Diagnostyka laboratoryjna. Hormony płciowe (badania rozrodu) Jak przygotować zwierzę do badań


17 OH progesteron (17 hydroksyprogesteron, 17-OPG) jest sterydem, produktem metabolicznym hormonu ciążowego progesteronu i 17 hydroksypregnenolonu. W organizmie człowieka substancja ta jest wytwarzana przez korę nadnerczy, jądra u mężczyzn, jajniki i łożysko u kobiet.

Główną funkcją hydroksyprogesteronu jest udział w syntezie hormonów: kortyzolu, testosteronu i estradiolu. Kortyzol to jeden z najważniejszych hormonów w organizmie człowieka, biorący udział w rozkładzie białek, tłuszczów i węglowodanów, w regulacji ciśnienia krwi oraz kontrolowaniu pracy układu odpornościowego. W praktyce klinicznej analiza 17 OH progesteronu wykorzystywana jest do oceny czynności nadnerczy, diagnostyki chorób nadnerczy oraz kontroli ryzyka patologicznej ciąży u kobiet.

Badanie 17-OH progesteronu przeprowadza się za pomocą testu immunoenzymatycznego. Aby przeprowadzić badanie, pacjent musi oddać kilka mililitrów krwi żylnej. Aby zminimalizować ryzyko fałszywych wyników testu, musisz przygotować się do badania:

  • ważne jest, aby wykonać analizę na pusty żołądek (6-8 godzin po jedzeniu);
  • należy powstrzymać się od palenia na pół godziny przed badaniem;
  • jeśli pacjent przyjmuje leki hormonalne, zaleca się poinformowanie o tym lekarza (w razie potrzeby przerwać przyjmowanie leku).

Kiedy wykonać analizę progesteronu 17 OH? Poziom tego hormonu podlega dobowym wahaniom. Najniższe stężenie 17-OH obserwuje się w nocy, najwyższe – rano. Dlatego ważne jest, aby wszystkie grupy osób, którym przydzielono ten test, wykonały go rano. Również zawartość danego steroidu zależy od fazy cyklu miesiączkowego u kobiet. Lekarze zalecają badanie na obecność hydroksyprogesteronu od trzeciego do piątego dnia cyklu (w fazie folikularnej).

Kiedy zaplanowane jest to badanie? Analiza 17 OH progesteronu jest przepisywana, gdy pacjent ma objawy lub podejrzenia patologii nadnerczy. Ta lista obejmuje szereg chorób, które zostaną omówione poniżej. Warto również zauważyć, że jednym z objawów patologicznej zawartości 17-OH u kobiet jest naruszenie cyklu miesiączkowego. W takim przypadku należy wykonać badanie tego sterydu.

Ważne jest, aby pamiętać, że badanie 17-OH jest zalecane, gdy ma miejsce planowanie ciąży. W takim przypadku badanie jest niezbędne do oceny rozwoju patologii nadnerczy u nienarodzonego dziecka, a także do kontroli syntezy hormonów płciowych, których równowaga jest szczególnie ważna przy planowaniu ciąży.

Norma 17 OH progesteron

Wskaźnik badań dla progesteronu 17 oh jest różny w zależności od płci i wieku pacjentki, a także czasu trwania ciąży u kobiet. Tabela 1 pokazuje wartości odniesienia dla 17-OH.

Tabela 1. 17 progesteron OH, norma u mężczyzn i kobiet, w zależności od wieku

U mężczyzn powyżej osiemnastego roku życia norma wynosi od 1,52 do 6,36 nmol / l.

U kobiet istnieje korelacja z fazą cyklu miesiączkowego:

  • pęcherzykowe 1,24–8,24 nmol/l;
  • lutealny 0,99–11,51 nmol/l.

W tabeli 2 przedstawiono referencyjne wartości zawartości steroidów w zależności od wieku ciążowego.

Tabela 2. 17 Norma progesteronu OH

Rozszyfrowanie wyników badania

Kiedy masz objawy patologii nadnerczy, musisz wykonać badanie krwi. Co może ujawnić?

  1. normalny poziom hormonów. Jeśli nie ma odchyleń od wartości referencyjnych, to nie ma się czego bać, nie ma patologii.
  2. Nieznaczny wzrost stężenia 17-OH. Wskaźnik ten charakteryzuje się umiarkowanie ciężkim przebiegiem przerostu nadnerczy. Ta choroba jest spowodowana nieprawidłowym wzrostem tkanki. Powiększenie nadnerczy grozi zakłóceniem gospodarki hormonalnej, co z kolei pociąga za sobą szereg patologicznych nieprawidłowości. Niezwykle ważne jest zwrócenie uwagi na tę patologię podczas planowania ciąży. Do tej kategorii należy również zaliczyć wrodzony przerost nadnerczy u dzieci. W przypadku dzieci z wykrytą patologią ważne jest okresowe przeprowadzanie analizy na obecność 17-OH.
  3. Znaczący wzrost stężenia 17-OH. Występuje głównie u noworodków z wcześniakami lub ciężkim wrodzonym przerostem nadnerczy. W takim przypadku należy dołożyć wszelkich starań, aby obniżyć poziom 17-OH.
  4. Zwiększony poziom hormonów można zaobserwować u kobiet z guzami o charakterze łagodnym i złośliwym. Takie formacje są z reguły zlokalizowane w jajnikach lub nadnerczach. Warto zwrócić uwagę na tę grupę patologii, w której występują następujące objawy: nadmierne owłosienie, powstawanie trądziku, nieregularne miesiączki. Kiedy pojawią się takie objawy, zaleca się wykonanie testu kilka razy, aby kontrolować wzrost guza i planować ciążę.

Przy podwyższonym stężeniu progesteronu 17 OH w większości przypadków konieczne jest wykonanie dodatkowych badań hormonalnych i przepisanie leczenia. Terapia tego stanu patologicznego polega na przyjmowaniu leków hormonalnych (deksametazon, metyloprednizolon). Podczas spożywania tych leków możliwy jest niewielki przyrost masy ciała z powodu zatrzymywania wody w organizmie.

Kiedy zalecany jest cykl leczenia lekami hormonalnymi, ważne jest, aby podczas ciąży powtórzyć badania krwi na obecność 17 OH progesteronu. Pomoże to kontrolować poziom sterydu w organizmie i przerwać leczenie w odpowiednim czasie, gdy osiągnie normę. Podczas terapii hormonalnej kobiet w ciąży ważne jest, aby nie szkodzić nienarodzonym dzieciom.

Należy zauważyć, że przy podwyższonym poziomie hormonu lekarz o odpowiednim profilu powinien rozszyfrować wyniki i przepisać terapię. Samopodawanie leków hormonalnych może nie tylko obniżyć poziom sterydu, ale także spowodować znaczne szkody dla organizmu i doprowadzić do nieodwracalnych uszkodzeń.

Kiedy następuje obniżenie wyniku badania?

  • zredukowany 17-OH reaguje na dodatnią dynamikę leczenia;
  • choroba Addisona (przewlekła niewydolność kory nadnerczy, często objawiająca się u dzieci), przy tej chorobie nadnercza tracą zdolność do produkcji hormonów w ilości wymaganej przez organizm;
  • pseudohermafrodytyzm u mężczyzn (rzadkie zaburzenie hormonalne).

Gdy wynik badania jest obniżony, wówczas głównym celem terapii jest wyeliminowanie źródła patologicznego obniżenia poziomu steroidów we krwi. Pozytywna dynamika choroby przywróci wskaźnik do normy. Terapia hormonalna w tym przypadku może służyć jedynie jako wsparcie.

progesteron jest żeńskim hormonem płciowym. Jego głównym zadaniem jest utrzymanie ciąży u psów.

Kiedy przepisywany jest poziom progesteronu?

  • ocena aspektów funkcji jajników u suk i kotów;
  • określenie czasu owulacji w celu określenia czasu krycia (u suk);
  • przewidywanie daty urodzenia;
  • potwierdzenie obecności pozostałości tkanki jajnika;
  • ocena funkcji ciałka żółtego w przypadkach aborcji;
  • wykrycie bezobjawowej rui;
  • wykrywanie obecności cyst lutealnych itp.

W praktyce weterynaryjnej najczęściej bada się poziom progesteronu w celu określenia optymalnego czasu krycia. Jest to niezwykle ważne przy sztucznej inseminacji zamrożonym lub schłodzonym nasieniem lub gdy samiec znajduje się w dużej odległości i trzeba znać dokładny termin krycia, aby sprowadzić sukę lub kocura.

Jak przygotować zwierzę do badań?

Nie ma potrzeby specjalnego przygotowania. Pobieranie krwi zwykle odbywa się rano na pusty żołądek. Głównym warunkiem jest to, że zwierzę nie powinno przyjmować leków wpływających na poziom progesteronu.

Kiedy ma być przeprowadzone badanie?

Badanie poziomu progesteronu można przeprowadzać co 2-3 dni, zaczynając od 3-5 dni od wystąpienia rui. Zwykle analiza jest gotowa w ciągu 24 godzin. Średni czas analizy wynosi do 4 godzin.

Jaka jest metoda badawcza?

Badanie przeprowadza się za pomocą testu immunoenzymatycznego (ELISA).

Jest to ilościowa metoda oznaczania poziomu progesteronu w surowicy krwi. Badanie przeprowadzane jest w laboratorium przy użyciu odpowiedniego analizatora immunoenzymatycznego przy użyciu specjalnych odczynników.

Zasada oznaczania progesteronu opiera się na zastosowaniu konkurencyjnej metody ELISA. Mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko progesteronowi są immobilizowane na wewnętrznej powierzchni studzienek tabletki. Progesteron z badanej próbki konkuruje ze skoniugowanym progesteronem o wiązanie z przeciwciałami na powierzchni studzienki. Rezultatem jest otoczona plastikiem „kanapka” zawierająca peroksydazę. Podczas inkubacji z roztworem substratu tetrametylobenzydyny następuje zabarwienie roztworów w studzienkach. Intensywność zabarwienia określana na analizatorze jest odwrotnie proporcjonalna do stężenia progesteronu w badanej próbce.

Jak interpretować wyniki analizy?

Ilościową wartość progesteronu we krwi określa się w okresie przed- i poowulacyjnym. Poziom progesteronu w surowicy krwi, zarówno u różnych psów, jak i u tego samego osobnika (z cyklu na cykl) może zmieniać się dość szybko.

Średnie przedstawiono w stół.

Wyniki w różnych laboratoriach mogą się różnić. Zależy to od ustawień aparatu i odczynników. Dokładnej interpretacji wyników powinien dokonać lekarz weterynarii posiadający odpowiednie kwalifikacje i doświadczenie.

Optymalny czas krycia:

Kiedy poziom progesteronu osiągnie 15,9 nmol / l (5 ng / ml), krycie przeprowadza się po 24-48 godzinach.

Sztuczną inseminację schłodzonym nasieniem przeprowadza się 4 dni po osiągnięciu poziomu progesteronu 7,95 nmol/l (2,5 ng/ml) lub 48 godzin po osiągnięciu poziomu 15,9 nmol/l (5 ng/ml).

AI z zamrożonym nasieniem wykonuje się 5 dni po 7,95 nmol/L (2,5 ng/mL) lub 72 godziny po 15,9 nmol/L (5 ng/mL)

Jaka jest korzyść z tego badania?

Określenie terminu owulacji pozwala zwiększyć nie tylko odsetek udanych krycia czy sztucznej inseminacji, ale także płodność. I dodatkowe metody badawcze oparte na wykorzystaniu wymazów z pochwy i

Ceny hormonów płciowych (badania reprodukcyjne)

Hormony odgrywają ważną rolę w regulacji układu rozrodczego. Oznaczanie zawartości hormonów służy ustaleniu przyczyn niepłodności zarówno żeńskiej, jak i męskiej, w której w wielu przypadkach regulacja hormonalna jest na pierwszym miejscu.

Hormon folikulotropowy (FSH) oraz hormon luteinizujący (LH) syntetyzowany w podwzgórzu z określoną częstotliwością i intensywnością w zależności od cyklu miesiączkowego. LH i FSH są czynnikami determinującymi regulację żeńskich hormonów płciowych jajników - estrogenów: estradiol (E2), estron, estriol oraz progesteron.

Główny z estrogenu do oceny aktywności wewnątrzwydzielniczej mieszków włosowych estradiol. U kobiet w wieku rozrodczym powstaje w pęcherzyku jajnikowym i endometrium. Przyjmowanie doustnych środków antykoncepcyjnych zwiększa stężenie estradiolu w surowicy krwi.

progesteron - hormon produkowany przez ciałko żółte , jego głównym narządem docelowym jest macica .

Prolaktyna u kobiet jest niezbędny do rozwoju gruczołów sutkowych i laktacji. Stężenie prolaktyny we krwi wzrasta wraz z wysiłkiem fizycznym, hipoglikemią, ciążą, laktacją, stresem. Po menopauzie stężenie prolaktyny spada.

testosteron- hormon androgenny odpowiedzialny za drugorzędowe cechy płciowe u mężczyzn. Komórki jąder są głównym źródłem testosteronu. Testosteron wspiera spermatogenezę, stymuluje erytropoezę, a także jest niezbędny do utrzymania libido i potencji.

Gonadotropina kosmówkowa (beta hCG)– jej fizjologiczną rolą jest stymulacja progesteronu przez ciałko żółte we wczesnych stadiach ciąży.

17-alfa-hydroksyprogesteron (17 OH - progesteron) jest prekursorem kortyzolu. Hormon ten jest wytwarzany w nadnerczach, jajnikach, jądrach i łożysku.

Siarczan dehydroepiandrosteronu (DHEA-S) syntetyzowany w nadnerczach i jajnikach.

Wskazania

Definicja hormon folikulotropowy (FSH) oraz hormon luteinizujący (LH) polecany przy: zaburzeniach miesiączkowania, niepłodności, obfitych krwawieniach miesiączkowych, poronieniach, przedwczesnym i opóźnionym rozwoju seksualnym, opóźnieniu wzrostu, zespole policystycznych jajników, endometriozie, monitorowaniu skuteczności terapii hormonalnej.

Prolaktyna - jego definicja jest zalecana w przypadku niepłodności, braku miesiączki, dysfunkcji jajników. Konieczne jest przepisanie prolaktyny w połączeniu z oznaczeniem TSH (ponieważ nadmierne tworzenie TSH może prowadzić do hiperprolaktynemii). W przypadku zakażenia opryszczką i interwencji chirurgicznych na gruczole sutkowym obserwuje się zwiększone wartości prolaktyny.

testosteron- jego awans obserwowano przy idiopatycznym przedwczesnym dojrzewaniu i przeroście kory nadnerczy u chłopców, guzach pozagonadalnych u mężczyzn, arrhenoblastoma, feminizującym zespole jąder.

spadek stężenie testosteronu obserwuje się w mocznicy, niewydolności wątroby, wnętrostwie.

Gonadotropina kosmówkowa (beta hCG) - jego zwiększone stężenie we krwi obserwuje się przy braku ultrasonograficznych objawów ciąży (zarówno w macicy, jak i poza nią). Oceniając wyniki beta-CHG w diagnostyce prenatalnej, należy wziąć pod uwagę, że wiele leków (syntetyczne progestageny: dufaston, dydrogesteron, progestogel (miejscowo), octan noretysteronu), szeroko stosowanych w leczeniu poronień, aktywuje syntezę beta-CHG. W ciążach mnogich poziom beta hCG wzrasta proporcjonalnie do liczby płodów.

Definicja 17-alfa-hydroksyprogesteron (17-OH progesteron) odgrywa wiodącą rolę w diagnostyce zespołu andrenogenitalnego, któremu towarzyszy zwiększona produkcja kortyzolu, który reguluje wydzielanie ACTH. Podwyższone wartości 17 OH-progesteronu obserwuje się w guzach kory nadnerczy.

Definicja siarczan dehydroepiandrosteronu (DHEA-S) służy do różnicowania pochodzenia androgenów: podwyższona zawartość DHEA-S pochodzenia nadnerczowego, obniżona zawartość pochodzenia z jąder.

Metodologia

Oznaczanie hormonów płciowych hormonu folikulotropowego (FSH) i hormonu luteinizującego (LH), estradiolu - E2, progesteronu, prolaktyny, testosteronu, beta hCG, siarczanu dehydroepiandrosteronu (DHEA-S) przeprowadza się metodą immunochemiczną na analizatorze „Architekt 2000”.

Oznaczanie 17-alfa-hydroksyprogesteronu (17-OH progesteronu) przeprowadza się za pomocą enzymatycznego testu immunologicznego.

Trening

Konieczne jest powstrzymanie się od aktywności fizycznej, spożywania alkoholu i narkotyków, zmian w diecie na 24 godziny przed pobraniem krwi. W tym czasie należy powstrzymać się od palenia.

FSH, LH, estradiol, testosteron, DHEA-S, 17OH-progesteron – od 2-5 dnia cyklu;

prolaktyna, progesteron - od 22-24 dnia cyklu.

Wskazane jest przyjmowanie porannego leku po pobraniu krwi (jeśli to możliwe). Unikaj przyjmowania następujących leków: androgeny, deksametazon, metyrapon, fenotiazyny, doustne środki antykoncepcyjne, stilben, gonadotropiny, klomifen, tamoksyfen.

Przed oddaniem krwi nie należy wykonywać następujących zabiegów: iniekcji, nakłuć, masażu ogólnego ciała, endoskopii, biopsji, EKG, badania rentgenowskiego, zwłaszcza z podaniem środka kontrastowego, dializy.

Jeśli jednak doszło do niewielkiej aktywności fizycznej, przed oddaniem krwi należy odpocząć przez co najmniej 15 minut.

Bardzo ważne jest ścisłe przestrzeganie tych zaleceń, gdyż tylko w takim przypadku uzyskamy wiarygodne wyniki badania krwi.


badania ELISA:

Diagnostyka laboratoryjna zaburzeń układu rozrodczego (część 2)

Nieczajew V.N., Ph.D.

Oznaczanie poziomu prolaktyny

Pierwszym etapem badania laboratoryjnego osób obojga płci z zaburzeniami rozrodu, na zalecenie WHO, jest pomiar stężenia prolaktyna(hormon mleka) w surowicy (osoczu) krwi. Prolaktyna nie wpływa bezpośrednio na czynność czynnościową gonad, natomiast poziom prolaktyny we krwi wyraźnie koreluje ze stanem podwzgórze oraz gruczolak przysadki. Prolaktyna reguluje wydzielanie mleka w okresie laktacji. Prolaktyna jest antagonistą hormonów FSZ oraz LG, a wraz ze wzrostem produkcji prolaktyny funkcja hormonalna jajników zostaje zakłócona i pojawia się hiperprolaktynemiczna postać niepłodności. U kobiet karmiących piersią obserwuje się fizjologiczną hiperprolaktynemię. U kobiet niekarmiących piersią podwyższony poziom prolaktyny może być spowodowany niektórymi lekami, guzem przysadki mózgowej lub nieprawidłowym funkcjonowaniem przysadki mózgowej. Jednym z objawów hiperprolaktynemii jest wydzielanie siary lub mleka z gruczołów sutkowych, zwłaszcza u nieródek. Zmiany patologiczne w organizmie ze zwiększonym lub obniżonym stężeniem prolaktyny przedstawiono w tabeli 1.

Tabela 1. Zmiany patologiczne w organizmie ze zwiększonym lub obniżonym poziomem prolaktyny

Prolaktyna występuje w surowicy krwi w trzech różnych postaciach. Dominuje biologicznie i immunologicznie aktywna postać monomeryczna (około 80%), 5-20% występuje jako dimeryczna postać nieaktywna, a 0,5-5% jako forma tetrameryczna, również nieaktywna. Tabela 2 przedstawia stężenia referencyjne postaci monomerycznej (biologicznie czynnej) prolaktyny.

Tabela 2. Wartości referencyjne stężenia prolaktyny w surowicy

Wskazania do oznaczenia:

Kobiety w okresie rozrodczym:

  • Zaburzenia miesiączkowania i brak miesiączki
  • Bezpłodność
  • zaburzenia laktacji
  • Mlekotok
  • Zespół nadczynności przysadki mózgowej
  • Niewydolność przysadki
  • niewydolność jąder
  • Azoospermia, oligospermia
  • Mlekotok
  • Zespół nadczynności przysadki mózgowej
  • Niewydolność przysadki
  • Terapia zastępcza po usunięciu guza przysadki

Przygotowanie próbki do analizy

Prolaktyna ma dość wyraźny rytm dobowy z maksymalnym uwalnianiem hormonu podczas nocnego snu. Zaleca się pobieranie krwi rano (8-10 godzin), we wczesnej fazie cyklu folikulinowego (u kobiet z regularnym cyklem) oraz w spokojnym otoczeniu. Aby wykluczyć przypadkowy wzrost poziomu prolaktyny w odpowiedzi na stres (pobranie krwi), pożądane jest 2-3-krotne badanie.

Materiał do badań:

  • surowica krwi

FSH i LH to „główne” hormony reprodukcyjne

Jeśli oznaczenie poziomu prolaktyny we krwi dostarcza informacji o stanie czynnościowym kompleksu podwzgórzowo-przysadkowego jako całości, to do oceny czynności układu rozrodczego należy wykonać pomiar zawartości we krwi hormonów gonadotropowych - FSH i LH jest używany.

To właśnie te hormony zapewniają wzrost i rozwój pęcherzyków (FSH) oraz stymulują syntezę hormonów płciowych w gonadach (LH). Z kolei wydzielanie LH i FSH jest kontrolowane przez hormony płciowe gonad (mechanizm ujemnego sprzężenia zwrotnego). Wzrostowi poziomu hormonów płciowych, przede wszystkim estradiolu, we krwi towarzyszy zahamowanie wydzielania gonadotropin (i odwrotnie). Wydzielanie FSH jest dodatkowo regulowane przez inhibinę, polipeptyd syntetyzowany przez gonady. W okresie przedowulacyjnym dojrzały dominujący pęcherzyk wydziela do krwi duże ilości estradiolu, pod wpływem którego następuje owulacyjne uwalnianie LH i FSH (zjawisko dodatniego sprzężenia zwrotnego). Ten wzrost (szczyt owulacji) nie trwa zbyt długo, 1-2 dni. Intensywność wydzielania gonadotropin w okresie okołoowulacyjnym determinuje przyszłą czynność czynnościową ciałka żółtego. Dobowy (okołodobowy) rytm wydzielania LH i FSH u dorosłych nie jest wyraźny, w przeciwieństwie do nastolatków, jednocześnie rytm okołodobowy (godzinowy) wydzielania jest bardzo charakterystyczny dla gonadotropin.

Nowoczesne systemy testów ELISA do oznaczania FSH i LH opierają się na wykorzystaniu przeciwciał monoklonalnych, które nie reagują krzyżowo z blisko spokrewnionymi hormonami TSH i hCG.

Tabela 3 Wartości referencyjne stężenia FSH i LH w surowicy krwi.

Przygotowanie próbki do analizy

Poziomy gonadotropin nie mają rytmu okołodobowego, nie ma potrzeby pobierania krwi na pusty żołądek. Należy pamiętać, że przy zachowanym cyklu miesiączkowym jednorazowe oznaczenie gonadotropin można przeprowadzić tylko we wczesnej fazie folikuliny (6-8 dni cyklu). Dokładniejsze wyniki uzyskuje się, pobierając 2-3 próbki krwi w odstępie 30-40 minut, a następnie łącząc otrzymane surowice. Niemożliwe jest jednokrotne oznaczenie LH i FSH w próbce krwi pobranej w połowie cyklu w celu wykrycia owulacji. Czas owulacji dla cykli o różnej długości jest różny (około 14 dni przed rozpoczęciem spodziewanej miesiączki) i może być przesunięty o 1-2 dni od oczekiwanych. W związku z tym wyniki pojedynczego oznaczania gonadotropin w 13-14 dniu cyklu w większości przypadków dają fałszywe informacje o naturze cyklu. Pulsacyjny charakter wydzielania w odstępach 1-2 godzinnych jest szczególnie charakterystyczny dla PH, dlatego wyniki pojedynczych analiz należy traktować jako przybliżone. Próbki surowicy lub osocza po utworzeniu skrzepu i/lub oddzieleniu krwinek czerwonych są stabilne przez czas wystarczający do wysłania próbek. Zamrożone próbki mogą być przechowywane przez długi czas.

Krew należy pobrać igłą o szerokim otworze, zasilaną grawitacyjnie lub z lekkim podciśnieniem tłoka strzykawki.

Materiał do badań:

  • surowica krwi
  • heparynizowane osocze krwi

Oznaczanie hormonów płciowych

Niewątpliwie do pełnego zbadania stanu układu rozrodczego niezbędne jest posiadanie testów ELISA do oznaczania hormonów płciowych (estradiolu, testosteronu, progesteronu) w surowicy krwi. Jeśli synteza hormonów płciowych w gonadach jest znacznie zmniejszona, to dzięki mechanizmowi ujemnego sprzężenia zwrotnego wydzielanie gonadotropin gwałtownie wzrasta, dzięki czemu rozpoznanie braku funkcji jajników nie sprawia trudności.

W algorytmie diagnostycznym badania podejrzenia niepłodności endokrynologicznej kluczowe jest oznaczenie stężenia LH, FSH, estradiolu i testosteronu.

Metody oznaczania tych hormonów opierają się dziś głównie na immunoenzymatycznych testach lub technologii immunofluorescencyjnej, co zapewnia ich szerokie zastosowanie.

estradiol

estradiol- główny estrogenowy hormon steroidowy. Katabolizm w wątrobie prowadzi do przemiany estradiolu w estriol lub w glukuronidy i siarczany wydalane z moczem.

Wśród kobiet estradiol syntetyzowany i wydzielany w Jajników, w osłonce i komórkach ziarnistych mieszków włosowych. Stymuluje rozwój pierwszej fazy cyklu jajnikowego, powodując wzrost białka mięśniowego macicy i rozrost endometrium. Na poziomie przysadki działa również na wydzielanie LH, FSH. Podczas pierwszej fazy cyklu następuje stopniowy wzrost koncentracji estradiol prowadzi do masowej sekrecji LG, który „rozpoczyna owulację”. Podczas ciąży stężenie estradiol wzrasta. Analiza estradiol w osoczu krwi jest głównym parametrem w monitorowaniu indukcja owulacji oraz stymulacja jajników. Zwiększenie szybkości syntezy estradiol a jego stężenie pod koniec stymulacji odzwierciedla liczbę i jakość dojrzewających pęcherzyków.

Tabela 4 Wartości referencyjne stężenia estradiolu w surowicy krwi.

Wskazania do oznaczenia:

  • kontrola stymulowanej owulacji,
  • ocena funkcji jajników,
  • nieregularne miesiączki,
  • brak miesiączki pochodzenia podwzgórzowego,
  • nowotwory produkujące estrogeny
  • kontrola leczenia niepłodności,
  • osteoporoza;

mężczyźni:

  • ginekomastia,

dzieci:

  • monitorowanie postępów dojrzewania.

Tabela 5 Choroby i stany, w których może zmieniać się stężenie estradiolu w surowicy krwi

progesteron

progesteron- jeden z głównych hormonów steroidowych. Jest wydzielany w niewielkich ilościach przez komórki ciałka żółtego jajników podczas fazy lutealnej cyklu miesiączkowego. Działa na endometrium wraz z estradiol, w wyniku czego cykl menstruacyjny przechodzi z fazy proliferacyjnej do sekrecyjnej. Poziom progesteron osiąga swoje maksimum w 5-7 dniu po owulacji. Jeśli do zapłodnienia nie dochodzi, poziom progesteronu spada i odwrotnie, jeśli doszło do zapłodnienia, ciałko żółte nadal wydziela dużą ilość progesteron zanim 12 tydzień ciąży. Następnie przechodzi do działania łożysko, który staje się głównym miejscem produkcji hormonu. progesteron również wydzielane w niewielkich ilościach kora nadnerczy oraz jądra i jest półproduktem w syntezie androgenów.

We krwi progesteron położony jak w darmowy, jak również w związane z z białkami nośnikowymi (albuminą i transkortyną). Okres półtrwania hormonu wynosi kilka minut, dwie trzecie progesteronu jest metabolizowane w wątrobie i wydzielane do moczu w postaci wolnego pregnandiolu, glukuronidu pregnandiolu i siarczanu pregnandiolu.

Tabela 6 Wartości referencyjne stężenia progesteronu w surowicy

Wskazania do oznaczenia:

kobiety:

  • zaburzenia owulacji,
  • brak owulacji z lub bez oligomenorrhea,
  • niewydolność funkcji ciałka żółtego;
  • dokładne określenie owulacji
  • wywołanie owulacji ludzką gonadotropiną menopauzalną lub klomifenem (zarówno z hCG, jak i bez);
  • potwierdzenie owulacji (określenie w drugiej połowie cyklu);
  • monitorowanie przebiegu owulacji u kobiet po samoistnym poronieniu;

mężczyźni i dzieci:

  • defekt w biosyntezie steroidów.

Progesteron powoduje wzrost podstawowej temperatury ciała. W przypadku stwierdzenia niewydolności ciałka żółtego próbki pobiera się 3 razy (każdorazowo po 3-4 dniach od poprzedniego pobrania). W co najmniej 2 przypadkach stężenie progesteronu powinno przekraczać 10 mcg/ml.

testosteron

Wśród kobiet testosteron sformowane w kora nadnerczy oraz Jajników w stosunku 1:1 i służą jako substrat do tworzenia estrogenów, a także stymulują przedowulacyjne uwalnianie LH. Poziom testosteronu u kobiet nie zmienia się wraz z wiekiem. Normalny poziom testosteronu u kobiet wynosi 0 - 0,9 ng/ml.

Wskazania do oznaczenia:

  • zespół Klinefeltera i inne choroby chromosomalne;
  • niedoczynność przysadki;
  • zaburzenia enzymatyczne syntezy androgenów;
  • hirsutyzm i wirylizacja kobiet;
  • większość nowotworów jajników i nerek wytwarzających androgeny.

U kobiet konieczne jest również oznaczenie poziomu DHEA – siarczanu, który ma działanie zbliżone do testosteronu (u mężczyzn jest środkiem wspomagającym w badaniu testosteronu).

Materiał do badań:

  • serum kobiet w 3-7 dniu cyklu miesiączkowego, najlepiej między godziną 8 a 10 rano.

Globulina wiążąca steroidy w surowicy (SHB)

SSH jest białkiem, które wiąże i transportuje testosteron i estradiol. Oprócz funkcji transportowej, SSH chroni testosteron i estradiol przed aktywnością metaboliczną na drodze z wydzielającego je gruczołu do narządu docelowego oraz tworzy swoisty magazyn hormonów w organizmie. SSG jest kwaśną glikoproteiną o masie cząsteczkowej 45 000 daltonów. Naruszenie syntezy SSH prowadzi do naruszenia dostarczania hormonów do narządów docelowych i wykonywania ich czynności funkcjonalnej. Stężenie DES w surowicy krwi jest podwyższane przez estrogeny, doustne środki antykoncepcyjne, zmniejszane przez androgeny, T4, TSH.

Tabela 7 Wartości odniesienia dla stężenia suchej surowicy krwi

Prekursory biosyntezy androgenów i estrogenów

17α-hydroksyprogesteron

17a-Hydroksyprogesteron (17OH-P) jest steroidem pośrednim w biosyntezie glukokortykoidów, androgenów i estrogenów, który jest syntetyzowany z progesteronu i 17a-hydroksypregnenolonu. Wydzielana przez korę nadnerczy, jajniki i jądra, krąży we krwi, zarówno w stanie wolnym, jak i związanym, podobnie jak progesteron, z dwoma białkami – albuminą i transkortyną. Okres półtrwania 17OH-P wynosi kilka minut. Jest metabolizowany w wątrobie i wydalany z moczem w postaci hormonu ciążowego.

17OH-P jest wytwarzany w niewielkich ilościach przez jajniki w fazie folikularnej, następnie jego stężenie wzrasta i pozostaje stałe podczas fazy lutealnej. Jeśli do zapłodnienia nie dojdzie, poziom 17OH-P spada. Po wszczepieniu zapłodnionego jaja, ciałko żółte nadal wydziela 17OH-P.

Analiza 17OH-P jest bardzo ważna w diagnostyce wrodzonego przerostu nadnerczy i wykrywaniu niedoboru enzymu odpowiedzialnego za występowanie tej choroby.

Poziom 17OH-P we krwi jest szczególnie orientacyjny i ma decydujące znaczenie w diagnostyce niedoboru 21-hydroksylazy u noworodków.

W wieku dorosłym, z częściowym lub późnym niedoborem enzymu, główny poziom aktywności 17OH-P może być prawidłowy lub podwyższony

Tabela 8 Wartości referencyjne stężenia 17OH-P w surowicy krwi

Wskazania do oznaczenia:

  • wrodzony niedobór enzymu odpowiedzialnego za występowanie przerostu nadnerczy;
  • choroby związane z niedoborem 21-hydroksylazy u noworodków (wysoki poziom 17OH-P);
  • częściowo lub późno objawiający się brak 21-hydroksylazy (prawidłowy lub wysoki poziom 17OH-P);
  • diagnostyka różnicowa niepłodności.

Materiał do badań:

  • surowica krwi;

Dehydroepiandrosteron

Dehydroepiandrosteron (DHEA) to jeden z najważniejszych androgenów (dokładniej ich prekursor), syntetyzowany przez korę nadnerczy i gonady z 17OH-P. Jest katabolizowany do wirylizujących androgenów: androstenodiolu, testosteronu i dihydrotestosteronu.

Większość DHEA jest modyfikowana przez dodanie siarczanu do (DHEA-S), który jest biologicznie nieaktywny, ale usunięcie grupy siarczanowej przywraca aktywność DHEA. DHEA jest tak naprawdę prohormonem, ma krótszy okres półtrwania i wyższą szybkość metabolizmu, a co za tym idzie jego stężenie we krwi jest 300 razy niższe niż poziom DHEA-S.

DHEA charakteryzuje się okołodobowym poziomem wydzielania z maksymalnym uwalnianiem hormonu w godzinach porannych. W cyklu miesiączkowym nie obserwuje się istotnych zmian w jego stężeniu. W przeciwieństwie do testosteronu, DHEA we krwi krążącej nie jest związany z DES, więc zmiana stężenia białek wiążących nie wpływa na jego poziom.

Tabela 9 Wartości referencyjne dla stężenia DHEA w surowicy

Wskazania do oznaczenia:

  • hirsutyzm;
  • wirylizacja;
  • opóźnione dojrzewanie

Materiał do badań:

  • surowica krwi;
  • osocze krwi z dodatkiem heparyny.

Siarczan dehydroepiandrosteronu

DHEA-S jest syntetyzowany w nadnerczach (95%) i jajnikach (5%), wydalany z moczem i stanowi główną frakcję 17a-ketosteroidów. Oznaczanie stężenia DHEA-C w surowicy krwi zastępuje badanie 17a-ketosteroidów w moczu.

DHEA-S jest wydzielany z szybkością 10-20 mg/24 godziny (35-70 µmol/24 godziny) u mężczyzn i 3,5-10 mg/24 godziny (12-35 µmol/24 godziny) u kobiet i bez rytmu okołodobowego rytm. Nie wiąże się ze specyficznymi białkami osocza, dlatego ich stężenie nie wpływa na poziom DHEA-S. Jednak DHEA-S wiąże się z albuminą surowicy.

Oprócz DHEA-S, DHEA jest obecny we krwi krążącej, odpowiadając za ¼ i ½ szybkości wydzielania DHEA-S odpowiednio u mężczyzn i kobiet. Ze względu na wysokie stężenie DHEA-S we krwi, długi okres półtrwania i wysoką stabilność oraz fakt, że pochodzi głównie z nadnerczy, DHEA-S jest doskonałym wskaźnikiem wydzielania androgenów.

Jeśli kobiety mają podwyższony poziom testosteronu, to mierząc stężenie DHEA-S można ustalić, czy jest to spowodowane upośledzoną funkcją nadnerczy, czy chorobą jajników.

Tabela 10 Wartości referencyjne stężenia DHEA-S w surowicy krwi

Wiek

Stężenie

(µg/ml)

Stężenie

(µmol/l)

Noworodki.

Dorośli ludzie:

Okres ciąży

okres przedmenopauzalny

okres pomenopauzalny

Przeliczniki:

  • 1 ng/100 ml = 28,8 nmol/l;
  • 1 nmol/l = 2,6 ng/ml
  • 1 ng/ml = 368,46 µmol/l

Wskazania do oznaczenia:

  • guzy nadnerczy;
  • diagnostyka różnicowa chorób jajników;
  • osteoporoza;
  • opóźnione dojrzewanie.

Materiał do badań:

  • surowica krwi;
  • osocze krwi z dodatkiem heparyny.

Choroby autoimmunologiczne układu rozrodczego

Fizjologiczne wyczerpanie pęcherzyków jajnikowych u kobiet następuje w wieku 45-55 lat. Zatrzymanie funkcji jajników przed 40 rokiem życia wskazuje na chorobę znaną jako przedwczesna niewydolność jajników. Konsekwencją tej choroby jest bezpłodność. W niektórych przypadkach przyczyną tego może być proces autoimmunologiczny związany z tworzeniem przeciwciał przeciwko hormonom płciowym jajników.

W niektórych przypadkach rozwój niepłodności u mężczyzn jest spowodowany obecnością swoistych przeciwciał w surowicy krwi lub osoczu nasienia.

Przeciwciała jajnikowe w surowicy krwi

Zwykle w surowicy krwi kobiety nie ma przeciwciał jajnikowych. Przeciwciała jajnikowe (przeciwko antygenom jajnikowym) stwierdzono u kobiet z przedwczesną menopauzą, niepłodnością i zapłodnieniem in vitro. Te przeciwciała mogą być wytwarzane przez komórki Leydiga, komórki granulocytarne jajnika i komórki łożyska. Do oznaczenia przeciwciał przeciwko hormonom płciowym stosuje się metodę immunofluorescencji pośredniej oraz ELISA. Metoda ELISA pozwala na oznaczenie zarówno przeciwciał całkowitych, jak i przeciw różnym klasom immunoglobulin (IgG, IgM, IgA). Przeciwciała autoimmunologiczne można wykryć we krwi kobiet na wiele lat przed rozwojem klinicznych objawów przedwczesnej niewydolności jajników.

Oprócz przeciwciał jajnikowych metoda ELISA umożliwia wykrycie przeciwciał skierowanych na przezroczystą błonę oocytu - całkowitych oraz przeciwciał do klas (IgG, IgM, IgA), które mają taką samą wartość diagnostyczną jak przeciwciała jajnikowe.

U kobiet wyraźna korelacja między stężeniem przeciwciał w surowicy krwi a rokowaniem co do płodności zwykle nie jest możliwa.

Przeciwciała antyspermowe w surowicy krwi

Zwykle w surowicy krwi kobiety nie ma przeciwciał antyspermowych. U mężczyzn przeciwciała antyspermowe powstają w wyniku reakcji autoimmunologicznej na nabłonek plemnika. Przyczyną rozwoju takiej reakcji może być uraz jądra, infekcje bakteryjne i wirusowe oraz operacje chirurgiczne na jądrze. Do oznaczania przeciwciał antyspermowych stosowana jest obecnie metoda ELISA, która jest wysoce czuła i specyficzna, a także pozwala na ilościowe oznaczenie przeciwciał różnych klas immunoglobulin (IgG, IgM, IgA), co pozwala na ocenę nasilenia i nasilenia proces autoimmunologiczny. Ponadto u mężczyzn stężenie przeciwciał antyspermowych koreluje z przywróceniem płodności.

U kobiet przeciwciała przeciw plemnikom nie są normalnie wytwarzane, jednak różne czynniki etiologiczne (zakażenia, choroby autoimmunologiczne) mogą prowadzić do utraty tolerancji immunologicznej. Jeśli we krwi kobiety obecne są przeciwciała antyspermowe, procesy tworzenia trofoblastu, wzrostu i tworzenia łożyska oraz implantacji zostają zakłócone. A to prowadzi do aborcji, stanu przedrzucawkowego, opóźnienia wzrostu płodu, niewydolności łożyska.

Badanie na obecność przeciwciał antyspermowych jest zalecane dla wszystkich par z niewyjaśnioną niepłodnością.

Gonadotropina kosmówkowa (hCG) w surowicy krwi

HCG jest glikoproteiną o masie cząsteczkowej około 46 000, składającą się z dwóch podjednostek alfa i beta. Podwyższony poziom hCG w surowicy krwi wykrywa się już w 8-12 dniu po zapłodnieniu. W pierwszym trymestrze ciąży stężenie hCG gwałtownie wzrasta, podwajając się co 2-3 dni. Maksymalne stężenie przypada na 7-10 tydzień ciąży, po czym stężenie hCG zaczyna spadać, aw drugiej połowie ciąży pozostaje mniej więcej stabilne.

Tabela 12 Mediany stężenia hCG w skriningu w kierunku wad wrodzonych płodu w II i III trymestrze ciąży

Alfa-fetoproteina (AFP) w surowicy krwi

AFP jest glikoproteiną o masie cząsteczkowej około 65 000 kDa, wydzielaną przez wątrobę i woreczek żółtkowy płodu. AFP u płodu jest głównym białkiem surowicy, u dorosłych zawartość AFP w surowicy krwi jest znikoma. W drugim trymestrze ciąży, jeśli płód ma zespół Downa, stężenie AFP jest obniżone, a stężenie hCG we krwi podwyższone. Mając to na uwadze, badanie ELISA dla AFP i hCG jest stosowane jako metoda masowego badania prenatalnego kobiet w ciąży, za pomocą którego można zidentyfikować grupę wysokiego ryzyka na podstawie obecności wad rozwojowych płodu lub zespołu Downa. Wartości median stężeń AFP w surowicy krwi do badań przesiewowych w kierunku wad wrodzonych płodu w II trymestrze przedstawiono w tabeli 13.

Tabela 13 Mediany wartości stężeń AFP w badaniach przesiewowych w kierunku wad wrodzonych płodu w II trymestrze ciąży

Wolny estriol w surowicy

Estriol jest głównym hormonem steroidowym syntetyzowanym przez łożysko. Zawartość estriolu we krwi ciężarnej koreluje z czynnością nadnerczy płodu. Estriol dostaje się do krwioobiegu kobiety w ciąży, gdzie można określić jego stężenie w stanie wolnym. W prawidłowo rozwijającej się ciąży synteza estriolu wzrasta wraz ze wzrostem wieku ciążowego i wzrostu płodu (tab. 14).

Tabela 14 Stężenie estriolu w surowicy krwi kobiety w dynamice ciąży fizjologicznej

Okres ciąży, tydzień

Mediana stężenia estriolu, nmol/l

Wartości referencyjne estriolu, nmol/l

W patologii (wyraźne wady rozwojowe OUN u płodu, wrodzone wady serca, zespół Downa, opóźnienie wzrostu płodu, niedorozwój nadnerczy płodu, wewnątrzmaciczna śmierć płodu) zmniejsza się stężenie wolnego stradiolu w surowicy krwi kobiety w ciąży.

Wartości median stężeń wolnego estradiolu w surowicy krwi do badań przesiewowych w kierunku wad wrodzonych w drugim trymestrze ciąży przedstawiono w tabeli 15.

Tabela 15 Wartości median stężeń wolnego estradiolu w surowicy krwi do badań przesiewowych w kierunku wad wrodzonych w II trymestrze ciąży

W zespole Downa i Edwardsa stężenie wolnego estradiolu wynosi zwykle 0,7 MoM.

Podsumowując, należy zauważyć, że powszechne wprowadzenie do praktyki klinicznej pełnoprawnej diagnostyki ELISA znacznie zwiększy efektywność diagnostyki i leczenia pacjentów z zaburzeniami układu rozrodczego.

Cena £: na prośbę

Możesz dodać artykuł do koszyka, określając ilość

Producent: Hema Medica

Kraj: Rosja

Jednostka miary: zestaw

Rodzaj opakowania: pudełko kartonowe

Kod dostawcy: K217

Opis

Ilościowe oznaczanie stężenia progesteronu w surowicy (osoczu) krwi za pomocą testu immunoenzymatycznego


Cel funkcjonalny

Oznaczanie progesteronu opiera się na zastosowaniu konkurencyjnego testu immunoenzymatycznego. Mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko progesteronowi są immobilizowane na wewnętrznej powierzchni studzienek tabletki. Progesteron z próbki konkuruje ze skoniugowanym progesteronem o wiązanie z przeciwciałami na powierzchni studzienki. Rezultatem jest otoczona plastikiem „kanapka” zawierająca peroksydazę. Podczas inkubacji z roztworem substratu tetrametylobenzydyny (TMB) następuje zabarwienie roztworów w dołkach. Intensywność barwy jest odwrotnie proporcjonalna do stężenia progesteronu w badanej próbce. Stężenie progesteronu w próbkach do badań określa się za pomocą wykresu kalibracyjnego zależności gęstości optycznej od zawartości progesteronu w próbkach kalibracyjnych

Specyfikacje

Metoda: test immunoenzymatyczny.
Próbka: surowica, osocze krwi.
Specyficzność 100%.
Czułość: minimalne wiarygodnie określone stężenie nie przekracza 0,5 nmol/l.
Współczynnik zmienności wyników nie przekracza 8%.
Liniowość: w zakresie stężeń 1-300 nmol/l ± 10%.
Zestaw przeznaczony jest do analizy w dwóch powtórzeniach 40 próbek testowych, 7 próbek kalibracyjnych i 1 kontrolna próbka surowicy (łącznie 96 oznaczeń).
Skład zestawu:
1. Tabletka polistyrenowa 96-dołkowa, rozpruta, gotowa do użycia - 1 szt.
2. Próbki kalibracyjne na bazie surowicy ludzkiej zawierające znane ilości progesteronu - 0; jeden; 3; dziesięć; trzydzieści; 100; 300 nmol/l, gotowe do użycia (próbka kalibracyjna 0 nmol/l - 2 ml, reszta - po 0,8 ml) płyny przezroczyste fioletowe (próbka kalibracyjna 0 - ciecz przezroczysta bezbarwna) - 7 szt.
3. Surowica kontrolna na bazie surowicy krwi ludzkiej o znanej zawartości progesteronu, gotowa do użycia, klarowny, bezbarwny płyn, 0,8 ml x 1 fiolka.
4. Koniugat, gotowy do użycia, purpurowy klarowny płyn, 22 ml x 1 fiolka.
5. Roztwór substratu tetrametylobenzydyny (TMB), gotowy do użycia, klarowny, bezbarwny płyn, 11 ml x 1 fiolka.
6. Koncentrat roztworu płuczącego, 21x, klarowny, bezbarwny płyn, 22 ml x 1 fiolka.
7. Stop Odczynnik, gotowy do użycia, klarowny, bezbarwny płyn, 11 ml x 1 fiolka.
8. Papier do przyklejenia tabletki - 2 szt.
9. Instrukcja użytkowania - 1 szt.
10. Paszport kontroli jakości - 1 szt.
Zestaw należy przechowywać w temperaturze +2…+8 °C przez cały okres ważności podany na opakowaniu, niedopuszczalne jest zamrażanie. Przygotowany roztwór czyszczący przechowywać w temperaturze pokojowej (+18…+25°C) nie dłużej niż 5 dni lub w temperaturze +2…+8°C nie dłużej niż 30 dni. Surowica kalibracyjna po otwarciu jest odpowiednia na 2 miesiące.
Wartość gęstości optycznej jest mierzona przy długości fali 450 nm.
Zarejestrowany w Roszdrawnadzorze.