ELISA анализът е съвременна техника за лабораторна диагностика на значителен брой различни заболявания. Съкращението означава ензимен имуноанализ. Същността на техниката е да се определи титърът (активността) на антителата.

Техниката ELISA придобива значителна популярност днес. Използва се в клиничната медицина за диагностика на различни патологии, както и в експериментални изследвания, които изискват точно определяне на концентрацията на различни съединения в изследваната среда.

Принципът на техниката ELISA

ELISA е имунологична реакция. Основава се на добавянето на специфични антитела
или антигени в тестовата среда (най-често тестовата кръв) с последващо ензимно определяне на концентрацията на получените комплекси антиген-антитяло. По концентрацията на комплекса може да се прецени нивото или активността на аналита в тестовата среда.

Определянето на концентрацията на комплексите антиген-антитяло обикновено се извършва с помощта на специално оборудване чрез хроматографски метод.

Показания за провеждане

ELISA анализът се извършва за различни показания, основните в клиничната медицина са:

• Диагностика на инфекциозна патология с преобладаващо сексуално предаване (ППИ), която включва хламидия, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомониаза, докато се откриват специфични антитела към инфекциозния агент.
• Диагностика на инфекциозни заболявания с различна локализация за определяне на етапа на патологичния процес, предимно в процеса на диагностициране на парентерален вирусен хепатит и ХИВ.
• Определяне на концентрацията на хормони за диагностика на различни патологии на органите на ендокринната система (ендокринни жлези).
• Определяне на различни съединения за диагностициране на причината за интоксикация на организма при отравяне, ухапване от насекоми или змии.

При тези медицински показания се извършва кръвен тест ELISA. Също така тази техника се използва активно в експерименталната медицина по време на различни клинични проучвания при разработването на нови лекарства, ваксини за имунопрофилактика.

Как се прави изследването

Кръвният тест ELISA се извършва в специализирана лаборатория. Преди това, за неговото прилагане, се взема венозна кръв, обикновено от кубиталната вена в обем от 5-10 ml, която след това се изпраща в лабораторията. Средно резултатът от анализа може да бъде получен още на следващия ден, което е важен момент за навременното назначаване на лечение след установяване на диагнозата на заболяването.

Как да се подготвим за ELISA

За да получите надеждни резултати от изследването чрез ензимен имуноанализ, трябва да следвате няколко прости подготвителни препоръки, които включват:

• В деня преди теста трябва да спрете да ядете мазни храни (месо, пушено месо) и алкохол.
• Материалът за изследване трябва да се вземе сутрин на празен стомах.
• В деня на изследването е желателно да се избягва физически и психо-емоционален стрес.
• Преди изследването трябва да се опитате да не пушите.

Повечето от получените фалшиво положителни резултати от имуноензимния анализ се дължат на неправилно изпълнение на подготвителните препоръки. Това в повечето случаи се свързва с приема на мазни храни, което води до повишаване на концентрацията на триглицериди (мазнини) в кръвната плазма, което намалява специфичността на ELISA.

Дешифриране на резултатите

Кръвният тест за антитела с помощта на ELISA има 2 модификации - качествено и количествено определяне. При
качествено определяне на антитела, резултатът може да бъде положителен (откриват се антитела, което показва възможното наличие на патологичен процес, причинен от инфекциозния агент) или отрицателен (няма антитела, което показва липса на инфекциозен процес).

Липсата на антитела не винаги е 100% показател за липсата на инфекциозен процес. Това се дължи на факта, че след инфекцията антителата не се образуват веднага, а през определен период от време (поне около 2 седмици). Следователно, за да се потвърди липсата на инфекция, ELISA може да се повтори след известно време.

С количествен ELISA се определя титърът (активността) на антителата, както и техните класове. В повечето случаи за диагностика на инфекциозни заболявания се определят антитела от клас IgG (имуноглобулини G) и IgM (имуноглобулини М), които се образуват в тялото на различни интервали след инфекцията, така че дешифрирането на резултата от анализа може да има няколко значения:

• Увеличаването на активността на IgM и липсата на IgG са доказателство за скорошна инфекция и остър ход на инфекциозния процес.
• Увеличаването на активността на IgM и IgG е обостряне на инфекциозния процес при хронично протичане и продължителна инфекция.
• Високата активност на IgG и липсата на IgM е хроничен ход на инфекциозния процес на фона на дългогодишна инфекция, след която са изминали повече от шест месеца (времето, необходимо за образуване на антитела от клас IgG).

Като цяло, тълкуването на резултатите от ELISA за всеки инфекциозен процес има определени характеристики. По-точното определяне на наличието на инфекциозно заболяване, както и етапа на неговото протичане, се извършва от лекар.

Понастоящем ELISA е методът на избор за диагностициране на повечето инфекциозни заболявания. Въз основа на резултатите от такова изследване лекарят има възможност да установи точна диагноза и да определи етапа на хода на патологичния процес, за да предпише последващото адекватно и ефективно лечение.

Целта на кръвния тест за сифилис е да открие антитела, които тялото може да е направило, за да се бори със своя патоген Treponema pallidum.

Фалшиво положителен анализ за сифилис може да бъде в случаите, когато производството на антигени е настъпило по други причини.

Фалшиво положителният сифилис се диагностицира в 10% от случаите.

Тъй като анализът за сифилис се предписва не само когато пациентът има оплаквания, но и при преминаване на медицински преглед, преди наемане, по време на бременност, преди хоспитализация, процентът на инфекция при хора, които дори не подозират за наличието на такова заболяване, е висок .

За да премахнете грешката, трябва да проверите надеждността на резултатите.

Положителните резултати за сифилис се разделят на две групи: остър и хроничен. Остър фалшиво положителен резултат се появява в рамките на 6 месеца след редовното изследване.

• остри инфекциозни заболявания;
• травма;
• всяка ваксинация 1-7 дни преди вземане на проби;
• остро отравяне.

При наличието на някой от факторите в организма се активира процесът на производство на антитела, което се отразява в резултатите от изследванията.

Ако има хронични заболявания, тестът може да покаже грешни резултати в продължение на 6 или повече месеца.

• нарушения на съединителната тъкан;
• всяка форма на туберкулоза;
• хронични заболявания на черния дроб;
• ХИВ, хепатит B, C, D и други вирусни заболявания;
• автоимунни процеси в организма.

Резултатът става погрешен поради систематичното производство на неспецифични антитела в отговор на едно от изброените нарушения.

Какво да направите, ако се открие фалшив сифилис

За да определите дали тестът за сифилис може да е грешен, трябва да оцените наличието на други фактори в проявата на болестта и вероятността от инфекция.

Бледата трепонема е причинителят на заболяването, което се предава по полов път през лигавиците на гениталните органи, устата и ректума при контакт със заразен човек. Възможно е и предаване на инфекцията от заразена майка на нейното дете.

Инкубационният период, през който болестта не се усеща, е 2-6 седмици. След това се образуват сифилитични язви с плътна основа в местата на възможно проникване на инфекция.

След 1-2 седмици най-близките до мястото на лезията лимфни възли се увеличават и стават болезнени.

При поставяне на диагноза - фалшиво положителен сифилис, трябва да кандидатствате отново в медицинска институция. В същото време докладвайте всички лекарства, които сте взели в навечерието на анализа, хронични и остри заболявания.

Ако сте имали незащитен секс с непроверен партньор или сте открили първите признаци на заболяването, трябва да уведомите Вашия лекар за това.

След събиране на анамнеза и провеждане на преглед, лекарят ще ви предпише серия от тестове, които ще ви позволят да установите точен резултат с грешка по-малка от 1%.

Видове тестове за сифилис

Анализите са два вида: нетрепонемни и трепонемални. Първият вариант включва използването на изкуствени аналози на бледа трепонема, във втория случай се използват истински трепонеми.

Нетрепонемни методи

Такива техники са широко използвани и най-често се използват при рутинни медицински прегледи.

Предимството е ниска цена, бързи резултати, възможност за провеждане на изследвания на стандартно лабораторно оборудване.

Анализ на RW

За неговото прилагане се взема кръв от пациента, по-рядко - цереброспинална течност. Кръв може да се вземе от пръст или вена. Грешката при такова изследване може да достигне до 7%.

Микрореакция на утаяване (MR или RMP)

Може да включва два вида тестове за сифилис RPR и VDRL. В резултат на разпадането на клетките под въздействието на трепонема се образуват антилипидни антитела.

Липидите могат да бъдат унищожени под въздействието на други нарушения, така че степента на грешка при провеждането на VDRL и RPR е 1-3%.

Трепонемни тестове

Такива изследвания не се провеждат във всички клиники и изискват скъпо оборудване.

Поради това те се използват, когато се подозира наличието на заболяването според резултатите от нетрепонемни тестове. Грешката на такива изследвания е по-малка от 1%.

Позволява откриване на антигени и антитела. За да се определи резултатът, пациентът дарява кръв от пръст или вена. В резултат на това изследването също ви позволява да установите стадия на заболяването.

Анализът за сифилис RPGA ви позволява да определите процента на аглутинация на еритроцитите. Точен резултат от реакцията на пасивна хемаглутинация може да се получи на 28-ия ден след заразяването.

ELISA определя наличието и стадия на заболяването чрез нивото на различни видове имуноглобулини.

Най-точният тест за откриване на патогенна ДНК. Използва се в редки случаи, тъй като изисква сложни реактиви.

Вероятността за грешки в теста RIF, RPGA, ELISA е по-малка от 1%. При PCR грешката може да бъде 0-1%.

Положителен за сифилис по време на бременност

При бременни жени може да се наблюдава грешен резултат в 1,5% от случаите при провеждане на нетрепонемни тестове. Анализът за този вид заболяване е задължителен през цялата бременност.

Първият тест за сифилис се извършва на 12 седмици, след това на 30 седмици и преди раждането. Резултатът може да е фалшив поради естествени промени в тялото и по-специално имунитет за защита на растящия плод.

Следователно по време на бременност може да се предпише втори тест, често се предписва дори при отрицателни резултати от първия, ако има рисков фактор.

Могат да се предписват и трепонемни тестове, тъй като ефектът на заболяването върху тялото на детето е по-вреден от антибиотичното лечение, ако диагнозата се потвърди.

Слабо положителен анализ

Ако формулярът, който сте получили с резултата, е 1-2 плюс, това може да означава наличие на малко количество антитела. Такива резултати могат да се появят в няколко случая:

• непълен инкубационен период;
• късна форма, след 2-4 години;
• остатъчни антитела след излекуване на заболяването.

В този случай повторната проверка е задължителна след 2 седмици.

Как да се подготвим за анализ

Ако е направен грешен тест за сифилис, ще ви бъде назначен втори. За да бъдат резултатите от него възможно най-точни, е необходимо да се подготвите правилно.

• преди анализа е разрешено да се пие само вода, забранено е да се яде храна;
• откажете се от алкохола и пушенето за 1 час на ден;
• ако дарявате кръв от вена, прекарайте 10 минути в покой преди това;
• ако инфекциозните заболявания се влошат, менструацията преминава или пациентът е бил изложен на рентгенови лъчи предишния ден, кръвен тест за сифилис не се извършва.

Има и редица лекарства в списъка с противопоказания, така че ако се подлагате на лечение, уведомете Вашия лекар за лекарствата, които приемате.

Ако заболяването се потвърди

Ако след няколко проверки, включително трепонемни тестове, резултатът е положителен, струва си да предприемете редица мерки:

• информирайте сексуалния си партньор за това, необходимо е той също да се подложи на преглед;
• близките роднини трябва да бъдат прегледани;
• е необходимо да се проведе превантивно лечение на роднини;
• по време на целия курс на лечение е необходимо да се издаде болничен лист и да се избягва близък контакт с други хора, за да се избегне предаване на инфекция;
• в края на лечението се издава удостоверение, което трябва да бъде приложено към медицинския картон и предоставено при изследвания за антитела, така че диагностиците да нямат въпроси относно появата на антигени в резултатите.

При поставяне на диагнозата информацията е поверителна. Не се съобщава при взимане на болничен, във всички документи, издадени от болницата, името на заболяването е криптирано, хората, които нямат близък контакт с пациента, не се информират за диагнозата.

След проведено лечение пациентът е напълно безопасен, наличието на сифилис в миналото не може да бъде причина за отказ от работа или други човешки права.

Ако диагнозата се потвърди в ранните етапи, тогава вероятността за пълно излекуване е 100%. Бледата трепонема, една от малкото в продължение на много години лечение на пациенти с пеницилин, не е разработила защита срещу нея.

Следователно, лечението на пациентите се извършва с помощта на лекарства, базирани на производни на пеницилин. Ако има първична форма на заболяването, е необходимо да се диагностицират и лекуват всички сексуални партньори, които са имали заразено лице, в рамките на 3 месеца.

Сифилисът след лечение на началния етап не оставя усложнения. Заболяването може да доведе до инвалидност, ако е преминал хроничен ход или е настъпила инфекция в утробата на майката.

IF за сифилис положителен

Въпроси и отговори на: положителен ifa за сифилис

Въпрос към д-р Сухов Ю.А.
Здравейте. Вече ви зададох въпрос на уебсайта на Здравето на Украйна съвсем накратко. Ще напиша цялата си история. Моля за съвет. Какви изследвания трябва да се направят?
Преди 2 години имаше открит случаен сексуален контакт.
След 1,5 месеца започна някакъв ужас: продължителна треска, сякаш някаква работа се случва в щитовидната жлеза, нещо бръмчи, след това главоболие, болки в гърлото, силни болки в костите и мускулите, първоначално пронизващи. , след това като вряла вода премина през мускулите, гадене, еднократен обрив, чести остри респираторни вирусни инфекции, които не се повлияват от лечение дълго време, задух, затруднено дишане, лош дъх, невралгия, нощно изпотяване, силна слабост , намалена производителност. Почти станах труп. Преди това бях здраво и цветущо момиче, занимаващо се професионално с танци.Физически бях доста издръжлива и активна. На практика изобщо не боледувах от настинки, бях практически здрав.
След 1 година и 10 месеца след незащитен сексуален контакт тя премина теста за ХИВ в 2 различни лаборатории, ELISA за антитела срещу ХИВ беше отрицателен.
Хепатит B и C отрицателни.
EBV PCR отрицателен
CMV PCR отрицателен
Херпес вирус тип 6 отрицателен
Токсоплазмоза PCR отрицателна
Сифилисът е отрицателен
STI отрицателен.

В общия анализ на кръвта: ESR 30; останалото е нормално.
Биохимия положителен CRP, останалото е в норма.

Какво трябва да направя? Отчаяна съм.Вече съм изследвала за всичко,за всички инфекции,но причината не е открита.Трябва ли да се изследвам отново за ХИВ?Минаха вече 2 години от контакта. Някои от симптомите изчезнаха, но се чувствам много зле, силна слабост, постоянна невралгия, изпотяване на гърдите през нощта.Не разбирам защо съм болна.че този младеж ме зарази, не го видях повече. Помогне. Посъветвайте какво да правя?

Здравейте!
На 31 години съм и съм бременна в 35 седмица. Преди 2 месеца дарих кръв за инфекции по метода ELISA (тъй като попаднах в отделението по инфекциозни болести със сълза, там направиха изследване), моят гинеколог не ме насочи да дарявам кръв за инфекции в ранните етапи на бременността (което ми се струва странно, въпреки че СПИН и сифилис взеха три пъти по време на бременност, всичките отрицателно). Сега ми казаха резултатите. Моля, коментирайте, моля. Някои показатели са тревожни, като вирус на рубеола, CMV, херпес HSV 1/2, инфекция с вируса на Epstein-Barr (EBV):

Рубеола Ig G K=2,0
CMV Ig G K=4,1
Херпес HSV Ig G 1 тип K=3.4, 2 типа отр.
Epstein-Barr VCA K=4,7 NA —
хламидия и микоплазма - отр.

Посоката ми е следната:
Коефициент на положителност K=оптична плътност на пробата. Ако K е по-малко от 0,9 - резултатът е отрицателен, ако K е от 0,9 до 1,1 - съмнителен, ако K е повече от 1,1 - положителен.
Стойности на Ig G, EBV, NA до 55 c.u./ml могат да бъдат нормални, над тази стойност резултатът е положителен.
Моля коментирайте! Благодаря ви за вниманието!

Дешифриране на резултатите от анализа за сифилис

Сифилисът е сериозно, силно заразно заболяване. За откриване на заболяването се използват кръвни изследвания (венозни и капилярни), а в някои случаи се изследва и цереброспинална течност. Дешифрирането на анализа за сифилис се извършва от лекуващия лекар. Пациентът може самостоятелно да види и разбере някои от обозначенията в анализа, но окончателното заключение за наличието или отсъствието на заболяването трябва да бъде направено от квалифициран лекар. Възможен е фалшиво положителен или фалшиво отрицателен тест за сифилис.

Кога да посетите лекар

Дълго време сифилисът беше опасно заболяване, което не можеше да бъде излекувано. Съвременната медицина разполага с всички средства за пълно излекуване на болестта. Колкото по-рано се диагностицира и открие болестта, толкова по-лесно ще бъде лечението. Заразяването със сифилис става не само чрез сексуален контакт, но и при използване на същите домакински предмети с пациента (четка за зъби, кърпа, кухненски прибори и др.). Затова се препоръчва периодичен бърз кръвен тест за сифилис за всеки човек.

При заразяване се наблюдава увеличение на лимфните възли в слабините, появата на рани и кожни обриви в устата и гениталиите. Ако се открият първите симптоми на заболяването, трябва незабавно да се консултирате с лекар. Прегледът може да бъде анонимен с направление от гинеколог, уролог, проктолог, венеролог или общопрактикуващ лекар. След като преминете теста, трябва да се свържете с Вашия лекар за препис от анализа за сифилис.

Цел на анкетата

Често по време на физически прегледи лекарят може да предпише много лабораторни изследвания, включително тест за сифилис. Такова направление не бива да се приема като съмнение за заболяване. В много области на обществения живот се изисква удостоверение за липса на заболяване.

• Семейно планиране
• Регистрация в хостела
• Допускане на работното място на здравни работници, служители в общественото хранене и др.
• Даряване на органи или кръв
• Сексуално активни пациенти
• Наличие на клинични симптоми
• Край на лечението на сифилис

Като първично изследване, като правило, се предписва един от неспецифичните (нетрепонемни) тестове. Надеждността на такива тестове е относително ниска и пациентът може да получи фалшиво положителен резултат. В този случай ще бъде насрочено второ изследване с помощта на специфичен (трепонемен) тест. Положителният или отрицателният тест трябва да се прецени от лекуващия лекар.

Подготовка за теста

Преди да дарите кръв от пръст или вена за лабораторен тест, трябва да следвате някои правила, така че анализът да е възможно най-надежден. 8-12 часа преди вземане на кръв не трябва да се приема храна, чай или кафе. През деня преди посещение в лабораторията не се препоръчва да се ядат пикантни, мазни, пържени, солени или пушени храни. Антибиотици и други лекарства също могат да изкривят теста. Всички взети вещества трябва да бъдат докладвани на лекуващия лекар. Той може да ви препоръча да се въздържате от теста за 1 или повече седмици. Кръвна проба може да бъде взета в частна лаборатория, областна клиника или може да бъде извикан здравен работник вкъщи.

Във всеки случай се използва стерилно оборудване и ръкавици за еднократна употреба.

Експресният анализ за сифилис може да се направи самостоятелно у дома. Аптеките предлагат специални тестове с подробни инструкции на руски език. Резултатът от теста е известен след 10 минути. Една червена линия на индикатора е отрицателна за сифилис, две линии са положителни. Надеждността на такива тестове не е достатъчно висока и не може да служи като потвърждение на диагнозата.

Как да разберем резултата от неспецифично изследване

Пациентите често се чувстват несигурни след изследването. Да дарите кръв и да не можете сами да дешифрирате тестовете за сифилис, разбира се, е неприятно. Дешифрирането на кръвен тест изисква медицинско образование и подходяща квалификация на лекар, както и отчитане на всички фактори, които влияят на резултата. Може ли пациентът самостоятелно да разчете резултатите от своя тест за сифилис? След като видите лабораторния доклад, можете да направите прости изводи, но лекарят трябва да потвърди или отхвърли диагнозата.

Тест с толуидиново червено се предписва не за диагностика, а за проверка на ефективността на лечението на заболяването. изследването показва колко се е променило количеството на антителата в сравнение с предишния анализ. Ако цифрата е намаляла, тогава лечението е успешно. Анализът се извършва в хода на лечението няколко пъти, както е предписано от лекаря. 3 месеца след приключване на процедурите се извършва контролно изследване.

Нетрепонемните тестове (RSKk, RMP и RPR) често се предписват по време на медицински прегледи и като експресна диагностика. Има няколко варианта за обозначения в резултат на изследване. Дешифрирането им е доста просто:

• "-" отрицателен резултат
• "+", "1+") или "++", "2+" слабо положителен анализ
• "+++", "3+" или "++++", "4+" положителен тест за сифилис

Всеки от резултатите може да бъде фалшиво положителен или фалшиво отрицателен за сифилис. При липса на клинични симптоми и случайни сексуални контакти отрицателният резултат може да се приеме от лекаря за верен. Положителната реакция обикновено се проверява с тест за трепонема.

Резултати от конкретно изследване

Трепонемните тестове са сложни и скъпи в сравнение с нетрепонемните тестове. Има няколко вида тестове, използвани за диагностициране на сифилис: RSKt, RIBT, RIF, RPHA, ELISA и имуноблотинг). Едно от точно специфичните изследвания е RIBT анализът. Резултатът от теста може да бъде представен от лабораторията като процент.

• 20% съответства на отрицателен резултат ("-")
• 21-30% съмнителен анализ ("++" или "2+")
• 31-50% слабо положителен ("+++", "3+")
• 51% или повече съответства на положителен резултат

Имуноблотингът е един от съвременните и точни методи за диагностика на заболяване. Обикновено се назначава, за да потвърди или опровергае резултатите от първото изследване. Откриването в кръвта на антитела като IgG и IgM се маркира с ивици. Резултатите от теста се интерпретират в сравнение с нетрепонемния тест.

Ако и двата резултата са отрицателни, пациентът е здрав или инфекцията е в първата седмица на развитие. И двата положителни резултата показват наличието на сифилис или друго възможно автоимунно заболяване.

Положителен имуноблот тест след отрицателен нетрепонемален тест показва наличието на сифилис, автоимунно заболяване или рак.

Може да има положителна реакция при бременни жени. Отрицателен имуноблот тест след положителен нетрепонемален тест показва липса на заболяване.

Надеждност на анализите

Винаги има вероятност резултатът от теста да е грешен. При декодиране на тестове за сифилис трябва да се обърне специално внимание на външни фактори, които не зависят от пациента. Лаборантът, който провежда изследването, или пациентът също могат да сбъркат, когато не са се подготвили правилно за вземане на кръв или не са предоставили на лекаря вярна информация за себе си. Фалшив положителен резултат е възможен под въздействието на следните фактори:

• Диабет от всякакъв вид
• Наличието на лекарства в кръвта
• Алкохолна интоксикация
• Инфекциозни заболявания (морбили, хепатит, мононуклеоза и др.)
• Доброкачествени или злокачествени неоплазми
• Сърдечни заболявания
• Прием на антибиотици или скорошна ваксинация
• Автоимунни заболявания (лупус еритематозус, ревматоиден артрит и др.)
• Бременност
• Яденето на мазни, пикантни или солени храни през деня преди вземането на кръвна проба

В зависимост от стадия на заболяването, някои тестове може да не открият заболяването. И така, реакцията на Васерман (RSKt и RSKk) се провежда само 3-4 седмици след възможна инфекция с вероятност от 100%, при наличие на третичен сифилис, надеждността ще бъде само 75%. За диагностициране на ранните стадии на заболяването е препоръчително да се използва ELISA тест. Анализът е ензимен имуноанализ с висока чувствителност към антитела. Надеждността на резултата е близо до 100%, фалшиво положителен резултат при наличие на други заболявания е изключен.

Отрицателните резултати от изследването за полово предавани болести означават, че лицето е здраво. Съмнителен анализ за сифилис ще доведе до втори преглед. Ако има фактори, които могат да повлияят на крайното заключение, като например наличие на други заболявания, лекарят ще промени параметрите на изследването. Положителният резултат от теста за сифилис не е присъда или причина за паника. С помощта на лекарства болестта може да бъде напълно излекувана. Трябва обаче да се помни, че болестите на ранен етап се лекуват много по-добре.

ELISA за сифилис: техника на анализ, интерпретация, причини за фалшиви положителни резултати

Списъкът на стандартните диагностични мерки, използвани за инфекциозни заболявания, включва ензимен имуноанализ. Ако ELISA за сифилис е положителен, не се паникьосвайте веднага.

Нека разгледаме по-подробно характеристиките на тази изследователска техника и принципите за дешифриране на резултатите, получени при различни категории пациенти.

Същността на изследването

Имуноензимният анализ е един от най-разпространените методи за диагностициране на инфекциозни заболявания. Той принадлежи към категорията трепонемни тестове, т.е. може да се използва за определяне на наличието в тялото на пациента на причинителя на сифилис - бледа трепонема.

Чрез ELISA сифилисът се открива поради откриването на антитела срещу трепонема. Те се съдържат в кръвта на пациента и техният вид и количество зависят от стадия и формата на заболяването, което ви позволява да получите важна информация за текущото състояние на човешкото здраве.

Предимства и недостатъци

ELISA много често се предписва при съмнение за сифилис или други инфекциозни заболявания. Това се дължи на факта, че анализът ви позволява да идентифицирате точния тип и стадий на заболяването, а неговата надеждност остава на високо ниво - вероятността за грешка въз основа на резултатите от множество изследвания е само 1%, първичният ELISA има точност около 90%.

Използването на висококачествени реактиви и модерно оборудване ни позволява да увеличим максимално точността на индикаторите.

Като цяло предимствата на метода са:

1. Висока точност на резултата. Вероятността за получаване на неверни данни е много малка.
2. Минимизиране на човешкия фактор на влияние.Съвременното оборудване за провеждане на ELISA изключва човешкото влияние върху резултатите от изследването поради автоматизацията на процеса.
3. Откриване на специфични антитела. Невъзможно е да се объркат антигени от един тип с други, така че анализът показва точен резултат за конкретна диагноза.
4. Фиксиране на най-малките отклонения от нормата. Дори и най-малката концентрация на патологични агенти няма да остане незабелязана.

Не забравяйте за недостатъците на този метод. ELISA има следните недостатъци:

1. Висока цена. Високата цена се дължи на много фактори, по-специално на необходимостта от добро оборудване, висококачествени реактиви и специалисти с достатъчно ниво на обучение.
2. Необходимостта от предварителна диагноза. Трябва да знаете кои антигени да търсите, тъй като без допълнителни данни ще бъде невъзможно да се направи точна диагноза.
3. Вероятността за фалшив положителен резултат. Някои състояния на тялото и други фактори могат да изкривят крайните данни.

Показания за провеждане

Лекарят може да предпише ензимен имуноанализ за диагностициране не само на сифилис, но и на редица други инфекциозни заболявания.

Ако разгледаме ситуацията директно с инфекцията с трепонема, причината за изследването може да бъде:

• появата на външни симптоми на заболяването (шанкъри, сифилитичен обрив, гума и др.);
• значително намаляване на имунитета;
• идентифициране или подозрение за сифилис при сексуален партньор, роднини и членове на семейството;
• положителна реакция по време на други тестове;
• идентифициране на други заболявания, които могат да бъдат свързани със сифилис;
• личното желание на човек да бъде прегледан.

Методи за провеждане

ELISA може да се извърши по различни начини. Във всеки случай се избира най-подходящият вариант.

На първо място, методите се разделят на:

1. Качествена. Установява се наличието на инфекция или вирус в тялото на пациента.
2. Количествени. Определя концентрацията на антитела срещу патогенен агент в човешкото тяло, което показва етапа и интензивността на развитие на заболяването.

Съществува и класификация на методите за провеждане на ELISA според принципа на възпроизвеждане на необходимата реакция.

Има 3 варианта:

1. Направо. Белязаните антитела се инжектират в предоставените кръвни проби.
2. Индиректен с антигени.Адсорбираните антигени се поставят предварително в клетките на полистиролова плака, предназначена за ELISA. След това към тях се добавят антитела на вируси, което провокира образуването на имунни комплекси, необходими за по-нататъшна оценка на резултатите.
3. Индиректен с антитела.За болести, предавани по полов път, този метод често се използва. Това включва предварителна сорбция на антитела, едва след това антигените се добавят към плаката.

Правила за вземане на проби от материали

За да се намалят рисковете от получаване на фалшиви резултати, е необходимо да се дарява кръв за анализ правилно.

Преди да се подложите на ELISA, трябва да се спазват някои ограничения:

• избягвайте силен физически и емоционален стрес;
• спрете да пушите и пиете алкохол поне 1-3 дни предварително;
• за няколко дни трябва да преминете към правилно хранене;
• желателно е жените да контролират фазата на менструалния цикъл, тъй като хормоните могат да изкривят резултатите;
• последното хранене трябва да бъде 8-10 часа преди кръводаряването;
• за 10 дни се изключват лекарства, които могат да повлияят на резултатите от изследването.

За ELISA се взема венозна кръв от кубиталната вена, трябва да се вземе сутрин на празен стомах. По принцип се прилагат стандартните правила за подготовка за вземане на венозна кръв. В зависимост от наличието на кое заболяване се изследва могат да се въведат допълнителни изисквания за предварителна подготовка на пациента.

Методика

Инструкциите за провеждане на ELISA са доста прости:

1. Пациентът взема кръв от вената.
2. Взетият материал се подготвя и разделя на проби върху специална фина палета.
3. Антигените се смесват с антитела според избрания метод.
4. Реакцията се оценява. Пробите се сравняват с контролните проби, извършва се качествена и количествена оценка на резултатите.
5. Данните се въвеждат в специална таблица с прилагане на количествени показатели (общи антитела).
6. Лекуващият лекар дешифрира резултатите. Ако е необходимо, се предписва подходящо лечение.

След прегледа на пациента се издава документ с резултатите. Той има формата на таблица със съответните обозначения срещу всеки тип имуноглобулин в пресечната точка с имената на инфекциозните заболявания.

Декриптиране

Само специалист ще може правилно да дешифрира резултатите от анализите. Трудно е да разберете сами, например, какво означава резултатът от ELISA k = 1 4. Сифилисът може да се появи и в различни форми, което също влияе на крайните данни.

Резултатите показват 3 вида имуноглобулини:

1. IgM. Позволява да се определи периодът на заразяване със сифилис. Положителният резултат показва обостряне на заболяването. Липсата им може да показва ремисия на хронични патологии или латентна форма на заболяването.
2. IgA.Показва заболяване, което е изминало повече от месец от заразяването. Това също е признак на острата фаза на заболяването, както с обикновени патологии, така и с напреднали хронични.
3. IgG. Това е признак за пиковия период на заболяването, тоест неговото обостряне. При сифилис положителна реакция се появява известно време след лечението. При някои видове заболявания може да е признак на развит имунитет.

Тези вещества се произвеждат от тялото в определена последователност, което е допълнителен признак на заболяването. С качествени изследвания се установява само наличието на имуноглобулини в кръвта от всеки тип.

Това се изразява в промяна на цвета на материалите, участващи в анализа. Количествените показатели са спомагателни, те по-точно описват ситуацията. Съотношението на антигени и антитела показва тежестта на заболяването и интензивността на реакцията на организма.

Какво да правя

Ако пациентът наистина има сифилис, абсолютно винаги се открива положителен ELISA, невъзможно е да не забележите наличието на трепонема в такова изследване. Не се отчайвайте, болестта се повлиява добре от лечението, особено в началните етапи.

Какво да направите, ако резултатът от теста е положителен:

• се подлагат на допълнителни прегледи според показанията на лекаря;
• вземете курс на антибиотична терапия според избраната схема;
• съсредоточете се върху укрепването на имунната система;
• информирайте сексуалния си партньор за заболяването;
• в бъдеще редовно се подлагат на превантивна диагностика до отписване в диспансера (след 5 години при липса на положителни резултати от теста).

Няма нужда да отлагате отпуск по болест и да се страхувате от публичност на резултатите. Диагнозата е криптирана и остава тайна, само ако има заплаха от инфекция за други хора, е необходимо да се информират роднини и сексуален партньор за проблема, така че те да преминат необходимите изследвания.

Фалшив положителен резултат и причините за него

Понякога резултатът от други тестове се записва и ELISA е фалшиво положителен за сифилис. Ето защо се препоръчва да се извършат 2-3 спомагателни метода и след известно време да се повтори имуноензимният анализ.

Такива неточности са редки, те се дължат главно на такива фактори:

• бременност;
• хронични болести;
• скорошна ваксинация;
• нараняване.

Фалшивите положителни резултати се разделят на остри и хронични, в зависимост от естеството на фактора, който ги е провокирал.

Пълна интерпретация на тестове за сифилис

Тестове за сифилис: видове тестове, интерпретация на резултатите, причини за фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати от изследването.

Сифилисът е полово предавана болест, причинена от бактерията Treponema pallidum (бледа трепонема). Прочетете повече за начините на предаване на сифилиса, симптомите и възможните усложнения в статията Всичко за сифилиса. Симптоми и лечение.

Навременното откриване на сифилис (с помощта на специални тестове) позволява на лекарите да започнат лечението навреме и да предотвратят развитието на опасни усложнения на това заболяване.

Тестването за сифилис по време на бременност помага да се предотврати раждането на бебета с вроден сифилис. Подробности за тестовете за сифилис по време на бременност са описани в статията Всичко за диагностиката и лечението на сифилис по време на бременност.

Защо ме изследваха за сифилис?

В по-голямата част от случаите лекарите нямат възможност да получат точни данни за сексуалния живот на пациентите (някои хора крият подробности за сексуалния си живот или подценяват риска от заразяване с болести, предавани по полов път). В тази връзка, за да предпазят хората от възможните последствия от собственото им невнимание или липса на медицински познания, в някои случаи лекарите предписват така наречените скринингови тестове за сифилис (т.е. тестове, които се правят от голям брой хора).

Вашият лекар може да назначи тестове за сифилис, дори ако нямате симптоми на заболяването и сте сигурни, че не може да сте се заразили.

Необходимостта от тези тестове се дължи на факта, че сифилисът понякога се предава чрез битови средства (не чрез сексуален контакт) и протича в латентна форма (т.е. без симптоми).

По правило скрининговият преглед се предписва в следните ситуации:

1. При кандидатстване за работа (здравни работници, кетъринг, военнослужещи и др.)
2. При регистрация за бременност.
3. При постъпване в болницата, при подготовка за операции.
4. Кръводарители.
5. Лица, лишени от свобода в местата за лишаване от свобода.

Вашият лекар може също да назначи тестове за сифилис:

1. При откриване на симптоми на заболяването (обикновено това е обрив в областта на гениталиите).
2. При получаване на положителни резултати от скринингови тестове за сифилис.
3. Ако сте имали сексуален контакт с човек, който е бил диагностициран със сифилис.
4. Новородени деца, чиито майки са болни от сифилис.

Освен това периодично се правят тестове за сифилис по време на лечението (за да се гарантира, че лечението е ефективно) и дори след края на курса на лечение, за да се следи излекуването.

Какви тестове се използват за диагностициране на сифилис?

Диагнозата и лечението на сифилис се извършва от дерматовенеролог. При диагностицирането на заболяването могат да се използват следните тестове:

инспекциякожата, външните и вътрешните полови органи се извършва, за да се идентифицират основните симптоми на сифилис: твърд шанкър, подути лимфни възли, кожни обриви и др. (вижте Симптоми на сифилис)

За да намерете treponema pallidum, лекарите изследват под микроскоп петна (или остъргвания), получени от язви, лимфни възли, околоплодна течност при бременни жени и др.. Кръвта не се изследва под микроскоп.

Важно: Ако във вашите анализи под микроскоп е открита бледа трепонема, това означава, че определено имате сифилис. Но ако тестовете показват, че причинителят на сифилис не е открит, не можете да сте напълно сигурни, че няма сифилис. За да сте сигурни, че не сте болни, трябва да си направите допълнителни изследвания, описани по-долу.

PCR (полимеразна верижна реакция)- Това е сложен и скъп метод за диагностициране на сифилис, който ви позволява да откриете ДНК на бледа трепонема в кръвта или други тестови материали (амниотична течност, цереброспинална течност). Ако PCR тестът даде отрицателен резултат, най-вероятно нямате сифилис. Въпреки това, когато получите положителен резултат (т.е. ако чрез PCR е открита ДНК на Treponema pallidum в кръвта), няма 100% гаранция, че сте болни. Това се дължи на факта, че PCR понякога дава фалшиво положителни резултати (дава положителен резултат при липса на заболяване). Следователно, ако PCR даде положителен резултат, се препоръчва допълнително да се подложат на други методи за изследване на сифилис (например имунофлуоресцентен тест (RIF) и тест за пасивна хемаглутинация (RPHA)).

Какво представлява серологичният тест за сифилис?

Серологичният анализ е откриването в кръвта на специални протеини (антитела), които се произвеждат в човешкото тяло в отговор на инфекция. За разлика от предишните диагностични методи, серологичните тестове не откриват самата бледа трепонема, а само нейните „следи“ в тялото.

Ако в кръвта ви се открият антитела срещу бледа трепонема, това означава, че или сте заразени със сифилис в момента, или сте го имали преди.

Какви тестове показват, че човек има сифилис?

Серологичните тестове за сифилис се разделят на 2 големи групи: неспецифични и специфични тестове. Основната разлика между тези тестове е, че неспецифичните тестове показват положителен резултат само ако човек има сифилис в момента и стават отрицателни след лечението, докато специфичните тестове остават положителни дори след излекуване на заболяването.

С други думи, отрицателен резултат от неспецифичен тест е известна гаранция, че сте здрави.

Какви тестове за сифилис са неспецифични (нетрепонемни)?

Неспецифичните анализи включват микрореакция на утаяване (MR) и реакция на Васерман (PB, RW). Тези тестове се използват за скрининг за сифилис. След излекуване на сифилис тези тестове стават отрицателни при 90% от хората.

Как работят тези тестове:в резултат на жизнената активност на бледа трепонема (със сифилис), клетките умират в тялото. В отговор на разрушаването на клетките имунната система произвежда специални протеини (антитела или имуноглобулини). Неспецифичните тестове са насочени към идентифициране на тези антитела, както и отчитане на тяхната концентрация (определяне на титъра на антителата).

Микрореакция на утаяване (MR)и неговите аналогове в някои страни: бърз реагин тест (RPR, Rapid Plasma Reagins)и VDRL тест (Лаборатория за изследване на венерически болести)са нетрепонемни тестове, които се предписват за скрининг за сифилис.

Какво се изследва:

обикновено 4-5 седмици след заразяването.

ако анализът показа положителен резултат, тогава има вероятност да имате сифилис. Тъй като този тест може погрешно да даде положителни резултати, се препоръчва да се подложите на допълнителен преглед, като използвате специфичните тестове, описани по-долу. Отрицателният резултат показва липсата на сифилис или ранен стадий на заболяването (преди появата на антитела в кръвта).

ако в кръвта се открият антитела в титър от 1:2 до 1:320 и повече, това означава, че сте заразени със сифилис. При късен сифилис титърът на антителата може да бъде нисък (което се оценява като съмнителен резултат).

Фалшиво положителни MR резултати се срещат в около 2-5% от случаите, ето възможните причини за тях:

1. Системни заболявания на съединителната тъкан (системен лупус еритематозус, склеродермия, ревматоиден артрит, дерматомиозит, васкулит и др.)
2. Инфекциозни заболявания: вирусен хепатит, инфекциозна мононуклеоза, туберкулоза, някои чревни инфекции и др.
3. Възпалителни заболявания на сърцето (ендокардит, миокардит).
4. Диабет.
5. Бременност
6. Скорошна ваксинация (ваксинация).
7. Употреба на алкохол, наркотици и др.
8. Минал и излекуван сифилис (приблизително 10% от хората, които са били лекувани, може да имат положителен MR тест за цял живот).

Какви могат да бъдат причините за фалшиво отрицателни резултати:тестът може погрешно да покаже отрицателен резултат, ако кръвта съдържа много антитела, ако тестът е направен в ранен стадий на заболяването преди появата на антитела или при късен сифилис, когато в кръвта остават малко антитела.

Реакция на Васерман (РВ, RW)е нетрепонемален тест, който се използва за скрининг за сифилис в страните от ОНД.

Какво се изследва:кръв (от пръст или от вена), цереброспинална течност.

Колко време след инфекцията тестът става положителен?обикновено 6-8 седмици след заразяването.

Как да оценим резултатите от анализа:„-“ е отрицателна реакция, „+“ или „++“ е слабо положителна реакция, „+++“ е положителна реакция, „++++“ е рязко положителна реакция. Ако реакцията на Васерман показа поне един плюс, тогава трябва да вземете допълнителни тестове за сифилис. Отрицателната реакция не е гаранция, че сте здрави.

Как да оценим получения титър на антитела:титър на антитела от 1:2 до 1:800 показва наличието на сифилис.

Какви могат да бъдат причините за фалшиво положителни резултати:Реакцията на Васерман може погрешно да даде положителен резултат по същите причини като микрореакцията на утаяване (MR), а също и ако сте пили алкохол или сте яли мазни храни малко преди да дарите кръв за анализ.

Поради големия брой грешни резултати, реакцията на Васерман (РВ, RW) се използва все по-рядко и се заменя с други, по-надеждни диагностични методи.

Неспецифичните тестове (преципитационна микрореакция (MR) и реакция на Васерман (PB, RW)) са добри методи за диагностициране на сифилис. Отрицателният резултат от теста е много вероятно да означава, че сте здрави. Но при получаване на положителни резултати от тези тестове е необходимо допълнително изследване с помощта на специфични (трепонемни) тестове.

Какви тестове за сифилис са специфични (трепонемни)?

Трепонемните тестове включват следните тестове: имунофлуоресцентна реакция (RIF), имуноблотинг, реакция на пасивна аглутинация (RPGA), реакция на имобилизиране на бледа трепонема (RIBT), ензимен имуноанализ (ELISA).

Специални тестове се предписват на хора, които имат положителни резултати от преципитационна микрореакция (MR) или реакция на Васерман (PW). Специфичните тестове остават положителни дълго след като сифилисът е бил излекуван.

Как работят тези тестове:когато патогените на сифилис навлязат в тялото, имунната система произвежда антитела, насочени към борба с treponema pallidum. Тези антитела не се появяват в кръвта веднага след инфекцията, а само след няколко седмици. Около края на втората седмица след заразяването в кръвта се появяват антитела от клас IgM. Антителата от този клас показват скорошна инфекция със сифилис, но ако не се лекуват, те остават в кръвта няколко месеца и дори години (докато броят им постепенно намалява). 4-5 седмици след заразяването със сифилис в кръвта започват да се откриват антитела от друг клас, IgG. Антителата от този тип остават в кръвта в продължение на много години (понякога през целия живот). Трепонемните тестове могат да открият наличието в кръвта на антитела (IgM и IgG), насочени към борба с treponema pallidum.

Имунофлуоресцентна реакция (RIF)или Флуоресцентно трепонемно антитяло (FTA и неговия вариант FTA-ABS)е тест за трепонема, който се използва за потвърждаване на диагнозата сифилис в най-ранните етапи (дори преди да се появят първите симптоми).

Какво се изследва:кръв от вена или от пръст.

Колко време след инфекцията тестът става положителен?: обикновено след 6-9 седмици.

Как да оценим резултатите от анализа:Резултатите от анализа се дават под формата на минус или плюс (от едно до четири). Ако има минус в анализа, тогава антитела не са открити и вие сте здрави. Наличието на един плюс или повече показва наличието на сифилис.

Какви могат да бъдат причините за фалшиво положителни резултати:фалшивите положителни резултати са редки, но са възможни грешки при хора със заболявания на съединителната тъкан (системен лупус еритематозус, дерматомиозит и др.), при бременни жени и др.

Реакция на пасивна аглутинация (RPHA), или Тест за хемаглуция на Treponema pallidum (TPHA)- Това е специфичен тест, който се използва за потвърждаване на диагнозата сифилис на почти всеки етап.

Какво се изследва: кръв от вена или от пръст.

Колко време след инфекцията тестът става положителен?обикновено в рамките на 4 седмици.

Как да оценим резултатите от анализа:положителен резултат от TPHA показва, че имате сифилис или сте здрави, но сте имали заболяването в миналото.

Как да оценим получения титър на антитела:В зависимост от титъра на антителата може да се предположи условно продължителността на инфекцията със сифилис. Малко след първото навлизане на трепонема в тялото, титърът на антителата обикновено е по-малък от 1:320. Колкото по-висок е титърът на антителата, толкова повече време е минало от инфекцията.

Ензимен имуноанализ (ELISA), или Ензимен имуноанализ (EIA), или ELISA (ензимно свързан имуносорбентен анализ)е тест за трепонема, който се използва за потвърждаване на диагнозата и определяне на стадия на сифилис.

Какво се изследва:кръв от вена или от пръст.

Колко време след инфекцията тестът става положителен?най-рано 3 седмици след заразяването.

Как да оценим резултатите от анализа:положителен ELISA тест показва, че имате или сте имали сифилис. Този анализ може да остане положителен дори след лечение.

Определяне на продължителността на инфекцията със сифилис чрез ELISA:В зависимост от това кои класове антитела (IgA, IgM, IgG) се намират в кръвта, можем да предположим възрастта на инфекцията.

Статията е написана въз основа на материали от сайтове: sifilis24.ru, www.health-ua.org, krov.expert, zppp.su, polismed.ru.

Как е изследването чрез ELISA

механизъм на реакция

Ензимният имуноанализ се основава на имунната реакция на антиген с антитяло и прикрепването на ензимен етикет към антителата позволява да се вземе предвид резултатът от реакцията антиген-антитяло чрез появата на ензимна активност или чрез промяна в нивото й. В опростена форма механизмът на реакцията може да бъде представен по следния начин:

	Първата реакция възниква между открития Ig (Ab) и пречистения патогенен антиген (Ag), фиксиран към повърхността на ямките на имунологичната плака
	За идентифициране на образуваните имунни комплекси се провежда втора имунологична реакция, при която свързаният специфичен Ig действа като антиген, а конюгат, представляващ Ig (Ab) към съответния човешки Ig, белязан с ензима -пероксидаза (К). като антитела към него.
	След това протича ензимна реакция, катализирана от ензимната част на конюгатната молекула.Субстратът на тази реакция е безцветно вещество - хромоген, което по време на реакцията образува оцветено вещество. Интензитетът на цвета в ямката зависи по определен начин от количеството имуноглобулини, съдържащи се в пробата.

Точкуване

Провеждане на имуноензимен анализ

За серодиагностика се използват 96-ямкови полистиренови плаки, върху клетъчните стени на които антигенът е адсорбиран предварително. Тестовият серум се добавя към клетката на таблетката. В този случай към него са прикрепени антитела, хомоложни на антигена. Неприкрепените антитела се отстраняват чрез промиване. След това в клетките се въвеждат маркирани с ензим антитела срещу човешки имуноглобулини (антитела). Ако откриваемите антитела присъстват в тестовия серум, тогава на този етап те ще действат като антигени, с които белязаните антитела ще реагират. Добавянето на хромогенно вещество (багрило) след измиване ще позволи да се вземе предвид реакцията чрез развитие на оцветяване в клетките. В този случай интензитетът на цвета е пропорционален на количеството ензим и следователно количеството на антителата.При измерване на оптичната плътност (ОП) на течност в клетка и сравняването й с контролна проба се изчислява концентрацията на антитела в обемни единици Най-често използваните резултати се изчисляват в единици оптична плътност Всяка тестова система има свои собствени показатели за отчитане на резултатите и показатели за норма и патология, които трябва да се ръководят при тълкуване на резултатите.

Какви инфекции могат да бъдат открити чрез ELISA

Използва се основно в съвременната венерология за диагностика на сифилис (в комбинация с други реакции), ХИВ инфекция, вирусен хепатит.Има ограничено значение за диагностицирането на хламидийна инфекция, цитомегаловирусна инфекция и други херпесни инфекции.Методът ELISA също е използва се за определяне на антитела при различни инфекциозни заболявания, нива на хормони, автоантитела и различни ракови маркери.

Как да тълкуваме резултатите от ELISA

Изследването на наличието и нивото на антитела от различни класове в някои случаи помага да се определят етапите на инфекциозния процес

Стадий на заболяването	IgM	IgA	IgG
Първична фаза (2 седмици от заразяването)
Първична фаза (2,5 - 3 седмици от заразяването)
Първична фаза (3-4 седмици от заразяването)
Обостряне на хроничната фаза (2 седмици от началото на обострянето)
хронична фаза
Минала (излекувана инфекция)
Възстановяване		намаляване на титъра 2-4 пъти след успешно лечение	намаляване на титъра с 4-8 пъти за 1-1,5 месеца след успешно лечение
Отрицателен резултат

За съжаление такова важно предимство на ELISA като количественото определяне на антитела не е от голямо значение в практическата работа - т.е. не позволява точна диагноза и не влияе на дозировката и времето на предписване на лекарства.

Каква е ролята на метода ELISA в диагностиката на сифилис

Методът ELISA при диагностицирането на сифилис е използван за първи път през 1975 г. В момента той се използва широко за серологична диагностика на сифилис в Русия и се използва като потвърждаващ тест за сифилис. Обикновено се провежда изследване, което открива т.н. наречени общи антитела срещу антигени на treponema pallidum (IgM и IgG), въпреки че в някои случаи е възможно да се определят само "ранни" антитела от клас М. ELISA за сифилис става положителен след 3 седмици от момента на инфекцията и остава положителен за доста дълго време дори след лечение (понякога за цял живот).Следователно, като тест, потвърждаващ лечението на сифилис, ELISA не се използва.В повечето случаи се извършва само качествено определяне на ELISA - т.е. само положителен или отрицателен резултат, въпреки че е възможно и количествено определяне.

С напредъка на съвременната медицина е възможно да се извърши по-задълбочена диагностика при съмнение за определени патологии при пациент. Един от информативните методи за лабораторно изследване е ELISA анализът, който се извършва чрез вземане на венозна кръв. Тоест нищо не се променя за пациента като цяло. Но лаборантът ELISA провежда сложна техника за изследване на събрания биоматериал. Какво представляват ELISA анализите и какви са тънкостите на използването на метода ELISA като диагностичен, ние разбираме материала по-долу.

Какво е ензимен имуноанализ?

Производството на антитела се провокира от самите антигени, които са влезли в човешкото тяло. Когато влизат в „битката“ за здравето на тялото, антителата, така да се каже, се маркират с антигени, което лаборантът вижда в кръвен тест. Тоест в събрания биоматериал е възможно да се проследи не само наличието на инфекция, но и нейните следи след пълно възстановяване на тялото.

По този начин, като предписва ензимно-свързан имуносорбентен анализ на пациент, лекуващият лекар може да проследи продължителността на инфекцията, степента на нейното прогресиране или да идентифицира наличието на имунитет към определена инфекция.

Диагностичният процес на ELISA изглежда така:

• Взетата венозна кръв се довежда в лабораторията до състояние на кръвен серум;
• След това лаборантът използва специална табла с клетки, всяка от които вече съдържа всички необходими антигени. Достатъчно е само да капнете кръвен серум във всяка клетка и да проследите реакцията на имуноглобулини (антитела) към антигени. Наличието на "желаната" реакция се показва чрез промяна в цвета на изследвания материал. В бъдеще лаборантът изучава оптичната плътност на изследваната среда.

• Аскаридоза и ентеробиоза (кръгли червеи и острици);
• трихинелоза;
• Описторхиаза в остра и хронична форма;
• лямблиоза;
• амебиоза;
• токсоплазмоза;
• Лайшманиоза под всякаква форма.

Важно: ензимният имуноанализ може да бъде както качествен, така и количествен. В първия случай лаборантът само потвърждава или опровергава наличието на желаното вещество в кръвта. Във втория случай в резултат на анализа се посочва концентрацията му в тялото на пациента.

Недостатъци на метода

С всички предимства на този диагностичен метод трябва да се разбере, че ензимният имуноанализ не е начин за откриване на причината за заболяването на пациента, а само метод за потвърждаване на диагнозата, твърдяна от лекуващия лекар. И с оглед на факта, че изследването е доста скъпо, то трябва да се използва разумно. В този случай резултатите от изследването трябва да се интерпретират само от квалифициран специалист.

Дешифриране на резултатите

След като разглобихме съкращението IFA и какво представлява то ─ разбрано, струва си да преминете към тълкуване на резултатите. Тук е важно да се разбере, че ако анализът е извършен качествено, тогава резултатът ще бъде само положителен или отрицателен. Тоест диагнозата или потвърждава подозренията на лекаря за определена диагноза, или ги опровергава. В този случай формулярът ще съдържа съответно символите "+" или "-".

Важно: Отрицателният резултат от теста не винаги означава липса на инфекция. Факт е, че антитела срещу антигени могат да се образуват в рамките на 14 дни след инфекцията и е вероятно те все още да не са се образували.

Ако се извърши количествен анализ, тогава тук се определят вида на антителата, техният брой и етап на активност. По-специално, при такава диагноза се определят антитела (имуноглобулини) IgG и IgM, които се образуват в различни периоди на прогресиране на инфекцията. Най-честите резултати в този случай са:

• Повишен IgM и пълна липса на IgG. Тази картина показва скорошна инфекция и остра фаза на патологията.
• Повишена активност и на двата вида имуноглобулини (IgM и IgG). Той говори за продължително и хронично протичане на инфекциозния процес.
• IgG активност и пълна липса на IgM. Инфекцията е била преди поне шест месеца и сега вирусът е в продължителен хроничен стадий.
• Липса на IgG и IgA антитела. Резултатът е неопределен.
• Липса на IgM, IgA и IgG антитела. Показва липса на имунитет към специфична инфекция.
• Активността на антителата IgG, IgM и IgA показва обостряне на хроничен процес.

В допълнение към идентифицирането на видовете антитела, лаборантът в специална колона на формуляра посочва и техния брой на обем кръв. Не забравяйте, че след като сте разбрали какво представлява методът ELISA, не интерпретирайте резултатите сами. Получените резултати могат да бъдат интерпретирани с точност само от лекуващия лекар в зависимост от предложената диагноза, изградена въз основа на клиничната картина на пациента.

Кръвният тест ELISA е често срещан метод за откриване на различни патологии. Резултатът от кръвен тест, чието ELISA декодиране е интерпретирано от лекар по лабораторна диагностика, в повечето случаи е надежден.

Какво е ELISA

ELISA е съвременен диагностичен метод, който се използва за лабораторна диагностика на инфекции, хормонални и имунни нарушения и онкологични заболявания. Методът позволява да се открият антитела срещу инфекция още в ранните стадии на заболяването.Този метод принадлежи към индиректните диагностични методи, тъй като разкрива имунния отговор на организма. Сред предимствата на ELISA в сравнение с други диагностични методи може да се открои високо ниво на технологичност, което намалява вероятността от грешки. Методът е високочувствителен и се използва за диагностика на заболявания както при деца, така и при възрастни. Има голям брой различни модификации на ELISA.

Методът ELISA се основава на спецификата на имунохимичните реакции, както и на физикохимичните модели на реакциите на комплексите антиген-антитяло. Реакциите се произвеждат с участието на специфични ензими, които са етикети за откриване на антитела. В резултат на имунохимична реакция, строго определени антитела се свързват със съответните антигени. Кръвен тест чрез ензимен имуноанализ почти елиминира възможността за получаване на фалшив положителен резултат. Специалистите по лабораторна диагностика преценяват положителния или отрицателния резултат въз основа на това дали разтворът се е оцветил по време на ензимната индикация на комплекса антиген-антитяло. Ако разтворът е оцветен, тогава антигенът е взаимодействал с антитялото, резултатът от ELISA е положителен.

Какви заболявания могат да бъдат открити чрез ELISA

Изследването с ензимен имуноанализ позволява:

• идентифицират редица инфекциозни заболявания;
• диагностика на автоимунни заболявания;
• да се установи наличието на онкология;
• идентифициране на хормонални нарушения;
• направете други изследвания.

Кръвен тест с ELISA ви позволява да определите наличието на следните инфекции:

Методът се използва за откриване на антигени на патогени на редица инфекции, както и за откриване на антитела от различни класове. Методът ELISA придоби голяма популярност за откриване на сифилис, ХИВ и вирусен хепатит. Не се препоръчва да се определят наличието и нивото на антитела в кръвния серум с цел първична диагностика на ППИ. В този случай наличието на антитела в кръвта може да бъде само знак, че тялото на пациента е имало контакт с инфекциозния агент в миналото.

Диагностиката на различни автоимунни заболявания чрез ELISA се извършва чрез изследване на:

• антинуклеарни тела;
• антитела срещу двойноверижна ДНК;
• антитела към разтворими ядрени антигени (ENA скрининг);
• антикардиолипинови антитела;
• IgG към цитрулин пептид;
• ревматоиден фактор;
• С-реактивен протеин;
• автоантитела към цитоплазмените антигени на неутрофилите (ANCA скрининг).

Специфични имунни комплекси са характерни за някои автоимунни заболявания. Например, двуверижни ДНК антитела са характерни за заболяване като системен лупус еритематозус.

Определянето на онкологични заболявания се извършва с ензимен имуносорбентен анализ на кръвен серум за специфични туморни маркери, като PSA, CA-125.

PSA показва наличието на аденом на простатата и рак на простатата. CA-125 е туморен маркер за рак на яйчниците. Стойността се увеличава и при ракови тумори на матката, млечните жлези, ендометриума.

Подготовка за анализ

За да осигурите максимална точност на резултатите, трябва да следвате определени правила за подготовка за изследването. Анализът за лабораторна диагностика чрез ELISA, като правило, се взема сутрин от кубиталната вена. Необходимо е да се дарява кръв строго на празен стомах. В допълнение към тази проста рецепта трябва да се спазват следните препоръки за подготовка:

• 24 часа преди изследването е необходимо да се изключат алкохолът и пушенето;
• избягвайте тежки физически натоварвания;
• запази спокойствие;
• избягвайте нервно напрежение;
• дарете кръв за ELISA не по-рано от 10 дни след оттеглянето на лекарството;
• уведомете Вашия лекар, ако приемате някакви лекарства, от които се нуждаете.

Освен това, няколко дни преди теста, се препоръчва да следвате диета. В същото време изключете от диетата мазни храни, пържени храни. Преди тестване за вирусен хепатит изключете от диетата не само мазни и пържени храни, но и цитрусови плодове, както и оранжеви зеленчуци.

Трябва да се отбележи, че резултатите от определен набор от хормонални изследвания се влияят от такъв фактор като фазата на менструалния цикъл. Необходимостта от вземане на анализ в една или друга фаза на менструалния цикъл трябва да се обсъди предварително с Вашия лекар. В противен случай може да получите неочаквани резултати. Например, нормалното ниво на лутеинизиращия полов хормон при жените варира в зависимост от деня на цикъла:

• 1-12 дни - 2-14 mU / l;
• 12-14 дни - 24-150 mU / l;
• от 15 дни преди началото на нов цикъл - 2-17 mU / l.

Интерпретация на резултатите от ELISA

Анализът ви позволява да установите наличието в тялото на антитела от различни класове. Има 3 класа антитела:

Производството на тези антитела възниква на различни етапи от заболяването. IgM антителата са първите, които се произвеждат в тялото след инфекцията. Наличието им във всеки случай е индикатор за заболяването. При здрав човек този клас антитела отсъства.

Тези имуноглобулини присъстват в кръвния серум за около 5-6 седмици.

Наличието на имуноглобулини от клас G в кръвта показва, че човек вече е имал заболяването или е носител на инфекцията. Тези антитела започват да се произвеждат след антителата от клас М, при повечето заболявания, 3-4 седмици след инфекцията. Тяхното присъствие в тялото е възможно в продължение на няколко години. И при някои заболявания (например сифилис) IgG присъства в кръвта за цял живот.

Ако IgA присъства в тялото, е необходимо да се борите с инфекцията възможно най-интензивно. Антителата от този клас се появяват само в случай на хронично инфекциозно заболяване. Изчезването на IgA показва унищожаването на инфекцията.

Ако ELISA анализът се извършва при деца под 1,5 години, трябва да се вземе предвид следната характеристика: кръвта на детето съдържа IgG на майката към различни инфекции. Това не означава, че детето е болно. В този случай това е по-скоро норма. Наличието на IgM е доказателство за вътрематочна инфекция или инфекция, придобита след раждането. IgM на майката не може да премине през плацентата в тялото на бебето.

Таблицата показва възможните комбинации от наличието или отсъствието на антитела от 3 класа в тялото и тяхната интерпретация.

При дешифриране на анализите (+) показва положителен резултат, а (-) показва обратното, т.е. отрицателен. Резултатът, показващ наличието или отсъствието на някакво вещество в тялото, се нарича качествен. Може да се допълни с количествени. Количественият резултат показва количественото съдържание на различни вещества в тялото.

Трябва да се отбележи, че тестовите системи имат свои собствени, определени от производителя, референтни стойности, които характеризират индикаторите. Превишаването на референтните стойности, като правило, означава наличието на определени патологии в тялото на субекта.

След получаване на резултатите от ELISA, лекуващият лекар трябва да дешифрира получените стойности. Само той може да направи правилна оценка на резултатите и да определи стадия на заболяването.

Във връзка с