूत्र तपासणी - सकाळी 10 ते दुपारी 2 दरम्यान गोळा केलेले 100 मिली मूत्र किंवा दररोजचा भाग, सेटल केला जातो आणि नंतर 1500 आरपीएमवर सेंट्रीफ्यूज केला जातो. परिणामी गाळ* काचेच्या स्लाइडवर लावला जातो आणि सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासला जातो. डब्ल्यूएचओ संपूर्ण मूत्र नमुना फिल्टर करण्याच्या पद्धतीची शिफारस करतो. गाळल्यानंतर, फिल्टरवर फॉर्मल्डिहाइड किंवा गरम (अंडी मारण्यासाठी) उपचार केले जातात आणि नंतर निनहायड्रिनच्या जलीय द्रावणाने ओले केले जातात. वाळलेल्या तयारीमध्ये, अंड्याचे भ्रूण जांभळा रंग प्राप्त करतात.

इम्यूनोलॉजिकल ऍप्लिकेशन शिस्टोसोमियासिसचे निदान करण्याच्या संशोधन पद्धती अडचणींशी संबंधित आहेत, कारण प्रौढ शिस्टोसोम्स आणि त्यांची अंडी मोठ्या संख्येनेविशिष्ट प्रजाती नसलेल्या रोगप्रतिकारक प्रतिक्रिया निर्माण करणारे प्रतिजन (डी. ब्रॅडली, 1979).

आपल्या देशात, हेल्मिंथियासिससाठी रोगप्रतिकारक प्रतिक्रियांचे स्टेजिंग करण्यासाठी, ते तयार केले जाते संपूर्ण ओळमानक निदान. व्यावहारिक वापरऍलर्जी आहे त्वचा चाचणीइचिनोकोकोसिस आणि अल्व्होकोकोसिससाठी, इचिनोकोकल अँटीजेनसह आरएलए, सर्दीमध्ये आरएससी, थंडीत पर्जन्य प्रतिक्रिया विविध बदलांमध्ये (रिंग पर्जन्य, चाचणी नळ्या किंवा केशिकांमधील पर्जन्य, ज्यामध्ये ट्रायचिनोसिस, सिस्टिरकोसिस आणि मायग्रोएसकेरियासिस प्रतिजन असतात). वर नमूद केलेल्या सेरोलॉजिकल रिअॅक्शन्स करण्यासाठी मानक डायग्नोस्टिक किट जीवाणूजन्य तयारी तयार करणार्‍या उद्योगांद्वारे तयार केल्या जातात. निर्मात्याने स्टोरेजचे नियम, औषधाचे शेल्फ लाइफ आणि प्रतिक्रिया स्टेजिंगच्या तंत्रासह संबंधित प्रतिजनांच्या वापरावरील निर्देशांवर उत्पादित निदान किटसाठी तपशीलवार सूचना प्रदान केल्या आहेत.

IN गेल्या वर्षेहेल्मिंथियासिसचे निदान करण्यासाठी वापरल्या जाणार्‍या सेरोलॉजिकल प्रतिक्रियांची यादी लक्षणीयरीत्या विस्तारली आहे. या हेतूंसाठी, खालील प्रतिक्रिया वापरल्या जातात: RIGA, अप्रत्यक्ष इम्युनोफ्लोरेसेन्स (RIF), इम्युनोडिफ्यूजन इन ए जेल (RID), काउंटर इम्युनोइलेक्ट्रोफोरेसीस (CIEF), CEMA. या प्रतिक्रियांचा उपयोग एस्केरियासिस, टॉक्सोकारियासिस, ट्रायचिनोसिस, हुकवर्म रोग, फिलेरियासिस, इचिनोकोकोसिस आणि अल्व्होकोकोसिस, ओपिस्टोर्चियासिस, स्किस्टोसोमियासिस, पॅरागोनिमियासिससाठी केला जाऊ शकतो. तथापि, आपल्या देशात या प्रतिक्रियांसाठी, मानक निदान चाचण्या जारी केल्या जात नाहीत आणि त्यांचे निदान करण्याचे तंत्र नियंत्रित केले जात नाही. वैयक्तिक प्रयोगशाळा, मुख्यतः वैज्ञानिक, स्वतंत्रपणे विशिष्ट प्रतिजन तयार करतात आणि विविध बदलांमध्ये त्यांचा वापर करतात. या पद्धतींचे वर्णन मोठ्या प्रमाणावर साहित्यात सादर केले गेले आहे आणि काटेकोरपणे एकत्रित केलेले नाही. डेटा व्याख्या रोगप्रतिकारक विश्लेषणवापरलेल्या प्रत्येक सेरोलॉजिकल प्रतिक्रियेची विशिष्टता आणि संवेदनशीलता लक्षात घेऊन रोगप्रतिकारक प्रतिसादाच्या गतिशीलतेचा अभ्यास करण्यावर आधारित असावे. म्हणून, निदान करताना, तसेच लोकसंख्येच्या सेरोपीडेमियोलॉजिकल सर्वेक्षणादरम्यान, अनेक अत्यंत संवेदनशील प्रतिक्रियांचा वापर करण्याचा सल्ला दिला जातो. या दृष्टिकोनातून, VIEF आणि REMA प्रतिक्रियांनी स्वतःला चांगले सिद्ध केले आहे, जे उच्च संवेदनशीलता आणि बर्‍यापैकी उच्च विशिष्टतेने ओळखले जातात (पी. अॅम्ब्रोइस-थॉमस, 1978; I. E. Ballad, 1979; G. M. Negreanu, 1980; A. M. Ponomareva; 189; ए. या. लिसेन्को, 1978, इ.). अमिबियासिस, लेशमॅनियासिस, ट्रायपॅनोसोमियासिस आणि टॉक्सोप्लाझोसिस (G. A. Ermolin, 1980) साठी REMA ची प्रभावीता तपासली गेली आहे.

जेव्हा विविध पर्यावरणीय वस्तूंवर (माती, पाणी, भाज्या इ.) हेल्मिंथ अंडी आढळतात तेव्हा त्यांची व्यवहार्यता निश्चित करणे नेहमीच आवश्यक असते. देखावा, अत्यावश्यक पेंट्ससह डाग लावणे, इष्टतम परिस्थितीत लागवड करणे आणि जैविक नमुना सेट करणे, उदा.

प्रयोगशाळेतील प्राण्यांना आहार देणे.

हेल्मिंथ अंडी किंवा लार्वाच्या व्यवहार्यतेचे स्वरूप द्वारे निश्चित करणे. हेल्मिंथ अंडी प्रथम कमी, नंतर उच्च वाढीवर सूक्ष्मदर्शक आहेत. विकृत आणि मृत हेल्मिंथ अंड्यांमध्ये, कवच फाटलेले किंवा आतील बाजूस वाकलेले असते, प्लाझ्मा ढगाळ आणि सैल होतो. खंडित अंड्यांमध्ये, क्रशिंग बॉल्स (ब्लास्टोमेर) आकारात असमान असतात, आकारात अनियमित असतात आणि बर्‍याचदा एका ध्रुवावर हलवले जातात. कधीकधी असामान्य अंडी असतात जी बाह्य विकृती असूनही, सामान्यपणे विकसित होतात. जिवंत राउंडवर्म अळ्यांमध्ये, बारीक कणिकता फक्त शरीराच्या मध्यभागी असते; ते मरतात, ग्रॅन्युलॅरिटी संपूर्ण शरीरात पसरते आणि मोठ्या चमकदार हायलाइन व्हॅक्यूल्स दिसतात - मोत्यांचे तथाकथित तार.

राउंडवर्म्स, व्हिपवर्म्स आणि पिनवर्म्सच्या परिपक्व अंड्यांची व्यवहार्यता निश्चित करण्यासाठी, आपण कॉल केले पाहिजे सक्रिय हालचालीतयारी हलके गरम करून अळ्या (३७ डिग्री सेल्सियसपेक्षा जास्त नसलेल्या तापमानात). राउंडवर्म आणि व्हिपवर्म अळ्या अंड्याच्या कवचापासून विलग झाल्यानंतर तयारीच्या कव्हर ग्लासवर विच्छेदन करणारी सुई किंवा चिमटीने दाबून त्यांची व्यवहार्यता पाहणे अधिक सोयीचे असते.

आक्रमक राउंडवर्म अळ्यांमध्ये, डोक्याच्या टोकाला एक आवरण सोलताना दिसते आणि अंड्यातील विकास पूर्ण केलेल्या व्हिपवर्म अळ्यांमध्ये, या ठिकाणी एक स्टाइलट जास्त प्रमाणात आढळते. मृत हेल्मिंथ लार्वामध्ये, त्यांचे स्थान (अंड्यात किंवा त्याच्या बाहेर) विचारात न घेता, शरीराचा क्षय दिसून येतो. या प्रकरणात, अळ्याची अंतर्गत रचना ब्लॉक किंवा दाणेदार बनते आणि शरीर ढगाळ आणि अपारदर्शक बनते. शरीरात व्हॅक्यूल्स आढळतात आणि क्यूटिकलवर ब्रेक आढळतात.

टॅनिइड ऑन्कोस्फियर्स (बोवाइन, डुकराचे मांस टेपवर्म इ.) ची व्यवहार्यता भ्रूणांच्या संपर्कात आल्यावर त्यांच्या हालचालींद्वारे निर्धारित केली जाते. पाचक एंजाइम. अंडी एका घड्याळाच्या काचेवर ठेवली जातात जठरासंबंधी रसकुत्रे किंवा कृत्रिम पक्वाशया विषयी रस. नंतरची रचना: पॅनक्रियाटिन 0.5 ग्रॅम, सोडियम बायकार्बोनेट 0.09 ग्रॅम, डिस्टिल्ड वॉटर 5 मिली. अंडी असलेले घड्याळाचे ग्लास थर्मोस्टॅटमध्ये 36-38 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 4 तास ठेवले जातात. त्याच वेळी, जिवंत भ्रूण त्यांच्या शेलमधून मुक्त होतात. जिवंत ऑन्कोस्फियर्सचे कवच आम्लीकृत पेप्सिनमध्ये आणि क्षारीय ट्रायप्सिनच्या द्रावणात 6-8 तासांनंतर थर्मोस्टॅटमध्ये 38 °C तापमानात विरघळतात.

जर तुम्ही सोडियम सल्फाइडच्या 1% द्रावणात किंवा सोडियम हायपोक्लोराईडच्या 20% द्रावणात किंवा 36-38 डिग्री सेल्सियस तापमानात क्लोरीन पाण्याच्या 1% द्रावणात टॅनिइड अंडी ठेवल्यास, प्रौढ आणि जिवंत भ्रूण पडद्यामधून बाहेर पडतात आणि ते करतात. 1 दिवसात बदलणार नाही. अपरिपक्व आणि मृत ऑन्कोस्फियर्स आकुंचन पावतात किंवा फुगतात आणि झपाट्याने वाढतात आणि नंतर 10 मिनिटांत - 2 तासांच्या आत “विरघळतात”. जिवंत टेनिड भ्रूण देखील 1% सोडियम क्लोराईड द्रावण, 0.5% सोडियम बायकार्बोनेट द्रावण आणि पित्त 36-38 च्या मिश्रणात सक्रियपणे हलतात. °C

इचिनोकोसीच्या स्कोलेक्सची व्यवहार्यता कमी हीटिंगसह निर्धारित केली जाते. हे करण्यासाठी, पाण्यात धुतलेले स्कोलेक्स किंवा ब्रूड कॅप्सूल एका काचेच्या स्लाइडवर एका छिद्रासह पाण्याच्या थेंबात ठेवल्या जातात, कव्हरस्लिपने झाकल्या जातात आणि 38-39 डिग्री सेल्सियस तापमानात हीटिंग स्टेजसह सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासल्या जातात. हीटिंग टेबल नसल्यास, औषध कोणत्याही उष्णता स्त्रोताचा वापर करून गरम केले जाते. त्याच वेळी, व्यवहार्य स्कोलेक्स सक्रियपणे हलवते, शोषकांना संकुचित करते किंवा आराम देते, प्रोबोस्किस लांब करते आणि लहान करते. जर तुम्ही स्कोलेक्सला खोलीच्या तपमानावर फिलिसिलीनच्या 0.5-1% जलीय द्रावणात ठेवले तर सर्व व्यवहार्य स्कोलेक्स लवकर बाहेर पडतील आणि मरतील. व्यवहार्य नसलेले स्कोलेक्स इव्हर्टेड नाहीत.

वनस्पती आणि जलस्रोतांच्या इतर वस्तूंवर गोळा केलेल्या अॅडोलेस्केरिया फॅसिओलीची व्यवहार्यता काचेच्या स्लाइडवर तपासून तपासली जाते. खारट द्रावणहीटिंग स्टेजसह सूक्ष्मदर्शकाखाली. जेव्हा ट्रेमेटोड अळ्या गरम होतात तेव्हा ते हलू लागतात.

बौने टेपवर्म अंड्याची व्यवहार्यता गर्भावरील हुकच्या स्थानाद्वारे निर्धारित केली जाते.

बटू टेपवर्मच्या जिवंत अंड्यांमध्ये, प्रोटोप्लाझमच्या आळशी लोलक सारखी हालचाल आणि जवळजवळ अभेद्य हलणे आणि आकड्यांच्या पार्श्व जोडीचे टोकदार टोक मधल्या जोडीपासून बाजूंना हलणे घडते.

गर्भाच्या प्रोटोप्लाझमचे आकुंचन आणि भ्रूण आकड्यांमुळे गर्भाला प्रथम ऑन्कोस्फियरच्या पडद्यापासून आणि नंतर अंड्याच्या बाहेरील कवचापासून मुक्त होण्यास मदत होते.

जिवंत अंड्यामध्ये, आकड्यांचा मध्य जोड आणि बाजूकडील जोड्या समांतर असतात; काही अंड्यांमध्ये, पार्श्व जोड्यांचे ब्लेड एकमेकांच्या जवळ असतात आणि हुकच्या मधल्या जोडीच्या संदर्भात 45° पेक्षा कमी कोनात असतात.

मरणासन्न भ्रूण आकुंचन पावतो आणि आळशीपणे आकड्या अलगद सरकतो. मृत भ्रूणामध्ये, हुकची हालचाल थांबते, आणि ते विस्कळीत स्थितीत स्थित असतात; काहीवेळा समीपच्या जोडीला बाजूकडील आकड्या उजव्या, स्थूल किंवा तीव्र कोनात अलग होतात.

कधीकधी गर्भाच्या सुरकुत्या आणि ग्रॅन्युलेशनची निर्मिती दिसून येते. तापमानात तीव्र बदल दरम्यान ऑन्कोस्फियरच्या हालचालींच्या देखाव्यावर आधारित अधिक अचूक पद्धत आहे: 5-10 ते 38-40 डिग्री सेल्सियस पर्यंत.

अपरिपक्व नेमाटोड्सच्या व्यवहार्यतेचे निर्धारण आर्द्र चेंबरमध्ये (पेट्री डिशेस), राउंडवर्म अंडी 24-30 डिग्री सेल्सिअस तापमानात आयसोटोनिक सोडियम क्लोराईड द्रावणात तयार केलेल्या 3% फॉर्मल्डिहाइड द्रावणात ठेवून, व्हिपवर्मची अंडी 3% मध्ये ठेवावीत. % हायड्रोक्लोरिक ऍसिडचे द्रावण 30-35 डिग्री सेल्सिअस तापमानात, पिनवर्म अंडी आयसोटोनिक सोडियम क्लोराईड द्रावणात 37 डिग्री सेल्सियस तापमानात पेट्री डिशेस आठवड्यातून 1-3 वेळा चांगले हवाबंद करण्यासाठी उघडले पाहिजे आणि फिल्टर पेपर स्वच्छ पाण्याने पुन्हा ओले केले पाहिजे.

हेल्मिन्थ अंड्याच्या विकासाचे निरीक्षण आठवड्यातून किमान 2 वेळा केले जाते. 2-3 महिन्यांत विकासाच्या चिन्हांची अनुपस्थिती त्यांची गैर-व्यवहार्यता दर्शवते. हेल्मिंथ अंड्याच्या विकासाची चिन्हे प्रथम क्रशिंगची टप्पे आहेत, अंड्यातील सामग्री स्वतंत्र ब्लास्टोमेरमध्ये विभागणे. पहिल्या दिवसादरम्यान, 16 पर्यंत ब्लास्टोमेर विकसित होतात, जे दुसऱ्या टप्प्यात जातात - मोरुला इ.

हुकवर्म अंडी एका काचेच्या सिलेंडरमध्ये (50 सेमी उंच आणि 7 सेमी व्यासाच्या) स्टॉपरने बंद केली जातात. निर्जंतुकीकरण वाळू, कोळसा आणि हुकवर्म अंडी असलेली विष्ठा यांचे मिश्रण, अर्ध-द्रव सुसंगततेसाठी पाण्याने पातळ केलेले, काचेच्या नळीचा वापर करून काळजीपूर्वक सिलेंडरच्या तळाशी ओतले जाते. 25-30 डिग्री सेल्सिअस तापमानात अंधारात स्थायिक झाल्यानंतर 1-2 दिवसांदरम्यान, अंड्यांमधून रॅबडीटीफॉर्म अळ्या बाहेर पडतात आणि 5-7 दिवसांनी ते फिलारीफॉर्म होतात: अळ्या सिलेंडरच्या भिंतींवर रेंगाळतात, जिथे ते असतात. अगदी उघड्या डोळ्यांना दृश्यमान. पाण्यामध्ये नैसर्गिकरित्या विकसित होणार्‍या ऑपिस्टॉर्किड्स, डिफिलोबोथ्रायड्स, फॅसिओला इत्यादी ट्रेमेटोड्सची अंडी घड्याळाच्या काचेवर, पेट्री डिशवर किंवा इतर भांड्यावर ठेवली जातात आणि त्यावर एक छोटा थर टाकला जातो. सामान्य पाणी. फॅसिओला अंड्याची लागवड करताना, अंधारात ते जलद विकसित होतात हे लक्षात घेतले पाहिजे, तर 9-12 दिवसांनी 22-24 डिग्री सेल्सियस तापमानात जिवंत अंड्यांमध्ये मिरासिडियम तयार होते. मायक्रोस्कोपी करताना अंडी विकसित करणे trematodes, miracidium च्या हालचाली स्पष्टपणे दृश्यमान आहेत. मिरासिडियम फॅसिओला अंड्याच्या कवचातून फक्त प्रकाशात बाहेर पडतो. लागवडीदरम्यान, पाणी 2-3 दिवसांनी बदलले जाते.

हुकवर्म आणि स्ट्राँगलॉइड अळ्या प्राण्यांच्या कोळशासह पेट्री डिशमध्ये आगरवर संवर्धन करतात. 5-6 दिवस 26-30 डिग्री सेल्सिअस तापमानात थर्मोस्टॅटमध्ये राहिल्यानंतर, अळ्या आगरमध्ये रेंगाळतात आणि जीवाणूंचा मार्ग (फुलबॉर्न पद्धत) मागे सोडतात.

हरडा आणि मोरीची पद्धत (1955). रॅकमध्ये ठेवलेल्या टेस्ट ट्यूबमध्ये 7 मिली डिस्टिल्ड वॉटर घाला. लाकडी काठी वापरून, 0.5 ग्रॅम विष्ठा घ्या आणि फिल्टर पेपरवर (15X150 मिमी) डाव्या काठावरुन 5 सेमी अंतरावर स्मीअर बनवा (हे ऑपरेशन प्रयोगशाळेच्या बेंचच्या पृष्ठभागाचे संरक्षण करण्यासाठी कागदाच्या शीटवर केले जाते). नंतर स्मीअर असलेली पट्टी चाचणी ट्यूबमध्ये घातली जाते जेणेकरून स्मीअरचे डावे टोक चाचणी ट्यूबच्या तळाशी पोहोचेल. वरचे टोक सेलोफेनच्या तुकड्याने झाकलेले असते आणि लवचिक बँडने घट्ट गुंडाळलेले असते. ज्या व्यक्तीची तपासणी केली जात आहे त्याचा नंबर आणि आडनाव टेस्ट ट्यूबवर लिहिलेले असते. या अवस्थेत, नळ्या 28 डिग्री सेल्सियस तापमानात 8-10 दिवसांसाठी साठवल्या जातात. संस्कृतीचा अभ्यास करण्यासाठी, सेलोफेनचे आवरण काढून टाका आणि चिमट्याने फिल्टर पेपरची पट्टी काढा. हे करताना काळजी घेतली पाहिजे कारण कमी संख्येत संसर्गजन्य अळ्या फिल्टर पेपरच्या वरच्या टोकाला किंवा नळीच्या बाजूला जाऊ शकतात आणि सेलोफेनच्या पृष्ठभागाखाली प्रवेश करू शकतात.

टेस्ट ट्यूब गरम ठिकाणी ठेवल्या जातात पाण्याचे स्नान 50 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 15 मिनिटे, त्यानंतर त्यातील सामग्री हलविली जाते आणि अळ्यांना गाळण्यासाठी 15-मिली चाचणी ट्यूबमध्ये पटकन ओतले जाते. सेंट्रीफ्यूगेशननंतर, सुपरनाटंट काढून टाकले जाते, आणि गाळ एका काचेच्या स्लाइडवर हस्तांतरित केला जातो, कव्हरस्लिपने झाकलेला असतो, आणि कमी मोठेीकरण अंतर्गत सूक्ष्मदर्शकदृष्ट्या तपासला जातो.

च्या साठी विभेदक निदानफिलारिफॉर्म लार्व्हा, टेबलमध्ये सादर केलेला डेटा वापरणे आवश्यक आहे. 13.

हेल्मिंथ अंडी आणि अळ्या डागण्याच्या पद्धती. बहुतेक प्रकरणांमध्ये मृत उती जिवंत लोकांपेक्षा जलद रंग ओळखतात. हेलमिन्थॉलॉजीमध्ये हेलमिन्थ अंडी आणि अळ्यांची व्यवहार्यता निश्चित करण्यासाठी ही वैशिष्ट्ये वापरली जातात. तथापि, काही प्रकरणांमध्ये, काही पेंट्स मृतांच्या तुलनेत जिवंत ऊतींद्वारे अधिक चांगले समजतात.

तक्ता 13. ए. ड्युओडेनेल, एन. अमेरिकनस, स्ट्रॉन्गाइलॉइड्स स्टेरकोरालिस, ट्रायकोस्ट्रॉन्गाइलस एसपीपीच्या फिलर-सदृश अळ्यांचे विभेदक निदान.

जिवंत आणि मृत अंडी आणि अळ्या यांच्या फरक ओळखण्यासाठी, खालील रंग आणि पद्धती वापरल्या जातात.

ल्युकोबेस मिथिलीन ब्लूचा वापर जिवंत आणि मृत ऊतींवर डाग लावण्यासाठी केला जातो. जिवंत सेलकिंवा ऊतींचे मेथिलीन निळे रंगहीन ल्युकोबेसमध्ये कमी केले जाते, मृत ऊतींमध्ये ही क्षमता नसते, म्हणून ते रंग प्राप्त करते.

राउंडवर्म अंड्यांना रंग देण्यासाठी, तुम्ही कॉस्टिक अल्कली (0.05 ग्रॅम मिथिलीन ब्लू, 0.5 ग्रॅम सोडियम हायड्रॉक्साईड, 15 मिली लैक्टिक ऍसिड) सह लॅक्टिक ऍसिडच्या द्रावणात मिथिलीन ब्लू वापरू शकता. जिवंत अंड्यांचा रंग कळत नाही; मृत अंड्यांचे भ्रूण रंगीत असतात निळा रंग.

राउंडवर्म्स आणि व्हिपवर्म्सच्या अपरिपक्व अंड्यांसाठी डाग लावण्याची पद्धत लागू होत नाही; रंगद्रव्ययुक्त कवच डागलेले असते आणि त्यामुळे अंड्यातील जंतू पेशी रंगीत आहे की नाही हे दिसत नाही.

Ascaris लार्वा 1:10 000 च्या एकाग्रतेमध्ये ब्रिलियंटक्रेसिल ब्लू पेंटच्या मूलभूत द्रावणाने डागलेले असतात. खालील प्रकारे: राउंडवर्म अंड्यांसह द्रवाचा एक थेंब आणि मुख्य पेंट सोल्यूशनचा एक थेंब काचेच्या स्लाइडवर लावला जातो. तयारी कव्हरस्लिपने झाकलेली असते, जी विच्छेदन करणार्‍या सुईने हलके टॅप करताना नमुन्यावर घट्ट दाबली जाते. उदयोन्मुख अळ्यांची संख्या आणि त्यांच्या डागांची मात्रा सूक्ष्मदर्शकाखाली पाहिली जाते, त्यानंतर 2-3 तासांनंतर त्याच तयारीची पुन्हा तपासणी केली जाते. केवळ 2 तास डाग न झालेल्या अळ्यांनाच जिवंत मानले जाते. मृत अळ्या जेव्हा डाग पडतात तेव्हा शेल तुटते (अंशतः किंवा पूर्णपणे).

एव्हीयन राउंडवर्म अंड्याची व्यवहार्यता ठरवताना आयोडीन द्रावणाने डाग पडण्याची शक्यता दर्शविली जाते. या प्रकरणात, 5% रंग म्हणून वापरला जातो. अल्कोहोल सोल्यूशनयोडा. जेव्हा ते तयार करण्यासाठी लागू केले जाते तेव्हा मृत एस्केरिडिया अंड्यांचे भ्रूण 1-3 सेकंदात रंगीत होतात. नारिंगी रंग. ओपिस्टोर्किस आणि ऑन्कोस्फियरची मृत अंडी बोवाइन टेपवर्मटोलुइडाइन ब्लू (1:1000) च्या द्रावणाने डागलेले असतात आणि बोवाइन टेपवर्मचे मृत ऑन्कोस्फियर चमकदार क्रेसिल ब्लू (1:10,000) च्या द्रावणाने डागलेले असतात. त्याच वेळी, मृत आणि जिवंत दोन्ही अंडींचे भ्रूण आणि कवच रंग घेतात. म्हणून, डाग पडल्यानंतर, अंडी आणि ऑन्कोस्फियर्स धुतले जातात स्वच्छ पाणीआणि त्याव्यतिरिक्त सॅफ्रॅनिन (10% अल्कोहोल सोल्यूशनमध्ये 1:10,000 पातळ केलेले) सह डागलेले. अल्कोहोल शेलमधून रंग काढून टाकते आणि सॅफरॅनिन त्यांना लाल रंग देते. परिणामी, जिवंत अंडी लाल होतात, मृतांचा गर्भ निळा होतो आणि कवच लाल राहतो. बोवाइन टेपवर्म ऑन्कोस्फियर्सचे मृत भ्रूण काही मिनिटांतच चटकन लाल होतात किंवा गुलाबी रंग safranin किंवा ब्लू ब्रिलियंट क्रेसिल ब्लू 1:4000 च्या पातळतेवर किंवा इंडिगो कार्माइन 1:1000-1:2000 च्या पातळतेवर.

जिवंत भ्रूण 2-7 तासांनंतरही या रंगांच्या प्रभावाखाली बदलत नाहीत.

बौने टेपवर्म अंड्यांची व्यवहार्यता निश्चित करण्यासाठी, खालील पेंट्स वापरण्याची शिफारस केली जाते: 1) चमकदार क्रेसिल निळा (1:8000) - 1 तासानंतर, मृत अंड्यांचे ऑन्कोस्फियर विशेषतः चमकदार रंगाचे बनते, जे फिकट विरूद्ध अगदी स्पष्टपणे दिसते. किंवा उर्वरित अंड्याची रंगहीन पार्श्वभूमी; 2) safranin: 2 तास एक्सपोजरसह 1:8000 आणि 3-5 तासांसाठी 1:5000 पातळ केले; 3) पायरोगॅलिक ऍसिडचे 50% द्रावण 1:2 च्या पातळतेमध्ये - 29-30 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 1 तास उघडल्यावर (तापमान जितके कमी असेल, दीर्घ प्रक्रियाडाग पडणे).

टेपवर्मचे जिवंत प्लेरोसेरकॉइड्स 5-20 मिनिटांसाठी न्यूट्रलॉटच्या जलीय द्रावणाने (1:1000) चांगले डागलेले असतात. सतत गुलाबी रंग मिळविण्यासाठी जो 5 दिवसांच्या आत अदृश्य होत नाही आणि प्लेरोसेरकॉइड्सच्या गतिशीलतेवर परिणाम करत नाही, सामान्यतः 10 मिनिटे पुरेसे असतात. अळ्या स्वच्छ पाहिल्याने रंग भरण्याचे प्रमाण नियंत्रित केले जाते आयसोटोनिक द्रावणसोडियम क्लोराईड, ज्यासाठी plerocercoids वेळोवेळी पेंटमधून काढले जातात. मृत प्लेरोसेरकॉइड्सवर डाग ठेवण्यासाठी मिथिलीन ब्लू वापरण्याचा सल्ला दिला जातो.

R.E. चोबानोव et al. (1986) यांनी "रुब्रिन" रंगद्रव्याचा वापर करून हेल्मिंथ अंडी आणि अळ्यांची व्यवहार्यता निश्चित करण्यासाठी एक पद्धत प्रस्तावित केली आहे, जो रंग म्हणून पेनिसिलियम रुबरमची लागवड करून प्राप्त केला जातो. हे करण्यासाठी, 3% जलीय डाई द्रावण वापरा.

अंडी आणि अळ्यांना रंग देण्याची प्रक्रिया 1.5 तासांनंतर पूर्ण होते. पिनवर्म्स, बोवाइन आणि ड्वार्फ टेपवॉर्म्स, हुकवर्म्स, ट्रायकोस्ट्रॉन्गिलड्सची अव्यवहार्य अंडी तीव्र गुलाबी रंग प्राप्त करतात, हुकवर्म आणि ट्रायकोस्ट्रॉन्गिलड अळ्या लाल होतात. राउंडवर्म्स आणि व्हिपवर्म्सच्या अंड्यांमध्ये कमी चमकदार रंग दिसून येतो, कारण जेव्हा आतड्यांमधून बाहेर पडते तेव्हा त्यांच्याकडे आधीपासूनच असते. गडद तपकिरी रंग: व्यवहार्य अंडी आणि अळ्यांवर डाग पडत नाहीत.

ट्रेमेटोड अंड्यांमधून मिरॅक्युलिड सोडण्यास उत्तेजित करण्यासाठी भौतिक-रासायनिक पद्धती. S.M. जर्मन आणि S.A. Beer (1984) द्वारे ओपिस्टोर्किड आणि डायक्रोसेलियम अंड्यांची व्यवहार्यता निर्धारित करण्यासाठी अंडी प्रतिक्रिया माध्यमात उघड करून पद्धती विकसित केल्या गेल्या. जर ते जिवंत असतील तर मिरासिडियम सोडले जाते. या पद्धती मिरासिडियम हॅचिंग ग्रंथीच्या भौतिक-रासायनिक सक्रियतेवर आणि लार्वाच्या मोटर क्रियाकलापांना उत्तेजन देण्यावर आधारित आहेत. अनुक्रमिक तंत्रांच्या संयोजनात ट्रेमेटोड अंडी एका विशेष प्रतिक्रिया माध्यमात उघड करून उत्तेजन प्राप्त केले जाते - तापमानात फरक निर्माण करणे, अंड्यांचे निलंबन कोरडे करणे, चाचणी ड्रॉपमध्ये द्रव कमकुवत प्रवाहाचा संपर्क, ज्यामुळे मिरासिडिया मोठ्या प्रमाणात मुक्त होण्यास हातभार लागतो. अंडे.

हर्मन आणि बिअरच्या पद्धतीचा वापर करून ओपिस्टोर्किड अंड्यांच्या व्यवहार्यतेचे निर्धारण. पाण्यात अंड्यांचे निलंबन (टॅप, सेटल केलेले) 10-12 डिग्री सेल्सियस पर्यंत थंड केले जाते. त्यानंतरच्या सर्व ऑपरेशन्स खोलीच्या तपमानावर (18-22 डिग्री सेल्सियस) केल्या जातात. 100-400 अंडी असलेल्या निलंबनाचा एक थेंब (अंदाजे 0.05 मिली) सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये जोडला जातो. अंडी गाळण्यासाठी नळ्या 5-10 मिनिटांसाठी रॅकमध्ये ठेवल्या जातात. नंतर फिल्टर पेपरची अरुंद पट्टी वापरून जास्तीचे पाणी पूर्णपणे काढून टाकेपर्यंत काळजीपूर्वक शोषून घ्या. टेस्ट ट्यूबमध्ये माध्यमाचे 2 थेंब घाला, शेक करा, काचेच्या स्लाइडवर पिपेटसह सामग्री स्थानांतरित करा आणि 5-10 मिनिटे सोडा, किंचित हलवून (किंवा हेअर ड्रायरच्या खाली ठेवा) निलंबनाच्या चाचणी ड्रॉपमध्ये कमकुवत द्रव प्रवाह तयार करा. . हे ऑपरेशन, जे मोलस्क आतड्याच्या पेरिस्टॅलिसिसचे अनुकरण करते, एखाद्याला मिरासिडियाचे प्रकाशन सक्रिय करण्यास अनुमती देते. यानंतर, निलंबनामध्ये माध्यमाचे आणखी 2 थेंब जोडले जातात आणि नंतर पारंपारिक प्रकाश सूक्ष्मदर्शक (X200) वापरून तयारी सूक्ष्मदर्शी केली जाते. या वेळी, व्यवहार्य मिरासिडियम असलेल्या अंड्यांचे झाकण उघडले पाहिजे आणि अळ्या सक्रियपणे वातावरणात बाहेर पडतात. त्यात इथेनॉलच्या उपस्थितीबद्दल धन्यवाद, मिरासिडियम 3-5 मिनिटांनंतर स्थिर होते आणि नंतर माध्यमात सापडलेल्या रंगाने डागले जाते. परिणामी, मिरासिडिया सहजपणे शोधले जातात आणि मोजले जातात.

प्रतिक्रिया माध्यमाची तयारी. हे माध्यम 0.05 M Tris-HCi बफरमध्ये 8.0-9.5 च्या इष्टतम pH परिस्थितीत तयार केले जाते. 10-13% पर्यंत इथेनॉल आणि एक डाई (safranin, methylene blue आणि pH रेंजमध्ये काम करणारे इतर) द्रव थोडासा रंग येईपर्यंत बफरमध्ये जोडला जातो (उदाहरणार्थ, safranin साठी त्याची अंतिम एकाग्रता 1:50,000 असेल). तुम्ही अल्कधर्मी pH मर्यादेत काम करणारे दुसरे बफर वापरू शकता, उदाहरणार्थ 0.05 M फॉस्फेट (pH 8.5). म्हणून, माध्यमात 96% इथेनॉल आहे - 12 भाग; रंग ( आई दारू) - 1-10 भाग; 0.05 M Tris-NS! बफर (पीएच 8.5-9.5) - 100 भागांपर्यंत. माध्यमाचे उदाहरण: 96% इथेनॉलचे 12 भाग, सॅच्युरेटेड सॅफ्रॅनिन द्रावणाचा 1 भाग, उर्वरित 100 भागांपर्यंत - 0.05 एम ट्रिस-एचसीएल बफर, पीएच 9.5.

हर्मन, बीअर, स्ट्रॅटनच्या पद्धतीचा वापर करून डिक्रोसेलियम अंड्याच्या व्यवहार्यतेचे निर्धारण. अंडी गाळण्यासाठी 100-150 ट्रेमेटोड अंडी असलेले निलंबन एक थेंब सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये 1-2 मिनिटे ठेवले जाते. नंतर फिल्टर पेपरची पट्टी वापरून द्रव काळजीपूर्वक वाळवला जातो. पाश्चर विंदुक वापरून प्रतिक्रिया माध्यमाचे 1-2 थेंब घाला आणि 2-3 मिनिटे 28-30 °C तापमानात पाण्याच्या बाथमध्ये उबवा. मध्यम रचना: बुटानॉलचे 6 भाग, 0.4% सोडियम क्लोराईड द्रावणाचे 94 भाग किंवा डिस्टिल्ड पाण्यात 0.3% पोटॅशियम क्लोराईड द्रावण. माध्यमातील अंडी एका काचेच्या स्लाइडवर पिपेटच्या सहाय्याने हस्तांतरित केली जातात आणि खोलीच्या तपमानावर (18-22 डिग्री सेल्सिअस) 1.5-2 तास सोडली जातात, दर 25-30 मिनिटांनी 1-2 थेंब (0.05) जोडले जातात (जसे ते कोरडे होतात) .ml) डिस्टिल्ड पाण्यात बुटानॉल द्रावण. यानंतर, तयारीची सूक्ष्मदर्शकाखाली 100-200x विस्ताराने तपासणी केली जाते. मिरासिडिया सोडलेल्या उघडलेल्या अंडींच्या संख्येद्वारे व्यवहार्यता निश्चित केली जाते. बुटानॉल अंड्याच्या कवचाच्या छिद्रांमधून आत प्रवेश करते, मिरासिडियापर्यंत पोहोचते आणि त्यांना सक्रिय करते. लक्षात घेतलेल्या तापमानात उष्मायन ही प्रक्रिया वाढवते. 3-7% च्या एकाग्रतेतील बुटानॉल अंड्यातून बाहेर पडणाऱ्या मिरासिडियमसाठी हानिकारक आहे. चाचणी ट्यूबमधून काचेच्या स्लाइडवर अंड्यांचे निलंबन हस्तांतरित केल्याने, मिरासिडियम बाहेर पडेपर्यंत (30-40 मिनिटांनंतर) अस्थिरतेमुळे ब्युटानॉलची एकाग्रता सुरक्षित पातळीवर (1.5-0.5%) कमी होते. 0.1-0.5% (किंवा 0.05-0.4% च्या एकाग्रतेवर पोटॅशियम क्लोराईड) च्या एकाग्रतेमध्ये सोडियम क्लोराईडची उपस्थिती सोडियम मिरॅसिडियमची क्रिया निर्धारित करते. ऑपिस्टॉर्चच्या लहान पारदर्शक अंड्यांप्रमाणे, डायक्रोसेलियम अंड्यांमध्ये गडद रंगाचे कवच असते; त्यांच्याकडे स्पष्टपणे दिसणारी टोपी असते, जी मिरासिडियम बाहेर पडल्यानंतर उघडते. त्यामुळे, डाग आणि मिरासिडिया मोजण्यापेक्षा, उघडलेल्या अंडी मोजून डायक्रोसेलियम अंड्याच्या व्यवहार्यतेचे मूल्यांकन करणे अधिक सोयीचे आहे.

हेल्मिंथ अंडी आणि अळ्यांचा अभ्यास करण्यासाठी ल्युमिनेसेंट पद्धत.

हेल्मिंथोलॉजिकल प्रॅक्टिसमध्ये प्रथमच, फ्लोरोसेंट मायक्रोस्कोपी पद्धती 1955 मध्ये वापरल्या गेल्या. असे नोंदवले गेले की फ्लोरोसेंट मायक्रोस्कोपीमुळे अंड्याचे नुकसान न करता जिवंत आणि मृत वस्तूंमध्ये फरक करणे शक्य होते. फ्लोरोसेन्ससाठी, अतिनील किरणांचा वापर केला जात नाही, परंतु निळा-व्हायलेट भाग वापरला गेला दृश्यमान प्रकाश, पारंपारिक सूक्ष्मदर्शक आणि काचेच्या स्लाइड्ससह; OI-18 इल्युमिनेटरसाठी रंग फिल्टरचा एक विशेष संच वापरला गेला.

असे आढळून आले की राउंडवर्म्स, पिनवर्म्स, ड्वार्फ टेपवर्म्स, बोवाइन टेपवर्म्स, ब्रॉड टेपवर्म्स आणि इतर हेल्मिंथ्सची जिवंत आणि मृत अंडी वेगळ्या प्रकारे तयार होतात. ही घटना रंगांचा वापर न करता प्राथमिक ल्युमिनेसेन्स दरम्यान आणि फ्लोरोक्रोम्स (ऍक्रिडाइन ऑरेंज, कोरीफॉस्फिन, प्रिम्युलिन, ऑरोलिन, बर्लेरिन सल्फेट, ट्रायपाफ्लेविन, रिव्हानॉल, क्विनाइन इ.) सह डाग केल्यावर दिसून येते.

रंगहीन, जिवंत, अखंडित राउंडवर्म अंडी चमकदार हिरव्या रंगाने चमकतात पिवळसर छटा; मृत अंड्यांमध्ये, कवच गडद हिरव्या भ्रूण शेलपेक्षा जास्त उजळ हिरवा प्रकाश उत्सर्जित करतो; अळ्या असलेल्या राउंडवर्म अंड्यांमध्ये, फक्त कवच दिसते आणि मृत अंड्यांमध्ये, शेल आणि अळ्या दोन्ही चमकदार पिवळ्या असतात.

पिनवर्म्स आणि ड्वार्फ टेपवॉर्म्सची रंगविरहित आणि खंडित नसलेली जिवंत अंडी हिरवा-पिवळा प्रकाश सोडतात; मृत अंड्यांमध्ये, कवच गडद हिरव्या भ्रूण वस्तुमानाच्या पार्श्वभूमीवर तीव्रतेने चमकते. दुय्यम ल्युमिनेसेन्ससह (जेव्हा 1:10,000 आणि 1:50,000 च्या सौम्यतेवर ऍक्रिडाइन ऑरेंजने 30 मिनिटांपासून 2 तासांपर्यंत डागलेले असते), जिवंत आणि मृत नेमाटोड्स, ट्रेमेटोड्स आणि सेस्टोड्सचे कवच वेगळ्या पद्धतीने ल्युमिनेसेस करतात.

जिवंत आणि मृत Ascaris lumbricoides, Toxocara leonina, Enterobius vermicularis, Hymenolepis nana, H.fraterna, H. diminuta, T.saginatus, D.latum यांचे कवच नारिंगी-लाल रंगाचे असते. जिवंत Asc च्या भ्रूण. lumbricoides, T.leonina, H.diminuta, D.latum आणि बोवाइन टॅपवर्म ऑन्कोस्फियर्स मंद गडद हिरव्या किंवा राखाडी-हिरव्या रंगात फ्लूरोसेस करतात. या हेल्मिंथ अंड्यांचे मृत भ्रूण "ज्वलंत" केशरी-लाल प्रकाश सोडतात. पिनवर्म्स आणि टॉक्सोकाराच्या जिवंत अळ्या (अंड्यांची टरफले मुक्त केलेली) मंद राखाडी-हिरवा प्रकाश उत्सर्जित करतात; जेव्हा ते मरतात तेव्हा रंग डोक्याच्या टोकापासून हलका हिरवा, नंतर पिवळा, नारिंगी आणि शेवटी चमकदार नारिंगी होतो.

जेव्हा फ्लोरोक्रोम्स - कोरीफॉस्फिलस, प्रिम्युलिन - राउंडवर्म्स आणि व्हिपवर्म्सची मृत अंडी लिलाक-पिवळ्या ते तांबे-लाल रंगात चमकतात. व्यवहार्य अंडी चमकत नाहीत, परंतु गडद हिरव्या रंगाची असतात. पॅरागोनिमस वेस्टरमनी आणि क्लोनोर्चिस सायनेन्सिस या ट्रेमेटोड्सची जिवंत अंडी अॅक्रिडाइन केशरी रंगाने रंगलेली असताना चमकत नाहीत, परंतु मृत अंडी पिवळसर-हिरवा प्रकाश टाकतात.

हेल्मिंथ लार्वाची व्यवहार्यता निश्चित करण्यासाठी ल्युमिनेसेन्स पद्धत देखील वापरली जाऊ शकते. अशाप्रकारे, स्ट्राँगाइलेट आणि रॅबडीटाटस अळ्या अक्रिडाइन ऑरेंज (1:2000) च्या द्रावणाने चमकतात: जिवंत - हिरव्या (टिंटसह), मृत - चमकदार केशरी प्रकाशासह. जिवंत ट्रायचिनेला अळ्या चमकत नाहीत किंवा 10 मिनिटांपर्यंत फ्लोरेसीन आयसोथिओसायनेट, ऑरामाइन इ.च्या द्रावणाने उपचार केल्यावर त्यांना कमकुवत चमक मिळत नाही. फ्लोरोक्रोम्ड मृत अळ्या (1:5000 च्या एकाग्रतेवर) चमकदार चमक देतात.

कवचातून बाहेर पडणारे जिवंत मिरासिडिया सिलियाच्या अगदी सहज लक्षात येण्याजोग्या हलक्या पिवळ्या कोरोलासह मंद निळसर प्रकाश सोडतात, परंतु मृत्यूनंतर 10-15 मिनिटांनंतर ते चमकदार "ज्वलंत" हलक्या हिरव्या आणि नंतर केशरी-लाल प्रकाशासह दिसतात.

हेल्मिंथोलॉजिकल संशोधन पद्धती. हेलमिन्थ संसर्गाचे निदान करण्याच्या पद्धती थेट हेल्मिंथ्स किंवा त्यांचे तुकडे, तसेच हेलमिन्थ अळ्या आणि अंडी (विष्ठा, मूत्र, पित्त आणि पक्वाशयातील सामग्री, थुंकी, रक्त आणि ऊती, सामग्री तपासण्याच्या पद्धती) च्या थेट शोधावर आधारित आहेत. पेरिअनल एरिया आणि सबंग्युअल स्पेसमधून स्क्रॅपिंगद्वारे प्राप्त केले जाते), आणि अप्रत्यक्ष, ज्याच्या मदतीने मानवी शरीरात हेल्मिंथ्सच्या क्रियाकलापांच्या परिणामी होणारे दुय्यम बदल प्रकट होतात (रक्ताच्या आकारात्मक रचनेचा अभ्यास, रोगप्रतिकारक पद्धतीहेल्मिंथियासिसचे निदान, एक्स-रे परीक्षा इ.). थेट पद्धतींपैकी, सर्वात सामान्य स्कॅटोलॉजिकल आहेत, जे मॅक्रो- आणि मायक्रोहेल्मिंथोस्कोपिकमध्ये विभागलेले आहेत. काही प्रकरणांमध्ये, विशेष पद्धती वापरल्या जातात.

मॅक्रोहेल्मिटोस्कोपिक संशोधन पद्धतीहेल्मिंथ किंवा त्यांचे तुकडे (स्कोलेक्स, सेगमेंट्स, सेस्टोड्सच्या स्ट्रोबिलाचे भाग) शोधण्याच्या उद्देशाने. ते हेल्मिंथियासिसचे निदान करण्यासाठी वापरले जातात ज्यामध्ये रुग्णाच्या मलमूत्रातून अंडी उत्सर्जित होत नाहीत किंवा कमी प्रमाणात उत्सर्जित केली जातात आणि नेहमीच नाही (उदाहरणार्थ, एन्टरोबियासिससह, पिनवर्म विष्ठेमध्ये आढळतात, टॅनियसिस - सेगमेंटसह).

विष्ठेमध्ये पिनवर्म्स किंवा सेस्टोड विभाग शोधण्यासाठी, विष्ठेची उघड्या डोळ्यांनी तपासणी केली जाते. च्या साठी विभेदक निदानटॅनिअसिस, काळ्या फोटोग्राफिक क्युवेट्समध्ये किंवा पेट्री डिशमध्ये गडद पार्श्वभूमीमध्ये पाण्याने पातळ केलेली विष्ठा पाहण्याची शिफारस केली जाते. हेल्मिंथच्या तुकड्यांसाठी संशयास्पद असलेल्या मोठ्या फॉर्मेशन्सची दोन स्लाइड्समधील भिंगाखाली तपासणी केली जाते. जर, क्लिनिकल संकेतांनुसार, उपचारानंतर लहान हेल्मिंथ किंवा सेस्टोड डोके शोधणे अपेक्षित असेल, तर संशयास्पद कण ग्लिसरीनच्या थेंबामध्ये भिंगाखाली तपासले जातात आणि आवश्यक असल्यास, सूक्ष्मदर्शकाखाली.

मायक्रोहेल्मिंथोस्कोपिक संशोधन पद्धती(गुणात्मक) हेलमिन्थ अंडी आणि अळ्या ओळखण्यासाठी आहेत. काटोनुसार सेलोफेन कव्हर प्लेटसह जाड स्मीअर पद्धत वापरली जाते. काटो मिश्रणात 6 असतात मिलीमॅलाकाइट ग्रीनचे 3% जलीय द्रावण, 500 मिलीग्लिसरीन आणि 500 मिली 6% फिनॉल द्रावण. काटो प्लेट्स (हायड्रोफिलिक सेलोफेन 20' 40 मोजण्याचे तुकडे केले जातात मिमी) 24 साठी विसर्जित hकाटो मिश्रणात जेणेकरून ते एकमेकांना लागून असतील (3-5 मिलीकाटो द्रावण प्रति 100 प्लेट). 100 मिग्रॅविष्ठा एका काचेच्या स्लाइडवर लावली जाते, काटो नुसार सेलोफेन कव्हर प्लेटने झाकली जाते आणि खाली दाबली जाते जेणेकरून विष्ठा सेलोफेन प्लेटच्या मर्यादेत काचेच्या स्लाइडवर लावली जाईल. स्मीअर खोलीच्या तपमानावर 40-50 पर्यंत हलके करण्यासाठी सोडले जाते मिआणि नंतर सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासले. गरम हंगामात, तयारी कोरडे होण्यापासून रोखण्यासाठी, तयार केलेल्या तयारीच्या प्लेटवर ओलसर स्पंज ठेवा.

सर्व प्रकारच्या हेल्मिंथ्सच्या संपूर्ण शोधासाठी, सेलोफेन कव्हर प्लेटसह काटो जाड स्मीअर पद्धत संवर्धन पद्धतींपैकी एकासह वापरली जाणे आवश्यक आहे. त्यापैकी सर्वात सामान्य कलंत्र्यन पद्धत आणि फुलीबॉर्न पद्धत आहेत.

कलंतारयन पद्धत: 100 च्या व्हॉल्यूमसह रुंद तोंडाच्या बाटल्यांमध्ये मिलीकाचेच्या रॉडने नीट ढवळून घ्यावे 5 जीविष्ठा, हळूहळू संतृप्त सोडियम नायट्रेट द्रावण (1 किलोसोडियम नायट्रेट प्रति 1 lउकळताना पाणी) काचेच्या काठावर. पृष्ठभागावर तरंगणारे मोठे कण पेपर स्कूपने काढले जातात. खारट द्रावणाच्या पृष्ठभागावर काचेची स्लाइड लावली जाते (मिश्रण काचेच्या स्लाइडच्या पूर्ण संपर्कात येईपर्यंत खारट द्रावण जोडले जाते). 20-30 मध्ये मिस्लाइड काढली जाते आणि चित्रपटाची सूक्ष्मदर्शकाखाली तपासणी केली जाते. या मीठाच्या अनुपस्थितीत, आपण फोलबॉर्न (400) नुसार टेबल मीठचे संतृप्त द्रावण वापरू शकता. जी 1 मध्ये मीठ lउकळते पाणी).

मोठ्या विशिष्ट गुरुत्वाकर्षणासह अंडी (राऊंडवर्म्सची अंडी, ट्रेमेटोड्सची अंडी आणि मोठ्या सेस्टोड्स) तरंगत नाहीत या वस्तुस्थितीमुळे, फुलीबॉर्न पद्धतीचा वापर करताना द्रवाच्या पृष्ठभागाच्या स्तराचे परीक्षण करण्याव्यतिरिक्त, तपासणे आवश्यक आहे. सूक्ष्मदर्शकाखाली गाळापासून 2-4 तयारी.

विविध हेल्मिंथियास तपासण्यासाठी विशेष प्रयोगशाळा पद्धती.

मल तपासणी

मायक्रोस्कोपी सुरुवातीला कमी मोठेपणा (X80) वर चालते. प्रोटोझोआ त्यांच्या प्रकाशाच्या मजबूत अपवर्तनाने बदलले जाऊ शकतात आणि काही प्रजाती त्यांच्या हालचाली किंवा आकार बदलून बदलल्या जाऊ शकतात. कमी मॅग्निफिकेशनमध्ये लक्षात आलेली एखादी वस्तू 400 किंवा 600 च्या मॅग्निफिकेशनमध्ये तपासली जाते. अनुभवाच्या अनुपस्थितीत, स्मीअर पाहणे ताबडतोब उच्च मॅग्निफिकेशनवर केले पाहिजे, जे तथापि, औषधाचा अभ्यास करण्यासाठी वेळ लक्षणीय वाढवते. ब्रशचे स्ट्रोक उच्च मोठेपणावर पाहणे हे कंडेन्सर वापरून समायोजित करून, मजबूत प्रकाशाखाली केले पाहिजे.

भिन्न वैशिष्ट्ये वैयक्तिक प्रजातीमूळ स्मीअरमधील अमीबा म्हणजे शरीराचा आकार आणि आकार, न्यूक्लियसची दृश्यमानता, स्यूडोपोडियाच्या निर्मितीचे स्वरूप, हालचाल, साइटोप्लाझमचे एक्टो- आणि एंडोप्लाझममध्ये विभाजन, समावेशाचे स्वरूप (फॅगोसाइटोसेड एरिथ्रोसाइट्स, इ.). फ्लॅगेलेट प्रजातींमध्ये फरक करताना - शरीराचा आकार आणि आकार, फ्लॅगेलाची संख्या, हालचालीचे स्वरूप, अनड्युलेटिंग झिल्लीची उपस्थिती किंवा अनुपस्थिती. बॅलेंटिडियाची विशिष्ट वैशिष्ट्ये म्हणजे आकार, शरीराचा आकार, हालचाल, सिलिया, सायटोस्टोम इ.

मुख्य हॉलमार्कजिवंत अवस्थेत प्रोटोझोआचे वनस्पतिवत् होणारे स्वरूप चळवळीचे काम करतात. स्मीअर्समध्ये विविध प्रकारचे अचल स्वरूप आढळतात - वनस्पती सेल्युलोज, स्नायू तंतू, बीजाणू, बुरशी इ. प्रोटोझोलॉजिकल निदानामध्ये ते विचारात घेतले जाऊ नयेत.

मूळ स्मीअर पद्धत सोपी आणि कोणत्याही प्रयोगशाळेत प्रवेश करण्यायोग्य आहे. फॅगोसाइटोसेड एरिथ्रोसाइट्ससह डिसेंटेरिक अमिबासचे ऊतक स्वरूप शोधताना ते पूर्णपणे ठेवण्याची परवानगी देते अचूक निदानअमीबिक डिसेंट्री, आणि जर बॅलेंटिडिया आणि लॅम्ब्लिया आढळले तर - बॅलेंटिडियासिस आणि जिआर्डिआसिसचे निदान.

लुगोलच्या सोल्युशनसह smears डागणे . हा डाग सिस्टद्वारे प्रोटोझोआचे निदान करण्यासाठी वापरला जातो. हे तयार, अर्ध-निर्मित आणि चिवट विष्ठेच्या अभ्यासासाठी वापरले जाते.

स्मीअर तयार करण्यासाठी, लाकडी काठीचा शेवट विष्ठेने डागलेला असतो आणि आयोडीनच्या द्रावणाच्या थेंबात (जे - 1.0 ग्रॅम, केजे - 2 ग्रॅम, डिस्टिल्ड वॉटर - 100 मिली) धुऊन एकसमान इमल्शन होईपर्यंत काचेच्या स्लाइडवर लावले जाते. प्राप्त. तयारी एका कव्हर ग्लासने झाकली जाते आणि 3-5 मिनिटांनंतर. सूक्ष्मदर्शक प्रसारित प्रकाशात तपासण्यासाठी स्मीअर पुरेसे पारदर्शक असावे.

अवशेषांमध्ये न पचलेले अन्न, बीजाणू, बुरशी, आयडोफिलिक बॅक्टेरिया, प्रोटोझोअन गळू, रंगीत तपकिरी किंवा हिरवट-पिवळा, काटेकोरपणे परिभाषित आकार, आकार, प्रत्येक प्रजातीचे वैशिष्ट्य, कडांची वेगळी बाह्यरेषा, गुळगुळीत, पारदर्शक, दुहेरी-परिवर्तन केलेल्या उपस्थितीने ओळखले जातात. शेल, सायटोप्लाझमची सामग्री, तसेच अस्पष्ट परिभाषित संरचनेसह केंद्रकांची उपस्थिती. अमिबा सिस्टमध्ये, तपकिरी (गडद तपकिरी) रंगाचे ग्लायकोजेन व्हॅक्यूल्स दिसतात. या व्हॅक्यूल्सच्या रंगाची डिग्री आणि त्यांच्या सीमांची रूपरेषा त्यांच्या परिपक्वतेवर अवलंबून, समान प्रजातींच्या प्रोटोझोअन सिस्टमध्ये बदलते.