Laboratórna diagnostika. Pohlavné hormóny (reprodukčné štúdie) Ako pripraviť zviera na výskum
17OH progesterón (17-hydroxyprogesterón, 17-OPG) je steroid, metabolický produkt tehotenského hormónu progesterónu a 17-hydroxypregnenolónu. V ľudskom tele je táto látka produkovaná kôrou nadobličiek, semenníkmi u mužov, vaječníkmi a placentou u žien.
Hlavnou funkciou hydroxyprogesterónu je podieľať sa na syntéze hormónov: kortizolu, testosterónu a estradiolu. Kortizol je jedným z najdôležitejších hormónov v ľudskom tele, podieľa sa na rozklade bielkovín, tukov a sacharidov, na regulácii krvného tlaku a riadení fungovania imunitného systému. V klinickej praxi sa analýza 17 OH progesterónu využíva na hodnotenie funkcie nadobličiek, diagnostiku ochorení nadobličiek a kontrolu rizík patologického tehotenstva u žien.
Štúdia na 17 OH progesteróne sa uskutočňuje pomocou enzýmového imunotestu. Na vykonanie testu musí pacient darovať niekoľko mililitrov venóznej krvi. Aby ste minimalizovali riziko falošných výsledkov testov, musíte sa pripraviť na štúdiu:
- je dôležité vykonať analýzu na prázdny žalúdok (6-8 hodín po jedle);
- pol hodiny pred testom by ste sa mali zdržať fajčenia;
- ak užívate hormonálne lieky, odporúča sa o tom informovať lekára (v prípade potreby prestať užívať lieky).
Kedy urobiť analýzu na 17 OH progesterón? Hladina tohto hormónu podlieha denným výkyvom. Najnižšia koncentrácia 17-OH sa pozoruje v noci, najvyššia - ráno. Preto je dôležité, aby všetky skupiny ľudí, ktorým je tento test pridelený, ho absolvovali ráno. Tiež obsah príslušného steroidu závisí od fázy menštruačného cyklu u žien. Lekári odporúčajú testovanie hydroxyprogesterónu na tretí až piaty deň cyklu (vo folikulárnej fáze).
Kedy je naplánovaná táto štúdia? Analýza na 17 OH progesterón sa predpisuje, keď má pacient symptómy alebo podozrenie na patológiu nadobličiek. Tento zoznam obsahuje množstvo chorôb, o ktorých sa bude diskutovať nižšie. Za zmienku tiež stojí, že jedným zo znakov patologického obsahu 17-OH u žien je porušenie menštruačného cyklu. V tomto prípade je potrebné vykonať štúdiu o tomto steroide.
Je dôležité poznamenať, že pri plánovaní tehotenstva je predpísaná štúdia o 17-OH. V tomto prípade je potrebná štúdia na posúdenie vývoja patológie nadobličiek u nenarodeného dieťaťa, ako aj na kontrolu syntézy pohlavných hormónov, ktorých rovnováha je obzvlášť dôležitá pri plánovaní tehotenstva.Norm 17 OH progesterón
Miera výskumu 17 oh progesterónu sa líši v závislosti od pohlavia a veku pacienta, ako aj od trvania tehotenstva u žien. Tabuľka 1 ukazuje referenčné hodnoty pre 17-OH.
Tabuľka 1. 17 progesterón OH, norma u mužov a žien, v závislosti od veku
U mužov starších ako osemnásť rokov sa norma pohybuje od 1,52 do 6,36 nmol / l.
U žien existuje korelácia s fázou menštruačného cyklu:
- folikulárny 1,24–8,24 nmol/l;
- luteálny 0,99–11,51 nmol/l.
Tabuľka 2 ukazuje referenčnú hodnotu obsahu steroidov v závislosti od gestačného veku.
Tabuľka 2. 17 OH norma progesterónu
Dešifrovanie výsledkov štúdie
Keď máte príznaky patológie nadobličiek, musíte urobiť krvný test. Čo môže odhaliť?
- normálne hladiny hormónov. Ak nie sú žiadne odchýlky od referenčných hodnôt, potom sa nie je čoho báť, neexistujú žiadne patológie.
- Mierne zvýšenie koncentrácie 17-OH. Tento indikátor je charakterizovaný stredne závažným priebehom adrenálnej hyperplázie. Toto ochorenie je spôsobené abnormálnym rastom tkaniva. Zväčšenie nadobličiek hrozí narušením hormonálnej rovnováhy, čo má za následok celý rad patologických abnormalít. Pri plánovaní tehotenstva je mimoriadne dôležité venovať pozornosť tejto patológii. Do tejto kategórie by mala byť zahrnutá aj vrodená adrenálna hyperplázia u detí. U detí so zistenou patológiou je dôležité pravidelne vykonávať analýzu 17-OH.
- Významné zvýšenie koncentrácie 17-OH. Vyskytuje sa hlavne u novorodencov s nedonosenými alebo ťažkou kongenitálnou adrenálnou hyperpláziou. V tomto prípade je potrebné vynaložiť maximálne úsilie na zníženie hladiny 17-OH.
- Zvýšené hladiny hormónov možno pozorovať u žien s nádormi benígnej a malígnej povahy. Takéto formácie sú spravidla lokalizované vo vaječníkoch alebo nadobličkách. Je dôležité venovať pozornosť tejto skupine patológií, pri ktorých sa nachádzajú nasledujúce príznaky: nadmerný rast vlasov, tvorba akné, menštruačné nepravidelnosti. Keď sa takéto príznaky objavia, odporúča sa vykonať test niekoľkokrát na kontrolu rastu nádoru a pri plánovaní tehotenstva.
Pri zvýšenom 17 OH progesterónu je vo väčšine prípadov potrebné vykonať ďalšie hormonálne testy a predpísať liečbu. Terapia tohto patologického stavu spočíva v užívaní hormonálnych liekov (dexametazón, metylprednizolón). Pri konzumácii týchto liekov je možný mierny prírastok hmotnosti v dôsledku zadržiavania vody v tele.
Keď je predpísaný priebeh liečby hormonálnymi liekmi, je dôležité počas tehotenstva opakovať krvné testy na 17 OH progesterón. To pomôže kontrolovať hladinu steroidu v tele a včas zastaviť liečbu, keď dosiahne normu. Pri hormonálnej terapii pre tehotné ženy je dôležité nepoškodiť nenarodené deti.
Je dôležité poznamenať, že pri zvýšenej hladine hormónu by mal lekár príslušného profilu dešifrovať výsledky a predpísať terapiu. Samopodávanie hormonálnych liekov môže nielen znížiť hladinu steroidu, ale tiež spôsobiť značné poškodenie tela a viesť k nezvratnému poškodeniu.
Kedy je výsledok štúdie znížený?
- znížený 17-OH reaguje na pozitívnu dynamiku liečby;
- Addisonova choroba (chronická nedostatočnosť nadobličiek, často sa prejavuje u detí), pri tejto chorobe nadobličky strácajú schopnosť produkovať hormóny v objeme, ktorý telo vyžaduje;
- pseudohermafroditizmus u mužov (zriedkavá hormonálna porucha).
Keď sa výsledok štúdie zníži, hlavným cieľom terapie je odstrániť zdroj patologického poklesu hladiny steroidov v krvi. Pozitívna dynamika ochorenia prinesie indikátor späť do normálu. Hormonálna terapia v tomto prípade môže slúžiť len ako podpora.
Progesterón je ženský pohlavný hormón. Jeho hlavnou úlohou je udržať tehotenstvo u psov.
Kedy sú predpísané hladiny progesterónu?
- hodnotenie aspektov funkcie vaječníkov u sučiek a mačiek;
- určenie času ovulácie na určenie času párenia (u sučiek);
- predpovedanie dátumu narodenia;
- potvrdenie prítomnosti zvyšku ovariálneho tkaniva;
- posúdenie funkcie žltého telieska v prípadoch potratu;
- detekcia asymptomatického estru;
- detekcia prítomnosti luteálnych cýst atď.
Vo veterinárnej praxi sa najčastejšie vyšetruje hladina progesterónu na určenie optimálneho času párenia. Toto je mimoriadne dôležité pri umelom oplodnení mrazeným alebo chladeným semenom, alebo keď je samec vo veľkej vzdialenosti a vy potrebujete vedieť presný dátum párenia, aby ste mohli priviesť sučku alebo samca.
Ako pripraviť zviera na výskum?
Nie je potrebná žiadna špeciálna príprava. Odber krvi sa zvyčajne robí ráno nalačno. Hlavnou podmienkou je, že zviera by nemalo užívať lieky, ktoré ovplyvňujú hladinu progesterónu.
Kedy sa má test vykonať?
Štúdia hladiny progesterónu sa môže vykonávať každé 2-3 dni, počnúc 3-5 dňami od začiatku estru. Zvyčajne je analýza hotová do 24 hodín. Priemerná doba analýzy je do 4 hodín.
Aká je metóda výskumu?
Štúdia sa uskutočňuje pomocou enzýmového imunotestu (ELISA).
Ide o kvantitatívnu metódu stanovenia hladiny progesterónu v krvnom sére. Štúdia sa uskutočňuje v laboratóriu s použitím vhodného analyzátora enzýmovej imunoanalýzy s použitím špeciálnych činidiel.
Princíp stanovenia progesterónu je založený na použití kompetitívnej metódy ELISA. Myšacie monoklonálne protilátky proti progesterónu sú imobilizované na vnútornom povrchu jamiek tablety. Progesterón testovanej vzorky súťaží s konjugovaným progesterónom o väzbu na protilátky na povrchu jamky. Výsledkom je plastom viazaný „sendvič“ obsahujúci peroxidázu. Počas inkubácie s roztokom tetrametylbenzidínového substrátu dochádza k zafarbeniu roztokov v jamkách. Intenzita farby, ktorá sa určuje na analyzátore, je nepriamo úmerná koncentrácii progesterónu v testovanej vzorke.
Ako interpretovať výsledky analýzy?
Kvantitatívna hodnota progesterónu v krvi sa stanovuje v pre- a postovulačných obdobiach. Hladina progesterónu v krvnom sére u rôznych psov aj u toho istého jedinca (z cyklu na cyklus) sa môže pomerne rýchlo meniť.
Priemery sú uvedené v tabuľky.
Výsledky v rôznych laboratóriách sa môžu líšiť. Závisí to od nastavení prístroja a činidiel. Presnú interpretáciu výsledkov by mal vykonať veterinárny lekár, ktorý má príslušnú kvalifikáciu a skúsenosti.
Optimálny čas párenia:
Keď hladina progesterónu dosiahne 15,9 nmol / l (5 ng / ml), párenie sa uskutoční po 24-48 hodinách.
Umelé oplodnenie chladeným semenom sa vykonáva 4 dni po dosiahnutí hladiny progesterónu 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) alebo 48 hodín po dosiahnutí 15,9 nmol/l (5 ng/ml).
AI so zmrazenou spermou sa vykonáva 5 dní po 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) alebo 72 hodín po 15,9 nmol/l (5 ng/ml)
Aký je prínos tejto štúdie?
Určenie načasovania ovulácie umožňuje zvýšiť nielen percento úspešných párení či umelého oplodnenia, ale aj plodnosť. A ďalšie výskumné metódy založené na použití vaginálnych náterov a
Ceny pohlavných hormónov (reprodukčné štúdie)
Hormóny hrajú dôležitú úlohu v regulácii reprodukčného systému. Zisťovanie obsahu hormónov slúži na zistenie príčin ženskej aj mužskej neplodnosti, pri ktorej je v mnohých prípadoch na prvom mieste hormonálna regulácia.
Folikuly stimulujúci hormón (FSH) a luteinizačný hormón (LH) syntetizované v hypotalame s určitou frekvenciou a intenzitou v závislosti od menštruačného cyklu. LH a FSH sú určujúce faktory regulácie ženských pohlavných hormónov vaječníkov - estrogénov: estradiol (E2), estrón, estriol a progesterón.
Hlavné z estrogénu na posúdenie endokrinnej aktivity folikulov je estradiol. U žien vo fertilnom veku sa tvorí vo ovariálnom folikule a endometriu. Užívanie perorálnych kontraceptív zvyšuje koncentráciu estradiolu v krvnom sére.
Progesterón - hormón produkovaný žltým telom , jeho hlavným cieľovým orgánom je maternica .
Prolaktín u žien je nevyhnutný pre vývoj mliečnych žliaz a laktáciu. Koncentrácia prolaktínu v krvi sa zvyšuje pri fyzickej námahe, hypoglykémii, tehotenstve, laktácii, strese. Po menopauze sa koncentrácia prolaktínu znižuje.
Testosterón- androgénny hormón zodpovedný za sekundárne pohlavné znaky u mužov. Testikulárne bunky sú hlavným zdrojom testosterónu. Testosterón podporuje spermatogenézu, stimuluje erytropoézu a je tiež nevyhnutný na udržanie libida a potencie.
Chorionický gonadotropín (beta hCG)– jeho fyziologickou úlohou je stimulácia progesterónu prostredníctvom žltého telieska v skorých štádiách tehotenstva.
17-alfa-hydroxyprogesterón (17 OH - progesterón) je prekurzorom kortizolu. Hormón sa tvorí v nadobličkách, vaječníkoch, semenníkoch a placente.
Dehydroepiandrosterón sulfát (DHEA-S) syntetizované v nadobličkách a vaječníkoch.
Indikácie
Definícia folikuly stimulujúci hormón (FSH) a luteinizačný hormón (LH) odporúča sa pri: poruchách menštruačného cyklu, neplodnosti, silnom menštruačnom krvácaní, potrate, predčasnom pohlavnom vývoji a oneskorenom pohlavnom vývoji, retardácii rastu, syndróme polycystických ovárií, endometrióze, sledovanie účinnosti hormonálnej terapie.
Prolaktín - jeho definícia sa odporúča pri neplodnosti, amenoree, dysfunkcii vaječníkov. Je potrebné predpísať prolaktín v kombinácii so stanovením TSH (pretože nadmerná tvorba TSH môže viesť k hyperprolaktinémii). Pri herpetickej infekcii a chirurgických zákrokoch na mliečnej žľaze sú zaznamenané zvýšené hodnoty prolaktínu.
Testosterón- jeho povýšenie pozorované pri idiopatickej predčasnej puberte a hyperplázii kôry nadobličiek u chlapcov, extragonadálnych nádoroch u mužov, arrhenoblastómoch, feminizujúcom testikulárnom syndróme.
pokles koncentrácia testosterónu sa pozoruje pri urémii, zlyhaní pečene, kryptorchizme.
Chorionický gonadotropín (beta hCG) - jeho zvýšená koncentrácia v krvi sa pozoruje pri absencii ultrazvukových príznakov tehotenstva (v maternici aj mimo nej). Pri hodnotení výsledkov beta-CHG v prenatálnej diagnostike je potrebné vziať do úvahy, že množstvo liekov (syntetické gestagény: dufaston, dydrogesterón, progestogel (lokálne), noretisterónacetát), široko používané na liečbu potratu, aktivuje syntézu beta-CHG. Pri viacpočetných tehotenstvách stúpa beta hCG úmerne k počtu plodov.
Definícia 17-alfa-hydroxyprogesterón (17OH progesterón) hrá vedúcu úlohu v diagnostike andrenogenitálneho syndrómu, ktorý je sprevádzaný zvýšenou produkciou kortizolu, ktorý reguluje sekréciu ACTH. Zvýšené hodnoty 17 OH-progesterónu sa pozorujú pri nádoroch kôry nadobličiek.
Definícia dehydroepiandrosterón sulfát (DHEA-S) sa používa na rozlíšenie pôvodu androgénov: zvýšený obsah DHEA-S v nadobličkách, znížený obsah v pôvode zo semenníkov.
Metodológia
Stanovenie pohlavných hormónov folikuly stimulujúceho hormónu (FSH) a luteinizačného hormónu (LH), estradiolu - E2, progesterónu, prolaktínu, testosterónu, beta hCG, dehydroepiandrosterón sulfátu (DHEA-S) sa vykonáva imunochemickou metódou na analyzátore "Architekt 2000".
Stanovenie 17-alfa-hydroxyprogesterónu (17OH progesterónu) sa uskutočňuje pomocou enzýmového imunotestu.
Školenie
24 hodín pred odberom krvi je potrebné zdržať sa fyzickej aktivity, užívania alkoholu a drog, zmien stravovania. V tejto dobe sa musíte zdržať fajčenia.
FSH, LH, estradiol, testosterón, DHEA-S, 17OH-progesterón - od 2-5 dní cyklu;
prolaktín, progesterón - od 22-24 dní cyklu.
Ranné lieky je vhodné užiť po odbere krvi (ak je to možné). Vyhnite sa užívaniu nasledujúcich liekov: androgény, dexametazón, metyrapón, fenotiazíny, perorálne kontraceptíva, stilbén, gonadotropíny, klomifén, tamoxifén.
Pred darovaním krvi by sa nemali robiť nasledovné procedúry: injekcie, punkcie, celková masáž tela, endoskopia, biopsia, EKG, RTG vyšetrenie, najmä so zavedením kontrastnej látky, dialýza.
Ak napriek tomu došlo k miernej fyzickej aktivite, musíte si pred darovaním krvi oddýchnuť aspoň 15 minút.
Je veľmi dôležité, aby sa tieto odporúčania prísne dodržiavali, pretože iba v tomto prípade sa získajú spoľahlivé výsledky krvného testu.
Štúdie ELISA:
Laboratórna diagnostika porúch reprodukčného systému (2. časť)
Nechaev V.N., Ph.D.
Stanovenie hladiny prolaktínu
Prvým stupňom laboratórneho vyšetrenia osôb oboch pohlaví s poruchami reprodukcie na odporúčanie WHO je meranie koncentrácie prolaktín(mliečny hormón) v sére (plazme) krvi. Prolaktín priamo neovplyvňuje funkčnú aktivitu pohlavných žliaz, pričom hladina prolaktínu v krvi jednoznačne koreluje so stavom hypotalamus a adenohypofýza. Prolaktín reguluje sekréciu mlieka počas laktácie. Prolaktín je antagonista hormónov FSH a LG, a pri zvýšení tvorby prolaktínu dochádza k narušeniu hormonálnej funkcie vaječníkov a vzniku hyperprolaktinemickej formy neplodnosti. U dojčiacich žien sa pozoruje fyziologická hyperprolaktinémia. U žien, ktoré nedojčia, môže byť zvýšená hladina prolaktínu spôsobená niektorými liekmi, nádorom hypofýzy alebo poruchou hypofýzy. Jedným z prejavov hyperprolaktinémie je uvoľňovanie kolostra alebo mlieka z mliečnych žliaz, najmä u nulipar. Patologické zmeny v tele so zvýšenými alebo zníženými hladinami prolaktínu sú uvedené v tabuľke 1.
Stôl 1. Patologické zmeny v tele so zvýšenou alebo zníženou hladinou prolaktínu
Prolaktín sa nachádza v krvnom sére v troch rôznych formách. Prevažuje biologicky a imunologicky aktívna monomérna forma (približne 80 %), 5-20 % je prítomných ako dimérna inaktívna forma a 0,5-5 % ako tetramérna, tiež inaktívna forma. Tabuľka 2 ukazuje referenčné koncentrácie monomérnej formy (biologicky aktívnej) prolaktínu.
Tabuľka 2 Referenčné hodnoty koncentrácie prolaktínu v sére
Indikácie na určenie:
Ženy v plodnom období:
- Menštruačné nepravidelnosti a amenorea
- Neplodnosť
- poruchy laktácie
- Galaktorea
- Syndróm hyperfunkcie hypofýzy
- Nedostatočnosť hypofýzy
- testikulárna nedostatočnosť
- Azoospermia, oligospermia
- Galaktorea
- Syndróm hyperfunkcie hypofýzy
- Nedostatočnosť hypofýzy
- Substitučná liečba po odstránení nádoru hypofýzy
Príprava vzorky na analýzu
Prolaktín má pomerne výrazný cirkadiánny rytmus s maximálnym uvoľňovaním hormónu počas nočného spánku. Odber krvi sa odporúča ráno (8-10 hodín), vo včasnej folikulínovej fáze cyklu (u žien s pravidelným cyklom) a v pokojnom prostredí. Aby sa vylúčilo náhodné zvýšenie hladiny prolaktínu v reakcii na stres (odber krvi), je potrebná 2-3-násobná štúdia.
Materiál na výskum:
- krvné sérum
FSH a LH sú „hlavné“ reprodukčné hormóny
Ak stanovenie hladiny prolaktínu v krvi poskytuje informácie o funkčnom stave hypotalamo-hypofyzárneho komplexu ako celku, potom na posúdenie aktivity reprodukčného systému je potrebné meranie obsahu gonadotropných hormónov - FSH a LH v krvi. sa používa.
Práve tieto hormóny zabezpečujú rast a vývoj folikulov (FSH) a stimulujú syntézu pohlavných hormónov v gonádach (LH). Sekrécia LH a FSH je zase pod kontrolou pohlavných hormónov pohlavných žliaz (mechanizmus negatívnej spätnej väzby). Zvýšenie hladiny pohlavných hormónov, predovšetkým estradiolu, v krvi je sprevádzané inhibíciou sekrécie gonadotropínov (a naopak). Sekrécia FSH je navyše regulovaná inhibínom, polypeptidom syntetizovaným gonádami. V predovulačnom období zrelý dominantný folikul vylučuje do krvi veľké množstvo estradiolu, pod vplyvom ktorého dochádza k ovulačnému uvoľňovaniu LH a FSH (fenomén pozitívnej spätnej väzby). Tento vzostup (ovulačný vrchol) netrvá veľmi dlho, 1-2 dni. Intenzita sekrécie gonadotropínov v periovulačnom období určuje budúcu funkčnú aktivitu corpus luteum. Denný (cirkadiánny) rytmus sekrécie LH a FSH u dospelých nie je výrazný, na rozdiel od adolescentov, súčasne je pre gonadotropíny veľmi charakteristický cirkadiánny (hodinový) rytmus sekrécie.
Moderné testovacie systémy ELISA na stanovenie FSH a LH sú založené na použití monoklonálnych protilátok, ktoré nereagujú skrížene s úzko súvisiacimi hormónmi TSH a hCG.
Tabuľka 3 Referenčné hodnoty koncentrácie FSH a LH v krvnom sére.
Príprava vzorky na analýzu
Hladiny gonadotropínov nemajú cirkadiánny rytmus, nie je potrebné odoberať krv nalačno. Malo by sa pamätať na to, že pri zachovanom menštruačnom cykle je možné jednorazové stanovenie gonadotropínov vykonať iba vo včasnej fáze folikulu (6-8 dní cyklu). Presnejšie výsledky získate odberom 2-3 vzoriek krvi s intervalom 30-40 minút a následným spojením výsledných sér. Nie je možné stanoviť LH a FSH raz vo vzorke krvi odobratej uprostred cyklu na zistenie ovulácie. Načasovanie ovulácie pre cykly rôznej dĺžky je rôzne (asi 14 dní pred začiatkom očakávanej menštruácie) a môže sa posunúť o 1-2 dni oproti očakávaným. V tomto ohľade výsledky jediného stanovenia gonadotropínov v 13. až 14. deň cyklu vo väčšine prípadov poskytujú nepravdivé informácie o povahe cyklu. Pre PH je charakteristická najmä pulzujúca povaha sekrécie v intervaloch 1-2 hodín, takže výsledky jednotlivých analýz by sa mali považovať za približné. Vzorky séra alebo plazmy po vytvorení zrazeniny a/alebo separácii červených krviniek sú stabilné po dobu dostatočnú na odoslanie vzoriek poštou. Zmrazené vzorky môžu byť skladované po dlhú dobu.
Krv sa musí odoberať ihlou so širokým otvorom a samospádom alebo miernym podtlakom piestu injekčnej striekačky.
Materiál na výskum:
- krvné sérum
- heparinizovanej krvnej plazmy
Stanovenie pohlavných hormónov
Pre kompletné vyšetrenie stavu reprodukčného systému je nepochybne potrebné mať testovacie systémy ELISA na stanovenie pohlavných hormónov (estradiol, testosterón, progesterón) v krvnom sére. Ak je syntéza pohlavných hormónov v pohlavných žľazách výrazne znížená, potom mechanizmom negatívnej spätnej väzby sa sekrécia gonadotropínov prudko zvyšuje, takže diagnóza nedostatočnej funkcie vaječníkov nespôsobuje ťažkosti.
V diagnostickom algoritme na vyšetrenie podozrenia na endokrinnú neplodnosť je kľúčové určiť koncentrácie LH, FSH, estradiolu a testosterónu.
Metódy na stanovenie týchto hormónov sú dnes založené najmä na enzýmovej imunoanalýze alebo imunofluorescenčnej technológii, čo zabezpečuje ich široké využitie.
Estradiol
Estradiol- hlavný estrogénový steroidný hormón. Katabolizmus v pečeni vedie k premene estradiolu na estriol alebo na glukuronidy a sulfáty vylučované močom.
Medzi ženami estradiol syntetizované a vylučované v vaječníkov, v pošve a granulózových bunkách folikulov. Stimuluje vývoj prvej fázy ovariálneho cyklu, čo spôsobuje zvýšenie svalového proteínu maternice a hyperpláziu endometria. Na úrovni hypofýzy pôsobí aj na sekréciu LH, FSH. Počas prvej fázy cyklu sa koncentrácia postupne zvyšuje estradiol vedie k masívnej sekrécii LG, ktorý „naštartuje ovuláciu“. Počas tehotenstva koncentrácia estradiol zvyšuje. Analýza estradiol v krvnej plazme je hlavným parametrom pri monitorovaní indukcia ovulácie a stimulácia vaječníkov. Zvýšenie rýchlosti syntézy estradiol a jeho koncentrácia na konci stimulácie odráža počet a kvalitu dozrievajúcich folikulov.
Tabuľka 4 Referenčné hodnoty koncentrácie estradiolu v krvnom sére.
Indikácie na určenie:
- kontrola stimulovanej ovulácie,
- hodnotenie funkcie vaječníkov,
- menštruačné nepravidelnosti,
- amenorea hypotalamického pôvodu,
- nádory produkujúce estrogén
- kontrola liečby neplodnosti,
- osteoporóza;
muži:
- gynekomastia,
deti:
- sledovanie priebehu puberty.
Tabuľka 5 Choroby a stavy, pri ktorých sa môže meniť koncentrácia estradiolu v krvnom sére
Progesterón
Progesterón- jeden z hlavných steroidných hormónov. V malých množstvách je vylučovaný bunkami žltého telieska vaječníkov počas luteálnej fázy menštruačného cyklu. Pôsobí na endometrium spolu s estradiol, v dôsledku čoho menštruačný cyklus prechádza z proliferačnej fázy do sekrečnej. úroveň progesterón dosiahne svoje maximum na 5. - 7. deň po ovulácii. Ak nedôjde k oplodneniu, hladina progesterónu klesá a naopak, ak k oplodneniu došlo, žlté teliesko naďalej vylučuje veľké množstvo progesterón predtým 12 týždňov tehotenstva. Potom ide do akcie placenta, ktorý sa stáva hlavným miestom pre produkciu hormónu. Progesterón tiež vylučované v malých množstvách kôry nadobličiek a semenníky a je medziproduktom pri syntéze androgénov.
V krvi progesterón nachádza sa ako v zadarmo, ako aj v súvisiace s nosnými proteínmi (albumín a transkortín) stavy. Polčas rozpadu hormónu je niekoľko minút, dve tretiny progesterónu sa metabolizujú v pečeni a vylučujú sa do moču ako voľný pregnandiol, pregnandiol glukuronid a pregnandiol sulfát.
Tabuľka 6 Referenčné hodnoty koncentrácie progesterónu v sére
Indikácie na určenie:
ženy:
- poruchy ovulácie,
- nedostatok ovulácie s oligomenoreou alebo bez nej,
- nedostatočná funkcia corpus luteum;
- presné určenie ovulácie
- indukcia ovulácie s menopauzálnym ľudským gonadotropínom alebo klomifénom (s hCG aj bez hCG);
- potvrdenie ovulácie (stanovenie v druhej polovici cyklu);
- sledovanie priebehu ovulácie u žien, ktoré podstúpili spontánny potrat;
muži a deti:
- porucha biosyntézy steroidov.
Progesterón spôsobuje zvýšenie bazálnej teploty. V prípade diagnózy insuficiencie žltého telieska sa odbery robia 3x (vždy po 3-4 dňoch od predchádzajúceho odberu). V najmenej 2 prípadoch by koncentrácia progesterónu mala prekročiť 10 mcg / ml.
Testosterón
Medzi ženami testosterónu vytvorený v kôry nadobličiek a vaječníkov v pomere 1:1 a slúži ako substrát pre tvorbu estrogénov a tiež stimuluje predovulačné uvoľňovanie LH. Hladiny testosterónu u žien sa vekom nemenia. Normálne hladiny testosterónu u žien sú 0 - 0,9 ng/ml.
Indikácie na určenie:
- Klinefelterov syndróm a iné chromozomálne ochorenia;
- hypopituitarizmus;
- enzymatické poruchy syntézy androgénov;
- hirsutizmus a virilizácia žien;
- väčšina nádorov vaječníkov a obličiek produkujúcich androgény.
U žien je potrebné stanoviť aj hladinu DHEA – sulfátu, ktorý má podobný účinok ako testosterón (u mužov je to adjuvans pri štúdiu testosterónu).
Materiál na výskum:
- sérum žien na 3. – 7. deň menštruačného cyklu, najlepšie medzi 8. a 10. hodinou ráno.
Sérový steroid viažuci globulín (SHB)
SSH je proteín, ktorý viaže a prenáša testosterón a estradiol. Okrem transportnej funkcie SSH chráni testosterón a estradiol pred metabolickou aktivitou na ceste od žľazy, ktorá ich vylučuje, do cieľového orgánu a vytvára v tele akési skladisko hormónov. SSG je kyslý glykoproteín s molekulovou hmotnosťou 45 000 daltonov. Porušenie syntézy SSH vedie k porušeniu dodávky hormónov do cieľových orgánov a výkonu ich funkčnej aktivity. Koncentráciu DES v krvnom sére zvyšujú estrogény, perorálne kontraceptíva, znižujú androgény, T4, TSH.
Tabuľka 7 Referenčné hodnoty pre koncentráciu suchého krvného séra
Prekurzory biosyntézy androgénov a estrogénov
17a-Hydroxyprogesterón
17a-Hydroxyprogesterón (17OH-P) je intermediárny steroid v biosyntéze glukokortikoidov, androgénov a estrogénov, ktorý sa syntetizuje z progesterónu a 17a-hydroxypregnenolónu. Vylučovaný kôrou nadobličiek, vaječníkmi a semenníkmi cirkuluje v krvi, ako voľný, tak aj viazaný, ako progesterón, s dvoma proteínmi - albumínom a transkortínom. Polčas rozpadu 17OH-P je niekoľko minút. Metabolizuje sa v pečeni a vylučuje sa močom ako pregnantriol.
17OH-P je produkovaný v malom množstve vaječníkmi počas folikulárnej fázy, potom sa jeho koncentrácia zvyšuje a zostáva konštantná počas luteálnej fázy. Ak nedôjde k oplodneniu, hladina 17OH-P klesá. Po implantácii oplodneného vajíčka corpus luteum pokračuje vo vylučovaní 17OH-P.
Analýza 17OH-P je veľmi dôležitá pre diagnostiku kongenitálnej adrenálnej hyperplázie a detekciu nedostatku enzýmu zodpovedného za výskyt tohto ochorenia.
Hladina 17OH-P v krvi je zvlášť orientačná a má rozhodujúci význam pri diagnostike deficitu 21-hydroxylázy u novorodencov.
V dospelosti, s čiastočným alebo neskorým nástupom nedostatku enzýmu, môže byť hlavná hladina aktivity 17OH-P normálna alebo zvýšená
Tabuľka 8 Referenčné hodnoty koncentrácie 17OH-P v krvnom sére
Indikácie na určenie:
- vrodený nedostatok enzýmov zodpovedný za výskyt adrenálnej hyperplázie;
- ochorenia spojené s nedostatkom 21-hydroxylázy u novorodencov (vysoké hladiny 17OH-P);
- čiastočne alebo neskoro manifestovaný nedostatok 21-hydroxylázy (normálna alebo vysoká hladina 17OH-P);
- diferenciálna diagnostika neplodnosti.
Materiál na výskum:
- krvné sérum;
Dehydroepiandrosterón
Dehydroepiandrosterón (DHEA) je jeden z najdôležitejších androgénov (presnejšie ich prekurzor), syntetizovaný kôrou nadobličiek a gonádami z 17OH-P. Je katabolizovaný na virilizujúce androgény: androsténdiol, testosterón a dihydrotestosterón.
Väčšina DHEA sa modifikuje pridaním sulfátu k (DHEA-S), ktorý je biologicky neaktívny, ale odstránením sulfátovej skupiny sa obnoví aktivita DHEA. DHEA je vlastne prohormón, má kratší polčas a vyššiu rýchlosť metabolizmu, a preto je jeho koncentrácia v krvi 300-krát nižšia ako hladina DHEA-S.
DHEA sa vyznačuje cirkadiánnou úrovňou sekrécie s maximálnym uvoľňovaním hormónu ráno. V menštruačnom cykle nie sú pozorované významné zmeny v jeho koncentrácii. Na rozdiel od testosterónu, DHEA v cirkulujúcej krvi nie je spojený s DES, takže zmena koncentrácie väzbových proteínov neovplyvňuje jeho hladinu.
Tabuľka 9 Referenčné hodnoty koncentrácie DHEA v sére
Indikácie na určenie:
- hirsutizmus;
- virilizácia;
- oneskorená puberta
Materiál na výskum:
- krvné sérum;
- krvná plazma s prídavkom heparínu.
Dehydroepiandrosterón sulfát
DHEA-S sa syntetizuje v nadobličkách (95 %) a vo vaječníkoch (5 %), vylučuje sa močom a tvorí hlavnú frakciu 17a-ketosteroidov. Stanovenie koncentrácie DHEA-C v krvnom sére nahrádza štúdium 17a-ketosteroidov v moči.
DHEA-S sa vylučuje rýchlosťou 10-20 mg/24 hodín (35-70 µmol/24 hodín) u mužov a 3,5-10 mg/24 hodín (12-35 µmol/24 hodín) u žien a bez cirkadiánnych rytmus. Neviaže sa na špecifické plazmatické proteíny, a preto ich koncentrácia neovplyvňuje hladiny DHEA-S. DHEA-S sa však viaže na sérový albumín.
Okrem DHEA-S je DHEA prítomný v cirkulujúcej krvi, čo predstavuje ¼ a ½ rýchlosti sekrécie DHEA-S u mužov a žien. Vďaka vysokej koncentrácii DHEA-S v krvi, dlhému polčasu rozpadu a vysokej stabilite, a pretože pochádza hlavne z nadobličiek, je DHEA-S výborným indikátorom sekrécie androgénov.
Ak majú ženy zvýšené hladiny testosterónu, potom meraním koncentrácie DHEA-S možno zistiť, či je to spôsobené poruchou funkcie nadobličiek alebo ochorením vaječníkov.
Tabuľka 10 Referenčné hodnoty koncentrácie DHEA-S v krvnom sére
Vek |
Koncentrácia (µg/ml) |
Koncentrácia (µmol/l) |
Novorodenci. |
||
Dospelí: |
||
Obdobie tehotenstva |
||
premenopauzálne obdobie |
||
postmenopauzálne obdobie |
Konverzné faktory:
- 1 ng/100 ml = 28,8 nmol/l;
- 1 nmol/l = 2,6 ng/ml
- 1 ng/ml = 368,46 umol/l
Indikácie na určenie:
- nádory nadobličiek;
- diferenciálna diagnostika ochorení vaječníkov;
- osteoporóza;
- oneskorená puberta.
Materiál na výskum:
- krvné sérum;
- krvná plazma s prídavkom heparínu.
Autoimunitné ochorenia reprodukčného systému
Fyziologické vyčerpanie ovariálnych folikulov u žien sa vyskytuje vo veku 45-55 rokov. Zastavenie funkcie vaječníkov pred dosiahnutím veku 40 rokov naznačuje ochorenie známe ako predčasné zlyhanie vaječníkov. Dôsledkom tohto ochorenia je neplodnosť. V niektorých prípadoch môže byť dôvodom autoimunitný proces spojený s tvorbou protilátok proti pohlavným hormónom vaječníkov.
V niektorých prípadoch je vývoj neplodnosti u mužov spôsobený prítomnosťou špecifických protilátok v krvnom sére alebo semennej plazme.
Ovariálne protilátky v krvnom sére
Normálne v ženskom krvnom sére nie sú žiadne ovariálne protilátky. Ovariálne protilátky (proti ovariálnym antigénom) boli nájdené u žien s predčasnou menopauzou, neplodnosťou a oplodnením in vitro. Tieto protilátky môžu produkovať Leydigove bunky, ovariálne granulocytové bunky a placentárne bunky. Na stanovenie protilátok proti pohlavným hormónom sa používa metóda nepriamej imunofluorescencie a ELISA. Metóda ELISA vám umožňuje stanoviť celkové aj protilátky proti rôznym triedam imunoglobulínov (IgG, IgM, IgA). Autoimunitné protilátky môžu byť detegované v krvi žien mnoho rokov pred vývojom klinických prejavov predčasného zlyhania vaječníkov.
Metóda ELISA umožňuje okrem ovariálnych protilátok zistiť protilátky proti priehľadnej membráne oocytu – celkové a protilátky tried (IgG, IgM, IgA), ktoré majú rovnakú diagnostickú hodnotu ako ovariálne protilátky.
U žien zvyčajne nie je možná jasná korelácia medzi koncentráciou protilátok v krvnom sére a prognózou fertility.
Protilátky proti spermiám v krvnom sére
Za normálnych okolností v krvnom sére ženy nie sú žiadne protilátky proti spermiám. U mužov sa antispermové protilátky tvoria v dôsledku autoimunitnej reakcie na spermiový epitel. Dôvodom na rozvoj takejto reakcie môže byť trauma semenníkov, bakteriálne a vírusové infekcie a chirurgické operácie na semenníku. Na stanovenie antispermových protilátok sa v súčasnosti používa metóda ELISA, ktorá je vysoko citlivá a špecifická a zároveň umožňuje kvantifikovať protilátky rôznych tried imunoglobulínov (IgG, IgM, IgA), čo umožňuje posúdiť závažnosť a závažnosť autoimunitný proces. Okrem toho u mužov koncentrácia antispermových protilátok koreluje s ohľadom na obnovu plodnosti.
U žien sa protilátky proti protilátkam proti spermiám bežne nevytvárajú, avšak rôzne etiologické faktory (infekcie, autoimunitné ochorenia) môžu viesť k strate imunologickej tolerancie. Ak sú v krvi ženy prítomné antispermové protilátky, dochádza k narušeniu procesov tvorby trofoblastov, rastu a tvorby placenty a implantácie. A to vedie k potratom, preeklampsii, retardácii rastu plodu, placentárnej insuficiencii.
Testovanie protilátok proti spermiám sa odporúča u všetkých párov s nevysvetliteľnou neplodnosťou.
Chorionický gonadotropín (hCG) v krvnom sére
HCG je glykoproteín s molekulovou hmotnosťou približne 46 000, ktorý sa skladá z dvoch podjednotiek, alfa a beta. Zvýšená hladina hCG v krvnom sére sa zistí už 8-12 deň po počatí. Počas prvého trimestra tehotenstva sa koncentrácia hCG rýchlo zvyšuje, zdvojnásobuje sa každé 2-3 dni. Maximálna koncentrácia pripadá na 7-10 týždeň tehotenstva, po ktorom sa koncentrácia hCG začína znižovať a počas druhej polovice tehotenstva zostáva viac-menej stabilná.
Tabuľka 12 Stredné hodnoty koncentrácie hCG na skríning vrodených malformácií plodu v trimestri II a III
Alfa-fetoproteín (AFP) v krvnom sére
AFP je glykoproteín s molekulovou hmotnosťou približne 65 000 kDa, vylučovaný fetálnou pečeňou a žĺtkovým vakom. AFP u plodu je hlavným sérovým proteínom, u dospelých je obsah AFP v krvnom sére zanedbateľný. V druhom trimestri tehotenstva, ak má plod Downov syndróm, je znížená koncentrácia AFP a zvýšená koncentrácia hCG v krvi. S ohľadom na to sa štúdia ELISA na AFP a hCG používa ako metóda hromadného prenatálneho vyšetrenia tehotných žien, pomocou ktorej je možné identifikovať vysoko rizikovú skupinu podľa prítomnosti malformácií plodu alebo Downovho syndrómu. Hodnoty stredných koncentrácií AFP v krvnom sére na skríning vrodených malformácií plodu v II trimestri sú uvedené v tabuľke 13.
Tabuľka 13 Stredné hodnoty koncentrácie AFP pre skríning vrodených malformácií plodu v druhom trimestri
Voľný estriol v sére
Estriol je hlavný steroidný hormón syntetizovaný placentou. Obsah estriolu v krvi tehotnej ženy koreluje s činnosťou nadobličiek plodu. Estriol vstupuje do krvného obehu tehotnej ženy, kde môžete určiť jeho koncentráciu vo voľnom stave. Pri normálne sa vyvíjajúcom tehotenstve sa syntéza estriolu zvyšuje v súlade so zvyšujúcim sa gestačným vekom a rastom plodu (tabuľka 14).
Tabuľka 14 Koncentrácie estriolu v krvnom sére ženy v dynamike fyziologického tehotenstva
Obdobie tehotenstva, týždeň |
Stredná koncentrácia estriolu, nmol/l |
Referenčné hodnoty estriolu, nmol/l |
Pri patológii (výrazné malformácie CNS u plodu, vrodené srdcové chyby, Downov syndróm, retardácia rastu plodu, hypoplázia nadobličiek plodu, intrauterinná smrť plodu) sa koncentrácia voľného stradiolu v krvnom sére tehotnej ženy znižuje.
Hodnoty stredných koncentrácií voľného estradiolu v krvnom sére na skríning vrodených malformácií v druhom trimestri gravidity sú uvedené v tabuľke 15.
Tabuľka 15 Hodnoty stredných koncentrácií voľného estradiolu v krvnom sére na skríning vrodených malformácií v druhom trimestri tehotenstva
Pri Downovom a Edwardsovom syndróme je koncentrácia voľného estradiolu zvyčajne 0,7 MoM.
Na záver konštatujeme, že plošné zavedenie plnohodnotnej ELISA diagnostiky do klinickej praxe výrazne zvýši efektivitu diagnostiky a liečby pacientov s poruchami reprodukčného systému.
Cena: NA ZNAMENIE
Položku môžete pridať do nákupného košíka zadaním množstva