Enzýmová imunoanalýza (EIA) ELISA: ako sa vykonáva analýza? cena


V laboratóriu hemostázy MLC sa používa nová, vysoko citlivá metóda ELISA - ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), heterogénna imunoanalýza na pevnej fáze. Počas štúdie sa zisťuje prítomnosť protilátok v krvi pacienta proti patogénom rôznych chorôb.

Náklady na analýzu ELISA*


Prečo absolvovať enzýmový imunotest

ELISA sa používa v mnohých oblastiach medicíny. U ľudí s ischemickou chorobou srdca, aterosklerózou a hypertenziou sa zisťujú protilátky proti proteínom hemostatického systému - trombín, makroglobulín a2 a antitrombín 3, ako aj peptidové bioregulátory koagulačného systému - angiotenzín 2 a bradykinín.

ELISA preukázala svoju účinnosť v prenatálnej diagnostike a pri určovaní plodnosti - ide o AFP test (diagnostika spina bifida, trizómia u plodu), testy na steroidné hormóny estadiol, estriol, progesterón.

Viacnásobné komplikácie tehotenstva, neplodnosť a tromboflebitída vyvolávajú závažné autoimunitné ochorenie - antifosfolipidový syndróm. Diagnóza APS vo Women's Medical Center sa tiež vykonáva pomocou enzýmového imunotestu: stanovujú sa protilátky proti kardiolipínu, b2-glykoproteínu, protrombínu a anexínu 5.

Obsah

Na posúdenie schopnosti tela odolávať infekčným chorobám alebo na určenie fázy patológie sa používa krvný test. Metóda ELISA zaujíma dôležité miesto medzi laboratórnymi štúdiami, pomáha komplexne študovať aktivitu ochrannej funkcie krvi, určiť imunodeficienciu pri infekčných ochoreniach, krvných ochoreniach, hormonálnych, autoimunitných procesoch.

Čo je to enzýmová imunoanalýza

Táto metóda sa vzťahuje na laboratórne štúdie, určuje prítomnosť ochranných krvných faktorov proteínovej povahy (protilátky) voči určitým pôvodcom ochorenia (antigény). Imunoenzýmová analýza krvi určuje imunoglobulíny, ktoré možno detegovať vo forme imunokomplexov. Objavujú sa, keď sa vyskytujú komplexné neurohumorálne reakcie ľudskej imunitnej obrany, ktoré sa stávajú odpoveďou na zavedenie cudzích antigénov.

Proti každému typu patogénu sa v tele vytvárajú špecifické protilátky. Ďalej dochádza k väzbe patologického mikroorganizmu alebo antigénu, vzniká komplexná zlúčenina "antigén-protilátka". Potom sa neutralizuje, nastáva enzymatická lýza, reakcia fagocytózy a proces končí stiahnutím z tela. Prítomnosť špecifických komplexov, určená ELISA, indikuje typ patogénu, škodlivej látky u pacienta.

Imunoglobulínové triedy

Vedci objavili a študovali 5 typov imunoglobulínov: IgE, IgD, IgG, IgM, IgA. Existujú aj ďalšie triedy, ale stále sú v štádiu výskumu a ich úloha nie je úplne objasnená. V praktickej medicíne sú dôležité A, M, G. Informatívnosť, presnosť určenia je založená na časových intervaloch, za ktoré sa objavujú, dosahujú maximum a miznú.

Indikácie na vyšetrenie krvi pomocou ELISA

Pomocou tejto analýzy je možné vyhodnotiť účinnosť liečby, vykonať komplexnú štúdiu pred transplantáciou, určiť stav imunodeficiencie a protilátky na viac ako 600 typov alergénov. Krvný test pomocou ELISA sa používa ako dodatočná metóda na detekciu rakovinových buniek. Analýza je predpísaná, ak je potrebné zistiť protilátky proti mikróbom, ktoré vyvolávajú pohlavné choroby:

  • trichomoniáza;
  • syfilis;
  • toxoplazmóza;
  • mykoplazmóza;
  • ureaplazmóza.

Pri helmintických inváziách pri analýze ELISA sa zaznamená zvýšenie počtu imunoglobulínov. Uskutočňuje sa výskum na potvrdenie prítomnosti pacienta:

  • vírus Epstein-Barrovej;
  • herpetické infekcie;
  • cytomegalovírus;
  • skupiny vírusovej hepatitídy.

Krvný test pomocou ELISA

Enzýmová imunoanalýza nie je jedinou možnosťou na stanovenie imunoglobulínov. Niekedy sa pre túto štúdiu odoberá cerebrospinálna tekutina, sklovec a plodová voda. Pri použití krvi sa odoberá z kubitálnej žily pomocou injekčnej ihly. Rozbor je potrebné urobiť nalačno, pred ELISA sa neodporúča užívať lieky, ktoré môžu ovplyvniť výsledok. Pred darovaním biomateriálu by ste sa mali vzdať alkoholu, fajčenia, užívania drog. Možnosti výsledku testu:

  1. S negatívnymi indikátormi imunoglobulínov IgG, IgM, IgA lekári hovoria o absencii patológie alebo počiatočného štádia. Rovnaký výsledok (negatívny) bude po úplnom zotavení po dlhom období.
  2. Ak je IgG pozitívny, ale IgM a IgA sa nezistia, naznačuje to vytvorenie imunity po očkovaní alebo infekčnej chorobe.
  3. Pri vysokých titroch IgM a negatívnych IgA, IgG sa diagnostikuje akútne infekčné ochorenie.
  4. S pozitívnym indikátorom IgG, IgM, IgA lekári hovoria o akútnej fáze relapsu existujúceho chronického ochorenia.
  5. Pri chronickej infekcii, ktorá je v štádiu ustupovania (remisie), analýza ELISA ukazuje negatívne titre IgM a IgA a IgG budú pozitívne.

Výhody a nevýhody analýzy ELISA

Hlavným negatívnym bodom tejto štúdie je možnosť získania falošne pozitívnych alebo falošne negatívnych výsledkov. Dôvodom nespoľahlivosti je príjem liekov, technické nedostatky laboratória. Proces metabolických porúch v tele môže sfalšovať analýzu. Hlavné výhody analýzy ELISA sú:

  • presnosť, diagnostická špecifickosť;
  • nízke náklady na analýzu;
  • rýchlosť získania výsledkov;
  • možnosť dynamickej kontroly štádia patológie, účinnosti liečby;
  • jednoduchosť výskumu;
  • schopnosť vykonávať hromadné vyšetrenia ložísk infekcie;
  • bezbolestnosť, bezpečnosť pre pacienta;
  • uplatnenie v spracovaní informačných technológií.

Video

Našli ste v texte chybu?
Vyberte to, stlačte Ctrl + Enter a my to opravíme!

Prepojený imunosorbentový test(alebo skrátene ELISA) je laboratórny test, ktorý pomáha stanoviť presnú diagnózu, identifikovať skryté choroby, určiť predispozíciu k určitým chorobám a tiež sledovať účinnosť predpísanej terapie. Počas štúdie sa v krvnom sére pacienta detegujú antigény charakteristické pre špecifické patogény a protilátky proti nim.

Aká je pointa

Aby sme pochopili princíp ELISA, je potrebné si zapamätať, ako funguje imunitný systém tela, čo sú „antigén“ a „protilátky“ a aké funkcie vykonávajú.

Antigén je molekula, ktorá nesie určitú informáciu o bunke. Ak sa do tela dostane cudzí antigén, protilátky (alebo imunoglobulíny (Ig)) sa v reakcii na objavenie sa cudzieho mikroorganizmu v tele naň naviažu a rozpoznajú, či je to ich vlastný alebo cudzí. Na signál „cudzí“ protilátky začnú ničiť potenciálne nebezpečný objekt. Takáto interakcia sa nazýva „antigén -protilátka“. imunitný komplex. Na ňom je založená metóda ELISA.

Indikácie

Analýza sa široko používa na diagnostiku rôznych chorôb. A čo je obzvlášť cenné, táto štúdia presne diagnostikuje choroby, ktoré sa vyskytujú v tele skryté, bez príznakov.

Môže sa použiť na identifikáciu:

  • sexuálne prenosné infekčné choroby (chlamýdie, ureaplazmóza, mykoplazmóza, syfilis, herpes, HIV atď.);
  • toxoplazmóza, tuberkulóza, hepatitída, osýpky atď.;
  • autoimunitné problémy;
  • onkológia;
  • pohlavné hormóny;
  • hormóny štítnej žľazy;
  • alergie.

ELISA môže dokonca odhaliť markery srdcových chorôb. Okrem toho je tiež predpísané hodnotenie účinnosti priebehu liečby, ako aj pred niektorými typmi chirurgických zákrokov.

Školenie

Krv na výskum sa odoberá z žily na prázdny žalúdok, najlepšie ráno.

V predvečer by ste sa mali zdržať alkoholu, sladených nápojov, kávy a výdatnej večere. Okrem toho môžu byť výsledky indikátorov ovplyvnené užívaním určitých liekov, preto je potrebná konzultácia s lekárom.

4 hodiny pred podujatím je potrebné sa vyhnúť fajčeniu.

Krvný test ELISA v ON CLINIC

International Medical Center ON CLINIC je vybavené vlastným laboratóriom, ktoré má medzinárodný certifikát kontroly kvality. Tu skúsení a kvalifikovaní odborníci vykonávajú rôzne druhy analýz (viac ako 1000 položiek).

Medzi výhody tejto metódy patrí skutočnosť, že ju odhalí už v najskorších štádiách vývoja ochorenia. Citlivosť testu je 90%. Štúdia presne ukazuje dynamiku infekčného procesu, čo umožňuje špecialistovi sledovať účinnosť terapie. Celý proces je plne automatizovaný, čím sa eliminuje vplyv takzvaného „ľudského faktora“.

Okrem toho vám vysoko presné vybavenie umožňuje získať spoľahlivé výsledky výskumu v čo najkratšom čase.

Výsledky môžete dešifrovať v ten istý deň s lekárom. Na základe nich lekár zvolí taktiku liečby, ktorá je pre vás vhodná.

NA CLINIC: Za viac ako 25 rokov práce si nás vybrali milióny ľudí. Pridať sa teraz!

Lekári

Administrátor vás bude kontaktovať pre potvrdenie registrácie. IMC "ON CLINIC" zaručuje úplnú dôvernosť vašej liečby.

Zoznam dostupných diagnostických metód sa v posledných desaťročiach rýchlo rozširuje, diagnostici sa snažia spojiť výhody všetkých doterajších analýz v nových metódach a zbaviť sa všetkých ich doterajších nedostatkov.

V poslednej dobe sa v zozname diagnostických postupov čoraz častejšie objavuje enzýmová imunoanalýza - moderný a pomerne nový test, ktorý je pre bežného človeka, ktorý nesúvisí s medicínou, málo známy. Napriek tomu táto technika rýchlo dopĺňa rady svojich prívržencov medzi kvalifikovaným zdravotníckym personálom. Čo to je a v akých prípadoch by sa malo použiť, môžete sa pokúsiť prísť na to, že sa zoznámite s jeho vlastnosťami a hlavnými charakteristikami.

Enzýmová imunoanalýza je inštrumentálna laboratórna technika založená na molekulárnej reakcii antigén-protilátka, ktorá umožňuje detegovať špecifické proteíny v biologických materiáloch (vzorky na výskum). Takýmito proteínmi môžu byť enzýmy, rôzne mikroorganizmy (vírusy, baktérie, huby), prvoky atď.

Po objavení metódy dostala názov ELISA test, ktorý nesúvisí s menom objaviteľov, ale ide o skratku celého názvu v anglickej verzii – enzyme-linked immunosorbent assay. Tento názov používajú lekári na celom svete, niektorí lekári v rusky hovoriacich krajinách nazývajú tento typ štúdia aj.

Hlavným princípom metódy je molekulárna reakcia „antigén-protilátka“.

Antigén je akákoľvek cudzia molekula, ktorá vstupuje do ľudského tela ako súčasť patogénneho mikróbu. Antigény sú zvyčajne proteínové molekuly. Okrem mikroorganizmov môžu byť takýmto „cudzincom“ bunky krvi niekoho iného, ​​ktoré sa nezhodujú v skupine alebo faktore Rh.

V reakcii na vstup takéhoto antigénu do tela sa spustí imunitná reakcia, ktorá je zameraná na ochranu pred akýmikoľvek cudzími molekulami. K tomu dochádza v dôsledku syntézy špeciálnych činidiel imunitného systému - protilátok (imunoglobulínov). Každá protilátka sa približuje iba k určitému antigénu a neutralizuje patogénneho „outsidera“ a viaže sa naň v jednom komplexe. Je to proces takejto väzby, ktorý sa nazýva reakcia antigén-protilátka.

Typy protilátok

Všetky protilátky (imunoglobulíny) sú rozdelené do 5 typov v závislosti od toho, v akom štádiu imunitnej odpovede sa objavia:

Pre diagnostiku ELISA sú najčastejšie dôležité hladiny imunoglobulínov IgG, IgM a IgA. Podľa ich kreditov zistíte, či už človek trpel nejakou chorobou alebo sa nakazil nedávno, či si vytvoril imunitu alebo je jeho telo bezbranné voči patológii.

Výhody a nevýhody enzýmovej imunoanalýzy

V súčasnosti je ELISA jednou z najpresnejších a najcitlivejších metód. Osvojili si ho špecialisti z rôznych oblastí medicíny a naďalej rozširuje svoj záber.

Výhody metódy

  • Vysoká presnosť prijatých údajov.
  • Citlivosť (umožňuje detekovať požadovanú látku aj pri minimálnej prítomnosti patogénu vo vzorke).
  • Možnosť diagnostiky v prvých dňoch ochorenia alebo v inkubačnej dobe.
  • Rýchlosť získavania údajov v porovnaní s inými metódami podobnej presnosti.
  • Vysoká automatizácia procesu a minimálna ľudská účasť, čo znižuje chybu interpreta.
  • Získanie údajov o štádiu patologického procesu a účinnosti zvolenej terapie.
  • Bezbolestná a nízka invazívnosť pri výbere materiálu.

Nevýhody metódy

  • Vo väčšine prípadov vám umožňuje určiť reakciu tela na patogénne činidlo, a nie na samotný patogén.
  • Pred štúdiou musí byť presne známe podozrenie na ochorenie, pretože test je vysoko špecifický.
  • Pravdepodobnosť falošných indikátorov spôsobených technickými problémami, užívaním liekov, súčasnou prítomnosťou viacerých chronických ochorení alebo metabolických porúch v tele pacienta.
  • Interpretáciu výsledkov by mal vykonávať iba vysokokvalifikovaný odborník, pretože na interpretáciu získaných údajov je potrebné špeciálne školenie a veľké množstvo lekárskych znalostí v konkrétnej oblasti.
  • ELISA je pomerne zriedkavá analýza, preto sa nevykonáva vo všetkých diagnostických laboratóriách.
  • Metóda je pomerne drahá, keďže okrem reagencií musí mať laboratórium početné drahé vybavenie a vzorky antigénov vyrábaných v špeciálnych ústavoch.

Kedy sa používa enzýmová imunoanalýza?

Úplný zoznam indikácií na vymenovanie enzýmovej imunoanalýzy je veľmi široký, zahŕňa takmer všetky odvetvia medicíny.

Najčastejšie sa ELISA používa na tieto účely:

  • detekcia infekčných chorôb;
  • diagnostika pohlavných chorôb;
  • stanovenie imunitného stavu alebo jednotlivých autoimunitných ochorení;
  • identifikácia nádorových markerov;
  • definícia hormónov.

V prípade infekčných a vírusových ochorení táto technika umožňuje identifikovať nasledujúce patológie:

Okrem toho vám ELISA umožňuje rýchlo a efektívne určiť srdcový infarkt, posúdiť reprodukčný potenciál tela, identifikovať alergie, ich zdroj atď.

Technika ELISA sa používa na vykonávanie klinických skúšok pri vývoji nových liekov a pri hodnotení ich vplyvu na ľudský organizmus.

Typy vzoriek a metódy ich výberu na výskum

Testovacím materiálom pre enzýmovú imunoanalýzu je najčastejšie krv, ktorá sa odoberá z loketnej žily pacienta. Odber vzoriek sa vykonáva nalačno, hlavne ráno. Po výbere z krvi sa tie vytvorené bunky, ktoré interferujú so štúdiou, oddelia a odstránia, pričom zostane iba sérum.

Pri diagnostike urogenitálnych infekcií sa často stávajú materiálnymi stery zo slizničných tkanív pohlavných orgánov, hlien z močovej rúry alebo krčka maternice, vzorky z konečníka, škrabance z erózií alebo vredov v oblasti slabín a z iných častí tela. Nátery sa môžu odoberať z ústnej dutiny, ako aj z nosohltanu.

Niekedy sa enzýmová imunoanalýza používa v pôrodníckej a gynekologickej praxi počas tehotenstva na určenie stavu plodovej vody. V tomto prípade sa vzorkou stáva plodová voda. Na tento účel sa odoberie malé množstvo tekutiny prepichnutím močového mechúra plodu dlhou ihlou. Všetky manipulácie sa vykonávajú pomocou sterilného nástroja, aby sa minimalizovali možné riziká.

Materiál sa často stáva cerebrospinálnou alebo seróznou tekutinou. Stáva sa to pri lokálnej anestézii, ktorá sa vstrekuje.

Špecifikujte, aký typ materiálov je potrebný na enzýmovú imunoanalýzu, ktorú by mal poslať špecialista, ktorý do štúdie pošle. Často sa odoberajú vzorky niekoľkých typov naraz alebo z rôznych miest. Lekár, ktorý vydáva odporúčanie na tento typ vyšetrenia, by mal pacienta informovať aj o príprave na dodanie biomateriálu.

Príprava na enzýmovú imunoanalýzu

Aby sa zvýšila presnosť údajov získaných po enzýmovom imunoteste, príprava na výber materiálu by mala byť nasledovná:

  • 10 dní pred štúdiou vylúčte antibiotiká, antivírusové a antimykotiká;
  • na jeden deň je potrebné vylúčiť alkohol, fajčenie a užívanie drog;
  • počas toho istého obdobia je potrebné vyhnúť sa fyzickému prepätiu;
  • informovať predpisujúceho lekára o všetkých liekoch, ktoré pacient užíva;
  • Informujte svojho lekára, ak ste tehotná alebo máte podozrenie, že ste tehotná.

Najlepšie je, ak sa materiály na testovanie vyberú ráno nalačno.

Ak je diagnóza zameraná na určenie stavu hormonálneho zázemia, potom je dôležité zabezpečiť pokojný stav v predvečer a vyhnúť sa nervovému napätiu. U žien je darovanie krvi na hormóny jednoznačne určené obdobím mesačného cyklu, ktoré preberie lekár pri vymenovaní.

2-3 dni pred odberom vzoriek by sa mali z jedálneho lístka vylúčiť vyprážané a mastné jedlá a pred testom na hepatitídu by sa nemali jesť citrusové plody a akékoľvek iné oranžové a žlté ovocie a zelenina.

Dešifrovanie výsledkov enzýmovej imunoanalýzy

Výsledok kvalitatívnej štúdie je spravidla označený znakmi „+“ (nájdené) alebo „-“ (nenájdené).

Na základe prítomnosti alebo neprítomnosti určitých skupín imunoglobulínov možno vyvodiť nasledujúce závery:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - imunita voči ochoreniu úplne chýba (telo sa s týmto typom antigénu ešte nestretlo);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - predtým došlo ku kolízii s týmto antigénom alebo s vakcínou;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - akútny patologický proces (s najväčšou pravdepodobnosťou primárny);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - chronický priebeh;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - relaps;
  • JgM (-) - štádium obnovy.

Kvantitatívne hodnoty nesú veľkú informačnú záťaž, ale iba ošetrujúci lekár ich dokáže interpretovať na základe predchádzajúcich indikácií, veku pacienta a noriem pre každú konkrétnu chorobu. Z tohto dôvodu nie je možné vyhodnotiť výsledky samostatne.

Ako dlho čakať na výsledky

Táto technika má mnoho odrôd, v závislosti od toho sa určuje termín získavania údajov. Priemerná dĺžka diagnostiky ELISA je 4-6 hodín, čo umožňuje vystaviť výsledky už nasledujúci deň.

Najdlhšie metódy trvajú napríklad až 10 dní v prípade zistenia infekcie HIV.

V prípade urgentnej potreby je možné využiť expresné metódy, pri ktorých je odpoveď získaná do 1-2 hodín.

Kde môžem získať test ELISA?

Keďže zariadenie na tento typ diagnostiky je pomerne drahé, nie všetky laboratóriá si ho môžu kúpiť. Navyše, testy obsahujúce špecifické antigény majú obmedzenú trvanlivosť (zvyčajne asi 1 rok), preto je potrebné ich neustále aktualizovať.

Z týchto dôvodov štátne zdravotnícke zariadenia nemajú vždy laboratóriá ELISA. Najčastejšie sa musíte obrátiť na veľké súkromné ​​lekárske alebo veľké diagnostické centrá.

Na vykonanie štúdie ELISA musí mať laboratórium špeciálnu licenciu a personál a laboratórni asistenti musia absolvovať špeciálne školenie.

Najčastejšie konkrétne diagnostické centrum alebo laboratórium odporučí lekár, ktorý pacienta nasmeruje na vyšetrenie.

Náklady na enzýmovú imunoanalýzu

Cena za toto štúdium závisí od regiónu krajiny a od úrovne kliniky poskytujúcej službu. V Moskve minimálna cena za stanovenie jedného antigénu začína od 700 rubľov. Ak je potrebné identifikovať viacero imunoglobulínov naraz, cena sa spočíta.

V prípade naliehavej analýzy sa náklady zvýšia o 150 - 200 rubľov. pre každý antigén.

Napriek pomerne vysokým nákladom umožňuje enzýmová imunoanalýza urobiť vyšetrenie pacienta čo najinformatívnejším a najrýchlejším, čo skracuje čas pred začiatkom liečby a umožňuje rýchlo stabilizovať stav osoby.

Toto video ukazuje film "Základy enzýmovej imunoanalýzy".

Analýza ELISA - čo to je? Celý názov tejto diagnostickej metódy sa nazýva enzýmová imunoanalýza a je založená na stanovení protilátok rôznych tried alebo imunoglobulínov v periférnej krvi, ktoré produkuje ľudské telo.

V praxi lekára má analýza ELISA veľmi dôležité miesto, keď je potrebné diagnostikovať akúkoľvek infekčnú patológiu. Táto analýza ukazuje nielen prítomnosť infekčného ochorenia, ale aj štádium patologického procesu. Tiež, nielen vo vzťahu k patogénu, je indikovaná metóda ELISA: používa sa na diagnostiku alergických stavov. Tento test vám umožňuje identifikovať problémy v imunitnom systéme, s mnohými ochoreniami hematopoetického systému, autoimunitnými a inými poruchami.

Prečo je potrebná ELISA?

Všetci výskumníci sa prikláňajú k názoru, že názov "protilátka" je zvolený príliš zle. Napriek tomu to odráža jednu dôležitú vlastnosť imunoglobulínov: sú schopné viazať a neutralizovať škodlivé látky a približovať sa k nim ako „kľúč“ k „zámku“. Množstvo protilátok v krvi odráža nielen celkovú schopnosť tela brániť sa infekciám, ale aj schopnosť vytvárať cirkulujúce imunitné komplexy, ktoré sa môžu vyskytnúť pri rôznych autoimunitných ochoreniach, ako je reumatoidná artritída alebo ankylozujúca spondylitída.

Komplexy protilátok s antigénom (škodlivý faktor infekčnej povahy) sú výsledkom reakcie tela na zavedenie "cudzích". Imunitný systém sa ich preto naučí rozpoznávať, pomocou lymfocytov trénuje imunokompetentné bunky a tie sú schopné vytvárať vysoko špecifické protilátky. Takže protilátky proti vírusu Epstein sú usporiadané inak ako protilátky proti vírusovej hepatitíde C alebo E. coli a anti-HAV alebo protilátky proti vírusu hepatitídy A, inak ako autoprotilátky proti tkanivu chrupavky. Je to vysoká špecifickosť a zhoda imunoglobulínov s infekčným patogénom, ktorá robí takú laboratórnu štúdiu, ako je enzýmový imunotest krvi vysokej hodnoty.

Po silnom spojení protilátok a antigénov do jedného komplexu (antigén-protilátka) strácajú škodlivé faktory schopnosť poškodzovať telesné tkanivá a následne sú tieto komplexy buď neutralizované alebo lyzované fagocytózou neutrofilmi a „natrávené“ opúšťajú telo.

Krvný test ELISA môže ukázať, akému konkrétnemu patogénnemu faktoru naše telo čelí, v akom štádiu je interakcia tela s infekciou. Po štúdiu môže lekár s vysokou mierou istoty urobiť prognózu, predpísať určité typy liečby a v niektorých prípadoch môže dokonca určiť očakávanú dĺžku života pacienta, najmä pri chronických vírusových infekciách, ako je vírusová hepatitída C.

V niektorých prípadoch však v tele nie sú žiadne infekčné agens a protilátky sa „omylom“ vrhnú na ich vlastné orgány a tkanivá, pretože imunokompetentné bunky dostali falošné informácie. Takéto ochorenia sa nazývajú autoimunitné a enzýmová imunoanalýza tiež pomáha rozpoznať túto chronickú patológiu a pomáha pri diagnostike.

Viac o imunoglobulínoch

Celkovo ľudské telo produkuje 5 známych tried protilátok, ktoré sú označené Ig(čo znamená imunoglobulíny), ktoré patria do tried A, M, G, E a D. Všetky majú veľký význam pri interpretácii výsledkov ELISA - analýzy. Samozrejme, komplexov je oveľa viac a nie všetky sú ešte otvorené. Ale pri diagnostike rôznych chorôb sú najcennejšie prvé tri typy protilátok. Krvný test ELISA využíva maximum informácií: okamih objavenia sa protilátok v krvi, zmenu ich koncentrácie v závislosti od času, čas vymiznutia a typ špecifických protilátok.

Účastníkmi primárneho akútneho infekčného procesu sú teda imunoglobulíny triedy M, ktoré vždy naznačujú akútnu fázu, aj keď je klinický priebeh ochorenia vymazaný. Typickým príkladom je anikterická forma akútnej vírusovej hepatitídy B alebo C. Enzýmovo viazaný imunosorbentný test na hepatitídu ukáže, že osoba má akútnu hepatitídu a symptómy ako bolesť v hypochondriu, sucho v ústach, boľavé kĺby a iné. špecifické príznaky sú ľahko pochopiteľné.

O niekoľko týždňov neskôr sa tieto protilátky nachádzajú v čoraz klesajúcich koncentráciách, čím sa premieňajú na imunoglobulíny triedy G. Stanovujú sa v krvi počas mnohých mesiacov a dokonca rokov a indikujú buď zotavenie, a potom môžu zostať po celý život a tvoria silná imunita. To naznačuje silnú obranu proti antigénom patogénov. Takže sú to protilátky tejto triedy, ktoré robia človeka imúnnym voči opakovaným prípadom antraxu a moru. Existujú však prípady, keď tieto protilátky neinterferujú s ich škodlivými účinkami v prítomnosti antigénov. V tomto prípade môžeme hovoriť o zvýšení aktivity chronického procesu.

Najprv musíte pochopiť, že takáto analýza neexistuje - „len krv pre ELISA“. Existuje analýza na hepatitídu, niekedy na ureaplazmu alebo na syfilis. Darovanie krvi na ELISA teda môže byť len cielené, „nariadiť“ pátranie po želanej infekcii. Je to tak nepochopiteľné, prečo darovať krv zo žily, nevediac, čo hľadať. Preto je metóda enzýmovej imunoanalýzy silným nástrojom, ktorý je dôležitý pri diagnostickom hľadaní. Túto analýzu môže predpísať iba lekár, ktorý cielene hľadá infekciu, ktorá sa vyznačuje týmito príznakmi. Bežný človek si, samozrejme, môže objednať 150 krvných testov ELISA na „všetky infekcie“, ale bol by to nerozumný a nákladný prístup k diagnostike, robiť testy na všetko.

Vymenovanie týchto analýz je najžiadanejšie pre nasledujúce choroby a stavy:

Rôzne mikrobiálne a vírusové infekcie, príznaky infekčných ochorení – vyrážka, horúčka, žltačka, zdurenie lymfatických uzlín, syndróm hnačky, podozrenie na sexuálne prenosné choroby.

Technika ELISA pomáha pri určovaní ureaplazmy a mykoplazmy, syfilisu a chlamýdií, tuberkulózy a cytomegalovírusovej infekcie, herpesu, vírusovej hepatitídy a vírusu Epstein-Barrovej. V súčasnosti možno pomocou metódy enzýmovej imunoanalýzy overiť asi 500 rôznych infekcií,

Ak máte podozrenie na helmintickú inváziu a prítomnosť príznakov, ako sú alergie, eozinofília v krvi, svrbenie, dyspepsia a strata hmotnosti,

Pri identifikácii alergénov, ktoré spôsobujú Quinckeho edém, urtikáriu, dýchavičnosť a záchvaty astmatického dusenia.

V tomto prípade sa zisťujú špecifické Ig E a existujú celé alergo panely, ktoré pomôžu presne určiť alergén - chobotnice alebo krevety, suché krmivo pre ryby obsahujúce dafnie, domáci prach. Pri sennej nádche vám táto metóda umožňuje nájsť presne tú obilninu, ker alebo strom, ktorý spôsobuje jarné kýchanie a slzenie,

  • Táto metóda je indikovaná pri suspektných autoimunitných ochoreniach liečených reumatológmi,
  • Ak je podozrenie na rast a aktivitu nádoru,
  • V komplexnej diagnostike stavov imunodeficiencie a HIV infekcie
  • Pri ochoreniach krvi a pri transplantáciách, na komplexné posúdenie imunity, napríklad pred transplantáciou pečene alebo obličky.

Teraz vieme, prečo musíte darovať krv na ELISA. Poďme zistiť, ako sa tento výskum vykonáva.

Ako sa vykonáva analýza?

Klasickým materiálom je žilová krv pacienta. Ale ak je to potrebné, môžete vyšetriť širokú škálu tekutín a tkanív: hlien, sliny, cervikálny sekrét, mozgovomiechový mok, sklovec oka, obsah pupočníka a plodovú vodu. Je dôležité mať na pamäti, že užívanie rôznych liekov, nadmerná fyzická aktivita, zneužívanie alkoholu môže značne skresliť výsledky testov.

Existuje niekoľko metód, ktoré umožňujú vykonať túto analýzu. Najčastejšie v klinických laboratóriách sa používa fotometrická metóda. V tomto prípade sa používajú farbivo značené látky, po reakcii ktorých a označení komplexu antigén-protilátka sa zmení ich farba. V dôsledku toho sa mení aj optická hustota roztoku a táto zmena je priamo úmerná koncentrácii detekovaných protilátok. Na meranie týchto odchýlok sa úspešne použili laboratórne spektrofotometre.


Na vykonávanie ELISA sa používa aj fluorimetrická metóda, ktorej základom je fluorescencia. Aj tu sa vypočítava intenzita fluorescenčných látok, ktoré sa usadili na skúmaných vzorkách.

Nakoniec, v imunotestoch sa na stanovenie aktivity enzýmov používajú elektrochemické metódy, ktoré sú špecifickými značkami pre antigény a protilátky. Samotná metóda ELISA najčastejšie zahŕňa použitie enzýmov ako alkalická fosfatáza, chrenová peroxidáza a galaktozidáza. Tieto enzýmy sa svojou aktivitou dokážu viazať na protilátky alebo antigény a označovať ich.

Nevýhody metódy a jej výhody

Medzi zjavné „výhody“ patrí demokratická cena analýzy, možnosť jej skríningového použitia vo veľkých skupinách populácie, napríklad pri vyšetrovaní tehotných žien na HIV. Enzýmová imunoanalýza je dosť špecifická a môže sa použiť na kontrolu kvality liečby mnohých chorôb. Je dôležité, aby sa analýza pripravila rýchlo, bola jednoduchá a bezpečná pre pacienta.

Je tu však veľa úskalí. Ak sa teda imunoglobulíny nezistia, neznamená to 100% absenciu ochorenia. Koniec koncov, na pozadí imunodeficiencie telo jednoducho nemusí „byť silné“ na syntézu protilátok. Ak má pacient vážne zlyhanie pečene, potom pečeň jednoducho nie je schopná syntetizovať proteín - stavebný materiál pre protilátky. V tomto prípade sa výsledok nazýva séronegatívny a potvrdenie infekcie si vyžaduje priama a najmodernejšia výskumná metóda - PCR alebo polymerázová reťazová reakcia. Na rozdiel od enzýmového imunosorbentného testu táto metóda neodhalí reakciu tela na infekčný proces (ktorý môže byť chybný alebo úplne chýba), PCR určuje priamo dedičný materiál alebo sa nájde samotný patogén.