Ифа директни и косвени методи. ELISA - ензимно-свързан имуносорбентен анализ: декодиране


ELISA или ензимен имуноанализ се отнася до серологични изследвания и е предназначен за откриване и диагностициране на патологични микроорганизми в кръвния серум.

Чрез анализ, различни класове имуноглобулиникъм бактериите: IgM- при остър патологичен процес и IgGна етапа на възстановяване, които в някои случаи продължават през целия живот.

Чрез ензимен имуноанализ се откриват заболявания с различна етиология:

Също така, ELISA е показан за диагностициране на сифилис, когато положителните резултати са потвърдени от RV метода и ви позволява да наблюдавате ефективността на лечението при патологичен процес.

Ензимният имуноанализ се предписва според показанията (при съмнение за инфекция с микроорганизми), той е задължителен по време на бременност и преди хирургични операции за откриване на носителство на различни бактерии.


Процедурата за анализ се извършва сутрин на празен стомах, материалът (кръвта) се взема от вената. Резултатите от диагностичното изследване се изготвят до 10 дни.

Положителен ELISA

Положителният резултат от ELISA се потвърждава от наличието на имуноглобулини IgG и IgM. Открити титри в кръвта IgM винаги показват заболяванев прогресивния стадий, при здрав човек, тези антитела отсъстват.

А IgG показва предишна инфекция или носителство на патогенни микроорганизми, някои от които в малки количества се считат за нормални. Например, бактериите стрептококи и стафилококи присъстват във всяко човешко тяло.

Сифилис

IgM антителата при сифилис се откриват от 2 седмици след инфекцията и показват наличието на първичен, вторичен или вроден епизод, с лечение те изчезват след около шест месеца, без терапия - след 18 месеца. Ако и двата вида имуноглобулини се открият едновременно, сифилисът в острата фаза се потвърждава. При болни хора IgG антитела срещу сифилисостават в серума за цял живот.

Вирусен хепатит

IgM към вирусен хепатит често се откриват дори в инкубационния период на заболяването, преди да се появят първите прояви и продължават по време на заболяването, след лечение те не се откриват. Изключение прави вирусният хепатит С, при който IgM се открива както в неговия активен, така и в латентен или хроничен стадий.

Антителата на IgG към хепатит А могат да присъстват дори при здрави хора, което се дължи на инфекция или намаляване на имунитета, а наличието на IgG към хепатит B, C и D при здрави хора не се наблюдава.

CMVI

CMVI се разпространява почти навсякъде и не представлява заплаха за общественото здраве. Въпреки това, той носи смъртоносен опасност за новороденотои плода по време на вътрематочна инфекция.

Откриването на IgM антитела срещу цитомегаловирус показва първична инфекция или активиране на латентната фаза. Титрите на IgG се запазват при възстановени хора в продължение на 10 години.

Херпес

Антителата срещу херпесния вирус при здрави хора обикновено отсъстват. Съдържанието на IgM показва острата фаза на заболяването, IgG показва латентната (в този случай лицето е носител на инфекцията). Със съдържанието на IgG към херпес трябва да знаете, че вирусът може по всяко време да се активира от латентен стадий към прогресивен.

Шарка

При варицела и 2 години след лечението имуноглобулините от клас IgM остават в кръвта. Обикновено при здрави хора не се откриват антитела срещу варицела.

Заболявания, причинени от стафилококи и стрептококи

Всички хора имат имуноглобулини срещу стафилококи и стрептококи. Поради това е възможно да се диагностицира патологичен процес, причинен от тези групи бактерии, чрез провеждане на двоен ензимен имуноанализ. Ако има увеличение на титрите с повторен ELISA (една седмица след първия), тогава анализът се счита за потвърден.

Хламидия

Положителният резултат за хламидия се показва от откриването IgM титри 1:8и по-горе и клас IgG - 1:64и нагоре, които се увеличават в хода на заболяването и достигат високи стойности. Например при деца с хламидиална пневмония титрите се повишават до 1:2000 - 1:4000. Наличието на IgM показва активността на хламидиите, известно време след инфекцията се откриват IgG глобулини в кръвта.

Отрицателният ензимен имуноанализ се обозначава с няма IgM антитела. Определените IgG не във всички случаи се считат за потвърждение на диагностично изследване, те често продължават няколко години след инфекцията, понякога за цял живот.

След сифилис, инфекциозна мононуклеоза, имуноглобулини IgG продължават през целия животи се определят в кръвния серум. В продължение на 10 години остават микроорганизмите на CMVI, морбили, рубеола, токсоплазмоза.

Заглавията на амебиазата продължават от няколко месеца до няколко години. Антителата срещу бактериите стафилококи и стрептококи се определят при абсолютно всички хора в малко количество.

В горните случаи откриването на IgG имуноглобулини след прекарани заболявания ни позволява да считаме резултатите от ELISA като отрицателни.

Норма по време на бременност

През първия триместър на бременността всяка жена се подлага на пълен преглед на тялото, който включва ензимен имуноанализ.

Изследванията за токсоплазмоза, CMVI, хламидия, херпес тип 2 (генитален), рубеола, уреаплазма и микоплазма са задължителни, тъй като тези заболявания представляват сериозна заплаха за развитието на плода. Те са в състояние да проникнат в тялото на детето, заобикаляйки плацентарната бариера.

И представляват особена опасност по време на първи триместър на бременносттаи почти винаги водят до вътрематочна смърт на плода и спонтанен аборт.

Проблемът на горните заболявания е, че те често протичат в асимптоматичен стадий, без видими клинични прояви и е възможно да се идентифицират само чрез ензимен имуноанализ.


Добри резултати от анализа могат да се кажат, ако не се открият микроорганизми в серума. Определените IgG показват носителство на вируси и изискват постоянно наблюдение на жената, за да се осигури навременна терапия в случай на внезапно обостряне. положителен IgMсигнализира за прогресиращ патологичен процес и изисква незабавно елиминиране на патогена.

Откриване на заглавие IgG за рубеолапоказва предишно заболяване и е норма по време на бременност. IgG към CMVIсъщо не представляват особена заплаха за плода, но не е изключена възможността за обостряне (честота на проявление, приблизително 1-2%).

Особена заплаха е наличието на IgG за херпес вирус тип 2 или генитален (HSV2), тъй като рискът от обостряне се увеличава значително по време на раждането. В гестационния период честотата на острата фаза се среща в 0,9% от случаите. Поражението на плода от херпесния вирус по време на преминаването на гениталния тракт се среща в 40% от случаите и води до смърт в 50%.

При минала токсоплазмоза IgM може да персистира до 2 години след лечението. Рискът от инфекция на плода в този случай е 17% през първия триместър и се увеличава до 60% до третия, тъй като основният път на инфекция е трансплацентарен. Разкрити IgG към токсоплазмозамного експерти са склонни да го оценяват като отрицателен резултат, който практически не представлява заплаха за хода на бременността.

Кръвният тест ELISA е често срещан метод за откриване на различни патологии. Резултатът от кръвен тест, чието ELISA декодиране е интерпретирано от лекар по лабораторна диагностика, в повечето случаи е надежден.

Какво е ELISA

ELISA е съвременен диагностичен метод, който се използва за лабораторна диагностика на инфекции, хормонални и имунни нарушения и онкологични заболявания. Методът позволява да се открият антитела срещу инфекция още в ранните стадии на заболяването.Този метод принадлежи към индиректните диагностични методи, тъй като разкрива имунния отговор на организма. Сред предимствата на ELISA в сравнение с други диагностични методи може да се открои високо ниво на технологичност, което намалява вероятността от грешки. Методът е високочувствителен и се използва за диагностика на заболявания както при деца, така и при възрастни. Има голям брой различни модификации на ELISA.

Методът ELISA се основава на спецификата на имунохимичните реакции, както и на физикохимичните модели на реакциите на комплексите антиген-антитяло. Реакциите се произвеждат с участието на специфични ензими, които са етикети за откриване на антитела. В резултат на имунохимична реакция, строго определени антитела се свързват със съответните антигени. Кръвен тест чрез ензимен имуноанализ почти елиминира възможността за получаване на фалшив положителен резултат. Специалистите по лабораторна диагностика преценяват положителния или отрицателния резултат въз основа на това дали разтворът се е оцветил по време на ензимната индикация на комплекса антиген-антитяло. Ако разтворът е оцветен, тогава антигенът е взаимодействал с антитялото, резултатът от ELISA е положителен.

Какви заболявания могат да бъдат открити чрез ELISA

Изследването с ензимен имуноанализ позволява:

  • идентифицират редица инфекциозни заболявания;
  • диагностика на автоимунни заболявания;
  • да се установи наличието на онкология;
  • идентифициране на хормонални нарушения;
  • направете други изследвания.

Кръвен тест с ELISA ви позволява да определите наличието на следните инфекции:

Методът се използва за откриване на антигени на патогени на редица инфекции, както и за откриване на антитела от различни класове. Методът ELISA придоби голяма популярност за откриване на сифилис, ХИВ и вирусен хепатит. Не се препоръчва да се определят наличието и нивото на антитела в кръвния серум с цел първична диагностика на ППИ. В този случай наличието на антитела в кръвта може да бъде само знак, че тялото на пациента е имало контакт с инфекциозния агент в миналото.

Диагностиката на различни автоимунни заболявания чрез ELISA се извършва чрез изследване на:

  • антинуклеарни тела;
  • антитела срещу двойноверижна ДНК;
  • антитела към разтворими ядрени антигени (ENA скрининг);
  • антикардиолипинови антитела;
  • IgG към цитрулин пептид;
  • ревматоиден фактор;
  • С-реактивен протеин;
  • автоантитела към цитоплазмените антигени на неутрофилите (ANCA скрининг).

Специфични имунни комплекси са характерни за някои автоимунни заболявания. Например, двуверижни ДНК антитела са характерни за заболяване като системен лупус еритематозус.

Определянето на онкологични заболявания се извършва с ензимен имуносорбентен анализ на кръвен серум за специфични туморни маркери, като PSA, CA-125.

PSA показва наличието на аденом на простатата и рак на простатата. CA-125 е туморен маркер за рак на яйчниците. Стойността се увеличава и при ракови тумори на матката, млечните жлези, ендометриума.

Подготовка за анализ

За да осигурите максимална точност на резултатите, трябва да следвате определени правила за подготовка за изследването. Анализът за лабораторна диагностика чрез ELISA, като правило, се взема сутрин от кубиталната вена. Необходимо е да се дарява кръв строго на празен стомах. В допълнение към тази проста рецепта трябва да се спазват следните препоръки за подготовка:

  • 24 часа преди изследването е необходимо да се изключат алкохолът и пушенето;
  • избягвайте тежки физически натоварвания;
  • запази спокойствие;
  • избягвайте нервно напрежение;
  • дарете кръв за ELISA не по-рано от 10 дни след оттеглянето на лекарството;
  • уведомете Вашия лекар, ако приемате някакви лекарства, от които се нуждаете.

Освен това, няколко дни преди теста, се препоръчва да следвате диета. В същото време изключете от диетата мазни храни, пържени храни. Преди тестване за вирусен хепатит изключете от диетата не само мазни и пържени храни, но и цитрусови плодове, както и оранжеви зеленчуци.

Трябва да се отбележи, че резултатите от определен набор от хормонални изследвания се влияят от такъв фактор като фазата на менструалния цикъл. Необходимостта от вземане на анализ в една или друга фаза на менструалния цикъл трябва да се обсъди предварително с Вашия лекар. В противен случай може да получите неочаквани резултати. Например, нормалното ниво на лутеинизиращия полов хормон при жените варира в зависимост от деня на цикъла:

  • 1-12 дни - 2-14 mU / l;
  • 12-14 дни - 24-150 mU / l;
  • от 15 дни преди началото на нов цикъл - 2-17 mU / l.

Интерпретация на резултатите от ELISA

Анализът ви позволява да установите наличието в тялото на антитела от различни класове. Има 3 класа антитела:

Производството на тези антитела възниква на различни етапи от заболяването. IgM антителата са първите, които се произвеждат в тялото след инфекцията. Наличието им във всеки случай е индикатор за заболяването. При здрав човек този клас антитела отсъства.

Тези имуноглобулини присъстват в кръвния серум за около 5-6 седмици.

Наличието на имуноглобулини от клас G в кръвта показва, че човек вече е имал заболяването или е носител на инфекцията. Тези антитела започват да се произвеждат след антителата от клас М, при повечето заболявания, 3-4 седмици след инфекцията. Тяхното присъствие в тялото е възможно в продължение на няколко години. И при някои заболявания (например сифилис) IgG присъства в кръвта за цял живот.

Ако IgA присъства в тялото, е необходимо да се борите с инфекцията възможно най-интензивно. Антителата от този клас се появяват само в случай на хронично инфекциозно заболяване. Изчезването на IgA показва унищожаването на инфекцията.

Ако ELISA анализът се извършва при деца под 1,5 години, трябва да се вземе предвид следната характеристика: кръвта на детето съдържа IgG на майката към различни инфекции. Това не означава, че детето е болно. В този случай това е по-скоро норма. Наличието на IgM е доказателство за вътрематочна инфекция или инфекция, придобита след раждането. IgM на майката не може да премине през плацентата в тялото на бебето.

Таблицата показва възможните комбинации от наличието или отсъствието на антитела от 3 класа в тялото и тяхната интерпретация.

При дешифриране на анализите (+) показва положителен резултат, а (-) показва обратното, т.е. отрицателен. Резултатът, показващ наличието или отсъствието на някакво вещество в тялото, се нарича качествен. Може да се допълни с количествени. Количественият резултат показва количественото съдържание на различни вещества в тялото.

Трябва да се отбележи, че тестовите системи имат свои собствени, определени от производителя, референтни стойности, които характеризират индикаторите. Превишаването на референтните стойности, като правило, означава наличието на определени патологии в тялото на субекта.

След получаване на резултатите от ELISA, лекуващият лекар трябва да дешифрира получените стойности. Само той може да направи правилна оценка на резултатите и да определи стадия на заболяването.

Във връзка с

В съвременната лабораторна диагностика на инфекциозни заболявания методът на ензимно-свързания имуносорбентен анализ (ELISA), базиран на откриването на специфични антитела, характерни за патогените, намери широко приложение.

Каква е същността на метода?

За да разберете това, трябва да знаете как работи човешката имунна система, какви са антигените, антителата, какви функции изпълняват.

  • Антигенът в нашето тяло е молекула, която специфично се свързва с антитяло. Той носи определена информация за клетката.
  • При попадане на чужд антиген в кръвта започват да се произвеждат антитела (имуноглобулини Ig), които го разпознават и се стремят да го унищожат.
  • Това взаимодействие се нарича имунен комплекс, на който се основава диагностичният метод ELISA.
  • Анализът ви позволява да определите нивото на хормони, имуноглобулини, имунологични комплекси и други биологично активни вещества, следователно са важни за комплексната диагностика.

Кой е диагностициран?

Специалистът може да предпише изследване с цел:

В сравнение с други методи на изследване, ELISA има редица предимства:

Задайте въпроса си на лекаря по клинична лабораторна диагностика

Анна Поняева. Завършила е Медицинска академия в Нижни Новгород (2007-2014) и ординатура по клинична лабораторна диагностика (2014-2016).

Сред недостатъците може да се отбележи възможна неточност на декодирането. Понякога анализът показва фалшиво отрицателен или фалшиво положителен резултат, особено при неправилна подготовка или нарушение на техниката на изпълнение.

Как се прави?

Процедурата не се различава от вземането на материал за.

  • След назначаването на анализа пациентът се изпраща в лабораторията за вземане на проби от венозна кръв. Процедурата се извършва сутрин на празен стомах.
  • Материалът се изпраща в лабораторията, където се получава серум от кръвта, в който се откриват антитела.
  • Серумът се поставя в епруветки с набори от антигени. На практика има много такива комплекти. Това могат да бъдат различни алергени (цветен прашец, вълна, цитрусови плодове, мляко и др.), патогени на инфекциозни и вирусни заболявания и др.
  • След получаване на реакцията останалият серум се отцежда. Количеството антитела се определя с помощта на специални индикатори.

Време за производство на анализ

Срокът зависи от конкретната лаборатория. Някои лаборатории предоставят резултат след 1-2 дни, други в рамките на 1 седмица. Закъсненията могат да се дължат на натрупването на определено количество серуми.

Учебна подготовка

Преди да преминете анализа, трябва да следвате прости правила за подготовка:

  • Избягвайте да приемате лекарства в навечерието на анализа. Ако това не е възможно, не забравяйте да уведомите лекаря, предписващ диагнозата. Особено внимание се обръща на лекарствата за алергия. Ако пациентът приема антихистамини, трябва да се консултирате с Вашия лекар колко време преди началото на изследването трябва да ги отмените. Това важи и за някои лекарства за щитовидната жлеза. В противен случай концентрацията на TSH може да бъде определена неправилно и резултатът от нормата и патологията ще бъде получен неправилно. Като правило, нормални антибактериални, антивирусни, антихистамините спрете да приемате 10-16 дни преди диагнозата.
  • Взима се кръвта строго на празен стомах. Последното хранене обикновено трябва да бъде 8-12 часа преди пътуването до лабораторията.
  • Не можете да приемате алкохолни напитки и да пушите, в противен случай това ще повлияе на скоростта на резултатите.
  • Трябва да се изключат всякакви стресови фактори, физическа активност. Не забравяйте да спите добре.

Всичко, което трябва да знаете за анализа, използвайки примера на една от лабораториите

Какво може да повлияе на резултатите?

ELISA анализът е доста точен метод за изследване. Грешки възникват в следните случаи:

  • нарушение на процедурата за вземане на материал;
  • при неправилно транспортиране и съхранение на материала;
  • докато приемате определени лекарства (лекарства за щитовидната жлеза, например, които могат да повлияят на концентрацията на TSH);
  • при наличие на скрити заболявания (включително STD, хламидия, например), метаболитни нарушения, имунодефицит;
  • по време на неонаталния период, когато майчините антитела нормално присъстват в тялото.

Декодиране, значения (норми и патологии)

Когато анализът е готов, пациентът получава формуляр, в който са посочени отрицателните (-) и положителните (+) резултати от всеки клас имуноглобулини. Тълкуването може да бъде:

  • Показано е възстановяването на пациента отрицателен IgM резултат, без определяне на IgA, IgG.
  • Хронично инфекциозно заболяване означава декодиране: (-) IgM и отрицателни, положителни IgG, IgA.
  • Липсата на защитна реакция към инфекции се показва от (-) стойности на IgM, IgG, IgA.
  • Острата инфекция се открива с отрицателни или положителни IgG и IgA, (+) IgM.
  • Постинфекциозен имунитет с (-) IgM, IgA и положителен IgG.
  • Обостряне на хронично заболяване - (+) показатели IgM, IgG, IgA.

Визуална демонстрация на ELISA анализ

Къде да направя?

Кръвният тест по метода IF се счита за популярна диагностика и се предлага от различни лаборатории и клиники в града.

В Москва можете да направите ELISA анализ:

  • в лаборатория Nearmedic,
  • Инвитро,
  • кралска клиника,
  • делтаклиник,
  • LDC Кутузовски,
  • MedCenterService,
  • онклинични мрежи,
  • доктор чудо,
  • семеен доктор,
  • K+31,
  • ООО Медицина и др.

В Санкт Петербург се извършва анализ на ELISA

  • в Мадис,
  • Американска медицинска клиника,
  • Клиника на д-р Филатов,
  • медем,
  • Клиника на д-р Пел,
  • Лека-Фарм,
  • клиника,
  • Експрес и др.

Много полезен образователен филм за ELISA анализа

Разходи за изследване

Състои се от броя на необходимите маркери. Колкото повече маркери, толкова по-висока е цената.

Цената за определяне на антитела към

  • цитомегаловирус Igm / IgG варира между 350-700 рубли,
  • до микоплазма 340-520 рубли,
  • за кандида 320-450 рубли,
  • Анти-Chlamydia tr. IgA + Anti-Chlamydia tr. IgG 1000-1300,
  • антитела от клас IgM към Chlamydia 500-600 рубли и др.
  • Вземането на кръв е средно 150-250 рубли.

Някои клиники и лаборатории предоставят услугата за изпращане на резултатите по имейл. Услугата е безплатна.

ELISA диагностика отнема специално мястов диагностиката на заболяванията.

Характеризира се широк спектър на действие, бързина и удобство на извършване, висока точност на резултатите, приемлива цена. Той е в търсенето, затова се предлага в различни клиники и лаборатории на града.

Диагностичният метод (ELISA) е информативен и не е твърде скъп, така че много лаборатории предлагат на своите клиенти този метод (ензимно-свързан имуносорбентен анализ). Изследването се провежда на празен стомах, кръвта за анализ се взема от кубиталната вена на пациента. Преди ELISA е препоръчително да не пушите и да не пиете алкохол.

Какво е кръвен тест ELISA?

Сред методите за анализ на кръвта, които позволяват да се оцени способността на организма да устои на инфекциозни заболявания и да се покаже фазата на заболяването, важно място заема ензимно-свързаният имуносорбентен анализ (ELISA). Провеждането на това изследване ви позволява цялостно да оцените активността на защитната функция на кръвта и да идентифицирате състоянието на имунодефицит при инфекциозни патологии, както и кръвни заболявания, автоимунни процеси и хормонални проблеми.

Това е лабораторен тест, който ви позволява да определите наличието на специфични антитела (защитни кръвни фактори от протеинова природа) към определени антигени (патогенни агенти). Сред антителата от първостепенно значение са имуноглобулините, които могат да съществуват под формата на имунокомплекси.

Имуноглобулините се произвеждат в резултат на сложни неврохуморални реакции на човешкия имунитет, които възникват като отговор на въвеждането на чужди антигени. Всеки тип патоген произвежда свои собствени специфични антитела. Те действат чрез "свързване" на антиген или патологичен микроорганизъм, образувайки комплексно съединение "антиген-антитяло", последвано от неутрализация, ензимен лизис, реакции на фагоцитоза и екскреция от тялото.Именно чрез наличието на определени комплекси методът ELISA определя вида на патогена или вредното вещество, присъстващо в пациента.

Струва си да се помни, че след курса на лечение антителата могат да останат в тялото ни много дълго време, дори след като инфекцията е напуснала тялото ни, т.е. остава така нареченият "серологичен белег". Да дадем пример: на нощното небе има хиляди звезди. Много от тези звезди отдавна са умрели, но тяхната светлина все още ни огрява от векове. Всъщност виждаме само следата на звездата. Има светлина, но звездите отдавна ги няма.

Но ако няма светлина, това не означава, че звездата не е била там. Същото е и с антителата. Наличието им не гарантира наличието на желания инфекциозен агент в организма. Липсата на антитела не означава, че няма инфекция. Ако резултатът от анализа чрез ELISA е положителен, това означава, че трябва да търсите инфекция с по-специфични и скъпи методи - PCR, бактериологични култури. Възможен е фалшив положителен резултат, ако няколко микроба имат подобна антигенна структура, тогава ще бъдат произведени „подобни“ антитела към различни микроби.

Какво представляват имуноглобулините

Открити и изследвани са 5 основни класа имуноглобулини - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. ролята на останалите все още не е напълно изяснена и те са на етап научно изследване.

Основната задача на имуноглобулин А (IgA) е защитните функции на лигавиците на дихателните пътища, стомашно-чревния тракт и отделителната система. При остро начало на заболяването е невъзможно да се идентифицират. Тези защитни комплекси се появяват едва от 2-та седмица от началото на заболяването, понякога по-късно. По-голямата част от имуноглобулин А е концентриран в лигавичните тъкани. Приблизително около 80%. Останалите антитела циркулират в кръвта.

Основната функция е неутрализиране и унищожаване на микроорганизми. След отзвучаване на острите прояви на заболяването количеството на тези имуноглобулини започва да намалява и напълно изчезва до 8 седмици от началото на заболяването. Ако IgA се открият на по-късна дата, това означава хроничен процес.

Основните и първи маркери на острата фаза на развиваща се патология са имуноглобулините от клас М (IgM). Те се откриват до 5-ия ден от началото на неразположението. Можете да определите присъствието им в кръвта за около 6 седмици. След това започват бързо да изчезват.

Остатъчният имунен отговор характеризира наличието на имуноглобулини клас G (IgG) в кръвта. Появата на тези фактори в кръвта се открива приблизително един месец след началото на заболяването. В бъдеще те могат да се определят в продължение на много месеци, години и дори цял живот, като изпълняват защитна функция срещу връщане (рецидив) на болестта и в някои случаи правят невъзможно вторичното развитие на патологията.

Ако количеството на имуноглобулин G започне да се повишава отново, тогава може да се подозира повторна инфекция. Подобно заключение може да се направи чрез провеждане на две или три проби, взети с интервал от 2 седмици.

Как се извършва кръвен ELISA?

За ензимно-свързан имуносорбентен анализ в повечето случаи се използва кръвта на пациентите, понякога се вземат стъкловидна тъкан, течност от гръбначния канал и амниотична течност.

Кръвта се изтегля през инжекционна игла в спринцовка от кубиталната вена. Изследването се провежда на празен стомах. Трябва да се помни, че приемането на определени лекарства може да повлияе на резултата от анализа. Преди да дарите кръв, трябва да се въздържате от пушене, пиене на алкохол. Употребата на наркотични вещества може да изкриви резултатите.

В случай на отрицателни стойности на имуноглобулините IgM, IgG, IgA, можем да говорим за липса на заболяване или начална фаза, а резултатът с минуси е възможен и при пълно възстановяване след значително време.

Ако IgA и IgM не се открият, а IgG е положителен, тогава най-вероятно говорим за формиран имунитет след инфекциозно заболяване или след ваксинация.

Ако IgA и IgM не се открият, а IgG е положителен, тогава най-вероятно говорим за формиран имунитет след инфекциозно заболяване или след ваксинация.

В случай на висок титър на IgM с отрицателни стойности на IgG, IgA, може да се заключи, че има остро инфекциозно заболяване.

Едновременните положителни стойности на резултатите от имуноглобулините - IgA, IgM, IgG са характерни за острата фаза на рецидив на съществуващо хронично заболяване.

Какво дава представената технология: определяне на наличието на хелминти в кръвта; търсене на други патогени в тялото; можете да разберете причините за влошаването на вашето здраве; лечението също се основава на анализи, получени по този начин; можете да наблюдавате състоянието на имунната си система.

Друга добра характеристика е възможността за проследяване на онкологични маркери, независимо от техния произход, но в зависимост от наличието им в организма, разбира се. Този тест е подходящ и за описване на състоянието на човешката репродуктивна система. Наличието на определени протеини, хормони и пептиди позволява да се прецени потенциалът на партньора по отношение на зачеването на дете, както и очакваното качество на бъдещия плод.

Кръвният тест за Giardia е доста популярна практика сред съвременните лекари. В допълнение, този изследователски метод е отличен инструмент за биомедицински анализи и количествена статистика по отношение на специфични антигени.

Как се използва ELISA?

Вярно е, че това са по-сложни случаи, така че качеството на такъв анализ ще зависи до голяма степен от работниците в лабораторията, извършващи изследването. Характеристики на технологията и нейната разлика от старите лабораторни изследвания:

  • сега вместо проба от изпражненията се използва кръв за определяне на наличието на хелминти;
  • изследването на пробата се извършва в лабораторията много бързо, на следващия ден можете да получите пълна информация;
  • цената на лабораторните изследвания е евтина, тъй като теологията е много проста;
  • кръвен тест за хелминти дава висока степен на точност.

Анализи в имунологичния анализ на кръвта чрез ELISA

Малко хора знаят какви са кръвните тестове от гледна точка на човешката имунологична система, тъй като тези тестове не са толкова чести. По правило такъв кръвен тест дава информация за вируса на имунната недостатъчност в човешкото тяло и е анонимен, тъй като се извършва по искане на пациента.

За вземане на проби се използва кръв, взета на празен стомах от вена, от която се получава серум за изследване чрез центрофугиране. В допълнение, изследването на кръвния серум може да разкрие редица полово предавани болести (сифилис, херпес, хламидия), както и всички видове хепатит, морбили, рубеола, паротит и токсоплазмоза.

По принцип, за провеждане на ELISA анализ, изследваният биологичен материал е кръвта, но цереброспиналната течност, съдържанието на стъкловидното тяло, амниотичната течност и др.

Имуноглобулините са имунни молекули, които могат да се свързват и неутрализират повечето инфекциозни агенти и токсини в тялото. В този случай най-важната характеристика на имуноглобулините е тяхната специфичност, т.е. способността да се свързват със специфичен антиген. Именно това свойство се използва за провеждане на кръвен тест за имуноглобулин.

Има пет вида имуноглобулини, но най-изследваните са имуноглобулините A, M и G. Имуноглобулините M и G са активни в кръвта. Имуноглобулините А са вид бариера на повърхността на лигавиците, тъй като те присъстват там в големи количества.

Имунологичният кръвен тест ви позволява да определите вида на имуноглобулините, благодарение на това ELISA ви позволява не само да диагностицирате заболяването, но и да определите стадия на това заболяване и да проследите динамиката на заболяването:

  • през първите 2 седмици от заболяването се откриват само имуноглобулини А;
  • от 2-ра до 3-та седмица на заболяването в кръвта се откриват имуноглобулини А и М;
  • Cc3 за 4 седмици, кръвен тест за имуноглобулин определя и трите вида;
  • при възстановяване имуноглобулините М изчезват в кръвта, а количеството на А и G намалява 2-4 пъти;
  • при наличие на хроничен процес имуноглобулини G задължително присъстват в кръвта, имуноглобулини М отсъстват, имуноглобулини А могат да присъстват или да не присъстват.

Обхват на имунологичен кръвен тест чрез ELISA

  • Диагностика на вирусни заболявания: хепатит, херпес, вирус на Епщайн-Бар, цитомегаловирус и др.;
  • инфекции, предавани по полов път: хламидия, гонорея, трихомонада, микоплазма, уреаплазма;
  • сифилис; ендокринология (определяне на нивата на хормоните);
  • туморни маркери (диагностика на онкологични заболявания); имунология (диагностика на имунодефицит);
  • алергология (диагностика и лечение на алергии).

Серологичният кръвен тест е лабораторен метод за изследване на кръвта, който се използва за диагностициране на инфекциозни заболявания и определяне на стадия на инфекциозния процес. Серологичната реакция се основава на взаимодействието на антитела и антигени.

Определянето на антигени се използва за определяне на рода и вида на микроорганизмите. Този метод на изследване се използва в урологията и венерологията. Кръвта за серологичен кръвен тест се взема сутрин на празен стомах от вената.

Показания за предписване и заболявания, открити чрез ELISA

Основният биоматериал за ELISA е кръвен серум: в лабораторията се взема кръвна проба от пациент от вена, от която впоследствие се отстраняват униформени елементи, които затрудняват анализа. В някои други случаи за анализ се използват гръбначно-мозъчна течност, амниотична течност, тампони от лигавица и др.

За да се избегнат изкривявания в резултатите, се препоръчва да се дарява кръв на празен стомах и две седмици преди изследването (ако целта е да се диагностицират хронични, латентни инфекциозни заболявания), е необходимо да спрете приема на антибиотици и антивирусни лекарства Невъзможно е да се покрие пълен списък с показания за ELISA.

Безспорните предимства на ELISA са високата чувствителност и специфичност на метода. Чувствителността е способността да се разпознае желаното вещество, дори ако концентрацията му в пробата е ниска. Специфичността, от друга страна, предполага точността на диагнозата: ако резултатът е положителен, това означава, че е намерено точно антитялото или антигена, а не някои други.

ELISA до голяма степен замени "златния стандарт" на микробиологията - бактериологичен диагностичен метод, по време на който, за да се идентифицира патогенът, беше необходимо да се изолира от тялото и след това културата да се отглежда върху хранителна среда в епруветка за няколко дни.

През цялото време, докато се извършваше анализът, лекарите бяха принудени да лекуват пациента „на сляпо“, като гадаеха за произхода на микроорганизма по симптомите на заболяването. Определянето на IgM с помощта на ELISA ви позволява да поставите точна диагноза още в първите дни на заболяването.

Високата степен на технологичност на ензимния имуноанализ минимизира влиянието на човешкия фактор, което намалява вероятността от грешка. Повечето от използваните в съвременните лаборатории тест системи и ELISA реактиви се произвеждат в индустриални условия, което гарантира точен резултат.

Недостатъци на метода ELISA

За съжаление, за да проведете ELISA, трябва да знаете какво да търсите: техниката на анализ предполага, че лекарят има предварително предположение за естеството на заболяването. Ето защо няма смисъл да се предписва такова изследване с надеждата случайно да се "отгатне" диагнозата.

В случай на диагностициране на инфекциозни заболявания, ензимният имуноанализ не може да открие патогена и да определи неговите специфични свойства: той само показва наличието на антитела в кръвта на пациента, косвено показвайки наличието на чужд микроорганизъм в човешкото тяло. ELISA е изключително точен, но не евтин метод, така че трябва да го използвате разумно и квалифициран лекар трябва да интерпретира резултатите.

Възможни резултати от ELISA

В зависимост от съдържанието на анализа формулярът може да представи данни под формата на таблица, в която са изброени всички антитела или антигени с отрицателни или положителни белези на реакция, или количествената стойност на резултата (отрицателен, слабо положителен, положителен или силно положителен) ще бъде посочено.

Последната опция определя колко антитела се съдържат в анализираната проба. Друг количествен показател е индексът на авидитет на антителата, изразен в проценти. Той показва колко време е минало от началото на инфекциозния процес (колкото по-висок е индексът, толкова повече).

Днес се произвеждат хиляди видове тест системи ELISA, които позволяват откриването на специфични антитела и антигени при различни патологии. Следователно този анализ се използва в почти всички медицински отрасли. Диагнозата, направена с помощта на ELISA, е гаранция за назначаването на адекватна терапия и ефективно лечение на заболяването.

При наличие на необходимите реактиви и добра организация на лабораторията, ще получите резултата от анализа до 1-2 дни след вземане на кръвта. В някои случаи, ако имате нужда от спешна реакция, този период може да бъде намален до 2-3 часа.

Списъкът на стандартните диагностични мерки, използвани за инфекциозни заболявания, включва ензимен имуноанализ. Ако ELISA за сифилис е положителен, не се паникьосвайте веднага.

Нека разгледаме по-подробно характеристиките на тази изследователска техника и принципите за дешифриране на резултатите, получени при различни категории пациенти.

Имуноензимният анализ е един от най-разпространените методи за диагностициране на инфекциозни заболявания. Той принадлежи към категорията трепонемни тестове, т.е. може да се използва за определяне на наличието в тялото на пациента на причинителя на сифилис - бледа трепонема.

Чрез ELISA сифилисът се открива поради откриването на антитела срещу трепонема. Те се съдържат в кръвта на пациента и техният вид и количество зависят от стадия и формата на заболяването, което ви позволява да получите важна информация за текущото състояние на човешкото здраве.

Предимства и недостатъци

ELISA много често се предписва при съмнение за сифилис или други инфекциозни заболявания. Това се дължи на факта, че анализът ви позволява да идентифицирате точния тип и стадий на заболяването, а неговата надеждност остава на високо ниво - вероятността за грешка въз основа на резултатите от множество изследвания е само 1%, първичният ELISA има точност около 90%.

Използването на висококачествени реактиви и модерно оборудване ни позволява да увеличим максимално точността на индикаторите.

Като цяло предимствата на метода са:

  1. Висока точност на резултата. Вероятността за получаване на неверни данни е много малка.
  2. Минимизиране на човешкия фактор на влияние.Съвременното оборудване за провеждане на ELISA изключва човешкото влияние върху резултатите от изследването поради автоматизацията на процеса.
  3. Откриване на специфични антитела. Невъзможно е да се объркат антигени от един тип с други, така че анализът показва точен резултат за конкретна диагноза.
  4. Фиксиране на най-малките отклонения от нормата. Дори и най-малката концентрация на патологични агенти няма да остане незабелязана.

Не забравяйте за недостатъците на този метод. ELISA има следните недостатъци:

  1. Висока цена. Високата цена се дължи на много фактори, по-специално на необходимостта от добро оборудване, висококачествени реактиви и специалисти с достатъчно ниво на обучение.
  2. Необходимостта от предварителна диагноза. Трябва да знаете кои антигени да търсите, тъй като без допълнителни данни ще бъде невъзможно да се направи точна диагноза.
  3. Вероятността за фалшив положителен резултат. Някои състояния на тялото и други фактори могат да изкривят крайните данни.

Показания за провеждане

Лекарят може да предпише ензимен имуноанализ за диагностициране не само на сифилис, но и на редица други инфекциозни заболявания.

Ако разгледаме ситуацията директно с инфекцията с трепонема, причината за изследването може да бъде:

  • появата на външни симптоми на заболяването (шанкъри, сифилитичен обрив, гума и др.);
  • значително намаляване на имунитета;
  • идентифициране или подозрение за сифилис при сексуален партньор, роднини и членове на семейството;
  • положителна реакция по време на други тестове;
  • идентифициране на други заболявания, които могат да бъдат свързани със сифилис;
  • личното желание на човек да бъде прегледан.

Методи за провеждане

ELISA може да се извърши по различни начини. Във всеки случай се избира най-подходящият вариант.

На първо място, методите се разделят на:

  1. Качествена. Установява се наличието на инфекция или вирус в тялото на пациента.
  2. Количествени. Определя концентрацията на антитела срещу патогенен агент в човешкото тяло, което показва етапа и интензивността на развитие на заболяването.

Съществува и класификация на методите за провеждане на ELISA според принципа на възпроизвеждане на необходимата реакция.

Има 3 варианта:

  1. Направо. Белязаните антитела се инжектират в предоставените кръвни проби.
  2. Индиректен с антигени.Адсорбираните антигени се поставят предварително в клетките на полистиролова плака, предназначена за ELISA. След това към тях се добавят антитела на вируси, което провокира образуването на имунни комплекси, необходими за по-нататъшна оценка на резултатите.
  3. Индиректен с антитела.За болести, предавани по полов път, този метод често се използва. Това включва предварителна сорбция на антитела, едва след това антигените се добавят към плаката.

Правила за вземане на проби от материали

За да се намалят рисковете от получаване на фалшиви резултати, е необходимо да се дарява кръв за анализ правилно.

Преди да се подложите на ELISA, трябва да се спазват някои ограничения:

  • избягвайте силен физически и емоционален стрес;
  • откажете пушенето и алкохола поне 1 до 3 дни предварително;
  • за няколко дни трябва да преминете към правилно хранене;
  • желателно е жените да контролират фазата на менструалния цикъл, тъй като хормоните могат да изкривят резултатите;
  • последното хранене трябва да бъде 8-10 часа преди кръводаряването;
  • за 10 дни се изключват лекарства, които могат да повлияят на резултатите от изследването.

За ELISA се взема венозна кръв от кубиталната вена, трябва да се вземе сутрин на празен стомах. По принцип се прилагат стандартните правила за подготовка за вземане на венозна кръв. В зависимост от наличието на кое заболяване се изследва могат да се въведат допълнителни изисквания за предварителна подготовка на пациента.

Методика

Инструкциите за провеждане на ELISA са доста прости:

  1. Пациентът взема кръв от вената.
  2. Взетият материал се подготвя и разделя на проби върху специална фина палета.
  3. Антигените се смесват с антитела според избрания метод.
  4. Реакцията се оценява. Пробите се сравняват с контролните проби, извършва се качествена и количествена оценка на резултатите.
  5. Данните се въвеждат в специална таблица с прилагане на количествени показатели (общи антитела).
  6. Лекуващият лекар дешифрира резултатите. Ако е необходимо, се предписва подходящо лечение.

След прегледа на пациента се издава документ с резултатите. Той има формата на таблица със съответните обозначения срещу всеки тип имуноглобулин в пресечната точка с имената на инфекциозните заболявания.

Декриптиране

Само специалист ще може правилно да дешифрира резултатите от анализите. Трудно е да разберете сами, например, какво означава резултатът от ELISA k = 1 4. Сифилисът може да се появи и в различни форми, което също влияе на крайните данни.

Резултатите показват 3 вида имуноглобулини:

  1. IgM. Позволява да се определи периодът на заразяване със сифилис. Положителният резултат показва обостряне на заболяването. Липсата им може да показва ремисия на хронични патологии или латентна форма на заболяването.
  2. IgA.Показва заболяване, което е изминало повече от месец от заразяването. Това също е признак на острата фаза на заболяването, както с обикновени патологии, така и с напреднали хронични.
  3. IgG. Това е признак за пиковия период на заболяването, тоест неговото обостряне. При сифилис положителна реакция се появява известно време след лечението. При някои видове заболявания може да е признак на развит имунитет.

Тези вещества се произвеждат от тялото в определена последователност, което е допълнителен признак на заболяването. С качествени изследвания се установява само наличието на имуноглобулини в кръвта от всеки тип.

Това се изразява в промяна на цвета на материалите, участващи в анализа. Количествените показатели са спомагателни, те по-точно описват ситуацията. Съотношението на антигени и антитела показва тежестта на заболяването и интензивността на реакцията на организма.

Какво да правя

Ако пациентът наистина има сифилис, абсолютно винаги се открива положителен ELISA, невъзможно е да не забележите наличието на трепонема в такова изследване. Не се отчайвайте, болестта се повлиява добре от лечението, особено в началните етапи.

Какво да направите, ако резултатът от теста е положителен:

  • се подлагат на допълнителни прегледи според показанията на лекаря;
  • вземете курс на антибиотична терапия според избраната схема;
  • съсредоточете се върху укрепването на имунната система;
  • информирайте сексуалния си партньор за заболяването;
  • в бъдеще редовно се подлагат на превантивна диагностика до отписване в диспансера (след 5 години при липса на положителни резултати от теста).

Няма нужда да отлагате отпуск по болест и да се страхувате от публичност на резултатите. Диагнозата е криптирана и остава тайна, само ако има заплаха от инфекция за други хора, е необходимо да се информират роднини и сексуален партньор за проблема, така че те да преминат необходимите изследвания.

Фалшив положителен резултат и причините за него

Понякога резултатът от други тестове се записва и ELISA е фалшиво положителен за сифилис. Ето защо се препоръчва да се извършат 2-3 спомагателни метода и след известно време да се повтори имуноензимният анализ.

Такива неточности са редки, те се дължат главно на такива фактори:

  • бременност;
  • хронични болести;
  • скорошна ваксинация;
  • нараняване.

Фалшивите положителни резултати се разделят на остри и хронични, в зависимост от естеството на фактора, който ги е провокирал.

Основните са представени в таблицата:

Име и снимка Кратко описание
Бременност

Плодът и генетичният материал на бащата се разглеждат като чужди агенти.
остра форма
Инфекция

За борба с болестта се произвеждат имуноглобулини.
Нараняване

Тялото реагира с възпалителен процес, може да възникне съпътстваща инфекция.
Интоксикация

Възниква при отравяне с токсични вещества или проникване на определени патогенни микроорганизми.
сърдечен удар

Острите сърдечни проблеми създават значителна тежест за тялото и предизвикват редица десенсибилизиращи реакции.
Ваксинация

Въвеждането на ваксината засяга производството на имуноглобулини.
Хронична форма
Туберкулоза

Подобна реакция се проявява при пренебрегвана форма на туберкулоза.
Чернодробни патологии

Нарушава се работата на целия организъм.
Автоимунни заболявания

При такива неуспехи производството на имуноглобулини може да бъде неоправдано от наличието на антитела.
Болести на съединителната тъкан

Те са предимно генетични патологии и понякога „събарят” резултатите от изследванията.
Възрастови промени

При възрастните хора имунната система не работи и има много хронични заболявания.

При наличието на такива здравословни проблеми тестът за сифилис може да покаже положителен резултат, но това е само следствие от производството на протеини в организма за борба с болестта. ELISA обаче ги разпознава като антигени.

Здраво дете на възраст до година и половина може да получи фалшиво положителни резултати от ELISA, ако една жена е била заразена със сифилис по време на бременност. Преди тази възраст кръвта все още няма време да се обнови напълно, така че антителата на майката могат да присъстват в нея. Изключение прави ситуацията с откриването на IgM имуноглобулини.

Можете да научите повече за характеристиките на ензимния имуноанализ и неговата методология, като гледате видеоклипа в тази статия.