Vlastnosti enzýmovej imunoanalýzy (ELISA). Abstrakt: Princípy enzýmovej imunoanalýzy, hlavné typy ELISA, aplikácia v diagnostike protilátok ELISA, stanovenie antigénu


(ELISA) je metóda testovania krvi v laboratóriu, založená na hľadaní špeciálnych buniek – protilátok proti rôznym chorobám. Metóda umožňuje nielen identifikovať patogén, ale aj zistiť, v akom štádiu je patologický proces. Ten je veľmi dôležitý pre prognózu a ďalšiu liečbu pacienta.

Výhody a nevýhody metódy

Spomedzi všetkých moderných diagnostických metód je ELISA najinovatívnejšia a technicky najpresnejšia. Jeho hlavné výhody sú:

  1. Schopnosť vyhľadať všetky existujúce protilátky proti infekčným chorobám v krvi pacienta.
  2. Vysoká dostupnosť výskumnej metódy. Dnes môže analýzy ELISA vykonávať každé stredne veľké laboratórium.
  3. Takmer 100% špecifickosť a citlivosť metódy.
  4. Schopnosť vyhľadávať protilátky a antigény, ako aj určiť štádium patologického procesu a sledovať jeho dynamiku vďaka porovnávaniu počtu.

Takéto množstvo výhod oproti iným testom úplne zatieňuje jednu a jedinú nevýhodu analýzy: je schopná detegovať protilátky, ale nie samotný patogén.

Základné pojmy hodnotenia analýzy

Aby ste pochopili, čo je analýza ELISA, čo to je a ako sa vykonáva, musíte sa oboznámiť so základnými pojmami, ktoré používajú odborníci.

  1. Protilátka- proteín, ktorý produkujú bunky ľudského imunitného systému (lymfocyty typu B). Reagujú špecifickou reakciou na požitie cudzieho činidla alebo látky. Ďalším názvom protilátok sú imunoglobulíny, patria do rôznych tried: A, E, M, G. Líšia sa od seba hmotnosťou, rýchlosťou odozvy, polčasom rozpadu a množstvom ďalších charakteristík. Bežne ľudská krv obsahuje najmä imunoglobulíny triedy G. Ak dôjde k akejkoľvek infekcii, prudko sa zvýši množstvo imunoglobulínov A a M. Imunoglobulíny E sa podieľajú na alergických reakciách.
  2. Antigén- cudzorodý prostriedok organického pôvodu a vysokej molekulovej hmotnosti. Najčastejšie ide o patogény alebo ich biologicky aktívne látky.
  3. Komplex antigén-protilátka alebo imunitný komplex je priamo kombináciou cudzorodej látky a imunoglobulínu, ktorá vyvoláva imunitnú odpoveď.

Podstata a rozsah metódy

Pacienti majú často otázku: ELISA analýza, čo to je, ako sa vykonáva a na čo slúži? O metóde môžete hovoriť prístupným spôsobom stručným popisom jej fáz.

Prípravná fáza. Laboratórny lekár používa špeciálnu platňu s 96 jamkami. Na povrch každej jamky sa aplikuje antigén špecifického patogénu.

1. fáza Odoberá sa krv, ktorá sa potom po kvapkách aplikuje do jamky. Jamka spustí reakciu medzi antigénom a protilátkou v krvi.

2. fáza V studni je reakcia v plnom prúde s tvorbou imunitných komplexov. V dôsledku toho sa vytvorí látka určitej farby. Intenzita farby závisí od množstva protilátok v krvi pacienta na každý konkrétny patogén.

3. fáza Vyhodnotenie výsledku fotometriou. Na to sa používa špeciálne zariadenie nazývané spektrofotometer. Porovnáva hustotu materiálu v jamke a kontrolnej vzorky. Ďalej zariadenie generuje výsledok matematickou analýzou.

Vyhodnotenie výsledkov a účel ELISA

Interpretácia výsledku závisí od niekoľkých dôležitých nuancií:

  1. Optická hustota studne.
  2. Výrobca platní pre studne (testovacie systémy).
  3. Laboratórium, kde bola štúdia vykonaná.

Vzhľadom na tieto nuansy by ste nikdy nemali porovnávať dva výsledky z rôznych testovacích systémov alebo z rôznych laboratórií.

Ďalším dôležitým bodom, ktorý ovplyvňuje analýzu ELISA, je takzvaná avidita protilátok. Tento parameter charakterizuje množstvo antigénu, silu väzby v komplexe antigén-protilátka. Jeho definícia je založená na ošetrení imunitného komplexu močovinou s cieľom vyriešiť proteínové štruktúry. To vám umožní zničiť slabé väzby medzi antigénom a protilátkou a ponechať len silné. Význam štúdie pre aviditu spočíva v tom, že pomocou nej možno zistiť trvanie infekcie. Tieto informácie sú mimoriadne dôležité pre diagnostiku tehotných žien.

Krvný test ELISA slúži na:

  1. Na vyhľadávanie rôznych antigénov patogénov.
  2. Študovať hormonálne pozadie.
  3. Na test na prítomnosť autoimunitného ochorenia.
  4. Na detekciu markerov rakoviny.

Odrody ELISA

Analýza ELISA má tieto odrody:

  1. Nepriame.
  2. Rovno.
  3. Konkurencieschopný.
  4. metóda blokovania.

Ale v skutočnosti sa dnes používa iba metóda nazývaná ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). Je založená na vyššie opísanej reakcii tvorby komplexu antigén-protilátka so zmenou farby na povrchu jamky.

Osobitnú pozornosť si zaslúži priamo kvantitatívny krvný test ELISA. Toto nie je typ analýzy, ale spôsob hodnotenia výsledkov. Vďaka nemu sa počíta počet protilátok a určujú sa ich triedy. Výsledok závisí od optickej hustoty vzorky, testovacieho systému, na ktorom bola ELISA vykonaná, a tiež od laboratória.

Choroby zistené testom ELISA

ELISA je krvný test, ktorý vám umožňuje identifikovať obrovské množstvo rôznych infekčných chorôb. Okrem toho sa vírusové aj bakteriálne ochorenia detegujú s rovnakou presnosťou. Napríklad pomocou tvorby imunitných komplexov je možné dokázať prítomnosť antigénov pôvodcov nasledujúcich chorôb:

Okrem toho vám ELISA umožňuje zistiť:

  1. Rakovinové markery - TNF (tumor necrosis factor), PSA (prostatický špecifický antigén), CEA (rakovinovo-embryonálny antigén), CA-125 (ovariálny nádorový marker)
  2. Tehotenský hormón je hCG (ľudský choriový gonadotropín).
  3. Poruchy reprodukčného systému: hormóny ženského a mužského reprodukčného systému.
  4. Patológia štítnej žľazy.

Je dôležité spomenúť, že test ELISA na HIV je dnes hlavným spôsobom diagnostiky tohto nebezpečného ochorenia.

Materiál ELISA a technika odberu vzoriek

Na vykonanie testu ELISA sa pacientovi odoberie krv na prázdny žalúdok. Ďalej sa z krvi získava sérum, ktoré sa priamo používa na analýzu. Okrem toho sa ELISA môže vykonávať na mozgovomiechovom moku (CSF), hliene krčka maternice (krčka maternice), plodovej vode a dokonca aj v sklovci (očnej gule).

Pred darovaním krvi je pacient upozornený, že by nemal užívať žiadne lieky a liečbu antibiotikami a antivirotikami sa odporúča absolvovať aspoň dva týždne pred odberom krvi.

Podmienky prijatia a interpretácie výsledkov

Načasovanie prijatia odpovede z laboratória nezávisí od rýchlosti jeho práce, ale od štádia ochorenia a od toho, aké protilátky sa už objavili v krvi. Napríklad: imunoglobulíny M sa objavia približne 2 týždne po odbere krvi na analýzu a znamenajú, že proces je v štádiu primárnej infekcie alebo došlo k exacerbácii chronickej. Zároveň sa pri primárnej infekcii objavujú protilátky triedy M a G. Okrem toho sa dá zistiť po 4 týždňoch.

IgA sa objaví po 2-3 týždňoch buď samostatne alebo spolu s M, čo naznačuje akútnu infekciu, alebo spolu s G, čo naznačuje chronický proces.

Takéto odlišné termíny pre výskyt protilátok v krvi spôsobia, že pacient bude dlho čakať na výsledok. Po vykonaní analýzy ELISA je prijateľné počkať viac ako mesiac. Dekódovanie a interpretácia lekárom tiež trvá určitý čas.

ELISA je moderná laboratórna štúdia, počas ktorej sa hľadajú špecifické krvné protilátky (alebo antigény) na špecifické ochorenia s cieľom identifikovať nielen etiológiu, ale aj štádium ochorenia.

  1. hľadanie špecifických protilátok proti akejkoľvek infekčnej chorobe;
  2. hľadanie antigénov akýchkoľvek infekčných chorôb;
  3. štúdium hormonálneho stavu pacienta;
  4. vyšetrenie na prítomnosť autoimunitných ochorení.

Ako každá metóda laboratórnej diagnostiky, aj ELISA má svoje výhody a nevýhody. Medzi výhody metódy patrí:

  1. vysoká špecifickosť a citlivosť metódy (viac ako 90 %);
  2. schopnosť určiť ochorenie a sledovať dynamiku procesu, to znamená porovnávať množstvo protilátok v rôznych časových intervaloch;
  3. dostupnosť a rýchlosť tejto štúdie;
  4. neinvazívna metóda odberu vzoriek materiálu nie je štúdiou;

Nevýhodou metódy je skutočnosť, že pri analýze je možné identifikovať nie pôvodcu ochorenia, ale iba imunitnú odpoveď naň (protilátky).

Podstata metódy ELISA

Existuje niekoľko typov ELISA: priama, nepriama, metóda blokovania, kompetitívna. V praxi sa však najčastejšie používa heterogénna imunoanalýza na pevnej fáze alebo ELISA.

Základom enzymatickej imunoanalýzy je imunitná reakcia antigénu a protilátky s tvorbou imunitného komplexu, výsledkom čoho je zmena enzymatickej aktivity špecifických značiek na povrchu protilátok.

V skutočnosti možno tento proces rozdeliť do niekoľkých etáp:

  1. na povrchu jamiek testovacieho systému je purifikovaný antigén určitého patogénu. Keď sa pridá krvné sérum zvieraťa, dôjde k špecifickej reakcii medzi týmto antigénom a požadovanou protilátkou;
  2. ďalej sa do jamky pridá špeciálny chromogén (konjugát značený peroxidázou). Dochádza k enzymatickej reakcii, ktorej výsledkom je vytvorenie farebnej látky v jamke tablety. Intenzita jeho farby závisí od množstva imunoglobulínov (protilátok) obsiahnutých v sére zvieraťa;
  3. Nasleduje vyhodnotenie výsledku. Pomocou viackanálového spektrofotometra sa porovnáva optická hustota testovaného materiálu s optickou hustotou kontrolných vzoriek a výsledky sú matematicky spracované. Množstvo protilátok u pacienta priamo závisí od výšky optickej hustoty danej jamky.

Je potrebné mať na pamäti: pre každý testovací systém sa vyvíjajú jednotlivé ukazovatele, aby sa zohľadnili výsledky, ukazovatele normy a patológie („referenčné hodnoty“). Toto by sa malo brať do úvahy pri hodnotení výsledkov každej konkrétnej štúdie.

Nie je správne interpretovať výsledky jedného laboratória z „referenčných hodnôt“ iného laboratória. Rovnako je nesprávne porovnávať výsledky rôznych laboratórií medzi sebou.

Pri hodnotení výsledkov pre špecifické infekcie je dôležitá trieda zistených protilátok a ich počet. Od toho závisí nielen otázka etiológie infekcie, ale aj očakávané štádium ochorenia (akútne, chronické), ako aj prítomnosť aktívnej infekcie (akútna alebo exacerbácia chronickej) v čase vyšetrenia. .

Aké je približné načasovanie výskytu protilátok?

Najskoršie protilátky sú IgM. Môžu byť zistené 1-3 týždne po možnej infekcii, ktorá charakterizuje akútnu fázu infekčného procesu. Druhou situáciou výskytu protilátok IgM je exacerbácia chronického procesu. IgM cirkulujú v priemere asi 3 mesiace, potom ich počet postupne mizne. U niektorých pacientov sa však stopové množstvá IgM môžu zistiť v priebehu 1-2 rokov od infekcie.

Od 4. týždňa po infekcii sa začínajú objavovať protilátky IgG. Pri väčšine infekcií sa ich titer postupne zvyšuje s maximom v rôznych časoch (v priemere po 1,5-2 mesiacoch), potom zostáva titer na nízkej úrovni a indikuje imunitu. Pri niektorých ochoreniach nie je hladina IgG vysoká.

Možnosti detekcie protilátok

  • Izolovaná detekcia IgM protilátok naznačuje primárnu infekciu.
  • Súčasná detekcia IgM a IgG v krvi je typická pre primárnu infekciu v predchádzajúcich 2-3 mesiacoch, ako aj počas exacerbácie chronického ochorenia.
  • Detekcia IgG v izolácii môže naznačovať imunitu voči ochoreniu aj chronickú infekciu. V druhej situácii záleží na množstve protilátok (titra), ako aj na zmene tohto titra v čase. Typicky sa štúdie vykonávajú v intervaloch 2-4-6 týždňov.

Z času na čas lekári predpisujú testy ELISA, nie každý vie, čo to je. Dekódovanie ELISA má nasledujúci - enzýmový imunotest. Takýto krvný test pomáha pochopiť, ako telo bojuje s chorobami infekčného spektra a preukázať fázu ochorenia. Enzýmová imunoanalýza pomáha pri hodnotení ochrannej aktivity krvi, identifikácii imunodeficiencie pri patológiách spojených s infekciami, hormonálnymi problémami a podobne.

Krvný test ELISA pracuje s materiálom, ktorý sa odoberá zo žily. Okrem toho je na vyšetrenie k dispozícii obsah sklovca, tekutina z miechy, stery z močovej rúry alebo krčka maternice. Pre enzýmovú imunoanalýzu môže ELISA u tehotných žien odobrať tekutinu, ktorá obklopuje plod.

V tomto prípade môže byť krv priamo testovaná na ELISA pomocou rôznych techník. Existuje priama cesta, nepriama cesta, súťaž a blokovanie. Keď je telo infikované nejakým patogénnym agensom, ktorý sa nazýva antigén, imunitný systém začne produkovať špecifické protilátky, napríklad proti hepatitíde. Tieto protilátky sú zamerané na "zaobchádzanie" s cudzími agentmi. Čo sú protilátky? Ide o špeciálne proteíny, ktoré sa dokážu viazať na antigény a vytvárať imunologicky cielené komplexy, ktoré sa nazývajú antigén-protilátka. Práve za detekciu týchto komplexov je zodpovedná diagnostika ELISA. Na detekciu antigénu sa do výslednej vzorky krvi pridajú protilátky alebo sa vykoná opačný postup.

Pozitívny výsledok ELISA je založený na reakcii imunity a enzýmov. Pod pôsobením prvého sa infekčné činidlá a bunkové prvky viažu, druhé pomáha vizualizovať výsledok prvého. Imunitná odpoveď zahŕňa protilátku a antigénne väzivo. Výsledkom tohto procesu je vytvorenie imunitne riadeného komplexu. Všetky bunky majú na svojom povrchu antigén. Imunitná bunka zachytí tú podozrivú a antigén, ktorý je fixovaný na povrchu, podstúpi porovnávaciu procedúru s informáciou, ktorá sa „nahrá“ do pamäte. Ak dôjde k zhode popisu, potom sa bunka vráti domov, ak nie, potom dôjde k spojeniu, ktorého vytvorenie je zodpovedné za protilátku, ktorá sa pripojí na povrch.

Enzymatická reakcia medzitým umožňuje premenu látok na nové. Materiál je vystavený pôsobeniu enzýmu. V tomto prípade je enzymatický rozdiel poskytovaný rôznymi substrátmi. Produkt, ktorý je výsledkom tejto reakcie, sa posiela na stanovenie množstva patogénu, ktorého stanovenie je založené na hustote farby roztoku.

Vlastnosti metódy

Ak je potrebné diagnostikovať alergie, ochorenia, ktoré sú vírusového pôvodu, je predpísaný enzýmový imunosorbentový test. Existuje aj test ELISA na syfilis a množstvo iných infekcií, ktorých prenos prebieha nechráneným sexuálnym kontaktom. Takáto diagnostika je v porovnaní s PCR čoraz populárnejšia. Faktom je, že PCR zahŕňa prácu s nátermi. Na rozdiel od PCR je možné výsledky ELISA získať z krvných testov.

Okrem toho je možné predpísať krvný test ELISA, keď je potrebné zistiť prítomnosť imunodeficiencie, diagnostikovať onkológiu, zhodnotiť účinnosť liečby, určiť hormonálnu hladinu a podstúpiť kombinované predoperačné vyšetrenie.

Ak porovnáme štúdie pomocou ELISA napríklad s PCR, môžeme nájsť množstvo výhod. Hlavná vec je možnosť úplnej diagnózy aj v najskorších štádiách vývoja. Okrem toho výsledky ELISA pomáhajú pri určovaní konkrétneho štádia ochorenia, na akej úrovni je jeho vývoj.

Analýza ELISA v porovnaní s PCR má vyššiu účinnosť, navyše sa môže použiť počas tehotenstva na detekciu pohlavne prenosných chorôb. Každý, kto prešiel týmto testom, môže zistiť koncentráciu TSH v krvnom sére. To je veľmi dôležité na kontrolu reakcie štítnej žľazy, či nie sú v jej práci poruchy.

Ďalšími výhodami, ktoré však má aj polymerázová reťazová reakcia, je rýchlosť štúdie, čo znamená, že výsledky sa dosahujú rýchlo. Lekári oceňujú presnosť výsledkov. Ak hovoríme o pohlavne prenosných chorobách, potom hladina dosahuje 98 percent, ako je to v prípade koncentrácie TSH.

Samozrejme, nie je to bez nevýhod. V tomto prípade však hovoríme o nepriamych vlastnostiach testu. Hovoríme najmä o tom, že nemožno vylúčiť možné chyby v definícii noriem. Niekedy môže analýza, ktorú urobilo úplne zdravé dievča, ukázať falošne pozitívny výsledok alebo negatívny v opačnom prípade. Klasifikácia metód psychologického výskumu však vo väčšine prípadov spája takéto nedostatky s nesprávnou prípravou alebo porušením techniky, s ktorou bol materiál odobratý.

Funkcie vykonávania

Pri analýze ELISA sa vo väčšine prípadov daruje krv. Pred darovaním krvi je dôležité dodržať aspoň osemhodinový pôst, vylúčiť užívanie množstva liekov, ktoré ovplyvňujú výsledok analýzy. Hovoríme o antihistaminikách a hormonálnych liekoch, ktoré ovplyvňujú fungovanie štítnej žľazy. Okrem toho by sa alkohol mal vylúčiť aspoň deň predtým. Uistite sa, že aspoň hodinu pred darovaním krvi nefajčíte. Skreslenie výsledku je možné aj pri užívaní drog.

Predtým, ako pristúpime k dešifrovaniu, stojí za zmienku, aké metódy merania sa na takýto test používajú. Ako výsledok analýzy budú indikované protilátky alebo Ig imunoglobulíny. Myslia sa nimi veľmi špecifické proteíny, o ktorých sa už diskutovalo. Za ich produkciu sú zodpovedné B-lymfocyty hneď, ako sa do tela dostanú vírusy, baktérie alebo plesne. Rozlišuje sa päť typov imunoglobulínov označených latinskou abecedou.

Ich rozdiely sú spojené s rôznym tvarom a hmotnosťou molekúl. Majú rôzne polčasy rozpadu, rôznymi spôsobmi sa zúčastňujú alebo nezúčastňujú infekčných procesov. Líši sa aj časový rámec, v ktorom ich možno zistiť od okamihu, keď došlo k infekcii.

Ak sú imunoglobulíny klasifikované pomocou molekulovej hmotnosti ako základu, potom IgM má najvyššiu mieru. Charakteristickým znakom tohto typu imunoglobulínov je neschopnosť prejsť cez placentárnu bariéru. Ak sa pri rozbore u novorodenca zistí IgM, hovoríme o prítomnosti infekcie u plodu.

Prevažná väčšina ľudskej krvi obsahuje imunoglobulíny IgG, najmenej IgE. Keď už hovoríme o práci v rámci infekčných procesov, osobitnú dôležitosť treba venovať možnostiam A, M, G. IgE pôsobí ako marker alergickej reakcie. IgD sa nachádza iba v tkanivách lymfatických uzlín a mandlí. Je to dôležité z hľadiska vytvárania imunity na lokálnej úrovni.

Okrem toho sa v analýze stanovujú antigény. Sú chápané ako látky vysokomolekulárneho typu, ktoré sú známe svojim organickým pôvodom. Hovoríme najmä o patogénoch infekčných a iných spektrálnych ochorení. Okrem toho máme na mysli aj látky, ktoré signalizujú rôzne bunkové zmeny, ktoré sú nevyhnutné pri rade ochorení. Je tiež indikovaný imunitný komplex, ktorý demonštruje komplex antigén-protilátka, ktorý sa podieľa na imunitnom procese.

Zvyčajne čas výroby závisí od konkrétneho laboratória, do ktorého ste sa prihlásili. Viaceré laboratóriá sú schopné poskytnúť výsledky do jedného alebo dvoch dní, iné vyžadujú týždeň. Oneskorenie môže byť spôsobené potrebou nahromadiť určité množstvo séra.

Vplyv na výsledky a interpretáciu

Napriek tomu, že ELISA je považovaná za jednu z najpresnejších testovacích metód, stále sa vyskytujú chyby. Postup pri odbere materiálu, jeho nesprávna preprava a skladovanie materiálu môže ovplyvniť správnosť výsledkov. Užívanie liekov, ako je uvedené vyššie, prítomnosť skrytých chorôb. Metabolické poruchy alebo imunodeficiencia vám tiež neumožnia získať správne ukazovatele. V období života do jedného roka nemusia mať novorodenci úplne správne ukazovatele. Je to spôsobené tým, že v tele sú prítomné materské protilátky.

Keď už hovoríme o dekódovaní, analytické formuláre používajú kladné alebo záporné znamienko, ktoré označuje výsledky výpočtu pre každú z tried imunoglobulínov. Možné možnosti sú nasledujúce.

Neprítomnosť detegovaných IgG, IgA a IgM naznačuje úplné zotavenie. Negatívnym výsledkom pre zložky ako IgM, IgA, IgG je nedostatočná imunita voči infekcii.

Kombinácia pozitívneho a negatívneho výsledku pre IgG, IgA v kombinácii s pozitívnym IgM naznačuje prítomnosť akútnej infekcie v tele. Pozitívny výsledok IgG v kombinácii s negatívnymi hodnotami IgA a IgM zodpovedá postvakcinačnému obdobiu alebo získaniu imunity v dôsledku infekcie.

Kombinácia pozitívneho alebo negatívneho výsledku IgG, IgA a negatívneho výsledku IgM naznačuje prítomnosť infekcie v jej chronickom priebehu. Pozitívny výsledok pre tri zložky: IgG, IgM, IgA naznačuje exacerbáciu infekcie, ktorá bola v chronickej forme. Okrem priameho objasnenia tried protilátok dostáva lekár v rámci dekódovania analýzy ELISA aj informácie o ich kvantitatívnych ukazovateľoch. Je dôležité zdôrazniť, že za dekódovanie by mal byť zodpovedný ošetrujúci lekár. Faktom je, že kombinácia niektorých komponentov ho môže priviesť k myšlienke falošného výsledku, ktorý povedie k opätovnému odovzdaniu. Vlastné dešifrovanie je v tomto prípade zbytočné.

Keď je predpísaná analýza, vykonajte test ELISA na syfilis. Metódy laboratórnej diagnostiky. Výsledky analýzy - ako určiť normu a odchýlky. Náklady na enzýmovú imunoanalýzu.

Spravidla pri kontaktovaní kliniky lekári predpisujú rôzne testy. To im umožňuje identifikovať infekcie a choroby, ktorými človek trpí. ELISA, alebo takzvaná enzýmová imunoanalýza, je výborným spôsobom na posúdenie imunitného systému organizmu a na identifikáciu infekcie a štádia ochorenia podľa prítomnosti protilátok.

Kto je teda poverený vykonaním tejto analýzy a čo je to enzýmová imunoanalýza? Lekári predpisujú túto analýzu, ak má osoba nasledujúce choroby:

  • Vyrážka na tele - alergické reakcie.
  • Vírusy - herpes, cytomegalavírus.
  • Sexuálne prenosné choroby - syfilis, Trichomonas.
  • Patológia spojená s rakovinou.
  • Neurosyfilis.

Okrem týchto chorôb je predpísaná analýza na stanovenie hladiny hormónu v krvi. Na základe výsledkov sa hodnotí kvalita terapie. Čo je syfilis, pravdepodobne každý vie, ale nepredstavuje jeho rozsah a koľko nakazených ľudí kráča vedľa nás.

V súčasnosti je syfilis najčastejším ochorením. Ide o treponóm, ktorý postihuje ľudské telo. A v dôsledku toho sú ovplyvnené všetky vnútorné orgány pacienta.

Ide o veľmi nebezpečnú infekciu a často sa stáva, že sa dlho nemusí prejaviť. Preto môže byť človek dlho nosičom a distribútorom bez toho, aby vedel, že je chorý.

Metóda laboratórnej diagnostiky

Medicína nestojí, moderné analýzy sa výrazne líšia od starých metód štúdia tela. Hoci sa svojej úlohy zhostili perfektne, na výsledky museli niekedy čakať týždne a mesiace. To prirodzene nebolo pre infikovanú osobu priaznivé. Aké je očakávanie výsledku, prešiel chorý.

Klasické analýzy - detekcia syfilisu Wassermanovou metódou, Kahnova metóda začala strácať svoje pozície a boli nahradené takými testami ako ELISA.

Ide o najmodernejšiu metódu zisťovania infekcie u ľudí. Výsledok je dešifrovaný pomocou počítača. To vám umožní presnejšie určiť pozitívny výsledok alebo negatívny test.

Počas dekódovania sa vykonáva vyhľadávanie protilátok proti špecifickým ochoreniam. A ako výsledok analýzy bolo možné odhaliť infekciu, keď bol výsledok pozitívny. Použitie ELISA na detekciu syfilisu znamená použitie imunoglobulínov troch tried:

  • G, M, A - pre diagnostiku sú najdôležitejšie.
  • Vyrábajú sa u infikovanej osoby prísne v určitom poradí.
  • Rýchlo určiť štádium infekcie.

Výsledky ELISA – normálny a pozitívny rozbor

Ak hovorí o analýze ELISA na syfilis, potom je v tomto prípade ťažké povedať, že existuje norma alebo odchýlka. Výsledok je zvyčajne buď negatívny alebo pozitívny. Okrem toho existujú titre, ktoré určujú množstvo protilátok v krvi.

Pri dešifrovaní analýzy je veľa jemností, ak ukázala pozitívny výsledok, analýza sa bude musieť niekoľkokrát opakovať, aby sa vylúčila metóda falošne pozitívnej reakcie.

Ako už bolo napísané, pri dešifrovaní analýzy existuje veľa jemností a výsledok môže určiť iba ošetrujúci lekár. V tabuľke uvádzame príklady, ktorých výsledky možno zobraziť pre enzýmovú imunoanalýzu:

Nezúfajte, ak analýza ukázala pozitívny výsledok. Na presnejšie stanovenie diagnózy sa spravidla vykonávajú ďalšie testy a testy rôznymi spôsobmi.

Náklady na enzýmovú imunoanalýzu

Náklady na túto analýzu spravidla priamo závisia od samotnej analýzy a identifikácie konkrétnej infekcie. Stanovenie markerov infekcie rôznych typov stojí od 200 do 350 rubľov. A takáto analýza sa vykoná do dvoch dní.

ELISA je najpopulárnejšia a najmodernejšia metóda diagnostiky organizmu. Metóda preukázala svoju účinnosť pri detekcii infekcie a určení presného obdobia infekcie.

Vzhľadom na cenovú politiku môžeme povedať, že analýza je dostupná každému človeku s akýmkoľvek rozpočtom. Umožňuje ošetrujúcemu lekárovi získať úplný obraz o infekcii človeka. Ukázal sa v prípade a lekárov nesklamal. Zároveň po obdržaní analýzy mohol ošetrujúci lekár okamžite reagovať a predpísať včasnú liečbu.

Na stanovenie úrovne obsahu takých biologicky aktívnych látok, ako sú imunologické komplexy, je potrebná špeciálna laboratórna štúdia. Ak existuje podozrenie na hematologické, infekčné alebo autoimunitné ochorenie, špecialisti predpisujú krvný test na ELISA. V priebehu článku zvážime, čo to je, ako sa na to pripraviť, čo ukazuje a ako to dešifrovať sami.

Čo je to za štúdium - krvný test na ELISA? Skratka znamená enzýmový imunotest, ktorý určuje kvantitatívny a kvalitatívny obsah rôznych biologicky aktívnych látok, ako aj protilátok a antigénov v biologickom materiáli.

Čo sa používa v enzýmovom imunoteste:

  • cerebrospinálna tekutina;
  • hlien močovej trubice, krčka maternice;
  • plodová voda;
  • obsah sklovca.

Enzýmová imunoanalýza je predpísaná na diagnostiku pohlavne prenosných chorôb, infekčných a onkologických procesov, alergických reakcií, porúch endokrinného a reprodukčného systému, autoimunitných a imunodeficitných ochorení, ako aj na posúdenie rizika vzniku niektorých obličiek.

Krvný test na ELISA počas tehotenstva je predpísaný na účely včasnej detekcie, porúch vývoja v počiatočných štádiách a kontroly ich dynamiky. Analýza ELISA vám navyše umožňuje kontrolovať hladinu protilátok, ktoré môžu vyvolať rozvoj závažných neurologických porúch u dieťaťa, čím sa zabráni rozvoju komplikácií nielen počas tehotenstva, ale aj počas pôrodu.

Umožňuje v predstihu reagovať na zistené problémy a výrazne zlepšiť zdravotný stav matky samotnej aj jej dieťatka.

Výhody krvnej ELISA zahŕňajú:

  • vysoký (až 90%) stupeň citlivosti;
  • možnosť včasnej diagnózy so súčasným určením štádia ochorenia;
  • nízke náklady na činidlá a následne dostupnosť;
  • minimálne množstvo materiálu na výskum;
  • minimálne podmienky prijatia;
  • možnosť dlhodobého skladovania činidiel;
  • schopnosť kontrolovať dynamiku vývoja patologického procesu.

Testovacie systémy

Nevýhody enzýmovej imunoanalýzy:

  • nie je možné špecifikovať pôvodcu ochorenia, v laboratóriu naň dostávajú len imunitnú odpoveď
  • možnosť získať falošný výsledok (vo veľmi zriedkavých prípadoch, najmä počas obdobia tehotenstva).

Školenie

Princíp tohto typu krvného testu je založený na tvorbe špecifických protilátok v ľudskom tele, keď doň vstupujú antigény, teda cudzie agensy, ktoré spôsobujú rozvoj konkrétneho ochorenia. V dôsledku ich interakcie sa vytvárajú komplexy "antigén-protilátka", ktoré sa skúmajú v priebehu enzýmového imunotestu.

V tomto ohľade, aby sa neovplyvnili tieto komplexy, a teda spoľahlivosť získaných výsledkov, krvný test a iný biologický materiál na ELISA si vyžaduje určitú prípravu.

Taktiež 14 dní pred navrhovaným vyšetrením sa preruší špecifická liečba a zastaví sa používanie antibakteriálnych, antivírusových liekov.

Krv na ELISA sa odoberá zo žily. Bezprostredne pred odberom krvi treba obmedziť fyzickú aktivitu, vylúčiť fajčenie a pitie alkoholických nápojov.

Existuje niekoľko techník a metód na vykonávanie enzýmového imunotestu: priama a nepriama metóda, kompetitívna a blokujúca metóda.

Základom vyšetrenia krvi (akéhokoľvek iného biologického materiálu) na ELISA je algoritmus, ktorý spočíva v realizácii dvoch reakcií – imunitnej a enzymatickej.

Počas prvej sa patologické činidlá viažu na ochranné prvky buniek biologického materiálu odobratého na štúdiu. Vzniká imunitný komplex „antigén – protilátka“. Vyzerá to takto. Antigény sú prítomné na povrchu absolútne všetkých buniek.

Keď cudzie bunky vstúpia do tela, zachytia ich imunitné bunky (na ktorých povrchoch sa nachádzajú protilátky), ktoré porovnávajú údaje o antigénoch z povrchu novoprijatých buniek s informáciami uloženými v ich vlastnej „pamäti“. V prípade nesúladu medzi týmito údajmi sú zahrnuté ochranné funkcie tela, ktoré spočívajú v tvorbe imunitného komplexu.

Potom sa uskutoční enzymatická reakcia, ktorá vizualizuje výsledky predchádzajúcej reakcie. Jeho princíp je založený na premene hmoty z jednej na druhú. Pre každý typ ELISA, ktorý vzniká pri imunitnej reakcii materiálu, existuje určitý enzým, ktorého spracovanie slúži na stanovenie koncentrácie cudzorodého činidla (podľa intenzity zafarbenia roztoku).


Dešifrovanie

Vďaka krvnému testu na ELISA laboratórni asistenti určujú A, G a M. Pozitívny výsledok pri štúdiu krvi (iných biologických surovín) na ELISA umožňuje nielen stanoviť diagnózu, ale aj štádium ochorenia. , ako aj charakter jeho priebehu (akútny alebo chronický).

Tieto imunoglobulíny v prítomnosti patologického procesu v tele pacienta sa tvoria v rôznych obdobiach ochorenia:

  • Imunoglobulíny M, IgM- sa tvoria päť dní po nástupe ochorenia a zostávajú v krvi 1,5 mesiaca, potom zmiznú. Detekcia IgM indikuje prítomnosť akútneho primárneho patologického procesu v tele a potrebu zvýšenej terapeutickej intervencie.
  • Imunoglobulíny G, IgG- sa vyskytnú štyri týždne po infekcii, ich prítomnosť v organizme možno zistiť aj niekoľko mesiacov. Detekcia IgG indikuje prítomnosť prekonanej choroby osoby v anamnéze. Zvýšenie ich obsahu môže tiež naznačovať opätovnú infekciu.
  • Imunoglobulíny A, IgA- sa objavia v čase infekcie a sú prítomné v tele štyri týždne. Zníženie ich obsahu naznačuje začiatok zotavenia. Výskyt v analýzach opäť po tom, čo osoba podstúpila liečbu a zotavila sa, naznačuje prechod choroby do chronickej formy. Súčasná detekcia IgA a IgG vo výsledkoch ELISA tiež naznačuje prítomnosť chronického procesu v tele.

Treba tiež poznamenať, že súčasná prítomnosť IgG a IgM v analýzach naznačuje, že chronický proces sa zhoršil a pacient musí začať liečbu. Ak sa počas vyšetrenia nezistil žiadny z imunoglobulínov, znamená to absenciu imunitnej odpovede.