Kung direkta at hindi direktang pamamaraan. ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay: decoding


Ang ELISA o enzyme immunoassay ay tumutukoy sa mga serological na pag-aaral at idinisenyo upang makita at masuri ang mga pathological microorganism sa serum ng dugo.

Sa pamamagitan ng pagsusuri, iba't-ibang mga klase ng immunoglobulin sa bacteria: IgM- sa talamak na proseso ng pathological, at IgG sa yugto ng pagbawi, na sa ilang mga kaso ay nagpapatuloy sa buong buhay.

Sa pamamagitan ng enzyme immunoassay, ang mga sakit ng iba't ibang etiologies ay napansin:

Gayundin, ang ELISA ay ipinahiwatig para sa pag-diagnose ng syphilis kapag ang mga positibong resulta ay nakumpirma ng paraan ng RV, at pinapayagan kang subaybayan ang pagiging epektibo ng paggamot sa isang proseso ng pathological.

Ang enzyme immunoassay ay inireseta ayon sa mga indikasyon (kung ang impeksyon sa mga mikroorganismo ay pinaghihinalaang), ito ay sapilitan sa panahon ng pagbubuntis at bago ang mga operasyon ng kirurhiko upang makita ang karwahe ng iba't ibang bakterya.


Ang pamamaraan ng pagsusuri ay isinasagawa sa umaga sa isang walang laman na tiyan, ang materyal (dugo) ay kinuha mula sa isang ugat. Ang mga resulta ng diagnostic na pag-aaral ay inihanda hanggang 10 araw.

Positibong ELISA

Ang isang positibong resulta ng ELISA ay nakumpirma ng pagkakaroon ng IgG at IgM immunoglobulins. Nakita ang mga titer sa dugo Ang IgM ay palaging nagpapahiwatig ng sakit sa progresibong yugto, sa isang malusog na tao, wala ang mga antibodies na ito.

At ang IgG ay nagpapahiwatig ng isang nakaraang impeksiyon, o ang pagdadala ng mga pathogenic microorganism, ang ilan sa mga ito ay itinuturing sa maliit na dami bilang normal. Halimbawa, ang bacteria streptococci at staphylococci ay naroroon sa bawat katawan ng tao.

Syphilis

Ang mga antibodies ng IgM sa syphilis ay napansin mula sa 2 linggo pagkatapos ng impeksyon at nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang pangunahin, pangalawa o congenital na yugto, na may paggamot, nawawala sila pagkatapos ng mga anim na buwan, nang walang therapy - pagkatapos ng 18 buwan. Kung ang parehong uri ng immunoglobulins ay nakita sa parehong oras, ang syphilis sa talamak na yugto ay nakumpirma. Sa mga taong may sakit IgG antibodies sa syphilis manatili sa serum habang buhay.

Viral hepatitis

Ang IgM sa viral hepatitis ay madalas na napansin kahit na sa panahon ng pagpapapisa ng itlog ng sakit, bago lumitaw ang mga unang pagpapakita at nagpapatuloy sa kurso ng sakit, pagkatapos ng paggamot ay hindi sila napansin. Ang pagbubukod ay viral hepatitis C, kung saan ang IgM ay natutukoy kapwa sa aktibo at tago o talamak na yugto nito.

Ang mga antibodies ng IgG sa hepatitis A ay maaaring naroroon kahit sa mga malulusog na tao, na dahil sa isang impeksiyon o pagbaba ng kaligtasan sa sakit, at ang pagkakaroon ng IgG sa hepatitis B, C at D sa mga malulusog na tao ay hindi sinusunod.

CMVI

Ang CMVI ay ipinamamahagi halos lahat ng dako at hindi nagdudulot ng banta sa kalusugan ng publiko. Gayunpaman, nagdadala ito ng nakamamatay panganib sa bagong panganak at fetus sa panahon ng impeksyon sa intrauterine.

Ang pagtuklas ng IgM antibodies sa cytomegalovirus ay nagpapahiwatig ng pangunahing impeksyon o pag-activate ng latent phase. Ang mga titer ng IgG ay nananatili sa mga na-recover na tao sa loob ng 10 taon.

Herpes

Ang mga antibodies sa herpes virus sa mga malulusog na tao ay karaniwang wala. Ang nilalaman ng IgM ay nagpapahiwatig ng talamak na yugto ng sakit, ang IgG ay nagpapahiwatig ng nakatago (sa kasong ito, ang tao ay ang carrier ng impeksiyon). Sa nilalaman ng IgG sa herpes, dapat mong malaman na ang virus ay maaaring maging aktibo anumang oras mula sa isang nakatagong yugto hanggang sa isang progresibong yugto.

Bulutong

Sa bulutong-tubig at sa loob ng 2 taon pagkatapos ng paggamot, ang mga immunoglobulin ng klase ng IgM ay nananatili sa dugo. Karaniwan, sa malusog na mga tao, ang mga antibodies sa bulutong-tubig ay hindi nakikita.

Mga sakit na dulot ng staphylococci at streptococci

Ang lahat ng tao ay may mga immunoglobulin sa staphylococci at streptococci. Samakatuwid, posible na masuri ang isang pathological na proseso na dulot ng mga grupong ito ng bakterya sa pamamagitan ng pagsasagawa ng double enzyme immunoassay. Kung mayroong isang pagtaas sa mga titer na may paulit-ulit na ELISA (isang linggo pagkatapos ng una), kung gayon ang pagsusuri ay itinuturing na nakumpirma.

Chlamydia

Ang isang positibong resulta para sa chlamydia ay ipinahiwatig ng pagtuklas IgM titers 1:8 at sa itaas at klase IgG - 1:64 at sa itaas, na tumataas sa panahon ng kurso ng sakit at umabot sa mataas na halaga. Halimbawa, sa mga batang may chlamydial pneumonia, ang mga titer ay tumaas sa 1:2000 - 1:4000. Ang pagkakaroon ng IgM ay nagpapahiwatig ng aktibidad ng chlamydia, ilang oras pagkatapos ng impeksyon, ang mga IgG globulin ay napansin sa dugo.

Ang isang negatibong enzyme immunoassay ay ipinahiwatig ng walang IgM antibodies. Ang determinadong IgG ay hindi sa lahat ng kaso ay itinuturing na kumpirmasyon ng isang diagnostic na pag-aaral, kadalasang nagpapatuloy ang mga ito sa loob ng ilang taon pagkatapos ng impeksiyon, minsan habang buhay.

Pagkatapos ng syphilis, nakakahawang mononucleosis, immunoglobulins IgG manatili sa buong buhay at tinutukoy sa serum ng dugo. Sa loob ng 10 taon, nananatili ang mga microorganism ng CMVI, tigdas, rubella, toxoplasmosis.

Ang mga titulo sa amoebiasis ay nagpapatuloy mula sa ilang buwan hanggang ilang taon. Ang mga antibodies sa bakterya ng staphylococcus at streptococcus ay natutukoy sa ganap na lahat ng tao sa isang maliit na halaga.

Sa mga kaso sa itaas, ang pagtuklas ng mga immunoglobulin ng IgG pagkatapos ng mga nakaraang sakit ay nagpapahintulot sa amin na ituring ang mga resulta ng ELISA bilang negatibo.

Normal sa panahon ng pagbubuntis

Sa unang trimester ng pagbubuntis, ang bawat babae ay sumasailalim sa isang kumpletong pagsusuri sa katawan, na kinabibilangan ng enzyme immunoassay.

Ang mga pag-aaral sa toxoplasmosis, CMVI, chlamydia, herpes type 2 (genital), rubella, ureaplasma at mycoplasma ay sapilitan, dahil ang mga sakit na ito ay nagdudulot ng malubhang banta sa pag-unlad ng fetus. Nagagawa nilang tumagos sa katawan ng bata, na nilalampasan ang placental barrier.

At nagdudulot sila ng isang partikular na panganib sa panahon unang trimester ng pagbubuntis at halos palaging humahantong sa intrauterine fetal death at spontaneous miscarriage.

Ang problema ng mga sakit sa itaas ay madalas na nangyayari sa isang asymptomatic stage, nang walang nakikitang clinical manifestations, at posible na makilala ang mga ito sa pamamagitan lamang ng enzyme immunoassay.


Ang magagandang resulta ng pagsusuri ay masasabi kung ang mga microorganism sa serum ay hindi nakita. Ang tinutukoy na IgG ay nagpapahiwatig ng pagdadala ng mga virus at nangangailangan ng patuloy na pagsubaybay sa babae upang magbigay ng napapanahong therapy sa kaso ng biglaang paglala. positibong IgM nagpapahiwatig ng isang progresibong proseso ng pathological, at nangangailangan ng agarang pag-aalis ng pathogen.

Pagtukoy ng pamagat IgG para sa rubella ay nagpapahiwatig ng isang nakaraang sakit at ang pamantayan sa panahon ng pagbubuntis. IgG hanggang CMVI hindi rin magdulot ng partikular na banta sa fetus, gayunpaman, ang posibilidad ng exacerbation ay hindi ibinukod (dalas ng pagpapakita, humigit-kumulang 1-2%).

Ang isang partikular na banta ay ang pagkakaroon ng IgG sa herpes virus type 2 o genital (HSV2), dahil ang panganib ng exacerbation ay tumataas nang malaki sa panahon ng panganganak. Sa panahon ng gestational, ang saklaw ng talamak na yugto ay nangyayari sa 0.9% ng mga kaso. Ang pagkatalo ng fetus sa pamamagitan ng herpes virus sa panahon ng pagpasa ng genital tract ay nangyayari sa 40% ng mga kaso at humahantong sa kamatayan sa 50%.

Sa nakaraang toxoplasmosis, ang IgM ay maaaring magpatuloy hanggang 2 taon pagkatapos ng paggamot. Ang panganib ng impeksyon ng fetus sa kasong ito ay 17% sa unang trimester at tumataas sa 60% ng pangatlo, dahil ang pangunahing ruta ng impeksyon ay transplacental. Nabunyag IgG sa toxoplasmosis maraming mga eksperto ang may posibilidad na suriin ito bilang isang negatibong resulta, na halos hindi nagbabanta sa kurso ng pagbubuntis.

Ang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay isang pangkaraniwang pamamaraan para sa pagtuklas ng iba't ibang mga pathologies. Ang resulta ng isang pagsusuri sa dugo, ang pag-decode ng ELISA na kung saan ay binibigyang kahulugan ng isang doktor sa diagnostic ng laboratoryo, ay maaasahan sa karamihan ng mga kaso.

Ano ang ELISA

Ang ELISA ay isang modernong paraan ng diagnostic na ginagamit upang masuri ang mga impeksyon, hormonal at immune disorder, at oncological na sakit sa laboratoryo. Ang pamamaraan ay nagbibigay-daan upang makita ang mga antibodies sa impeksyon na nasa maagang yugto ng sakit. Ang pamamaraang ito ay kabilang sa mga hindi direktang pamamaraan ng diagnostic, dahil ipinapakita nito ang immune response ng katawan. Kabilang sa mga pakinabang ng ELISA kumpara sa iba pang mga diagnostic na pamamaraan, ang isang tao ay maaaring mag-isa ng isang mataas na antas ng paggawa, na binabawasan ang posibilidad ng mga pagkakamali. Ang pamamaraan ay lubos na sensitibo at ginagamit upang masuri ang mga sakit sa parehong mga bata at matatanda. Mayroong isang malawak na bilang ng iba't ibang mga pagbabago ng ELISA.

Ang pamamaraan ng ELISA ay batay sa pagtitiyak ng mga immunochemical na reaksyon, pati na rin ang mga physicochemical pattern ng mga reaksyon ng mga antigen-antibody complex. Ang mga reaksyon ay ginawa sa paglahok ng mga tiyak na enzyme, na mga label para sa pagtuklas ng mga antibodies. Bilang resulta ng isang immunochemical reaction, ang mahigpit na tinukoy na mga antibodies ay nagbubuklod sa mga kaukulang antigens. Ang isang pagsusuri sa dugo sa pamamagitan ng enzyme immunoassay ay halos maalis ang posibilidad na makakuha ng maling positibong resulta. Ang mga espesyalista sa diagnostic ng laboratoryo ay naghuhusga ng positibo o negatibong resulta batay sa kung ang solusyon ay nabahiran sa panahon ng enzymatic na indikasyon ng antigen-antibody complex. Kung ang solusyon ay may kulay, kung gayon ang antigen ay nakipag-ugnayan sa antibody, ang resulta ng ELISA ay positibo.

Anong mga sakit ang maaaring makita ng ELISA

Ang pag-aaral sa pamamagitan ng enzyme immunoassay ay nagbibigay-daan sa:

  • kilalanin ang isang bilang ng mga nakakahawang sakit;
  • pag-diagnose ng mga sakit na autoimmune;
  • upang makita ang pagkakaroon ng oncology;
  • makilala ang mga hormonal disorder;
  • gumawa ng iba pang pananaliksik.

Ang pagsusuri sa dugo ng ELISA ay nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang pagkakaroon ng mga sumusunod na impeksyon:

Ang pamamaraan ay ginagamit upang makita ang mga antigen ng mga pathogen ng isang bilang ng mga impeksyon, pati na rin upang makita ang mga antibodies ng iba't ibang klase. Ang pamamaraan ng ELISA ay nakakuha ng mahusay na katanyagan para sa pagtuklas ng syphilis, HIV, at viral hepatitis. Hindi inirerekomenda na matukoy ang presensya at antas ng mga antibodies sa serum ng dugo para sa layunin ng pangunahing pagsusuri ng mga STI. Sa kasong ito, ang pagkakaroon ng mga antibodies sa dugo ay maaari lamang maging isang senyales na ang katawan ng pasyente ay nakikipag-ugnayan sa nakakahawang ahente sa nakaraan.

Ang diagnosis ng iba't ibang mga sakit na autoimmune sa pamamagitan ng ELISA ay isinasagawa sa pamamagitan ng pag-aaral ng:

  • mga antinuklear na katawan;
  • antibodies sa double-stranded DNA;
  • antibodies sa mga natutunaw na nuclear antigens (ENA screen);
  • anticardiolipin antibodies;
  • IgG sa citrulline peptide;
  • rheumatoid factor;
  • C-reactive na protina;
  • autoantibodies sa cytoplasmic antigens ng neutrophils (ANCA screen).

Ang mga partikular na immune complex ay katangian ng ilang mga autoimmune na sakit. Halimbawa, ang double-stranded DNA antibodies ay katangian ng isang sakit tulad ng systemic lupus erythematosus.

Ang kahulugan ng mga sakit na oncological ay isinasagawa gamit ang isang enzyme-linked immunosorbent assay ng serum ng dugo para sa mga partikular na marker ng tumor, tulad ng PSA, CA-125.

Ang PSA ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng prostate adenoma at prostate cancer. Ang CA-125 ay isang tumor marker para sa ovarian cancer. Ang halaga ay tumataas din sa mga cancerous na tumor ng matris, mammary glands, endometrium.

Paghahanda para sa pagsusuri

Upang matiyak ang pinakamataas na katumpakan ng mga resulta, kailangan mong sundin ang ilang mga patakaran para sa paghahanda para sa pag-aaral. Ang pagtatasa para sa mga diagnostic ng laboratoryo ng ELISA, bilang panuntunan, ay kinukuha sa umaga mula sa cubital vein. Kinakailangang mag-abuloy ng dugo nang mahigpit sa walang laman na tiyan. Bilang karagdagan sa simpleng reseta na ito, ang mga sumusunod na rekomendasyon para sa paghahanda ay dapat sundin:

  • 24 na oras bago ang pag-aaral, kinakailangang ibukod ang alkohol at paninigarilyo;
  • maiwasan ang mabigat na pisikal na pagsusumikap;
  • manatiling kalmado;
  • maiwasan ang pag-igting ng nerbiyos;
  • mag-donate ng dugo para sa ELISA nang hindi mas maaga kaysa sa 10 araw pagkatapos ng pag-alis ng gamot;
  • sabihin sa iyong doktor kung umiinom ka ng anumang mga gamot na kailangan mo.

Bilang karagdagan, ilang araw bago ang pagsubok, inirerekomenda na sundin ang isang diyeta. Kasabay nito, ibukod ang mga mataba na pagkain, pritong pagkain mula sa diyeta. Bago ang pagsubok para sa viral hepatitis, ibukod mula sa diyeta hindi lamang mataba at pritong pagkain, kundi pati na rin ang mga prutas na sitrus, pati na rin ang mga orange na gulay.

Dapat pansinin na ang mga resulta ng isang tiyak na hanay ng mga pag-aaral sa hormonal ay naiimpluwensyahan ng isang kadahilanan tulad ng yugto ng panregla. Ang pangangailangan na kumuha ng pagsusuri sa isa o ibang yugto ng siklo ng panregla ay dapat na talakayin nang maaga sa iyong doktor. Kung hindi, maaari kang makakuha ng mga hindi inaasahang resulta. Halimbawa, ang normal na antas ng luteinizing sex hormone sa mga kababaihan ay nag-iiba depende sa araw ng cycle:

  • 1-12 araw - 2-14 mU / l;
  • 12-14 araw - 24-150 mU / l;
  • mula 15 araw bago magsimula ang isang bagong cycle - 2-17 mU / l.

Interpretasyon ng mga resulta ng ELISA

Pinapayagan ka ng pagsusuri na maitatag ang presensya sa katawan ng mga antibodies ng iba't ibang klase. Mayroong 3 klase ng antibodies:

Ang paggawa ng mga antibodies na ito ay nangyayari sa iba't ibang yugto ng sakit. Ang IgM antibodies ay ang unang ginawa sa katawan pagkatapos ng impeksyon. Ang kanilang presensya ay isang tagapagpahiwatig ng sakit sa anumang kaso. Sa isang malusog na tao, wala ang klase ng antibodies na ito.

Ang mga immunoglobulin na ito ay naroroon sa serum ng dugo para sa mga 5-6 na linggo.

Ang mga immunoglobulin ng Class G na nasa dugo ay nagpapahiwatig na ang isang tao ay mayroon nang sakit o isang carrier ng impeksyon. Ang mga antibodies na ito ay nagsisimulang makagawa pagkatapos ng mga antibodies ng klase M, sa karamihan ng mga sakit, 3-4 na linggo pagkatapos ng impeksyon. Ang kanilang presensya sa katawan ay posible sa loob ng ilang taon. At sa ilang mga sakit (halimbawa, syphilis), ang IgG ay naroroon sa dugo habang-buhay.

Kung ang IgA ay naroroon sa katawan, ito ay kinakailangan upang labanan ang impeksyon bilang intensive hangga't maaari. Ang mga antibodies ng klase na ito ay lilitaw lamang sa kaso ng isang talamak na nakakahawang sakit. Ang pagkawala ng IgA ay nagpapahiwatig ng pagkasira ng impeksiyon.

Kung ang pagsusuri sa ELISA ay isinasagawa sa mga batang wala pang 1.5 taong gulang, ang sumusunod na tampok ay dapat isaalang-alang: ang dugo ng bata ay naglalaman ng IgG ng ina sa iba't ibang mga impeksyon. Hindi ito nangangahulugan na ang bata ay may sakit. Sa kasong ito, ito ay sa halip ang pamantayan. Ang pagkakaroon ng IgM ay katibayan ng impeksyon sa intrauterine o impeksyon na nakuha pagkatapos ng kapanganakan. Ang IgM ng ina ay hindi maaaring tumawid sa inunan sa katawan ng sanggol.

Ipinapakita ng talahanayan ang mga posibleng kumbinasyon ng pagkakaroon o kawalan ng mga antibodies ng 3 klase sa katawan at ang kanilang interpretasyon.

Kapag nag-decipher ng mga pagsusuri, ang (+) ay nagpapahiwatig ng isang positibong resulta, at ang (-) ay nagpapahiwatig ng kabaligtaran, iyon ay, isang negatibo. Ang resulta, na nagpapakita ng presensya o kawalan ng anumang sangkap sa katawan, ay tinatawag na qualitative. Maaari itong dagdagan ng quantitative. Ipinapakita ng quantitative na resulta ang quantitative na nilalaman ng iba't ibang substance sa katawan.

Dapat pansinin na ang mga sistema ng pagsubok ay may sariling, na tinukoy ng tagagawa, mga halaga ng sanggunian na nagpapakilala sa mga tagapagpahiwatig. Ang paglampas sa mga halaga ng sanggunian, bilang panuntunan, ay nangangahulugan ng pagkakaroon ng ilang mga pathologies sa katawan ng paksa.

Matapos matanggap ang mga resulta ng ELISA, dapat na maunawaan ng dumadating na manggagamot ang mga nakuhang halaga. Siya lamang ang makakagawa ng tamang pagtatasa ng mga resulta at matukoy ang yugto ng sakit.

Sa pakikipag-ugnayan sa

Sa modernong mga diagnostic ng laboratoryo ng mga nakakahawang sakit, ang paraan ng enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), batay sa pagtuklas ng mga tiyak na antibodies na katangian ng mga pathogen, ay natagpuan ang malawak na aplikasyon.

Ano ang kakanyahan ng pamamaraan?

Upang maunawaan ito, dapat malaman ng isa kung paano gumagana ang immune system ng tao, kung ano ang isang antigen, antibodies, kung ano ang mga function na ginagawa nila.

  • Ang isang antigen sa ating katawan ay isang molekula na partikular na nagbubuklod sa isang antibody. Nagdadala ito ng ilang impormasyon tungkol sa cell.
  • Kapag ang isang dayuhang antigen ay pumasok sa daloy ng dugo, ang mga antibodies (immunoglobulins Ig) ay nagsisimulang gumawa, na kinikilala ito at naghahangad na sirain ito.
  • Ang pakikipag-ugnayan na ito ay tinatawag na immune complex, kung saan nakabatay ang ELISA diagnostic method.
  • Pinapayagan ka ng pagsusuri na matukoy ang antas ng mga hormone, immunoglobulin, immunological complex at iba pang biologically active substance, kaya mahalaga para sa mga kumplikadong diagnostic.

Sino ang nasuri?

Ang espesyalista ay maaaring magreseta ng isang pag-aaral para sa layunin ng:

Kung ikukumpara sa iba pang mga pamamaraan ng pananaliksik, ang ELISA ay may ilang mga pakinabang:

Itanong ang iyong tanong sa doktor ng mga diagnostic ng klinikal na laboratoryo

Anna Poniaeva. Nagtapos siya sa Nizhny Novgorod Medical Academy (2007-2014) at residency sa clinical laboratory diagnostics (2014-2016).

Kabilang sa mga pagkukulang ay mapapansin posibleng hindi kawastuhan ng pag-decode. Minsan ang pagsusuri ay nagpapakita ng maling negatibo o maling positibong resulta, lalo na sa hindi tamang paghahanda o paglabag sa pamamaraan ng pagpapatupad.

Paano ito ginagawa?

Ang pamamaraan ay hindi naiiba sa pagkuha ng materyal para sa.

  • Pagkatapos ng appointment ng pagsusuri, ang pasyente ay ipinadala sa laboratoryo para sa venous blood sampling. Ang pamamaraan ay isinasagawa sa umaga sa isang walang laman na tiyan.
  • Ang materyal ay ipinadala sa laboratoryo, kung saan ang serum ay nakuha mula sa dugo, kung saan matatagpuan ang mga antibodies.
  • Ang serum ay inilalagay sa mga test tube na may mga hanay ng mga antigens. Sa pagsasagawa, maraming mga ganoong hanay. Ang mga ito ay maaaring iba't ibang allergens (pollen, lana, citrus fruits, gatas, at iba pa), mga pathogen ng mga nakakahawang sakit at viral, at iba pa.
  • Matapos makuha ang reaksyon, ang natitirang serum ay pinatuyo. Ang dami ng antibodies ay tinutukoy gamit ang mga espesyal na tagapagpahiwatig.

Pagsusuri ng oras ng produksyon

Ang deadline ay depende sa partikular na laboratoryo. Ang ilang mga laboratoryo ay nagbibigay resulta sa loob ng 1-2 araw, ang iba sa loob ng 1 linggo. Ang mga pagkaantala ay maaaring dahil sa akumulasyon ng isang tiyak na halaga ng sera.

Paghahanda sa pag-aaral

Bago ipasa ang pagsusuri, dapat mong sundin ang mga simpleng patakaran ng paghahanda:

  • Iwasan ang pag-inom ng anumang mga gamot sa bisperas ng pagsusuri. Kung hindi ito posible, siguraduhing ipaalam sa doktor na nagrereseta ng diagnosis. Ang partikular na atensyon ay binabayaran sa mga gamot sa allergy. Kung ang pasyente ay umiinom ng antihistamines, dapat kang kumunsulta sa iyong doktor tungkol sa kung gaano katagal bago magsimula ang pag-aaral kailangan mong kanselahin ang mga ito. Nalalapat din ito sa ilang mga gamot sa thyroid. Kung hindi man, ang konsentrasyon ng TSH ay maaaring matukoy nang hindi tama at ang resulta ng pamantayan at patolohiya ay makukuha nang hindi tama. Bilang isang patakaran, normal na antibacterial, antiviral, ang mga antihistamine ay huminto sa pag-inom 10-16 araw bago ang diagnosis.
  • Kinukuha ang dugo mahigpit na walang laman ang tiyan. Ang huling pagkain ay karaniwang dapat na 8-12 oras bago ang paglalakbay sa laboratoryo.
  • Hindi ka maaaring uminom ng mga inuming nakalalasing at manigarilyo, kung hindi, makakaapekto ito sa rate ng mga resulta.
  • Anumang mga kadahilanan ng stress, pisikal na aktibidad ay dapat na hindi kasama. Siguraduhing matulog ng maayos.

Lahat ng kailangan mong malaman tungkol sa pagsusuri gamit ang halimbawa ng isa sa mga laboratoryo

Ano ang maaaring makaapekto sa mga resulta?

Ang pagsusuri sa ELISA ay isang medyo tumpak na pamamaraan ng pananaliksik. Ang mga error ay nangyayari sa mga sumusunod na kaso:

  • paglabag sa pamamaraan para sa pagkuha ng materyal;
  • sa kaso ng hindi tamang transportasyon at imbakan ng materyal;
  • habang umiinom ng ilang mga gamot (mga gamot sa thyroid, halimbawa, na maaaring makaapekto sa konsentrasyon ng TSH);
  • sa pagkakaroon ng mga nakatagong sakit (kabilang ang mga STD, chlamydia, halimbawa), metabolic disorder, immunodeficiency;
  • sa panahon ng neonatal, kapag ang maternal antibodies ay karaniwang naroroon sa katawan.

Pag-decode, mga kahulugan (mga pamantayan at patolohiya)

Kapag handa na ang pagsusuri, ang pasyente ay makakatanggap ng isang form, na nagpapahiwatig ng negatibo (-) at positibo (+) na mga resulta ng bawat klase ng immunoglobulins. Ang interpretasyon ay maaaring:

  • Ang pagbawi ng pasyente ay ipinahiwatig negatibong resulta ng IgM, nang walang pagpapasiya ng IgA, IgG.
  • Ang talamak na nakakahawang sakit ay nangangahulugan ng pag-decode: (-) IgM at negatibo, positibong IgG, IgA.
  • Ang kawalan ng isang proteksiyon na reaksyon sa mga impeksyon ay ipinahiwatig ng (-) mga halaga ng IgM, IgG, IgA.
  • Ang talamak na impeksyon ay natukoy na may negatibo o positibong IgG at IgA, (+) IgM.
  • Post-infection immunity na may (-) IgM, IgA at positibong IgG.
  • Paglala ng isang malalang sakit - (+) mga tagapagpahiwatig ng IgM, IgG, IgA.

Visual na pagpapakita ng pagsusuri sa ELISA

saan gagawin?

Ang pagsusuri sa dugo gamit ang pamamaraang IF ay itinuturing na isang popular na diagnostic at inaalok ng iba't ibang mga laboratoryo at klinika sa lungsod.

Sa Moscow, maaaring gawin ang pagsusuri ng ELISA:

  • sa Nearmedic laboratory,
  • Invitro,
  • royal clinic,
  • deltaclinic,
  • LDC Kutuzovsky,
  • MedCenterService,
  • mga onclinic network,
  • himalang doktor,
  • doktor ng pamilya,
  • K+31,
  • OOO Medisina at iba pa.

Sa St. Petersburg, ang pagsusuri ng ELISA ay isinasagawa

  • sa Madis,
  • American Medical Clinic,
  • Klinika ni Dr. Filatov,
  • medem,
  • Klinika ni Dr. Pel,
  • Leka-Pharm,
  • hilig,
  • Express at iba pa.

Napaka-kapaki-pakinabang na pelikulang pang-edukasyon tungkol sa pagsusuri ng ELISA

Gastos sa pananaliksik

Binubuo ito ng bilang ng mga kinakailangang marker. Ang mas maraming marker, mas mataas ang presyo.

Ang presyo para sa pagpapasiya ng antibodies sa

  • cytomegalovirus Igm / IgG ay nag-iiba sa pagitan ng 350-700 rubles,
  • sa mycoplasma 340-520 rubles,
  • sa candida 320-450 rubles,
  • Anti-Chlamydia tr. IgA + Anti-Chlamydia tr. IgG 1000-1300,
  • antibodies ng klase ng IgM sa Chlamydia 500-600 rubles, atbp.
  • Ang average na sampling ng dugo ay 150-250 rubles.

Ang ilang mga klinika at laboratoryo ay nagbibigay ng serbisyo ng pagpapadala ng mga resulta sa pamamagitan ng e-mail. Ang serbisyo ay libre.

Ang diagnosis ng ELISA ay tumatagal espesyal na lugar sa pagsusuri ng mga sakit.

Ito ay nailalarawan malawak na spectrum ng pagkilos, bilis at kaginhawaan ng pagsasagawa, mataas na katumpakan ng mga resulta, katanggap-tanggap na gastos. Ito ay hinihiling, samakatuwid ito ay magagamit sa iba't ibang mga klinika at laboratoryo ng lungsod.

Ang diagnostic method (ELISA) ay nagbibigay-kaalaman at hindi masyadong mahal, kaya maraming mga laboratoryo ang nag-aalok sa kanilang mga kliyente ng ganitong paraan (enzyme-linked immunosorbent assay). Ang pag-aaral ay isinasagawa sa isang walang laman na tiyan, ang dugo para sa pagsusuri ay kinuha mula sa cubital vein ng pasyente. Bago ang ELISA, ipinapayong huwag manigarilyo o uminom ng alak.

Ano ang ELISA blood test?

Kabilang sa mga pamamaraan ng pagsusuri ng dugo na nagpapahintulot sa pagtatasa ng kakayahan ng katawan na labanan ang mga nakakahawang sakit at pagpapakita ng yugto ng sakit, isang mahalagang lugar ang inookupahan ng enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Ang pagsasagawa ng pag-aaral na ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang komprehensibong masuri ang aktibidad ng proteksiyon na pag-andar ng dugo at kilalanin ang estado ng immunodeficiency sa mga nakakahawang pathologies, pati na rin ang mga sakit sa dugo, mga proseso ng autoimmune, at mga problema sa hormonal.

Ito ay isang pagsubok sa laboratoryo na nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang pagkakaroon ng mga tiyak na antibodies (proteksiyon na mga kadahilanan ng dugo ng isang likas na protina) sa ilang mga antigens (mga ahente ng pathogen). Kabilang sa mga antibodies na pinakamahalaga ay ang mga immunoglobulin, na maaaring umiral sa anyo ng mga immunocomplex.

Ang mga immunoglobulin ay ginawa bilang isang resulta ng mga kumplikadong neurohumoral na reaksyon ng kaligtasan sa tao na lumitaw bilang isang tugon sa pagpapakilala ng mga dayuhang antigens. Ang bawat uri ng pathogen ay gumagawa ng sarili nitong mga tiyak na antibodies. Ang mga ito ay kumikilos sa pamamagitan ng "pagbubuklod" ng isang antigen o isang pathological microorganism, na bumubuo ng isang "antigen-antibody" complex compound, na sinusundan ng neutralization, enzymatic lysis, mga reaksyon ng phagocytosis at paglabas mula sa katawan. Ito ay sa pamamagitan ng pagkakaroon ng ilang mga complexes na ang ELISA method tinutukoy ang uri ng pathogen o nakakapinsalang sangkap na nasa pasyente.

Ito ay nagkakahalaga ng pag-alala na pagkatapos ng kurso ng paggamot, ang mga antibodies ay maaaring manatili sa ating katawan sa napakatagal na panahon, kahit na ang impeksyon ay umalis sa ating katawan, i.e. ang tinatawag na "serological scar" ay nananatili. Upang magbigay ng isang halimbawa: mayroong libu-libong bituin sa kalangitan sa gabi. Marami sa mga bituin na ito ay matagal nang namatay, ngunit ang kanilang liwanag ay sumisikat pa rin sa atin sa loob ng maraming siglo. Kung tutuusin, bakas lang ng bituin ang nakikita natin. May liwanag, ngunit ang mga bituin ay matagal nang nawala.

Ngunit kung walang ilaw, hindi ito nangangahulugan na wala ang bituin. Totoo rin ito sa mga antibodies. Ang kanilang presensya ay hindi ginagarantiyahan ang pagkakaroon ng ninanais na nakakahawang ahente sa katawan. Ang kawalan ng antibodies ay hindi nangangahulugan na walang impeksyon. Kung ang resulta ng pagsusuri ng ELISA ay positibo, nangangahulugan ito na kailangan mong maghanap ng impeksyon na may mas tiyak at mahal na mga pamamaraan - PCR, bacteriological culture. Posible ang isang maling positibong resulta kung ang ilang mga mikrobyo ay may katulad na antigenic na istraktura, pagkatapos ay ang "katulad" na mga antibodies ay gagawin sa iba't ibang mga mikrobyo.

Ano ang mga immunoglobulin

5 pangunahing klase ng immunoglobulins ang natuklasan at pinag-aralan - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. ang papel ng iba ay hindi pa ganap na naipaliwanag at sila ay nasa yugto ng siyentipikong pananaliksik.

Ang pangunahing gawain ng immunoglobulin A (IgA) ay ang mga proteksiyon na pag-andar ng mauhog lamad ng respiratory tract, gastrointestinal tract at urinary system. Sa isang talamak na pagsisimula ng sakit, imposibleng makilala ang mga ito. Ang mga proteksiyon na complex na ito ay lilitaw lamang mula sa ika-2 linggo ng pagsisimula ng sakit, minsan mamaya. Ang bulk ng immunoglobulin A ay puro sa mga mucous tissue. Humigit-kumulang 80%. Ang natitirang mga antibodies ay umiikot sa dugo.

Ang pangunahing pag-andar ay ang neutralisasyon at pagkasira ng mga microorganism. Matapos ang mga talamak na pagpapakita ng sakit ay humupa, ang halaga ng mga immunoglobulin na ito ay nagsisimulang bumaba at ganap na nawawala hanggang sa 8 linggo pagkatapos ng simula ng sakit. Kung ang IgA ay napansin sa ibang araw, kung gayon ito ay nagpapahiwatig ng isang talamak na proseso.

Ang pangunahing at unang mga marker ng talamak na yugto ng pagbuo ng patolohiya ay class M immunoglobulins (IgM). Ang mga ito ay matatagpuan sa ika-5 araw ng simula ng karamdaman. Maaari mong matukoy ang kanilang presensya sa dugo para sa mga 6 na linggo. Pagkatapos ay nagsisimula silang mawala nang mabilis.

Ang natitirang immune response ay nagpapakilala sa pagkakaroon ng class G immunoglobulins (IgG) sa dugo. Ang hitsura ng mga salik na ito sa dugo ay napansin humigit-kumulang isang buwan pagkatapos ng pagsisimula ng sakit. Sa hinaharap, maaari silang matukoy sa loob ng maraming buwan, taon, at kahit isang buhay, na gumaganap ng isang proteksiyon na function laban sa pagbabalik (pagbabalik) ng sakit, at sa ilang mga kaso na ginagawang imposible para sa pangalawang pag-unlad ng patolohiya.

Kung ang halaga ng immunoglobulin G ay nagsimulang tumaas muli, kung gayon ang muling impeksyon ay maaaring pinaghihinalaan. Ang isang katulad na konklusyon ay maaaring iguguhit sa pamamagitan ng pagsasagawa ng dalawa o tatlong sample na kinuha na may pagitan ng 2 linggo.

Paano isinasagawa ang ELISA ng dugo?

Para sa enzyme-linked immunosorbent assay, sa karamihan ng mga kaso, ang dugo ng mga pasyente ay ginagamit, minsan ang vitreous tissue, spinal canal fluid, at amniotic fluid ay kinukuha.

Ang dugo ay iginuhit sa pamamagitan ng isang injection needle sa isang syringe mula sa cubital vein. Ang pag-aaral ay isinasagawa sa walang laman na tiyan. Dapat tandaan na ang pagkuha ng ilang mga gamot ay maaaring makaapekto sa resulta ng pagsusuri. Bago mag-donate ng dugo, dapat mong pigilin ang paninigarilyo, pag-inom ng alak. Ang paggamit ng mga narcotic substance ay maaaring masira ang mga resulta.

Sa kaso ng mga negatibong halaga ng immunoglobulins IgM, IgG, IgA, maaari nating pag-usapan ang kawalan ng sakit o ang paunang yugto nito, at ang resulta na may mga minus ay posible rin sa kumpletong pagbawi pagkatapos ng isang makabuluhang tagal ng oras.

Kung ang IgA at IgM ay hindi nakita, at ang IgG ay positibo, kung gayon sa lahat ng posibilidad ay pinag-uusapan natin ang nabuong kaligtasan sa sakit pagkatapos ng isang nakakahawang sakit, o pagkatapos ng pagbabakuna.

Kung ang IgA at IgM ay hindi nakita, at ang IgG ay positibo, kung gayon sa lahat ng posibilidad ay pinag-uusapan natin ang nabuong kaligtasan sa sakit pagkatapos ng isang nakakahawang sakit, o pagkatapos ng pagbabakuna.

Sa kaso ng isang mataas na titer ng IgM na may negatibong mga halaga ng IgG, IgA, maaari itong tapusin na mayroong isang talamak na nakakahawang sakit.

Ang sabay-sabay na mga positibong halaga ng mga resulta ng immunoglobulins - IgA, IgM, IgG ay katangian ng talamak na yugto ng pag-ulit ng isang umiiral na malalang sakit.

Ano ang ibinibigay ng ipinakita na teknolohiya: pagpapasiya ng pagkakaroon ng mga helminth sa dugo; naghahanap ng iba pang mga pathogens sa katawan; maaari mong malaman ang mga dahilan para sa pagkasira ng iyong kalusugan; ang paggamot ay batay din sa mga pagsusuri na nakuha sa ganitong paraan; maaari mong subaybayan ang estado ng iyong immune system.

Ang isa pang magandang tampok ay ang kakayahang subaybayan ang mga oncological marker, anuman ang kanilang pinagmulan, ngunit napapailalim sa kanilang presensya sa katawan, siyempre. Ang pagsusulit na ito ay angkop din para sa paglalarawan ng estado ng sistema ng reproduktibo ng tao. Ang pagkakaroon ng ilang mga protina, hormones at peptides ay ginagawang posible upang hatulan ang potensyal ng isang kapareha sa mga tuntunin ng paglilihi ng isang bata, pati na rin ang inaasahang kalidad ng hinaharap na fetus.

Ang pagsusuri ng dugo para sa Giardia ay isang medyo popular na kasanayan sa mga modernong doktor. Bilang karagdagan, ang paraan ng pananaliksik na ito ay isang mahusay na tool para sa biomedical analytics at quantitative statistics sa mga tuntunin ng mga partikular na antigens.

Paano ginagamit ang ELISA?

Totoo, ang mga ito ay mas kumplikadong mga kaso, kaya ang kalidad ng naturang pagsusuri ay lubos na nakasalalay sa mga manggagawa ng laboratoryo na nagsasagawa ng pagsubok. Mga tampok ng teknolohiya at pagkakaiba nito mula sa lumang pananaliksik sa laboratoryo:

  • ngayon, sa halip na isang sample ng dumi, ang dugo ay ginagamit upang matukoy ang pagkakaroon ng helminths;
  • ang pag-aaral ng sample ay isinasagawa sa laboratoryo nang napakabilis, sa susunod na araw makakakuha ka ng kumpletong impormasyon;
  • ang halaga ng pananaliksik sa laboratoryo ay mura, dahil ang teolohiya ay napakasimple;
  • ang pagsusuri ng dugo para sa mga helminth ay nagbibigay ng mataas na mga rate ng katumpakan.

Pagsusuri sa immunological analysis ng dugo sa pamamagitan ng ELISA

Ilang tao ang nakakaalam tungkol sa kung ano ang mga pagsusuri sa dugo mula sa pananaw ng sistema ng immunological ng tao, dahil ang mga pagsusuring ito ay hindi pangkaraniwan. Bilang isang patakaran, ang naturang pagsusuri sa dugo ay nagbibigay ng impormasyon tungkol sa immunodeficiency virus sa katawan ng tao at hindi nagpapakilala, dahil ito ay isinasagawa sa kahilingan ng pasyente.

Para sa sampling, ang dugo na kinuha sa isang walang laman na tiyan mula sa isang ugat ay ginagamit, kung saan ang serum ay nakuha para sa pagsusuri sa pamamagitan ng centrifugation. Bilang karagdagan, ang pag-aaral ng serum ng dugo ay maaaring magbunyag ng isang bilang ng mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik (syphilis, herpes, chlamydia), pati na rin ang lahat ng uri ng hepatitis, tigdas, rubella, beke at toxoplasmosis.

Karaniwan, para sa pagsasagawa ng pagsusuri sa ELISA, ang biological na materyal na pinag-aaralan ay dugo, gayunpaman, ang cerebrospinal fluid, ang mga nilalaman ng vitreous body, amniotic fluid, atbp.

Ang mga immunoglobulin ay mga immune molecule na maaaring magbigkis at mag-neutralize sa karamihan ng mga nakakahawang ahente at lason sa katawan. Sa kasong ito, ang pinakamahalagang katangian ng mga immunoglobulin ay ang kanilang pagtitiyak, iyon ay, ang kakayahang magbigkis sa isang tiyak na antigen. Ito ang ari-arian na ginagamit upang magsagawa ng pagsusuri ng dugo para sa immunoglobulin.

Mayroong limang uri ng immunoglobulins, ngunit ang pinaka-pinag-aralan ay immunoglobulins A, M, at G. Immunoglobulins M at G ay aktibo sa dugo. Ang mga immunoglobulin A ay isang uri ng hadlang sa ibabaw ng mga mucous membrane, dahil naroroon sila sa maraming dami.

Ang isang immunological na pagsusuri sa dugo ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang uri ng mga immunoglobulin, salamat dito, pinapayagan ka ng ELISA hindi lamang upang masuri ang sakit, kundi pati na rin upang matukoy ang yugto ng sakit na ito at subaybayan ang dinamika ng sakit:

  • sa unang 2 linggo ng sakit, ang mga immunoglobulin A lamang ang nakita;
  • mula sa ika-2 hanggang ika-3 linggo ng sakit, ang mga immunoglobulin A at M ay napansin sa dugo;
  • Cc3 sa loob ng 4 na linggo, tinutukoy ng pagsusuri sa dugo para sa immunoglobulin ang lahat ng tatlong uri;
  • kapag bumabawi, ang mga immunoglobulin M ay nawawala sa dugo, at ang halaga ng A at G ay bumababa ng 2-4 na beses;
  • sa pagkakaroon ng isang malalang proseso, ang mga immunoglobulin G ay kinakailangang naroroon sa dugo, ang mga immunoglobulin M ay wala, ang mga immunoglobulin A ay maaaring naroroon o maaaring wala.

Saklaw ng immunological blood test ng ELISA

  • Diagnosis ng mga sakit na viral: hepatitis, herpes, Epstein-Barr virus, cytomegalovirus, atbp.;
  • mga impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik: chlamydia, gonorrhea, trichomonas, mycoplasma, ureaplasma;
  • syphilis; endocrinology (pagpapasiya ng mga antas ng hormone);
  • mga marker ng tumor (pag-diagnose ng mga sakit na oncological); immunology (pag-diagnose ng immunodeficiency);
  • allergology (diagnosis at paggamot ng mga allergy).

Ang isang serological blood test ay isang paraan ng laboratoryo para sa pagsusuri ng dugo, na ginagamit upang masuri ang mga nakakahawang sakit at matukoy ang yugto ng nakakahawang proseso. Ang serological reaksyon ay batay sa pakikipag-ugnayan ng mga antibodies at antigens.

Ang pagtukoy ng mga antigen ay ginagamit upang matukoy ang genus at species ng mga microorganism. Ang paraan ng pananaliksik na ito ay ginagamit sa urology at venereology. Ang dugo para sa isang serological blood test ay kinukuha sa umaga sa walang laman na tiyan mula sa isang ugat.

Mga indikasyon para sa reseta at mga sakit na nakita ng ELISA

Ang pangunahing biomaterial para sa ELISA ay serum ng dugo: sa laboratoryo, ang isang sample ng dugo ay kinuha mula sa isang pasyente mula sa isang ugat, kung saan ang mga unipormeng elemento ay kasunod na inalis na nagpapahirap sa pagsusuri. Sa ilang iba pang mga kaso, ang cerebrospinal fluid, amniotic fluid, mucosal swabs, atbp ay ginagamit para sa pagsusuri.

Upang maiwasan ang mga pagbaluktot sa mga resulta, inirerekumenda na mag-abuloy ng dugo nang walang laman ang tiyan, at dalawang linggo bago ang pag-aaral (kung ang layunin ay mag-diagnose ng talamak, nakatagong mga nakakahawang sakit), kinakailangan na huminto sa pag-inom ng mga antibiotic at antiviral na gamot. Imposibleng masakop ang kumpletong listahan ng mga indikasyon para sa ELISA.

Ang hindi mapag-aalinlanganang mga bentahe ng ELISA ay ang mataas na sensitivity at pagtitiyak ng pamamaraan. Ang pagiging sensitibo ay ang kakayahang makilala ang nais na sangkap, kahit na mababa ang konsentrasyon nito sa sample. Ang katiyakan, sa kabilang banda, ay nagpapahiwatig ng katumpakan ng diagnosis: kung ang resulta ay positibo, nangangahulugan ito na eksakto ang antibody o antigen na dapat na matagpuan, at hindi ang iba.

Ang ELISA ay higit na pinalitan ang "pamantayan ng ginto" ng microbiology - isang bacteriological diagnostic na pamamaraan, kung saan, upang makilala ang pathogen, kinakailangan na ihiwalay ito mula sa katawan, at pagkatapos ay palaguin ang kultura sa isang nutrient medium sa isang test tube sa ilang mga araw.

Sa lahat ng oras habang isinasagawa ang pagsusuri, ang mga doktor ay pinilit na tratuhin ang pasyente nang "bulag", paghula tungkol sa pinagmulan ng mikroorganismo sa pamamagitan ng mga sintomas ng sakit. Ang pagpapasiya ng IgM gamit ang ELISA ay nagpapahintulot sa iyo na gumawa ng tumpak na diagnosis na sa mga unang araw ng sakit.

Ang mataas na antas ng paggawa ng enzyme immunoassay ay nagpapaliit sa impluwensya ng kadahilanan ng tao, na binabawasan ang posibilidad ng pagkakamali. Karamihan sa mga sistema ng pagsubok at ELISA reagents na ginagamit sa mga modernong laboratoryo ay ginawa sa mga kondisyong pang-industriya, na ginagarantiyahan ang isang tumpak na resulta.

Mga disadvantages ng ELISA method

Sa kasamaang palad, upang magsagawa ng ELISA, kailangan mong malaman kung ano ang hahanapin: ang pamamaraan ng pagsusuri ay nagpapahiwatig na ang doktor ay may palagay tungkol sa likas na katangian ng sakit nang maaga. Samakatuwid, walang saysay na magreseta ng gayong pagsubok sa pag-asa na hindi sinasadyang "hulaan" ang diagnosis.

Sa kaso ng pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit, hindi mahanap ng enzyme immunoassay ang pathogen at matukoy ang mga partikular na katangian nito: ipinapahiwatig lamang nito ang pagkakaroon ng mga antibodies sa dugo ng pasyente, na hindi direktang nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang dayuhang microorganism sa katawan ng tao. Ang ELISA ay isang napakatumpak, ngunit hindi murang paraan, kaya kailangan mong gamitin ito nang matalino, at dapat bigyang-kahulugan ng isang kwalipikadong doktor ang mga resulta.

Mga posibleng resulta ng ELISA

Depende sa nilalaman ng pagsusuri, ang form ay maaaring magpakita ng data sa anyo ng isang talahanayan na naglilista ng lahat ng antibodies o antigens na may negatibo o positibong mga marka ng reaksyon, o ang quantitative na halaga ng resulta (negatibo, mahinang positibo, positibo o malakas na positibo) ay ipahiwatig.

Tinutukoy ng huling opsyon kung gaano karaming mga antibodies ang nakapaloob sa nasuri na sample. Ang isa pang quantitative indicator ay ang antibody avidity index, na ipinahayag bilang isang porsyento. Ipinapahiwatig nito kung gaano karaming oras ang lumipas mula noong simula ng nakakahawang proseso (mas mataas ang index, mas marami).

Ngayon, libu-libong uri ng mga sistema ng pagsubok ng ELISA ang ginawa na nagpapahintulot sa pagtuklas ng mga tiyak na antibodies at antigens sa iba't ibang mga pathologies. Samakatuwid, ang pagsusuri na ito ay ginagamit sa halos lahat ng mga medikal na sangay. Ang diagnosis na ginawa sa tulong ng ELISA ay isang garantiya ng appointment ng sapat na therapy at epektibong paggamot ng sakit.

Kung mayroon kang mga kinakailangang reagents at mahusay na organisasyon ng laboratoryo, matatanggap mo ang resulta ng pagsusuri sa loob ng 1-2 araw pagkatapos ng sampling ng dugo. Sa ilang mga kaso, kung kailangan mo ng agarang tugon, ang panahong ito ay maaaring bawasan sa 2-3 oras.

Kasama sa listahan ng mga karaniwang diagnostic measure na ginagamit para sa mga nakakahawang sakit ang enzyme immunoassay. Kung positibo ang ELISA para sa syphilis, huwag agad mag-panic.

Isaalang-alang natin nang mas detalyado ang mga tampok ng pamamaraan ng pananaliksik na ito at ang mga prinsipyo para sa pag-decipher ng mga resulta na nakuha sa iba't ibang kategorya ng mga pasyente.

Ang enzyme immunoassay ay isa sa mga pinakakaraniwang pamamaraan para sa pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit. Ito ay kabilang sa kategorya ng mga pagsusuri sa treponemal, iyon ay, maaari itong magamit upang matukoy ang presensya sa katawan ng pasyente ng causative agent ng syphilis - maputlang treponema.

Sa pamamagitan ng ELISA, ang syphilis ay nakita dahil sa pagtuklas ng mga antibodies sa treponema. Ang mga ito ay nakapaloob sa dugo ng pasyente, at ang kanilang uri at halaga ay nakasalalay sa yugto at anyo ng sakit, na nagpapahintulot sa iyo na makakuha ng mahalagang impormasyon tungkol sa kasalukuyang kalagayan ng kalusugan ng tao.

Mga kalamangan at kahinaan

Ang ELISA ay madalas na inireseta para sa pinaghihinalaang syphilis o iba pang mga nakakahawang sakit. Ito ay dahil sa ang katunayan na ang pagsusuri ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang eksaktong uri at yugto ng sakit, at ang pagiging maaasahan nito ay nananatili sa isang mataas na antas - ang posibilidad ng pagkakamali batay sa mga resulta ng maraming pag-aaral ay 1% lamang, ang pangunahing ELISA ay may katumpakan na halos 90%.

Ang paggamit ng mga de-kalidad na reagents at modernong kagamitan ay nagpapahintulot sa amin na i-maximize ang katumpakan ng mga indicator.

Sa pangkalahatan, ang mga pakinabang ng pamamaraan ay:

  1. Mataas na katumpakan ng resulta. Napakaliit ng posibilidad na makatanggap ng maling data.
  2. Pagbabawas ng kadahilanan ng impluwensya ng tao. Ang mga modernong kagamitan para sa pagsasagawa ng ELISA ay hindi kasama ang impluwensya ng tao sa mga resulta ng pag-aaral dahil sa automation ng proseso.
  3. Pagtuklas ng mga tiyak na antibodies. Imposibleng malito ang mga antigen ng isang uri sa iba, kaya ang pagsusuri ay nagpapakita ng isang tumpak na resulta para sa isang tiyak na diagnosis.
  4. Pag-aayos ng pinakamaliit na paglihis mula sa pamantayan. Kahit na ang pinakamaliit na konsentrasyon ng mga ahente ng pathological ay hindi mapapansin.

Huwag kalimutan ang tungkol sa mga kahinaan ng pamamaraang ito. Ang ELISA ay may mga sumusunod na disadvantages:

  1. Mataas na presyo. Ang mataas na gastos ay dahil sa maraming mga kadahilanan, sa partikular, ang pangangailangan para sa mahusay na kagamitan, mataas na kalidad na reagents at mga espesyalista na may sapat na antas ng pagsasanay.
  2. Ang pangangailangan para sa isang paunang pagsusuri. Kailangan mong malaman kung aling mga antigen ang hahanapin, dahil walang karagdagang data imposibleng makagawa ng tumpak na diagnosis.
  3. Ang posibilidad ng isang maling positibong resulta. Maaaring i-distort ng ilang kundisyon ng katawan at iba pang salik ang huling data.

Mga indikasyon para sa pagsasagawa

Ang doktor ay maaaring magreseta ng enzyme immunoassay upang masuri hindi lamang ang syphilis, kundi pati na rin ang ilang iba pang mga nakakahawang sakit.

Kung isasaalang-alang namin ang sitwasyon nang direkta sa impeksyon ng treponema, ang dahilan para sa pagsusuri ay maaaring:

  • ang hitsura ng mga panlabas na sintomas ng sakit (chancres, syphilitic rash, gummas, atbp.);
  • isang makabuluhang pagbaba sa kaligtasan sa sakit;
  • pagkakakilanlan o hinala ng syphilis sa isang sekswal na kasosyo, kamag-anak at miyembro ng pamilya;
  • positibong reaksyon sa panahon ng iba pang mga pagsubok;
  • pagkilala sa iba pang mga sakit na maaaring nauugnay sa syphilis;
  • personal na pagnanais ng isang tao na masuri.

Mga pamamaraan ng pagsasagawa

Ang ELISA ay maaaring isagawa sa iba't ibang paraan. Sa bawat kaso, ang pinaka-angkop na pagpipilian ay pinili.

Una sa lahat, mayroong isang dibisyon ng mga pamamaraan sa:

  1. Ng husay. Natutukoy ang pagkakaroon ng impeksyon o virus sa katawan ng pasyente.
  2. Dami. Tinutukoy ang konsentrasyon ng mga antibodies sa isang pathogenic agent sa katawan ng tao, na nagpapahiwatig ng yugto at intensity ng pag-unlad ng sakit.

Mayroon ding pag-uuri ng mga pamamaraan para sa pagsasagawa ng ELISA ayon sa prinsipyo ng pagpaparami ng kinakailangang reaksyon.

Mayroong 3 mga pagpipilian:

  1. Diretso. Ang mga may label na antibodies ay itinuturok sa ibinigay na mga sample ng dugo.
  2. Hindi direktang may antigens. Ang mga adsorbed antigens ay preliminarily na inilagay sa mga cell ng isang polystyrene plate na nilayon para sa ELISA. Pagkatapos ang mga antibodies ng mga virus ay idinagdag sa kanila, na naghihikayat sa pagbuo ng mga immune complex na kinakailangan para sa karagdagang pagsusuri ng mga resulta.
  3. Hindi direktang may mga antibodies. Para sa mga sakit na nakukuha sa pakikipagtalik, kadalasang ginagamit ang pamamaraang ito. Ito ay nagsasangkot ng paunang pagsipsip ng mga antibodies, pagkatapos lamang ang mga antigen ay idinagdag sa plato.

Mga panuntunan sa pag-sample ng materyal

Upang mabawasan ang mga panganib ng pagkuha ng mga maling resulta, kinakailangan na mag-abuloy ng dugo para sa pagsusuri nang tama.

Bago sumailalim sa isang ELISA, ang ilang mga paghihigpit ay dapat sundin:

  • maiwasan ang matinding pisikal at emosyonal na stress;
  • huminto sa paninigarilyo at pag-inom ng alak nang hindi bababa sa 1 hanggang 3 araw nang maaga;
  • sa loob ng ilang araw kailangan mong lumipat sa tamang nutrisyon;
  • ito ay kanais-nais para sa mga kababaihan na kontrolin ang yugto ng panregla cycle, dahil ang mga hormone ay maaaring papangitin ang mga resulta;
  • ang huling pagkain ay dapat na 8-10 oras bago ang donasyon ng dugo;
  • sa loob ng 10 araw, ang mga gamot na maaaring makaapekto sa mga resulta ng pag-aaral ay hindi kasama.

Para sa ELISA, ang venous blood ay kinukuha mula sa cubital vein, dapat itong kunin sa umaga nang walang laman ang tiyan. Sa pangkalahatan, ang mga karaniwang tuntunin para sa paghahanda para sa venous blood sampling ay nalalapat. Depende sa pagkakaroon ng kung aling sakit ang sinusuri, ang mga karagdagang kinakailangan para sa paunang paghahanda ng pasyente ay maaaring ipakilala.

Pamamaraan

Ang mga tagubilin para sa pagsasagawa ng ELISA ay medyo simple:

  1. Ang pasyente ay kumukuha ng dugo mula sa isang ugat.
  2. Ang kinuhang materyal ay inihahanda at hinahati sa mga sample sa isang espesyal na fine-mesh palette.
  3. Ang mga antigen ay halo-halong may mga antibodies ayon sa napiling pamamaraan.
  4. Nasusuri ang reaksyon. Inihahambing ang mga sample sa mga control sample, isinasagawa ang qualitative at quantitative na pagsusuri ng mga resulta.
  5. Ang data ay ipinasok sa isang espesyal na talahanayan na may aplikasyon ng mga quantitative indicator (kabuuang antibodies).
  6. Tinutukoy ng dumadating na manggagamot ang mga resulta. Kung kinakailangan, inireseta ang naaangkop na paggamot.

Pagkatapos ng pagsusuri, bibigyan ang pasyente ng isang dokumento na may mga resulta. Mayroon itong anyo ng isang talahanayan na may kaukulang mga pagtatalaga sa tapat ng bawat uri ng immunoglobulin sa intersection na may mga pangalan ng mga nakakahawang sakit.

Pag-decryption

Ang isang espesyalista lamang ang makakapag-decipher ng tama sa mga resulta ng mga pagsusuri. Mahirap malaman sa iyong sarili, halimbawa, kung ano ang ibig sabihin ng resulta ng ELISA k = 1 4. Ang syphilis ay maaari ding mangyari sa iba't ibang anyo, na nakakaapekto rin sa huling data.

Ang mga resulta ay nagpapahiwatig ng 3 uri ng immunoglobulins:

  1. IgM. Pahintulutan upang matukoy ang panahon ng impeksyon sa syphilis. Ang isang positibong resulta ay nagpapahiwatig ng isang exacerbation ng sakit. Ang kanilang kawalan ay maaaring magpahiwatig ng pagpapatawad ng mga talamak na pathologies o isang nakatagong anyo ng sakit.
  2. IgA. Nagsasaad ng isang sakit na mahigit isang buwan na ang edad mula noong impeksyon. Ito rin ay isang tanda ng talamak na yugto ng sakit, kapwa may mga ordinaryong pathologies at mga advanced na talamak.
  3. IgG. Ito ay isang tanda ng peak period ng sakit, iyon ay, ang paglala nito. Sa syphilis, lumilitaw ang isang positibong reaksyon ilang oras pagkatapos ng paggamot. Sa ilang uri ng sakit, maaari itong maging tanda ng nabuong kaligtasan sa sakit.

Ang mga sangkap na ito ay ginawa ng katawan sa isang tiyak na pagkakasunud-sunod, na isang karagdagang tanda ng sakit. Sa mga pagsusulit ng husay, ang pagkakaroon lamang ng mga immunoglobulin sa dugo ng bawat uri ay itinatag.

Ito ay ipinahayag sa isang pagbabago sa kulay ng mga materyales na kasangkot sa pagsusuri. Ang mga quantitative indicator ay pantulong, mas tumpak nilang inilalarawan ang sitwasyon. Ang ratio ng antigens at antibodies ay nagpapahiwatig ng kalubhaan ng sakit at ang intensity ng tugon ng katawan.

Anong gagawin

Kung ang pasyente ay talagang may syphilis, ang isang positibong ELISA ay ganap na palaging napansin, imposibleng hindi mapansin ang pagkakaroon ng mga treponema sa naturang pag-aaral. Huwag mawalan ng pag-asa, ang sakit ay tumutugon nang maayos sa paggamot, lalo na sa mga unang yugto.

Ano ang gagawin kung positibo ang resulta ng pagsusulit:

  • sumailalim sa karagdagang pagsusuri ayon sa mga indikasyon ng doktor;
  • kumuha ng kurso ng antibiotic therapy ayon sa napiling pamamaraan;
  • tumuon sa pagpapalakas ng immune system;
  • ipaalam sa iyong kasosyo sa sekswal ang tungkol sa sakit;
  • sa hinaharap, regular na sumasailalim sa preventive diagnostics hanggang sa pagtanggal sa dispensaryo (pagkatapos ng 5 taon sa kawalan ng mga positibong resulta ng pagsubok).

Hindi na kailangang ipagpaliban ang sick leave at matakot na isapubliko ang mga resulta. Ang diagnosis ay naka-encrypt at nananatiling lihim, kung mayroong banta ng impeksyon sa ibang mga tao, kinakailangan na ipaalam sa mga kamag-anak at isang kasosyo sa sekswal ang tungkol sa problema upang sumailalim sila sa mga kinakailangang pagsusuri.

Maling positibong resulta at mga sanhi nito

Minsan ang resulta ng iba pang mga pagsusuri ay naitala at ang ELISA ay false positive para sa syphilis. Iyon ang dahilan kung bakit inirerekomenda na magsagawa ng 2-3 pantulong na pamamaraan at ulitin ang enzyme immunoassay pagkatapos ng ilang sandali.

Ang ganitong mga kamalian ay bihira, ang mga ito ay higit sa lahat dahil sa mga naturang kadahilanan:

  • pagbubuntis;
  • malalang sakit;
  • kamakailang pagbabakuna;
  • pinsala.

Ang mga maling positibong resulta ay nahahati sa talamak at talamak, depende sa likas na katangian ng kadahilanan na nagpukaw sa kanila.

Ang mga pangunahing ay ipinakita sa talahanayan:

Pangalan at larawan Maikling Paglalarawan
Pagbubuntis

Ang fetus at ang genetic na materyal ng ama ay itinuturing na mga dayuhang ahente.
talamak na anyo
Impeksyon

Ang mga immunoglobulin ay ginawa upang labanan ang sakit.
Pinsala

Ang katawan ay tumutugon sa isang nagpapasiklab na proseso, maaaring mangyari ang magkakatulad na impeksiyon.
Pagkalasing

Nangyayari kapag nalason sa mga nakakalason na sangkap o ang pagtagos ng ilang mga pathogenic microorganism.
atake sa puso

Ang mga matinding problema sa puso ay lumilikha ng malaking pasanin sa katawan at nagiging sanhi ng ilang mga desensitizing na reaksyon.
Pagbabakuna

Ang pagpapakilala ng bakuna ay nakakaapekto sa paggawa ng mga immunoglobulin.
Talamak na anyo
Tuberkulosis

Ang isang katulad na reaksyon ay ipinapakita ng isang napabayaang anyo ng tuberculosis.
Mga pathology sa atay

Ang gawain ng buong organismo ay nasisira.
Mga sakit sa autoimmune

Sa gayong mga pagkabigo, ang paggawa ng mga immunoglobulin ay maaaring hindi makatarungan sa pagkakaroon ng mga antibodies.
Mga sakit sa connective tissue

Ang mga ito ay nakararami sa genetic pathologies at kung minsan ay "itumba" ang mga resulta ng mga pagsusuri.
Mga pagbabago sa edad

Sa mga matatandang tao, ang immune system ay hindi gumagana, at mayroong maraming mga malalang sakit.

Sa pagkakaroon ng gayong mga problema sa kalusugan, ang isang pagsusuri para sa syphilis ay maaaring magpakita ng isang positibong resulta, ngunit ito ay bunga lamang ng paggawa ng katawan ng mga protina upang labanan ang sakit. Gayunpaman, kinikilala sila ng ELISA bilang mga antigen.

Ang isang malusog na bata hanggang isa at kalahating taong gulang ay maaaring makaranas ng maling positibong resulta ng ELISA kung ang isang babae ay nahawahan ng syphilis sa panahon ng pagbubuntis. Bago ang edad na ito, ang dugo ay wala pang oras upang ganap na i-renew ang sarili nito, kaya ang mga antibodies ng ina ay maaaring naroroon dito. Ang pagbubukod ay ang sitwasyon sa pagtuklas ng mga immunoglobulin ng IgM.

Maaari kang matuto nang higit pa tungkol sa mga tampok ng enzyme immunoassay at ang pamamaraan nito sa pamamagitan ng panonood ng video sa artikulong ito.