Лабораторна діагностика. Статеві гормони (дослідження репродуктивної функції) Як підготувати тварину до дослідження


17 ВІН прогестерон (17 гідроксипрогестерон, 17-ОПГ) – це стероїд, продукт метаболізму гормону «вагітності» прогестерону та 17 гідроксипрегненолону. У людському організмі ця речовина продукується корою надниркових залоз, яєчками у чоловіків, яєчниками та плацентою у жінок.

Основною функцією гідроксипрогестерону є участь у процесах синтезу гормонів: кортизолу, тестостерону та естрадіолу. Кортизол – це один із найважливіших гормонів людського організму, який бере участь у розщепленні білків, жирів та вуглеводів, у регулюванні кров'яного тиску та контролі над роботою імунної системи. У клінічній практиці аналіз на 17 ОН прогестерон використовується для оцінки функціонування надниркових залоз, діагностики захворювань надниркових залоз та контролю над ризиками патологічного перебігу вагітності у жінок.

Дослідження на 17 ОН прогестерон виконується за допомогою імуноферментного аналізу. Для здійснення тесту пацієнту необхідно здати кілька мілілітрів венозної крові. Для мінімізації ризиків помилкових результатів тесту до дослідження необхідно підготуватися:

  • здавати аналіз важливо натще (через 6-8 годин після їди);
  • варто утриматися від куріння за півгодини до тесту;
  • якщо ви приймаєте гормональні препарати, рекомендується інформувати про це лікаря (при необхідності призупинити прийом ліків).

Коли здавати аналіз на 17 ОН прогестерон? Рівень цього гормону схильний до добових коливань. Найменша концентрація 17-ОН спостерігається вночі, найвища – вранці. Тому всім групам осіб, яким призначено цей тест, важливо здавати його в першій половині дня. Також зміст стероїду, що розглядається, залежить від фази менструального циклу у жінок. Лікарі рекомендують проводити дослідження гідроксипрогестерону на третій – п'ятий день циклу (у фолікулярній фазі).

Коли призначається це дослідження? Аналіз на 17 ОН прогестерон призначається, коли у хворого є симптоми або підозри на патології надниркових залоз. У цей список входить низка захворювань, про які йтиметься нижче. Також варто зазначити, що однією з ознак патологічного вмісту 17-ОН у жінок є порушення менструального циклу. У такому разі дослідження на цей стероїд необхідно обов'язково здавати.

Важливо зауважити, що дослідження на 17-ОН призначається, коли має місце планування вагітності. В даному випадку дослідження необхідне для оцінки розвитку патології надниркових залоз у майбутньої дитини, а також для контролю за синтезом статевих гормонів, баланс яких особливо важливий при плануванні вагітності.

Норма 17 OH прогестерону

Норма дослідження на 17 oh прогестерон коливається в залежності від статі та віку пацієнта, а також від терміну вагітності у жінок. У таблиці 1 наведено референсні значення 17-OH.

Таблиця 1. 17 ВІН прогестрон, норма у чоловіків та жінок залежно від віку

У чоловіків віком понад вісімнадцять років норма коливається від 1,52 до 6,36 нмоль/л.

У жінок спостерігається кореляція від фази менстрального циклу:

  • фолікулярна 1,24-8,24 нмоль/л;
  • лютеїнова 0,99-11,51 нмоль/л.

У таблиці 2 представлені референсні значення змісту стероїду залежно від терміну вагітності.

Таблиця 2. 17 ВІН прогестерон норма

Розшифрування результатів дослідження

Коли ви з'явилися симптоми патології надниркових залоз, необхідно здавати аналіз крові. Що може виявити?

  1. Нормальний вміст гормону. Якщо немає відхилень від референсних значень, то боятися нічого, патологій немає.
  2. Невелике підвищення концентрації 17-OH. Цей показник характеризується помірно тяжким перебігом гіперплазії надниркових залоз. Це захворювання зумовлюється патологічним зростанням тканин. Збільшення надниркових залоз загрожує порушенням гормонального балансу, що, у свою чергу, тягне за собою широкий спектр патологічних відхилень. Дуже важливо звернути увагу на цю патологію під час планування вагітності. У цю категорію варто віднести вроджену гіперплазію надниркових залоз у дітей. Для дітей з виявленою патологією важливо здавати аналіз на 17-ОН періодично.
  3. Значне підвищення концентрації 17-OH. Виявляється в основному у новонароджених дітей при недоношеності чи серйозній вродженій гіперплазії надниркових залоз. У цьому випадку потрібно докласти всіх зусиль, щоб знизити рівень 17-OH.
  4. Підвищений вміст гормонуможе спостерігатися у жінок при пухлинах доброякісного та злоякісного характеру. Локалізовані такі утворення, як правило, у яєчниках чи надниркових залозах. Важливо звернути увагу на цю групу патологій, при яких виявляються такі симптоми: надмірне оволосіння, утворення прищів, порушення менструального циклу. З появою таких ознак рекомендується здавати аналіз кілька разів контролю над зростанням пухлини і за плануванні вагітності.

Коли 17 ОН прогестерон підвищений, то в більшості випадків необхідно здати додаткові гормональні аналізи та призначити лікування. Терапія цього патологічного стану полягає у прийомі гормональних препаратів (дексаметазон, метилпреднізолон). При споживанні цих лікарських засобів можливий невеликий набір ваги через затримку води в організмі.

Коли призначається курс лікування гормональними препаратами, дослідження крові на 17 ОН прогестерон при вагітності важливо здавати повторно. Це допоможе контролювати рівень стероїду в організмі та своєчасно припинити лікування при досягненні норми. При гормональній терапії вагітних важливо не завдати шкоди майбутнім дітям.

Важливо, що з підвищеному рівні гормону здійснювати розшифровку результатів і призначати терапію повинен лікар відповідного профілю. Самостійний прийом гормональних лікарських препаратів здатний не лише знизити рівень стероїду, а й завдати значної шкоди організму та призвести до незворотних ушкоджень.

Коли результат дослідження знижено?

  • знижений 17-ОН відповідає позитивній динаміці лікування;
  • хвороба Аддісона (хронічна недостатність надниркових залоз, часто проявляється у дітей), при даному захворюванні надниркові залози втрачають можливість виробляти гормони в необхідному організмі обсязі;
  • псевдогермафродитизм у чоловіків (рідкісне гормональне відхилення)

Коли результат дослідження знижений, головною метою терапії є усунення джерела патологічного зниження рівня стероїду в крові. Позитивна динаміка захворювання дозволить привести показник у норму. Гормональна терапія у разі може бути лише підтримкою.

Прогестерон- Це жіночий статевий гормон. Його головне завдання – підтримання вагітності у собак.

У яких випадках призначають дослідження прогестерону?

  • оцінка аспектів функціонування яєчника у сук та кішок;
  • визначення часу овуляції для визначення часу в'язання (у сук);
  • передбачення дати пологів;
  • підтвердження наявності залишку тканини яєчника;
  • оцінка функції жовтого тіла у випадку аборту;
  • виявлення безсимптомної тічки;
  • виявлення наявності лютеїнових кіст та ін.

У ветеринарній практиці найчастіше досліджуються рівні прогестерону визначення оптимального часу в'язки. Це вкрай важливо при штучному заплідненні замороженої або охолодженої спермою, або коли собака знаходиться на великій відстані і потрібно точно знати дату в'язки, щоб привезти суку або собаку.

Як підготувати тварину до дослідження?

В особливій підготовці потреби немає. Забір крові проводять зазвичай вранці натще. Основна умова - тварина не повинна приймати препарати, що впливають на рівень прогестерону.

В який час потрібно проводити дослідження?

Дослідження рівня прогестерону можна проводити кожні 2-3 дні, починаючи з 3-5 днів від початку течки. Зазвичай аналіз готовий протягом 24-х годин. Середній час виконання аналізу – до 4 годин.

Яким способом проводиться дослідження?

Дослідження проводять методом імуноферментного аналізу (ІФА).

Це кількісний метод визначення рівня прогестерону у сироватці крові. Дослідження виконується в лабораторних умовах із використанням відповідного приладу імуноферментного аналізатора із застосуванням спеціальних реагентів.

Принцип визначення прогестерону ґрунтується на використанні конкурентного методу ІФА. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла до прогестерону. Прогестерон зразка, що досліджується, конкурує з кон'югованим прогестероном за зв'язування з антитілами на поверхні лунки. В результаті утворюється пов'язаний із пластиком «сендвіч», що містить пероксидазу. Під час інкубації із розчином субстрату тетраметилбензидину відбувається забарвлення розчинів у лунках. Інтенсивність забарвлення, яку визначають на аналізаторі, обернено пропорційна концентрації прогестерону в досліджуваному зразку.

Як тлумачити результати аналізу?

Кількісне значення прогестерону в крові визначають у до- та постовуляторний періоди. Рівень прогестерону в сироватці крові, як у різних собак, так і в однієї і тієї ж особини (від циклу до циклу) може змінюватися досить швидко.

Середні показники представлені в таблиці.

Результати у різних лабораторіях можуть відрізнятися. Це залежить від налаштувань апарата та реагентів. Точну інтерпретацію результатів повинен проводити ветеринарний лікар, який має відповідну кваліфікацію та досвід роботи.

Оптимальні терміни в'язання:

При досягненні рівня прогестерону 15,9 нмоль/л (5 нг/мл) в'язка здійснюється через 24-48 годин.

Штучне запліднення за допомогою охолодженої сперми проводиться через 4 дні після досягнення рівня прогестерону 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) або 48 годин після позначки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).

Штучне запліднення за допомогою замороженої сперми виконується через 5 днів після позначки 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) або 72 години після позначки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл)

Яка користь цього дослідження?

Визначення термінів овуляції дозволяє збільшити як відсоток вдалих в'язок чи штучного запліднення, а й плодючість. А додаткові методи дослідження, засновані на використанні піхвових мазків та

Ціни на статеві гормони (дослідження репродуктивної функції)

Гормонам відводиться найважливіша роль регуляції репродуктивної системи. Визначення вмісту гормонів використовується для встановлення причин як жіночої, так і чоловічої безплідності, при яких у багатьох випадках на першому місці стоїть порушення гормональної регуляції.

Фолікулостимулюючий гормон (ФСГ)і лютеїнізуючий гормон (ЛГ)синтезуються в гіпоталамусі з певною частотою та інтенсивністю залежно від менструального циклу. ЛГ та ФСГє визначальними факторами у регуляції жіночих статевих гормонів яєчників – естрогенів: естрадіолу (Е2), естрону, естріолуі прогестерону.

Основним з естрогенівдля оцінки ендокринної активності фолікулів є естрадіол. У жінок дітородного віку він утворюється у фолікулі яєчника та ендометрії. Прийом оральних контрацептивів підвищує концентрацію естрадіолу у сироватці крові.

Прогестерон –гормон, що виробляється жовтим тілом , його основним органом-«мішенню» є матка .

Пролактіну жінок необхідний для розвитку молочних залоз та лактації. Концентрація пролактину в крові збільшується при фізичних навантаженнях, гіпоглікемії, вагітності, лактації, стресі. Після настання менопаузи концентрація пролактину знижується.

Тестостерон- андрогенний гормон, відповідальний за вторинні статеві ознаки у чоловіків. Основним джерелом тестостерону є клітини сім'яників. Тестостерон підтримує сперматогенез, стимулює еритропоез, а також необхідний підтримки лібідо і потенції.

Хоріонічний гонадотропін (бета ХГ)– його фізіологічною роллю є стимуляція прогестерону жовтим тілом на ранніх стадіях вагітності.

17-альфа-гідроксипрогестерон (17 ВІН - прогестерон)є попередником кортизолу. Гормон виробляється у надниркових залозах, яєчниках, яєчках і плаценті.

Дегідроепіандростерон-сульфат (ДГЕА-С)синтезується в надниркових залозах та яєчниках.

Показання

Визначення фолікулостимулюючого гормону (ФСГ)і лютеїнізуючого гормону (ЛГ)рекомендовано при: порушенні менструального циклу, безплідності, рясних менструальних кровотечах, невиношуванні вагітності, передчасному статевому розвитку та затримці статевого розвитку, затримці росту, синдромі полікістозних яєчників, ендометріозі, контролі ефективності гормональної терапії.

Пролактин -його визначення рекомендовано при безплідності, аменореї, порушення функції яєчників. Необхідне призначення пролактину в комплексі з визначенням ТТГ (бо надмірне утворення ТТГ може призвести до гіперпролактинемії). При герпетичній інфекції та оперативних втручаннях на молочній залозі відзначаються підвищені значення пролактину.

Тестостерон- Його підвищенняспостерігається при ідеопатичному передчасному статевому дозріванні та гіперплазії кори надниркових залоз у хлопчиків, екстрагонадних пухлинах у чоловіків, арренобластомах, синдромі яєчок, що фемінізують.

ЗниженняКонцентрація тестостерону спостерігається при уремії, печінковій недостатності, крипторхізм.

Хоріонічний гонадотропін (бета ХГ)його підвищена концентрація у крові спостерігається за відсутності ультразвукових ознак вагітності (як і матці, і поза нею). При оцінці результатів бета ХГ у пренатальній діагностиці слід враховувати, що ряд препаратів (синтетичні гестагени: дюфастон, дидрогестерон, прожестожель (місцево), норетистерон ацетат), які широко застосовуються для лікування невиношування вагітності, активують синтез бетаХГ. При багатоплідній вагітності бета ХГ підвищується пропорційно до кількості плодів.

Визначення 17-альфа-гідроксипрогестерону (17 ВІН прогестерону)відіграє провідну роль у діагностиці андреногенітального синдрому, що супроводжується підвищеною продукцією кортизолу, що регулює секрецію АКТГ. Підвищені значення 17 ОН прогестерону відзначаються при пухлинах кори надниркових залоз.

Визначення дегідроепіандростерону-сульфату (ДГЕА-С) використовується для диференціювання походження андрогенів: підвищений вміст ДГЕА-С при наднирковому походженні, знижений - при походженні з насінників.

Методика

Визначення статевих гормонів фолікулостимулюючого гормону (ФСГ) і лютеїнізуючого гормону (ЛГ), естрадіолу - Е2, прогестерону, пролактину, тестостерону, бета ХГ, дегідроепіандростерону-сульфату (ДГЕА-С) здійснюється імунохімічним методом на аналізатор.

Визначення 17-альфа-гідроксипрогестерону (17 ОН прогестерону) здійснюється за допомогою імуноферментного аналізу.

Підготовка

Необхідно утриматися від фізичних навантажень, прийому алкоголю та ліків, змін у харчуванні протягом 24 годин до взяття крові. У цей час потрібно утриматися від куріння.

ФСГ, ЛГ, естрадіол, тестостерон, ДГЕА-С, 17ОН-прогестерон – з 2-5 дня циклу;

пролактин, прогестерон – з 22-24 дня циклу.

Бажано ранковий прийом лікарських засобів провести після взяття крові (якщо це можливо). Виключити прийом наступних лікарських препаратів: андрогенів, дексаметазону, метирапону, фенотіазинів, пероральних контрацептивів, стильбену, гонадотропінів, кломіфену, тамоксифену.

Не слід перед здаванням крові здійснювати такі процедури: ін'єкції, пункції, загальний масаж тіла, ендоскопію, біопсію, ЕКГ, рентгенівське обстеження, особливо із введенням контрастної речовини, діаліз.

Якщо все ж таки було незначне фізичне навантаження, потрібно відпочити не менше 15 хвилин перед здаванням крові.

Дуже важливо, щоб точно дотримувалися вказаних рекомендацій, тому що тільки в цьому випадку будуть отримані достовірні результати дослідження крові.


ІФА-дослідження:

Лабораторна діагностика порушень репродуктивної системи (частина 2)

Нечаєв В.М., к.б.н.

Визначення рівня пролактину

Першим етапом лабораторного обстеження осіб обох статей, які страждають на порушення репродуктивної функції, за рекомендацією ВООЗ є вимірювання концентрації пролактину(молочного гормону) у сироватці (плазмі) крові. Пролактин не безпосередньо впливає на функціональну активність статевих залоз, у той же час рівень пролактину в крові чітко корелює зі станом гіпоталамусаі аденогіпофіза. Пролактин регулює секрецію молока під час лактації. Пролактінє гормоном-антагоністом ФСГі ЛГі при підвищенні вироблення пролактину порушується гормональна функція яєчників і виникає гіперпролактинемічна форма безпліддя. Фізіологічна гіперпролактинемія спостерігається у жінок, які годують груддю. У жінок, які не годують, підвищений рівень пролактину може бути пов'язаний з прийомом деяких лікарських препаратів, пухлиною гіпофіза або порушенням його роботи. Одним із проявів гіперпролактинемії є виділення молозива або молока з молочних залоз, особливо у жінок, які не народжували. Патологічні зміни в організмі при підвищених або знижених рівнях пролактину представлені в таблиці 1.

Таблиця 1.Патологічні зміни в організмі при підвищених або знижених рівнях пролактину

Пролактин знаходиться у сироватці крові у трьох різних формах. Переважає біологічно та імунологічно активна мономерна форма (приблизно 80%), 5-20% присутня у вигляді димерної неактивної форми та 0,5-5% у вигляді тетрамерної, також неактивної форми. У таблиці 2 представлені референтні величини концентрацій мономерної форми (біологічно активної) пролактину.

Таблиця 2.Референтні значення концентрації пролактину у сироватці крові

Показання до визначення:

Жінки дітородного періоду:

  • Порушення менструального циклу та аменорея
  • Безпліддя
  • Порушення лактації
  • Галакторрея
  • Синдром гіперфункції гіпофіза
  • Недостатність гіпофіза
  • Тестикулярна недостатність
  • Азооспермія, олігоспермія
  • Галакторрея
  • Синдром гіперфункції гіпофіза
  • Недостатність гіпофіза
  • Замісна терапія після видалення пухлини гіпофіза

Підготовка проб для аналізу

Пролактин має досить виражений циркадний ритм з максимальним викидом гормону під час нічного сну. Забір крові рекомендується проводити вранці (8-10 год), ранню фолікулінову фазу циклу (у жінок з регулярним циклом) і в спокійній обстановці. Для виключення випадкового підвищення рівня пролактину у відповідь на стрес (взяття крові) бажано 2-3-кратне дослідження.

Матеріал для дослідження:

  • сироватка крові

ФСГ та ЛГ – «основні» гормони репродукції

Якщо визначення рівня пролактину в крові дає інформацію про функціональний стан гіпоталамо-гіпофізарного комплексу в цілому, то для оцінки активності репродуктивної системи застосовують вимірювання вмісту крові гонадотропних гормонів - ФСГ і ЛГ.

Саме ці гормони забезпечують зростання та розвиток фолікулів (ФСГ) та стимулює синтез статевих гормонів у гонадах (ЛГ). Секреція ЛГ та ФСГ знаходиться, у свою чергу, під контролем статевих гормонів гонад (механізм негативного зворотного зв'язку). Підвищення рівня статевих гормонів, насамперед естрадіолу, у крові супроводжується пригніченням секреції гонадотропінів (і навпаки). Секреція ФСГ додатково регулюється інгібіном – поліпептидом, що синтезується гонадами. У передовуляторний період дозрілий домінантний фолікул секретує в кров великі кількості естрадіолу, під впливом якого відбувається овуляторний викид ЛГ та ФСГ (феномен позитивного зворотного зв'язку). Цей підйом (овуляторний пік) продовжується дуже недовго, 1-2 дні. Інтенсивність секреції гонадотропінів у періодовуляторний період визначає майбутню функціональну активність жовтого тіла. Добовий (циркадний) ритм секреції ЛГ та ФСГ у дорослих людей не виражений, на відміну від підлітків, водночас цирхоральний (погодинний) ритм секреції дуже характерний саме для гонадотропінів.

Сучасні ІФА тест-системи визначення ФСГ і ЛГ засновані на використанні монклональних антитіл, які мають перехресної реакції з близькими гормонами ТТГ і ХГЧ.

Таблиця 3.Референтні величини концентрації ФСГ та ЛГ у сироватці крові.

Підготовка проб для аналізу

Рівні гонадотропінів не мають циркадного ритму, немає необхідності брати кров натще. Слід враховувати, що при збереженому менструальному циклі одноразове визначення гонадотропінів може проводитися тільки в ранню фазу фолікуліну (6-8-й дні циклу). Більш чіткі результати отримують при заборі 2-3 проб крові з інтервалом 30-40 хв та подальшому об'єднанні отриманих сироваток. Не можна одноразово визначати ЛГ та ФСГ у пробі крові, взятої в середині циклу, для детекції овуляції. Терміни овуляції для циклів різної тривалості різні (приблизно за 14 днів до початку очікуваної менструації) і можуть зрушуватись на 1-2 дні від передбачуваних. У зв'язку з цим результати одноразового визначення гонадотропінів на 13-14 дні циклу в більшості випадків дають неправдиву інформацію про характер циклу. Пульсуючий характер секреції з інтервалами в 1-2 години особливо притаманний ЛГ, тому результати одиничних аналізів слід вважати приблизними. Зразки сироватки або плазми після утворення згустків та/або відділення еритроцитів стабільні протягом часу, достатнього для пересилання зразків поштою. Заморожені зразки можна зберігати протягом тривалого часу.

Кров необхідно відбирати голкою з широким просвітом, самопливом або за незначного негативного тиску поршня шприца.

Матеріал для дослідження:

  • сироватка крові
  • гепаринізована плазма крові

Визначення статевих гормонів

Безперечно, що для повного обстеження стану репродуктивної системи потрібна наявність ІФА тест-систем для визначення статевих гормонів (естрадіолу, тестостерону, прогестерону) у сироватці крові. Якщо синтез статевих гормонів у гонадах різко знижений, то механізмом негативного зворотний зв'язок секреція гонадотропінів різко збільшується отже діагноз відсутності функції яєчників немає труднощів.

У діагностичному алгоритмі обстеження при підозрі на ендокринну безплідність ключовим є визначення концентрацій ЛГ, ФСГ, естрадіолу та тестостерону.

Методи визначення цих гормонів на сьогоднішній день переважно базуються на імунноферментній або імунофлуоресцентній технології, що забезпечує їхнє широке застосування.

Естрадіол

Естрадіол- Основний естрогенний стероїдний гормон. Катаболізм у печінці призводить до трансформації естрадіолу в естріол або в глюкуроніди і сульфати, що виділяються в сечу.

У жінок естрадіолсинтезується і секретується в яєчниках, в оболонці та гранульозних клітинах фолікулів. Він стимулює розвиток першої фази оваріального циклу, викликаючи збільшення м'язового білка матки та гіперплазію ендометрію. На гіпофізарному рівні він також діє на секрецію ЛГ, ФСГ. Протягом першої фази циклу наростаюче збільшення концентрації естрадіолупризводить до масивної секреції ЛГ, що “запускає овуляцію”. При вагітності концентрація естрадіолузбільшується. Аналіз естрадіолуу плазмі крові є основним параметром у стеженні за індукцією овуляціїі стимуляцією яєчників. Збільшення швидкості синтезу естрадіолута її концентрація наприкінці стимуляції відбиває кількість і якість дозріваючих фолікулів.

Таблиця 4.Референтні величини концентрації естрадіолу у сироватці крові.

Показання до визначення:

  • контроль за стимульованою овуляцією,
  • оцінка функції яєчників,
  • порушення менструального циклу,
  • аменорея гіпоталамічного походження,
  • пухлини, що виробляють естрогени,
  • контроль за лікуванням безплідності,
  • остеопороз;

чоловіки:

  • гінекомастія,

діти:

  • спостереження за перебігом статевого дозрівання.

Таблиця 5.Захворювання та стани, при яких може змінюватися концентрація естрадіолу у сироватці крові

Прогестерон

Прогестерон- один із основних стероїдних гормонів. Він секретується в невеликій кількості клітинами жовтого тіла яєчників у лютеїновій фазі менструального циклу. Він діє на ендометрій разом з естрадіолом, внаслідок чого менструальний цикл переходить із проліферативної фази в секреторну Рівень прогестреронудосягає свого максимуму на 5 – 7-й день після овуляції. Якщо не відбувається запліднення, рівень прогестерону зменшується, і навпаки, якщо відбулося запліднення, жовте тіло продовжує секретувати велику кількість. прогестеронудо 12 тижнів вагітності. Потім входить у дію плацентаяка стає основною ділянкою вироблення гормону. Прогестеронтакож секретується у невеликих кількостях корою надниркових залозі насінникамиі є проміжною ланкою у синтезі андрогенів.

У крові прогестеронзнаходиться як у вільному, так і в пов'язаномуз білками переносниками (альбумін та транскортин) станах. Період напіврозпаду гормону становить кілька хвилин, дві третини прогестерону метаболізується у печінці та секретується у сечу у вигляді вільного прегнандіолу, глюкуроніду прегнандіолу та сульфату прегнандіолу.

Таблиця 6.Референтні величини концентрації прогестерону у сироватці крові

Показання до визначення:

жінки:

  • порушення овуляції,
  • відсутність овуляції з олігоменореєю або без неї,
  • недостатність функції жовтого тіла;
  • точне визначення овуляції
  • індукція овуляції людським гонадотропіном менопаузи або кломіфеном (як у присутності ХГЛ, так і без нього);
  • підтвердження овуляції (визначення у другій половині циклу);
  • спостереження за перебігом овуляції у жінок, які перенесли мимовільний аборт;

чоловіки та діти:

  • дефект біосинтезу стероїдів.

Прогестерон спричинює збільшення базальної температури тіла. У разі діагностики недостатності функції жовтого тіла проби беруться 3 рази (кожна після 3-4 днів попереднього взяття). Принаймні у 2 випадках концентрація прогестерону повинна перевищувати 10 мкг/мл.

Тестостерон

У жінок тестостеронутворюється в корі надниркових залозі яєчникаху співвідношенні 1:1 і є субстратом для утворення естрогенів, а також стимулює передовуляторний викид ЛГ. Рівні тестостерону у жінок із віком не змінюються. Рівні тестостерону в нормі у жінок – 0 – 0,9 нг/мл.

Показання до визначення:

  • синдром Клайнфельтера та інші хромосомні захворювання;
  • гіпопітуїтаризм;
  • ферментативні порушення синтезу андрогенів;
  • гірсутизм та вірилізація жінок;
  • більшість андрогенвиробляють пухлин яєчників і нирок.

У жінок необхідно також визначати рівень ДГЕА - сульфату, який має схожу з тестостероном дію (у чоловіків є допоміжним засобом при дослідженні тестостерону).

Матеріал для дослідження:

  • сироватка крові жінок на 3-7 день менструального циклу, краще між 8 та 10 годинами ранку.

Стероїдзв'язуючий глобулін (ССГ) у сироватці крові

ССГ - білок, що зв'язує та транспортує тестостерон та естрадіол. Крім своєї транспортної функції, ССГ захищає тестостерон і естрадіол від метаболічної активності шляхом від секретуючої їх залози до органу-мішені, і утворює свого роду депо гормонів в організмі. ССГ - кислий глікопротеїд із молекулярною масою 45 000 дальтон. Порушення синтезу ССГ призводить до порушення доставки гормонів до органів-мішеней та виконання їх функціональної активності. Концентрацію ССГ у сироватці крові підвищують естрогени, пероральні контрацептиви, знижують – андрогени, Т4, ТТГ.

Таблиця 7.Референтні величини концентрації ССГ у сироватці крові

Попередники біосинтезу андрогенів та естрогенів

17α-Гідроксипрогестерон

17а-Гідроксипрогестерон (17ОН-П) - проміжний стероїд у біосинтезі глюкокортикоїдів, андрогенів та естрогенів, який синтезується з прогестерону та 17а-гідроксипрегненолону. Секретований корою надниркових залоз, яєчниками та сім'яниками, він циркулює в крові, як у вільному, так і пов'язаному, подібно до прогестерону, з двома білками - альбуміном і транскортином, стані. Період напівжиття 17ОН-П становить кілька хвилин. Він метаболізується печінкою та виділяється у сечу у вигляді прегнантріолу.

17ОН-П виробляється у невеликих кількостях яєчниками під час фолікулярної фази, потім його концентрація зростає і залишається постійною протягом лютеїнової фази. Якщо запліднення немає, рівень 17ОН-П зменшується. При імплантації заплідненої яйцеклітини жовте тіло продовжує секретувати 17ОН-П.

Аналіз 17ОН-П дуже важливий для діагностики вродженої гіперплазії надниркових залоз та виявлення дефіциту ферменту, відповідального за виникнення даного захворювання.

Рівень 17ОН-П у крові особливо показовий і має вирішальне значення у діагностиці дефіциту 21-гідроксилази у новонароджених.

У зрілому віці при частковому або пізно дефіциті ферменту, що проявився, основний рівень активності 17ОН-П може бути в нормі або підвищений

Таблиця 8Референтні величини концентрації 17ОН-Р у сироватці крові

Показання до визначення:

  • уроджений дефіцит ферменту, відповідальний за виникнення гіперплазії надниркових залоз;
  • захворювання, пов'язані з дефіцитом 21-гідроксилази у новонароджених (високий рівень 17ОН-Р);
  • частково або пізно нестача 21-гідроксилази (нормальний або високий рівень 17ОН-Р);
  • диференційна діагностика безплідності.

Матеріал для дослідження:

  • сироватка крові;

Дегідроепіандростерон

Дегідроепіандростерон (ДГЕА) - один з найбільш важливих андрогенів (точніше їх попередник), що синтезується корою надниркових залоз і статевими залозами з 17ОН-Р. Він катаболізується у вірілізуючі андрогени: андростендіол, тестостерон та дигідротестостерон.

Більша частина ДГЕА модифікується шляхом приєднання сульфату (ДГЕА-С), який біологічно неактивний, але видалення сульфатної групи, відновлює активність ДГЕА. ДГЕА фактично є прогормоном, має більш короткий період напівжиття і більш високу швидкість метаболічного обміну, у зв'язку з чим його концентрація в крові в 300 разів нижче рівня ДГЕА-С.

ДГЕА характеризується циркадним рівнем секреції з максимальним викидом гормону вранці. У менструальному циклі значних змін його концентрації немає. На відміну від тестостерону, ДГЕА в циркулюючій крові не пов'язаний з ССГ, тому зміна концентрації білків, що зв'язують, не впливає на його рівень.

Таблиця 9.Референтні величини концентрації ДГЕА у сироватці крові

Показання до визначення:

  • гірсутизм;
  • вірилізація;
  • затримка статевого дозрівання

Матеріал для дослідження:

  • сироватка крові;
  • плазма крові з додаванням гепарину.

Дегідроепіандростерон-сульфат

ДГЕА-С синтезується в надниркових залозах (95%) і в яєчниках (5%), виділяється з сечею і становить основну фракцію 17a-кетостероїдів. Визначення ДГЕА-З концентрації у сироватці крові замінює дослідження 17a-кетостероїдів сечі.

ДГЕА-С секретується зі швидкістю 10-20 мг/24 години (35-70 мкмоль/24 години) у чоловіків і 3,5-10 мг/24 години (12-35 мкмоль/24 години) у жінок, причому без циркадного ритму. Він не зв'язується зі специфічними білками плазми крові і, отже, їхня концентрація не впливає на рівень ДГЕА-С. Однак ДГЕА-З зв'язується з альбуміном сироватки крові.

Крім ДГЕА-С у циркулюючій крові присутній ДГЕА, що становить ¼ і ½ від швидкості секреції ДГЕА-С у чоловіків та жінок відповідно. Завдяки високій концентрації ДГЕА-С у крові, тривалого періоду напівжиття та високої стабільності, а також тому, що його джерелом, в основному, є надниркові залози, ДГЕА-С є відмінним індикатором андрогенної секреції.

Якщо у жінок спостерігається підвищений рівень тестостерону, то за допомогою визначення концентрації ДГЕА-С можна встановити, чи це пов'язано з порушенням функції надниркових залоз, або із захворюванням яєчників.

Таблиця 10Референтні величини концентрації ДГЕА-С у сироватці крові

Вік

Концентрація

(мкг/мл)

Концентрація

(мкмоль/л)

Новонароджені.

Дорослі:

Період вагітності

Передклімактеричний період

Постклімактеричний період

Коефіцієнти перерахунку:

  • 1 нг/100мл = 28,8 нмоль/л;
  • 1 нмоль/л = 2,6 нг/мл
  • 1 нг/мл = 368,46 мкмоль/л

Показання до визначення:

  • пухлини надниркових залоз;
  • диференційна діагностика захворювань яєчників;
  • остеопороз;
  • затримка статевого дозрівання.

Матеріал для дослідження:

  • сироватка крові;
  • плазма крові з додаванням гепарину.

Аутоімунні захворювання репродуктивної системи

Фізіологічне виснаження фолікулів яєчників у жінок відбувається у віці 45-55 років. При припиненні функції яєчників до 40 років свідчить про захворювання, відоме як передчасна недостатність яєчників. Наслідком цього захворювання є безпліддя. У ряді випадків причиною цього може бути аутоімунний процес, пов'язаний з утворенням антитіл до статевих гормонів яєчників.

У деяких випадках розвиток безплідності у чоловіків зумовлений наявністю в сироватці кроків або насіннєвої плазми специфічних антитіл.

Оваріальні антитіла у сироватці крові

У нормі у сироватці крові жінки оваріальні антитіла відсутні. Оваріальні антитіла (до антигенів яєчників) були виявлені у жінок при передчасній менопаузі, безплідності та при заплідненні invitro. Ці антитіла можуть вироблятися клітинами Лейдіга, грануцилезними клітинами яєчників та клітинами плаценти. Для визначення антитіл до статевих гормонів використовують метод непрямої імунофлюресценції та ІФА. ІФА метод дозволяє визначати як сумарні, так і антитіла до різних класів імуноглобулінів (IgG, IgM, IgA). Аутоімунні антитіла можна виявити в крові жінок за багато років до розвитку клінічних проявів передчасної недостатності яєчників.

Крім оваріальних антитіл метод ІФА дозволяє виявляти антитіла до прозорої оболонки ооциту - сумарні та антитіла до класів (IgG, IgM, IgA), які мають таке ж діагностичне значення, як і оваріальні антитіла.

У жінок виявити чітку кореляцію між концентрацією антитіл у сироватці крові та прогнозом щодо фертильності зазвичай не вдається.

Антиспермальні антитіла у сироватці крові

У нормі у сироватці крові жінки антиспермальні антитіла відсутні. У чоловіків антиспермальні антитіла утворюються внаслідок аутоімунної реакції на спермальний епітелій. Причиною розвитку такої реакції може бути травма яєчка, бактеріальні та вірусні інфекції, хірургічні операції на яєчку. Для визначення антиспермальних антитіл в даний час застосовують метод ІФА, який відрізняється великою чутливістю та специфічністю, а також дозволяє кількісно визначати антитіла різних класів імуноглобулінів (IgG, IgM, IgA), що дозволяє оцінити гостроту та вираженість аутоімунного процесу. Крім того, у чоловіків концентрація антиспермальних антитіл корелює щодо відновлення здатності до запліднення.

У жінок у нормі антитіла проти антитегів сперматозоїдів не виробляються, однак різні етіологічні фактори (інфекції, аутоімунні захворювання) можуть призводити до втрати імунологічної толерантності. Якщо у крові жінки присутні антиспермальні антитіла, тоді порушуються процеси формування трофобласту, зростання та формування плаценти, імплантації. А це призводить до переривання вагітності, гестозу, затримки розвитку плода, фетоплацентарної недостатності.

Дослідження на антиспермальні антитіла рекомендують проводити у всіх пар з незрозумілою безплідністю.

Хоріонічний гонадотропін (ХГч) у сироватці крові

ХГч - глікопротеїн з молекулярною масою приблизно 46000, що складається з двох субодиниць-альфа та бета. Підвищений рівень ХГч у сироватці крові виявляють вже на 8-12-й день після зачаття. Протягом першого триместру вагітності концентрація ХГч швидко наростає, подвоюючи, кожні 2-3 дні. Максимум концентрації припадає на 7-10 тижні вагітності, після чого концентрація ХГч починає знижуватися, і протягом другої половини вагітності залишається більш-менш стабільною.

Таблиця 12Значення медіан концентрації ХГч для скринінгу вроджених вад розвитку плода у II та III триместрі

Альфа-Фетопротеїн (АФП) у сироватці крові

АФП - глікопротеїн з молекулярною масою приблизно 65000 кДа, що секретується плодовою печінкою та жовтковим мішком. АФП у плода є основним білком сироватки, у дорослих вміст АФП у сироватці крові незначний. У ІІ триместрі вагітності, за наявності у плода синдрому Дауна, концентрація АФП знижена, а концентрація ХГч у крові підвищена. З урахуванням цього, ІФА дослідження на АФП та ХГч використовують як метод масового пренатального обстеження вагітних, за допомогою якого можна виділити групу високого ризику за наявності у плоду вад розвитку або синдрому Дауна. Значення медіан концентрації АФП у сироватці крові для скринінгу вроджених вад розвитку плода у II триместрі наведено у таблиці 13.

Таблиця 13Значення медіан концентрації АФП для скринінгу вроджених вад розвитку плода у II триместрі

Вільний естріол у сироватці крові

Естріол – головний стероїдний гормон, що синтезується плацентою. Вміст естріолу у крові вагітної корелює з активністю надниркових залоз плода. Естріол проникає у кровотік вагітної, де можна визначити концентрацію його у вільному стані. При вагітності, що нормально розвивається, синтез естріолу підвищується відповідно до збільшення терміну вагітності і зростання плода (таблиця 14).

Таблиця 14Концентрації естріолу у сироватці крові жінки у динаміці фізіологічної вагітності

Термін вагітності, тиждень

Медіана концентрації естріолу, нмоль/л

Референтні величини естріолу, нмоль/л

При патології (виражені вади розвитку ЦНС у плода, вроджені вади серця, синдром Дауна, затримка росту плода, гіпоплазія надниркових залоз плода, внутрішньоутробна смерть плода) концентрація вільного страдіолу у сироватці крові вагітної знижується.

Значення медіан концентрації вільного естрадіолу в сироватці крові для скринігу вроджених вад розвитку у II триместрі вагітності наведено у таблиці 15.

Таблиця 15Значення медіан концентрації вільного естрадіолу у сироватці крові для скринігу вроджених вад розвитку у II триместрі вагітності

При синдромі Дауна та Едвардса концентрація вільного естрадіолу зазвичай становить 0,7 Мом.

На закінчення відзначимо, що широке впровадження повноцінної ІФА діагностики у клінічну практику суттєво підвищить ефективність діагностики та лікування пацієнтів із порушеннями репродуктивної системи.

Ціна: на запит

Ви можете додати товар до кошика, вказавши кількість

Виробник:Хема-медика

Країна:Росія

Од. вим.:набір

Вид упаковки:картонна коробка

Артикул: K217

Опис

Кількісне визначення концентрації прогестерону в сироватці (плазмі) крові методом твердофазного імуноферментного аналізу


Функціональне призначення

Визначення прогестерону ґрунтується на використанні конкурентного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла до прогестерону. Прогестерон із зразка конкурує з кон'югованим прогестероном за зв'язування з антитілами на поверхні лунки. В результаті утворюється пов'язаний із пластиком «сендвіч», що містить пероксидазу. Під час інкубації із розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) відбувається забарвлення розчинів у лунках. Інтенсивність забарвлення обернено пропорційна концентрації прогестерону в досліджуваному зразку. Концентрацію прогестерону в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком залежності оптичної густини від вмісту прогестерону в калібрувальних пробах

Технічні характеристики

Метод: твердофазний імуноферментний аналіз.
Проба: сироватка, плазма.
Специфіка 100%.
Чутливість: мінімальна концентрація, що достовірно визначається, не перевищує 0,5 нмоль/л.
Коефіцієнт варіації результатів вбирається у 8%.
Лінійність: діапазон концентрацій 1-300 нмоль/л ± 10%.
Набір розрахований на проведення аналізу у дублікатах 40 досліджуваних зразків, 7 калібрувальних проб та 1 проби контрольної сироватки (всього 96 визначень).
Склад набору:
1. Планшет 96-лунковий полістироловий, стрипований, готовий до використання – 1 шт.
2. Калібрувальні проби на основі сироватки крові людини, що містять відомі кількості прогестерону - 0; 1; 3; 10; 30; 100; 300 нмоль/л, готові до використання (калібрована проба 0 нмоль/л - 2 мл, інші - по 0.8 мл кожна) прозорі рідини пурпурного кольору (калібрована проба 0 - прозора безбарвна рідина) - 7 шт.
3. Контрольна сироватка на основі сироватки крові людини з відомим вмістом прогестерону, готова до використання, безбарвна прозора рідина, 0,8 мл х 1 флакон.
4. Кон'югат, готовий до використання, прозора рідина пурпурового кольору, 22 мл х 1 флакон.
5. Розчин субстрату тетраметилбензидину (ТМБ), готовий до використання, безбарвна прозора рідина, 11 мл х 1 флакон.
6. Концентрат відмивального розчину, 21-кратний, прозора безбарвна рідина, 22 мл х 1 флакон.
7. Стоп-реагент, готовий до використання, безбарвна прозора рідина, 11 мл х 1 флакон.
8. Папір для заклеювання планшета – 2 шт.
9. Інструкція із застосування - 1 шт.
10. Паспорт контролю якості – 1 шт.
Набір зберігати при температурі +2…+8 °C протягом усього терміну придатності, вказаного на упаковці, неприпустиме заморожування. Приготований розчин для відмивання зберігати при кімнатній температурі (+18…+25 °C) не більше 5 діб або при температурі +2…+8 °C не більше 30 діб. Калібрувальна сироватка після розтину придатна протягом 2 місяців.
Величину оптичної густини вимірюють при довжині хвилі 450 нм.
Зареєстровано в Росздравнагляд.