Ang isang malaking bilang ng mga pamamaraan para sa pagbibilang ng phagocytosis ay inilarawan sa panitikan. Ang dami ng aklat na ito ay hindi nagpapahintulot sa amin na ilarawan nang detalyado ang lahat ng mga ito, kaya lilimitahan namin ang aming sarili sa paglalarawan ng iilan lamang.

Mga materyales at kagamitan

Upang magtrabaho, kailangan mong magkaroon ng:

Citratedextrose anticoagulant: 8 g citric acid. 22 g ng trisubstituted sodium citrate (two-water), 24.5 g ng glucose ay natunaw sa 1 litro ng tubig;

Dextrosodextran solution: 4.5 g NaCl, 25 g glucose, 30 g dextran (rel. mol. wt. 500,000) sa 1 l;

Ammonium chloride solution: 9 na bahagi 0.83% ammonium chloride, 1 bahagi Tris-HCl buffer pH 7.2 (20.6 g/l);

Isang halo ng ficoll - vizotrast: 9 g ng ficoll, 20 ml ng vizotrast, 100 ml ng bidistilled H 2 0, density 1.077;

Substrate para sa β-glucuronidase: 31.5 mg p-nitrophenyl-β-glucuronide at 100 μm Triton X 100 ay natunaw sa 100 ml 0.05 M sodium acetate buffer pH 5;

Myeloperoxidase deficiency reagents: fixative (10 ml 37% formaldehyde na may 90 ml absolute ethanol), substrate solution (100 ml 30% EDTA, 0.3 g benzidine chloride, 0.038 g ZnS0 4 x7H 2 0, 1 ml distilled water, CH 1 . 3 C00Nax3H 2 0, 0.7 ml 3% H 2 0 2); dalhin ang pH ng 1.0 M NaOH sa 6.0.

Mga komersyal na reagents:

FSB, Hank's solution at Eagle-MEM medium (State Institute for Immune Preparations and Nutrient Media, Berlin-Weissensee, GDR);

Heparin (5000 IU/mg) (Gedeon Richter, Hungary);

Serum ng bovine embryo (Flow Laboratories, USA, maaaring gamitin ang ibang kumpanya);

Visotrast (Listahan ng VEB Fahlberg, Magdeburg, GDR);

Infucoll (VEB Serumwerk Bernburg, GDR);

Dextran, ficoll (Pharmacia, Sweden);

Colloidal carbon Сl1/143a (Wagner, Pelikanwerke, Germany);

Diisodecyl phthalate, paradioxane (Coleman, Matheson at Bell, USA);

Triton X 100 (Serva, Germany, posible ang isa pang kumpanya);

Pulang langis O (Allied chemical corp., Morristown, NY, USA);

Iaranitrophenyl-β-glucuronide (Sigma, USA);

Safranin O (Fischer Scientific Lab., Chicago, USA);

Polystyrene beads, tubes (Nunc, Denmark);

Grid F 905 (VEB Orvo Wolfen, GDR).

Pagkuha ng mga phagocytes

Ang kinakailangang impormasyon tungkol sa paghihiwalay ng mga granulocytes ng tao ay maaaring makuha sa kabanata na "Paghihiwalay ng mga selula ng immune system"; para sa pagkuha ng peritoneal macrophage, tingnan ang mga seksyon na "Paglilinang ng mga macrophage at monocytes" at "Paghihiwalay ng mga macrophage mula sa isang suspensyon ng spleiocytes". Ang isyung ito ay isinasaalang-alang nang detalyado sa isang bilang ng mga gawa.

Bilang karagdagan, ang mga sumusunod na pamamaraan ay dapat ding banggitin:

8 ml ng dugo ay halo-halong may solusyon ng dextranglucose. Pagkatapos ay magdagdag ng 6% na solusyon ng dextran 75 sa 0.15 M NaCl (5 ml). Ang halo ay naiwan sa loob ng 45-50 min sa temperatura ng silid para sa sedimentation ng mga erythrocytes. Aspirate ng plasma. Ang mga natitirang erythrocyte ay lysed sa pamamagitan ng pagdaragdag ng 0.83% ammonium chloride (35 ml hanggang 15 ml ng plasma). Centrifuge sa loob ng 10 minuto sa 80g, suspindihin ang precipitate sa 0.15 M NaCl na pinalamig hanggang 0°C. Pagsamahin ang ilang mga precipitates at centrifuge sa loob ng 10 minuto sa 800 g. Ang mga cell ay pinakamahusay na nakatago sa yelo sa 0.15 M NaCl (ang medium na ito ay mas angkop kaysa sa buffered media na may divalent cations na nagiging sanhi ng pagdikit ng mga cell);

Kung ang bagay ng phagocytosis ay lebadura, ang hakbang sa paggamot ng ammonium chloride ay maaaring tanggalin, dahil ang mga pulang selula ng dugo ay hindi nakakasagabal sa proseso. Ang mga mononuclear cell ay maaaring makuha tulad ng sumusunod: ang heparinized na dugo ay halo-halong may 1/3 ng dami ng daluyan ng Eagle na naglalaman ng 15% glucose, layered sa isang layer ng isang pinaghalong ficoll - visotrast at centrifuged para sa 20 minuto sa 400 g. Ang fraction ng mga mononuclear cell ay na-aspirate gamit ang isang Pasteur pipette, hugasan ng dalawang beses gamit ang PBS, at ang isang suspensyon ay inihanda sa Eagle's medium (1x10 7 cells/ml).

Paghahanda ng butil para sa phagocytosis

Ang mga live na kultura ng Staphylococcus aureus (SG 511 o 502 A), Staphylococcus epididermidis SG 475, E. coli at iba pang enterobacteria, listeria, corynebacteria, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae ay mas karaniwang ginagamit. Ang mga mikroorganismo ay lumaki sa loob ng 24 na oras (kung kinakailangan, 48 oras) sa solid at likidong nutrient media. Ang nakolektang biomass ay hinuhugasan ng tatlong beses gamit ang 0.15M NaCl. Masyadong makapal ang isang suspensyon ay sinusukat sa 640 nm, ang konsentrasyon ay tinutukoy mula sa calibration curve.

Ang konsentrasyon ng mga mikroorganismo ay natutukoy din sa pamamagitan ng mga pamamaraan ng pagsala sa siksik na nutrient media; sa ilang mga kaso, ang enumeration ng mga microorganism ay maaaring isagawa sa pagbibilang ng mga silid.

Kapag nagtatrabaho sa mga live na bacterial culture, dapat mag-ingat na laging gumamit ng mga kultura sa parehong yugto. Ang pagdaragdag ng 0.01% bovine serum albumin ay nagtataguyod ng kaligtasan ng mga microorganism. Ang inihandang suspensyon ay nananatiling matatag sa loob ng 1-2 oras.

Ang mga pinatay na microorganism culture ay karaniwang nakukuha sa pamamagitan ng pag-init ng 30 minuto sa 80°C o sa pamamagitan ng paggamot na may dumadaloy na singaw. Ang mga napatay na mikrobyo ay hinuhugasan ng tatlong beses na may 0.15 M NaCl, muling sinuspinde, at ang konsentrasyon ng suspensyon ay tinutukoy.

Paghahanda ng lebadura ng panadero: 0.5 g ng lebadura ng panadero ay sinuspinde sa 0.15 M NaCl at inilagay sa isang paliguan ng tubig na kumukulo sa loob ng 30 minuto. Salain sa pamamagitan ng cotton-gauze filter. Kapag gumagamit ng live na lebadura, ang mga sariwang selula (4-5 araw na kultura) ay hinuhugasan ng tatlong beses sa medium ng Eagle na may pagdaragdag ng 1.0% na glucose. Karaniwan ang isang cell suspension na 10 8 at 10 9 na mga cell/ml ay ginagamit. Ang mga lebadura ay ginagamit bilang mga particle ng pagsubok sa pagtuklas ng mga depekto sa bahagi ng C5.

Paggamit ng isang suspensyon ng polystyrene particle: Maghanda ng 10% aqueous suspension ng polystyrene particle na may diameter na 1.091 μm. Ito ay diluted sa isang ratio ng 1 + 1 na may isang 0.2% BSA solusyon sa 0.15 M NaCl, centrifuged. Sa isang wavelength na 253 nm, ang isang suspensyon ng polystyrene 1 μg/ml ay nagbibigay ng pagsipsip ng 1.17x10 -3 .

Paglalapat ng isang suspensyon ng lipopolysaccharide - pula ng langis O sa mineral na langis: 2 g ng pula ng langis ay triturated sa 50 ML ng diisodecyl phthalate (o langis ng vaseline) sa isang porcelain mortar. Centrifuge para sa 20 min sa 500 g. Magdagdag ng 10 μg ng supernatant fraction sa 10 ml ng dioxin, sukatin ang optical density sa wavelength na 525 nm. Ang conversion factor ay 0.92. Sa ikalawang yugto, 40 mg ng lipopolysaccharide (E. coli 0.26 B6, atbp.) ay natunaw sa 3 ml ng 0.15 M NaCl. Pagkatapos ay 1 ml ng isang solusyon ng madulas na pula O sa diisodecyl sulfate ay idinagdag sa halo na ito, at ang halo ay sinuspinde ng 90 segundo. Ang suspensyon ay ginagamit kaagad at maaaring i-freeze.

Upang i-set up ang reaksyon ng phagocytosis, ang mga pormal na erythrocytes ay maaaring gamitin bilang mga particle ng pagsubok.

Phagocytosis ng bakterya, bactericidal

Eksperimento sa pagsususpinde ng live na bacteria: Karaniwang ginagamit ang ratio na 3-10 microbes/phagocyte. Sa kabuuang dami ng 2 ml, 1x10 6 phagocytes ay halo-halong may 3x10 6 - 1x10 7 microbes. Sa pagsasagawa, ang 1 ml ng bacterial suspension ay idinagdag sa 1 ml ng phagocyte suspension, kung saan idinagdag ang 8 IU ng heparin. Ang oras ng pakikipag-ugnayan ay karaniwang 30 minuto, sa ilang mga kaso ito ay mas mahaba. Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog, 0.5 ml ng pinaghalong kinuha, 1.5 ml ng isang 0.1% gelatin solution sa Hank's solution, pinalamig sa 0 ° C, ay idinagdag, at centrifuge para sa 3-4 minuto sa 300 g. Ang mga pahid ay inihanda mula sa namuo, na kung saan ay nabahiran ayon sa Pappenheim. Tingnan ang 200 mga cell (kung maaari tatlong beses). Kalkulahin ang porsyento ng phagocytosis. Ayon sa bilang ng mga bakterya na nakapaloob sa mga selula, ang index ng aktibidad ng phagocytosis ay kinakalkula: ang bilang ng mga phagocytized na bakterya ay pinarami ng porsyento ng mga phagocytic na selula; ang intensity ng phagocytosis ay ipinahayag ng mga numero mula 1 hanggang 4.

Grade 1: Phagocytosed na may I-4 bacteria
Grade 2: phagocytosed 5-7 bacteria
Grade 3: phagocytosed 8-10 bacteria
Grade 4: Mahigit sa 10 bacteria bawat cell na na-phagocytos

Kapag tinutukoy ang antas ng phagocytosis ng mga buhay na microbes, ang cell sediment at ang supernatant fraction ay hiwalay na sinusuri. Ang bilang ng mga live microbes ay natutukoy sa pamamagitan ng pagsala sa solid nutrient media na 0.1 ml ng mga pinag-aralan na fraction. Incubated para sa 24 (48) oras Kapag kinakalkula ang aktibidad ng bactericidal, ipinapalagay na ang isang nabuong kolonya ay tumutugma sa isang buhay na mikrobyo.

Para sa isang direktang pag-aaral ng aktibidad ng bactericidal, ang dugo ng mga pasyente at malusog na donor ay sinusuri kasama ang pagdaragdag ng isang antibiotic solution (5000 IU ng penicillin at streptomycin / ml) at kung wala ito, at isinasagawa din ang pagkontrol sa bakterya. Sample na komposisyon: 0.3 ml ng Hank's solution + 0.1 ml ng normal na serum na nakuha mula sa dugo na kinuha mula sa 5 donor + 0.5 ml ng leukocyte suspension (10 7 cells / ml) + 0.1 ml ng microbial suspension (10 6 microbes/ml). Ang isang solusyon ng antibiotics ay idinagdag sa 0.02 ml bawat sample. I-incubate ang mga sample sa 37°C at tukuyin ang bilang ng mga mikrobyo pagkatapos ng 20 minuto, 1.5 oras at 3 oras. Upang gawin ito, kumuha ng 0.1 ml mula sa bawat sample, palabnawin ang mga napiling aliquot na may solusyon ng Hank 10, 100 at 1000 beses at ilapat sa pinainit na agar. Minsan, lalo na kung ang mga antibiotics ay idinagdag, ang mga intermediate dilution ay inihanda upang tumpak na mabilang ang mga mikrobyo (halimbawa, 0.2 ml ng sample ay halo-halong may 5 ml ng Hank's solution, centrifuge para sa 5 minuto sa 450 g, ang precipitate ay natunaw sa 1.9 ml. ng PBS, inilapat sa agar) . Kung nais mong paikliin ang tagal ng pag-aaral ng bacteriological, maaari mong matukoy ang mga microbes sa loob ng cell sa pamamagitan ng fluorescence gamit ang acridine yellow staining.

Phagocytosis ng lebadura ng panadero: maghanda ng suspensyon na 10 9 cells/ml sa 0.15 M NaCl. Paghaluin ang 0.1 ml ng suspensyon sa 0.1 ml ng plasma ng pasyente, i-incubate sa loob ng 30 minuto sa 37 ° C, magdagdag ng 0.2 ml (10 6) PMNL, i-incubate ng 30 minuto. Ang mga aliquot ay kinukuha sa pagitan ng 5 hanggang 30 minuto. Binibilang ang 100 PMN at tinutukoy ang bilang ng mga nakuhang yeast particle bawat cell. Ang sumusunod na pagbabago ay kilala: 50 µl ng test serum ay idinagdag sa 50 µl ng guinea pig serum (dati ito ay diluted sa ratio na 1 + 1 sa Eagle's medium na may glucose), 50-200 µl ng isang suspensyon ng leukocytes ( 10 7 cell / ml) ay idinagdag, ang volume ay nababagay sa 450 µl na may medium Needle na may glucose at incubate ng 30 min sa 37 °C. Pagkatapos ay magdagdag ng 50 μl ng yeast suspension (10 8 cells/ml), ihalo, i-incubate ng 40 minuto sa 37 °C. Magdagdag ng 50 μl ng L-75 Se-methionine (kabuuang aktibidad 100 kBq), ihalo at i-incubate ng 1 oras sa 37 °C. Ang mga cell ay na-precipitate sa pamamagitan ng centrifugation sa loob ng 5 minuto sa 1000 g, sila ay hugasan ng dalawang beses sa PBS, ang radyaktibidad ay sinusukat sa isang gamma counter. Ang porsyento ng phagocytosed yeast ay kinakalkula ng formula:

Phagocytosis gamit ang isang solusyon ng pula ng langis sa mineral na langis: 0.2 ml ng particle suspension ay halo-halong may 0.8 ml ng cell suspension na pinainit sa 37°C. Pagkatapos ng 5 minuto ng pagpapapisa ng itlog, 6 ml ng isang 0.15 M NaCl solution na pinalamig hanggang 0°C na naglalaman ng 126 μg/l ng N-ethylmaleimide (upang ihinto ang pagkuha ng mga particle) ay idinagdag. Centrifuge para sa 10 minuto sa 250 g. Ang supernatant fraction ay itinapon, ang precipitate ay muling sinuspinde sa isang solusyon ng NaCl at N-ethylmaleimide (tingnan sa itaas), ang mga cell ay hugasan ng dalawang beses. Ang mga cell ay lysed sa ultrasound, ang pula ng langis ay inilabas. Magdagdag ng 1 ml ng dioxane. Centrifuged para sa 15 minuto sa 500 g, sukatin ang optical density sa isang wavelength na 525 nm laban sa purong dioxane. Ang antas ng phagocytosis (IF) ay tinukoy bilang ang halaga ng mineral na langis (mg) na hinihigop bawat minuto ng 10 7 mga cell. Maaari mong gamitin ang sumusunod na formula upang makalkula:

Ang pag-aaral ng phagocytosis sa monolayer ng macrophage:

1. Phase: 2 ml ng cell suspension (200,000 cells/ml) ay idinagdag sa sterile polystyrene tubes. Mag-inoculate ng 5 oras sa 37°C, pagkatapos ay hugasan gamit ang medium ng Eagle. 2 ml ng culture medium na may 10% inactivated (30 min, 56 °C) serum ng bovine embryo ay idinagdag sa mga test tube, na incubated sa 37 °C.

2. Phase A: isang suspensyon ng microbes (3-10/macrophage) ay ipinakilala, incubated para sa 30-60 min sa 37 °C, ang mga tubes ay anglaw 6 beses na may 3 ml na bahagi ng medium upang alisin ang non-phagocytosed microbes. Ayusin kaagad gamit ang pinaghalong 1 bahagi ng glacial acetic acid at 3 bahagi ng methanol. Mantsa ang paghahanda ayon sa Mayo - Griinwald, bilangin ang mga selula.

Phase B: pagtukoy ng intracellular na buhay na bakterya. Ang pagkakasunud-sunod ng mga operasyon ay pareho sa phase A bago ang yugto ng pag-aayos. Pagkatapos ng paghuhugas, maingat na alisin ang lahat ng mga bakas ng daluyan. Ang mga cell ay lysed, kung saan ang 2 ml ng isang 0.01% sterile solution ng bovine serum albumin (4°C) ay idinagdag, paulit-ulit na inalog. Karamihan sa mga cell ay lysed pagkatapos ng 20 minuto. Ang inilabas na bakterya ay tinutukoy sa pamamagitan ng pagsala sa siksik na nutrient media.

Phagocytosis ng erythrocytes: paghaluin ang 4x10 7 phagocytes sa 5x10 7 test erythrocytes sa 5 ml ng PBS. Ilipat ang 2 ml ng pinaghalong sa 5 mM phosphate buffer na pinalamig sa 0°C at centrifuge. Sukatin ang optical density ng supernatant fraction sa wavelength na 420 nm. Ang antas ng phagocytosis ay natutukoy sa pamamagitan ng pagbaba sa nilalaman ng hemoglobin sa cell-free phase gamit ang mga curve ng pagkakalibrate.

Pinasimpleng paraan para sa pagtukoy ng clearance

Isang halimbawa ng pagtukoy ng clearance sa mga daga: ang mga hayop ay tinuturok nang intraperitoneally sa 5x10 7 microbes bawat 100 g ng timbang (0.1 ml/ /100 g). Ang pinakamainam na dosis ay maaaring mula 10 6 hanggang 10 8 bawat 100 g ng timbang. Sa pagitan ng 1-2 oras, 3 indibidwal ang kinakatay mula sa bawat pangkat ng mga eksperimentong hayop; kabuuang tagal ng eksperimento 16 na oras. Sterilly kumuha ng 0.5 ml ng dugo mula sa puso, 1 ml ng peritoneal fluid, ilihim ang mga baga, atay, pali at bato. Ang mga silindro ay pinutol mula sa organ tissue na may Pasteur pipette. Tukuyin ang bilang ng mga microorganism sa pamamagitan ng pag-culture sa likido at solid nutrient media.

Halimbawa ng pagtukoy ng clearance sa mga daga: colloidal charcoal o may label na 51 [Cr] ram erythrocytes ay ginagamit. Ang mga daga (hindi bababa sa 5 indibidwal bawat karanasan) ay tinuturok sa ugat ng 0.01 ml ng isang suspensyon ng karbon sa rate na 16 mg bawat 100 g ng timbang. Sa loob ng 15 minuto na may pagitan ng 2 minuto, 0.025 ml ng dugo ang kinuha mula sa retroorbital space. Ang napiling 0.025 ml ng dugo ay idinagdag sa 2.0 ml ng 0.1% Na 2 C0 3 na solusyon. Pagkatapos ng hemolysis, ang konsentrasyon ng karbon ay tinutukoy ng colorimetrically sa wavelength na 675 nm gamit ang mga calibration curves.

t ay ang oras sa minuto, C ay ang carbon concentration sa sample.

Nawastong halaga ng phagocytosis:

Functional screening ng phagocytes

Degranulation determination (activity measurement (β-glucuropidase): 10 7 leukocytes ay sinuspinde sa 0.8 ml ng PBS sa plastic tubes, inalog ng 5 minuto sa 37 ° C. Magdagdag ng 0.2 ml ng sensitized LPS, fluorochromic particle (FC 80), cool 30 minuto sa yelo, centrifuge sa loob ng 10 minuto sa 250 g Suriin ang aktibidad ng enzyme sa supernatant fraction I-incubate ang 0.9 ml ng substrate mixture sa loob ng 18 oras na may 0.1 ml ng ininvestigated fraction Magdagdag ng 2 ml ng 0.1 M NaOH, sukatin ang optical density sa alon 410 nm.

Pagkalkula:

(OD 410 x20)/(1.84x18) = bilang ng nmol ng substance na inilabas sa loob ng 1 oras ng 10 7 leukocytes, ibig sabihin, ang antas ng degranulation ay ipinahayag sa mga nanomol ng paranitrophenyl-β-glucuronide.

Paraan para sa pagtukoy ng mga depekto sa myeloperoxidase: ang pinakamahusay na mga resulta ay nakuha sa pamamagitan ng biochemical na pagpapasiya ng H 2 0 2, na nagpapahiwatig ng mga pagbabago sa metabolismo sa panahon ng phagocytosis. Para sa mga praktikal na layunin, napakahalaga na ang pag-activate ng hexose-monophosphate shunt, ang pagbawas ng tetrazolium nitroene, at ang pagbubuklod ng exogenous iodine sa mga protina ng PMNL ay nauugnay sa pagbuo ng H 2 0 2 . Ang isang regular na blood smear ay naayos sa loob ng 30 segundo na may pinaghalong alkohol at formalin. Hinugasan ng distilled water, at stain para sa peroxidase sa loob ng 30 segundo. Sa mga cell na naglalaman ng peroxidase, ang mga inklusyon na nabahiran ng madilim na asul ay nakita.

Pagsubok para sa pagbabawas ng tetrazolium nitro blue (TNS). Ang THC ay binabawasan ng normal na PMNL sa formazan. Ihalo sa 0.1 ml ng dugo ang 0.1 ml ng 0.1% na solusyon ng THC sa 0.15 M NaCl, i-incubate sa loob ng 20 minuto sa 37 ° C, ihalo muli nang lubusan. Ang pagsasama ng Formazan sa mga cell ay tinutukoy ng mikroskopya. Ang resulta ay ipinahayag bilang isang porsyento ng mga cell na positibo sa formazan.

Ang sumusunod na paraan ay medyo mas kumplikado: 1 patak ng dugo ng pasyente ay inilapat sa isang coverslip. I-incubate sa loob ng 20 minuto sa 37°C sa isang basang silid, pagkatapos ay maingat na hugasan ang baso gamit ang sterile na 0.15 M NaCl. Maglagay ng cover slip sa isang slide na naglalaman ng 1 drop ng THC medium (0.5 ml ng serum + 0.3 ml ng sterile 0.15 M NaCl + 0.6 ml ng THC, tingnan sa itaas). Incubate para sa 30 minuto sa isang mahalumigmig na silid sa 37°C, alisin ang coverslip at tuyo sa hangin. Ayusin gamit ang absolute methanol sa loob ng 60 segundo at hugasan ng distilled water. Mantsang para sa 5 min na may safranin (1 g safranin + 100 ml distilled water + 40 ml gliserin), hugasan. Ang mga cell na positibo sa Formazan ay malaki, parang sabog, at naglalaman ng mga asul na butil. Karaniwan, halos 30% ng mga cell na positibo sa formazan ay nakita sa paghahanda.

Ang mga pamamaraan sa itaas para sa pagtatasa ng phagocytosis ay isang buod ng napakalaking bilang ng mga publikasyon. Ang mas detalyadong impormasyon sa mga isyung ito ay matatagpuan sa mga nauugnay na gawa.

Ang kaligtasan sa sakit- ito ay isang paraan upang maprotektahan ang katawan mula sa mga buhay na katawan at mga sangkap na nagdadala ng mga palatandaan ng genetically alien na impormasyon.

Ang kaligtasan sa sakit- isang mahalagang sistema ng mga biological na mekanismo ng pagtatanggol sa sarili ng katawan.

Sa tulong ng kaligtasan sa sakit, ang lahat ng dayuhan ay kinikilala at nawasak. Alien - hindi sariling, genetic dibisyon sa pagitan ng mga sangkap.

Mga Gawain - pagpapanatili ng integridad ng istruktura ng katawan. Nagbibigay

1. Pagpapanatili ng homeostasis
2. Pagpapanatili ng functional structural integrity ng katawan
3. Pagpapanatili ng biological na sariling katangian ng organismo.
4. Ang mga cell na genetically ay naiiba sa mga cell ng katawan ay nawasak.

Immunology- ang agham ng mga organismo, ang mga molekula ng immune system. Pinag-aaralan ang structural function ng immunity at ang immune response sa mga dayuhang antibodies. Pinag-aaralan niya ang pagkakasunud-sunod ng immune response at kung paano ito maiimpluwensyahan.

Pag-unlad ng immunology

Ang tagapagtatag ay ang mga gawa ng Mechnikov noong 1883. Nilikha ang phagocytic theory of immunity, 1897 - Nilikha ni Ehrlich ang humoral theory of immunity, 1908 - nakatanggap ng nob. Mga Premyo sa Teorya.

Empirically, ang mga bakuna ay iminungkahi (bago ang gook na iyon).

Gener - bakuna sa cowpox

1974 - naalis ang bulutong.

Ang bakunang Pasteur ay isang bakuna laban sa rabies.

kaligtasan sa mga species.

Ang kaligtasan sa sakit dahil sa likas na biological na katangian ng organismo.

Nag-iiba sa mga katangian

1. Species sign (ang mga hayop ay hindi dumaranas ng mga sakit ng tao)

2. Tinutukoy sa genetiko - sa pamamagitan ng mana

3. Non-specific - walang pinipiling direksyon, ngunit nagpapakita ng sarili laban sa iba't ibang mga impeksiyon

4. paulit-ulit ngunit hindi ganap

Mga mekanismo ng kaligtasan sa mga species.

Panlabas na mga hadlang kaligtasan sa mga species.

1. Ang balat ay isang mekanikal na hadlang sa mga nakakahawang ahente - mga pathogen. Mayroon itong bactericidal property dahil ang mga lihim ng pawis at sebaceous glands ay naglalaman ng hydrogen peroxide, pati na rin ang urea, unsaturated fatty acids, bile pigments, ammonia.
2. mauhog lamad. Ang lihim ng mauhog lamad ay naghuhugas ng mga pathogen mula sa ibabaw. Naglalaman ng lysozyme, secretory antibodies, inhibitors ng bacteria at virus.
3. Mga anatomic at physiological na tampok ng organismo. Cilia ng columnar epithelium ng upper respiratory tract. Mga paraan. Pagkaantala ng mga pathogens, pati na rin ang pagsusuka, pag-ubo, pagbahing - ito ay mga physiological acts. Ang mga pilikmata, kilay ng mga mata ay pumipigil sa pagpasok ng mga pathogens

Panloob na mga hadlang

1. Normal na microflora ng katawan, na naninirahan sa mauhog lamad, balat, iba't ibang biotopes. Ito ay isang antagonist ng pathogenic at conditional pathogenic organisms. May epekto sa pagbabakuna. Dahil dito, hinihikayat nito ang pagbuo ng mga antibodies. Synthesis ng mga bitamina - K, B.
2. mga lamad ng cell
3. Ang pag-andar ng histohematic barrier. Magsagawa ng proteksyon ng utak, reproductive system, mata.
4. lymphoid system. Kasama ang sistema ng mga lymphoid node at formations
5. Lagnat - ang pagtaas ng temperatura ay nagpapabuti sa mga proseso ng metabolic, daloy ng dugo, aktibidad ng mga enzyme, macrophage, pinipigilan ang pagpaparami ng mga virus at bakterya.
6. Ang pamamaga ay nangyayari kapag ang mga tisyu ay nasira. Ang mga phagocyte ay nagmamadali sa pokus ng pamamaga. Ang mga biologically active substance (BAS) ay isinaaktibo - serotonin at histomin, na nagpapataas ng vascular permeability, na humahantong sa pagbuo ng edema, pamumula, mga sangkap na naipon - mga antibodies at isang papuri na nagsisiguro sa pagkasira ng pathogen.
7. function ng excretory system. Inaalis nito ang mga nasirang pathogen sa pamamagitan ng gastrointestinal tract, respiratory tract at urinary system.

Mga mekanismo ng cellular ng kaligtasan sa mga species.

Phagocytosis at mga function ng natural killer NK cells.

Phagocytosis- ang proseso ng pagkuha at pagkasira ng mga dayuhang antigen ng mga phagocytes.

Ang phagocytosis ay nagsasangkot ng mga cell, na nahahati sa mga sumusunod na uri - microphages. Ang mga ito ay polymorphonuclear neutrophils sa peripheral blood. Macrophages - monocytes, phage macrophage, na tinatawag na histiocytes. Cooper cells ng atay, osteoclast - bone tissue, pati na rin ang microglial cells ng nervous tissue. Ang mga macro at microphage sa mga lamad ay may maraming mga receptor, enzymes at isang binibigkas na lysosomal apparatus.

Mga yugto ng phagocytosis

1. Ang paggalaw ng phagocyte patungo sa bagay ay isinasagawa ng chemotaxis. Ito ay isang direktang paggalaw ng cell sa ilang kemikal. Mga pangkat na tinukoy ng mga receptor.
2. Ang pagdirikit ng isang bagay sa mga phagocytes, na tinutukoy bilang pagdirikit at pagsipsip, na nangyayari sa pamamagitan ng pakikipag-ugnayan sa mga receptor.
3. Pagsipsip ng phagocyte ng bagay. Sa site ng attachment, ang cell wall ay invaginates. Ang bagay ay nahuhulog sa phagocyte. Ang isang phagosome ay nabuo, na nagsasama sa isang lysosome upang bumuo ng isang phagolysosome complex.
4. Iba ang kinalabasan. Mga pagpipilian sa kinalabasan 1. Pagtunaw ng bagay. 2. Pagpaparami ng bagay sa phagocyte 3. Pagtulak sa bagay palabas ng phagocyte

Mga mekanismo ng panunaw

1. O-dependent. Ang phagocyte ay aktibong sumisipsip ng oxygen, isang oxidative na pagsabog ay nangyayari, ang mga reaktibong species ng oxygen ay nabuo, tulad ng hydroxylion, superoxidanion, hydrogen peroxide, na may masamang epekto sa bacterium.
2. Independiyenteng oxygen. Isinasagawa ng mga cationic protein at lysosomal enzymes.

Mga uri ng phagocytosis

1. Nakumpleto - ang bagay ay natutunaw
2. Hindi kumpleto - hindi natutunaw ang bacteria

Mga mekanismo ng hindi kumpletong phagocytosis.

1. Ang bakterya ay maaaring lumalaban sa lysosomal enzymes, tulad ng gonococci
2. Ang mga mikroorganismo ay maaaring lumabas sa phagocyte at dumami, na karaniwan para sa rickettsiae.
3. Ang mga bakterya ay maaaring makagambala sa pagbuo ng mga phagolysosome - tubercle bacillus.

Pagtatasa ng phagocytosis.

Upang masuri ang aktibidad ng phagocytic, ginagamit ang mga sumusunod na tagapagpahiwatig

-Phagocytosis na porsyento (PF)- ang bilang ng mga phagocytes sa 100, na nagpapakita ng functional na aktibidad.

Normal laban sa staphylococci o anumang corpuscles - 60-80%

-Phagocytosis index (IF)- ang bilang ng bacteria na nakuha ng isang phagocyte sa 100. Humigit-kumulang 6-8 bacteria ang nakukuha ng 1 phagocyte.

Ang aktibidad ng mga phagocytes ay maaaring tumaas sa ilalim ng impluwensya ng mga cytokine, papuri, antibodies, kung saan mayroong mga opsonins. Ito ay mga antibodies na naghahanda ng bacterium para sa phagocytosis. Sa kanilang presensya, ang phagocytosis ay mas aktibo. Synthesized opsonins sa nabakunahang organismo.

Ang pagkakaroon ng mga opsonin ay tinutukoy ng opson-phagocytic index (OPI)

OFI = PF ng immune serum / FP ng normal na serum. Kung > 1, may mga opsonin. Ang isang pasyente na may brucellosis ay nagkakaroon ng mga opsonin. Ang Antietla ay naghahanda ng mga phagocytes upang makuha ang Brucella. 80/20=4. Kung ang< 1 человек болен.

Mga function ng phagocytes

1. Tinitiyak ang phagocytosis
2. Pagproseso ng mga antigen
3. Ang pagtatanghal ng antigen sa mga selula ng immune system at nagpapalitaw ng kasunod na tugon ng immune.
4. Ang pagtatago ng BAS - biologically active substances. Higit sa 5-. Mga cytokine, mga bahagi ng pandagdag, prostaglandin,

Mga natural killer.

Ito ay mga natural na mamamatay na kabilang sa mga lymphocytes na walang mga katangian ng T at B lymphocytes, may cytotoxic effect sa mga selula ng tumor, mga cell na naglalaman ng mga virus. Mayroon silang isang espesyal na protina na mabilis na nag-polymerize sa pagkakaroon ng mga calcium ions, nabuo ang mga subunit na naka-embed sa lamad ng cell, at isang channel ay nabuo kung saan ang tubig ay dumadaloy sa cell. Ang cell ay namamaga, sumasabog, na tinatawag na cytolysis.

Humoral na mga kadahilanan ng kaligtasan sa species

1. Ang papuri ay isang multicomponent system ng mga protina ng serum ng dugo na nagpapanatili ng homeostasis. Pinagsasama nito ang 9 na bahagi-fraction at itinalaga ng Latin C na may index na 1,2,3,4,5, atbp. Kasama sa system ang mga subcomponents С1R, C1S, C5A, C5B. Mga protina sa regulasyon, mga salik na kasangkot sa pag-activate ng papuri - gamma globulins, magnesium at calcium ions. Ang mga bahagi ng papuri ay nasa isang hindi aktibong estado, at ang pag-activate ng sistema ng papuri ay kinakailangan para sa pagpapakita ng isang gumaganang pagkilos. Mayroong mga sumusunod na paraan ng pag-activate -

1. Klasiko
2. Alternatibo
3. Lectin.

Pag-activate ng klasikong uri. Ang pag-activate ay nagpapatuloy bilang isang pagtaas ng kaskad.

Nasira ang 1 molekula, pinapagana ang 2 molekula, at iba pa. Pinasimulan ng antigen-antibody complex, na nakikipag-ugnayan sa unang bahagi ng C1, na nahahati sa mga subcomponents. Nakikipag-ugnayan sa C4, na nakikipag-ugnayan sa C2, na nag-a-activate sa C3, na nabubulok sa mga subcomponents na C3A at C3B, na humahantong sa pag-activate ng C5, na nabubulok sa mga subkomponyenteng C5a at C5b, nag-a-activate sa C6 at iba pa hanggang C9. Ang C6-C9 complex ay isang membrane attacking complex na naka-embed sa lamad, isang channel ay nabuo kung saan ang tubig ay pumapasok at ang cell lyses.

Pag-activate ayon sa alternatibong uri. Ito ay na-trigger ng LPS at microbial antigens, na agad na nag-activate ng C3 fraction. Karagdagang C5 at hanggang C9.

Pag-activate sa pamamagitan ng lectin Ang uri ay na-trigger ng mga monose-binding na protina na nagbubuklod sa mga residue ng monosa sa mga bacterial cell, isang protease ang na-activate, na nag-aalis sa 4th complement fraction. Pagkatapos C2,3 at iba pa hanggang C9. Bilang resulta, ang papuri ay isinaaktibo.

Ang papuri bilang resulta ng pag-activate ay gumaganap ng mga sumusunod na function

1. lysis ng cell
2. Ang pagpapasigla ng phagocytosis, halimbawa C5 fraction ay nagpapahusay ng chemotaxis
3. Nadagdagang vascular permeability, na ibinibigay ng mga subcomponents
4. Pinahuhusay ang proseso ng pamamaga

Ang mga humoral na kadahilanan ng kaligtasan sa mga species ay kinabibilangan ng enzyme lysozyme, na sumisira sa peptidoglycan ng cell wall, na nagiging sanhi ng pagkamatay ng bakterya, at na-synthesize ng macrophage at monocytes. Mataas sa dugo, likido sa katawan, laway at lacrimal fluid

Mga acute phase protein tulad ng C reactive protein. Ito ay isang malaking molekula ng protina ng 5 magkaparehong mga subunit - pentroxin. Ito ay may kaugnayan sa bacterial cell wall substance. Nagbibigay ng opsonization ng bacteria, activation ng compliment kasama ang classical pathway

Ang mga endogenous peptides na may aktibidad na antibiotic ay maaaring pumatay ng bakterya

Interferon, mga proteksiyon na protina ng suwero ng dugo, bukod sa kung saan, bilang karagdagan sa talamak na mga protina ng phase, properdin, beta lysine, monobinding protein ay nakikilala.

Ang kakanyahan ng phagocytosis ay maaaring ilarawan sa ilang salita lamang. Sa prosesong ito, ang mga espesyal na selula ng phagocyte ay "kinakalkula", nilalamon at hinuhukay ang mga nakakapinsalang particle na pumasok sa katawan, pangunahin ang mga impeksyon. Ang layunin ng hindi pangkaraniwang bagay ay upang maprotektahan tayo mula sa mga potensyal na pathogens, toxins at iba pa. At paano eksaktong isinasagawa ang mekanismo ng phagocytosis? Dumadaan ito sa ilang yugto, na tatalakayin nang mas detalyado sa ibaba.

Mga yugto ng phagocytosis:

Chemotaxis

Ang isang malisyosong bagay ay pumapasok sa katawan at nananatiling hindi napapansin doon sa maikling panahon. Ang bagay na ito, maging ito ay isang bacterium, isang dayuhang katawan, o iba pa, ay naglalabas ng mga espesyal na sangkap (chemoattractants) at direktang napupunta sa dugo o mga tisyu. Ang lahat ng ito ay nagpapaalam sa katawan ng pagkakaroon ng isang aggressor sa loob nito.

Ang isang kaskad ng biochemical reaksyon ay nangyayari. Sa unang yugto ng phagocytosis, ang mga mast cell ay naglalabas ng mga espesyal na compound sa daluyan ng dugo na nagiging sanhi ng isang nagpapasiklab na reaksyon. Ang simula ng proseso ng nagpapasiklab ay "gumising" ng mga macrophage at iba pang mga phagocyte cell mula sa isang estado ng pahinga. Ang mga neutrophil, na nakakakuha ng pagkakaroon ng mga chemoattractant, ay mabilis na lumabas sa dugo sa mga tisyu at nagmamadaling lumipat sa nagpapasiklab na pokus.

Mahirap ilarawan ito, at mas mahirap isipin ito, ngunit ang pagtagos ng isang pathogen sa katawan ay humahantong sa paglulunsad ng isang tunay na epekto ng domino, na kinabibilangan ng daan-daang (!) Ng iba't ibang physiological phenomena na nagaganap sa cellular at subcellular mga antas. Ang estado ng immune system sa yugtong ito ng phagocytosis ay maihahambing sa estado ng isang nababagabag na pugad ng pukyutan, kapag ang maraming mga naninirahan dito ay naghahanda upang salakayin ang nagkasala.

Neutrophil - lumilipat na phagocyte

Ang pagkakasunud-sunod ng phagocytosis ay nagpapatuloy sa ikalawang yugto, ang reaksyon ng pagdirikit. Ang mga phagocytes na lumapit sa tamang lugar ay nagpapalawak ng kanilang mga proseso sa pathogen, nakipag-ugnayan dito at nakikilala ito. Hindi naman sila nagmamadaling umatake agad at mas gusto munang siguraduhing hindi sila nagkakamali sa "stranger". Ang pagkilala sa isang nakakapinsalang ahente ay nangyayari sa tulong ng mga espesyal na receptor sa ibabaw ng mga lamad ng phagocyte.

Pag-activate ng lamad

Sa ikatlong yugto ng phagocytosis, ang mga hindi nakikitang reaksyon ay nangyayari sa mga selula ng tagapagtanggol na naghahanda sa kanila upang makuha at sirain ang pathogen.

Paglulubog

Ang phagocyte membrane ay isang likido, plastik na substansiya na maaaring magbago ng hugis. Ano ang ginagawa nito kapag nakatagpo ang cell ng malisyosong bagay. Ang larawan ay nagpapakita na ang phagocyte ay nagpapalawak ng "mga galamay" nito sa dayuhang butil. Pagkatapos ay unti-unti siyang kumakalat sa paligid niya, gumapang sa ibabaw niya at ganap na hinuhuli siya.

Ang phagocyte ay nagpapalawak ng mga proseso sa pathogen

Pagbuo ng phagosome

Kapag ang isang phagocyte ay sumasakop sa isang particle mula sa lahat ng panig, ang lamad nito ay nagsasara mula sa labas, at ang isang saradong bula ay nananatili sa loob ng cell kasama ang inatake na bagay sa loob. Kaya, tila nilalamon ng cell ang butil. Ang vesicle na ito ay tinatawag na phagosome.

Pagbuo ng phagolysosome (fusion)

Habang ang iba pang mga yugto ng phagocytosis ay nangyayari, sa loob ng phagocyte ang sandata nito ay inihahanda para sa paggamit - lysosome organelles na naglalaman ng "digestive" enzymes ng cell. Sa sandaling ang isang bacterium o iba pang mapanganib na bagay ay nakuha ng isang defender cell, ang mga lysosome ay lumalapit dito. Ang kanilang mga lamad ay sumanib sa shell na bumabalot sa butil, at ang kanilang mga nilalaman ay ibinubuhos sa "bag" na ito.

Ito ang pinaka-dramatikong sandali sa buong mekanismo ng phagocytosis. Ang nahuli na bagay ay natutunaw at pinaghiwa-hiwalay ng phagocyte.

Pag-alis ng mga produkto ng cleavage

Anuman ang natitira sa napatay na bacterium o iba pang natutunaw na butil ay aalisin sa selula. Ang dating phagolysosome, na isang sac na may mga produktong degradasyon, ay lumalapit sa panlabas na lamad ng phagocyte at sumasailalim dito. Kaya ang mga labi ng hinihigop na bagay ay tinanggal mula sa cell. Nakumpleto ang pagkakasunud-sunod ng phagocytosis

Ang kakanyahan ng phagocytosis ay maaaring ilarawan sa ilang salita lamang. Sa prosesong ito, ang mga espesyal na selula ng phagocyte ay "kinakalkula", nilalamon at hinuhukay ang mga nakakapinsalang particle na pumasok sa katawan, pangunahin ang mga impeksyon. Ang layunin ng hindi pangkaraniwang bagay ay upang maprotektahan tayo mula sa mga potensyal na pathogens, toxins at iba pa. At paano eksaktong isinasagawa ang mekanismo ng phagocytosis? Dumadaan ito sa ilang yugto, na tatalakayin nang mas detalyado sa ibaba.

Mga yugto ng phagocytosis:

Chemotaxis

Ang isang malisyosong bagay ay pumapasok sa katawan at nananatiling hindi napapansin doon sa maikling panahon. Ang bagay na ito, maging ito ay isang bacterium, isang dayuhang katawan, o iba pa, ay naglalabas ng mga espesyal na sangkap (chemoattractants) at direktang napupunta sa dugo o mga tisyu. Ang lahat ng ito ay nagpapaalam sa katawan ng pagkakaroon ng isang aggressor sa loob nito.

Ang isang kaskad ng biochemical reaksyon ay nangyayari. Sa unang yugto ng phagocytosis, ang mga mast cell ay naglalabas ng mga espesyal na compound sa daluyan ng dugo na nagiging sanhi ng isang nagpapasiklab na reaksyon. Ang simula ng proseso ng nagpapasiklab ay "gumising" ng mga macrophage at iba pang mga phagocyte cell mula sa isang estado ng pahinga. Ang mga neutrophil, na nakakakuha ng pagkakaroon ng mga chemoattractant, ay mabilis na lumabas sa dugo sa mga tisyu at nagmamadaling lumipat sa nagpapasiklab na pokus.

Mahirap ilarawan ito, at mas mahirap isipin ito, ngunit ang pagtagos ng isang pathogen sa katawan ay humahantong sa paglulunsad ng isang tunay na epekto ng domino, na kinabibilangan ng daan-daang (!) Ng iba't ibang physiological phenomena na nagaganap sa cellular at subcellular mga antas. Ang estado ng immune system sa yugtong ito ng phagocytosis ay maihahambing sa estado ng isang nababagabag na pugad ng pukyutan, kapag ang maraming mga naninirahan dito ay naghahanda upang salakayin ang nagkasala.

Pagdirikit

Ang pagkakasunud-sunod ng phagocytosis ay nagpapatuloy sa ikalawang yugto, ang reaksyon ng pagdirikit. Ang mga phagocytes na lumapit sa tamang lugar ay nagpapalawak ng kanilang mga proseso sa pathogen, nakipag-ugnayan dito at nakikilala ito. Hindi naman sila nagmamadaling umatake agad at mas gusto munang siguraduhing hindi sila nagkakamali sa "stranger". Ang pagkilala sa isang nakakapinsalang ahente ay nangyayari sa tulong ng mga espesyal na receptor sa ibabaw ng mga lamad ng phagocyte.

Pag-activate ng lamad

Sa ikatlong yugto ng phagocytosis, ang mga hindi nakikitang reaksyon ay nangyayari sa mga selula ng tagapagtanggol na naghahanda sa kanila upang makuha at sirain ang pathogen.

Paglulubog

Ang phagocyte membrane ay isang likido, plastik na substansiya na maaaring magbago ng hugis. Ano ang ginagawa nito kapag nakatagpo ang cell ng malisyosong bagay. Ang larawan ay nagpapakita na ang phagocyte ay nagpapalawak ng "mga galamay" nito sa dayuhang butil. Pagkatapos ay unti-unti siyang kumakalat sa paligid niya, gumapang sa ibabaw niya at ganap na hinuhuli siya.

Pagbuo ng phagosome

Kapag ang isang phagocyte ay sumasakop sa isang particle mula sa lahat ng panig, ang lamad nito ay nagsasara mula sa labas, at ang isang saradong bula ay nananatili sa loob ng cell kasama ang inatake na bagay sa loob. Kaya, tila nilalamon ng cell ang butil. Ang vesicle na ito ay tinatawag na phagosome.

Ang pagbuo ng phagolysosome (fusion)

Habang ang iba pang mga yugto ng phagocytosis ay nangyayari, sa loob ng phagocyte ang sandata nito ay inihahanda para sa paggamit - lysosome organelles na naglalaman ng "digestive" enzymes ng cell. Sa sandaling ang isang bacterium o iba pang mapanganib na bagay ay nakuha ng isang defender cell, ang mga lysosome ay lumalapit dito. Ang kanilang mga lamad ay sumanib sa shell na bumabalot sa butil, at ang kanilang mga nilalaman ay ibinubuhos sa "bag" na ito.

Pagpatay

Ito ang pinaka-dramatikong sandali sa buong mekanismo ng phagocytosis. Ang nahuli na bagay ay natutunaw at pinaghiwa-hiwalay ng phagocyte.

Pag-alis ng mga produkto ng cleavage

Anuman ang natitira sa napatay na bacterium o iba pang natutunaw na butil ay aalisin sa selula. Ang dating phagolysosome, na isang sac na may mga produktong degradasyon, ay lumalapit sa panlabas na lamad ng phagocyte at sumasailalim dito. Kaya ang mga labi ng hinihigop na bagay ay tinanggal mula sa cell. Ang phagocytosis sequence ay nakumpleto.

Ano ang tumutukoy sa tagumpay ng phagocytosis?

Sa kasamaang palad, hindi palaging ang buong proseso na inilarawan ay parang orasan. Sa ilang mga kaso, ang pathogen ay mas malakas kaysa sa phagocytic link ng kaligtasan sa sakit, nagtagumpay ito sa depensa, at ang tao ay nagkasakit. Napansin din ni Mechnikov na kung masyadong maraming fungal cell ang kumikilos sa larvae at worm, kung gayon ang mga nahawaang organismo ay mamamatay.

Ang isa pang posibleng dahilan ng pagkabigo ay hindi kumpletong phagocytosis. Ang ilang (kadalasang lubhang mapanganib at nakakahawa) na mga pathogen ay protektado mula sa panunaw ng mga phagocytes. Bilang resulta, nakapasok lamang sila sa loob ng mga ito, naninirahan doon at umuunlad, hindi naa-access sa iba pang mga kadahilanan sa proteksyon ng kaligtasan sa sakit. Pagkatapos ng lahat, ang isang "normal" na immune system ay hindi aatake sa sarili nitong mga selula, hindi nito alam na sa loob ng mga ito ay isang mapanganib na pathogen ...

Upang maiwasan ang "hindi matagumpay" na phagocytosis at magbigay ng pinakamahusay na proteksyon sa immune, inirerekumenda na uminom ng gamot Transfer Factor. Ang mga molekula ng impormasyon nito ay nagpapadala ng impormasyon sa mga immune cell kung paano kumilos sa iba't ibang mga pathogen at kung paano mapupuksa ang mga ito. Bilang isang resulta, ang gawain ng immune system ay nagiging mas mahusay, at ito ay nagdaragdag ng kanyang resistensya sa mga sakit na hindi pa lumitaw at ang pagiging epektibo ng paggamot sa mga na binuo na.

Ang Phagocytosis ay phylogenetically ang pinaka sinaunang proseso ng proteksyon na isinasagawa ng mga dalubhasang selula ng immune system (Mechnikov 1883, 1892; Greenberg, 1999). Ito ay I. I. Mechnikov na sa unang pagkakataon sa comparative morphophysiological studies ay pinatunayan ang pangunahing papel ng immune defense mechanism na ito sa pagbuo ng resistensya ng hayop sa impeksyon.

Ang mga propesyonal na phagocytes sa mga vertebrates ay pangunahing kinabibilangan ng mga neutrophil (polymorphonuclear leukocytes, microphages) at monocytes/macrophages (mononuclear, mononuclear phagocytes). Ang mga cell na ito ay morphophysiologically at biochemically adapted upang sumipsip at mag-inactivate ng mga microbial body at particle na mas malaki sa 0.5 µm ang diameter (ang laki ng pinakamaliit na bacteria ng Mycoplasma group). Ang pagkakaiba sa pagitan ng phagocytosis at iba pang anyo ng mga endocytic na reaksyon ng mga cell ay nagmumungkahi ng ipinag-uutos na pakikilahok sa prosesong ito ng actin cytoskeleton, na, sa anyo ng mga microfilament, ay tumagos sa pseudopodia na kumukuha ng mga microorganism at particle. Ang phagocytosis ay nangangailangan ng ilang partikular na kondisyon ng temperatura para sa kurso nito (t> +13-18 °C) at hindi nangyayari sa mas mababang temperatura sa mga vertebrates. Kasama ng mga neutrophil at monocytes/macrophages, ang mga immature na dendritic cells, eosinophils, mast cell, epithelial cell, platelets, at kahit ilang lymphocytes ay nakikibahagi sa phagocytosis.

Ang pakikipag-ugnay ng isang phagocyte sa isang microorganism ay nagpapasimula ng mga reaksiyong cellular na nauugnay sa cytoplasmic membrane, cytoskeleton, pag-activate ng mga mekanismo ng pagpatay ng pathogen, paggawa ng mga cytokine, chemokines, at mga molekula na may mahalagang papel sa pagtatanghal ng mga antigens (Underhill at Ozinsky, 2002) .

Mga receptor ng phagocytosis Mga cell Receptor Target ligand Mga leukocyte FcyRs mga immune complex pentraxin-opsonized zymosan (lebadura) CH-domain ng immunoglobulins SAP, SRV neutrophils, monocytes/ mga macrophage CR1 (CD35) Complement-opsonized bacteria at fungi C3b, C4b, masyadong CR3 (CD1 lb- CD18, oMp2, Maci) Complement-opsonized bacteria at fungi Gram-negatibong bakterya Bordetella pertussis NPS, C3d LPS mga hibla ng hemag-glutinin P-glycan macrophage, dendritic cells CR4 (CD1lc-CD18) M. tuberkulosis Hindi nakilala Mga macrophage CD43 (leukosialin/sialophorin) M. tuberkulosis masyadong napakataba CD48 bituka bakterya FimH Mga macrophage mannose receptor Pneumocystis candida albicans Mga labi ng mannose o fucose » Scavenger receptor AI/I1 Apoptotic lymphocytes Gram-positive cocci ? mga phosphatidylserine lipoteichoic acid Mga Ser-cell Muling scavenger Apoptotic Phosphate- bubong felts, thymus epithelial cells ceptor B 1 mga selula dilserine

Mga cell	Receptor	Target	ligand
Mga macrophage	MARCO	E. co/i, S. aureus	Hindi nakilala
»	MER	Apoptotic thymocytes	? Gas6Apoc-fatidyl-serine
marami	PSR	Apoptotic	Phosphati- dilserine
Mga macrophage	CD36	Apoptotic neutrophils	Phosphati- dilserine
»	CD14	Pseudomonas apoptotic	?lps hindi nakilala nilagyan
marami	pi-integrin	Yersinia spp.	mga infestation
mga selula
Mga macrophage	opfZ	Apoptotic	? thrombospondin
Dendritik	sofZ	Pareho	Hindi nakilala
al
Epithelial	E-cadherin	Listeria spp.	1p1A
mga selula
Pareho	Nakilala	Pareho	1p1B

Ang mga pangunahing yugto ng phagocytosis: chemotaxis, contact ng isang phagocyte na may microbe, pagsipsip (internalization) ng mga microorganism (phagocytosis sa makitid na kahulugan ng salita), inactivation (pagpatay) at kasunod na pagtunaw ng mga pathogens sa vacuolar apparatus ng phagocytes (pagkumpleto ng phagocytosis). Kasama ng mga functional manifestations na ito, ang phagocytosis, bilang panuntunan, ay sinamahan ng mga secretory reactions ng phagocytes, lalo na ang mga monocytes / macrophage at dendritic cells, kung saan ang iba't ibang mga physiologically active substance ay inilabas na nagsisiguro sa proteksiyon na kalikasan ng kurso at kumpletuhin ang buong proseso bilang isang buo.

Ang iba't ibang mga receptor ay kasangkot sa pagkilala, pakikipag-ugnay, at pagsipsip ng mga mikrobyo ng mga phagocytes (Talahanayan 7) (Greenberg, 78).

Grinstein, 2002). Gamit ang mga modernong molecular genetic na pamamaraan, naitatag na ang mga pagbabago sa pagpapahayag ng higit sa 200 mga gene ay sinusunod sa mga phagocytes sa panahon ng phagocytosis ng mga latex particle ng mouse macrophage, at mga 600 na gene sa panahon ng phagocytosis ng Mycobacterium tuberculosis (Ehrt et al., 2001) . Ang lahat ng ito ay nagpapatotoo sa kumplikado at kumplikadong katangian ng mga pagbabago sa istruktura at pagganap sa mga macrophage na nauugnay sa proseso ng phagocytic. Ang pag-unawa sa kanilang molecular na batayan ay magbibigay sa hinaharap ng paglikha ng mga pharmacological agent na partikular na kinokontrol ang proseso ng phagocytosis. Tinitiyak ng iba't ibang mga receptor ang kahusayan ng pagkilala sa mga pathogens ("non-native") at isang kinakailangang kondisyon para sa kasunod na naka-target na hindi aktibo ng mga nakakahawang ahente. Sa isa sa mga modernong konsepto ng likas na kaligtasan sa sakit, ang kumbinasyon ng mga receptor na ito ay karaniwang tinutukoy bilang isang sistema ng mga receptor (mga molekula) na kumikilala sa mga pattern ng molekular na nauugnay sa pathogen (Janeway, 1992, 2002). "