Enzyme immunoassay (EIA) ELISA: paano isinasagawa ang pagsusuri? Presyo


Sa MLC hemostasis laboratory, ginagamit ang isang bago, napakasensitibong paraan ng ELISA - ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), isang heterogenous solid-phase immunoassay. Sa panahon ng pag-aaral, natutukoy ang pagkakaroon ng mga antibodies sa dugo ng pasyente sa mga pathogen ng iba't ibang sakit.

Halaga ng pagsusuri sa ELISA*


Bakit kumuha ng enzyme immunoassay

Ang ELISA ay ginagamit sa maraming larangan ng medisina. Sa mga taong may coronary heart disease, atherosclerosis at hypertension, ang mga antibodies ay napansin sa mga protina ng hemostasis system - thrombin, a2 macroglobulin at antithrombin 3, pati na rin sa peptide bioregulators ng coagulation system - angiotensin 2 at bradykinin.

Napatunayan ng ELISA ang pagiging epektibo nito sa prenatal diagnosis at sa pagtukoy ng fertility - ito ay isang AFP test (diagnosis ng spina bifida, trisomy sa fetus), mga pagsusuri para sa steroid hormones estadiol, estriol, progesterone.

Maramihang mga komplikasyon ng pagbubuntis, kawalan ng katabaan at thrombophlebitis ay naghihimok ng isang malubhang sakit na autoimmune - antiphospholipid syndrome. Ang diagnosis ng APS sa Women's Medical Center ay isinasagawa din sa pamamagitan ng enzyme immunoassay: ang mga antibodies sa cardiolipin, b2-glycoprotein, prothrombin at annexin 5 ay tinutukoy.

Nilalaman

Upang masuri ang kakayahan ng katawan na labanan ang mga nakakahawang sakit o upang matukoy ang yugto ng patolohiya, ginagamit ang isang pagsusuri sa dugo. Ang pamamaraan ng ELISA ay sumasakop sa isang mahalagang lugar sa mga pag-aaral sa laboratoryo, nakakatulong ito upang komprehensibong pag-aralan ang aktibidad ng proteksiyon na pag-andar ng dugo, matukoy ang immunodeficiency sa mga nakakahawang sakit, mga karamdaman sa dugo, hormonal, mga proseso ng autoimmune.

Ano ang enzyme immunoassay

Ang pamamaraang ito ay tumutukoy sa mga pag-aaral sa laboratoryo, tinutukoy ang pagkakaroon ng mga proteksiyon na kadahilanan ng dugo ng isang likas na protina (antibodies) sa ilang mga ahente na nagdudulot ng sakit (antigens). Ang pagsusuri ng immunoenzyme ng dugo ay tumutukoy sa mga immunoglobulin, na maaaring makita sa anyo ng mga immunocomplex. Lumilitaw ang mga ito kapag nangyari ang mga kumplikadong neurohumoral na reaksyon ng immune defense ng tao, na nagiging tugon sa pagpapakilala ng mga dayuhang antigens.

Ang mga partikular na antibodies ay ginawa sa katawan laban sa bawat uri ng pathogen. Dagdag pa, ang pagbubuklod ng isang pathological microorganism o antigen ay nangyayari, isang kumplikadong tambalang "antigen-antibody" ay nabuo. Pagkatapos ito ay neutralisado, nangyayari ang enzymatic lysis, ang reaksyon ng phagocytosis, at ang proseso ay nagtatapos sa pag-alis mula sa katawan. Ang pagkakaroon ng mga partikular na complex, na tinutukoy ng ELISA, ay nagpapahiwatig ng uri ng pathogen, isang nakakapinsalang sangkap sa isang pasyente.

Mga klase ng immunoglobulin

Natuklasan at pinag-aralan ng mga siyentipiko ang 5 uri ng immunoglobulin: IgE, IgD, IgG, IgM, IgA. Mayroong iba pang mga klase, ngunit sila ay nasa yugto pa rin ng pananaliksik, at ang kanilang tungkulin ay hindi pa ganap na naipapaliwanag. Sa praktikal na gamot, mahalaga ang A, M, G. Ang pagiging informative, ang katumpakan ng pagpapasiya ay batay sa mga agwat ng oras kung saan lumilitaw ang mga ito, umabot sa maximum at nawawala.

Mga indikasyon para sa pagsusuri ng dugo sa pamamagitan ng ELISA

Sa tulong ng pagsusuri na ito, posible na suriin ang pagiging epektibo ng paggamot, magsagawa ng isang komprehensibong pag-aaral bago ang mga operasyon ng transplant, matukoy ang estado ng immunodeficiency at antibodies sa higit sa 600 mga uri ng allergens. Ang pagsusuri sa dugo gamit ang ELISA ay ginagamit bilang karagdagang paraan para sa pagtukoy ng mga selula ng kanser. Ang isang pagsusuri ay inireseta kung kinakailangan upang makita ang mga antibodies sa mga microbes na pumukaw sa mga venereal pathologies:

  • trichomoniasis;
  • syphilis;
  • toxoplasmosis;
  • mycoplasmosis;
  • ureaplasmosis.

Sa mga helminthic invasion sa pagsusuri ng ELISA, mapapansin ang pagtaas sa bilang ng mga immunoglobulin. Ang pananaliksik ay isinasagawa upang kumpirmahin ang presensya ng pasyente:

  • Epstein Barr virus;
  • impeksyon sa herpetic;
  • cytomegalovirus;
  • mga grupo ng viral hepatitis.

Pagsusuri ng dugo sa pamamagitan ng ELISA

Ang isang enzyme immunoassay ay hindi lamang ang opsyon para sa pagtukoy ng mga immunoglobulin. Minsan para sa pag-aaral na ito, ang cerebrospinal fluid, vitreous tissue, at amniotic fluid ay kinukuha. Kapag gumagamit ng dugo, ito ay kinokolekta mula sa cubital vein gamit ang isang injection needle. Kinakailangan na kumuha ng pagsusuri sa walang laman na tiyan; bago ang ELISA, hindi inirerekomenda na kumuha ng mga gamot na maaaring makaapekto sa resulta. Dapat mong iwanan ang alkohol, paninigarilyo, paggamit ng droga bago ibigay ang biomaterial. Mga pagpipilian sa resulta ng pagsubok:

  1. Sa mga negatibong tagapagpahiwatig ng immunoglobulins IgG, IgM, IgA, pinag-uusapan ng mga doktor ang kawalan ng patolohiya o ang paunang yugto. Ang parehong resulta (negatibo) ay pagkatapos ng ganap na paggaling pagkatapos ng mahabang panahon.
  2. Kung ang IgG ay positibo, ngunit ang IgM at IgA ay hindi nakita, ito ay nagpapahiwatig ng pagbuo ng kaligtasan sa sakit pagkatapos ng pagbabakuna o isang nakakahawang sakit.
  3. Sa mataas na titer ng IgM at negatibong IgA, IgG, ang isang talamak na nakakahawang sakit ay nasuri.
  4. Sa isang positibong tagapagpahiwatig ng IgG, IgM, IgA, pinag-uusapan ng mga doktor ang talamak na yugto ng pagbabalik ng isang umiiral na malalang sakit.
  5. Sa isang talamak na impeksiyon na nasa yugto ng pagbabawas (remission), ang pagsusuri sa ELISA ay nagpapakita ng mga negatibong titer ng IgM, at ang IgA at IgG ay magiging positibo.

Mga kalamangan at kawalan ng pagsusuri sa ELISA

Ang pangunahing negatibong punto ng pag-aaral na ito ay ang posibilidad na makakuha ng maling positibo o maling negatibong resulta. Ang dahilan para sa hindi pagiging maaasahan ay ang paggamit ng mga gamot, mga teknikal na pagkukulang ng laboratoryo. Ang proseso ng mga metabolic disorder sa katawan ay maaaring pekein ang pagsusuri. Ang pangunahing bentahe ng pagsusuri ng ELISA ay:

  • katumpakan, pagtitiyak ng diagnostic;
  • mababang halaga ng pagsusuri;
  • ang bilis ng pagkuha ng mga resulta;
  • ang posibilidad ng dynamic na kontrol ng yugto ng patolohiya, ang pagiging epektibo ng paggamot;
  • kadalian ng pananaliksik;
  • ang kakayahang magsagawa ng mass examinations ng foci ng impeksiyon;
  • kawalan ng sakit, kaligtasan para sa pasyente;
  • aplikasyon sa pagproseso ng teknolohiya ng impormasyon.

Video

May nakita ka bang error sa text?
Piliin ito, pindutin ang Ctrl + Enter at aayusin namin ito!

Naka-link na immunosorbent assay(o ELISA para sa maikli) ay isang pagsubok sa laboratoryo na tumutulong upang makagawa ng tumpak na pagsusuri, makilala ang mga nakatagong sakit, matukoy ang predisposisyon sa ilang mga sakit, at masubaybayan din ang bisa ng iniresetang therapy. Sa panahon ng pag-aaral, ang mga antigen na katangian ng mga tiyak na pathogen at antibodies sa kanila ay nakita sa serum ng dugo ng pasyente.

Ano ang punto

Upang maunawaan ang prinsipyo ng ELISA, kailangang tandaan kung paano gumagana ang immune system ng katawan, kung ano ang "antigen" at "antibodies", at kung ano ang mga function na ginagawa nila.

Ang antigen ay isang molekula na nagdadala ng ilang impormasyon tungkol sa isang cell. Kung ang isang dayuhang antigen ay pumasok sa katawan, ang mga antibodies (o immunoglobulins (Ig)), bilang tugon sa paglitaw ng isang dayuhang mikroorganismo sa katawan, ay magbibigkis dito at kilalanin kung ito ay sa kanila o sa ibang tao. Kapag ang signal ay "dayuhan ", ang mga antibodies ay nagsisimulang sirain ang isang potensyal na mapanganib na bagay. Ang ganitong pakikipag-ugnayan ay "antigen -antibody" ay tinatawag na immune complex. Ang pamamaraan ng ELISA ay nakabatay dito.

Mga indikasyon

Ang pagsusuri ay malawakang ginagamit upang masuri ang iba't ibang mga sakit. At kung ano ang lalong mahalaga, ang pag-aaral na ito ay tumpak na nag-diagnose ng mga sakit na nangyayari sa katawan na nakatago, nang walang mga sintomas.

Maaari itong magamit upang makilala:

  • mga nakakahawang sakit na nakukuha sa pakikipagtalik (chlamydia, ureaplasmosis, mycoplasmosis, syphilis, herpes, HIV, atbp.);
  • toxoplasmosis, tuberculosis, hepatitis, tigdas, atbp.;
  • mga problema sa autoimmune;
  • oncology;
  • mga sex hormone;
  • mga thyroid hormone;
  • allergy.

Ang ELISA ay maaaring makakita ng mga marker ng sakit sa puso. Bilang karagdagan, inireseta din upang suriin ang pagiging epektibo ng kurso ng paggamot, pati na rin bago ang ilang mga uri ng mga interbensyon sa kirurhiko.

Pagsasanay

Ang dugo para sa pananaliksik ay kinuha mula sa isang ugat sa isang walang laman na tiyan, mas mabuti sa umaga.

Sa bisperas, dapat mong iwasan ang alak, mga inuming matamis, kape at isang masaganang hapunan. Bilang karagdagan, ang mga resulta ng mga tagapagpahiwatig ay maaaring maapektuhan ng paggamit ng ilang mga gamot, kaya ang konsultasyon sa iyong doktor ay kinakailangan.

Dapat iwasan ang paninigarilyo 4 na oras bago ang kaganapan.

ELISA blood test sa ON CLINIC

Ang International Medical Center ON CLINIC ay nilagyan ng sarili nitong laboratoryo, na mayroong internasyonal na sertipiko ng kontrol sa kalidad. Dito, ang mga may karanasan at kwalipikadong mga espesyalista ay nagsasagawa ng iba't ibang uri ng pagsusuri (higit sa 1000 item).

Kabilang sa mga pakinabang ng pamamaraang ito, maaaring isa-isa ng isa ang katotohanan na nakikita na ito sa pinakamaagang yugto ng pag-unlad ng sakit. Ang sensitivity ng pagsubok ay 90%. Ang pag-aaral ay tumpak na nagpapakita ng dynamics ng nakakahawang proseso, na nagpapahintulot sa espesyalista na subaybayan ang pagiging epektibo ng therapy. Ang buong proseso ay ganap na awtomatiko, na nag-aalis ng impluwensya ng tinatawag na "human factor".

Bilang karagdagan, ang high-precision na kagamitan ay nagbibigay-daan sa iyo na makakuha ng maaasahang mga resulta ng pananaliksik sa pinakamaikling posibleng panahon.

Maaari mong tukuyin ang mga resulta sa parehong araw sa doktor. Batay sa kanila, pipili ang doktor ng taktika sa paggamot na tama para sa iyo.

SA KLINIK: Para sa higit sa 25 taon ng trabaho, kami ay pinili ng milyun-milyong tao. Sumali ka na!

Mga doktor

Makikipag-ugnayan sa iyo ang administrator upang kumpirmahin ang pagpaparehistro. Ginagarantiyahan ng IMC "ON CLINIC" ang kumpletong pagiging kumpidensyal ng iyong paggamot.

Ang listahan ng mga magagamit na pamamaraan ng diagnostic ay mabilis na lumalawak sa mga nakaraang dekada, sinusubukan ng mga diagnostician na pagsamahin ang mga pakinabang ng lahat ng mga nakaraang pagsusuri sa mga bagong pamamaraan, inaalis ang lahat ng kanilang mga nakaraang pagkukulang.

Kamakailan, mas at mas madalas sa listahan ng mga diagnostic procedure, lumilitaw ang enzyme immunoassay - isang moderno at medyo bagong pagsubok, na hindi gaanong kilala sa isang ordinaryong tao na walang kaugnayan sa gamot. Gayunpaman, ang pamamaraan na ito ay mabilis na nagdaragdag sa hanay ng mga tagasunod nito sa mga kwalipikadong kawani ng medikal. Ano ito at sa anong mga kaso dapat itong gamitin, maaari mong subukang malaman ito sa pamamagitan ng pamilyar sa iyong sarili sa mga tampok at pangunahing katangian nito.

Ang enzyme immunoassay ay isang instrumental na pamamaraan sa laboratoryo batay sa antigen-antibody molecular reaction, na ginagawang posible na makakita ng mga partikular na protina sa mga biological na materyales (mga sample para sa pananaliksik). Ang ganitong mga protina ay maaaring mga enzyme, iba't ibang mga microorganism (mga virus, bakterya, fungi), protozoa, atbp.

Matapos ang pagtuklas ng pamamaraan, binigyan ito ng pangalang ELISA test, na hindi nauugnay sa pangalan ng mga natuklasan, ngunit isang pagdadaglat ng buong pangalan sa Ingles na bersyon - enzyme-linked immunosorbent assay. Ginagamit ng mga doktor sa buong mundo ang pangalang ito, ang ilang mga doktor sa mga bansang nagsasalita ng Ruso ay tinatawag din ang ganitong uri ng pag-aaral.

Ang pangunahing prinsipyo ng pamamaraan ay ang molekular na reaksyon na "antigen-antibody".

Ang antigen ay anumang dayuhang molekula na pumapasok sa katawan ng tao bilang bahagi ng isang pathogenic microbe. Ang mga antigen ay karaniwang mga molekula ng protina. Bilang karagdagan sa mga microorganism, ang gayong "stranger" ay maaaring mga selula ng dugo ng ibang tao na hindi tumutugma sa grupo o Rh factor.

Bilang tugon sa pagpasok ng naturang antigen sa katawan, inilunsad ang isang immune reaction, na naglalayong protektahan laban sa anumang mga dayuhang molekula. Nangyayari ito dahil sa synthesis ng mga espesyal na ahente ng immune system - mga antibodies (immunoglobulins). Ang bawat antibody ay lumalapit lamang sa isang tiyak na antigen, at neutralisahin ang pathogenic na "tagalabas", na nagbubuklod dito sa isang solong kumplikado. Ito ay ang proseso ng naturang pagbubuklod na tinatawag na antigen-antibody reaction.

Mga uri ng antibodies

Ang lahat ng antibodies (immunoglobulins) ay nahahati sa 5 uri depende sa kung anong yugto ng immune response ang lalabas ng mga ito:

Para sa mga diagnostic ng ELISA, ang mga antas ng immunoglobulin na IgG, IgM at IgA ay pinakamadalas na mahalaga. Sa pamamagitan ng kanilang mga kredito, maaari mong malaman kung ang isang tao ay nagkaroon ng sakit bago o nahawahan kamakailan, kung siya ay nakabuo ng kaligtasan sa sakit o ang kanyang katawan ay walang pagtatanggol laban sa patolohiya.

Mga kalamangan at kawalan ng enzyme immunoassay

Sa ngayon, ang ELISA ay isa sa mga pinakatumpak at sensitibong pamamaraan. Ito ay pinagtibay ng mga espesyalista sa iba't ibang larangan ng medisina at patuloy na pinapalawak ang saklaw nito.

Mga kalamangan ng pamamaraan

  • Mataas na katumpakan ng natanggap na data.
  • Sensitivity (pinapayagan kang makita ang kinakailangang sangkap kahit na may kaunting presensya ng pathogen sa sample).
  • Ang posibilidad ng diagnosis sa mga unang araw ng sakit o sa panahon ng pagpapapisa ng itlog.
  • Ang bilis ng pagkuha ng data kumpara sa iba pang mga paraan ng katulad na katumpakan.
  • Mataas na automation ng proseso at minimal na partisipasyon ng tao, na binabawasan ang error ng tagapalabas.
  • Pagkuha ng data sa yugto ng proseso ng pathological at ang pagiging epektibo ng napiling therapy.
  • Walang sakit at mababang invasiveness sa pagpili ng materyal.

Mga disadvantages ng pamamaraan

  • Sa karamihan ng mga kaso, pinapayagan ka nitong matukoy ang tugon ng katawan sa isang pathogenic agent, at hindi ang pathogen mismo.
  • Bago ang pag-aaral, ang pinaghihinalaang sakit ay dapat na tiyak na kilala, dahil ang pagsusulit ay lubos na tiyak.
  • Ang posibilidad ng mga maling tagapagpahiwatig na sanhi ng mga teknikal na isyu, pagkuha ng mga gamot, ang sabay-sabay na pagkakaroon ng ilang mga malalang sakit o metabolic disorder sa katawan ng pasyente.
  • Ang interpretasyon ng mga resulta ay dapat gawin lamang ng isang mataas na kwalipikadong espesyalista, dahil upang mabigyang-kahulugan ang data na nakuha, kinakailangan na magkaroon ng espesyal na pagsasanay at isang malaking stock ng medikal na kaalaman sa isang partikular na lugar.
  • Ang ELISA ay isang medyo bihirang pagsusuri, samakatuwid, hindi ito ginagawa sa lahat ng diagnostic laboratories.
  • Ang pamamaraan ay medyo mahal, dahil bilang karagdagan sa mga reagents, ang laboratoryo ay dapat magkaroon ng maraming mamahaling kagamitan at mga sample ng antigens na ginawa sa mga espesyal na institusyon.

Kailan ginagamit ang enzyme immunoassay?

Ang buong listahan ng mga indikasyon para sa appointment ng enzyme immunoassay ay napakalawak, kabilang dito ang halos lahat ng mga sangay ng gamot.

Kadalasan, ang ELISA ay ginagamit para sa mga naturang layunin:

  • pagtuklas ng mga nakakahawang sakit;
  • diagnosis ng mga sakit sa venereal;
  • pagpapasiya ng immune status o mga indibidwal na autoimmune na sakit;
  • pagkakakilanlan ng mga marker ng tumor;
  • kahulugan ng mga hormone.

Sa kaso ng mga nakakahawang sakit at viral, ang pamamaraan ay nagbibigay-daan upang makilala ang mga sumusunod na pathologies:

Bilang karagdagan, pinapayagan ka ng ELISA na mabilis at epektibong matukoy ang isang atake sa puso, masuri ang potensyal ng reproduktibo ng katawan, tukuyin ang mga alerdyi, pinagmulan nito, atbp.

Ang pamamaraan ng ELISA ay ginagamit para sa pagsasagawa ng mga klinikal na pagsubok sa pagbuo ng mga bagong gamot at sa pagtatasa ng epekto nito sa katawan ng tao.

Mga uri ng mga sample at pamamaraan ng kanilang pagpili para sa pananaliksik

Kadalasan, ang test material para sa enzyme immunoassay ay dugo, na kinuha mula sa cubital vein ng pasyente. Ang sampling ay isinasagawa sa walang laman na tiyan, pangunahin sa umaga. Pagkatapos ng pagpili mula sa dugo, ang mga nabuong cell na nakakasagabal sa pag-aaral ay pinaghihiwalay at inalis, na nag-iiwan lamang ng serum.

Kapag nag-diagnose ng mga impeksyon sa genitourinary, ang mga pamunas mula sa mauhog na tisyu ng mga genital organ, uhog mula sa yuritra o cervix, mga sample mula sa tumbong, mga pag-scrape mula sa mga pagguho o ulser sa lugar ng singit at mula sa iba pang bahagi ng katawan ay kadalasang nagiging materyal. Maaaring kunin ang mga pahid mula sa oral cavity, gayundin mula sa nasopharynx.

Minsan ginagamit ang enzyme immunoassay sa obstetric at gynecological practice sa panahon ng pagbubuntis upang matukoy ang kondisyon ng amniotic fluid. Sa kasong ito, ang amniotic fluid ay nagiging sample. Upang gawin ito, ang isang maliit na halaga ng likido ay kinuha sa pamamagitan ng pagbubutas sa pantog ng pangsanggol na may mahabang karayom. Ang lahat ng mga manipulasyon ay isinasagawa gamit ang isang sterile na instrumento upang mabawasan ang mga posibleng panganib.

Kadalasan ang materyal ay nagiging cerebrospinal o serous fluid. Nangyayari ito sa lokal na kawalan ng pakiramdam, na iniksyon.

Tukuyin kung anong uri ng mga materyales ang kailangan para sa enzyme immunoassay, dapat ang espesyalista na nagpapadala sa pag-aaral. Kadalasan ang mga sample ay kinukuha ng ilang uri nang sabay-sabay o mula sa iba't ibang lokasyon. Ang doktor na nag-isyu ng referral para sa ganitong uri ng pagsusuri ay dapat ding sabihin sa pasyente ang tungkol sa paghahanda para sa paghahatid ng biomaterial.

Paghahanda para sa enzyme immunoassay

Upang madagdagan ang katumpakan ng data na nakuha pagkatapos ng enzyme immunoassay, ang paghahanda para sa pagpili ng materyal ay dapat na ang mga sumusunod:

  • 10 araw bago ang pag-aaral, ibukod ang mga antibiotic, antiviral at antimycotic na gamot;
  • para sa isang araw kinakailangan na ibukod ang alkohol, paninigarilyo at pag-inom ng droga;
  • sa parehong panahon, kinakailangan upang maiwasan ang pisikal na labis na pagsisikap;
  • ipaalam sa tagapagreseta ng lahat ng mga gamot na iniinom ng pasyente;
  • Ipaalam sa iyong doktor kung ikaw ay buntis o pinaghihinalaang buntis.

Pinakamainam kung ang mga materyales para sa pagsubok ay pinili sa umaga sa isang walang laman na tiyan.

Kung ang diagnosis ay naglalayong matukoy ang estado ng hormonal background, kung gayon mahalaga na matiyak ang isang kalmado na estado sa bisperas at maiwasan ang pag-igting ng nerbiyos. Para sa mga kababaihan, ang donasyon ng dugo para sa mga hormone ay malinaw na tinutukoy ng panahon ng buwanang cycle, na tatalakayin ng doktor sa oras ng appointment.

2-3 araw bago ang pag-sample, ang mga pritong at mataba na pagkain ay dapat na hindi kasama sa menu, at ang mga citrus fruit at anumang iba pang orange at dilaw na prutas at gulay ay hindi dapat kainin bago ang pagsusuri sa hepatitis.

Pag-decipher ng mga resulta ng enzyme immunoassay

Ang resulta ng isang husay na pag-aaral, bilang panuntunan, ay ipinahiwatig ng mga palatandaan na "+" (nahanap) o "-" (hindi natagpuan).

Sa pagkakaroon o kawalan ng ilang grupo ng mga immunoglobulin, ang mga sumusunod na konklusyon ay maaaring makuha:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - ang kaligtasan sa sakit ay ganap na wala (ang katawan ay hindi pa nakatagpo ng ganitong uri ng antigen bago);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - dati ay nagkaroon ng banggaan sa antigen na ito o sa isang bakuna;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - talamak na proseso ng pathological (malamang na pangunahin);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - talamak na kurso;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - relapse;
  • JgM (-) - yugto ng pagbawi.

Ang dami ng mga halaga ay nagdadala ng isang malaking pag-load ng impormasyon, ngunit tanging ang dumadating na manggagamot lamang ang makakapagbigay-kahulugan sa kanila, batay sa mga nakaraang indikasyon, ang edad ng pasyente, at ang mga pamantayan para sa bawat partikular na sakit. Para sa kadahilanang ito, imposibleng suriin ang mga resulta sa iyong sarili.

Gaano katagal maghintay para sa mga resulta

Ang pamamaraan na ito ay may maraming mga varieties, depende sa kung saan ang termino para sa pagkuha ng data sa kamay ay tinutukoy. Ang average na tagal ng mga diagnostic ng ELISA ay 4-6 na oras, na ginagawang posible na maglabas ng mga resulta sa susunod na araw.

Ang pinakamahabang pamamaraan ay tumatagal ng hanggang 10 araw, halimbawa, sa kaso ng pagtuklas ng impeksyon sa HIV.

Sa kaso ng kagyat na pangangailangan, posible na gumamit ng mga express na pamamaraan, kung saan ang sagot ay nakuha sa loob ng 1-2 oras.

Saan ako makakakuha ng pagsusulit sa ELISA?

Dahil ang mga kagamitan para sa ganitong uri ng mga diagnostic ay medyo mahal, hindi lahat ng mga laboratoryo ay maaaring bumili nito. Bilang karagdagan, ang mga pagsubok na naglalaman ng mga partikular na antigen ay may limitadong buhay sa istante (karaniwan ay mga 1 taon), kaya kailangan nilang patuloy na i-update.

Para sa mga kadahilanang ito, ang mga institusyong medikal ng estado ay hindi palaging may mga laboratoryo ng ELISA. Kadalasan, kailangan mong makipag-ugnayan sa malalaking pribadong medikal o malalaking diagnostic center.

Upang magsagawa ng pag-aaral ng ELISA, ang laboratoryo ay dapat magkaroon ng isang espesyal na lisensya, at ang mga kawani at mga katulong sa laboratoryo ay dapat sumailalim sa espesyal na pagsasanay.

Kadalasan, ang isang tiyak na sentro ng diagnostic o laboratoryo ay inirerekomenda ng doktor na namamahala sa pasyente para sa pagsusuri.

Ang halaga ng enzyme immunoassay

Ang presyo para sa pag-aaral na ito ay depende sa rehiyon ng bansa at sa antas ng klinika na nagbibigay ng serbisyo. Sa Moscow, ang pinakamababang presyo para sa pagpapasiya ng isang antigen ay nagsisimula mula sa 700 rubles. Kung kinakailangan upang matukoy ang ilang mga immunoglobulin nang sabay-sabay, ang presyo ay ibubuod.

Sa kaso ng isang kagyat na pagsusuri, ang gastos ay tumataas ng 150-200 rubles. para sa bawat antigen.

Sa kabila ng medyo mataas na gastos, ginagawang posible ng enzyme immunoassay na gawin ang pagsusuri sa pasyente bilang nagbibigay-kaalaman at mabilis hangga't maaari, na binabawasan ang oras bago ang paggamot at nagbibigay-daan sa mabilis mong patatagin ang kondisyon ng tao.

Ipinapakita ng video na ito ang pelikulang "Mga Batayan ng enzyme immunoassay".

ELISA analysis - ano ito? Ang buong pangalan ng pamamaraang diagnostic na ito ay tinatawag na enzyme immunoassay, at ito ay batay sa pagpapasiya ng iba't ibang klase ng antibodies, o mga immunoglobulin, na ginagawa ng katawan ng tao sa peripheral na dugo.

Sa pagsasanay ng isang manggagamot, ang pagsusuri ng ELISA ay tumatagal ng isang napakahalagang lugar kapag kinakailangan upang masuri ang anumang nakakahawang patolohiya. Ipinapakita ng pagsusuri na ito hindi lamang ang katotohanan ng pagkakaroon ng isang nakakahawang sakit, kundi pati na rin ang yugto ng proseso ng pathological. Gayundin, hindi lamang may kaugnayan sa pathogen, ang pamamaraan ng ELISA ay ipinahiwatig para sa paggamit: ginagamit ito upang masuri ang mga kondisyon ng allergy. Ang pagsusulit na ito ay nagpapahintulot sa iyo na makilala ang mga problema sa immune system, na may maraming mga sakit ng hematopoietic system, autoimmune at iba pang mga karamdaman.

Bakit kailangan ang ELISA?

Ang lahat ng mga mananaliksik ay may hilig na maniwala na ang pangalang "antibody" ay napili nang hindi maganda. Ngunit gayon pa man, sinasalamin nito ang isang mahalagang katangian ng mga immunoglobulin: nagagawa nilang magbigkis at mag-neutralize ng mga nakakapinsalang sangkap, na lumalapit sa kanila tulad ng isang "susi" sa isang "lock". Ang dami ng antibodies sa dugo ay sumasalamin hindi lamang sa pangkalahatang kakayahan ng katawan na ipagtanggol laban sa mga impeksiyon, kundi pati na rin ang kakayahang bumuo ng mga nagpapalipat-lipat na immune complex, na maaaring mangyari sa iba't ibang mga sakit na autoimmune, tulad ng rheumatoid arthritis o ankylosing spondylitis.

Ang mga complex ng antibodies na may antigen (isang nakakapinsalang kadahilanan ng isang nakakahawang kalikasan) ay ang resulta ng tugon ng katawan sa pagpapakilala ng "mga estranghero". Samakatuwid, natututo ang immune system na kilalanin ang mga ito, sa tulong ng mga lymphocytes, sinasanay nito ang mga immunocompetent na selula, at nakakagawa sila ng mga partikular na antibodies. Kaya, iba ang pagkakaayos ng mga antibodies sa Epstein virus kaysa sa mga antibodies sa viral hepatitis C, o sa E. coli, at anti-HAV, o mga antibodies sa hepatitis A virus, na naiiba kaysa sa mga autoantibodies sa cartilage tissue. Ito ay ang mataas na pagtitiyak at pagsusulatan ng mga immunoglobulin sa isang nakakahawang pathogen na gumagawa ng naturang pag-aaral sa laboratoryo bilang isang enzyme immunoassay ng dugo na may mataas na halaga.

Matapos ang isang malakas na koneksyon ng mga antibodies at antigens sa isang solong complex (antigen-antibody), ang mga nakakapinsalang salik ay nawawala ang kanilang kakayahang makapinsala sa mga tisyu ng katawan, at pagkatapos ang mga complex na ito ay alinman sa neutralisado o lysed ng phagocytosis ng mga neutrophil, at, "natutunaw", umalis sa katawan.

Maaaring ipakita ng pagsusuri sa dugo ng ELISA kung anong partikular na pathogenic factor ang kinakaharap ng ating katawan, sa anong yugto ang pakikipag-ugnayan ng katawan sa impeksyon. Pagkatapos ng pag-aaral, ang doktor ay maaaring gumawa ng isang pagbabala na may mataas na antas ng katiyakan, magreseta ng ilang mga uri ng paggamot, at sa ilang mga kaso ay maaaring matukoy ang pag-asa sa buhay ng pasyente, lalo na sa mga talamak na impeksyon sa viral, tulad ng viral hepatitis C.

Ngunit sa ilang mga kaso, walang mga nakakahawang ahente sa katawan, at ang mga antibodies ay "nang hindi sinasadya" ay sumasalakay sa kanilang sariling mga organo at tisyu, dahil ang mga immunocompetent na mga cell ay nakatanggap ng maling impormasyon. Ang ganitong mga sakit ay tinatawag na autoimmune, at ang enzyme immunoassay ay tumutulong din na makilala ang talamak na patolohiya na ito at tumulong sa pagsusuri.

Higit pa tungkol sa mga immunoglobulin

Sa kabuuan, ang katawan ng tao ay gumagawa ng 5 kilalang klase ng mga antibodies, na itinalaga Ig(na nangangahulugang immunoglobulins), na nabibilang sa mga klase A, M, G, E, at D. Lahat ng mga ito ay may malaking kahalagahan sa interpretasyon ng mga resulta ng ELISA - pagsusuri. Siyempre, marami pang mga kumplikado, at hindi pa lahat ay bukas. Ngunit sa pagsusuri ng iba't ibang sakit, ang unang tatlong uri ng antibodies ay pinakamahalaga. Ang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay gumagamit ng maximum na impormasyon: ang sandali kung kailan lumitaw ang mga antibodies sa dugo, ang pagbabago sa kanilang konsentrasyon depende sa oras, oras ng pagkawala, at ang uri ng mga partikular na antibodies.

Kaya, ang mga kalahok sa pangunahing, talamak na nakakahawang proseso ay mga immunoglobulin ng klase M, na palaging nagpapahiwatig ng isang talamak na yugto, kahit na ang klinikal na kurso ng sakit ay nabura. Ang isang tipikal na halimbawa ay ang anicteric form ng acute viral hepatitis B o C. Ang isang enzyme-linked immunosorbent assay para sa hepatitis ay magpapakita na ang isang tao ay may talamak na hepatitis, at mga sintomas tulad ng pananakit sa hypochondrium, tuyong bibig, pananakit ng mga kasukasuan at iba pang hindi- ang mga tiyak na sintomas ay madaling maunawaan.

Pagkalipas ng ilang linggo, ang mga antibodies na ito ay matatagpuan sa lalong nawawalang mga konsentrasyon, na nagbubunga sa mga immunoglobulin ng klase G. Natutukoy ang mga ito sa dugo sa loob ng maraming buwan, at kahit na taon, at nagpapahiwatig ng alinman sa isang pagbawi, at pagkatapos ay maaari silang manatili habang buhay, na bumubuo ng isang malakas na kaligtasan sa sakit. Ito ay nagpapahiwatig ng isang malakas na depensa laban sa mga antigen ng mga pathogen. Kaya, ang mga antibodies ng klase na ito ang gumagawa ng isang tao na immune sa paulit-ulit na mga kaso ng anthrax at salot. Ngunit may mga kaso kapag ang mga antibodies na ito ay hindi nakakasagabal sa kanilang mga nakakapinsalang epekto sa pagkakaroon ng mga antigens. Sa kasong ito, maaari nating pag-usapan ang isang pagtaas sa aktibidad ng isang talamak na proseso.

Una sa lahat, kailangan mong maunawaan na walang ganoong pagsusuri - "dugo lamang para sa ELISA". Mayroong pagsusuri para sa hepatitis, minsan para sa ureaplasma, o para sa syphilis. Kaya, ang pag-donate ng dugo para sa ELISA ay maaari lamang i-target, "pag-order" sa paghahanap para sa nais na impeksyon. Napaka hindi maintindihan kung bakit mag-donate ng dugo mula sa isang ugat, hindi alam kung ano ang hahanapin. Kaya naman ang paraan ng enzyme immunoassay ay isang makapangyarihang tool na mahalaga sa diagnostic search. Ang isang doktor lamang ang maaaring magreseta ng pagsusuri na ito, dahil sinasadya niyang naghahanap ng isang impeksyon na nailalarawan sa mga sintomas na ito. Ang isang ordinaryong tao, siyempre, ay maaaring mag-order ng 150 ELISA na pagsusuri ng dugo para sa "lahat ng mga impeksyon", ngunit ito ay magiging isang hindi makatwiran at magastos na diskarte sa pagsusuri, pagkuha ng mga pagsusuri para sa lahat.

Ang appointment ng mga pagsusuring ito ay pinaka-in demand para sa mga sumusunod na sakit at kundisyon:

Iba't ibang microbial at viral infection, sintomas ng mga nakakahawang sakit - pantal, lagnat, paninilaw ng balat, namamagang lymph node, diarrhea syndrome, pinaghihinalaang mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik.

Ang ELISA technique ay tumutulong sa pagtukoy ng ureaplasma at mycoplasma, syphilis at chlamydia, tuberculosis at cytomegalovirus infection, herpes, viral hepatitis at Epstein-Barr virus. Sa kasalukuyan, humigit-kumulang 500 iba't ibang mga impeksyon ang maaaring ma-verify gamit ang paraan ng enzyme immunoassay,

Kung pinaghihinalaan mo ang helminthic invasion, at ang pagkakaroon ng mga sintomas tulad ng allergy, eosinophilia sa dugo, pangangati, dyspepsia at pagbaba ng timbang,

Kapag natukoy ang mga allergens na nagdudulot ng edema ni Quincke, urticaria, igsi ng paghinga at pag-atake ng asthmatic suffocation.

Sa kasong ito, ang mga tiyak na Ig E ay nakita, at may mga buong panel ng allergo na makakatulong upang tumpak na matukoy ang allergen - pusit o hipon, tuyong pagkain ng isda na naglalaman ng daphnia, alikabok sa bahay. Sa hay fever, ang pamamaraang ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang mahanap ang eksaktong cereal, shrub o puno na nagdudulot ng pagbahing at lacrimation sa tagsibol,

  • Ang pamamaraang ito ay ipinahiwatig para sa mga pinaghihinalaang sakit sa autoimmune na ginagamot ng mga rheumatologist,
  • Kung pinaghihinalaan ang paglaki at aktibidad ng tumor,
  • Sa mga kumplikadong diagnostic ng mga estado ng immunodeficiency at impeksyon sa HIV,
  • Sa mga sakit sa dugo at sa paglipat, para sa isang komprehensibong pagtatasa ng kaligtasan sa sakit, halimbawa, bago ang isang atay o kidney transplant.

Ngayon alam na namin kung bakit kailangan mong mag-donate ng dugo para sa ELISA. Alamin natin kung paano isinasagawa ang pananaliksik na ito.

Paano isinasagawa ang pagsusuri?

Ang klasikong materyal ay ang venous blood ng pasyente. Ngunit kung kinakailangan, maaari mong suriin ang iba't ibang uri ng likido at tissue: mucus, laway, cervical secretion, cerebrospinal fluid, vitreous body ng mata, ang mga nilalaman ng umbilical cord at amniotic fluid. Mahalagang tandaan na ang pag-inom ng iba't ibang mga gamot, labis na pisikal na aktibidad, pag-abuso sa alkohol, ay maaaring lubos na masira ang mga resulta ng mga pagsusuri.

Mayroong ilang mga pamamaraan na nagpapahintulot sa pagsusuri na ito na maisagawa. Kadalasan sa mga klinikal na laboratoryo, ginagamit ang pamamaraang photometric. Sa kasong ito, ginagamit ang mga sangkap na may label na pangulay, pagkatapos ng reaksyon kung saan, at ang pagmamarka ng antigen-antibody complex, ang kanilang kulay ay nagbabago. Bilang resulta, nagbabago rin ang optical density ng solusyon, at ang pagbabagong ito ay direktang proporsyonal sa konsentrasyon ng mga nakitang antibodies. Matagumpay na ginamit ang mga spectrophotometer ng laboratoryo upang sukatin ang mga paglihis na ito.


Gayundin, para sa pagsasagawa ng ELISA, ginagamit ang isang fluorimetric na paraan, ang batayan nito ay fluorescence. Dito, din, ang intensity ng fluorescent substance na naayos sa mga sample sa ilalim ng pag-aaral ay kinakalkula.

Sa wakas, sa mga immunoassay, ginagamit ang mga electrochemical na pamamaraan upang matukoy ang aktibidad ng mga enzyme, na mga tiyak na label para sa mga antigen at antibodies. Ang mismong pamamaraan ng ELISA ay kadalasang nagsasangkot ng paggamit ng mga enzyme tulad ng alkaline phosphatase, malunggay peroxidase at galactosidase. Ang mga enzyme na ito ay maaaring magbigkis sa mga antibodies o antigens at markahan ang mga ito dahil sa kanilang aktibidad.

Kahinaan ng pamamaraan at mga pakinabang nito

Ang halatang "mga kalamangan" ay kinabibilangan ng demokratikong halaga ng pagsusuri, ang posibilidad ng paggamit nito sa screening sa malalaking grupo ng populasyon, halimbawa, kapag sinusuri ang mga buntis na kababaihan para sa HIV. Ang paraan ng enzyme immunoassay ay medyo tiyak at maaaring gamitin upang kontrolin ang kalidad ng paggamot ng maraming sakit. Mahalaga na ang pagsusuri ay inihanda nang mabilis, at ito ay simple at ligtas para sa pasyente.

Gayunpaman, mayroong maraming mga pitfalls. Kaya, kung ang mga immunoglobulin ay hindi napansin, kung gayon hindi ito nangangahulugang isang 100% na kawalan ng sakit. Pagkatapos ng lahat, laban sa background ng immunodeficiency, ang katawan ay maaaring hindi "malakas" para sa synthesis ng mga antibodies. Kung ang pasyente ay may malubhang pagkabigo sa atay, kung gayon ang atay ay hindi lamang makapag-synthesize ng protina - ang materyal na gusali para sa mga antibodies. Sa kasong ito, ang resulta ay tinatawag na seronegative, at ang pagkumpirma ng impeksyon ay kinakailangan ng direkta at pinaka-advanced na paraan ng pananaliksik - PCR, o polymerase chain reaction. Hindi tulad ng enzyme-linked immunosorbent assay, ang pamamaraang ito ay hindi nagpapakita ng reaksyon ng katawan sa nakakahawang proseso (na maaaring may depekto, o wala sa kabuuan), direktang tinutukoy ng PCR ang namamana na materyal, o ang pathogen mismo ay natagpuan.