Meldonium: mity i rzeczywistość. Badania eksperymentalne i kliniczne dotyczące Mildronianu. Czym są leki placebo, Mildronian
Od 1984 roku przeprowadzono szereg badań wykazujących skuteczność przyjmowania meldonium w szeregu schorzeń, np. w chorobie niedokrwiennej i dusznicy bolesnej. Ponieważ meldonium było testowane przez ponad 30 lat, większość listy źródeł publikacji naukowych to szanowane publikacje medyczne, których autorytet zdobyto przez wiele dziesięcioleci testowania różnych leków.
Nie mniej przekonujące jest praktyczne doświadczenie stosowania meldonium. W ciągu ponad 30 lat stosowania substancji w codziennej praktyce medycznej (zarówno w leczeniu sportowców, jak i zwykłych ludzi) midronian okazał się lekiem o wysokiej skuteczności, nie mającym nic wspólnego z placebo.
Jedno z najwcześniejszych badań midronianu z placebo przeprowadzono w ramach badania nad chorobą niedokrwienną serca i wpływem meldonium na stan pacjentów z tą chorobą. Podczas przyjmowania tego leku zaobserwowano zarówno ogólną poprawę jakości życia pacjentów, jak i poprawę tolerancji wysiłku.
Inne badanie meldonium dotyczące skuteczności leku w chorobach takich jak choroba niedokrwienna serca II i III FC według klasyfikacji Canadian Cardiovascular Society (CCS), obejmowało obserwację grupy placebo. Wymagane jest wyjaśnienie na czym polega badanie placebo. W tym podejściu pacjenci są losowo przydzielani do grup terapeutycznych (tzw. procedura randomizacji) i mają takie same szanse otrzymania zarówno leku badanego, jak i leku kontrolnego (tj. leku porównawczego lub placebo). W grupie meldonium, podczas przyjmowania Mildronianu, zaobserwowano zmniejszenie zapotrzebowania pacjentów na przyjmowanie nitrogliceryny. Ponadto ataki dusznicy bolesnej zaczęły dokuczać badanym znacznie rzadziej. Wątpliwości co do skuteczności Mildronianu nie przetrwały ani jednego badania kontrolowanego placebo.
Jednak dyskusje na temat „leków obojętnych” nadal wstrząsają rosyjskim Internetem. Niektórzy nadal nie wierzą kontrolowanym placebo testom midronianu, inni wręcz przeciwnie, uważają substancję za doping meldonium, argumentując swój punkt widzenia faktem, że wielu sportowców jest zmuszonych do regularnego przyjmowania midronianu.
Przypomnijmy, że wzrost zainteresowania tym popularnym lekiem, dostępnym w każdej rosyjskiej aptece, spowodowany był wpisaniem go przez WADA na listę środków dopingujących zabronionych sportowcom.
Od 1 stycznia 2016 roku wielu zawodowych sportowców, którzy nie przeszli testów antydopingowych, zostało zmuszonych do wycofania się z zawodów. 90 procent sportowców żyje na obszarze poradzieckim. W Europie łagodny środek praktycznie nie jest znany, z wyjątkiem tego, że w niektórych regionach wschodnich, które miały bliskie stosunki z ZSRR, w USA nie jest w ogóle znany, ponieważ. nie ma pozwolenia na sprzedaż (rynek nie potrzebował leku, więc twórcy meldonium nigdy nie starali się o licencję).
Sytuację tłumaczy pochodzenie meldonium - pozyskiwano je na sowieckiej Łotwie. W 2000 roku rynek zbytu został rozszerzony na Chiny, Bułgarię, Albanię, Mongolię i Kosowo, ale Rosja pozostała rekordzistą w spożyciu łagodnyronianów. Dlatego też można uznać za uzasadnione podejrzenia, że zarówno wpisanie meldonium na listę dopingową, jak i nagłe zapowiedzi placebo z łagodnym środkiem zapobiegawczym mają charakter polityczny.
W sieciach społecznościowych aktywnie dyskutuje się o leku, z powodu którego rosyjscy sportowcy „wypalili się” na dopingu. „Jeśli Mildronian zwiększa wytrzymałość, to może należy go przyjmować podczas uprawiania sportu?” – zastanawiają się miłośnicy fitnessu. „A co, jeśli ten lek jest niebezpieczny dla wszystkich, skoro został zakazany dla sportowców?” Inni się martwią. O komentarz zwróciliśmy się do Doktora Nauk Medycznych, Profesora, Kierownika Kliniki Chorób Miokardium i Niewydolności Serca Instytutu Kardiologii Klinicznej im. A.I. GLIN. Myasnikov z Rosji - Kompleks badawczo-produkcyjny kardiologiczny Siergiej Tereszczenko.
- Siergiej Nikołajewicz, w jakich przypadkach przepisywany jest łagodnyronian i jak powszechnie jest on obecnie stosowany?
Lek ten stosuje się w chorobach sercowo-naczyniowych w celu odżywienia mięśnia sercowego (mięsień sercowy. - Auth.). Jest również stosowany w neurologii, w szczególności z naruszeniem krążenia mózgowego. W Rosji łagodnyronian jest często przepisywany pacjentom z sercem – „umiłowaliśmy” leki odżywiające mięsień sercowy.
- Jak uzasadnione jest to?
Sam pomysł jest dobry, jednak o ile mi wiadomo, nie ma zakrojonych na szeroką skalę badań klinicznych, które w 100% potwierdziłyby skuteczność Mildronianu i innych leków poprawiających metabolizm w komórkach mięśnia sercowego.
W międzynarodowej bazie naukowej Pubmed znajdują się dane potwierdzające, że łagodnyronian ostatecznie jest w stanie zwiększyć wytrzymałość.
Być może były to różne małe badania, pilotażowe, eksperymentalne i tym podobne. Powtórzę: nie są mi znane klasyczne badania kliniczne na dużej liczbie osób z kilkoma fazami, które jednoznacznie potwierdzałyby poważne działanie łagodnego leku.
Czyli możliwe, że taki efekt nadal istnieje, ale nie został w pełni udowodniony w klasyczny sposób?
Tak. Swoją drogą, to też jest powód – ze względu na brak pełnych badań klinicznych, Mildronian nie może wejść na międzynarodowy rynek farmaceutyczny i nie jest stosowany w innych krajach.
- Czy ma analogi?
Myśle że nie. Istnieje preductal (substancja czynna trimetazydyna), która ma podobne zadanie - poprawę metabolizmu, czyli metabolizmu w komórkach mięśnia sercowego. Ale mechanizm działania tego leku jest zupełnie inny. Nawiasem mówiąc, preductal znalazł się na liście leków dopingujących jeszcze wcześniej niż Mildronate.
Co się stanie, jeśli zdrowy człowiek zacznie stosować takie leki w celach profilaktycznych, np. podczas uprawiania aktywnego sportu?
Nic dobrego. Po co leczyć zdrową osobę, zakłócać normalne funkcjonowanie serca i wybijać je z zewnątrz? Kategorycznie odradzam osobom zdrowym przyjmowanie łagodnego leku.
Pacjenci też się martwią: skoro ten lek jest zabroniony sportowcom, to może jest niebezpieczny dla innych, w tym chorych na serce?
Przed rejestracją leki należy przetestować pod kątem bezpieczeństwa. Dlatego osoby przyjmujące łagodnyronian ze względów medycznych nie powinny martwić się szkodliwością.
CZYTAJ TAKŻE
Biolog molekularny: „Mildronate to nie manekin, dla rdzeni może być sposobem na odbicie się, ale nie narkotykiem”
Na prośbę KP naukowiec Garik Mkrtchyan przeprowadził poważne międzynarodowe badania nad rewelacyjnym lekiem i odpowiedział
Z powodu łagodnego leku (meldonium) w ciągu ostatnich kilku dni pięciu rosyjskich sportowców zostało jednocześnie przyłapanych na dopingu. Najgłośniejsze było uznanie Marii Szarapowej. Kiedyś lek mógł być stosowany przez sportowców, jednak na początku 2015 roku, po publikacji niemieckich naukowców, millonium zostało przeniesione na listę zakazanych. O komentarz na temat badań nad tym lekiem poprosiliśmy eksperta.
I W TYM CZASIE
Duma Państwowa zwołuje nadzwyczajne posiedzenie w związku z Szarapową
W ciągu jednego dnia kilku naszych zawodników znalazło się jednocześnie na czarnej liście
Skandal dopingowy nabiera tempa. Na jego orbicie zaangażowanych było już siedmiu rosyjskich sportowców reprezentujących różne dyscypliny sportowe.
Najgłośniejszego ujawnienia dokonała tenisistka Maria Szarapowa, która mogła stracić dziesiątki milionów dolarów i całkowicie zakończyć karierę.
PRZY OKAZJI
Meldonium, wynalezione na Łotwie, zostało uznane przez niemieckich naukowców za „złe”.
„KP” opowiada o tym, jak powszechnie stosowany narkotyk stał się zakazany dla sportowców
W ciągu ostatnich kilku dni meldonium stało się jednym z najbardziej znanych narkotyków w Rosji. Od 1 stycznia 2016 roku znajduje się oficjalnie na liście substancji zabronionych do stosowania przez Światową Agencję Antydopingową. Lek ten jest szeroko stosowany w Europie Wschodniej i został opracowany przez łotewskiego profesora Ivarsa Kalvinsa, który po głośnym skandalu pospieszył z oświadczeniem, że meldonium nie pomaga poprawić wyników, a jedynie chroni zdrowie sportowców
Zgodnie ze swoją budową chemiczną, midroronian - 3-(2,2,2-trimetylohydrazyniu)propionian - jest strukturalnym analogiem bezpośredniego prekursora karnityny - γ-butyrobetainy. Specyficzne działanie midronianu wynika z jego zdolności do hamowania zależnego od karnityny utleniania FA, zmniejszając zawartość karnityny i jej metabolicznie aktywnej frakcji (acylokarnityny) w mięśniu sercowym. Zaproponowano następujące możliwe mechanizmy działania leku (Simkhovich B.Z. i in., 1986, 1990, 1991):
hamowanie aktywności hydroksylazy γ-butyrobetainy typu niekonkurencyjnego; hamowanie enzymu katalizującego ostatni etap biosyntezy karnityny – hydroksylację γ-butyrobetainy, Mildronian obniża poziom karnityny i tym samym zapobiega gromadzeniu się długołańcuchowej acylokarnityny i acylo-CoA;
hamowanie aktywności acylotransferazy karnityny przez typ konkurencyjny, co służy jako dodatkowy mechanizm hamowania gromadzenia się acylokarnityny;
spadek aktywności syntetazy acylo-CoA, która katalizuje powstawanie „aktywnej formy” FA-acylo-CoA.
Wraz ze spadkiem stężenia karnityny w cytozolu zmniejsza się również szybkość transportu kwasów tłuszczowych do mitochondriów, co z kolei przyczynia się do przywrócenia transportu już wytworzonego ATP do cytozolu. Wzrost stężenia kwasów tłuszczowych w cytosolu jest swoistym sygnałem dla komórki, że utlenianie kwasów tłuszczowych jest z jakiegoś powodu niemożliwe. Organizm reaguje na taki sygnał włączając mechanizmy utleniania glukozy.
Eksperymentalna weryfikacja mechanizmu działania Mildronianu wykazała, że profilaktyczne dziesięciodniowe podawanie Mildronianu w dużym stopniu zapobiega zaburzeniu procesu tlenowego utleniania glukozy w wyizolowanym perfundowanym sercu szczura. To samo obserwuje się in vivo. Tak więc, w modelu zawału mięśnia sercowego u psów, profilaktyczne 10-dniowe podawanie Mildronianu zmniejsza gromadzenie się mleczanu w strefie niedokrwienia mięśnia sercowego o ponad 50%. Wskazuje to, że łagodnyronian zapobiega kwasicy strefy niedokrwiennej mięśnia sercowego (Kalvinysh I.Ya., 2001).
Dowód na to, że to właśnie utlenianie glukozy jest głównym źródłem energii do utrzymania wydolności czynnościowej mięśnia sercowego podczas niedokrwienia spowodowanego stymulacją serca, pod wpływem zarówno łagodnyronianu, jak i insuliny, uzyskano na izolowanym sercu szczura (po wstępnej jednodniowe podawanie Mildronianu).
Normalnie potencjał ładunku energetycznego (ECP) jest bliski jedności, co oznacza, że wśród fosforanów makroergicznych w mięśniu sercowym dominuje ATP. W strefie niedokrwiennej wskaźnik ten gwałtownie maleje (o około 35%). Równocześnie w grupie zwierząt leczonych Mildronianem potencjał energetyczny komórek w strefie niedokrwienia mięśnia sercowego jest prawie całkowicie zachowany.
Ustalono, że łagodnyronian aktywuje oba najważniejsze enzymy tlenowego cyklu utleniania glukozy (Shutenko Zh.V. i in., 1991 a, b):
heksokinaza, która w procesie utleniania angażuje nie tylko glukozę, ale także inne heksozy;
dehydrogenaza pirogronianowa, która obejmuje pirogronian powstający z cukrów w cyklu Krebsa, zapobiegając w ten sposób tworzeniu się mleczanu (kwasicy).
Należy podkreślić, że pod wpływem Mildronianu nie tylko wzrasta aktywność tych enzymów, ale także indukowana jest ich biosynteza, tj. liczba tych ważnych enzymów w kardiomiocytach wzrasta.
Mildronate odwracalnie hamuje konwersję gammabu-terobetainy do karnityny po dziesięciodniowym podawaniu leku.
Zgromadzono znaczną ilość danych na temat farmakodynamiki biochemicznej Mildronianu w eksperymencie. Tak więc, gdy szczurom podaje się Mildronian (50 mg/kg, dootrzewnowo, 10 dni), stężenie wolnej karnityny w mięśniu sercowym zmniejsza się o 42%, a po podaniu w dawce 150 mg/kg, o 70%. W tym ostatnim przypadku stężenie nierozpuszczalnej w kwasie acylokarnityny spada o 84%. U szczurów utrzymywanych na diecie tłuszczowej podawanie leku hamuje utlenianie kwasu 14 C-palmitynowego odpowiednio o 16% i 50% (Simkhovich B.Z. i in., 1985, 1987 i 1991; Shutenko Zh.V. i in. ., 1991 a, b;), nie wpływa na zwiększoną ilość ATP i zmniejsza stężenie mleczanu w mięśniu sercowym (Simkhovich B.Z. i in., 1987 a). Lek podany białym szczurom prawie podwoił stężenie WKT w surowicy krwi bez wpływu na ich poziom w mięśniu sercowym, co najwyraźniej jest spowodowane ograniczeniem ich pobierania z krwi. Zawartość trójglicerydów w mięśniu sercowym ma tendencję do wzrostu (o 1,25 razy), co można uznać za reakcję kompensacyjną w odpowiedzi na nadmiar FFA w warunkach oczywiście podawania Mildronianu (Shutenko Zh.V. i in., 1988 ). W doświadczeniach na szczurach poddanych głodowaniu wykazano, że podawany w kuracji łagodny środek wykazuje działanie antyketogenne zarówno w zależnej od karnityny ketogenezie (głodzenie), jak i w niezależnym od karnityny tworzeniu ciał ketonowych (ładowanie oktononianem w warunkach hamowania ketogeneza zależna od karnityny przez Mildronian), w której występują krótko- i średniołańcuchowe kwasy tłuszczowe. Efekty te mogą być przydatne w korekcji stanów patologicznych, którym towarzyszy wzrost ketogenezy (otyłość, cukrzyca) (Simkhovich B.Z. i in., 1987 b).
Ochrona serca szczurów poddanych perfuzji według Langendorfa, przeszkodę w naruszeniu funkcji skurczowej stwierdza się tylko przy kursowym stosowaniu łagodnych leków. Profilaktyczne długotrwałe podawanie Mildronianu w dawkach 50–150 mg/kg zapobiega zaburzeniom metabolizmu mięśnia sercowego wywołanym przez izadrynę (gromadzenie acylokarnityny, spadek zawartości ATP) na tle jeszcze wyraźniejszego spadku stężenia wolnej karnityny i braku AMP i gromadzenie się mleczanu. Wraz z tym osłabieniu ulega szkodliwy wpływ membranotropowych produktów aktywacji metabolicznej kwasów tłuszczowych na hepatocyty i kardiomiocyty, co potwierdza brak stymulowanego izadryną uwalniania do krwi CPK - izoformy MB i LDH. U zwierząt z zawałem mięśnia sercowego, Mildronian hamuje peroksydację lipidów w mięśniu sercowym i erytrocytach (obniża poziom dialdehydu malonowego, koniugatów dienowych), zwiększa całkowitą aktywność przeciwutleniającą, przywracając aktywność Ca 2+ - Mg 2+ - ATPazy, fosfatazy alkalicznej, kreatyny fosfokinaza, wzmacniająca procesy naprawcze (Boitsov V.A., 2003).
Ze względu na charakter wpływu midronianu na metabolizm wolnych kwasów tłuszczowych i karnityny oraz biochemię niedokrwionego mięśnia sercowego, zastosowanie tego leku w tego typu patologii wydawało się właściwe (Shutenko Zh.V. i in., 1988).
Tak więc, u królików leczonych Mildronianem (250 mg/kg, dootrzewnowo, 10 dni), po ekspozycji na hipoksję podczas trzyminutowego utleniania, izolowane przedsionki rozwinęły początkową siłę skurczów. U zwierząt grupy kontrolnej przez cały okres obserwacji siła ta była niższa od wyjściowej (Simkhovich B.Z. i in., 1985).
Lek chronił perfundowane Langendorffem serce szczura przed uszkodzeniem funkcji skurczowej spowodowanym niedokrwieniem i długotrwałym narażeniem na kwas palmitynowy. Jednocześnie w procesie perfuzji poniedokrwiennej palmitynianem przywrócenie tempa relaksacji serca szczurów leczonych Mildronatem było istotnie wyraźniejsze we wszystkich okresach obserwacji w porównaniu z grupą kontrolną. Działanie leku objawiało się tylko przy podawaniu zwierzętom i nie było obserwowane przy bezpośrednim wstrzyknięciu do perfuzatu (Simkhovich B.Z. i in., 1990).
Mildronate potwierdził działanie kardioprotekcyjne w przypadku uszkodzenia mięśnia sercowego izadryny, które jest najbliższe chorobom ludzkim pod względem patogenezy i objawów (Temnaya E.V., 1990). Wstępne podanie u szczurów Mildronianu zapobiega zaburzeniom metabolizmu mięśnia sercowego wywołanym przez izadrynę: kumulacja acylokarnityny i spadek zawartości ATP na tle jeszcze wyraźniejszego spadku stężenia wolnej karnityny, zapobiega gromadzeniu się AMP i mleczanu. Zawartość karnityny w mięśniu sercowym pod wpływem kardioprotekcyjnych dawek leku (50-150 mg/kg) zmniejsza się (o 70%) przy spadku stężenia acylokarnityny o 56% i wzroście stężenia WKT w mięśnia sercowego o 80% (Simkhovich B.Z. i in., 1985, 1991).
Tym samym pod wpływem Mildronianu stężenie WKT w mięśniu sercowym jeszcze bardziej wzrasta przy jednoczesnym ograniczeniu zawartości wolnej karnityny. W tym przypadku możliwa jest intensyfikacja metabolizmu FFA w wątrobie, na co wskazuje spadek poziomu FFA w surowicy krwi. Wraz z tym osłabieniu ulega szkodliwy wpływ membranotropowych produktów aktywacji metabolicznej FA na hepatocyty i kardiomiocyty, co potwierdza brak we krwi izoformy CPK-MB i wątrobowego LDH stymulowanego izadryną (Simkhovich B.Z. i in., 1986). .
W porównaniu z innymi inhibitorami beta-oksydacji FFA, Mildronian ma wiele zalet. Przykładowo, w odróżnieniu od oksyfenicyny, lek nie powoduje gromadzenia się FFA, trójglicerydów i cholesterolu w mięśniu sercowym. Stosowaniu Mildronianu nie towarzyszy gromadzenie się długołańcuchowego acylo-CoA i acylokarnityny w sercu, które są utrwalane pod działaniem pochodnych kwasu oksirano-2-karboksylowego (Simkhovich B.Z. i in., 1986).
Nasze badania wykazały korzystny wpływ midronianu na metabolizm energetyczny mięśnia sercowego szczurów z zawałem mięśnia sercowego izadryny w fazie bliznowacenia (Temnaya E.V., 1990; Dark E.V. i in., 1990). U zwierząt z tą patologią obserwowano zaburzenia metaboliczne, które objawiały się znacznymi zmianami w metabolizmie energetycznym - spadkiem poziomu ATP, ADP i AMP, ilości nukleotydów adenylowych, spadkiem całkowitej zawartości koenzymów nikotynamidu z powodu spadek poziomu form utlenionych i wzrost form zredukowanych. Pod wpływem Mildronianu (50 mg/kg, domięśniowo, 21 dni) w mięśniu sercowym zwierząt zwiększył się poziom wszystkich składników układu adenylowego i ich suma, zwiększył się udział utlenionych form koenzymów nikotynamidu i zmniejszył się - formy zredukowane .
Skuteczność Mildronianu w zapobieganiu wywołanym przez Izadrynę zaburzeniom metabolizmu energetycznego mięśnia sercowego można wytłumaczyć kompensacyjnym wzrostem glikolizy w wyniku uwolnienia akceptorów protonów, o czym świadczy zmniejszenie zawartości glukozo-6-fosforanu i pirogronianu. Podobny efekt wystąpił przy znacznym spadku stężenia wolnej karnityny (o 36 – 60%) (Good Y.K i in., 1995). Spadkowi zużycia WKT pod wpływem Mildronianu towarzyszy w warunkach normoksycznych aktywacja szlaku utleniania oksydazy bursztynianowej w limfocytach szczura, co objawia się wzrostem aktywności dehydrogenazy bursztynianowej i dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej , aw warunkach niedotlenienia - przez dominującą aktywację glikolizy ze wzrostem aktywności LDH (Serebrovskaya T.V. i współautor, 1991). Według autorów (Serebrovskaya T.V. i wsp., 1991) przeciwhipoksyczne działanie midronianu wynika z jego zdolności do hamowania syntezy endogennej karnityny, a tym samym hamowania zależnego od karnityny utleniania FFA, co prowadzi do zmniejszenia zapotrzebowania tkanek na tlen . Pojedyncze podanie Mildronianu (40 mg/kg) szczurom z niedotlenieniem mózgu pochodzenia krążeniowego znacząco zmniejszyło nasilenie zaburzeń neurologicznych i ich manifestację EEG (Baranchikova N.V. i in., 1991).
Dalsze badania wykazały właściwości przeciwutleniające Mildronianu. Stwierdzono, że aktywacja procesów peroksydacji lipidów w zawale mięśnia sercowego izadryny – znaczny wzrost poziomu koniugatów dienowych (DC) i dialdehydu malonowego (MDA) w mięśniu sercowym, spadek całkowitej aktywności antyoksydacyjnej (AOA) – była skutecznie hamowana przez podanie Mildronianu. Lek zmniejszał stężenie DC, MDA, co wiąże się z jego zdolnością do obniżania poziomu zredukowanych form koenzymów nikotynamidu, których nadmiar stymuluje peroksydację lipidów. W wyniku hamującego działania leku na wymianę kwasów tłuszczowych i ich toksycznych dla błon metabolitów detergentowych, wskaźnik AOA wzrósł o 20%. Zwiększony o 29% w wyniku aktywacji peroksydacji lipidów, poziom cholesterolu we krwi spadł o 21%.
Normalizacji metabolizmu mięśnia sercowego towarzyszyła dodatnia dynamika czynności bioelektrycznej serca, co objawiało się normalizacją załamka T i odcinka ST, wzrostem załamka R (Temnaya E.V., 1990; Dark E.V. i in., 1990).
U szczurów z dystrofią adrenalinową mięśnia sercowego łagodnyronian zmniejszał intensywność peroksydacji lipidów w erytrocytach (co objawiało się spadkiem poziomu MDA i DC), przywracał aktywność Ca 2+ -ATPazy, która była o 11% wyższa od aktywności zwierząt kontrolnych, hamował aktywność Mg 2+ -ATPazy z niewielkim spadkiem aktywności całkowitej Ca 2+, Mg 2+ -ATPazy (towarzyszyła temu tendencja do normalizacji biernej przepuszczalności błony dla Ca 2+), wpłynął na odbudowę aktywności fosfatazy alkalicznej, fosfokinazy kreatynowej i dehydrogenazy bursztynianowej. Wskazane działanie leku było silniejsze niż znanego przeciwutleniacza α-tokoferolu i towarzyszyła mu poprawa stanu włókien kurczliwych, wzrost liczby nienaruszonych mitochondriów oraz nasilenie wewnątrzkomórkowych procesów naprawczych (Grushko V.S. , 1990). Normalizacja funkcjonowania ATPaz kardiomiocytów, których odpowiednim modelem są błony erytrocytów, pod wpływem łagodniedronianu przyczynia się do pełnego rozkurczu i stworzenia sprzyjających warunków do przywrócenia czynności funkcjonalnej mięśnia sercowego.
Ustalono (Radlovskaya Z.T. i in., 1990), że podawanie leku białym szczurom z przewlekłą nieswoistą chorobą płuc (POChP) przyczyniło się do zachowania rezerw histaminy w mięśniu sercowym, w szczególności jego związanej frakcji, która została wyczerpana podczas rozwoju POChP (mildronian nie ma właściwości uwalniających w stosunku do tej substancji biologicznie czynnej, normalizuje stosunek jej frakcji). Te właściwości leku są ważne w leczeniu POChP, podczas której dochodzi do zwiększonego spożycia histaminy i innych substancji biologicznie czynnych do krwi.
Badania eksperymentalne wpływu łagodnego na przepływ krwi w naczyniach wieńcowych (Savchuk V.I. i in., 1991) wykazały, że w ostrym eksperymencie na psach wprowadzenie leku (0,01 - 0,06 mg / kg) do gałęzi okalającej lewej tętnicy wieńcowej tętnica zwiększyła prędkość objętościową wieńcowego przepływu krwi i pO2 we krwi zatoki wieńcowej przy stałym ciśnieniu perfuzji krwi. Sugeruje to, że przyczyną wzrostu prędkości objętościowej przepływu wieńcowego jest aktywne poszerzenie tętnic wieńcowych.
Badania przeprowadzone przez Frantsuzovą S.B., Antonenko L.I. i Arshinnikova L.L. (1996a) w przewlekłym eksperymencie na psach z modelem płucnej niewydolności serca i nadciśnienia w krążeniu płucnym, po raz pierwszy wykazali, że łagodny środek (50 mg/kg masy ciała, domięśniowo przez 3 tygodnie) ma wyraźny i dominujący wpływ na krążenie krwi w krążeniu płucnym. Lek pomaga wyeliminować zespół nadciśnienia płucnego, zmniejszając ciśnienie skurczowe (o 28%) i rozkurczowe (o 47%) w tętnicy płucnej, a także całkowity opór płucny i tętniczy płucny - odpowiednio o 52 i 44%. W warunkach obniżonego oporu naczyniowego w płucach, Mildronate optymalizował pracę prawej komory serca (zmniejszając jej przeciążenie o 40%). Oddziałując na zawłośniczkowe łożysko pojemnościowe, Mildronian istotnie ograniczał przepływ krwi do serca (spadek ośrodkowego ciśnienia żylnego – CVP o 37%) bez zauważalnej zmiany w przedwłośniczkowym łożysku oporowym, w związku z czym obciążenie następcze praktycznie się nie zmieniało (niepewny spadek całkowity opór obwodowy o 15%).
Cechą działania Mildronianu jest ujemne działanie inotropowe, wpływające głównie na trzustkę. Pod wpływem leku dochodziło do obniżenia zarówno parametrów mocy (ciśnienie maksymalne), jak i szybkości (+dp/dt max) czynności skurczowej trzustki. Spadek właściwości relaksacyjnych trzustki (-dp/dt max) wskazywał, że łagodny środek nie jest w stanie wyeliminować jednego z wczesnych objawów niewydolności serca – zespołu „niepełnego” rozkurczu.
Lek nie miał istotnego wpływu na czynność LV. Funkcja pompowania serca po zakończeniu farmakoterapii nie uległa istotnym zmianom, chociaż u zwierząt leczonych łagodnym kwasem stwierdzono jednokierunkową tendencję w kierunku wzrostu IOC (o 25%) i poprawy pracy serca (zwiększenie pojemności minutowej serca). o 25%, RILI – o 38%).
W celu zbadania mechanizmu ujemnego inotropowego działania łagodnego kwasu na mięsień sercowy trzustki zbadano jego wpływ w zakresie stężeń od 10 -7 do 10 -4 mol/l na główne parametry skurczu izometrycznego preparatów stymulowanych elektrycznie izolowany mięsień brodawkowy serca szczura. Początkowe parametry uzyskane dla nienaruszonych izolowanych mięśni brodawkowatych perfundowanych roztworem Krebsa (kontrola) przyjęto jako 100%.
Pod wpływem wszystkich badanych stężeń midronianu stwierdzono istotny spadek maksymalnej rozwiniętej siły skurczu (tab. 3). Istotny (o 48%) spadek tego wskaźnika odnotowano przy stężeniu leku 10 -4 mol/l.
Czas do osiągnięcia maksymalnej siły skurczu izometrycznego (VDM) właściwie nie różnił się od wartości kontrolnej zarówno przy minimalnym (10 -7 mol/l), jak i maksymalnym (10 -4 mol/l) stężeniu leku w perfuzacie . Dopiero przy stężeniu 10 -6 mol/l zaobserwowano znaczny (o 23,2%) spadek wskaźnika w porównaniu do kontroli. Co więcej, dopiero przy tym stężeniu istotnie (o 15%) skrócił się czas półrelaksacji (SLR) (Frantsuzova S.B. i in., 1996 a).
Tak więc, badając wpływ midronianu na kinetykę skurczu izometrycznego i rozkurczu izolowanego mięśnia brodawkowatego szczura, ustalono jego negatywny wpływ na maksymalnie rozwiniętą siłę skurczu. Spadek wskaźników czasowych skurczu obserwuje się przy stężeniu leku w perfuzacie wynoszącym 10 -6 mol/l. Uzyskane dane wskazują, że Mildronian ma bezpośrednie, ujemne działanie inotropowe. Daje to powód, aby uznać za właściwe stosowanie go w połączeniu z korektorami tego efektu, w szczególności ze środkami kardiotonicznymi zarówno o charakterze glikozydowym, jak i nieglikozydowym.
W doświadczeniach na psach z modelem płucnej niewydolności serca i nadciśnienia w krążeniu płucnym, przeprowadzonych w naszym laboratorium przez Arshinnikova L.L., wykazano (Arshinnikova L.L., 2001), że skojarzona farmakoterapia łagodnym i strofantyną u zwierząt z tą patologią pozwala uniknąć negatywnych konsekwencji monoterapii każdym z leków (eliminacja ujemnego działania inotropowego łagodnego leku i zwiększonego ciśnienia w tętnicy płucnej pod wpływem strofantyny w warunkach zastosowanego modelu eksperymentalnego). Wyniki te pozwalają rekomendować włączenie łagodnego leku do kompleksowej terapii płucnej niewydolności serca wywołanej SMC w POChP, prowadzonej z użyciem glikozydów nasercowych.
Dane dotyczące wpływu leku na parametry metabolizmu energetycznego w sercu i innych ważnych narządach są bardzo interesujące dla zrozumienia cech farmakodynamiki łagodnego leku. W doświadczeniach na psach modelem LSN i SMC (patrz wyżej) stwierdzono, że łagodnyronian pod względem zawartości nukleotydów adenylowych w ważnych narządach ma zdolność optymalizacji metabolizmu prawej komory serca i płuc, eliminują ich niedobory energetyczne (wykrywane w LSN) poprzez zwiększenie zawartości wszystkich składników układu adenylowego (Frantsuzova S.B. i in., 1996 b).
Jednocześnie lek praktycznie nie ma wpływu na procesy bioenergetyczne lewej komory i znacznie zmniejsza ilość makroergów w wątrobie.
Wysoka zdolność Mildronianu do korygowania procesu wymiany energetycznej mięśnia sercowego prawej komory w LHF w doświadczeniu może wynikać z jego wazoaktywności w stosunku do krążenia płucnego, prowadzącego do rozszerzenia naczyń płucnych, eliminacji nadciśnienia płucnego i w związku z tym zmniejszenie stopnia przeciążenia prawej komory. Dzięki temu ten ostatni działa w bardziej optymalnym trybie, co najprawdopodobniej intensyfikuje procesy wytwarzania energii, równoważy resyntezę i rozpad makroergów.
Możliwe, że hemodynamiczne odciążenie płuc ma również pozytywny wpływ na ich wymianę energetyczną.
Na modelu błon erytrocytów wykazano (Antonenko LI i in., 1992), że podanie łagodnego kwasu solnego nie miało pozytywnego wpływu na przepuszczalność błon biologicznych w zależności od oporu osmotycznego erytrocytów. Pod wpływem tego leku następuje dalszy (w porównaniu z LSN) wzrost przepuszczalności komórek. W szczególności w 0,5% roztworze NaCl poziom hemolizy erytrocytów psów po podaniu Mildronianu przewyższał poziom w LSN o 128%, w roztworze 0,45% - o 71%, a w 0,4% - o 42,2%. .
Brak pozytywnego wpływu Mildronianu na przepuszczalność błon erytrocytów pozwala na stwierdzenie, że celowe jest łączenie Mildronianu z referencyjnym stabilizatorem błony, przeciwutleniaczem α-tokoferolem.
Modelując ostrą niewydolność serca (AHF) u kotów poprzez zwężenie gałęzi okalającej lewej tętnicy wieńcowej, stwierdzono, że wstępne podanie Mildronianu zapobiegało rozwojowi AHF, zapobiegając zmniejszeniu kurczliwości lewej komory, zmniejszeniu w nasileniu zmian ciśnienia końcoworozkurczowego w lewej komorze, nieco zwolnił tętno i obniżył BP, co generalnie przyczyniło się do stabilizacji głównych parametrów hemodynamicznych (Savchuk V.I. i in., 1991).
Pokazano również właściwości leku jako adaptogenu do wyniszczającego wysiłku fizycznego. Tak więc wprowadzenie Mildronianu wydłużyło czas biegu myszy na bieżni o 290 - 325% w porównaniu z poziomem początkowym. Opóźniony wpływ na wydolność fizyczną, spowodowany przebiegiem podawania Mildronianu, utrzymywał się do 7 dni i do 4 dni. utrzymywała się na poziomie bliskim maksimum (przewyższając podobne działanie L- i DL-karnityny (Portugalov S.N., Maslov I.V., 1991).
Ze względu na specyfikę mechanizmu działania metabolitotropowego kardioprotektora i jego wysoką skuteczność w badaniach eksperymentalnych, lek jest szeroko stosowany w praktyce klinicznej. Początkowo Mildronian stosowano jako środek zwiększający wytrzymałość i przyspieszający proces regeneracji po intensywnym wysiłku fizycznym. Przyjmowaniu leku przez sportowców na obozie treningowym (wioślarskim) towarzyszyło zwiększenie wytrzymałości i szybkości procesów regeneracyjnych przy znacznej aktywności fizycznej, co objawiało się zwiększeniem stężenia NEFA we krwi, trójglicerydów, lipidów ogółem, spadkiem w mleczanie i moczniku zarówno w spoczynku, jak i po treningu. Jednocześnie w grupie eksperymentalnej wzrósł poziom białka całkowitego, a w grupie kontrolnej obniżył się (Voronina LN, 1991).
Obecność właściwości kardioprotekcyjnych i przeciw niedokrwiennych łagodnego kwasu determinowała jego zastosowanie w klinice w leczeniu pacjentów z chorobą niedokrwienną serca, co jest przedmiotem wielu prac. Zatem monoterapii łagodnym kwasem solnym u pacjentów z dławicą wysiłkową towarzyszyło wyraźne działanie przeciwdławicowe, które rozwijało się w dniach 5–7. i osiągnął maksimum o 14 dni. Stwierdzono zmniejszenie liczby i czasu trwania napadów dusznicy bolesnej, zmniejszenie duszności, zmniejszenie dziennego spożycia nitrogliceryny, umiarkowane działanie hipotensyjne oraz tendencję do zwiększenia częstości akcji serca w spoczynku. Doprowadziło to do dodatniej dynamiki wskaźników spiroweloergometrycznych, która na tle standardowego obciążenia objawiała się spadkiem zużycia tlenu i aktywności skurczowej mięśnia sercowego wraz ze wzrostem tej ostatniej przy obciążeniu o większej mocy, a także jako zmniejszenie kosztu tlenu pracy mięśni i wskaźnika kosztów energii mięśnia sercowego. Przesunięciom tym towarzyszyło zmniejszenie stopnia nierównowagi tlenowej podczas wysiłku oraz podniesienie progu beztlenowego pracy (Dudko V.A. i in., 1989; Sakharchuk II i in., 1989).
Po pojedynczym wstrzyknięciu łagodnego leku u większości pacjentów z chorobą wieńcową pojemność minutowa serca wzrosła w wyniku zwiększenia objętości wyrzutowej, podczas gdy częstość akcji serca pozostała praktycznie niezmieniona. W trakcie leczenia wskaźniki wstrząsu i serca spadły do wartości poniżej normy, co zbiegło się z rozwojem przeciwdławicowego działania leku. W większości przypadków po leczeniu wykryto wzrost objętościowego przepływu krwi, co jest związane z właściwościami rozszerzającymi naczynia łagodnydronianu (Olbinskaya L.I., Golokolenova G.M., 1990). Lek zwiększał tolerancję wysiłku, zwiększał ilość wykonywanej pracy, częstość akcji serca, skurczowe ciśnienie krwi podczas wysiłku, natomiast końcowe ciśnienie krwi pozostawało niezmienione (Savchuk V.I. i wsp., 1991).
Parametry radiokardiograficzne u pacjentów z przewlekłą chorobą wieńcową powikłaną niewydolnością serca wykazały pozytywny wpływ łagodnego na hemodynamikę ośrodkową i obwodową: zwiększenie wskaźników udarowych i kardiologicznych, zmniejszenie obwodowego przepływu krwi, zmniejszenie OPS. W składzie gazowym krwi tętniczej wykazano tendencję do wzrostu pO 2 (z początkową hipoksemią), zmniejszeniem zawartości wodorowęglanów prawdziwych przy braku wskaźników dynamiki napięcia CO 2. W trakcie kursu wprowadzano znormalizowany metabolizm azotu, a także aktywność Ca 2+ - i Mg 2+ -ATPazy. Wyraźne działanie przeciwutleniające leku objawiało się zmniejszeniem aktywności LPO w błonach erytrocytów (Grushko V.S., 1990; Sakharchuk I.I. i in., 1990). Mildronian zwiększał liczbę erytrocytów we krwi ze zwiększoną odpornością na hemolizę kwasową, najwyraźniej ze względu na zwiększenie puli młodych erytrocytów w krążącej krwi, eliminując niektóre niekorzystne skutki nitropreparatów (Artyukh V.P. i in., 1991; Sakharchuk I.I. i in., 1991).
Długotrwałe stosowanie Mildronianu przez pacjentów z CIHD przyczyniło się do zmniejszenia intensywności glikolizy, co wyrażało się zmniejszeniem aktywności całkowitego LDH, aktywacją procesów tlenowych, przy jednoczesnym wzmożeniu koniugacji utleniania i fosforylacji, optymalizacji aktywności enzymatycznej dehydrogenaz limfocytów (Sakharchuk II i in., 1990).
Dane z obserwacji potwierdziły wysoką skuteczność leku jako kardioprotektora, który zmniejszał częstość nawrotów zawału mięśnia sercowego 9,2 razy w porównaniu z pacjentami otrzymującymi tradycyjną farmakoterapię (Sakharchuk II i wsp., 1990).
Podawanie łagodnego leku pacjentom z zawałem mięśnia sercowego w okresie rehabilitacji sanatoryjnej na tle terapii tradycyjnej (Temnaya E.V., 1990; Dark E.V. i in., 1990) spowodowało znaczne obniżenie poziomu cholesterolu we krwi, cholesterolu w β-lipoproteinach i wskaźnik aterogenności, wzrost utlenionych i spadek zredukowanych form koenzymów nikotynamidu, nieznaczny spadek pierwotnych i wtórnych produktów peroksydacji lipidów oraz wzrost ochrony antyoksydacyjnej, co korelowało z dodatnią dynamiką objawów klinicznych. Te pozytywne efekty zostały znacząco wzmocnione przez połączenie łagodniedronianu i α-tokoferolu, których łączne podanie doprowadziło do zsumowania efektów w oparciu o komplementarny wpływ leków na różne ogniwa patogenezy. Taki schemat farmakoterapii jest wysoce skuteczny, normalizuje metabolizm energetyczny i lipidowy mięśnia sercowego, poprawia trofizm i zmniejsza nasilenie objawów niedokrwiennych mięśnia sercowego, korzystnie wpływając na procesy bliznowacenia. Klinicznie objawiało się to znaczną poprawą stanu ogólnego pacjentów, ich sfery psycho-emocjonalnej, witalności, zmniejszeniem dziennego spożycia nitrogliceryny, wzrostem tolerancji wysiłku, dodatnią dynamiką parametrów EKG (Dark E.V., 1990; Dark E.V. i in., 1990).
Szczególnie interesujące są właściwości Mildronianu jako immunomodulatora. Tak więc u pacjentów z CIHD, po zakończeniu leczenia lekiem, główne wskaźniki odporności komórkowej (całkowite wartości układu T oraz stosunek populacji T-pomocniczej i supresora T) i odporności humoralnej (poziom a-globulin, krążących kompleksów, miana przeciwciał przeciw mięśniu sercowemu) znormalizowanych (Dark E. V., 1990).
W ostatnich latach pojawiło się wiele publikacji potwierdzających skuteczność kliniczną łagodniedronianu w leczeniu przewlekłej niewydolności serca (CHF) u pacjentów z ChNS, przewlekłą niewydolnością serca u pacjentów we wczesnym okresie po zawale, ze stabilną dławicą piersiową itp.
Nowoczesnym i obiecującym kierunkiem leczenia CHF jest stosowanie leków, które nie mają bezpośredniego działania inotropowego, mają działanie cytoprotekcyjne i bezpośrednie działanie metaboliczne na poziomie komórkowym oraz przyczyniają się do zwiększenia wydajności pracy mięśnia sercowego poprzez optymalizację ATP synteza w mitochondriach kardiomiocytów przy mniejszym zużyciu tlenu.
W ramach wieloośrodkowego, równoległego, randomizowanego badania z podwójnie ślepą próbą, kontrolowanego placebo, oceniano skuteczność kliniczną i bezpieczeństwo łagodnego leczenia w porównaniu z digoksyną u 120 pacjentów z niewydolnością serca II klasy czynnościowej na tle przewlekłych postaci choroby wieńcowej. choroby serca (Karpov R.S. i in., 2000; Scarda I. i in., 2001). W porównaniu z placebo, na tle leczenia łagodnym lekiem (1 - 1,5 g/dobę), ogólna ocena skuteczności klinicznej wzrasta (o 42%), zwiększa się aktywność skurczowa lewej komory, wzrasta wydolność fizyczna (wzrost w czasie trwania obciążenia o 34% i objętości wykonywanej pracy - o 47%), u 78% pacjentów zmniejsza się klasa czynnościowa niewydolności serca. U pacjentów z początkowo niskimi wartościami frakcji wyrzutowej (EF) i minutowej objętości krwi (MBV) łagodnyronian wpływał normalizująco na te parametry. Charakterystyczne jest, że w ciągu 2-4 tygodni po zakończeniu leczenia łagodnym lekiem obserwowano zwiększoną tolerancję wysiłku, czego nie obserwowano w przypadku przerwania terapii digoksyną. W odróżnieniu od digoksyny, przy której zastosowaniu u 29% pacjentów w szczytowym okresie wysiłku rowerowego wystąpił atak dusznicy bolesnej i zmiany niedokrwienne odcinka ST, u pacjentów leczonych Mildronianem nie wykryto tych negatywnych skutków. Ponadto u co najmniej 70% pacjentów liczba dodatkowych skurczów zmniejszyła się o 50% lub więcej. Podobne dane uzyskano w specjalnych badaniach nad zastosowaniem Mildronianu w złożonej terapii niewydolności serca (II - IV klasa czynnościowa według klasyfikacji NYHA), która rozwinęła się w wyniku choroby niedokrwiennej serca (Vizir V.A., 2001). Wszyscy pacjenci (80) otrzymali terapię zalecaną przez Europejskie Towarzystwo Kardiologiczne, obejmującą enalapryl (5-20 mg/dzień), furosemid (120-880 mg/tydzień), kardiket (60-120 mg/dzień) i digoksynę (0,25 - 0,5 mg / dzień). Po ustabilizowaniu się stanu klinicznego u połowy pacjentów do standardowej terapii dołączono łagodnyronian w dawce 500 mg doustnie dziennie i w obu grupach leczenie kontynuowano przez kolejne 4 tygodnie. Jednocześnie stwierdzono, że Mildronian poprawia wyniki terapii klasycznej o 10% według kryterium przejścia pacjentów do niższej klasy funkcjonalnej według NYHA (57,5% w grupie Mildronian vs 47,5% w terapii podstawowej) grupy), a także przyczyniły się do znacznego zmniejszenia objętości końcowoskurczowej (KSO). Efektowi temu towarzyszyła normalizacja początkowo obniżonej zawartości ATP w erytrocytach oraz ilości nukleotydów adenylowych, czego nie zaobserwowano u pacjentów z grupy kontrolnej. Nastąpił wzrost frakcji wyrzutowej i przebytego dystansu w ciągu 6 minut oraz zmniejszenie nasilenia dyskomfortu ocenianego w skali Borga.
Według Statsenko M.E. i in. (2005) na podstawie badania 96 pacjentów z zawałem mięśnia sercowego powikłanym CHF stwierdzono, że włączenie łagodnedronianu do schematu leczenia pozytywnie wpłynęło na stan funkcjonalny pacjentów (wzrost mocy wykonywanego obciążenia, znaczne zmniejszenie w liczbie ataków dusznicy bolesnej), szereg wskaźników metabolizmu mięśnia sercowego i stan czynnościowy nerek. U pacjentów w podeszłym wieku z chorobą wieńcową (117 pacjentów obojga płci), którzy przyjmowali łagodnyronian przez 12 tygodni, zaobserwowano zmniejszenie poziomu produktów peroksydacji lipidów w LDL o 33% i wzrost odporności LDL na utlenianie o 26% . Jednocześnie we krwi pacjentów odnotowano średnio 1,4-krotny wzrost stężenia metabolitów NO, choć nie wykazały one istotnych zmian w profilu lipidowym krwi (cholesterol całkowity, TG, HDL, LDL) ( Shabalkin A.V. i in., 2006).
Wykazano, że u pacjentów z chorobą wieńcową powikłaną CHF I - III klasa czynnościowa według NYHA, którzy otrzymywali Mildronian podczas treningu fizycznego wykonywanego w stacjonarnej fazie rehabilitacji, lek (do czasu wypisu pacjenta ze szpitala) znacznie zwiększyło szybkość testu z sześciominutowym spacerem. Znacznie większą prędkość chodu osiągano podczas sesji treningowych, występowała tendencja do wydłużania w tym czasie ich czasu trwania i pokonywanego dystansu (Nedoshivin A.O. i in., 2001).
Stosowanie u pacjentów ze stabilną dusznicą bolesną (CHD: wysiłkowa dławica piersiowa І - ІІІ FC) na tle standardowej terapii przeciwdławicowej (β-adrenolityki, azotany) doprowadziło do poprawy zarówno parametrów subiektywnych, jak i obiektywnych. Zmniejszenie niedokrwienia mięśnia sercowego odnotowano na podstawie danych tomografii komputerowej emisyjnej pojedynczego fotonu mięśnia sercowego (SPECT) i ergometrii rowerowej (VEM), co pozwoliło badaczom (Sergienko I.V. et al., 2005) mówić o działaniu przeciwniedokrwiennym mięśnia sercowego i przeciwdławicowe działanie leku. Znaczący wzrost perfuzji mięśnia sercowego, spowodowany zastosowaniem Mildronianu, odnotowano jedynie podczas próby wysiłkowej, tj. niedokrwienie wywołane stresem zmniejsza się, podczas gdy łagodny środek nie wpływa na stabilne zaburzenia perfuzji.
Identyfikacja pozytywnego wpływu midronianu na perfuzję mięśnia sercowego wydaje się być bardzo ważna (Sergienko I.V. i in., 2005). Autorzy uważają, że skoro Mildronian nie zwiększa przepływu krwi w mięśniu sercowym, jego wpływ na perfuzję można wytłumaczyć założeniem, że wzrost produkcji ATP pod wpływem Mildronianu prowadzi do wzrostu wychwytu 99m Tc-MIBI (metoksyizobutylozonitryl) przez kardiomiocyty (na podstawie badania obszaru ubytku perfuzyjnego i jego głębokości metodą SPECT).
Dane dotyczące stosowania leku w celu zwiększenia skuteczności leczenia zawału mięśnia sercowego u pacjentów z cukrzycą są bardzo interesujące dla zrozumienia farmakodynamiki klinicznej łagodnego leku, co zostało przekonująco wykazane na dużej grupie pacjentów (Ushakov O.V., 2007). ), jak również u osób po udarze niedokrwiennym (Vinnichuk S.M., 1991).
Aby zrozumieć wpływ Mildronianu jako modulatora niektórych endogennych mechanizmów kardioprotekcji, przeprowadzono badania molekularnych mechanizmów jego działania na poziomie uniwersalnych kaskad sygnalizacyjnych komórek – cyklazy adenylanowej i polifosfoinozytydu mobilizującego wapń (symbol C 1 i C 2, odpowiednio). My (Frantsuzova S.B. i in., 2002) badaliśmy wpływ łagodnego kwasu arachidonowego na reakcje, w tym agregację płytek krwi, niektóre rodzaje aktywności komórek immunokompetentnych, ruchliwość leukocytów wielojądrzastych, aktywność enzymatycznej kaskady utleniania kwasu arachidonowego i późniejsze uwalnianie produktów z komórek, a także aktywność kurczliwą mięśni gładkich. Podejścia te odpowiednio odzwierciedlają równowagę aktywności C1 i C2 (Kukhar VP i in., 1991).
Badanie Mildronianu jako potencjalnego modulatora właściwości reologicznych krwi wykazało, że w przypadku stymulacji płytek krwi szczura trombiną, Mildronian wykazuje niewielkie, choć zależne od dawki, ale nieistotne działanie hamujące. Stopień zmniejszenia szybkości agregacji praktycznie pokrywa się z danymi dotyczącymi blokera kanału Ca2+, nifedypiny (Nirop M. i in., 1988). Może to wskazywać na tożsamość punktów działania leków. Możliwe jest, że działanie Mildronianu jest związane z jego wpływem na kanały Ca2+ płytek krwi, o których wiadomo, że odgrywają znaczącą rolę w aktywującym działaniu trombiny na komórki.
Wpływ łagodnydronianu na indukowaną ADP agregację płytek krwi u królika jest znacząco różny od wpływu agregacji płytek krwi u szczura indukowanej trombiną. Charakterystyczne jest, że w wystarczająco niskim stężeniu lek praktycznie nie działa. Jednocześnie w najwyższym badanym stężeniu (1x10 -4 mol/dm 3) łagodny środek wykazuje silne działanie antagonistyczne. Stwierdzono zmianę przepuszczalności światła zawiesiny płytek krwi w wyniku ich agregacji pod wpływem ADP oraz zmianę tego procesu pod wpływem Mildronianu. Wraz ze spadkiem szybkości agregacji lek zmniejsza wielkość początkowego skoku przepuszczalności światła związanego ze zmianą kształtu komórek.
Wiadomo, że dihydropirydynowe blokery kanału Ca mogą hamować agregację płytek krwi spowodowaną aktywacją receptorów α2-adrenergicznych. Niewykluczone, że nawet w przypadku zastosowania łagodnego środka oddziałuje on z niektórymi celami innymi niż kanał Ca 2+. Z drugiej strony możliwe jest, że Mildronian jest zarówno blokerem wnikania Ca +2 do płytek krwi, jak i silnym inhibitorem innych ogniw w łańcuchu przekazywania sygnału, co odróżnia go od szeregu „czystych” blokerów kanału Ca 2+, takich jak skuteczniejszy inhibitor aktywności funkcjonalnej płytek krwi.
Immunomodulacyjne działanie midronianu badano na modelu tworzenia rozet mysich limfocytów T z erytrocytami barana. Zgodnie z uzyskanymi wynikami, midroronian ma wyraźny efekt immunosupresyjny. Maksymalny efekt obserwuje się przy stężeniu Mildronianu 1 x 10-6 mol/dm 3 (spadek liczby komórek tworzących rozety o 48% w porównaniu z kontrolą); jednocześnie przy stężeniach 1 x 10-5 i 1 x 10-8 mol/dm 3 wskaźnik ten pozostaje dość wysoki (odpowiednio 42 i 35%).
Wzrost aktywności hamującej wraz ze spadkiem stężenia midronianu może wskazywać na złożoność mechanizmów leżących u podstaw immunosupresyjnego działania leku. Fakt ten świadczy o politropowym działaniu midronianu w obrębie szlaków sygnałowych komórki, gdyż przy różnych stężeniach głównym celem mogą być różne, w tym wewnątrzkomórkowe, elementy tych szlaków, ilościowo odmiennie wpływając na efektywność transmisji sygnału przy zachowaniu jakościowo ogólnego kierunek efektu.
Zdolność midronianu do wpływania na podstawową aktywność układów sygnalizacyjnych leukocytów oceniano na modelu chemokinezy tych komórek, a działanie leku w warunkach transmisji sygnału zewnętrznego przez C2 oceniano na modelu chemotaksji stymulowanej przez fMLP - formylo-metionylo-leucylo-fenyloalanina. Uzyskane wyniki wskazują, że midronian ma wyraźny wpływ hamujący zarówno na niestymulowaną, jak i stymulowaną ruchliwość leukocytów wielojądrzastych (PMNL). W tym przypadku maksymalny efekt osiąga się przy stężeniu leku 1 x 10 -7 mol / dm 3 (spadek chemokinezy i chemotaksji odpowiednio o 79 i 53%).
Badania wpływu Mildronianu na uwalnianie leukotrienu (LT)C4 z makrofagów wysięku otrzewnowego szczurów wykazały, że lek tylko w najwyższym z badanych stężeń (1x10 -5 mol/dm3) zmniejsza uwalnianie LTC4 z makrofagów o 38% (Tabela 8). Fakt ten, jak się wydaje bardzo istotny, wskazuje na hamowanie przez Mildronian biosyntezy LTC4 z endogennego kwasu arachidonowego, gdyż trudno przyjąć, że obserwowany spadek uwalniania LTC4 wynika jedynie ze zmniejszenia szybkości jego transportu przez Błona komórkowa.
Tym samym dane eksperymentalne pozwoliły zidentyfikować inny punkt działania midronianu w obrębie C2, a mianowicie wymianę arachidonianu na szlaku lipooksygenazy.
Generalnie wyniki tych badań wskazują, że midronian jest przedstawicielem grupy środków farmakologicznych - inhibitorów polifosfoinozytydowego systemu sygnalizacji komórkowej o wyraźnej politropii działania. Sugeruje to, że bezpośrednie efekty metaboliczne Mildronianu, w szczególności jego wpływ na metabolizm lipidów, mogą być pośredniczone przez działanie „sygnalizacyjne” leku, ponieważ kontrola metabolizmu lipidów przez systemy sygnalizacji komórkowej jest ogólnie uznanym faktem.