रोग प्रतिकारशक्तीचा सिद्धांत. शरीराच्या रोगप्रतिकारक प्रतिसादांमध्ये फागोसाइटोसिस

साहित्यात फागोसाइटोसिसचे प्रमाण मोजण्यासाठी मोठ्या संख्येने पद्धती वर्णन केल्या आहेत. या पुस्तकाचे खंड आम्हाला त्या सर्वांचे तपशीलवार वर्णन करण्याची परवानगी देत नाही, म्हणून आम्ही केवळ काही वर्णन करण्यापुरतेच मर्यादित राहू.

साहित्य आणि उपकरणे

कार्य करण्यासाठी, आपल्याकडे असणे आवश्यक आहे:

सायट्रेटेडएक्सट्रोज अँटीकोआगुलंट: 8 ग्रॅम साइट्रिक ऍसिड. 22 ग्रॅम ट्रायसब्स्टिट्यूट सोडियम सायट्रेट (दोन-पाणी), 24.5 ग्रॅम ग्लुकोज 1 लिटर पाण्यात विरघळतात;

डेक्स्ट्रोसोडेक्सट्रान द्रावण: 4.5 ग्रॅम NaCl, 25 ग्रॅम ग्लुकोज, 30 ग्रॅम डेक्सट्रान (rel. mol. wt. 500,000) 1 l मध्ये;

अमोनियम क्लोराईड द्रावण: 9 भाग 0.83% अमोनियम क्लोराईड, 1 भाग Tris-HCl बफर pH 7.2 (20.6 g/l);

फिकॉलचे मिश्रण - विझोट्रास्ट: फिकॉलचे 9 ग्रॅम, व्हिझोट्रास्टचे 20 मिली, बिडस्टिल्ड एच 2 0 100 मिली, घनता 1.077;

β-glucuronidase साठी सब्सट्रेट: 31.5 mg p-nitrophenyl-β-glucuronide आणि 100 μm Triton X 100 100 ml 0.05 M सोडियम एसीटेट बफर pH 5 मध्ये विसर्जित केले जातात;

मायलोपेरॉक्सिडेस डेफिशियन्सी अभिकर्मक: फिक्सेटिव्ह (90 मिली अॅबसोल्युट इथेनॉलसह 10 मिली 37% फॉर्मल्डिहाइड), सब्सट्रेट सोल्यूशन (100 मिली 30% ईडीटीए, 0.3 ग्रॅम बेंझिडाइन क्लोराईड, 0.038 ग्रॅम ZnS0 4 x7H 2 0, 0.0 मिली लिटर पाणी 3 C00Nax3H 2 0, 0.7 मिली 3% H 2 0 2); 1.0 M NaOH चा pH 6.0 वर आणा.

व्यावसायिक अभिकर्मक:

एफएसबी, हँकचे सोल्यूशन आणि ईगल-एमईएम माध्यम (स्टेट इन्स्टिट्यूट फॉर इम्यून प्रिपरेशन्स अँड न्यूट्रिएंट मीडिया, बर्लिन-वेइसेंसी, जीडीआर);

हेपरिन (5000 IU/mg) (Gedeon Richter, Hungary);

गोवाइन भ्रूणांचे सीरम (फ्लो लॅबोरेटरीज, यूएसए, दुसरी कंपनी वापरली जाऊ शकते);

Visotrast (VEB Fahlberg सूची, Magdeburg, GDR);

इन्फुकोल (VEB Serumwerk Bernburg, GDR);

डेक्सट्रान, फिकॉल (फार्मेसिया, स्वीडन);

कोलोइडल कार्बन Сl1/143a (वॅगनर, पेलिकनवेर्के, जर्मनी);

Diisodecyl phthalate, paradioxane (Coleman, Matheson and Bell, USA);

ट्रायटन एक्स 100 (सर्वा, जर्मनी, दुसरी कंपनी शक्य आहे);

ऑइल रेड ओ (अलाईड केमिकल कॉर्प., मॉरिसटाउन, एनवाय, यूएसए);

Iaranitrophenyl-β-glucuronide (सिग्मा, यूएसए);

Safranin O (फिशर सायंटिफिक लॅब., शिकागो, यूएसए);

पॉलीस्टीरिन मणी, नळ्या (नंक, डेन्मार्क);

ग्रिड F 905 (VEB Orvo Wolfen, GDR).

फॅगोसाइट्स मिळवणे

मानवी ग्रॅन्युलोसाइट्सच्या अलगावबद्दल आवश्यक माहिती "प्रतिरक्षा प्रणालीच्या पेशींचे पृथक्करण" या अध्यायात मिळू शकते; पेरिटोनियल मॅक्रोफेज मिळविण्यासाठी, "मॅक्रोफेजेस आणि मोनोसाइट्सची लागवड" आणि "स्प्लीओसाइट्सच्या निलंबनापासून मॅक्रोफेजचे पृथक्करण" विभाग पहा. या समस्येचा अनेक कामांमध्ये तपशीलवार विचार केला जातो.

याव्यतिरिक्त, खालील पद्धती देखील नमूद केल्या पाहिजेत:

डेक्स्ट्राँग्लुकोजच्या द्रावणात 8 मिली रक्त मिसळले जाते. नंतर 0.15 M NaCl (5 ml) मध्ये dextran 75 चे 6% द्रावण घाला. एरिथ्रोसाइट्सच्या अवसादनासाठी हे मिश्रण खोलीच्या तपमानावर 45-50 मिनिटे सोडले जाते. एस्पिरेट प्लाझ्मा. अवशिष्ट एरिथ्रोसाइट्स 0.83% अमोनियम क्लोराईड (35 मिली ते 15 मिली प्लाझ्मा) जोडून नष्ट केले जातात. 80g वर 10 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज करा, 0.15 M NaCl 0°C पर्यंत थंड झालेल्या अवक्षेपाला निलंबित करा. 800 ग्रॅम वर 10 मिनिटे अनेक अवक्षेपण आणि सेंट्रीफ्यूज एकत्र करा. पेशी बर्फावर 0.15 M NaCl मध्ये उत्तम प्रकारे ठेवल्या जातात (हे माध्यम बफर केलेल्या माध्यमापेक्षा अधिक योग्य आहे द्विसंयोजक केशन्स ज्यामुळे पेशी एकत्र चिकटतात);

जर फागोसाइटोसिसची वस्तु यीस्ट असेल तर, अमोनियम क्लोराईड उपचाराची पायरी वगळली जाऊ शकते, कारण लाल रक्तपेशी प्रक्रियेत व्यत्यय आणत नाहीत. मोनोन्यूक्लियर पेशी खालीलप्रमाणे मिळू शकतात: हेपरिनाइज्ड रक्त 15% ग्लुकोज असलेल्या गरुड माध्यमाच्या 1/3 प्रमाणात मिसळले जाते, फिकॉल - व्हिसोट्रास्टच्या मिश्रणाच्या थरावर स्तरित केले जाते आणि 400 ग्रॅम वर 20 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज केले जाते. मोनोन्यूक्लियर पेशींचा अंश पाश्चर विंदुकाने एस्पिरेट केला जातो, पीबीएसने दोनदा धुतला जातो आणि ईगलच्या माध्यमात (1x10 7 पेशी/मिली) निलंबन तयार केले जाते.

फागोसाइटोसिससाठी कण तयारी

Staphylococcus aureus (SG 511 किंवा 502 A), Staphylococcus epididermidis SG 475, E. coli आणि इतर एन्टरोबॅक्टेरिया, listeria, corynebacteria, Candida albicans, Saccharomyces cerevisiae च्या लाइव्ह कल्चर्सचा अधिक वापर केला जातो. घन आणि द्रव पोषक माध्यमांवर सूक्ष्मजीव 24 तास (आवश्यक असल्यास, 48 तास) वाढतात. गोळा केलेले बायोमास 0.15 M NaCl ने तीन वेळा धुतले जाते. खूप जाड निलंबन 640 एनएम वर मोजले जाते, एकाग्रता कॅलिब्रेशन वक्र वरून निर्धारित केली जाते.

सूक्ष्मजीवांची एकाग्रता दाट पोषक माध्यमांवर चाळण्याच्या पद्धतींद्वारे देखील निर्धारित केली जाते; काही प्रकरणांमध्ये, सूक्ष्मजीवांची गणना मोजणी कक्षांमध्ये केली जाऊ शकते.

जिवंत जिवाणू संस्कृतींसोबत काम करताना, एकाच टप्प्यावर संस्कृतींचा नेहमी वापर करण्याची काळजी घेतली पाहिजे. 0.01% बोवाइन सीरम अल्ब्युमिनची जोडणी सूक्ष्मजीवांच्या अस्तित्वाला प्रोत्साहन देते. तयार केलेले निलंबन 1-2 तास स्थिर राहते.

मारले गेलेले सूक्ष्मजीव संवर्धन सामान्यतः 80 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 30 मिनिटे गरम करून किंवा वाहत्या वाफेवर उपचार करून मिळवले जातात. मारले गेलेले सूक्ष्मजंतू 0.15 M NaCl सह तीन वेळा धुतले जातात, पुन्हा निलंबित केले जातात आणि निलंबनाची एकाग्रता निश्चित केली जाते.

बेकरचे यीस्ट तयार करणे: 0.5 ग्रॅम बेकरचे यीस्ट 0.15 M NaCl मध्ये निलंबित केले जाते आणि 30 मिनिटे उकळत्या पाण्याच्या बाथमध्ये ठेवले जाते. कापूस-गॉझ फिल्टरद्वारे फिल्टर करा. लाइव्ह यीस्ट वापरताना, 1.0% ग्लुकोजच्या व्यतिरिक्त ताज्या पेशी (4-5 दिवसांचे कल्चर) ईगलच्या माध्यमात तीन वेळा धुतात. सामान्यतः 10 8 आणि 10 9 पेशी/ml चे सेल सस्पेंशन वापरले जाते. घटक C5 मधील दोष शोधण्यासाठी यीस्टचा वापर चाचणी कण म्हणून केला जातो.

पॉलिस्टीरिन कणांचे निलंबन वापरणे: 1.091 μm व्यासासह पॉलीस्टीरिन कणांचे 10% जलीय निलंबन तयार करा. ते 0.15 M NaCl मध्ये 0.2% BSA सोल्यूशनसह 1 + 1 च्या प्रमाणात पातळ केले जाते, सेंट्रीफ्यूज केले जाते. 253 nm च्या तरंगलांबीवर, पॉलिस्टीरिन 1 μg/ml चे निलंबन 1.17x10 -3 चे शोषण देते.

लिपोपोलिसॅकराइडचे निलंबन वापरणे - खनिज तेलामध्ये तेल लाल O: 2 ग्रॅम तेल लाल एका पोर्सिलेन मोर्टारमध्ये 50 मिली डायसोडेसिल फॅथलेट (किंवा व्हॅसलीन तेल) मध्ये ट्रिट्युरेटेड केले जाते. 500 ग्रॅम वर 20 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज. डायऑक्सिनच्या 10 मिलीलीटरमध्ये 10 μg सुपरनाटंट अंश जोडा, 525 एनएमच्या तरंगलांबीवर ऑप्टिकल घनता मोजा. रूपांतरण घटक 0.92 आहे. दुस-या टप्प्यावर, 40 मिलीग्राम लिपोपॉलिसॅकेराइड (ई. कोलाई 0.26 बी6, इ.) 0.15 एम NaCl च्या 3 मिलीमध्ये विरघळले जाते. नंतर या मिश्रणात डायसोडेसिल सल्फेटमधील तेलकट लाल O चे 1 मिली द्रावण जोडले जाते आणि मिश्रण 90 सेकंदांसाठी निलंबित केले जाते. निलंबन ताबडतोब वापरले जाते आणि गोठवले जाऊ शकते.

फॅगोसाइटोसिस प्रतिक्रिया सेट करण्यासाठी, औपचारिक एरिथ्रोसाइट्सचा वापर चाचणी कण म्हणून केला जाऊ शकतो.

बॅक्टेरियाचे फागोसाइटोसिस, जीवाणूनाशक

लाइव्ह बॅक्टेरिया सस्पेंशन प्रयोग: 3-10 सूक्ष्मजंतू/फॅगोसाइटचे प्रमाण सहसा वापरले जाते. एकूण 2 मिली वॉल्यूममध्ये, 1x10 6 फॅगोसाइट्स 3x10 6 - 1x10 7 सूक्ष्मजंतूंसह मिसळले जातात. प्रॅक्टिसमध्ये, 1 मिलीलीटर फागोसाइट सस्पेंशनमध्ये 1 मिली बॅक्टेरियल सस्पेंशन जोडले जाते, ज्यामध्ये हेपरिनचे 8 आययू जोडले जातात. परस्परसंवादाची वेळ सहसा 30 मिनिटे असते, काही प्रकरणांमध्ये ती जास्त असते. उष्मायनानंतर, 0.5 मिली मिश्रण घेतले जाते, हॅंकच्या द्रावणातील 0.1% जिलेटिन द्रावणातील 1.5 मिली, 0 डिग्री सेल्सिअस पर्यंत थंड केले जाते, जोडले जाते आणि 300 ग्रॅमवर 3-4 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज केले जाते. पेपेनहाइमनुसार डाग असलेल्या अवक्षेपणापासून स्मीअर तयार केले जातात. 200 सेल पहा (शक्य असल्यास तीन वेळा). फॅगोसाइटोसिसच्या टक्केवारीची गणना करा. पेशींमध्ये असलेल्या जीवाणूंच्या संख्येनुसार, फागोसाइटोसिस क्रियाकलापांच्या निर्देशांकाची गणना केली जाते: फागोसाइटाइज्ड बॅक्टेरियाची संख्या फॅगोसाइटिक पेशींच्या टक्केवारीने गुणाकार केली जाते; फॅगोसाइटोसिसची तीव्रता 1 ते 4 पर्यंतच्या संख्येद्वारे व्यक्त केली जाते.

ग्रेड 1: I-4 बॅक्टेरियासह फॅगोसाइटोज्ड
ग्रेड 2: फॅगोसाइटोज्ड 5-7 जीवाणू
ग्रेड 3: फॅगोसाइटोज्ड 8-10 जीवाणू
ग्रेड 4: 10 पेक्षा जास्त जीवाणू प्रति सेल फॅगोसाइटोज्ड

जिवंत सूक्ष्मजंतूंच्या फॅगोसाइटोसिसची पातळी निर्धारित करताना, सेल सेडमेंट आणि सुपरनेटंट अंश स्वतंत्रपणे तपासले जातात. अभ्यास केलेल्या अपूर्णांकांपैकी 0.1 मिली घन पोषक माध्यमांवर चाळणी करून जिवंत सूक्ष्मजंतूंची संख्या निश्चित केली जाते. 24 (48) तास उष्मायन केले जाते जिवाणूनाशक क्रियाकलापांची गणना करताना, असे गृहीत धरले जाते की एक बनलेली वसाहत एका जिवंत सूक्ष्मजंतूशी संबंधित आहे.

जीवाणूनाशक क्रियाकलापांच्या निर्देशित अभ्यासासाठी, रुग्ण आणि निरोगी रक्तदात्यांचे रक्त प्रतिजैविक द्रावण (पेनिसिलिन आणि स्ट्रेप्टोमायसिन / एमएलचे 5000 आययू) जोडून आणि त्याशिवाय तपासले जाते आणि बॅक्टेरियाचे नियंत्रण देखील केले जाते. नमुना रचना: 0.3 मिली हँकचे द्रावण + 0.1 मिली सामान्य सीरम 5 रक्तदात्यांकडून घेतलेले रक्त + 0.5 मिली ल्युकोसाइट सस्पेंशन (10 7 पेशी / मिली) + 0.1 मिली मायक्रोबियल सस्पेंशन (10 6 सूक्ष्मजीव/मिली). प्रति नमुन्यात प्रतिजैविकांचे द्रावण 0.02 मिली मध्ये जोडले जाते. 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात नमुने उबवा आणि 20 मिनिटे, 1.5 तास आणि 3 तासांनंतर सूक्ष्मजंतूंची संख्या निश्चित करा. हे करण्यासाठी, प्रत्येक नमुन्यातून 0.1 मिली घ्या, निवडलेल्या एलिकोट्सला हँकच्या द्रावणाने 10, 100 आणि 1000 वेळा पातळ करा आणि गरम केलेल्या आगरला लावा. काहीवेळा, विशेषत: प्रतिजैविक जोडले गेले असल्यास, सूक्ष्मजंतूंच्या अचूक मोजणीसाठी इंटरमीडिएट डायल्युशन्स तयार केले जातात (उदाहरणार्थ, 0.2 मिली नमुन्यात 5 मिली हँकच्या द्रावणात मिसळले जाते, 450 ग्रॅमवर 5 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज केले जाते, वर्षाव विरघळला जातो. 1.9 मिली पीबीएस, आगरवर लागू) . जर तुम्हाला बॅक्टेरियोलॉजिकल अभ्यासाचा कालावधी कमी करायचा असेल, तर तुम्ही ऍक्रिडाइन यलो स्टेनिंगचा वापर करून फ्लोरोसेन्सद्वारे सेलमधील सूक्ष्मजंतू निर्धारित करू शकता.

बेकरच्या यीस्टचे फॅगोसाइटोसिस: 0.15 M NaCl मध्ये 10 9 पेशी/मिली निलंबन तयार करा. रुग्णाच्या प्लाझ्माच्या 0.1 मिली निलंबनात 0.1 मिली मिसळा, 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 30 मिनिटे उबवा, 0.2 मिली (10 6) पीएमएनएल घाला, 30 मिनिटे उष्मायन करा. अलिकोट्स 5 ते 30 मिनिटांच्या अंतराने घेतले जातात. 100 PMN मोजले जातात आणि प्रति सेल कॅप्चर केलेल्या यीस्ट कणांची संख्या निर्धारित केली जाते. खालील बदल ज्ञात आहेत: गिनी पिग सीरमच्या 50 μl पर्यंत, चाचणी सीरमचे 50 μl जोडा (पूर्वी ग्लुकोजसह ईगलच्या माध्यमासह 1 + 1 च्या प्रमाणात पातळ केले गेले होते), ल्युकोसाइट्सचे निलंबन 50-200 μl जोडा (10). 7 सेल्स/मिली), व्हॉल्यूम 450 μl पर्यंत समायोजित करा आणि ग्लुकोजसह मध्यम सुईने 30 मिनिटे 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात इनक्यूबेट करा. नंतर 50 μl यीस्ट सस्पेंशन (10 8 पेशी/मिली) घाला, मिक्स करा, 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 40 मिनिटे उबवा. 50 μl L-75 Se-methionine (एकूण क्रियाकलाप 100 kBq) घाला, मिक्स करा आणि 37 °C वर 1 तास उबवा. 1000 ग्रॅम वर 5 मिनिटांसाठी सेंट्रीफ्यूगेशनद्वारे पेशींचा अवक्षेप केला जातो, ते पीबीएसने दोनदा धुतले जातात, रेडिओएक्टिव्हिटी गामा काउंटरवर मोजली जाते. फॅगोसाइटोसेड यीस्टची टक्केवारी सूत्रानुसार मोजली जाते:

खनिज तेलामध्ये तेल लाल रंगाचे द्रावण वापरून फॅगोसाइटोसिस: ०.२ मिली कण सस्पेन्शन ०.८ मिली सेल सस्पेन्शन ३७ डिग्री सेल्सिअस पर्यंत गरम केले जाते. उष्मायनाच्या 5 मिनिटांनंतर, 0.15 M NaCl द्रावणाचे 6 मिली 0°C पर्यंत थंड केले जाते ज्यामध्ये 126 μg/l N-ethylmaleimide (कण पकडणे थांबवण्यासाठी) जोडले जाते. 250 ग्रॅम वर 10 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज करा. सुपरनेटंट अंश टाकून दिला जातो, NaCl आणि N-ethylmaleimide (वर पहा) च्या द्रावणात अवक्षेपण पुन्हा केले जाते, पेशी दोनदा धुतल्या जातात. पेशी अल्ट्रासाऊंडसह lysed आहेत, तेल लाल प्रकाशीत आहे. डायऑक्सेन 1 मिली घाला. 500 ग्रॅम वर 15 मिनिटांसाठी सेंट्रीफ्यूज केले, शुद्ध डायऑक्सेनच्या विरूद्ध 525 एनएम तरंगलांबीवर ऑप्टिकल घनता मोजा. फॅगोसाइटोसिस (IF) ची डिग्री 10 7 पेशींद्वारे प्रति मिनिट शोषले जाणारे खनिज तेल (मिग्रॅ) म्हणून परिभाषित केले जाते. गणना करण्यासाठी आपण खालील सूत्र वापरू शकता:

मॅक्रोफेजच्या मोनोलेयरमध्ये फॅगोसाइटोसिसचा अभ्यास:

1. टप्पा: 2 मिली सेल सस्पेंशन (200,000 पेशी/मिली) निर्जंतुकीकरण पॉलीस्टीरिन ट्यूबमध्ये जोडले जातात. 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 5 तास लसीकरण करा, नंतर ईगलच्या माध्यमाने धुवा. 10% निष्क्रिय (30 मिनिटे, 56 °C) गोवाइन भ्रूणांचे सीरम असलेले 2 मिली कल्चर माध्यम चाचणी ट्यूबमध्ये जोडले जाते, 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात उबवले जाते.

2. फेज A: सूक्ष्मजंतूंचे निलंबन (3-10/मॅक्रोफेज) सादर केले जाते, 37 डिग्री सेल्सियस तापमानात 30-60 मिनिटे उबवले जाते, नॉन-फॅगोसाइटोज्ड सूक्ष्मजंतू काढून टाकण्यासाठी माध्यमाच्या 3 मिली भागांसह नळ्या 6 वेळा धुवल्या जातात. 1 भाग ग्लेशियल ऍसिटिक ऍसिड आणि 3 भाग मिथेनॉलच्या मिश्रणाने त्वरित निराकरण करा. मे नुसार तयारी डाग - ग्रिनवाल्ड, पेशी मोजा.

फेज बी: इंट्रासेल्युलर जिवंत जीवाणूंचे निर्धारण. ऑपरेशन्सचा क्रम फिक्सेशन स्टेजच्या आधी फेज ए प्रमाणेच आहे. धुतल्यानंतर, माध्यमाचे सर्व ट्रेस काळजीपूर्वक काढून टाका. पेशी नष्ट केल्या जातात, ज्यासाठी बोवाइन सीरम अल्ब्युमिन (4°C) च्या 0.01% निर्जंतुकीकरण द्रावणात 2 मिली जोडले जाते, वारंवार हलवले जाते. 20 मिनिटांनंतर बहुतेक पेशी नष्ट होतात. सोडलेले जीवाणू दाट पोषक माध्यमांवर चाळणी करून निर्धारित केले जातात.

एरिथ्रोसाइट्सचे फॅगोसाइटोसिस: पीबीएसच्या 5 मिली मध्ये 4x10 7 फॅगोसाइट्स 5x10 7 चाचणी एरिथ्रोसाइट्ससह मिसळा. 0 डिग्री सेल्सिअस आणि सेंट्रीफ्यूजवर थंड झालेल्या 5 मिमी फॉस्फेट बफरमध्ये 2 मिली मिश्रण स्थानांतरित करा. 420 nm च्या तरंगलांबीवर सुपरनॅटंट अंशाची ऑप्टिकल घनता मोजा. कॅलिब्रेशन वक्र वापरून सेल-फ्री टप्प्यात हिमोग्लोबिन सामग्रीमध्ये घट झाल्यामुळे फॅगोसाइटोसिसची डिग्री निर्धारित केली जाते.

क्लिअरन्स निश्चित करण्यासाठी सरलीकृत पद्धत

उंदरांमध्ये क्लिअरन्स निश्चित करण्याचे उदाहरण: प्राण्यांना इंट्रापेरिटोनली इंट्रापेरिटोनली इंजेक्ट केले जाते 5x10 7 सूक्ष्मजंतू प्रति 100 ग्रॅम वजनाच्या (0.1 मिली//100 ग्रॅम). इष्टतम डोस प्रति 100 ग्रॅम वजनाच्या 10 6 ते 10 8 पर्यंत असू शकतो. 1-2 तासांच्या अंतराने, प्रायोगिक प्राण्यांच्या प्रत्येक गटातून 3 व्यक्तींची कत्तल केली जाते; प्रयोगाचा एकूण कालावधी 16 तास. निर्जंतुकपणे हृदयातून 0.5 मिली रक्त, पेरीटोनियल द्रवपदार्थ 1 मिली, फुफ्फुस, यकृत, प्लीहा आणि मूत्रपिंड स्राव करा. पाश्चर विंदुकाने अंगाच्या ऊतीमधून सिलेंडर कापले जातात. द्रव आणि घन पोषक माध्यमांवर संवर्धन करून सूक्ष्मजीवांची संख्या निश्चित करा.

उंदरांमध्ये क्लिअरन्स निश्चित करण्याचे उदाहरण: कोलाइडल चारकोल किंवा 51 [Cr] रॅम एरिथ्रोसाइट्ससह लेबल केलेले वापरले जातात. उंदरांना (प्रति अनुभव किमान 5 व्यक्ती) 0.01 मिली कोळशाच्या सस्पेंशनसह 16 मिलीग्राम प्रति 100 ग्रॅम वजनाने इंट्राव्हेनस इंजेक्शन दिले जातात. 2 मिनिटांच्या अंतराने 15 मिनिटांच्या आत, रेट्रोऑर्बिटल स्पेसमधून 0.025 मिली रक्त घेतले जाते. निवडलेले 0.025 मिली रक्त 0.1% Na 2 C0 3 च्या 2.0 मिली द्रावणात जोडले जाते. हेमोलिसिसनंतर, कॅलिब्रेशन वक्र वापरून कोळशाची एकाग्रता 675 एनएमच्या तरंगलांबीवर रंगीतपणे निर्धारित केली जाते.

t म्हणजे मिनिटातील वेळ, C हे नमुन्यातील कार्बनचे प्रमाण आहे.

फॅगोसाइटोसिसचे योग्य मूल्य:

फागोसाइट्सची कार्यात्मक तपासणी

डीग्रॅन्युलेशन निर्धारण (क्रियाकलाप मोजमाप (β-glucuropidase): 10 7 ल्युकोसाइट्स प्लास्टिकच्या नळ्यांमध्ये 0.8 मिली पीबीएसमध्ये निलंबित केले जातात, 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 5 मिनिटे हलवले जातात. 0.2 मिली संवेदनशील एलपीएस, फ्लोरोक्रोमिक कण (एफसी 800), थंड. बर्फावर मिनिटे, 250 ग्रॅम वर 10 मिनिटे सेंट्रीफ्यूज करा सुपरनेटंट अंशातील एंझाइमची क्रिया तपासा 0.9 मिली सब्सट्रेट मिश्रणाचा 0.1 मिली तपासलेल्या अंशासह 18 तास उष्मायन करा 0.1 एम NaOH चे 2 मिली जोडा, ऑप्टिकल घनता मोजा तरंग 410 nm वर.

गणना:

(OD 410 x20)/(1.84x18) = 10 7 ल्युकोसाइट्सद्वारे 1 तासात सोडलेल्या पदार्थाच्या nmol ची संख्या, म्हणजेच degranulation ची डिग्री paranitrophenyl-β-glucuronide च्या nanomoles मध्ये व्यक्त केली जाते.

मायलोपेरॉक्सीडेसमधील दोष निश्चित करण्याची पद्धत: एच 2 0 2 च्या जैवरासायनिक निर्धाराने सर्वोत्तम परिणाम प्राप्त होतात, जे फॅगोसाइटोसिस दरम्यान चयापचयातील बदल दर्शवितात. व्यावहारिक हेतूंसाठी, हेक्सोज-मोनोफॉस्फेट शंटचे सक्रियकरण, टेट्राझोलियम नायट्रोइन कमी करणे आणि पीएमएनएल प्रथिनांना एक्सोजेनस आयोडीनचे बंधन H 2 0 2 च्या निर्मितीशी संबंधित असणे फार महत्वाचे आहे. अल्कोहोल आणि फॉर्मेलिनच्या मिश्रणासह 30 सेकंदांसाठी नियमित रक्त स्मीअर निश्चित केले जाते. डिस्टिल्ड पाण्याने धुऊन, पेरोक्सिडेजसाठी 30 सेकंदांसाठी डाग. पेरोक्सिडेस असलेल्या पेशींमध्ये, गडद निळ्या रंगात डागलेले समावेश शोधले जातात.

टेट्राझोलियम नायट्रो ब्लू (TNS) कमी करण्यासाठी चाचणी. THC सामान्य PMNL ने फॉर्मझानमध्ये कमी केले आहे. 0.1 मिली रक्त 0.1 मिली THC चे 0.1% द्रावण 0.15 M NaCl मध्ये मिसळा, 37 ° C वर 20 मिनिटे उष्मायन करा, पुन्हा चांगले मिसळा. पेशींमध्ये फॉर्मॅझनचा समावेश मायक्रोस्कोपीद्वारे निर्धारित केला जातो. परिणाम फॉर्मॅझन-पॉझिटिव्ह पेशींची टक्केवारी म्हणून व्यक्त केला जातो.

खालील पद्धत थोडी अधिक क्लिष्ट आहे: रुग्णाच्या रक्ताचा 1 थेंब कव्हरस्लिपवर लावला जातो. आर्द्र चेंबरमध्ये 37°C तापमानावर 20 मिनिटे उष्मायन करा, नंतर काच काळजीपूर्वक 0.15 M NaCl ने धुवा. THC माध्यमाचा 1 ड्रॉप असलेल्या स्लाइडवर कव्हर स्लिप ठेवा (0.5 मिली सीरम + 0.3 मिली निर्जंतुकीकरण 0.15 M NaCl + 0.6 मिली THC, वर पहा). आर्द्र चेंबरमध्ये 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 30 मिनिटे उबवा, कव्हरस्लिप काढा आणि हवा कोरडी करा. 60 सेकंदांसाठी परिपूर्ण मिथेनॉलसह निराकरण करा आणि डिस्टिल्ड पाण्याने धुवा. safranin (1 ग्रॅम safranin + 100 ml डिस्टिल्ड वॉटर + 40 ml ग्लिसरीन) सह 5 मिनिटे डाग, धुवा. फॉर्मझान-पॉझिटिव्ह पेशी मोठ्या, स्फोटासारख्या असतात आणि त्यात निळे ग्रेन्युल असतात. सहसा, तयारीमध्ये सुमारे 30% फॉर्मॅझन-पॉझिटिव्ह पेशी आढळतात.

फागोसाइटोसिसचे मूल्यांकन करण्यासाठी वरील पद्धती खूप मोठ्या प्रमाणात प्रकाशनांचा सारांश आहेत. या मुद्द्यांवर अधिक तपशीलवार माहिती संबंधित कामांमध्ये आढळू शकते.

प्रतिकारशक्ती- जीवंत शरीरे आणि अनुवांशिकरित्या परकीय माहितीची चिन्हे असलेल्या पदार्थांपासून शरीराचे संरक्षण करण्याचा हा एक मार्ग आहे.

प्रतिकारशक्ती- शरीराच्या आत्म-संरक्षणाच्या जैविक यंत्रणेची अविभाज्य प्रणाली.

प्रतिकारशक्तीच्या सहाय्याने, सर्व काही परदेशी ओळखले जाते आणि नष्ट केले जाते. एलियन - स्वतःचे नाही, पदार्थांमधील अनुवांशिक विभागणी.

कार्ये - शरीराची संरचनात्मक अखंडता राखणे. पुरवतो

होमिओस्टॅसिसचे संरक्षण
शरीराच्या कार्यात्मक संरचनात्मक अखंडतेचे संरक्षण
जीवाच्या जैविक व्यक्तिमत्त्वाचे जतन.
शरीराच्या पेशींपेक्षा अनुवांशिकदृष्ट्या भिन्न असलेल्या पेशी नष्ट होतात.

इम्यूनोलॉजी- जीवांचे विज्ञान, रोगप्रतिकारक प्रणालीचे रेणू. प्रतिकारशक्तीचे स्ट्रक्चरल फंक्शन आणि परदेशी ऍन्टीबॉडीजच्या प्रतिकारशक्तीचा अभ्यास करतो. तो रोगप्रतिकारक प्रतिसादाचा क्रम आणि त्यावर कसा प्रभाव टाकायचा याचा अभ्यास करतो.

इम्यूनोलॉजीचा विकास

संस्थापक 1883 मध्ये मेकनिकोव्हची कामे आहेत. 1897 - एहरलिचने प्रतिकारशक्तीचा विनोदी सिद्धांत तयार केला, 1908 - नोब प्राप्त झाला. सिद्धांत बक्षिसे.

प्रायोगिकदृष्ट्या, लस प्रस्तावित केल्या गेल्या आहेत (त्या गोकच्या आधी).

जनर - काउपॉक्स लस

1974 - चेचक निर्मूलन.

पाश्चर लस ही रेबीज विरुद्धची लस आहे.

प्रजाती रोग प्रतिकारशक्ती.

शरीराच्या जन्मजात जैविक वैशिष्ट्यांमुळे प्रतिकारशक्ती.

गुणधर्मांमध्ये फरक आहे

1. प्रजाती चिन्ह (प्राण्यांना मानवी रोगांचा त्रास होत नाही)

2. अनुवांशिकरित्या निर्धारित - वारसाद्वारे

3. गैर-विशिष्ट - निवडक दिशा नाही, परंतु विविध संक्रमणांविरूद्ध स्वतःला प्रकट करते

4. सक्तीचे पण निरपेक्ष नाही

प्रजातींच्या प्रतिकारशक्तीची यंत्रणा.

बाह्य अडथळेप्रजाती रोग प्रतिकारशक्ती.

त्वचा संक्रामक एजंट्स - रोगजनकांसाठी एक यांत्रिक अडथळा आहे. यात जीवाणूनाशक गुणधर्म आहेत कारण घाम आणि सेबेशियस ग्रंथींच्या रहस्यांमध्ये हायड्रोजन पेरोक्साइड तसेच युरिया, असंतृप्त फॅटी ऍसिडस्, पित्त रंगद्रव्ये, अमोनिया असतात.
श्लेष्मल त्वचा. श्लेष्मल झिल्लीचे रहस्य पृष्ठभागावरील रोगजनकांना धुवून टाकते. यामध्ये लाइसोझाइम, सेक्रेटरी अँटीबॉडीज, बॅक्टेरिया आणि व्हायरसचे अवरोधक असतात.
जीवाची शारीरिक आणि शारीरिक वैशिष्ट्ये. वरच्या श्वसनमार्गाच्या स्तंभीय एपिथेलियमचे सिलिया. मार्ग. विलंब रोगजनक, तसेच उलट्या, खोकला, शिंका येणे - या शारीरिक क्रिया आहेत. पापण्या, डोळ्यांच्या भुवया रोगजनकांच्या प्रवेशास प्रतिबंध करतात

अंतर्गत अडथळे

शरीराचा सामान्य मायक्रोफ्लोरा, श्लेष्मल त्वचा, त्वचा, विविध बायोटोप्समध्ये राहतो. हे रोगजनक आणि सशर्त रोगजनक जीवांचे विरोधी आहे. एक रोगप्रतिकारक प्रभाव आहे. यामुळे, ते अँटीबॉडीज तयार करण्यास प्रवृत्त करते. जीवनसत्त्वांचे संश्लेषण - के, बी.
सेल पडदा
हिस्टोहेमॅटिक अडथळ्यांचे कार्य. मेंदू, प्रजनन प्रणाली, डोळे यांचे संरक्षण करा.
लिम्फॉइड प्रणाली. लिम्फॉइड नोड्स आणि फॉर्मेशन्सची प्रणाली समाविष्ट आहे
ताप - तापमानात वाढ चयापचय प्रक्रिया, रक्त प्रवाह, एंजाइम, मॅक्रोफेजची क्रिया वाढवते, व्हायरस आणि बॅक्टेरियाचे पुनरुत्पादन प्रतिबंधित करते.
जेव्हा ऊतींचे नुकसान होते तेव्हा जळजळ होते. फागोसाइट्स जळजळ होण्याच्या केंद्रस्थानी धावतात. जैविक दृष्ट्या सक्रिय पदार्थ (बीएएस) सक्रिय केले जातात - सेरोटोनिन आणि हिस्टोमिन, ज्यामुळे संवहनी पारगम्यता वाढते, ज्यामुळे सूज, लालसरपणा, पदार्थ जमा होतात - अँटीबॉडीज आणि एक प्रशंसा जे रोगजनकांचा नाश सुनिश्चित करतात.
उत्सर्जन प्रणालीचे कार्य. हे गॅस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रॅक्ट, श्वसनमार्ग आणि मूत्र प्रणालीद्वारे नष्ट झालेल्या रोगजनकांपासून मुक्त होते.

प्रजातींच्या प्रतिकारशक्तीची सेल्युलर यंत्रणा.

फॅगोसाइटोसिस आणि नैसर्गिक किलर एनके पेशींची कार्ये.

फागोसाइटोसिस- फॅगोसाइट्सद्वारे परदेशी प्रतिजन कॅप्चर आणि नष्ट करण्याची प्रक्रिया.

फागोसाइटोसिसमध्ये पेशींचा समावेश होतो, ज्या खालील प्रकारांमध्ये विभागल्या जातात - मायक्रोफेजेस. ते परिधीय रक्तातील पॉलिमॉर्फोन्यूक्लियर न्यूट्रोफिल्स आहेत. मॅक्रोफेजेस - मोनोसाइट्स, फेज मॅक्रोफेज, ज्याला हिस्टिओसाइट्स म्हणतात. यकृताच्या कूपर पेशी, ऑस्टियोक्लास्ट्स - हाडांचे ऊतक, तसेच मज्जातंतूच्या ऊतींचे मायक्रोग्लियल पेशी. पडद्यावरील मॅक्रो आणि मायक्रोफेजेसमध्ये अनेक रिसेप्टर्स, एन्झाईम्स आणि उच्चारित लाइसोसोमल उपकरणे असतात.

फागोसाइटोसिसचे टप्पे

वस्तूच्या दिशेने फॅगोसाइटची हालचाल केमोटॅक्सिसद्वारे केली जाते. ही सेलची विशिष्ट रसायनाकडे निर्देशित हालचाल आहे. रिसेप्टर्सद्वारे परिभाषित गट.
फॅगोसाइट्सला वस्तूचे चिकटणे, ज्याला आसंजन आणि शोषण असे म्हणतात, जे रिसेप्टर्सच्या परस्परसंवादाद्वारे होते
ऑब्जेक्टच्या फागोसाइटद्वारे शोषण. जोडणीच्या ठिकाणी, सेल भिंत घुसते. वस्तू फॅगोसाइटमध्ये बुडविली जाते. एक फागोसोम तयार होतो, जो लाइसोसोमसह फ्यूज होऊन फॅगोलिसोसोम कॉम्प्लेक्स बनतो.
परिणाम वेगळा आहे. परिणाम पर्याय 1. वस्तूचे पचन. 2. फॅगोसाइटमधील वस्तूचे पुनरुत्पादन 3. वस्तूला फॅगोसाइटच्या बाहेर ढकलणे

पचनाची यंत्रणा

ओ-आश्रित. फागोसाइट सक्रियपणे ऑक्सिजन शोषून घेते, ऑक्सिडेटिव्ह स्फोट होतो, प्रतिक्रियाशील ऑक्सिजन प्रजाती तयार होतात, जसे की हायड्रॉक्सीलियन, सुपरऑक्सिडॅनियन, हायड्रोजन पेरोक्साइड, ज्याचा जीवाणूवर हानिकारक प्रभाव पडतो.
ऑक्सिजन स्वतंत्र. cationic प्रथिने आणि lysosomal enzymes द्वारे चालते.

फागोसाइटोसिसचे प्रकार

पूर्ण झाले - वस्तू पचवली जात आहे
अपूर्ण - जीवाणू पचत नाहीत

अपूर्ण फॅगोसाइटोसिसची यंत्रणा.

जीवाणू लायसोसोमल एन्झाईम्सला प्रतिरोधक असू शकतात, जसे की गोनोकोकी
सूक्ष्मजीव फॅगोसाइटमधून बाहेर पडू शकतात आणि गुणाकार करू शकतात, जे रिकेट्सियासाठी वैशिष्ट्यपूर्ण आहे.
बॅक्टेरिया फागोलिसोसोम्स - ट्यूबरकल बॅसिलसच्या निर्मितीमध्ये व्यत्यय आणू शकतात.

फागोसाइटोसिसचे मूल्यांकन.

फागोसाइटिक क्रियाकलापांचे मूल्यांकन करण्यासाठी, खालील निर्देशक वापरले जातात

-फॅगोसाइटोसिस टक्केवारी (पीएफ)- 100 पैकी फॅगोसाइट्सची संख्या, कार्यात्मक क्रियाकलाप दर्शविते.

स्टॅफिलोकोसी किंवा कोणत्याही कॉर्पसल्स विरूद्ध सामान्य - 60-80%

-फॅगोसाइटोसिस इंडेक्स (IF)- 100 पैकी एका फागोसाइटने पकडलेल्या जीवाणूंची संख्या. अंदाजे 6-8 जीवाणू 1 फॅगोसाइटद्वारे पकडले जातात.

साइटोकिन्स, कॉम्प्लिमेंट्स, अँटीबॉडीजच्या प्रभावाखाली फागोसाइट्सची क्रिया वाढू शकते, ज्यामध्ये ऑप्सोनिन्स आहेत. हे ऍन्टीबॉडीज आहेत जे फागोसाइटोसिससाठी जीवाणू तयार करतात. त्यांच्या उपस्थितीत, फागोसाइटोसिस अधिक सक्रिय आहे. लसीकरण केलेल्या जीवामध्ये संश्लेषित ऑप्सोनिन्स.

opsonins ची उपस्थिती opson-phagocytic index (OPI) द्वारे निर्धारित केली जाते.

OFI = रोगप्रतिकारक सीरमचे पीएफ / सामान्य सीरमचे एफपी. जर > 1, तर तेथे ऑप्सोनिन्स आहेत. ब्रुसेलोसिस असलेल्या रुग्णाला ऑप्सोनिन्स विकसित होतात. अँटिटला ब्रुसेला पकडण्यासाठी फागोसाइट्स तयार करतात. 80/20=4. जर ए< 1 человек болен.

फागोसाइट्सची कार्ये

फागोसाइटोसिस सुनिश्चित करणे
प्रतिजनांची प्रक्रिया
रोगप्रतिकारक प्रणालीच्या पेशींमध्ये प्रतिजनचे सादरीकरण आणि त्यानंतरच्या रोगप्रतिकारक प्रतिसादास चालना देणे.
बीएएसचा स्राव - जैविक दृष्ट्या सक्रिय पदार्थ. 5- पेक्षा जास्त. सायटोकिन्स, पूरक घटक, प्रोस्टॅग्लॅंडिन,

नैसर्गिक मारेकरी.

हे लिम्फोसाइट्सचे नैसर्गिक मारेकरी आहेत ज्यात टी आणि बी लिम्फोसाइट्सचे गुणधर्म नसतात, ट्यूमर पेशींवर सायटोटॉक्सिक प्रभाव असतो, व्हायरस असलेल्या पेशी असतात. त्यांच्याकडे एक विशेष प्रथिने आहे जे कॅल्शियम आयनच्या उपस्थितीत त्वरीत पॉलिमराइझ होते, सब्यूनिट्स तयार होतात जे सेल झिल्लीमध्ये एम्बेड केलेले असतात आणि एक चॅनेल तयार होतो ज्याद्वारे पाणी सेलमध्ये जाते. पेशी फुगतात, फुटतात, ज्याला सायटोलिसिस म्हणतात.

प्रजातींच्या प्रतिकारशक्तीचे विनोदी घटक

कॉम्प्लिमेंट ही रक्तातील सीरम प्रथिनांची बहुघटक प्रणाली आहे जी होमिओस्टॅसिस राखते. हे 9 घटक-अपूर्णांक एकत्र करते आणि लॅटिन सी द्वारे 1,2,3,4,5, इत्यादी निर्देशांकाने नियुक्त केले आहे. सिस्टममध्ये उपघटक С1R, C1S, C5A, C5B समाविष्ट आहेत. नियामक प्रथिने, प्रशंसा सक्रियतेमध्ये सामील असलेले घटक - गॅमा ग्लोब्युलिन, मॅग्नेशियम आणि कॅल्शियम आयन. प्रशंसा घटक निष्क्रिय स्थितीत आहेत आणि कार्यात्मक कृतीच्या प्रकटीकरणासाठी प्रशंसा प्रणाली सक्रिय करणे आवश्यक आहे. सक्रिय करण्याचे खालील मार्ग आहेत -

शास्त्रीय
पर्यायी
लेक्टिन.

क्लासिक प्रकार सक्रियकरण. सक्रियता वाढत्या कॅस्केड म्हणून पुढे जाते.

1 रेणू तुटतो, 2 रेणू सक्रिय करतो आणि असेच. अँटीजेन-अँटीबॉडी कॉम्प्लेक्सद्वारे प्रारंभ केला जातो, जो पहिल्या C1 अंशाशी संवाद साधतो, जो उपघटकांमध्ये मोडतो. C4 शी परस्परसंवाद साधतो, जो C2 शी संवाद साधतो, जो C3 सक्रिय करतो, जो C3A आणि C3B या उपघटकांमध्ये विघटित होतो, ज्यामुळे C5 सक्रिय होतो, जे C5a आणि C5b या उपघटकांमध्ये विघटित होते, C6 आणि असेच C9 पर्यंत सक्रिय होते. C6-C9 कॉम्प्लेक्स हे झिल्ली आक्रमण करणारे कॉम्प्लेक्स आहे जे झिल्लीमध्ये एम्बेड केलेले असते, एक चॅनेल तयार होते ज्याद्वारे पाणी प्रवेश करते आणि सेल लिसेस होते.

वैकल्पिक प्रकारानुसार सक्रियकरण.हे एलपीएस आणि मायक्रोबियल प्रतिजनांद्वारे ट्रिगर केले जाते, जे ताबडतोब C3 अंश सक्रिय करतात. पुढे C5 आणि C9 पर्यंत.

लेक्टिनद्वारे सक्रियकरणप्रकार मोनोस-बाइंडिंग प्रथिनेंद्वारे ट्रिगर केला जातो जो बॅक्टेरियाच्या पेशींवर मोनोस अवशेषांना बांधतो, एक प्रोटीज सक्रिय केला जातो, जो 4 था पूरक अंश क्लीव्ह करतो. नंतर C2,3 आणि पुढे C9 पर्यंत. परिणामी, प्रशंसा सक्रिय केली जाते.

सक्रियतेच्या परिणामी प्रशंसा खालील कार्ये करते

सेल lysis
फॅगोसाइटोसिसचे उत्तेजन, उदाहरणार्थ C5 अंश केमोटॅक्सिस वाढवते
वाढीव संवहनी पारगम्यता, जी उपघटकांनी प्रदान केली आहे
जळजळ प्रक्रिया वाढवते

प्रजातींच्या प्रतिकारशक्तीच्या विनोदी घटकांमध्ये एन्झाइम लायसोझाइमचा समावेश होतो, जो पेशीच्या भिंतीच्या पेप्टिडोग्लाइकनचा नाश करतो, ज्यामुळे जीवाणूंचा मृत्यू होतो आणि मॅक्रोफेजेस आणि मोनोसाइट्सद्वारे संश्लेषित केले जाते. रक्त, शरीरातील द्रव, लाळ आणि अश्रु द्रवपदार्थ जास्त

तीव्र टप्प्यातील प्रथिने जसे की सी प्रतिक्रियाशील प्रथिने. हा 5 समान उपयुनिट्सचा एक मोठा प्रोटीन रेणू आहे - पेंट्रोक्सिन. हे जिवाणू सेल भिंत पदार्थ एक आत्मीयता आहे. बॅक्टेरियाचे ऑप्टोनायझेशन प्रदान करते, शास्त्रीय मार्गासह प्रशंसा सक्रिय करते

अंतर्जात पेप्टाइड्स ज्यात प्रतिजैविक क्रिया असते ते जीवाणू नष्ट करू शकतात

इंटरफेरॉन, रक्ताच्या सीरमचे संरक्षणात्मक प्रथिने, त्यापैकी, तीव्र टप्प्यातील प्रथिने व्यतिरिक्त, प्रोपरडिन, बीटा लाइसिन, मोनोबाइंडिंग प्रोटीन वेगळे आहेत.

फागोसाइटोसिसचे सार काही शब्दांमध्ये वर्णन केले जाऊ शकते. या प्रक्रियेत, विशेष फागोसाइट पेशी "गणना करतात", शरीरात प्रवेश केलेले हानिकारक कण खातात आणि पचवतात, प्रामुख्याने संक्रमण. इंद्रियगोचर उद्देश संभाव्य रोगजनकांच्या, toxins आणि त्यामुळे वर आम्हाला संरक्षण आहे. आणि फॅगोसाइटोसिसची यंत्रणा नेमकी कशी चालते? हे अनेक टप्प्यांतून जाते, ज्याची खाली अधिक तपशीलवार चर्चा केली जाईल.

फॅगोसाइटोसिसचे टप्पे:

केमोटॅक्सिस

एक दुर्भावनायुक्त वस्तू शरीरात प्रवेश करते आणि थोड्या काळासाठी तेथे कोणाचे लक्ष नाही. ही वस्तू, मग ते जीवाणू असो, परदेशी शरीर असो किंवा इतर काही असो, विशेष पदार्थ (केमोएट्रॅक्टंट्स) सोडते आणि थेट रक्त किंवा ऊतींच्या संपर्कात येते. हे सर्व शरीराला त्याच्या आत आक्रमक असल्याची जाणीव करून देते.

जैवरासायनिक प्रतिक्रियांचे कॅस्केड उद्भवते. फॅगोसाइटोसिसच्या पहिल्या टप्प्यात, मास्ट पेशी रक्तप्रवाहात विशेष संयुगे सोडतात ज्यामुळे दाहक प्रतिक्रिया निर्माण होते. प्रक्षोभक प्रक्रियेची सुरुवात मॅक्रोफेज आणि इतर फागोसाइट पेशींना विश्रांतीच्या स्थितीतून “जागृत” करते. न्यूट्रोफिल्स, केमोएट्रॅक्टंट्सची उपस्थिती पकडतात, रक्त त्वरीत ऊतींमध्ये बाहेर पडतात आणि दाहक फोकसकडे स्थलांतर करण्यासाठी घाई करतात.

त्याचे वर्णन करणे कठीण आहे आणि त्याची कल्पना करणे त्याहूनही कठीण आहे, परंतु शरीरात रोगजनकांच्या प्रवेशामुळे वास्तविक डोमिनो इफेक्ट सुरू होतो, ज्यामध्ये सेल्युलर आणि सबसेल्युलरमध्ये होणार्‍या शेकडो (!) विविध शारीरिक घटनांचा समावेश होतो. पातळी फागोसाइटोसिसच्या या टप्प्यावर रोगप्रतिकारक शक्तीच्या स्थितीची तुलना मधमाशीच्या बिघडलेल्या पोळ्याच्या स्थितीशी केली जाऊ शकते, जेव्हा त्याचे असंख्य रहिवासी गुन्हेगारावर हल्ला करण्याच्या तयारीत असतात.

न्यूट्रोफिल - स्थलांतरित फॅगोसाइट

फागोसाइटोसिसचा क्रम दुसऱ्या टप्प्यात, आसंजन प्रतिक्रियासह चालू राहतो. योग्य ठिकाणी पोहोचलेले फागोसाइट्स त्यांची प्रक्रिया रोगजनकापर्यंत वाढवतात, त्याच्या संपर्कात येतात आणि ते ओळखतात. ते ताबडतोब हल्ला करण्याची घाई करत नाहीत आणि प्रथम "अनोळखी" बद्दल चुकीची खात्री करून घेण्यास प्राधान्य देतात. फागोसाइट झिल्लीच्या पृष्ठभागावर विशेष रिसेप्टर्सच्या मदतीने हानिकारक एजंटची ओळख होते.

पडदा सक्रियकरण

फागोसाइटोसिसच्या तिसर्‍या टप्प्यात, डिफेंडर पेशींमध्ये अदृश्य प्रतिक्रिया उद्भवतात जे त्यांना रोगजनक पकडण्यासाठी आणि नष्ट करण्यासाठी तयार करतात.

विसर्जन

फागोसाइट झिल्ली हा एक द्रव, प्लास्टिक पदार्थ आहे जो आकार बदलू शकतो. सेलला दुर्भावनायुक्त वस्तू आढळते तेव्हा ते काय करते. फोटो दर्शविते की फागोसाइट त्याचे "मंडप" परदेशी कणापर्यंत वाढवते. मग तो हळूहळू तिच्याभोवती पसरतो, तिच्यावर रेंगाळतो आणि तिला पूर्णपणे पकडतो.

फागोसाइट रोगजनकापर्यंत प्रक्रिया वाढवते

फागोसोम निर्मिती

जेव्हा फॅगोसाइट सर्व बाजूंनी कण झाकतो तेव्हा त्याचा पडदा बाहेरून बंद होतो आणि आतमध्ये आक्रमण केलेल्या वस्तूसह एक बंद बबल सेलच्या आत राहतो. अशा प्रकारे, पेशी कण गिळताना दिसते. या वेसिकलला फागोसोम म्हणतात.

फागोलिसोसोमची निर्मिती (फ्यूजन)

फागोसाइटोसिसचे इतर टप्पे चालू असताना, फागोसाइटच्या आत, त्याची शस्त्रे वापरण्यासाठी तयार केली जात होती - सेलचे "पाचक" एन्झाइम असलेले लाइसोसोम ऑर्गेनेल्स. एक जीवाणू किंवा इतर हानीकारक वस्तू डिफेंडर सेलद्वारे पकडल्याबरोबर, लाइसोसोम त्याच्याकडे जातात. त्यांचे पडदा कणाला आच्छादित असलेल्या शेलमध्ये विलीन होतात आणि त्यांची सामग्री या "पिशवी" मध्ये ओतली जाते.

फागोसाइटोसिसच्या संपूर्ण यंत्रणेतील हा सर्वात नाट्यमय क्षण आहे. पकडलेली वस्तू फागोसाइटद्वारे पचली जाते आणि तोडली जाते.

क्लीवेज उत्पादने काढून टाकणे

मारले गेलेले जिवाणू किंवा इतर पचलेले कण जे काही उरते ते सेलमधून काढून टाकले जाते. पूर्वीचे फागोलिसोसोम, जी डिग्रेडेशन उत्पादनांसह एक थैली आहे, फॅगोसाइटच्या बाह्य झिल्लीकडे जाते आणि त्यात विलीन होते. त्यामुळे शोषलेल्या वस्तूचे अवशेष सेलमधून काढून टाकले जातात. फॅगोसाइटोसिसचा क्रम पूर्ण होतो

फॅगोसाइटोसिसचे टप्पे:

केमोटॅक्सिस

आसंजन

पडदा सक्रियकरण

विसर्जन

फागोसोम निर्मिती

फागोलिसोसोमची निर्मिती (फ्यूजन)

मारणे

क्लीवेज उत्पादने काढून टाकणे

मारले गेलेले जिवाणू किंवा इतर पचलेले कण जे काही उरते ते सेलमधून काढून टाकले जाते. पूर्वीचे फागोलिसोसोम, जी डिग्रेडेशन उत्पादनांसह एक थैली आहे, फॅगोसाइटच्या बाह्य झिल्लीकडे जाते आणि त्यात विलीन होते. त्यामुळे शोषलेल्या वस्तूचे अवशेष सेलमधून काढून टाकले जातात. फागोसाइटोसिसचा क्रम पूर्ण झाला.

फॅगोसाइटोसिसचे यश काय ठरवते?

अरेरे, नेहमी वर्णन केलेली संपूर्ण प्रक्रिया घड्याळाच्या काट्यासारखी जात नाही. काही प्रकरणांमध्ये, रोगकारक रोग प्रतिकारशक्तीच्या फागोसाइटिक दुव्यापेक्षा मजबूत असतो, तो संरक्षणावर मात करतो आणि व्यक्ती आजारी पडते. मेकनिकोव्हने हे देखील लक्षात घेतले की जर बर्याच बुरशीजन्य पेशी अळ्या आणि कृमींवर कार्य करतात, तर संक्रमित जीव मरतात.

अपयशाचे आणखी एक संभाव्य कारण म्हणजे अपूर्ण फॅगोसाइटोसिस. काही (बहुतेकदा अतिशय धोकादायक आणि संसर्गजन्य) रोगजनकांना फागोसाइट्सद्वारे पचनापासून संरक्षित केले जाते. परिणामी, ते फक्त त्यांच्या आत येतात, तेथे राहतात आणि विकसित होतात, इतर प्रतिकारशक्ती संरक्षण घटकांसाठी प्रवेश नसतात. तथापि, एक "सामान्य" रोगप्रतिकारक प्रणाली स्वतःच्या पेशींवर हल्ला करणार नाही, हे माहित नाही की त्यांच्या आत एक धोकादायक रोगजनक आहे ...

"अयशस्वी" फॅगोसाइटोसिस टाळण्यासाठी आणि सर्वोत्तम रोगप्रतिकारक संरक्षण प्रदान करण्यासाठी, औषध घेण्याची शिफारस केली जाते. हस्तांतरण घटक. त्याचे माहिती रेणू रोगप्रतिकारक पेशींना विविध रोगजनकांशी कसे वागावे आणि त्यांच्यापासून मुक्त कसे व्हावे याबद्दल माहिती प्रसारित करतात. परिणामी, रोगप्रतिकारक शक्तीचे कार्य चांगले होत आहे आणि यामुळे अद्याप उद्भवलेल्या रोगांवरील प्रतिकारशक्ती वाढते आणि आधीच विकसित झालेल्या रोगांना बरे करण्याची प्रभावीता वाढते.

फागोसाइटोसिस ही फायलोजेनेटिकली सर्वात प्राचीन संरक्षणात्मक प्रक्रिया आहे जी रोगप्रतिकारक प्रणालीच्या विशेष पेशींद्वारे केली जाते (मेक्निकोव्ह 1883, 1892; ग्रीनबर्ग, 1999). I. I. मेकनिकोव्ह यांनीच प्रथमच तुलनात्मक मॉर्फोफिजियोलॉजिकल अभ्यासात प्राण्यांच्या संसर्गास प्रतिकार निर्माण करण्यात या रोगप्रतिकारक संरक्षण यंत्रणेची महत्त्वाची भूमिका सिद्ध केली.

कशेरुकांमधील व्यावसायिक फागोसाइट्समध्ये प्रामुख्याने न्यूट्रोफिल्स (पॉलीमॉर्फोन्यूक्लियर ल्युकोसाइट्स, मायक्रोफेजेस) आणि मोनोसाइट्स/मॅक्रोफेजेस (मोनोन्यूक्लियर, मोनोन्यूक्लियर फॅगोसाइट्स) यांचा समावेश होतो. या पेशी मॉर्फोफिजियोलॉजिकल आणि बायोकेमिकली सूक्ष्मजीव शरीरे आणि 0.5 µm व्यासापेक्षा मोठे कण (मायकोप्लाझ्मा गटातील सर्वात लहान जीवाणूंचा आकार) शोषून घेतात आणि निष्क्रिय करतात. फॅगोसाइटोसिस आणि पेशींच्या एंडोसाइटिक प्रतिक्रियांच्या इतर प्रकारांमधील फरक ऍक्टिन साइटोस्केलेटनच्या या प्रक्रियेत अनिवार्य सहभाग सूचित करतो, जे मायक्रोफिलामेंट्सच्या रूपात, सूक्ष्मजीव आणि कण कॅप्चर करणारे स्यूडोपोडियामध्ये प्रवेश करते. फागोसाइटोसिसला त्याच्या कोर्ससाठी विशिष्ट तापमान परिस्थितीची आवश्यकता असते (t> +13-18 °C) आणि पृष्ठवंशीयांमध्ये कमी तापमानात होत नाही. न्युट्रोफिल्स आणि मोनोसाइट्स/मॅक्रोफेजेस सोबत, अपरिपक्व डेन्ड्रिटिक पेशी, इओसिनोफिल्स, मास्ट पेशी, उपकला पेशी, प्लेटलेट्स आणि काही लिम्फोसाइट्स देखील फॅगोसाइटोसिसमध्ये भाग घेतात.

सूक्ष्मजीवांसह फॅगोसाइटचा संपर्क सायटोप्लाज्मिक झिल्ली, सायटोस्केलेटन, रोगजनक मारण्याच्या यंत्रणेचे सक्रियकरण, साइटोकाइन्स, केमोकाइन्स आणि रेणूंचे उत्पादन जे प्रतिजनांच्या सादरीकरणात महत्त्वाची भूमिका बजावतात (अंडरहिल आणि ओझिनस्की) यांच्याशी संबंधित सेल्युलर प्रतिक्रिया सुरू करतात. .

फागोसाइटोसिस रिसेप्टर्स

पेशी	रिसेप्टर	लक्ष्य	लिगँड
ल्युकोसाइट्स	FcyRs	रोगप्रतिकारक संकुले pentraxin-opsonized zymosan (यीस्ट)	इम्युनोग्लोबुलिन एसएपी, एसआरव्हीचे सीएच-डोमेन
न्यूट्रोफिल्स, मोनोसाइट्स/ मॅक्रोफेज	CR1 (CD35)	पूरक-ऑप्सोनाइज्ड बॅक्टेरिया आणि बुरशी	C3b, C4b,
खूप	CR3 (CD1 lb- CD18, oMp2, Maci)	पूरक-ऑप्सोनाइज्ड बॅक्टेरिया आणि बुरशी ग्राम-नकारात्मक जीवाणू बोर्डेटेला पेर्टुसिस	NPS, C3d LPS हेमाग-ग्लुटिनिन पी-ग्लायकॅनचे पट्टे
macrophages, dendritic पेशी	CR4 (CD1lc-CD18)	एम. क्षयरोग	अनोळखी
मॅक्रोफेज	CD43 (ल्युकोसियालिन/सियालोफोरिन)	एम. क्षयरोग	खूप
लठ्ठ	CD48	आतड्यांसंबंधी जिवाणू	FimH
मॅक्रोफेज	मॅनोज रिसेप्टर	न्यूमोसिस्टिस candida albicans	मॅनोज किंवा फ्यूकोजचे अवशेष
»	स्कॅव्हेंजर रिसेप्टर AI/I1	अपोप्टोटिक लिम्फोसाइट्स ग्राम-पॉझिटिव्ह कोकी	? phosphatidylserine lipoteichoic ऍसिडस्
सेर-सेल्स	सफाई कामगार पुन्हा-	अपोप्टोटिक	फॉस्फेट-
छप्पर घालणे फेल्ट, थायमस उपकला पेशी	सेप्टर बी 1	पेशी	डिलसेरीन

पेशी	रिसेप्टर	लक्ष्य	लिगँड
मॅक्रोफेज	मार्को	ई. सह/i, एस. ऑरियस	अनोळखी
»	MER	अपोप्टोटिक थायमोसाइट्स	? Gas6Apoc-fatidyl-serine
अनेक	PSR	अपोप्टोटिक	फॉस्फेटी- डिलसेरीन
मॅक्रोफेज	CD36	अपोप्टोटिक न्यूट्रोफिल्स	फॉस्फेटी- डिलसेरीन
»	CD14	स्यूडोमोनास apoptotic	?lps न ओळखलेले बसवलेले
अनेक	pi-integrins	येर्सिनिया एसपीपी.	संसर्ग
पेशी
मॅक्रोफेज	opfz	अपोप्टोटिक	? थ्रोम्बोस्पॉन्डिन
डेन्ड्रिटिक	sofZ	त्याच	ओळख नसलेली
al
उपकला	ई-कॅडेरिन	लिस्टेरिया एसपीपी.	1p1A
पेशी
त्याच	भेटले	त्याच	1p1B

फॅगोसाइटोसिसचे मुख्य टप्पे: केमोटॅक्सिस, सूक्ष्मजंतूसह फागोसाइटचा संपर्क, सूक्ष्मजीवांचे शोषण (आंतरीकरण) (शब्दाच्या संकुचित अर्थाने फॅगोसाइटोसिस), निष्क्रियता (हत्या करणे) आणि व्हॅक्यूलर उपकरणामध्ये रोगजनकांचे त्यानंतरचे पचन (फॅगोसाइट्स) फॅगोसाइटोसिसचे). या कार्यात्मक अभिव्यक्तींसह, फागोसाइटोसिस, एक नियम म्हणून, फॅगोसाइट्स, विशेषत: मोनोसाइट्स / मॅक्रोफेजेस आणि डेंड्रिटिक पेशींच्या गुप्त प्रतिक्रियांसह असते, ज्या दरम्यान विविध शारीरिकदृष्ट्या सक्रिय पदार्थ सोडले जातात जे कोर्सचे संरक्षणात्मक स्वरूप सुनिश्चित करतात आणि संपूर्ण प्रक्रिया पूर्ण करतात. संपूर्ण

फागोसाइट्स (टेबल 7) (ग्रीनबर्ग, 78) द्वारे सूक्ष्मजीव ओळखणे, संपर्क करणे आणि शोषण्यात विविध रिसेप्टर्स गुंतलेले आहेत

ग्रिंस्टीन, 2002). आधुनिक आण्विक अनुवांशिक पद्धतींचा वापर करून, हे स्थापित केले गेले आहे की माऊस मॅक्रोफेजद्वारे लेटेक्स कणांच्या फागोसाइटोसिस दरम्यान फॅगोसाइट्समध्ये 200 पेक्षा जास्त जनुकांच्या अभिव्यक्तीमध्ये बदल दिसून येतात आणि मायकोबॅक्टेरियम ट्यूबरक्युलोसिस (Ehrt et201) च्या फॅगोसाइटोसिस दरम्यान सुमारे 600 जीन्स आढळतात. . हे सर्व फॅगोसाइटिक प्रक्रियेशी संबंधित मॅक्रोफेजमधील संरचनात्मक आणि कार्यात्मक बदलांच्या जटिल आणि जटिल स्वरूपाची साक्ष देते. त्यांचा आण्विक आधार समजून घेणे भविष्यात फार्माकोलॉजिकल एजंट्सची निर्मिती प्रदान करेल जे विशेषतः फॅगोसाइटोसिसच्या प्रक्रियेचे नियमन करतात. रिसेप्टर्सची विविधता रोगजनकांच्या ओळखीची कार्यक्षमता सुनिश्चित करते (“नॉन-नेटिव्ह”) आणि संसर्गजन्य एजंट्सच्या त्यानंतरच्या लक्ष्यित निष्क्रियतेसाठी एक आवश्यक अट आहे. जन्मजात प्रतिकारशक्तीच्या आधुनिक संकल्पनांपैकी एकामध्ये, या रिसेप्टर्सच्या संयोजनास सामान्यतः रिसेप्टर्सची प्रणाली (रेणू) म्हणून संबोधले जाते जे रोगजनक-संबंधित आण्विक नमुने ओळखतात (Janeway, 1992, 2002). "