текущ

MUK 4.2.2939-11

МЕТОДИЧЕСКИ УКАЗАНИЯ

4.2. МЕТОДИ ЗА КОНТРОЛ. БИОЛОГИЧНИ И МИКРОБИОЛОГИЧНИ ФАКТОРИ

Процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за лаборатории на териториално, регионално и федерално ниво

Дата на въвеждане: от момента на одобрение

1. Разработено от Федералната държавна здравна институция „Руски научно-изследователски противочумен институт „Микроб“ на Роспотребнадзор (В. В. Кутирев, И. Н. Шарова, Н. А. Осина, Е. С. Казакова, Е. А. Плотникова, С. А. Пионтковски, Т. Ю. Красовская, Д. В. Уткин, С. А. Щербакова); М. В. Чеснокова, А. В. Мазепа, С. А. Татарников); Федерална обществена здравна институция "Ставрополски научноизследователски противочумен институт" на Роспотребнадзор (А. Н. Куличенко, О. В. Малецкая, Т. В. Таран, А. П. Бейер, А. В. Таран); Федерално държавно здравеопазване Институт „Волгоградски научноизследователски противочумен институт“ на Роспотребнадзор (В.В. Алексеев, А.В. Липницки, В.А. Антонов, Д.В. Викторов); Федерална държавна здравна институция „Ростов-на-Дон научноизследователски противочумен институт“ на Роспотребнадзор (Н.В. Павлович, Н.Л. Пичурина, Н.В. Аронова, Н.Н. Оноприенко, М.В. Цимбалистова, А.С. Водопянов); Федерална държавна здравна институция "Център за борба с чумата" на Роспотребнадзор (V.E. Bezsmertny, S.M. Ivanova); Федерална бюджетна здравна институция "Федерален център по хигиена и епидемиология" на Роспотребнадзор (V.G. Sennikova, M.V. Zarochentsev, V.V. Mordvinova); Федерална държавна научна институция „Държавен научен център по приложна микробиология и биотехнология“ на Роспотребнадзор (I.A. Dyatlov, A.N. Mokrievich, S.F. Biketov, M.V. Khramov, N.I. Luneva); Федерална държавна бюджетна институция "GISK на името на L.A. Tarasevich" на Министерството на здравеопазването и социалното развитие (I.V. Borisevich, L.V. Sayapina).

3. Одобрено от ръководителя на Федералната служба за надзор на защитата на правата на потребителите и благосъстоянието на хората, главния държавен санитарен лекар на Руската федерация Г. Г. Онищенко на 14 юли 2011 г.

1 област на използване

1 област на използване

1.1. Настоящите указания определят процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за лаборатории на териториално, регионално и федерално ниво, формите и методите на тяхното взаимодействие, номенклатурата и обхвата на изследването, изискванията към лабораториите, специалистите и персонала, участващи в извършването на проучвания, логистиката на изследванията, биологичната безопасност на труда.

1.2. Тези указания са предназначени за специалисти от бактериологични лаборатории на институции, упражняващи държавен санитарен и епидемиологичен надзор на туларемия в Руската федерация, лечебно-профилактични и противочумни институции.

2. Нормативни препратки

2.1. Федерален закон от 03.03.1999 г. N 52-FZ „За санитарното и епидемиологичното благосъстояние на населението“.
______________
Федерален закон от 30 март 1999 г. N 52-FZ „За санитарното и епидемиологичното благополучие на населението“. - Бележка на производителя на базата данни.

2.2. Указ на правителството на Руската федерация от 29 октомври 2007 г. N 720 * „За изменение на клауза 5 от Наредбата за лицензиране на дейности, свързани с използването на агенти на инфекциозни болести“, одобрен с Указ на правителството на Руската федерация от януари 22, 2007 N 31 *.
________________
* Документът стана невалиден въз основа на постановление на правителството на Руската федерация от 16 април 2012 г. N 317

2.3. Указ на главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 24 февруари 2009 г. № 11 „За представяне на извънредни доклади за извънредни ситуации в областта на общественото здраве от санитарен и епидемиологичен характер“ (регистриран в Министерството на правосъдието на Руската федерация от 10 април 2009 г. N 13745).

2.4. Заповед на Министерството на здравеопазването и социалното развитие на Руската федерация от 7 юли 2009 г. N 415n „За одобряване на квалификационните изисквания за специалисти с висше и следдипломно медицинско и фармацевтично образование в областта на здравеопазването“ (регистриран в Министерството на правосъдието на Руската федерация от 9 юли 2009 г. N 14292).

2.6. SP 1.2.036-95 "Процедура за отчитане, съхранение, прехвърляне и транспортиране на микроорганизми от групи на патогенност I-IV" (одобрена с постановление на Държавния комитет за санитарен и епидемиологичен надзор на Руската федерация от 28 август 1995 г. N 14 ).

2.7. SP 3.1.7.2642-10 "Профилактика на туларемия" (одобрен с Указ на Главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 31 май 2010 г. N 61 "За одобрение на SP 3.1.7.2642-10". Регистриран в Министерството на Правосъдието на Руската федерация от 7 юли 2010 г. N 7745).

2.8. SP 1.3.1285-03 „Безопасност при работа с микроорганизми от групи I-II на патогенност (опасност)“ (одобрен с постановление на Главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 15 април 2003 г. N 42 „За приемането на Санитарни и епидемиологични правила SP 1.3.1285-03" . Регистрирани в Министерството на правосъдието на Руската федерация на 10 май 2003 г. N 4545).

2.9. SP 1.3.1318-03* „Процедурата за издаване на санитарно-епидемиологично заключение относно възможността за работа с патогени на човешки инфекциозни заболявания от I-IV групи на патогенност (опасност), генетично модифицирани микроорганизми, отрови от биологичен произход и хелминти“ ( одобрен с решение на Главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 30 април 2003 г. N 85 „За приемането на санитарни и епидемиологични правила SP 1.2.1318-03“ , Регистриран в Министерството на правосъдието на Руската федерация на май 19, 2003 N 4558).
______________
*Вероятно оригинална грешка. Трябва да се чете: SP 1.2.1318-03. - Бележка на производителя на базата данни.

2.12. SP 3.4.2318-08 „Санитарна защита на територията на Руската федерация“ (одобрен с Указ на Главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 22 януари 2008 г. N 3 „За одобряване на санитарните и епидемиологични правила SP 3.4 .2318-08" . Регистриран в Министерството на правосъдието на Руската федерация 3.04.2008 N 11459).

2.13. SanPiN 2.1.7.2790-10 "Санитарни и епидемиологични изисквания за работа с медицински отпадъци" (одобрен с Указ на Главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 9 декември 2010 г. N 163. Регистриран в Министерството на правосъдието на Руската федерация Федерация на 17 февруари 2011 г. N 19871).

2.14. SanPiN 2.1.3.2630-10 "Санитарни и епидемиологични изисквания за организации, извършващи медицински дейности" (одобрен с Указ на Главния държавен санитарен лекар на Руската федерация от 18 май 2010 г. N 58. Регистриран в Министерството на правосъдието на Руската федерация Федерация от 9 август 2010 г. N 18094).

2.15. Санитарни правила за подреждане, оборудване и поддръжка на експериментални биологични клиники (вивариуми) (одобрени от Главния държавен санитарен лекар на СССР от 6 април 1973 г. N 1045-73).

2.16. MU 3.1.2007-05 "Епидемиологичен надзор на туларемия".

2.17. MU 3.3.2.2124-06 "Контрол на диагностични хранителни среди за биологични индикатори за патогени на чума, холера, антракс, туларемия".

2.18. MUK 4.2.2316-08 "Методи за мониторинг на бактериологични хранителни среди".

2.19. MU 1.3.2569-09 "Организация на работата на лаборатории, използващи методи за амплификация на нуклеинова киселина при работа с материал, съдържащ микроорганизми от групи на патогенност I-IV".

2.20. MU 4.2.2495-09 "Определяне на чувствителността на патогени на опасни бактериални инфекции (чума, антракс, холера, туларемия, бруцелоза, сап и мелиоидоза) към антибактериални лекарства."

3. Списък на съкращенията

LPS - липополизахарид

MPU - лечебно-профилактична институция

OOI - особено опасни инфекции

SP - санитарни и епидемиологични правила

SanPiN - санитарни и епидемиологични правила и разпоредби

MU - насоки

PBA - патогенен биологичен агент

MFA - метод на флуоресцентни антитела

ELISA - ензимен имуноанализ

PCR - полимеразна верижна реакция

RA - реакция на аглутинация

RNGA - реакция на индиректна хемаглутинация

RTNGA - реакции на инхибиране на непряка хемаглутинация

RNAt - реакция на неутрализация на антитела

MIS - магноимуносорбенти

RLA - реакция на латексна аглутинация

IC - имунохроматография

IC тест - имунохроматографски тест

4. Общи положения

Характеристики на заболяването и причинителя на туларемия

Туларемията е зоонозна системна естествена фокална бактериална инфекциозна болест, характеризираща се със симптоми на обща интоксикация, треска, възпалителни промени в областта на инфекциозния канал, регионален лимфаденит и склонност към продължително протичане.

Основните резервоари и източници на причинителя на туларемия в естествени условия са диви животни (около 50 вида), главно различни видове гризачи и зайци. На територията на естествените огнища на туларемия могат да се заразят овце, свине и говеда. Резервоарът и носителите на патогена също са кръвосмучещи членестоноги: иксодидни и гамазидни акари, комари, конски мухи, бълхи. Болният човек не представлява епидемиологична опасност.

Както при всички зоонози, туларемията се характеризира с множество механизми (аспирационен, контактен, фекално-орален, трансмисивен), както и пътища и фактори на предаване. В съответствие с Международната статистическа класификация на болестите и свързаните със здравето проблеми (десета ревизия, Женева, 2003 г., (ICD-10) и според локализацията на основния патологичен процес се разграничават следните форми на туларемия:

A21.0 - улцерогландуларен (язвено-бубонен);

A21.1 - окуло-жлезиста (окуло-бубонна);

A21.2 - белодробен;

A21.3 - стомашно-чревна (коремна);

A21.7 - генерализиран;

A21.8 - други форми на туларемия (ангинозно-бубонна);

5.1.1. Изисквания към лабораториите на лечебните заведения, които извършват изследвания на туларемия

Лечебните заведения, чиито лаборатории извършват диагностични изследвания за туларемия, трябва да имат лиценз за извършване на дейности, свързани с употребата на патогени от групи на патогенност (опасност) III-IV.

Лабораториите на здравните заведения трябва да имат санитарно-епидемиологично заключение относно възможността за работа с микроорганизми от групи за патогенност (опасност) III-IV в съответствие с действащия SP относно процедурата за издаване на санитарно-епидемиологично заключение относно възможността за работа с патогени инфекциозни заболявания на човека от I-IV група на патогенност (опасност), генетично модифицирани микроорганизми, отрови от биологичен произход и хелминти.

Отчитането, съхранението, прехвърлянето и транспортирането на изолирани култури от холерни вибриони (подозрителни) трябва да се извършва в съответствие с действащите нормативни документи относно процедурата за отчитане, съхранение, прехвърляне и транспортиране на микроорганизми от групи на патогенност I-IV.



Провеждането на изследвания на всички етапи - вземане на проби, съхранение, доставка в лабораторията, регистрация, процедура на изследване, издаване на резултати, взаимодействие с институциите на Роспотребнадзор - трябва да отговаря на изискванията на действащите нормативни и административни документи.



Тестовете за туларемия могат да се извършват от специалисти на възраст не по-малко от 18 години с висше и средно медицинско, биологично образование, които са завършили курсове за обучение по специалността "Бактериология" с разработването на методи за безопасна работа с патогени на инфекциозни заболявания от III-ти клас. IV група на патогенност (опасност), които имат разрешение за работа с PBA III-IV група на патогенност въз основа на заповедта на ръководителя на институцията. Специалистите, провеждащи диагностични изследвания за туларемия, трябва да притежават необходимите професионални умения в съответствие с номенклатурата на провежданите изследвания (Приложение 8).

Специалистите, извършващи дейности, свързани с употребата на патогени на инфекциозни заболявания, трябва да повишават квалификацията си най-малко веднъж на всеки пет години и да имат сертификат за специалист.









Контролът на качеството на диагностичните изследвания за туларемия в лабораториите на здравните заведения включва:












Правила за документиране





За вземане на материал и провеждане на диагностични тестове за туларемия в бактериологични лаборатории здравните заведения трябва да разполагат с:





Персоналът трябва да бъде осигурен с гащеризони и лични предпазни средства (за вземане на проби от клиничен материал и провеждане на имуносерологични реакции).

5.1.2. Номенклатура и обхват на изследването

Клиничните заведения избират клиничен материал от лица със съмнение за туларемия, пациенти с различни форми на туларемия и ваксинирани, както и секционен материал от починали лица.

В бактериологичните лаборатории на здравните заведения кръвните серуми от пациенти с туларемия и ваксинирани срещу туларемия се изследват чрез имуносерологични и алергологични методи:

1) откриване на антитела в сдвоени серуми;

2) провеждане на реакцията на лизиране на левкоцитите.

Лекарят инфекционист на лечебното заведение оценява алергологичния статус на пациентите чрез поставяне на алергична проба с туларин.

5.1.3. Редът за лабораторна диагностика на туларемия в лабораториите на лечебните заведения

Вземане на проби и транспортиране на проби от клиничен материал

Материалът от пациентите се взема от медицинския персонал на здравното заведение при приемане на пациента, преди началото на лечението с антибактериални лекарства. Вземането на проби се извършва от двама медицински работници, единият от които е специалист по инфекциозни заболявания или терапевт (хирург), обучен за диагностика на особено опасни инфекции и спазване на изискванията за биологична безопасност при работа с клиничен материал, за който се подозира, че съдържа патогени на инфекциозни заболявания на I-II групи на патогенност. Материал от ваксинирани лица се взема от медицинския персонал на здравните заведения

Секционният материал се взема от медицински работници от патологоанатомичните отделения (или BSME) в присъствието на специалист по особено опасни инфекции, ръководен от настоящите методически указания за организиране и прилагане на първични противоепидемични мерки в случаи на откриване на пациент (труп), заподозрян за инфекциозни заболявания, които причиняват извънредни ситуации в зоните на санитарно и епидемиологично благосъстояние на населението, в съответствие с регламентираните изисквания за биологична безопасност при работа с патогенни биологични агенти от групи I-II.

За да бъдат изпратени в бактериологичните лаборатории на институциите на Роспотребнадзор, те вземат:

от болни хора, в зависимост от клиничната форма на заболяването: съдържанието на бубона, материал от гърлото, от конюнктивата на окото, язвен секрет, храчки, кръв;

от починали хора: увеличени лимфни възли, променени области на белите дробове и далака, трахеята;

от ваксинирани хора: кръв.

Вземането на проби от всички видове материали се извършва в стерилни стъклени или пластмасови съдове, съответстващи на обема на пробите.

Пункт от бубовземете до 14-20 дни от заболяването със спринцовка с вместимост най-малко 5 ml. Кожата на мястото, предназначено за пункция, се третира със 70% алкохол, след което се смазва с 5% йоден разтвор и отново се избърсва със 70% алкохол. Иглата се вкарва по такъв начин, че върхът й да достигне централната част на бубона, след което, издърпвайки буталото до отказ, иглата бавно се отстранява. Съдържанието се прехвърля в стерилна епруветка с капачка на винт. Възможно е да се въведат 0,3-0,5 ml стерилен 0,9% разтвор на натриев хлорид в бубона преди вземане на материала и след това да се избере съдържанието. При отваряне на бубона материалът се взема отделно от периферната плътна част и отделящата се фистула.

Преди прием отделяща се язва, папули, везикули или излющена струпас дезинфектант преди инжектиране, внимателно почистете кожата около засегнатата област, ако е необходимо, отстранете некротичните маси и гной със стерилна марля. Чрез търкаляне на тампона върху повърхността на раната от центъра към периферията, материалът се абсорбира върху тампона за 5-10 s. Тампонът с материала се поставя в епруветка или транспортна среда. Когато използвате спринцовка, иглата се вкарва в ръба на везикулата (пустула) и след това се придвижва към средата. При язви се пробива плътен ръб.

храчкисъбрани в специални контейнери с широко гърло и капак на винт.

Отделяща се фарингеална лигавицаприема се на празен стомах или 3-4 часа след хранене. Внимателно натискайки езика с шпатула, тампонът се вкарва между арките на сливиците и езика (не можете да докосвате устните, бузите, езика с тампона) и събира материал от задната част на фаринкса, сливиците и местата на възпаление или разязвяване на лигавицата. Тампонът с материала се поставя в стерилна епруветка или в епруветка с транспортна или хранителна среда.

Кръвза изследване се вземат при спазване на правилата за асептика и лични предпазни мерки. Кръвта се взема от кубиталната вена в количество от 10-20 ml със спринцовка за еднократна употреба и се прехвърля в епруветка за инокулация върху хранителни среди и инфекция на животни за биотест, в епруветка с антикоагулант (4% разтвор на натриев цитрат в съотношение 1:10 към обема на кръвта или 6% разтвор на EDTA в съотношение 1:20 към обема на кръвта) за PCR анализ, в епруветка за получаване на серум за имуносерологични реакции.

За да се създаде реакция на аглутинация на кръвни капки и реакция на левкоцитолиза, се взема кръв от пръста.

Секреция на конюнктивата на окототрябва да се вземат до 17-ия ден от заболяването с помощта на стерилен тампон, предварително навлажнен с 0,9% разтвор на натриев хлорид. Пробите от всяко око се вземат с отделни тампони с две или три кръгови движения по лигавицата на окото. Тампонът с материала се поставя в стерилна епруветка или транспортна среда. При наличие на обилно гнойно течение със стерилен сух памучен тампон се взема гной от вътрешната повърхност на долния клепач, като се придвижва към вътрешния ъгъл на очната фисура. Необходимо е да се гарантира, че миглите не докосват тампона (дръжте клепача с ръка). Доставка на материала в лабораторията в рамките на 1 час, ако се използват специални транспортни среди - в рамките на един ден.

Контейнерите с проби се етикетират, третират се отвън с дезинфекционен разтвор, опаковат се в полиетиленов плик с цип и се поставят в контейнер за транспортиране на биологичен материал за изследване. Контейнерът с опакования материал се запечатва и изпраща до лабораторията с куриер със специално предназначен за това транспорт. Повърхността на масата след опаковането на пробите се третира с дезинфекционен разтвор.

За проби, доставени в лабораторията, попълнете направлението (Приложение 1), което посочва: адреса на институцията, до която се изпраща пробата (пробите); фамилия, име, бащино име на пациента (починал); пол, възраст, местоживеене, дата на заболяване, дата на търсене на медицинска помощ, дата на хоспитализация, предварителна диагноза; характеристики на епидемиологичната история; дали пациентът е получил антибактериална терапия преди вземането на материала (кога, кои лекарства са използвани, в каква доза); вид материал, взет за бактериологично изследване; цел на изследването; дата и час на вземане на материала; адреса, на който да се докладват резултатите от бактериологичното изследване; наименование на институцията, длъжност, фамилия и инициали на лицето, изпращащо пробата (пробите), подпис; време за доставка на мостра; длъжност, фамилия и инициали на лицето, взело пробите.

Материалът се транспортира до лабораторията в хладилна чанта. При липса на условия за съхранение на материала на студено, времето от момента на вземане на материала до началото на изследването не трябва да надвишава 5-6 часа.



Определянето и записването на имуносерологичните реакции се извършва в бактериологичната лаборатория на лечебното заведение в съответствие с инструкциите за употреба на диагностични препарати. В динамиката на заболяването се изследват сдвоени серуми с интервал от 7-10 дни. 4-кратно или повече увеличение на титъра на антителата е диагностично надеждно.

Свръхчувствителността при болни и ваксинирани индивиди се определя от инвитро

Формулирането и записването на резултатите от алергичния тест с туларин (туларемичен течен алерген, суспензия за кожно скарификационно приложение) при заразени или съмнителни за заразени с туларемия лица се извършва от специалист по инфекциозни болести в здравно заведение в съответствие с инструкции за употреба на лекарството.

Трябва да се помни, че алергичният тест остава положителен при хора, които са имали туларемия.

5.1.4. Регистрация на резултатите от изследванията

Регистрирането на резултатите от серологични и алергични изследвания на серуми за туларемия в бактериологичните лаборатории на лечебните заведения се извършва в съответствие с установените в институцията счетоводни форми. Издаване на отговори за истории на заболяването - по унифицирани формуляри.

5.1.5. Процедурата за взаимодействие на лечебните заведения с организациите на Роспотребнадзор

5.2. Процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за клоновете на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в община (град и административни области на субекта, обединени на териториална основа) в субекта на Руската федерация

5.2.1. Изисквания към лабораториите на клоновете на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в община в съставна единица на Руската федерация, които извършват изследвания на туларемия

Наличие на разрешителни и регулаторни документи

FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в състава на Руската федерация, на базата на чиито клонове работят бактериологични лаборатории, трябва да има лиценз за извършване на дейности, свързани с използването на патогени от II-IV (или III-IV ) групи за патогенност (опасност).

Лаборатории на клонове на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в община в съставна единица на Руската федерация, които извършват изследвания на туларемия, трябва да имат санитарно-епидемиологично заключение за възможността за работа с микроорганизми от III-IV групи на патогенност (опасност) в съответствие с действащия SP относно процедурата за издаване на санитарно-епидемиологично заключение относно възможността за извършване на работа с патогени на човешки инфекциозни заболявания от I-IV групи на патогенност (опасност), генетично модифицирани микроорганизми, отрови от биологичен произход и хелминти.

Лабораториите на клоновете на FBUZ „Център по хигиена и епидемиология“ в община в съставна единица на Руската федерация трябва да бъдат акредитирани за техническа компетентност по предписания начин в съответствие с действащата законодателна рамка на Руската федерация.

Отчитането, съхранението, прехвърлянето и транспортирането на проби от клиничен материал трябва да се извършва в съответствие с действащия SP относно процедурата за записване, съхранение, прехвърляне и транспортиране на микроорганизми от групи на патогенност I-IV.

Обезвреждането на отпадъците трябва да се извършва в съответствие с действащите санитарни и епидемиологични изисквания за третиране на медицински отпадъци.



Изисквания към специалистите и персонала, участващи в извършването на изследвания на туларемия

Тестовете за туларемия могат да се извършват от специалисти на възраст не по-малко от 18 години с висше и средно медицинско, биологично образование, които са завършили курсове за обучение по специалността "Бактериология" с разработването на методи за безопасна работа с патогени на инфекциозни заболявания от III-ти клас. IV група на патогенност (опасност), които имат разрешение за работа с PBA III-IV групи въз основа на заповедта на ръководителя на институцията. Специалистите, провеждащи диагностични изследвания за туларемия, трябва да притежават необходимите професионални умения в съответствие с номенклатурата на провежданите изследвания (Приложение 8).

Специалистите, занимаващи се с дейности, свързани с употребата на патогени на инфекциозни заболявания, трябва да имат сертификат за специалист и да повишават квалификацията си най-малко веднъж на всеки пет години.

Изисквания за осигуряване безопасността на персонала

Всяка лаборатория, извършваща изследвания за туларемия, трябва да разполага с пакет от документи, които определят безопасния режим на работа на служителите, като се вземат предвид естеството на работата, технологичните характеристики и свойствата на микроорганизмите. Документите трябва да бъдат съгласувани с комисията за наблюдение на спазването на изискванията за биологична безопасност, специалисти по защита на труда, противопожарни мерки и одобрени от ръководителя на институцията. Резултатите от проверката на познаването на правилата за безопасност на персонала по време на работа се записват в специален дневник.

Всички служители трябва да спазват изискванията за осигуряване на безопасност при работа с материали, подозрителни или заразени с патогени на инфекциозни заболявания от III-IV групи на патогенност (опасност), в съответствие с действащите нормативни документи.

Служителите на институцията, участващи в епизоотологичното изследване на ензоотичната територия, трябва да бъдат ваксинирани срещу туларемия, последвано от наблюдение на нивото на имунитет и записване на резултатите в специален дневник.

Процедурата за организиране на вътрешен контрол на качеството на лабораторните изследвания

Контролът на качеството на диагностичните тестове за туларемия в лабораториите включва:

контрол на качеството на диагностични препарати и тест системи, дестилирана вода, химични реактиви и дезинфектанти;

навременна проверка на средствата за измерване, сертифициране на тестово оборудване;

контрол на качеството на стерилизация на лабораторна стъклария;

контрол на работата на парни и суховъздушни стерилизатори;

контрол на работата на бактерицидни лампи;

контрол на температурата на хладилници;

контрол на температурата на термостати;

проверка на климатичното състояние на промишлени помещения и боксове, температура, влажност;

проверка на санитарното състояние на помещенията, включително условията за почистване, дезинфекция, контрол на измиването от повърхности и оборудване.

Резултатите от контрола се записват в специални журнали.

Правила за документиране

Поддържането на лабораторна документация, включително регистрационни и работни дневници, се извършва в съответствие с изискванията на действащите нормативни и методически документи.

Изисквания за материални ресурси, необходими за извършване на диагностични изследвания за туларемия

За извършване на диагностични изследвания за туларемия в бактериологичните лаборатории на филиалите на Центъра по хигиена и епидемиология трябва да са налице:

диагностични препарати, тест системи, регистрирани по установения ред (Приложение 3);

химически реактиви (Приложение 4);

устройства, оборудване, консумативи (Приложение 5, 6).

Препоръчва се наличието на медицински комплект за вземане на материал (универсална опаковка за вземане на материал от хора и от обекти на околната среда за изследване за особено опасни инфекциозни заболявания).

Персоналът трябва да бъде осигурен с гащеризони и лични предпазни средства.

5.2.2. Номенклатура и обхват на изследването

Лабораториите на клоновете на FBUZ „Център по хигиена и епидемиология“ в общините на съставния субект на Руската федерация, когато упражняват епидемиологично наблюдение, наблюдават състоянието на антитуларемичния имунитет при ваксинирани хора.

Изследванията се извършват в следния обхват:

1) откриване на антитела;

2) поставяне на реакцията на лизис на левкоцитите.

Ако лабораторията на лечебното заведение не извършва серологични изследвания за туларемия, серумът на пациентите или тези със съмнение за това заболяване се изследва в клона на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в субекта на Руската федерация (от споразумение).

5.2.3. Процедурата за лабораторна диагностика на туларемия в лабораториите на клоновете на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в община в съставна единица на Руската федерация

Състоянието на имунитета при ваксинирани хора се проверява 5 години след ваксинацията и впоследствие - 1 път на 2 години.

Контролът на състоянието на антитуларемичния имунитет се извършва с помощта на алергологичен (реакция на левкоцитолиза) или един от серологичните методи на изследване (RA, реакция на обемна агломерация, RNHA, ELISA). В този случай е за предпочитане да се използват серологични методи на изследване. Материалът за изследването е кръвта и кръвния серум на ваксинираните. Ако е необходимо, можете да използвате реакция с кръвни капки, която ви позволява да дадете отговор в рамките на 5 минути и може да бъде доставена със суха капка кръв.

От пациенти или лица със съмнение за туларемия в динамиката на заболяването се изследват сдвоени серуми на интервал от 7-10 дни. 4-кратно или повече увеличение на титъра на антителата е диагностично надеждно.

Свръхчувствителността при ваксинирани и преболедували лица се определя от инвитров реакцията на левкоцитолиза в съответствие с настоящите указания за епидемиологично наблюдение на туларемия.

5.2.4. Регистрация на резултатите от изследванията

Регистрирането на резултатите от изследванията в лабораториите на клоновете на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в община в съставна единица на Руската федерация се извършва в съответствие с установените в институцията счетоводни форми. Издаване на отговори - по унифицирани формуляри.

5.2.5. Процедурата за взаимодействие на клонове на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в община в съставна единица на Руската федерация с други организации на Роспотребнадзор

Информацията за резултатите от лабораторната диагностика на туларемия в лабораторията на клона на Центъра по хигиена и епидемиология на FBUZ в състава на Руската федерация се предава в съответствие с действащите нормативни документи.

5.3. Процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в съставна единица на Руската федерация

5.3.1. Процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в субекта на Руската федерация, в структурата на който няма отдели и лаборатории за особено опасни инфекции

Процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за лаборатории на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в съставните образувания на Руската федерация, в структурата на които няма отдели или лаборатории за особено опасни инфекции, съответства на процедура за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за лаборатории на клонове на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в съставна единица на Руската федерация (раздел 5.2).

5.3.2. Процедурата за организиране и провеждане на лабораторна диагностика на туларемия за лаборатории за особено опасни инфекции на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в субекта на Руската федерация

5.3.2.1. Изисквания към лаборатории за особено опасни инфекции FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в състава на Руската федерация, извършващи изследвания на туларемия.

Наличие на разрешителни и регулаторни документи

FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в състава на Руската федерация, на базата на който работят лаборатории за особено опасни инфекции, извършващи изследвания на туларемия, трябва да има лиценз за извършване на дейности, свързани с използването на патогени на II. -IV групи на патогенност (опасност).

Лабораториите на OOI FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в съставна единица на Руската федерация, които извършват изследвания на туларемия, трябва да имат санитарно-епидемиологично заключение за възможността за работа с микроорганизми от II-IV групи на патогенност (опасност) в в съответствие с действащия SP относно процедурата за издаване на санитарни и епидемиологични заключения относно възможността за извършване на работа с патогени на човешки инфекциозни заболявания от I-IV групи на патогенност (опасност), генетично модифицирани микроорганизми, отрови от биологичен произход и хелминти.

Лабораториите на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в съставна единица на Руската федерация трябва да бъдат акредитирани за техническа компетентност по предписания начин в съответствие с действащата законодателна рамка на Руската федерация.

Отчитането, съхранението, трансферът и транспортирането на изолирани подозрителни култури от причинителя на туларемия и / или проби от клиничен материал трябва да се извършват в съответствие с действащия SP относно процедурата за записване, съхранение, трансфер и транспортиране на микроорганизми от групи патогенност I-IV.

Обезвреждането на отпадъците трябва да се извършва в съответствие с регламентираните санитарно-епидемиологични изисквания за третиране на медицински отпадъци.

Провеждането на изследвания на всички етапи: вземане на проби, съхранение, доставка в лабораторията, регистрация, процедура на изследване, издаване на резултати, взаимодействие с организациите на Роспотребнадзор трябва да отговарят на изискванията на действащите нормативни документи.

Изисквания към специалистите и персонала, участващи в извършването на изследвания на туларемия

Изследванията за туларемия могат да се извършват от специалисти на възраст не по-малко от 18 години с висше и средно медицинско, биологично образование, завършили курсове за обучение по специалност "Бактериология" с основите на безопасна работа с патогенни биологични агенти (PBA) от група I -II, които имат разрешение за работа с PBA II - IV групи въз основа на заповедта на ръководителя на институцията. Специалистите, провеждащи изследвания на туларемия, трябва да притежават необходимите професионални умения (Приложение 8).

Специалистите, извършващи дейности, свързани с употребата на патогени на инфекциозни болести, трябва да имат сертификати и да подобряват уменията си най-малко веднъж на всеки пет години.

Изисквания за осигуряване безопасността на персонала

Всяка лаборатория, извършваща изследване на туларемия, трябва да разполага с пакет от документи, които определят безопасния режим на работа на служителите, като се вземат предвид естеството на работа, технологичните характеристики и свойствата на микроорганизмите. Документите трябва да бъдат съгласувани с комисията за наблюдение на спазването на изискванията за биологична безопасност, специалисти по защита на труда, противопожарни мерки и одобрени от ръководителя на институцията. Резултатите от проверката на познаването на правилата за безопасност на персонала по време на работа се записват в специален дневник.

Специалистите, които извършват епизоотологично изследване на територия, ензоотична за туларемия и нейната лабораторна поддръжка, трябва да бъдат ваксинирани срещу туларемия, последвано от наблюдение на нивото на имунитет и записване на резултатите в специален журнал.

Всички служители трябва да спазват изискванията за осигуряване на безопасност при работа с материали, подозрителни или заразени с патогени на инфекциозни заболявания от I-II групи на патогенност (опасност), в съответствие с действащите нормативни документи.

Процедурата за организиране на вътрешен контрол на качеството на лабораторните изследвания

Контролът на качеството на диагностичните изследвания за туларемия в лабораториите на OOI FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" включва:

контрол на качеството на хранителни среди, диагностични препарати и тест системи, дискове с антибактериални препарати, дестилирана вода, химически реактиви и дезинфектанти;

навременна проверка на средствата за измерване, сертифициране на тестово оборудване;

контрол на качеството на стерилизация на лабораторна стъклария;

контрол на работата на парни и суховъздушни стерилизатори;

контрол на работата на бактерицидни лампи;

контрол на температурата на хладилници;

контрол на температурата на термостати;

проверка на климатичното състояние на промишлени помещения и боксове, температура, влажност;

проверка на санитарното състояние на помещенията, включително условията за почистване, дезинфекция, контрол на измиването от повърхности и оборудване.

Резултатите от контрола се записват в специални журнали.

Правила за документиране

Поддържането на лабораторна документация, включително регистрационни и работни дневници, се извършва ежедневно в съответствие с изискванията на текущите методически документи.

Изисквания за материални ресурси, необходими за извършване на диагностични изследвания за туларемия

За извършване на диагностични тестове за туларемия лабораториите трябва да разполагат с:

хранителни среди, регистрирани по предписания начин (Приложение 2);

диагностични препарати, тест системи, антибактериални препарати, регистрирани по установения ред (Приложение 3, 7);

химически реактиви (Приложение 4);

инструменти, оборудване, консумативи (Приложение 5, 6);

медицински комплект (универсална опаковка за вземане на материал от хора и от обекти на околната среда за изследване за особено опасни инфекциозни заболявания).

Хранителните среди подлежат на задължителен контрол в съответствие с действащите указания за контрол на диагностичните хранителни среди по биологични показатели (за причинителя на туларемия).

5.3.2.2. Номенклатура и обхват на изследването.

Лабораториите на OOI FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в съставните образувания на Руската федерация извършват:

изследване на материал от пациенти и починали със съмнение за туларемия;

изследване на материал от лица, подлежащи на изследване за туларемия в съответствие с изискванията на епидемиологичния надзор (по договаряне);

изследване на проби, събрани при епизоотологичното проучване на територията;

изследване на проби от обекти на околната среда;

идентифициране на изолирани култури от причинителя на туларемия по съкратена схема;

контрол на качеството и инхибиторни свойства на хранителните среди.

Диагностичните изследвания на материала се извършват в следния обем:

а) индикация на патогена в нативен материал чрез методи за експресна и ускорена диагностика (MFA, PCR, ELISA, RA, RNHA, RNAb, селективна концентрация върху MIS, последвана от ELISA);

б) създаване на биологична проба;

в) засяване върху хранителни среди с цел изолиране на чиста култура на патогена;

г) откриване на антитела към причинителя на туларемия;

д) идентификация на избраната култура по намалената схема.

5.3.2.3. Редът за диагностични изследвания за туларемия в лабораториите за особено опасни инфекции на FBUZ "Център по хигиена и епидемиология" в субекта на Руската федерация.

Процедура за изследване на клиничен материал

Изборът на материал се извършва в съответствие с параграф 5.1.

За идентифициране на причинителя на туларемия се използват диагностични препарати и сложни агарови или жълтъчни среди с добавяне на цистеин, тъканни екстракти, дефибринирана кръв, глюкоза, регистрирани по предписания начин. Всяка партида агар трябва да бъде тествана за чувствителност към растежа на туларемичния микроб в съответствие с действащите нормативни и методически документи. За потискане на растежа на чужда микрофлора, пеницилин (100 единици / ml), ампицилин (100 единици / ml), полимиксин В (50-100 µg / ml), кефзол (или цефалексин), амфотерицин В (или амфоглюкамин), ристомицин сулфат се използват и някои други антибактериални лекарства.

Обектите с култури се инкубират при температура 37 °C. Посевите се преглеждат след 24-48 часа (по-нататък - ежедневно в продължение на 10 дни от момента на засяване).

Подготовката на проби за PCR се извършва в съответствие с изискванията на ръководството за организация на работата на лабораториите, използващи методи за амплификация на нуклеинова киселина при работа с материал, съдържащ микроорганизми от групи на патогенност I-IV.

Изследване на материал от болен човек (труп)

Етап I:

подготовка на цитонамазки, оцветяване на фиксирани петна по Грам, Романовски-Гимза, флуоресцентни имуноглобулини срещу туларемия;

PCR настройка;

задаване на имуносерологични реакции за откриване на антигени и антитела към причинителя на туларемия (RA, MFA, RNGA, RNAt, ELISA и др.);

настройка на реакцията на левкоцитолиза (кръв на пациента);

инфекция на животни за биотест (морски свинчета интраперитонеално; бели мишки интраперитонеално или подкожно (кръв, бубон пунктат), подкожно (храчка, гърлен секрет, отворен бубон, язвен секрет, конюнктива);

сеитба върху плътни хранителни среди (кръв, бубонна точка);

сеитба върху твърди хранителни среди с инхибитори на чужда флора (храчка, тампон от гърлото, субстрат от отворен бубон, отделяне от язва, конюнктива).

II етап(2-6 часа от началото на изследването):

отчитане на резултатите от MFA, ELISA, PCR;

отчитане на резултатите от RA, RPGA и RNAt след 18-24 часа;

екстрадиция предварителен положителен отговорвъз основа на наличието в петна от малки кокоидни пръчици с грам-отрицателен или лилав цвят при оцветяване по Romanovsky-Giemsa, тяхната специфична луминесценция при оцветяване с флуоресцентни имуноглобулини на туларемия, положителен резултат от PCR, положителни имуносерологични реакции с отрицателни контроли.

Етап III(48-72 часа от началото на изследването):

гледане на култури от местен материал върху агарови плочи;

бактериоскопия на намазки от съмнителни колонии (оцветяване по Грам);

настройка на IC тест за експресна идентификация на туларемичен микроб с материал от съмнителни колонии;

скрининг на подозрителни колонии от туларемичен микроб върху хранителен агар за изолиране на чиста култура;

екстрадиция потвърждение на предварителен положителен отговорвъз основа на наличието на характерен растеж върху плътни хранителни среди, наличието на малки грам-отрицателни кокови пръчки в намазки от колонии, положителен IC тест за бързо идентифициране на туларемичния микроб.

IV етап(3-5 дни от началото на изследването):

след натрупване на чиста култура, поставяне на тестове за нейното идентифициране. Идентифицирането на изолираната култура се извършва съгласно следните тестове:

клетъчна морфология, естеството на оцветяването по Грам и флуоресцентните имуноглобулини срещу туларемия;

естеството на растеж върху хранителна среда FT-arape или върху среда с нагънат жълтък на McCoy;

липса на растеж върху прости хранителни среди (месен пептонен агар и/или бульон);

аглутинация на култури със специфичен туларемичен серум или RLA с изолирана култура;

експресна идентификация на туларемичния микроб чрез IC тест;

идентифициране на видово специфични ДНК цели чрез PCR;

аутопсия на умрели биопробни животни, инокулация на органи и кръв върху твърди хранителни среди, изготвяне и изследване на петна-отпечатъци от органи, PCR с органни суспензии.

Етап V(5-15 дни от началото на изследването):

отчитане на резултатите от идентификацията на културите;

преглед на култури от материал от мъртви животни за биотест;

аутопсия и изследване на заклани биотест животни;

екстрадиция окончателен положителен отговорсе извършва въз основа на изолиране на чиста култура на туларемичен микроб от посеви от нативен материал, неговата идентификация чрез морфологични, културни свойства, положителни резултати от имуносерологични реакции, наличие на патогенна ДНК, както и въз основа на изолиране на идентични култури от мъртви или заклани лабораторни животни.

Втора група. Силно чувствителни, но нечувствителни бозайници (те се заразяват, когато единични микробни клетки на причинителя на туларемия навлизат в тялото, боледуват сериозно, но бързо се отърват от микроба, придобивайки стабилен имунитет). Тази група включва полски мишки, всички видове плъхове и земни катерици, катерици, бурундуци, бобри, таралежи, ондатра, водна земеровки, земеровки и някои други видове бозайници.

Трета група. Малочувствителни и практически нечувствителни бозайници. Те включват повечето хищни бозайници и селскостопански животни.

Схема на изследване на полеви материали

Лабораторните изследвания на теренния материал започват веднага след получаването му. Допуска се краткотрайно съхранение (не повече от 20 часа) при температура от 4 до 6 °C. Когато животните се аутопсират на мястото за събиране, органите могат да се съхраняват и доставят в лабораторията в консервант. Вазелин-парафинова смес може да служи като консерванти (1 част парафин и 10 части вазелиново масло се смесват и стерилизират в продължение на 45 минути чрез нагряване във вряща водна баня), 5% разтвор на готварска сол, в допълнение, дълбоко замразяване в използва се течен азот и др.. В консерванти и при ниска температура животинските органи могат да се съхраняват един месец.

Изследването се извършва по биологичен, бактериоскопски (светлинна и луминесцентна микроскопия), бактериологичен (посяване върху хранителни среди, изолиране на чисти култури и тяхната идентификация), молекулярно-генетичен (PCR анализ) и имуносерологичен (RA, RLA, RNGA, RNAt, RNAg). , ELISA) методи. Схемата за изследване на материала зависи от групата на чувствителност на животните и от формата, в която е доставен материалът.

дребни бозайници, уловени в природата с риболовни уреди или живи, се изследват по групов метод, като в една проба се обединяват органите на няколко животни (5-10) от един и същи вид и уловени на едно място.

За изследване се вземат части от далака, черния дроб, лимфните възли, кръвта или "измиването" от гръдната кухина. Материалът се изследва с биологични, молекулярно-генетични и имуносерологични методи.

Органната суспензия се използва за заразяване на животни за биотест и за откриване на антигени и ДНК на причинителя на туларемия. Кръвен серум или "измивки" от гръдната кухина се изследват за наличие на антитела срещу причинителя на туларемия.

Трупове на животниумрели в природата, умрели в лаборатория или животни, при които при аутопсия са открити патологични и анатомични промени, характерни за туларемия, се подлагат на индивидуално изследване. Части от далак, черен дроб, бъбреци, лимфни възли, костен мозък се изследват чрез биологични, бактериологични, молекулярно-генетични и имуносерологични методи.

При условия на установена епизоотия, когато се изследват животни от първа група, можете да се ограничите до засяване на органи върху хранителни среди и бактериоскопия на петна от органи, като някои от тях се държат на студено до получаване на резултатите от изследванията. В съмнителни случаи се прибягва до биологичния метод. Животните от втора и трета група се изследват задължително по биологичен метод.

Вероятността за откриване на причинителя на туларемия в органите на животни от първата група по време на микроскопско изследване (по-добре е да се използва флуоресцентна микроскопия) е много по-висока, отколкото по време на бактериоскопия на петна от органи на трупове на животни от втора група. .

домашни любимци(говеда, свине, овце, северни елени) са видове, които са нечувствителни към туларемия (трета група). В тяхното изследване се използват главно имуносерологични методи (RA, RNGA, ELISA), по-рядко - интрадермален тест с туларин. Бактериологични и биологични методи се използват само при изследване на умрели, заклани или болни животни. Изследвайте предимно лимфните възли и далака. При серологично изследване трябва да се вземе предвид възможността за откриване на кръстосани реакции с Brucella и микробната флора на червата на животните. Препоръчително е да се изследват серуми от домашни животни в поне два серологични теста. Положителните реакции при RNGA трябва да се наблюдават при RTGA.

Пелети от хищни птици и тор от хищни бозайниципрепоръчително е да се изучава индивидуално. Смъртта на туларемичния микроб в пелети и изпражнения настъпва бързо (на първия ден; при отрицателни температури, може би по-бавно) и следователно биологичните и бактериологичните изследвания на този материал са неподходящи. Проби от пелети и отпадъци се използват за търсене на антиген на причинителя на туларемия чрез имуносерологични методи и ДНК чрез PCR.

Кръвосмучещи насекоми и други безгръбначнисе изследват по групов метод, насекоми или безгръбначни от един и същи вид (род) и взети от едно и също място се комбинират в една проба.

Възрастните иксодидни кърлежи обединяват до 50 индивида.

Ларвите са обединени в 100-200 екземпляра, нимфите - в 50-100 екземпляра, в зависимост от степента на тяхната тлъстост. Не се извършва измиване на ларви и нимфи ​​на иксодидни кърлежи в алкохол, т.к. това може да повреди анализа.

Бълхи, гамазидни акари, въшки се сортират по вид (род), както и по видове животни, от които са събрани, поставят се в стерилни епруветки и след това се подлагат на обработка по същия начин като ларвите и нимфите на иксодовите кърлежи. .

Кръвосмучещите двукрили насекоми се евтаназират с етерни пари, за да се ограничи подвижността. При конските мухи крайниците и крилата се отрязват предварително, комарите и мушиците се изследват като цяло. В един анализ се включват до 25-50 конски мухи или до 100 комара или до 250 мушици.

Хидробионти - водници, амфиподи, дафнии, циклопи и др.преди изследването те се измиват в няколко порции вода и 1-2 порции стерилна дестилирана вода. При животни с капаци или черупки, последните се отстраняват, ако е възможно. Животните се обединяват в групи от 5-10-50 екземпляра в зависимост от размера на отделните видове.

Откриването на туларемичния микроб или неговата ДНК в безгръбначни е най-ефективно при използване на биологичен метод и PCR. Възможно е също така да се открие специфичният антиген на туларемия LPS с помощта на IC теста.

Водни проби(100-200 ml) се вземат от различни водоеми: реки, потоци, езера, езера, блата, кладенци и др. Най-ефективното изследване на водата в имената на блатните огнища на туларемия през зимата. Пробите се вземат на засенчено място, на дълбочина 10-20 cm от повърхността на застояла или слабо течаща вода. От всеки пункт трябва да се вземат по 2 проби. Пробите се вземат в местообитанията на животните (близо до маси за хранене, дупки, колиби на бобри или ондатри). Използват се филтриране, центрофугиране, магнитни сорбенти и други методи за концентриране на патогена. За изследването се използва биологичен метод (на бяла мишка се инжектира подкожно до 1 ml, а на морско свинче - до 5 ml вода), молекулярно-генетични и имуносерологични методи, насочени към откриване на ДНК и антигени на причинителя на туларемия.

Възникна грешка

Плащането не е извършено поради техническа грешка, средства от вашата сметка
не са били отписани. Опитайте да изчакате няколко минути и повторете плащането отново.

Вивариумът е важна част от изследователски институти, лаборатории и други институции, където се извършват изследвания върху животни. Мазе или неподходящи помещения (навеси, пристройки и др.) с висока влажност и течения са напълно неподходящи за вивариум. Сградата на вивариум, както и разсадник за разплодни животни, трябва да се изгради на високо и сухо място, с прилежащ парцел. Вивариумът трябва да има достатъчно слънчева светлина, зоната в съседство с помещенията трябва да бъде защитена от вятъра. Територията на вивариума е оградена с глуха ограда; загражденията са разположени в непосредствена близост до основното помещение.

Сградата на вивариума се състои от основни помещения, в които се отглеждат лабораторни животни, и спомагателни. Всяка стая във вивариума трябва да съдържа животни от един и същи вид. По правило големите лабораторни животни (маймуни, кучета) се държат в различни помещения, а котките също се държат отделно. Малките животни (морски свинчета, плъхове, мишки) обикновено се поставят в една и съща стая. Кучетата и зайците могат да се отглеждат на открито, в клетки под навес или във волиери.

Важна и необходима част от вивариума са помощните помещения: кухня, стая за персонала, карантина, стая за изолация, пералня. Кухнята за приготвяне на храна е оборудвана с готварска печка и хладилник с топла и студена вода. Кухнята се намира в същата сграда на вивариума до килерите за храна. Помещението за обслужващ персонал е оборудвано с индивидуални шкафчета за съхранение на гащеризони и специални обувки. До него трябва да има душ кабина за персонала на вивариума. Всички животни, влизащи във вивариума, се прехвърлят в основния отдел само след карантина. Карантинното помещение трябва да е изолирано и да има всичко необходимо за грижата за животните. Заедно с това е необходимо наличието на изолатор за болни или съмнителни лабораторни животни, както и помещение за аутопсия. Осигурено е помещение за измиване, дезинфекция и сушене на клетки и друго оборудване на вивариума, както и гащеризони за служителите. Вивариумът трябва да разполага с инсинератор и баня за къпане на животни.

Съществена част от вивариума е клиниката за животни. Обикновено кучетата се настаняват в клиниката след операции; те са в него до излизане от тежко състояние след интервенцията. Клиниката е оборудвана със специални клетки или клетки от обичайния тип; трябва да има топла и студена вода, газ, аптечка с необходимите лекарства за кърмещи животни. В зависимост от естеството на изследването, клиниката е оборудвана със специални машини за фиксиране на животни.

Подовете на вивариума, особено основното отделение, трябва да са водонепроницаеми и с наклон към канализацията. Подовете са покрити с пластмаса, метлах, бетонирани или в краен случай асфалтирани. Стените на височина 2 m от пода са покрити с гланцирани плочки, пластмаса или боядисани с блажна боя. Канализационната система трябва да има широки дренажи за избягване на запушване, покрити с метална решетка. Отпадъчните води трябва да бъдат неутрализирани преди да попаднат в обществената канализация.

В помещенията на вивариума, в допълнение към естествената вентилация (прозорци, фрамуги, отварящи се прозорци), се организира захранваща и изпускателна вентилация с многократен обмен на въздух. Отоплението на вивариума трябва да бъде централно, необходимо е да се предотврати появата на влага и да се поддържа температура в рамките на 12-18 °.

В зависимост от профила на изследователската институция (експериментална хирургия, нормална и патологична физиология, микробиология, токсикология и др.), При планиране на вивариум трябва да се предвидят необходимите специални допълнителни помещения. В някои случаи се разпределят изолирани помещения за съхраняване на лабораторни животни, заразени с култури от патогени на особено опасни инфекции и радиоактивни вещества, с операционна зала във всяка от тези стаи. Всяка стая трябва да разполага с хладилник и необходимото оборудване за заразяване на животни и дисекция на трупове.

Вивариумът трябва да се управлява от специалист по животновъдство, обучен в отглеждането на лабораторни животни.

кучета. Когато кучетата са затворени в основната част на вивариума, не трябва да има струпване, тъй като това създава неблагоприятни санитарни и епидемиологични условия с опасност от бързо разпространение на инфекцията в голяма група животни. Кучетата са най-добре поставени в отделни малки стаи с устройство във всяка от тях 5-6 клетки.

При необходимост от събиране на урина кучетата се поставят в т. нар. обменни клетки, чийто под е направен от мрежа и подвижна тава с дренаж.

Кучета с тих лай. Тъй като поддържането на голям брой кучета е свързано с определени трудности поради шума, който създават лаещи животни, в някои случаи те прибягват до лигиране на възвратните нерви на шията от двете страни, в резултат на което гласните струни са денервирани и кучетата губят способността да лаят.

Оперативна техника. Животните се оперират под анестезия с морфин с добавяне на локална анестезия (0,5 или 0,25% разтвор на новокаин) или под етерна анестезия. Разрез на кожата с дължина 8-10 см се извършва по средната линия на шията от долния ръб на щитовидния хрущял надолу. Дисектирайте фасцията заедно с кожния мускул на шията. Двата стернохиоидни мускула са тъпо разделени, левият мускул е избутан навън (фиг. 1). Разтвор на новокаин се инжектира в тъканта между левия стернохиоиден мускул и трахеята. Повтарящият се клон на блуждаещия нерв преминава в тясна междина между трахеята и хранопровода и е в непосредствена близост до задната странична повърхност на трахеята. Нервът се открива в тъканта на нивото на 6-10-ти трахеален пръстен, вкарва се в раната с тъпа кука и се пресича или резецира на 1 см. Куките се отстраняват и левият стернохиоиден мускул се поставя на място. По същия начин се пресича рецидивиращият клон на блуждаещия нерв отдясно. Трябва да се има предвид, че на нивото на горните трахеални пръстени рецидивиращият клон на блуждаещия нерв е разделен на крайни клонове и придобива свободен тип. По време на операцията не е възможно да се пресекат всички малки нервни разклонения и операцията може да не даде желания резултат.

При кучета след пресичане на рецидивиращите нерви се наблюдава дихателна недостатъчност, което ги прави неподходящи за сложни експериментални операции (L. M. Nagibin et al., 1967; N. A. Super et al., 1967).

котки. Отглеждането на котки във вивариум е трудно, защото те не понасят клетки. За котките те отделят специална стая, където имат свобода на движение. При тези условия те могат да живеят във вивариум дълго време. Стаята трябва да е светла, топла, добре проветрена, с рафтове, на които котките да седят. На пода на стаята е подредена тоалетна, която е кутия, пълна със сух пясък, торф, дървени стърготини. Чекмеджето трябва да се почиства често, миризмата в стаята може да се премахне с калиев перманганат.

Зайци и малки лабораторни животни. Животните се държат в клетки, поставени върху стелажи, монтирани под формата на батерии, или в комплекти клетки, разположени на колела. Клетките са монтирани на стелажи на разстояние 30-50 см от стените, долният ред клетки трябва да бъде разположен на 50-70 см от пода. Между стелажите се оставя проход от най-малко 1 м. Подовете на клетките на стелажите или батериите са изолирани един от друг с водоустойчив материал, който изключва навлизането на екскременти в клетките, разположени отдолу.

В зависимост от вида на животното се препоръчват следните размери на клетките (V.N. Ivanov, 1967): за мишки (10-20 животни) - 200X300X150 mm, за плъхове (10-15 животни) - 334X450X200 mm, за морски свинчета (5- 10 животни) - 486X450X200 мм, за зайци (1-2 в зависимост от възрастта и породата) - 486X450X300 мм.

Клетките са направени от различни материали: калай, тел, стомана,
шперплат, пластмаса и др. Те трябва да са издръжливи и икономични, лесни за почистване, устойчиви на дезинфектанти и термична обработка. Клетките от неръждаема стомана са най-подходящи за работа с радиоактивни изотопи.

Ориз. 1. Операция за изолиране и прерязване на клоните на рецидивиращите нерви за създаване на тих лай при кучета.
1-ляв лоб на щитовидната жлеза; 2 - възрастов клон на блуждаещия нерв; 3 - ляв стернохиоиден мускул (начертан с кука); 4 - хранопровода; 5-трахея.

Стаята, в която се намират клетките с животни, трябва да бъде добре проветрена, относителната влажност на въздуха трябва да бъде в рамките на 40-45%. Дори при наличие на захранваща и смукателна вентилация, за да се намали съдържанието на амоняк и животински отпадъци във въздуха, се препоръчва използването на торфена постеля или дървени стърготини с добавяне на суперфосфат. Процесът на събиране на клетки може да бъде автоматизиран; почистването се извършва 1-2 пъти на ден.

На предната стена на клетката са монтирани хранилка, автопоилка и е окачена табела, на която се въвеждат основните данни за животното, вида на оперативната интервенция и др.

Зайците и морските свинчета често се отглеждат извън вивариума. За това се използват клетки, които се поставят на няколко нива под общ покрив. Отглеждането на открито допринася за отглеждането на здрави, по-устойчиви на различни болести зайци и е най-често срещано в разсадниците.

Тема 4. Използване на лабораторни животни в диагностични изследвания. Цели на използването на лабораторни животни във вирусологията

Задача за следващия урок

Обобщаване на урока

Задачи

1. Намерете под светлинен микроскоп в препаратите и нарисувайте:

а) цитоплазмени включващи телца;

б) интрануклеарни тела на включване;

в) вириони на вируса на едра шарка, оцветени по Морозов.

2. Запознайте се с устройството и принципа на действие на електронния микроскоп.

3. Декодирайте електронни микроснимки на вириони на различни вируси (дайте техния схематичен чертеж).

Самостоятелна работа на учениците

Учениците се запознават с устройството на светлинни, луминесцентни и електронни микроскопи (в лабораторията), чертаят схема на устройството на електронен микроскоп. Запознайте се с подготовката на препарати за електронна микроскопия. Вижте готовия продукт във флуоресцентен микроскоп. Начертайте диаграма на директния и индиректния RIF метод.

Тестови въпроси:

1. Устройството на електронния микроскоп.

2. Методи за подготовка на препарати за гледане в електронен микроскоп.

3. Флуоресцентна микроскопия (RIF) директни и индиректни методи.

4. Значение на електронната и луминесцентната микроскопия във вирусологичните изследвания.

Цел на урока:запознаване на студентите с изискванията към видовете лабораторни животни, тяхната карантина, поддържане, хранене, етикетиране.

Оборудване и материали:набор от инструменти в стерилизатора (ножици, игли, спринцовки, пинсети, клещи), лабораторни животни, спиртни памучни тампони за етикетиране на бои, етер, ксилен, мултимедийно оборудване, постери и презентации MS Office PowerPointпо темата на урока.

Обяснение на учителя:Повечето вируси от различни таксономични групи могат да бъдат разграничени един от друг на базата на патогенност за лабораторни животни от различни видове или възрасти.

4.1 Видове лабораторни животни.Най-широко използвани във вирусологичните лаборатории са мишки, бели плъхове, зайци, морски свинчета, хамстери и пилета. В млади мишки експериментално се възпроизвеждат грипни, алфа и флавивирусни инфекции, шап (при новородени мишки) и др.. Те са податливи на много вируси, лесни за отглеждане и удобни за работа. По-добре е да използвате мишки от инбредни линии, тъй като те реагират почти еднакво на определен вирус. Плъховете също създават инбредни линии, но тези животни са по-устойчиви на определени вирусни инфекции от мишките. Онкогенността на някои вируси е широко изследвана при златни хамстери. За вирусологични опити обикновено се използват гладкокосмести морски свинчета с тегло 250-300 g.

Инфекцията понякога се изследва при животни от няколко вида с различна чувствителност към даден вирус, което прави възможно разграничаването на вируси, които причиняват клинично подобни симптоми на заболяването (например шап, везикулозен стоматит, везикулозен екзантем и везикулозен болест по свинете).

Според генетичните качества лабораторните животни се делят на четири групи:

1) животни от смесен произход, получени от различни развъдници, такива животни са хетерогенни;

2) животни, получени директно от същия източник, но тези животни са генетично променливи;

3) инбредни линии животни. Те се получават чрез чифтосване на брат със сестра или родители с деца от поне 20 поколения. С този метод на размножаване се постига все по-висока степен на хомозиготност.

4) хомогенни хибриди F 1 . Високата степен на хетерозиготност, характерна за всеки хибрид, се свързва тук с генетична еднородност, която съответства на степента на хомозиготност на родителските линии. Като правило, еднаквите F 1 хибриди са по-малко променливи от двете родителски линии. Животните-мутанти имат отделно изразен наследствен фактор, който предизвиква видимо отклонение от нормалната форма.

Отрицателната страна на изолирането на вируса при лабораторни животни е възможността за диагностични грешки поради активирането на латентния вирусоносител. В този случай развитието на симптомите на заболяването след въвеждането на материала не е следствие от действието на въведения вирус, а резултат от самата процедура, която нарушава предишния баланс в организма. По това време се появява вирус или друг инфекциозен агент, който продължава да съществува в тялото дълго време. Това се изразява с остри неврологични симптоми (завои по дългата ос на тялото).

Наличието на латентна вирусна инфекция може да се изрази и чрез намаляване или изчезване на чувствителността на животните към изследвания вирус поради феномена на интерференция. Възможен е и обратният ефект, а именно явлението синергизъм в действието на вирусите, което понякога дава резултати, които трудно могат да бъдат правилно интерпретирани.

За някои вирусологични работи, например при изолиране на вирус с неизвестни патогенни свойства, е необходимо да се използват гнотобиоти. Терминът "гнотобиоти" обединява две категории животни: немикробни (стерилни), несъдържащи жизнеспособни микроби, и гнотофори - носители на един (моногнотофори), два (дигнотофори) или повече (полигнотофори) микроорганизми. Понастоящем животните без микроби са разделени на три групи според динамиката на растеж: I - маймуни, прасенца, пилета растат по-добре от обикновените животни или наравно с тях; II - плъхове, мишки, кучета, котки растат наравно с обикновените животни; III - морските свинчета, зайците, яретата, агнетата растат по-зле от обикновените животни.

Стерилни птици се получават чрез инкубация на яйца със стерилна черупка в стерилен инкубатор, лабораторни животни - чрез цезарово сечение или хистеректомия. Дръжте животните в стерилни изолационни помещения. Въздухът, водата и храната трябва да са стерилни.

От особено значение сред гнотобиотите са SPF животните (Specific pathogen free), които са свободни само от патогенни микроорганизми. В тялото им има всички необходими за нормален живот бактерии и вируси, които заедно създават група от така наречената резидентна (полезна) микрофлора. В момента са получени лабораторни SPF животни - плъхове, морски свинчета, зайци, прасенца, птици и др.

4.2 Цели на използването на лабораторни животни.Понастоящем лабораторните животни се използват във вирусологията за:

- откриване на вируса в патологичния материал;

- първично изолиране на вируса от патологичния материал;

- натрупване на вирусна маса;

– поддържане на вируса в лабораторията в активно състояние;

– титруване на вируса;

- получаване на хиперимунни серуми;

– като тестов обект в реакцията на неутрализация.

Във вирусологията се използват зайци, морски свинчета, бели плъхове, бели мишки, златни хамстери. Въпреки това, само някои вируси могат да бъдат култивирани в животни от тези видове. В много случаи други животни, чувствителни към този вирус, се използват за същите цели: пилета, гълъби, котенца, кученца и т.н. По този начин биотестът при диагностицирането на птича шарка се поставя върху пилета, шарка по овце - върху овце, чума по свинете - навици.

4.3 Изисквания към лабораторните животни.При попълване на групи животни за вирусологични изследвания трябва да бъдат изпълнени следните изисквания:

- животното трябва да е податливо на този вирус;

– възрастта му е от голямо значение за култивирането на много вируси. Повечето вируси се размножават по-добре в тялото на млади и дори новородени животни. Например мишките кърмачки се използват за биотестове за бяс и шап, а пилетата се използват за ларинготрахеит при птиците. Но в същото време инфекцията на възрастни зайци с вируса на болестта на Ауески води до появата на ярки и специфични клинични признаци на заболяването;

- стандартна чувствителност се постига чрез подбор на животни на определена възраст и еднакво тегло;

– лабораторните животни трябва да са здрави. Животните, влизащи във вивариума на вирусологичната лаборатория, трябва да бъдат донесени от ферма, свободна от заразни болести. Те се държат изолирано, т.е. под карантина (бели мишки и плъхове 14 дни, а други животни 21 дни). През този период животните се наблюдават ежедневно. При съмнение за инфекциозно заболяване животните се подлагат на лабораторни изследвания. При установяване на инфекциозно заболяване сред животните, цялата постъпила партида се унищожава.

4.4 Поддържане на лабораторни животни.Вивариумът за лабораторни животни трябва да има основно помещение за животни, перално помещение (с бокс, съоръжения за сушене и стерилизация), кухня за приготвяне на храна с поне една маса, оборудвана за приготвяне на храна и хладилник за нетрайни продукти, килер, операционна зала, гардеробна и санитарни помещения за персонала. Помещенията трябва да са чисти. Стените и подовете са лесни за дезинфекция. Запасите от храна трябва да се съхраняват в специални помещения. В местата, където се отглеждат опитни животни, е желателно да има влагомер и термометър.

Мишки, плъхове, хамстери и морски свинчета по време на експеримента се препоръчва да се държат в стъклени буркани с капак от телена мрежа или перфорирана ламарина. Това улеснява наблюдението им, а бурканите се почистват и дезинфекцират лесно. Можете да отглеждате животни в метални клетки, които също лесно се дезинфекцират.

Като постеля се използват материали, които абсорбират влагата и могат да се използват от животни за изграждане на гнездо: стърготини за мишки, плъхове, хамстери, морски свинчета, порове, пилета; дървени стърготини за големи мишки, плъхове, хамстери, порове, пилета; слама за хамстери, морски свинчета, зайци, кучета, пилета; плява за мишки, плъхове; сено за мишки, плъхове, хамстери, порове, пилета; пилешки пясък. Трябва да се използва спално бельо, което генерира възможно най-малко прах, тъй като последният може да доведе до респираторни заболявания. Всички постелки трябва да бъдат предварително стерилизирани при 100°C за 30 минути.

Стаите за лабораторни животни се дезинфекцират периодично, особено преди поставянето на нова партида животни. Това важи и за предмети за грижа за животните (лопати, стъргалки, метли и др.), които влизат в контакт с тор и различни отпадъци от помещенията. След края на всеки опит клетките трябва да се третират с дезинфекционни разтвори, което трябва да бъде предшествано от почистване както на клетките, така и на помещението.

Съдовете за храна и вода се навлажняват ежедневно с дезинфекционен разтвор, след което се измиват и изплакват с чиста вода. Помещенията се третират с 1% разтвор на натриев хидроксид, който се използва през деня. Dezkovriki импрегнирани с пресен разтвор на всеки 2 дни. За дезинфекция на предмети за грижа, измиване на подове и съдове се препоръчва използването на 3% разтвор на хлорамин, който трябва да се приложи в рамките на 2 часа.Във вивариума е необходимо да се унищожат вредители: мухи, комари, бълхи, холка, кърлежи, въшки, мравки, мишки, плъхове.

Лабораторните животни се поставят по такъв начин, че от една страна да се осигури функционирането на всички системи на тялото в рамките на физиологичната норма, от друга страна, да се изключи взаимното повторно заразяване и разпространението на инфекция извън вивариума. Животните се държат във вивариум, като се вземат предвид техните физиологични нужди от светлина и температура. Така мишките, плъховете се нуждаят от здрач и температура на въздуха около 20 ° C, морските свинчета, зайците и пилетата се нуждаят от дневна светлина и температури в диапазона от 16–23, 14–18 и не по-ниски от 0 ° C, съответно. Плътността на отглеждане трябва да бъде приблизително 1 g от масата на лабораторните животни на 1 cm 2 от дъното на клетката. На животните се осигурява редовно и пълноценно хранене и постоянна вода за пиене.

Ако има само един вивариум, заразените животни се държат изолирано от здравите, като почистването и храненето започват от последните. За грижата за заразените животни се използва отделно оборудване и хранилки. По-добре е да има два вивариума: за поддържане на здрави и заразени животни.

При работа във вивариума служителите използват гащеризони: халат, гумени ръкавици, престилка, водоустойчиви обувки. Във вивариума инвентарът се дезинфекцира ежедневно и се извършва мокро почистване с дезинфектанти. В края на експеримента клетките се дезинфекцират, умрелите животни се неутрализират чрез изгаряне в пещи или чрез автоклавиране.

В опитната група се избират животни с еднакво тегло, температура, кръвен състав и пр. От това до голяма степен зависи успехът на изолирането, титруването и пасажирането на вируса. Това отчита чувствителността на животните към различни вируси. Избраните животни се етикетират, разпределят се в буркани или клетки, отбелязва се датата на опита, неговият номер, заразяващата или профилактичната доза на лекарството и при необходимост как са етикетирани животните. Последното е важно, когато животни от няколко групи са в един буркан или клетка.

маса 1

Тегло на животни на различна възраст

РД-АПК 3.10.07.02-09

МИНИСТЕРСТВО НА ЗЕМЕДЕЛИЕТО
РУСКА ФЕДЕРАЦИЯ

Москва 2009 г

Разработено от: д.ф.н. с.-х. Науки, изкуство. научен сътрудник П.Н. Виноградов, д.ф.н. техн. науки S.S. Шевченко, О.Л. Седов, Е.С. Гарафутдинова, М.Ф. Malygin (SPC "Giproniselkhoz"); д-р вет. науки, проф. В.Г. Тюрин (GNU VNIIVSGE)

ВЪВЕДЕ: СПЦ "Гипрониселхоз".

ОДОБРЕНО И ВЪВЕДЕНО В ДЕЙСТВИЕ: Заместник-министърът на земеделието на Руската федерация A.I. Беляев 1 декември 2009 г

ПРОЕКТИРАН ЗА ПЪРВИ ПЪТ.

Дата на въвеждане 15.12.2009г

1. Общи положения

1.1. Настоящите указания се прилагат за всички изследователски организации и образователни институции на агропромишления комплекс на Русия, независимо от тяхната организационна и правна форма, използващи лабораторни (опитни, опитни) животни в работата си.

В съответствие с Федералния закон „За техническото регулиране“ (приет от Държавната дума на 15 декември 2002 г. и одобрен от Съвета на федерацията на 18 декември 2002 г.), до приемането на съответните разпоредби, техническите разпоредби в областта на вземането ветеринарно-санитарните мерки се извършват в съответствие със Закона на Руската федерация „ За ветеринарната медицина (одобрен на 14 май 1993 г., № 4979-1).

1.2. Указанията се отнасят както за новопроектирани помещения за отглеждане и работа с лабораторни животни - експериментални биологични клиники, вивариуми и др., така и за съществуващи и реконструирани.

1.3. Обектите за отглеждане и работа с лабораторни животни са научни помощни звена на изследователски организации, образователни институции и са създадени за отглеждане и, ако е необходимо, отглеждане на лабораторни животни, използвани в експериментална работа и изследвания. В тези съоръжения може да се извършва и самостоятелно разработване на отделни научни проблеми.

1.4. Стандартите и изискванията, определени в тези указания за проектиране, изграждане и експлоатация на съоръжения за отглеждане на лабораторни животни, са насочени към осигуряване на безопасността на персонала, работещ с животни, и населението като цяло от появата на антропозаонози и други заболявания.

1.5. Разработването, съгласуването, одобряването и съставянето на проектна документация за изграждане на съоръжения за отглеждане на лабораторни животни се извършват в съответствие с изискванията на SNiP 11.01-2003.

1.6. Обектът за отглеждане на лабораторни животни (наричан по-долу вивариум) се намира в отделна сграда (комплекс от сгради) или на горните етажи на лабораторни сгради на ветеринарни държавни научни институции, както и на територията на учебни заведения.

1.7. Вивариумите трябва да бъдат снабдени с качествена питейна вода, включително топла вода, електричество, оборудвани с канализация (тръби с диаметър най-малко 100 mm), захранваща и смукателна вентилация, отопление, охранителна и противопожарна аларма и да имат удобни пътища за достъп.

1.8. Разстоянието между отделна сграда на вивариума и съоръженията на изследователските институции, които включват този вивариум, трябва да бъде най-малкото разстоянието на противопожарните прекъсвания, установено от действащите правила за пожарна безопасност в Руската федерация.

1.9. Отделни сгради на вивариуми трябва да бъдат оградени с глуха ограда и отделени от жилищната зона със санитарно-охранителна зона. Територията трябва да бъде озеленена.

Размерите на санитарно-защитната зона се определят от изискванията на SaNPiN 2.2.1 / 2.1.1.1200-03.

1.10. Размерите на санитарно-охранителната зона за вивариуми, разположени в отделни административни, промишлени сгради и с изолиран изход, се съгласуват във всеки конкретен случай с органите за държавен санитарен и ветеринарен надзор.

2. Състав, взаимно разположение и площни норми на помещенията на вивариума

2.1. Всеки вивариум трябва да включва помещения, проектирани в съответствие с действащите строителни норми и правила в съответствие с действащите ветеринарно-санитарни изисквания и зоохигиенни норми, включително:

стая за персонал с индивидуални шкафчета за гащеризони;

помещения за приемане и карантиниране на новопостъпили във вивариума животни;

изолатор;

помещения за отглеждане на опитни животни (отделни за всеки вид) или (съгласувано с органите за държавен ветеринарен и санитарен надзор) разделени на секции според видовете животни;

стерилизационна стая или бокс за изследователи за работа с незаразени животни, с помещение за дисекция на животни и хладилник за временно съхранение на трупове;

изолирани помещения за отглеждане на опитни животни, заразени с култури от патогени на особено опасни инфекции или радиоактивни вещества (отделно) с операционна зала във всяка изолирана стая с хладилник и необходимото оборудване за заразяване и дисекция на животни;

хранителна кухня за приготвяне на храна (трябва да бъде оборудвана с печка и хладилник);

дезинфекционно-миечно отделение за измиване с топла вода, дезинфекция и изсушаване на клетки и друго оборудване;

склад за чист (обеззаразен) резервен инвентар: клетки, поилки и др.;

санитарен възел (душ и тоалетна);

помещение, оборудвано с пещ за изгаряне на животински трупове;

общ хладилен склад за съхраняване на животински трупове;

склад за фураж;

склад за отпадъци;

в отделно помещение или в самостоятелна сграда - технически възел за климатични, вентилационни, електрически и други специални инсталации.

2.2. Всеки вивариум трябва да има помещение за приемане на пристигащите животни. Във вивариумите, където се отглеждат малки гризачи, пред приемното отделение се монтира изолиран вестибюл, в който влиза и разтоварва кола с пристигнали животни.

Когато вивариумът е разположен на горните етажи на лабораторните сгради, приемната и изолираният вестибюл са разположени на първия етаж на лабораторния корпус и са свързани с вивариума чрез асансьор, който се използва само за повдигане на лабораторни животни.

2.3. Приемната е помещение от 12,5 - 18 м2 с естествено и изкуствено осветление в съответствие с изискванията.

Височината на всички помещения на вивариума е 3 - 3,5 m.

2.4. Карантинното помещение се състои от няколко изолирани помещения с площ от 12,5 - 18 m2 и е изолирано от помещенията, в които се намират животни, преминали карантина и идващи за опити.

2.5. Към карантинните помещения има изолатор за болни животни и животни със съмнение за заболяване. Площите на изолаторите са подобни на тези на карантинните помещения.

2.6. Помещенията, предназначени за отглеждане на опитни животни, могат да водят до един общ коридор или да са разположени между два коридора и да имат изходи към всеки от тях. При еднокоридорно оформление "мръсните" и "чистите" услуги са разположени в различни краища на коридора.

При двукоридорна система, фуражи, карантинирани животни пристигат по един коридор („чисти“), служителите влизат в чисти гащеризони и сменяеми обувки, преди да започнат работа с животни. В друг („мръсен“) коридор се отстраняват неизядени фуражи и тор, изнасят се трупове на животни, служителите излизат след работа с животни.

При невъзможност за изолиране на "мръсни" и "чисти" потоци се допуска използването на едно и също помещение за една или друга цел, при условие че то се дезинфекцира всеки път след преминаване на "мръсния" поток през него.

2.7. Площта на помещенията за отглеждане на определени видове опитни животни е 12,5 - 18 m2; площта на помещенията за отглеждане на опитни животни, разделени на секции, се определя чрез изчисление.

2.8. Площта на помещението за стерилизация или кутията за работа на изследователи с незаразени животни се определя чрез изчисление въз основа на спецификата на предложената работа.

2.9. Площите на изолирани помещения за работа с опитни животни, заразени с патогени на особено опасни инфекции, и за работа с опитни животни, заразени с радиоактивни вещества, както и площите на операционните зали във всяка изолирана стая се определят чрез изчисление въз основа на състояние на технологичното и специално оборудване, използвано за извършване на необходимите манипулации.

2.10. Общата площ на помещенията, заети от хранителната кухня, отделението за дезинфекция и миене и съхранението на чисто резервно оборудване, трябва да бъде приблизително 50% от общата площ на помещенията, заети от животни (в големи вивариуми този процент може бъде леко намален).

Фуражната кухня се състои от две съседни помещения, предназначени за обработка и приготвяне на фуражи. Всяка стая трябва да има достъп до коридора.

Отделението за дезинфекция и измиване (едно или няколко) се състои от две помещения, свързани с проходен автоклав или проходна камера за суха топлина.

Устройството на отделението за дезинфекция и измиване трябва да осигурява различна последователност на работата му:

при наличие на заразен материал - предварителна стерилизация на инвентара и спалното бельо с последващо механично почистване на последното в друга стая;

стерилизация след механично почистване на клетките и инвентара, когато няма опасност от замърсен материал.

Независимо от местоположението на вивариума (в отделна сграда или на последния етаж на лабораторната сграда), отделението за дезинфекция и измиване трябва да бъде снабдено с улей за боклук за отстраняване на мръсна постелка и механизирано повдигане на материали и оборудване.

Складът за чист инвентар и оборудване се намира до отделението за дезинфекция и миене.

2.11. За съхранение на постелки (стърготини, дървени стърготини, торф и др.) Се разпределят две помещения: едната за стерилизирани и опаковани в контейнери, използвани от този вивариум, другата за съхранение на новозакупени постелки.

2.12. При проектирането на помещенията на вивариума е необходимо да се осигури максимална изолация:

всички негови помещения от други подразделения, които са част от изследователската институция;

помещения на изолатора и карантина от други помещения на вивариума;

между хранителната кухня, помещенията за животни и отделението за дезинфекция и миене.

2.13. Във всеки случай площта, заета от фуражната кухня, отделението за дезинфекция и миене и склада за чист резервен инвентар, се определя в зависимост от използваното оборудване, степента на механизация на производствените процеси и видовете фуражи за опитни животни.

Размерите на площите на горните помещения са посочени в заданието за проектиране.

3. Ветеринарно-санитарни и технологични изисквания за строителни решения за вивариумни помещения и инженерно оборудване

Осветителните тела и осветителните тела от затворен тип трябва да бъдат достъпни за мокро почистване.

3.5. Помещенията на вивариума, в които се държат лабораторни животни, са оборудвани с принудителна система за захранване и изпускателна вентилация, която осигурява честотата на обмен на въздух и условията на температура и влажност в съответствие с данните, дадени в табл. .

Животински видове	Температура, °С		Относителна влажност, %		Максимално допустима концентрация във въздуха
	флуктуации		флуктуации		амоняк, mg/l	въглероден диоксид по обем, %
морски свинчета

3.6. Режимът на температура и влажност в другите помещения на вивариума трябва да се осигури в съответствие с данните, дадени в табл. .

стая	Температура в студения и преходен период на годината, ° С	Скорост на обмен на въздух (обеми на час)
1. За персонала
2. За приемане на животни
3. За изследване
4. Измиване-стерилизиране
5. За евтаназия (евтаназия)
6. Отваряне
7. Рециклиране		По изчисление
	Според нормите на технологичния дизайн за съответния вид животни, животни, птици
Бележки. 1 Относителната влажност на въздуха в производствените помещения, посочени в параграфи 1 и 3, не трябва да надвишава 75%, в параграфи 2, 4 - 7 - 80% и не по-малко от 30%. Относителната влажност на въздуха в помещенията за отглеждане на селскостопански животни се определя от съответните стандарти (ръководства) на технологичния дизайн. 2 Температурата на въздуха на закрито в промишлени помещения, с изключение на помещенията за отглеждане на животни, през топлия сезон (при температура на външния въздух от 10 ° C и повече) трябва да бъде не повече от 3 ° C по-висока от средната външна температура температура в 13:00 на най-горещия месец.

3.7. През топлия период на годината в помещенията трябва да се осигури естествено поемане на външен въздух през отварящи се прозорци.

3.8. Помещенията, изброени в параграфа, трябва да бъдат оборудвани с канализация, да имат топла и студена вода.

3.9. Вивариумите трябва да бъдат оборудвани с локална канализационна система, която включва всички етапи на механично и биологично третиране, поради потенциалната опасност от рециклируеми отпадъци, генерирани по време на експлоатацията на вивариума.

3.10. Канализационните системи трябва да бъдат проектирани разделени за промишлени, битови и дъждовни канали.

Количеството и характеристиките на промишлените отпадъчни води от измиване и дезинфекция на технологично оборудване (клетки и инвентар) и ограждащи конструкции (подове и стени) се приемат съгласно технологичната част на проекта. Количеството битови отпадъчни води трябва да се вземе в съответствие със SNiP 2.04.01-85 *.

3.11. За отстраняване и събиране на отпадъчни води след измиване и дезинфекция на технологично оборудване и подове е необходимо да се предвиди монтирането на тави, покрити с подвижни перфорирани плочи и стълби. Наклонът на корите трябва да бъде най-малко 0,02.

3.12. При проектирането на локалната канализационна система на вивариумите трябва да се спазват следните изисквания:

отпадъчните води от помещенията за изгаряне на трупове се стерилизират в манжу с жива пара при температура 120 ° C за 30 минути или в пароструйна инсталация при температура 110 ° C за 10 минути; при наличие на особено опасни инфекции, отпадъчните води се стерилизират при 140 ° и 130 ° C съответно за 20 и 60 минути;

промишлени и битови отпадъчни води от измиване на подове и технологично оборудване за измиване и дезинфекция трябва да се събират в специален приемник и да се дезинфекцират с препарати, съдържащи хлор, преди да се изхвърлят в канализацията;

дъждовните канали от територията на свободно стоящи вивариуми, които са неблагоприятни във ветеринарно-санитарно отношение, подлежат на дезинфекция с химикали;

получената механична и биологична утайка от отпадъчни води се изгаря.

3.13. Основните канали за захранване и смукателна вентилация, захранващи, водоснабдителни и канализационни тръби трябва да бъдат разположени в специални ниши в коридорите и да имат свободен достъп за проверка и ремонт.

3.14. Изолираните помещения за отглеждане на опитни животни, заразени с култури от патогени на особено опасни инфекции или радиоактивни вещества, и изолационното помещение са оборудвани с локални вентилационни системи с филтри, които осигуряват 100% пречистване и дезинфекция на изпускания въздух. Вентилационната система трябва да осигурява в тези помещения намалено (с 3-5 mm Hg) атмосферно налягане в сравнение с други помещения на вивариума. Проветряването в тези помещения чрез отваряне на прозорци е забранено.

4. Оборудване на вивариума и условия за настаняване на животните

4.1. Мишки, плъхове, хамстери, морски свинчета и зайци се настаняват в клетки, монтирани на метални стелажи.

4.2. Стенните или други стелажи трябва да бъдат с подвижни скоби и подвижни рафтове, което позволява да се превърнат в клетки с различни размери с различни видове лабораторни животни.

4.3. За да се изчисли производствената площ, е необходимо да се изхожда от следните стандарти за поставяне на животни в клетки (таблица).

Животински видове	Минимална площ на дъното на клетката на животно, cm2	Брой животни
		максимално допустимо в клетка	на 1 м2 площ
			65 възрастни или 240 млади животни
			20 възрастни или 100 млади животни
морски свинчета

Бележки.

1. За приблизително определяне на производствената площ трябва да се изхожда от изчислението, че 1 g тегло на животното трябва да се пада на 1 cm2 от площта на дъното на клетката.

2. Стелажите са разположени главно покрай стените и трябва да заемат приблизително 40% от производствената площ.

4.4. Кучетата се настаняват в отделни кабини (боксове) строго индивидуално. Размерите на кутията трябва да съответстват на дължината и височината на животните.

Размерът на кутията за големи кучета с тегло над 22,5 kg - 1,2 × 1,8 m = 2,2 m2, за средни кучета с тегло 16 - 22,5 kg - 1,2 × 1,5 m = 1,8 m2, малки с тегло 4,5 - 16 kg - 0,9 × 1,2 m = 1,1 м2. Разстоянието между прътите е 4,5 - 5,5 см, диаметърът на металните пръти е 0,5 - 0,6 см. Страничните стени са твърди. На долната стена (под) се полагат дървени щитове.

Хранене и поене - в бокс. Загражденията за разходка са индивидуални, в размер на до 2 m2 на животно. Време за ходене - поне 2 пъти на ден, продължителност - минимум 20 минути. Трябва да се осигури разделно отглеждане на мъжки от женски, кученца и агресивни животни.

4.5. На територията на вивариума за кучета се изграждат специални помещения, оборудвани с кабини. Към кабините са прикрепени заграждения (пешеходки). Всяко куче трябва да има собствено заграждение.

Размери на кабината, m: дължина - 2; ширина - 1,5; височината на предната стена - 2,5 и задната - 1,5 - 2; височина на вратата на кабината - 1,7, ширина - 0,7. Над вратата на кабината е монтирана остъклена рамка. В долната част на вратата, монтирана в задната стена на кабината, която е предната стена на заграждението, се прави отвор в заграждението с размери 40 × 50 см, който се окачва с дебел плат за зимна защита от студ.

Размери на корпуса, m: дължина - 3, ширина - 2, височина - 2,2. В предната му стена е направена врата с размери 1,8 × 0,7 m.

4.6. Котките се настаняват в заграждения по пет глави, където са предвидени етажерки (легла), достатъчно площ за настаняване на всички животни. Площта на заграждението за една котка е 0,5 m2. Пред входа на волиерата е оборудван мрежест вестибюл.

4.7. Ако селскостопански животни и птици се поставят във вивариуми за научни цели, помещенията за тях се изграждат в съответствие с действащите стандарти за технологично проектиране в съответствие с зоохигиенните стандарти, посочени в тези стандарти.

5. Допускане на животни във вивариума

5.1. Попълването на вивариума с животни и птици се извършва от специализирани разсадници, които са свободни от инфекциозни заболявания.

Закупуването на животни и птици в други организации и лица е разрешено, ако не е възможно да бъдат закупени в разсадници и ако всяка покупка има ветеринарен сертификат за благосъстоянието на организацията (ферма, частно лице) за инфекциозни заболявания.

5.2. Животните се приемат във вивариума с ветеринарномедицинско свидетелство или придружаващи документи от разсадника.

5.3. Животните, получени от разсадника, се поставят в изолирани отделения за период от три дни, за да се адаптират към новите условия. Последващите периоди на изолация или карантина за тези животни се определят в зависимост от условията на отглеждане на животните, естеството на предстоящите опити, разстоянието, условията на транспортиране и др.

5.4. За животни, които не са получени от разсадници, се установяват следните условия на тяхната карантина:

за мишки и плъхове - 14 дни, морски свинчета и зайци - 21, кучета и котки - 30, за други животни и птици - 21 дни.

В някои случаи, когато в опитите се използват бременни женски, новородени и млади животни, както и при краткосрочни опити, продължителността на карантината може да бъде намалена, ако тези животни се поставят в изолирани помещения и под подходящ надзор.

5.5. По време на карантинния период животните подлежат на ежедневно клинично наблюдение: термометрия и регистриране на общото състояние на животните в специален дневник.

5.6. В карантинните и опитните секции животните се поставят в чисти, предварително дезинфекцирани (обработени в автоклав) клетки.

5.7. Грижите за животните в карантинната сграда се извършват от персонала, назначен в тези помещения.

5.8. Забранява се изнасянето на храни, гащеризони и оборудване от карантинните помещения в други помещения и секции за опитни животни.

5.9. По време на карантинния период се извършва периодична смяна на клетките. В края на карантината освободените клетки и инвентар се прехвърлят в отделението за дезинфекция и миене.

Почистването и измиването на клетки и друго оборудване от карантинните секции може да се извършва в отдела за обща дезинфекция и миене на вивариума само след предварителна дезинфекция. Отпадъците също трябва да бъдат обеззаразени или изгорени. Методите за дезинфекция, дезинсекция и режим на автоклавиране се определят във всеки отделен случай в зависимост от спецификата на институцията.

5.10. По време на периода на адаптация или карантина животните със съмнение за инфекциозни заболявания се подлагат на бактериологично изследване. При потвърждаване на инфекциозно заболяване мишки, плъхове, хамстери, морски свинчета и зайци от цялата постъпваща партида се унищожават, а за кучета, котки и други животни карантинният срок се удължава в зависимост от установеното заболяване.

5.11. Карантинните помещения след всяка партида животни, прехвърлени за експеримент, и след всеки случай на откриване на инфекциозни заболявания се дезинфекцират старателно.

5.12. В случай на масови заболявания сред животни, наблюдавани в карантина, или ако по време на експериментите се открият отделни случаи на инфекциозни заболявания, които са особено опасни за лабораторни животни и хора, във вивариума се провежда необходимият набор от превантивни мерки. В този случай опитите върху животни временно се прекратяват.

5.13. В края на карантинния период животните се прехвърлят в опитните секции.

6. Режим на работа и основни правила за отглеждане на животните

6.1. Във всяка отделна стая се препоръчва да се отглеждат животни само от един вид. Ако според условията на експеримента е необходимо да се държат лабораторни животни от различни видове в една секция, те трябва да бъдат поставени на различни стелажи.

6.2. Всяка клетка (бокс, волиера и др.) трябва да има етикет, указващ данните за животното и времето на опита.

6.3. Лабораторните животни и птици се отглеждат в клетки с твърдо дъно върху постеля или в клетки с мрежесто дъно - под. Дървени стърготини, стърготини или торф за постеля се използват като легло. Постелята се автоклавира предварително или се съхранява в шкаф за суха топлина (при 150 - 180 ° C за 15 - 20 минути). Дебелината на слоя постеля в клетката е 5 - 10 mm. Когато животните се държат в клетки с мрежесто дъно, постелята се изсипва в тава (тава), разположена под мрежестия под.

6.4. Цялата работа по грижата и поддръжката на лабораторни животни се изгражда в съответствие с дневния режим и работния график, одобрен от ръководителя на тази институция. Дневният режим предвижда време за хигиенизиране на помещенията и оборудването, раздаване на фураж и провеждане на опитна работа и манипулации.

6.5. Храненето на лабораторните животни се извършва в съответствие със съществуващите стандарти.

6.6. Фуражите и полуфабрикатите се съхраняват в специално предназначено за целта помещение. Раздаването на фуража се извършва по предписания начин.

Във фуражната кухня на вивариума е разрешено съхранението на храна за не повече от два до три дни. При хранене на животни с гранулиран фураж и при наличие на бункери за фураж в клетките е разрешено предварително получаване на фураж от склада за седем до десет дни.

6.7. Във фуражната кухня и в килера на вивариума са оборудвани специални сандъци (метални или тапицирани с калай отвътре) за съхранение на запасите от фураж. Нетрайните храни се съхраняват в хладилник. Доставката на фураж от склада се извършва от специално назначен персонал (работници, които не участват пряко в грижите за животните).

6.8. Разпределението на фуража в помещенията-секции се извършва от работници или кухненски персонал, специално разпределени за тази цел в дезинфекцирани съдове (контейнери), определени за всяка секция. Отписването на фуража се извършва по предписания начин според действителната наличност на животни за всеки ден.

6.9. Забранено е влизането в хранителната кухня на персонал, който се грижи за лабораторни животни и неупълномощени лица.

6.10. Доставката на лабораторни животни с питейна вода се извършва от водопровода, качеството на водата трябва да отговаря на SanPiN 2.1.4.1074-01.

6.11. Покълването на зърно върху зелена маса за хранене на лабораторни животни се извършва в специално предназначени за това помещения. Разрешено е да се хранят животните с кореновата маса на растенията при липса на мухъл в нея.

6.12. Раздаването на фуража и поенето на животните трябва да се извършва само след почистване на помещенията, почистване или смяна на клетките и отстраняване на мръсното оборудване, тави с постелки и други материали, които трябва да се дезинфекцират или изхвърлят от секциите.

6.13. Почистването на клетките и почистването на стаите се извършва с помощта на инвентар, строго определен за всяка стая.

6.14. При периодична смяна на клетките, животните се трансплантират 1-2 пъти седмично в предварително дезинфекцирани клетки с подготвени легла, хранилки и поилки. Мръсните клетки, заедно с постелята, хранилките и поилките се прехвърлят в отделението за дезинфекция и измиване за последваща обработка.

6.15. Килиите се почистват ежедневно. В същото време замърсените постелки и други отпадъци от клетките се събират в специални метални резервоари с капак. Резервоарите се затварят плътно и се прехвърлят в отделението за дезинфекция и миене.

6.16. При използване на клетки с мрежесто дъно и тави, изолирани от клетките, последните периодично (поне веднъж седмично) се сменят с нови. Мръсните палети с постелки се прехвърлят в отделението за дезинфекция и измиване за по-нататъшна обработка.

6.17. Когато един работник обслужва няколко вида лабораторни животни, първо се обработват клетки с морски свинчета, след това клетки с мишки, плъхове и зайци и накрая помещенията, в които се отглеждат кучета и котки.

6.18. Измиването и дезинфекцията на клетки, хранилки и поилки директно в секциите е забранено.

6.19. Преди края на работния ден в секциите се извършва мокро почистване на пода с 1% разтвор на хлорамин или друг дезинфектант. Най-малко веднъж месечно се провежда санитарен ден, по време на който се почистват всички помещения. Редът на санитарния ден се определя от ръководителя на вивариума.

6.20. Дезинфекцията, почистването и измиването на клетки, хранилки, поилки и друго оборудване се извършват от работници, специално назначени в отдела за дезинфекция и миене. Контролът върху ефективността на почистването и дезинфекцията на инвентара се възлага на ветеринарния лекар на вивариума.

6.21. Условията за събиране, съхранение, отстраняване (или обезвреждане) на отпадъци (постеля, оборски тор, остатъци от фураж и т.н.) трябва да се определят за всеки конкретен случай в съгласие с местните власти и институциите на Роспотребнадзор. При работа със заразен материал е необходимо да се обеззаразят отпадъците чрез автоклавиране или обработка с дезинфекционни разтвори.

6.22. В секциите с опитни животни трябва да се извършва постоянен мониторинг на температурно-влажностния режим. За да се контролира качеството на въздушната среда в помещенията, където се отглеждат животни, се препоръчва периодично (2-3 пъти месечно) да се определя концентрацията на вредни газове (диоксид и амоняк).

6.23. Предаването на животни за опити се извършва по еднократни изисквания по годишна заявка от лабораториите, утвърдена от ръководителя на институцията. Работа с животни е разрешена само в часовете, предвидени от дневния режим на вивариума.

6.24. Ако в секциите се открият болни животни, последните със знанието на експериментатора се унищожават или се прехвърлят в изолатор. Въпросът за по-нататъшното използване на болни животни се решава в рамките на не повече от два дни.

6.25. Труповете на животни се съхраняват в специален хладилник за не повече от един ден преди патологоанатомичната аутопсия, след което подлежат на обезвреждане. Съхраняването на животински трупове в клетки и на пода в опитните секции е строго забранено.

6.26. Патологоанатомичната аутопсия на животните се извършва от експериментатора. В случай на смърт на животно, независимо от експеримента, ветеринарният лекар на вивариума присъства на аутопсията.

6.27. Всеки случай на смърт или принудително клане на животни трябва да се записва в специален дневник.

6.28. Забранено е посещението на вивариума от неоторизирани лица без специално разрешение. Служителите на институцията, извършваща работа във вивариума, са длъжни:

спазват установените правила за дневния режим и работния график на вивариума;

провеждат системни наблюдения на своите опитни животни;

поддържат първична документация, своевременно попълват етикети върху клетки с опитни животни;

посещавайте само тези помещения на вивариума, в които има животни, назначени за този служител;

след приключване на опити или всяка друга текуща работа с опитни животни да напусне работното място по съответния ред;

следи за своевременното отписване на опитни животни, които са напуснали експеримента, паднали или са били принудени да ги убият;

информира специалистите на вивариума за всички наблюдавани случаи на заболявания на експериментални животни, както и своевременно да уведомява специалистите на вивариума за предполагаемите патологични състояния на животните в съответствие с условията на експеримента.

6.29. На служителите на институцията, извършващи работа във вивариума с експериментални животни, е забранено да дават каквито и да било инструкции на работниците за промяна на режима на отглеждане и хранене на животни без съгласието на специалистите на вивариума.

6.30. Когато служителите на тази институция провеждат съвместни изследвания на животни в други институции, за това време е забранено тези служители да работят във вивариума (клиника) на своя институт (институция).

6.31. Всички действия, които могат да причинят болка на лабораторните животни (операции, пълно кървене, имплантиране на сензори и т.н., както и принудително клане на животни), трябва да се извършват с помощта на анестетици. Ако според условията на експеримента използването на анестезия е противопоказано, тогава всички горепосочени действия трябва да се извършат възможно най-скоро.

6.32. По време на експеримента служителят, който провежда този експеримент, трябва задължително да спазва следните правила за хуманно отношение към лабораторни (опитни) животни.

В случаите, когато се очаква хирургична интервенция или експеримент с болкова стимулация, анестезията трябва да се приложи преди животното да бъде вързано за машината.

Изчисляването на количеството анестетик трябва да се извършва на 1 kg или 1 g тегло на животното. Името на веществото и неговото количество трябва да бъдат записани не само в протокола от опита, но и в специална карта.

По време на експеримента, когато той се окаже по-дълъг от първоначално изчисления, е задължително допълнителното прилагане на анестетици.

Ако острият експеримент завърши със смъртта на животното, тогава експериментаторът трябва да убие животното преди края на действието на упойката.

След приключване на хирургическата интервенция животното трябва да бъде прехвърлено в следоперативната зала на специална носилка, което изключва възможността за изместване на тъканите, разминаване на конци и др.

Експериментаторът трябва да предвиди възможността за поява на болка в животното в следоперативния период и да предпише болкоуспокояващи.

7. Брой служители на вивариума

7.1. Броят на служителите на вивариума се определя в зависимост от обема и характера на експерименталните изследвания, както и от броя на лабораторните животни. В този случай е необходимо да се изхожда от следните норми за натоварване на животни от един и същи вид на работник, който се грижи за тях (като се вземат предвид нормите за поставяне на животни в клетки).

Животински видове
	животни
морски свинчета

Когато едно лице обслужва животни от няколко вида, изчислението се извършва въз основа на горните стандарти. Във всеки конкретен случай при определяне на нормите за натоварване на животните на работник е необходимо да се вземат предвид вида на клетките, степента на механизация на производствените процеси, вида на храненето (естествен фураж или гранулиран фураж), честота, характер и характеристики на изследването и др.

7.2. При работа с радиоактивни вещества или особено опасни инфекции, както и при отглеждане на видове животни, които не са изброени в табл. , стандартите за обслужване се установяват от ръководителя на научна институция въз основа на графика на отделните операции и като се вземат предвид настоящите стандарти за обслужване на селскостопански животни.

8. Правила за лична хигиена на служителите във вивариума

8.1. Персоналът на Вивариума трябва да бъде осигурен с гащеризони, предпазни обувки, сапун и кърпи в съответствие с действащите разпоредби.

8.2. В помещенията с животни, в хранителната кухня, в отделението за дезинфекция и миене е необходимо да има дезинфекционни разтвори за дезинфекция на ръцете.

8.3. Персоналът на вивариума трябва:

преди да започнете работа, свалете връхни дрехи, обувки, облечете гащеризони, предпазни обувки;

в края на работа (за предпочитане преди началото на работа), подложете се на лечение в санитарния блок (вземете душ или вана);

закачете домашни дрехи и гащеризони само в различни секции на отделен гардероб;

периодично (но поне веднъж месечно) дезинфекцират индивидуалните си шкафове;

в края на всеки отделен етап от работата в съответствие с дневния режим, както и преди хранене, не забравяйте да измиете и дезинфекцирате ръцете.

8.4. В производствените помещения на вивариума е строго забранено да се яде и пуши.

8.5. Новоназначените лица за работа с лабораторни животни задължително преминават медицински преглед, който включва изследвания за наличие на възбудители на туберкулоза и цялата група чревни инфекции. Контролните прегледи се извършват поне веднъж годишно. Във вивариума не се допускат до работа болни от туберкулоза, венерически, кожни и други заразни болести.

8.6. При провеждане на експерименти с животни с опасни за хората инфекциозни микроорганизми служителите на вивариума се подлагат на профилактична имунизация.

Говеда

Животното се опитомява чрез притискане на носната преграда с пръсти, щипци на Гармс, Николаев, пръстени на носа или ограничаване на движението чрез задържане за рогата с въже, за врата, главата и втората примка около носа. Задните крайници се фиксират с въжена примка, която се прикрепя към двата крайника малко над скакателните стави. Когато почиствате и подрязвате копитата на тазовите крайници на животните, можете да поставите усукване на подбедрицата.

Биковете са фиксирани с пръстени на носа и здрава яка с верига.

Биковете за разплод, независимо от характера им, се довеждат за преглед само на юлар и винаги използват носеща пръчка (карабинер) с дължина около 2 м, която се прикрепя към обиколката на носа, което предпазва животното от внезапно нападение над човек.

Прасците се хващат с ръце за врата, ушите или с помощта на сляпа примка за врата със специален възел и се завързват с въже за стелажа.

Животните се фиксират в изправено положение чрез улавяне на горната челюст с метален кабел и държач за дръжка или в машина с проста конструкция.

Удобно е да се държат угояващите млади животни и женските с щипки, предложени от K.P. Соловьов. Изисква се внимание при работа с нерези, стари прасета и кърмещи свине майки, особено тези, които са фиксирани в кошари.

Кози и овце

Животните се държат за рогата или врата. Ако е необходимо, фиксирайте в легнало положение на масата.

Конете са фиксирани така, че да не могат да удрят с предни и задни крайници или да хапят. Към конете трябва да се подхожда леко отстрани, по посока на рамото и лопатката, за предпочитане от лявата страна, тъй като конят свиква с това по време на работа. Те се приближават до главата, хващат юлара, юздата или гривата с лявата си ръка и галят и потупват по врата, холката, след това по лопатката и рамото с дясната ръка. Ако животното се държи без каишка в щанд, тогава трябва да го извикате, за да привлечете вниманието към себе си, да го повикате, изричайки нежни думи. Необходимо е конят да стои с глава към човека.

Животно, намиращо се в машината или на стойка за прикачване, не трябва да се приближава отзад, а малко отстрани от страната, на която гледа.

По време на термометрия, ректален преглед и различни медицински манипулации, за да се гарантира безопасността на работата на ветеринарния специалист, е необходимо да се повдигне гръдният крайник от страната, от която специалистът манипулира, или да се поставят облекла на единия или и на двата зада. крайници.

Гръдният крайник се фиксира чрез повдигане за четката или предполагаемата част и огъване в карпалната става. В същото време те застават отстрани на животното с гръб към главата му. Повдигнатият крайник се държи с две ръце, а при продължителни манипулации - с помощта на кит или въже, преметнато през гърба. Не можете да поставите повдигнатия крайник на животното на коляното си, тъй като животното има четвърта опорна точка, която не е безопасна за хората. Въжето не трябва да се завързва за никакъв предмет или да се увива около тялото на животното, тъй като в случай на неочаквано падане конят няма да може бързо да освободи крайника. При изследване на задните части на тялото тазовият крайник е фиксиран. Застанали на крупата на коня с лице към опашката, с една ръка се облягат в маклока, а с другата леко потупват крака отгоре надолу, повдигат го, закопчават шпакловъчния колан или поставят въжена примка, която е след това се прекарва между предните крайници, обикаля се около врата и се завързва с неразтягаща се примка. При изследването на упорити и за укротяване на неспокойни коне се използват завъртания и клещи за устни. За да приложите усукване, трябва да пъхнете ръката си в примката на усукването. Хванете горната устна, издърпайте я напред, преместете усукващата примка върху устната с лявата си ръка и я завъртете силно. Животните могат да бъдат надеждно фиксирани в специални машини. В машината се препоръчва да завържете коня за участъка, а на упоритото животно, за да не се срине, носете колани под корема.

камили

Камилите се носят за изследване на юлар. Необходимо е да се подхожда внимателно към камилите, за предпочитане отстрани (от страната на гръдните крайници). Методите за опитомяване на тези животни са същите като тези на говеда и коне. Трябва да се вземат предвид особеностите на поведението на тези животни. Желателно е персоналът, който постоянно се грижи за тях, да участва в ремонта на камилите.

Птицата се фиксира, като се държи в естествена позиция за крайниците и крилата, без да се притиска гърдите, за да се избегне задушаване. Когато работите с водолюбиви птици (гъски, патици), трябва да държите главата си, за да избегнете удар в окото, и да извършвате манипулации на една ръка разстояние.

животни с кожа

Животните се държат със специални щипки или ръце в платнени (с памучна подплата) ръкавици. Слагат го на масата и го държат с едната ръка за врата, с другата за торса. Устната кухина може да се отвори с помощта на прозявки, проектирани от V.L. Берестов, се препоръчва използването на специални намордници. Можете да фиксирате животни в мрежести капани, да използвате аналгетици или транквиланти с локални анестетици, както и упойка.

С помощта на стопанина на животните се поставя намордник или устата им се завързва със здрава плитка. За тази цел върху челюстите се нанася плитка отгоре, завързана с обикновен възел под долната челюст, след което накрая се фиксира на гърба на главата с морски възел. При съмнение за бяс, както и ядосани и неспокойни кучета, е по-добре да ги поставите в специална метална клетка, едната страна на която се движи и я щипе. За фиксиране на кучета в легнало положение се използва операционна маса за малки животни, която им позволява да се даде всяка позиция, удобна за работа.

По време на болезнени манипулации животните се фиксират в специален платнен ръкав или се увиват в кърпа, като се оставя свободна част от тялото за изследване. Муцуната може да бъде вързана като куче, а краката могат да бъдат фиксирани с ръце, носещи кожени или гумени ръкавици.

. SNiP 23.05-95. Естествено и изкуствено осветление.

. OSN-APK 2.10.24.001-04. Индустриални стандарти за осветление на селскостопански предприятия, сгради и съоръжения.

. SNiP 2.04.01-85*. Вътрешни водопроводи и канализация на сгради.

. SanPiN 2.1.4.1074-01. Пия вода. Хигиенни изисквания за качеството на водата в централизираните системи за питейно водоснабдяване. Контрол на качеството.

2019-01-10T13:50:20+03:00

Зайци, плъхове, кучета, котки са били използвани в експерименти от изследователски институти и други организации от десетилетия. Те живеят във вивариуми - специални помещения за отглеждане на лабораторни животни. Към тези помещения и грижите за самите животни се налагат специални изисквания - в края на краищата чистотата на експеримента често зависи от поддържането на идеалното здраве на животните.

Правилата за отглеждане на лабораторни животни зависят от характеристиките на вида и подвида на животното, в някои случаи - неговата порода, размер, физиологични характеристики (ако говорим за кучета). Осигурено им е всичко необходимо: пространство, слънчева светлина, чист въздух, храна и вода. Специални (общи за всички животни) изисквания се налагат на помещението, където ще бъдат - вивариум.

Вивариумът трябва да бъде разположен на сухо място, на хълм. Не могат да се използват низини, мазета и други помещения, първоначално неподходящи за отглеждане на животни.

В близост до вивариума трябва да има парцел, защитен от вятъра. За да направите това, около периметъра е изградена сляпа ограда. На входа на сградата се изграждат заграждения или клетки. При необходимост над тях се монтира козирка.

Самият вивариум е разделен на две части. На първо място самите животни. Втората е със сервизни помещения.

Как се настаняват животните?

Извън сградата можете да отглеждате зайци и кучета. Първите се поставят в клетки, вторите - във волиери в местната зона.

Основната част на сградата е разделена на стаи, всяка от които може да съдържа само един вид животни. Например една стая е оборудвана за кучета, втората - за маймуни, третата - за котки. В едно помещение могат да се отглеждат гризачи (големи бели плъхове, хамстери, морски свинчета) от различни видове - поради размера им.

Защо са необходими помощни помещения?

• Кухня и килер. Храната се съхранява в килера, а готвенето се извършва в кухнята, която се намира в близост.
• Стая за персонала. Тук персоналът на вивариума се преоблича, оставя ежедневните неща и съхранява гащеризони и предпазни обувки. Душ трябва да бъде прикрепен към стаята.
• Карантина. Това е първото помещение, в което животното се поставя при първото му довеждане във вивариума. Тук го изследват за заразни болести. След карантина той се изпраща в основната част на сградата.
• Изолатор. Болните животни от основната част на вивариума се настаняват в изолатор.
• Клиника. Това е стаята, в която се отвеждат животни след операция и експерименти. Тук те се съхраняват, докато се върнат към нормалното.
• Секционни. Това е помещение за съхранение на трупове, тук се пренасят мъртви животни. Тук се прави отворът.
• Помещения за миене на оборудване, клетки и гащеризони. Трябва да има всичко за дезинфекция на оборудването.
• КрематориумСпециално помещение за изхвърляне на трупове. Оборудван с фурна и съпътстващо оборудване.
• Помещение за измиване на животни. Поддържането на животните чисти е едно от задължителните условия за работа с лабораторни животни.

Всички помещения, където временно или постоянно се намират субектите на теста, трябва да имат заграждения или клетки. Тук са създадени всички условия за нормално поддържане на лабораторни животни.

Технически изисквания към вивариума

Поддържането на лабораторни животни във вивариуми е потенциално опасно за околността и хората, които се намират в нея. Мъртви или болни зайци, кучета, котки могат да станат източник на инфекция. И ако ваксини или други лекарства срещу инфекциозни заболявания се тестват в лабораторията, тогава за безопасността трябва да се внимава двойно.

По-специално, вивариумът трябва да има водоустойчиви подове. При производството им се прави лек наклон - така че влагата да тече в канализационната система. Подовете могат да бъдат направени от бетон, асфалт, пластмаса, плочки. Стените също са завършени с материал, устойчив на влага и други течности: блажна боя, пластмасови панели, плочки.

Инженерни системи:

• Канализационната система на вивариума трябва да бъде отделена от общата. Отпадъчните води се дезинфекцират преди постъпване в общата система. Системата трябва да осигурява и широки дренажи.
• Вентилацията, съгласно правилата за отглеждане на лабораторни животни, трябва да бъде представена от две системи - естествена и захранваща и изпускателна.
• Сградата е оборудвана с централно отопление, което осигурява температура от +12 до +18 градуса по Целзий.

Специални съоръжения за отглеждане на лабораторни животни

В допълнение към изброените по-горе помещения вивариумът може да има допълнителни помещения, в които се отглеждат животни с опасни инфекциозни заболявания и радиоактивно замърсяване. Те трябва да са изолирани от останалите помещения и да имат хладилник. Обикновено към тях се присъединяват операционни зали.

Кучета, котки, гризачи и тяхното съдържание

Както вече посочихме, различните видове животни изискват собствен подход към поддръжката и диетата. Нека да поговорим за основните изисквания за отглеждане на котки, кучета и гризачи.

кучета

Минималният размер на клетката е 1,5 на 1,2 метра, подът в нея е изолиран, направен с лек наклон. Редовно се измива и дезинфекцира, а самите животни се къпят.

В редица случаи кучетата се „заглушават“: извършва се операция на гласните струни под местна анестезия и морфин. Това намалява нивото на шума във вивариум с голям брой кучета, но ги прави неподходящи за сложни експерименти: след операция животните могат да развият дихателна недостатъчност.

котки

Котките не понасят добре клетките, затова се поставят в цели стаи. Животните могат да се разхождат свободно по тях. Стаята трябва да е топла и светла, да не е задушно. По стените са монтирани рафтове, на които котките могат да седят. На пода се поставя кутия с пълнител - котешка тоалетна. Тоалетната се почиства редовно, миризмата се премахва с помощта на химикали.

Съвместното поддържане на котки и котки е допустимо след кастрация. Преди да експериментират, животните се държат известно време в лабораторията, докато свикнат.

Гризачи и зайци

Малките животни - от зайци и големи бели плъхове до мишки - могат да се държат в една и съща стая, дори ако принадлежат към различни видове. Те се поставят в клетки, клетките се монтират на стелажи - 30-50 см от стените и 50-70 см от пода. Осигурете проход между стелажите - ширина 1 метър.

Клетките се избират според размера и броя на животните. Изработени са от стомана, калай, пластмаса. Важно е материалът да е достатъчно здрав. Тук поставят купа за пиене и хранилка, на стената е монтирана табела с информация за животните.

Зайците и морските свинчета могат да се отглеждат както на закрито, така и на открито. На чист въздух и слънце растат по-силни и здрави животни.