Prokaryote là nhóm sinh vật phong phú nhất về số lượng và sự đa dạng của các con đường trao đổi chất. Một số trong số chúng, để tổng hợp ATP ("tiền tệ" năng lượng chính của tế bào), sử dụng sơ đồ hô hấp hiếu khí điển hình của hầu hết các sinh vật nhân chuẩn. Các vi sinh vật không có cơ chế này được gọi là vi khuẩn kỵ khí. Những vi khuẩn này có thể lấy năng lượng từ các hợp chất hóa học mà không cần sự tham gia của oxy.

Phân loại vi khuẩn kỵ khí

Liên quan đến oxy, hai nhóm vi khuẩn kỵ khí được phân biệt:

• tùy chọn - chúng có thể nhận năng lượng cả khi có oxy và không có oxy, quá trình chuyển đổi từ loại chuyển hóa này sang loại chuyển hóa khác phụ thuộc vào điều kiện môi trường;
• bắt buộc - không bao giờ sử dụng O 2 .

Đối với vi khuẩn kỵ khí tùy tiện, kiểu trao đổi chất không có oxy có giá trị thích nghi và vi khuẩn chỉ sử dụng nó như là phương sách cuối cùng khi chúng xâm nhập vào môi trường kỵ khí. Điều này được giải thích là do quá trình hô hấp bằng oxy mang lại nhiều lợi nhuận hơn về mặt năng lượng.

Một nhóm kỵ khí khác thiếu cơ chế sinh hóa để sử dụng O 2 cho quá trình oxy hóa các hợp chất và sự hiện diện của nguyên tố này trong môi trường không những không hữu ích mà còn độc hại.

Có một số loại vi khuẩn kỵ khí bắt buộc khác nhau về khả năng chống lại sự hiện diện của oxy phân tử:

• chết nghiêm ngặt ngay cả ở nồng độ O 2 thấp;
• nghiêm trọng vừa phải được đặc trưng bởi khả năng chống lại sự hiện diện của oxy ở mức trung bình hoặc cao;
• dung nạp khí - một nhóm sinh vật nhân sơ đặc biệt không chỉ có thể sống sót mà còn phát triển trong không khí.

Tỷ lệ của một loại vi khuẩn cụ thể với oxy có thể được xác định bởi bản chất của sự phát triển của nó trong độ dày của môi trường dinh dưỡng.

Vi khuẩn axit lactic được phân loại là vi sinh vật hiếu khí. Một số loài (ví dụ như Clostridium) có thể chịu được nồng độ oxy cao bằng cách tạo ra nội bào tử.

chuyển hóa năng lượng kỵ khí

Tất cả các vi sinh vật kỵ khí đều là sinh vật hóa dưỡng điển hình, vì chúng sử dụng năng lượng của các liên kết hóa học làm nguồn năng lượng. Đồng thời, cả chất hữu cơ (hóa dưỡng) và chất vô cơ (hóa dưỡng) đều có thể là chất cho năng lượng.

Vi khuẩn kỵ khí có hai hình thức chuyển hóa thiếu khí: hô hấp và lên men. Sự khác biệt cơ bản giữa chúng nằm ở cơ chế đồng hóa năng lượng.

Do đó, trong quá trình lên men, năng lượng đầu tiên được lưu trữ ở dạng phosphagen (ví dụ, ở dạng phosphoenolpyruvate), và sau đó quá trình phosphoryl hóa cơ chất của ADP xảy ra với sự tham gia của dehydrogenase tế bào. Trong trường hợp này, các điện tử được chuyển đến một chất nhận nội sinh hoặc ngoại sinh, trở thành sản phẩm phụ của quá trình.

Trong quá trình trao đổi chất kiểu hô hấp, năng lượng được dự trữ trong một hợp chất cụ thể - Pmf, được sử dụng ngay cho các quá trình của tế bào hoặc đi vào chuỗi vận chuyển điện tập trung trên màng, nơi tổng hợp ATP. Chỉ khác, không giống như hô hấp hiếu khí, chất nhận điện tử cuối cùng không phải là oxy mà là một hợp chất khác, có thể là cả chất hữu cơ và chất vô cơ trong tự nhiên.

Các loại hô hấp kỵ khí

Nhiệm vụ chính mà một loại vi khuẩn kỵ khí với kiểu trao đổi chất hô hấp giải quyết là tìm ra một giải pháp thay thế cho oxy phân tử. Năng suất của phản ứng phụ thuộc vào điều này. Tùy thuộc vào chất đóng vai trò là chất nhận đầu cuối, các loại hô hấp kỵ khí sau đây được phân biệt:

• nitrat;
• sắt;
• thuốc tím;
• sunfat;
• lưu huỳnh;
• cacbonat.

Hô hấp kỵ khí kém hiệu quả hơn so với hô hấp hiếu khí, nhưng so với quá trình lên men, nó mang lại năng lượng lớn hơn nhiều.

Cộng đồng vi khuẩn phá hoại kỵ khí

Loại hệ vi sinh vật này được hình thành trong các hốc sinh thái giàu chất hữu cơ, trong đó oxy được tiêu thụ gần như hoàn toàn (đất ngập nước, hệ thống thủy lực ngầm, phù sa, v.v.). Tại đây, xảy ra quá trình phân hủy từng bước các hợp chất hữu cơ, được thực hiện bởi hai nhóm vi khuẩn:

• vi khuẩn kỵ khí chính chịu trách nhiệm cho giai đoạn đầu tiên của quá trình khử chất hữu cơ;
• kỵ khí thứ cấp là vi sinh vật có quá trình trao đổi chất kiểu hô hấp.

Trong số các vi khuẩn kỵ khí chính, thủy phân và phân tán được phân biệt, chúng được kết nối với nhau bằng các tương tác dinh dưỡng. Quá trình thủy phân hình thành các màng sinh học trên bề mặt chất nền rắn và tạo ra các exoenzym thủy phân giúp phân hủy các hợp chất hữu cơ phức tạp thành oligome và monome.

Chất nền dinh dưỡng thu được chủ yếu được sử dụng bởi chính các chất thủy phân, nhưng cũng bởi các sinh vật vô dưỡng. Loại thứ hai thường ít hợp tác hơn và không giải phóng một lượng đáng kể exoenzyme, hấp thụ các sản phẩm cuối cùng của quá trình thủy phân polyme sinh học. Một đại diện đặc trưng của sự phân tán là vi khuẩn thuộc chi Syntrophomonas.

canh tác

Yêu cầu canh tác đặc biệt chỉ áp dụng cho vi khuẩn kỵ khí bắt buộc. Tùy ý sinh sản tốt trong môi trường oxy.

Các phương pháp nuôi cấy vi sinh vật kỵ khí được chia thành ba loại: hóa học, vật lý và sinh học. Nhiệm vụ chính của họ là giảm hoặc loại bỏ hoàn toàn sự hiện diện của oxy trong môi trường dinh dưỡng. Mức độ nồng độ cho phép của O 2 được xác định bởi mức độ chịu đựng của một loại kỵ khí cụ thể.

phương pháp vật lý

Bản chất của các phương pháp vật lý là loại bỏ oxy khỏi môi trường không khí mà vi khuẩn tiếp xúc hoặc loại bỏ hoàn toàn sự tiếp xúc của vi khuẩn với không khí. Nhóm này bao gồm các công nghệ canh tác sau:

• canh tác trong microaerostat - một thiết bị đặc biệt trong đó hỗn hợp khí nhân tạo được tạo ra thay vì không khí trong khí quyển;
• canh tác sâu - gieo vi khuẩn không phải trên bề mặt, nhưng trong một lớp cao hoặc độ dày của môi trường để không khí không xâm nhập vào đó;
• việc sử dụng môi trường nhớt, trong đó sự khuếch tán của O 2 giảm khi mật độ tăng;
• trồng trong bờ yếm khí;
• làm đầy bề mặt môi trường bằng dầu vaseline hoặc parafin;
• sử dụng tủ ấm CO2;
• ứng dụng trạm kỵ khí SIMPLICITY 888 (phương pháp hiện đại nhất).

Một phần bắt buộc của các phương pháp vật lý là đun sôi sơ bộ môi trường dinh dưỡng để loại bỏ oxy phân tử khỏi nó.

Sử dụng hóa chất

Các hợp chất hóa học được sử dụng để phát triển kỵ khí được chia thành 2 nhóm:

• Chất nhặt oxy hấp thụ các phân tử O 2. Khả năng hấp thụ phụ thuộc vào loại chất và thể tích không gian không khí trong môi trường. Phổ biến nhất là pyrogallol (dung dịch kiềm), sắt kim loại, clorua dạng đồng, natri dithionit.
• Các chất khử (cysteine, dithiothreitol, axit ascorbic, v.v.) làm giảm khả năng oxy hóa khử của môi trường.

Một loại phương pháp hóa học đặc biệt là sử dụng các hệ thống tạo khí, bao gồm các tác nhân tạo ra hydro và carbon dioxide, và O 2 hấp thụ chất xúc tác palladi. Các hệ thống như vậy được sử dụng trong các bể nuôi trồng kín (máy điều hòa khí, túi nhựa, v.v.).

phương pháp sinh học

Các phương pháp sinh học bao gồm nuôi cấy đồng thời vi khuẩn kị khí và hiếu khí. Loại thứ hai loại bỏ oxy khỏi môi trường, tạo điều kiện cho sự phát triển của "những người sống chung" với chúng. Vi khuẩn kỵ khí tùy tiện cũng có thể được sử dụng làm chất hấp phụ.

Có hai sửa đổi đối với phương pháp này:

• Gieo hai nền văn hóa trên các nửa khác nhau của đĩa Petri, sau đó đậy nắp lại.
• Cấy bằng môi trường "mặt kính đồng hồ" chứa vi khuẩn hiếu khí. Kính này được đậy bằng đĩa Petri, cấy dịch cấy kỵ khí theo lớp liên tục.

Đôi khi các vi sinh vật hiếu khí được sử dụng ở giai đoạn chuẩn bị môi trường dinh dưỡng lỏng để cấy vi khuẩn kỵ khí. Sau khi loại bỏ oxy dư, vi khuẩn hiếu khí (ví dụ E. colli) bị tiêu diệt bằng nhiệt và sau đó cấy vi khuẩn mong muốn.

Cách ly văn hóa thuần túy

Nuôi cấy thuần khiết là một quần thể vi sinh vật thuộc cùng một loài, có các đặc tính giống nhau và thu được từ một tế bào. Để thu được một nhóm vi khuẩn có những đặc điểm này, người ta thường sử dụng phương pháp pha loãng và hạn chế pha loãng, nhưng làm việc với vi khuẩn kỵ khí là một quy trình đặc biệt đòi hỏi phải loại trừ tiếp xúc với oxy để thu được các khuẩn lạc riêng biệt.

Có một số cách để phân lập một nền văn hóa kỵ khí thuần túy. Bao gồm các:

• Phương pháp của Zeissler - gieo bằng cách tỉa thưa trên đĩa Petri với việc tạo điều kiện kỵ khí và sau đó ủ trong máy điều nhiệt (từ 24 đến 72 giờ).
• Phương pháp Weinberg - phân lập vi khuẩn kị khí trong môi trường nuôi cấy sử dụng thạch đường (gieo trong cột cao), vi khuẩn được chuyển qua mao quản kín. Đầu tiên, nguyên liệu được cho vào ống nghiệm có dung dịch đẳng trương (giai đoạn pha loãng), sau đó cho vào ống nghiệm có thạch ở nhiệt độ 40-45 độ, trong đó nguyên liệu được trộn kỹ với môi trường. Sau đó, cấy liên tiếp vào 2 ống nghiệm nữa, ống cuối cùng được làm lạnh dưới vòi nước chảy.
• Phương pháp Peretz - vật liệu được pha loãng trong dung dịch đẳng trương được đổ vào đĩa Petri để nó lấp đầy khoảng trống dưới tấm kính nằm trên đáy của nó, trên đó sự phát triển sẽ bắt đầu.

Trong cả ba phương pháp, vật liệu từ các khuẩn lạc phân lập thu được được cấy truyền vào môi trường kiểm soát độ vô trùng (SCS) hoặc môi trường Kitt-Tarozzi.

Nhiễm trùng kỵ khí gây ra nhiều rắc rối cho bệnh nhân, vì biểu hiện của chúng là cấp tính và khó chịu về mặt thẩm mỹ. Những kẻ khiêu khích nhóm bệnh này là các vi sinh vật hình thành bào tử hoặc không hình thành bào tử đã rơi vào điều kiện thuận lợi cho sự sống.

Nhiễm trùng do vi khuẩn kỵ khí phát triển nhanh chóng, có thể ảnh hưởng đến các mô và cơ quan quan trọng, vì vậy việc điều trị phải bắt đầu ngay sau khi chẩn đoán để tránh biến chứng hoặc tử vong.

Nó là gì?

Nhiễm trùng kỵ khí là một bệnh lý, tác nhân gây bệnh là vi khuẩn có thể phát triển và nhân lên trong điều kiện hoàn toàn không có oxy hoặc điện áp thấp. Độc tố của chúng có khả năng thâm nhập cao và được coi là cực kỳ hung dữ.

Nhóm bệnh truyền nhiễm này bao gồm các dạng bệnh lý nghiêm trọng được đặc trưng bởi tổn thương các cơ quan quan trọng và tỷ lệ tử vong cao. Ở bệnh nhân, các biểu hiện của hội chứng nhiễm độc thường chiếm ưu thế hơn các dấu hiệu lâm sàng tại chỗ. Bệnh lý này được đặc trưng bởi tổn thương chủ yếu của mô liên kết và sợi cơ.

Nguyên nhân gây nhiễm trùng kỵ khí

Vi khuẩn kỵ khí được phân loại là gây bệnh có điều kiện và là một phần của hệ vi sinh vật bình thường của màng nhầy, hệ thống tiêu hóa và sinh dục và da. Trong các điều kiện gây ra sự sinh sản không kiểm soát của chúng, nhiễm trùng kỵ khí nội sinh sẽ phát triển. Vi khuẩn kỵ khí sống trong mảnh vụn hữu cơ thối rữa và đất, khi giải phóng vào vết thương hở, gây nhiễm trùng kỵ khí ngoại sinh.

Sự phát triển của nhiễm trùng kỵ khí được tạo điều kiện thuận lợi bởi tổn thương mô, tạo ra khả năng xâm nhập của mầm bệnh vào cơ thể, tình trạng suy giảm miễn dịch, chảy máu ồ ạt, quá trình hoại tử, thiếu máu cục bộ và một số bệnh mãn tính. Nguy cơ tiềm ẩn được thể hiện bằng các thao tác xâm lấn (nhổ răng, sinh thiết, v.v.), can thiệp phẫu thuật. Nhiễm trùng kỵ khí có thể phát triển do vết thương bị nhiễm đất hoặc các dị vật khác xâm nhập vào vết thương, trong bối cảnh sốc chấn thương và giảm thể tích, liệu pháp kháng sinh không hợp lý ngăn chặn sự phát triển của hệ vi sinh vật bình thường.

Liên quan đến oxy, vi khuẩn kỵ khí được chia thành tùy tiện, vi hiếu khí và bắt buộc. Các vi sinh vật kỵ khí tùy ý có thể phát triển cả trong điều kiện bình thường và khi không có oxy. Nhóm này bao gồm tụ cầu, E. coli, liên cầu, shigella và một số loại khác. Vi khuẩn ưa khí là một liên kết trung gian giữa hiếu khí và kỵ khí, oxy cần thiết cho hoạt động sống của chúng, nhưng với số lượng nhỏ.

Trong số các vi sinh vật kỵ khí bắt buộc, vi sinh vật clostridial và không clostridial được phân biệt. Nhiễm trùng do clostridial là ngoại sinh (external). Đó là ngộ độc, hoại tử khí, uốn ván, ngộ độc thực phẩm. Đại diện của vi khuẩn kỵ khí không clostridia là tác nhân gây ra các quá trình viêm mủ nội sinh, chẳng hạn như viêm phúc mạc, áp xe, nhiễm trùng huyết, đờm, v.v.

Triệu chứng

Thời gian ủ bệnh kéo dài khoảng ba ngày. Nhiễm trùng kỵ khí bắt đầu đột ngột. Ở bệnh nhân, các triệu chứng nhiễm độc nói chung chiếm ưu thế hơn so với viêm cục bộ. Sức khỏe của họ xấu đi rõ rệt cho đến khi các triệu chứng cục bộ xuất hiện, vết thương có màu đen.

Bệnh nhân bị sốt và run rẩy, suy nhược nghiêm trọng và suy nhược, khó tiêu, thờ ơ, buồn ngủ, thờ ơ, huyết áp giảm, nhịp tim nhanh, tam giác mũi chuyển sang màu xanh. Dần dần, sự thờ ơ được thay thế bằng sự phấn khích, bồn chồn, bối rối. Nhịp thở và mạch của họ tăng tốc.

Tình trạng của đường tiêu hóa cũng thay đổi: lưỡi của bệnh nhân khô, đóng vảy, họ cảm thấy khát nước và khô miệng. Da mặt tái nhợt, có màu đất, mắt trũng xuống. Có một cái gọi là "mặt nạ Hippocrates" - "mờ dần Hippocrates". Bệnh nhân trở nên ức chế hoặc phấn khích mạnh, thờ ơ, trầm cảm. Họ ngừng điều hướng trong không gian và cảm xúc của chính họ.

Các triệu chứng tại chỗ của bệnh lý:

1. Phù mô của chi tiến triển nhanh chóng và được biểu hiện bằng cảm giác đầy và đầy của chi.
2. Cơn đau dữ dội, không thể chịu đựng được, ngày càng tăng có tính chất bùng phát, không thuyên giảm bằng thuốc giảm đau.
3. Các phần xa của chi dưới trở nên không hoạt động và thực tế không nhạy cảm.
4. Viêm hoại tử mủ phát triển nhanh chóng và thậm chí ác tính. Trong trường hợp không điều trị, các mô mềm bị phá hủy nhanh chóng, khiến tiên lượng bệnh lý không thuận lợi.
5. Khí trong các mô bị ảnh hưởng có thể được phát hiện bằng cách sờ nắn, gõ và các kỹ thuật chẩn đoán khác. Khí phế thũng, tiếng lạo xạo mô mềm, viêm màng nhĩ, ran nổ nhẹ, âm thanh hộp là những dấu hiệu của hoại thư khí.

Quá trình nhiễm trùng kỵ khí có thể là tối cấp (trong vòng 1 ngày kể từ thời điểm phẫu thuật hoặc vết thương), cấp tính (trong vòng 3-4 ngày), bán cấp (hơn 4 ngày). Nhiễm trùng kỵ khí thường đi kèm với sự phát triển của suy đa cơ quan (thận, gan, tim phổi), sốc nhiễm độc, nhiễm trùng huyết nặng, là nguyên nhân gây tử vong.

Chẩn đoán nhiễm trùng kỵ khí

Trước khi bắt đầu điều trị, điều quan trọng là phải xác định chính xác xem vi sinh vật kỵ khí hay hiếu khí đã gây ra nhiễm trùng, và đối với điều này, chỉ đánh giá các triệu chứng bên ngoài là chưa đủ. Các phương pháp xác định tác nhân lây nhiễm có thể khác nhau:

• Xét nghiệm máu ELISA (hiệu quả và tốc độ của phương pháp này cao, cũng như giá cả);
• chụp X quang (phương pháp này hiệu quả nhất trong chẩn đoán nhiễm trùng xương và khớp);
• nuôi cấy vi khuẩn của dịch màng phổi, dịch tiết, máu hoặc mủ;
• Nhuộm gram của phết đã lấy;

Điều trị nhiễm trùng kỵ khí

Với nhiễm trùng kỵ khí, một phương pháp điều trị tích hợp bao gồm điều trị phẫu thuật triệt để ổ mủ, giải độc tích cực và điều trị bằng kháng sinh. Giai đoạn phẫu thuật nên được thực hiện càng sớm càng tốt - cuộc sống của bệnh nhân phụ thuộc vào nó.

Theo quy định, nó bao gồm việc bóc tách rộng tổn thương bằng cách loại bỏ các mô hoại tử, giải nén các mô xung quanh, dẫn lưu mở bằng cách rửa sâu răng và vết thương bằng dung dịch sát trùng. Các đặc điểm của quá trình nhiễm trùng kỵ khí thường đòi hỏi phải cắt bỏ hoại tử nhiều lần, mở túi mủ, điều trị vết thương bằng siêu âm và laser, liệu pháp ozone, v.v. Với sự phá hủy mô rộng, có thể chỉ định cắt cụt chi hoặc cắt bỏ chi.

Các thành phần quan trọng nhất của điều trị nhiễm trùng kỵ khí là liệu pháp truyền dịch tích cực và liệu pháp kháng sinh với các loại thuốc phổ rộng có tính nhiệt đới cao đối với vi khuẩn kỵ khí. Là một phần của điều trị phức tạp các bệnh nhiễm trùng kỵ khí, oxy hóa cao áp, UBI, điều chỉnh máu ngoài cơ thể (hút máu, lọc huyết tương, v.v.) được sử dụng. Nếu cần thiết, bệnh nhân được tiêm huyết thanh kháng ung thư chống độc.

Dự báo

Kết quả của nhiễm trùng kỵ khí phần lớn phụ thuộc vào hình thức lâm sàng của quá trình bệnh lý, tiền sử bệnh, tính kịp thời của chẩn đoán và bắt đầu điều trị. Tỷ lệ tử vong ở một số dạng nhiễm trùng kỵ khí vượt quá 20%.

Vi khuẩn kỵ khí là vi khuẩn có thể phát triển và nhân lên trong điều kiện không có oxy tự do. Tác dụng độc hại của oxy đối với vi khuẩn kỵ khí có liên quan đến việc ngăn chặn hoạt động của một số vi khuẩn. Có những vi khuẩn kỵ khí tùy ý có thể thay đổi kiểu hô hấp kỵ khí thành hiếu khí và những vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt (bắt buộc), chỉ có kiểu hô hấp kỵ khí.

Khi nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt, các phương pháp hóa học được sử dụng để loại bỏ oxy: các chất có khả năng hấp thụ oxy (ví dụ: dung dịch kiềm của pyrogallol, natri hydrosulfite) được thêm vào môi trường xung quanh vi khuẩn kỵ khí hoặc chúng được đưa vào thành phần của các chất có khả năng hấp thụ oxy. khôi phục oxy đến (ví dụ, v.v.) . Có thể cung cấp vi sinh vật kỵ khí bằng các phương pháp vật lý: loại bỏ cơ học khỏi môi trường dinh dưỡng trước khi gieo bằng cách đun sôi, sau đó đổ đầy chất lỏng lên bề mặt môi trường, đồng thời sử dụng máy kỵ khí; cấy bằng cách tiêm vào một cột thạch dinh dưỡng cao, sau đó đổ dầu vaseline nhớt vào. Cách sinh học để cung cấp các điều kiện thiếu oxy cho vi khuẩn kỵ khí là gieo hạt kết hợp giữa cây trồng và vi khuẩn kỵ khí.

Vi khuẩn yếm khí gây bệnh bao gồm các vi sinh vật dạng que, mầm bệnh (xem Clostridia). Xem thêm .

Vi khuẩn yếm khí là những vi sinh vật có thể tồn tại và phát triển bình thường mà không cần tiếp cận với oxy tự do.

Các thuật ngữ "kỵ khí" và "kỵ khí" (sự sống không có không khí; từ tiền tố phủ định của Hy Lạp là anaer - không khí và sự sống sinh học) được đề xuất bởi L. Pasteur vào năm 1861 để mô tả các điều kiện cho sự tồn tại của vi khuẩn lên men butyric được phát hiện bởi anh ấy. Vi khuẩn kỵ khí có khả năng phân hủy các hợp chất hữu cơ trong môi trường không có oxy và do đó thu được năng lượng cần thiết cho hoạt động sống của chúng.

Vi khuẩn kị khí phân bố rộng rãi trong tự nhiên: chúng sống trong đất, phù sa của các hồ chứa, đống phân trộn, ở độ sâu của vết thương, trong ruột của người và động vật - bất cứ nơi nào chất hữu cơ bị phân hủy mà không có không khí.

Liên quan đến oxy, kỵ khí được chia thành kỵ khí nghiêm ngặt (bắt buộc), không thể phát triển khi có oxy và kỵ khí có điều kiện (tùy nghi), có thể sinh trưởng và phát triển cả khi có oxy và không có oxy. Nhóm đầu tiên bao gồm hầu hết các vi khuẩn kỵ khí thuộc chi Clostridium, vi khuẩn lên men lactic và butyric; đến nhóm thứ hai - cầu khuẩn, nấm, v.v. Ngoài ra, có những vi sinh vật cần nồng độ oxy thấp cho sự phát triển của chúng - microaerophiles (Clostridium histolyticum, Clostridium tertium, một số đại diện của chi Fusobacterium và Actinomyces).

Chi Clostridium hợp nhất khoảng 93 loài vi khuẩn gram dương hình que hình thành các bào tử ở đầu cuối hoặc dưới đầu mút (tsvetn. Hình 1-6). Clostridia gây bệnh bao gồm Cl. perfringen, Cl. phù-tiens, Cl. vách ngăn, Cl. histolyticum, Cl. sordellii, là tác nhân gây nhiễm trùng kỵ khí (hoại thư khí), hoại thư phổi, viêm ruột thừa hoại tử, biến chứng sau sinh và sau phá thai, nhiễm trùng huyết kỵ khí và ngộ độc thực phẩm (Cl. perfringens, loại A, C, D, F).

Vi khuẩn kỵ khí gây bệnh cũng là Cl. tetani là tác nhân gây bệnh uốn ván và Cl. botulinum là tác nhân gây bệnh ngộ độc thịt.

Chi Bacteroides bao gồm 30 loài vi khuẩn gram âm hình que, không sinh bào tử, phần lớn là vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt. Đại diện của chi này được tìm thấy trong đường ruột và cơ quan sinh dục của người và động vật; một số loài gây bệnh, gây nhiễm trùng máu và áp xe.

Vi khuẩn kỵ khí thuộc chi Fusobacterium (những que nhỏ dày lên ở hai đầu, không hình thành bào tử, gram âm), là cư dân trong khoang miệng của người và động vật, kết hợp với các vi khuẩn khác gây ra bệnh hoại tử, viêm amidan, viêm miệng hoại tử. Tụ cầu kỵ khí thuộc giống Peptococcus và liên cầu thuộc giống Peptostreptococcus được tìm thấy ở người khỏe mạnh ở đường hô hấp, miệng, âm đạo và ruột. Cầu khuẩn kỵ khí gây ra các bệnh có mủ khác nhau: áp xe phổi, viêm vú, viêm cơ, viêm ruột thừa, nhiễm trùng huyết sau khi sinh và phá thai, viêm phúc mạc, v.v. Vi khuẩn kỵ khí thuộc chi Actinomyces gây bệnh xạ khuẩn ở người và động vật.

Một số vi khuẩn kỵ khí cũng thực hiện các chức năng hữu ích: góp phần tiêu hóa và hấp thụ chất dinh dưỡng trong ruột người và động vật (vi khuẩn lên men butyric và axit lactic), tham gia vào chu trình chuyển hóa các chất trong tự nhiên.

Các phương pháp phân lập vi sinh vật kỵ khí dựa trên việc tạo ra các điều kiện kỵ khí (giảm áp suất riêng phần của oxy trong môi trường), để tạo ra các phương pháp sau đây được sử dụng: 1) loại bỏ oxy khỏi môi trường bằng cách bơm không khí ra ngoài hoặc thay thế bằng một chất vô cảm. khí ga; 2) hấp thụ oxy hóa học bằng cách sử dụng natri hydrosulfite hoặc pyrogallol; 3) loại bỏ oxy kết hợp cơ học và hóa học; 4) hấp thụ oxy sinh học bởi các vi sinh vật hiếu khí bắt buộc được gieo trên một nửa đĩa Petri (phương pháp Fortner); 5) loại bỏ một phần không khí khỏi môi trường dinh dưỡng lỏng bằng cách đun sôi, thêm các chất khử (glucose, thioglycolate, cysteine, miếng thịt hoặc gan tươi) và đổ dầu vaseline vào môi trường; 6) bảo vệ cơ học khỏi oxy không khí, được thực hiện bằng cách cấy vi khuẩn kỵ khí vào cột thạch cao trong ống thủy tinh mỏng theo phương pháp Veillon.

Các phương pháp xác định các vi khuẩn kỵ khí nuôi cấy phân lập - xem Nhiễm trùng kỵ khí (chẩn đoán vi sinh vật).

Vi khuẩn có mặt ở khắp mọi nơi trên thế giới của chúng ta. Chúng ở khắp mọi nơi và mọi nơi, và số lượng giống của chúng chỉ đơn giản là đáng kinh ngạc.

Tùy thuộc vào nhu cầu về sự hiện diện của oxy trong môi trường dinh dưỡng để thực hiện các hoạt động sống, vi sinh vật được phân thành các loại sau.

• Vi khuẩn hiếu khí bắt buộc, được thu thập ở phần trên của môi trường dinh dưỡng, hệ thực vật chứa lượng oxy tối đa.
• Vi khuẩn kỵ khí bắt buộc, nằm ở phần dưới của môi trường, càng xa oxy càng tốt.
• Vi khuẩn tùy nghi chủ yếu sống ở phần trên, nhưng có thể phân bố khắp môi trường, vì chúng không phụ thuộc vào oxy.
• Microaerophiles thích nồng độ oxy thấp, mặc dù chúng tập trung ở phần trên của môi trường.
• Các vi sinh vật kị khí hiếu khí phân bố đều trong môi trường dinh dưỡng, không nhạy cảm với sự có mặt hoặc vắng mặt của oxy.

Khái niệm về vi khuẩn kỵ khí và phân loại của chúng

Thuật ngữ "vi khuẩn kỵ khí" xuất hiện vào năm 1861, nhờ công trình của Louis Pasteur.

Vi khuẩn kỵ khí là vi sinh vật phát triển bất kể sự hiện diện của oxy trong môi trường dinh dưỡng. Họ nhận được năng lượng bởi sự phosphoryl hóa cơ chất. Có các loại hiếu khí tùy tiện và bắt buộc, cũng như các loại khác.

Các vi khuẩn kỵ khí quan trọng nhất là bacteroides

Vi khuẩn hiếu khí quan trọng nhất là vi khuẩn. Khoảng năm mươi phần trăm của tất cả các quá trình viêm mủ, tác nhân gây bệnh có thể là vi khuẩn kỵ khí, là vi khuẩn.

Bacteroides là một chi vi khuẩn kỵ khí bắt buộc Gram âm. Đây là những que có màu lưỡng cực, kích thước không vượt quá 0,5-1,5 x 15 micron. Chúng tạo ra độc tố và enzym có thể gây ra độc lực. Các vi khuẩn khác nhau có khả năng kháng kháng sinh khác nhau: có cả kháng và nhạy cảm với kháng sinh.

Sản xuất năng lượng trong các mô của con người

Một số mô của các sinh vật sống đã tăng sức đề kháng với hàm lượng oxy thấp. Trong điều kiện tiêu chuẩn, quá trình tổng hợp adenosine triphosphate xảy ra trên không, nhưng với sự gia tăng gắng sức về thể chất và các phản ứng viêm, cơ chế kỵ khí trở nên nổi bật.

Adenosine triphosphate (ATP) Nó là một loại axit đóng vai trò quan trọng trong quá trình sản xuất năng lượng của cơ thể. Có một số lựa chọn để tổng hợp chất này: một hiếu khí và ba kỵ khí.

Cơ chế tổng hợp ATP kỵ khí bao gồm:

• tái phosphoryl hóa giữa creatine phosphate và ADP;
• phản ứng chuyển hóa 2 phân tử ADP;
• phân hủy kỵ khí glucose hoặc glycogen dự trữ trong máu.

Nuôi cấy vi sinh vật kỵ khí

Có những phương pháp đặc biệt để phát triển kỵ khí. Chúng bao gồm thay thế không khí bằng hỗn hợp khí trong bộ điều nhiệt kín.

Một cách khác là nuôi vi sinh vật trong môi trường dinh dưỡng có bổ sung các chất khử.

Môi trường nuôi cấy vi sinh vật kỵ khí

Có các môi trường dinh dưỡng phổ biến và môi trường dinh dưỡng chẩn đoán phân biệt. Những cái phổ biến bao gồm môi trường Wilson-Blair và môi trường Kitt-Tarozzi. Để chẩn đoán phân biệt - môi trường Hiss, môi trường Ressel, môi trường Endo, môi trường Ploskirev và thạch bismuth-sulfite.

Cơ sở cho môi trường Wilson-Blair là agar-agar với việc bổ sung glucose, natri sulfite và sắt dichloride. Khuẩn lạc kỵ khí màu đen được hình thành chủ yếu ở độ sâu của cột thạch.

Môi trường Ressel's (Russell's) được sử dụng trong nghiên cứu đặc tính sinh hóa của vi khuẩn như Shigella và Salmonella. Nó cũng chứa agar-agar và glucose.

Ploskirev thứ tưức chế sự phát triển của nhiều vi sinh vật nên được dùng với mục đích chẩn đoán phân biệt. Trong môi trường như vậy, mầm bệnh thương hàn, kiết lị và các vi khuẩn gây bệnh khác phát triển tốt.

Mục đích chính của thạch bismuth sulfite là phân lập salmonella ở dạng tinh khiết. Môi trường này dựa trên khả năng tạo ra hydrogen sulfide của Salmonella. Phương tiện này tương tự như phương tiện Wilson-Blair trong kỹ thuật được sử dụng.

nhiễm trùng kỵ khí

Hầu hết các vi khuẩn kỵ khí sống trong cơ thể người hoặc động vật có thể gây ra các bệnh nhiễm trùng khác nhau. Theo quy định, nhiễm trùng xảy ra trong thời kỳ suy giảm khả năng miễn dịch hoặc vi phạm hệ vi sinh vật chung của cơ thể. Ngoài ra còn có khả năng nhiễm mầm bệnh từ môi trường bên ngoài, nhất là vào cuối thu và đầu đông.

Nhiễm trùng do vi khuẩn kỵ khí gây ra thường liên quan đến hệ thực vật trên màng nhầy của con người, nghĩa là với môi trường sống chính của vi khuẩn kỵ khí. Thông thường, những nhiễm trùng này nhiều kích hoạt cùng một lúc(đến 10).

Số lượng chính xác các bệnh do vi khuẩn kỵ khí gây ra hầu như không thể xác định được do khó khăn trong việc thu thập vật liệu để phân tích, vận chuyển mẫu và nuôi cấy vi khuẩn. Thông thường, loại vi khuẩn này được tìm thấy trong các bệnh mãn tính.

Nhiễm trùng kỵ khí ảnh hưởng đến mọi người ở mọi lứa tuổi. Đồng thời, mức độ mắc các bệnh truyền nhiễm ở trẻ em cao hơn.

Vi khuẩn kỵ khí có thể gây ra các bệnh nội sọ khác nhau (viêm màng não, áp xe, v.v.). Phân phối, như một quy luật, xảy ra với dòng máu. Trong các bệnh mãn tính, vi khuẩn kỵ khí có thể gây ra các bệnh lý ở đầu và cổ: viêm tai giữa, viêm hạch, áp xe. Những vi khuẩn này gây nguy hiểm cho cả đường tiêu hóa và phổi. Với các bệnh khác nhau của hệ thống niệu sinh dục nữ, cũng có nguy cơ phát triển nhiễm trùng kỵ khí. Các bệnh khác nhau về khớp và da có thể là kết quả của sự phát triển của vi khuẩn kỵ khí.

Nguyên nhân gây nhiễm trùng kỵ khí và các triệu chứng của chúng

Nhiễm trùng được gây ra bởi tất cả các quá trình trong đó vi khuẩn kỵ khí hoạt động xâm nhập vào các mô. Ngoài ra, sự phát triển của nhiễm trùng có thể gây suy giảm cung cấp máu và hoại tử mô (chấn thương khác nhau, khối u, phù nề, bệnh mạch máu). Nhiễm trùng miệng, vết cắn của động vật, bệnh phổi, bệnh viêm vùng chậu và nhiều bệnh khác cũng có thể do vi khuẩn kỵ khí gây ra.

Ở các sinh vật khác nhau, nhiễm trùng phát triển theo những cách khác nhau. Điều này bị ảnh hưởng bởi loại mầm bệnh và tình trạng sức khỏe con người. Do những khó khăn liên quan đến chẩn đoán nhiễm trùng kỵ khí, kết luận thường dựa trên các giả định. Khác nhau ở một số tính năng của nhiễm trùng gây ra bởi kỵ khí không clostridia.

Các dấu hiệu đầu tiên của nhiễm trùng mô với vi khuẩn hiếu khí là siêu âm, viêm tắc tĩnh mạch, hình thành khí. Một số khối u và khối u (ruột, tử cung, v.v.) cũng đi kèm với sự phát triển của vi sinh vật kỵ khí. Với nhiễm trùng kỵ khí, mùi khó chịu có thể xuất hiện, tuy nhiên, sự vắng mặt của nó không loại trừ vi khuẩn kỵ khí là tác nhân gây nhiễm trùng.

Các tính năng lấy và vận chuyển mẫu

Nghiên cứu đầu tiên trong việc xác định nhiễm trùng do vi khuẩn kỵ khí gây ra là kiểm tra trực quan. Các tổn thương da khác nhau là một biến chứng phổ biến. Ngoài ra, bằng chứng về hoạt động sống còn của vi khuẩn sẽ là sự hiện diện của khí trong các mô bị nhiễm bệnh.

Để nghiên cứu trong phòng thí nghiệm và thiết lập chẩn đoán chính xác, trước hết, cần phải thành thạo lấy mẫu vật chất từ khu vực bị ảnh hưởng. Đối với điều này, một kỹ thuật đặc biệt được sử dụng, nhờ đó hệ thực vật bình thường không xâm nhập vào các mẫu. Phương pháp tốt nhất là hút bằng kim thẳng. Lấy vật liệu phòng thí nghiệm bằng vết bẩn không được khuyến khích, nhưng có thể.

Các mẫu không phù hợp để phân tích thêm bao gồm:

• đờm thu được bằng cách tự bài tiết;
• các mẫu thu được trong quá trình nội soi phế quản;
• phết tế bào từ vòm âm đạo;
• nước tiểu có nước tiểu tự do;
• phân.

Đối với nghiên cứu có thể được sử dụng:

• máu;
• Chất dịch màng phổi;
• hút khí quản;
• mủ thu được từ khoang áp xe;
• dịch não tủy;
• thủng phổi.

mẫu vận chuyển cần càng sớm càng tốt trong hộp đặc biệt hoặc túi nhựa có điều kiện yếm khí, vì ngay cả sự tương tác ngắn hạn với oxy cũng có thể gây ra cái chết của vi khuẩn. Các mẫu chất lỏng được vận chuyển trong ống nghiệm hoặc trong ống tiêm. Gạc có mẫu được vận chuyển trong các ống nghiệm có carbon dioxide hoặc môi trường đã chuẩn bị trước.

Trong trường hợp chẩn đoán nhiễm khuẩn kỵ khí để có biện pháp điều trị thích hợp cần tuân thủ các nguyên tắc sau:

• độc tố do vi sinh vật kỵ khí sinh ra phải được trung hòa;
• nên thay đổi môi trường sống của vi khuẩn;
• sự lây lan của vi khuẩn kỵ khí phải được khoanh vùng.

Để tuân thủ các nguyên tắc này kháng sinh được sử dụng trong điều trị, ảnh hưởng đến cả sinh vật kỵ khí và hiếu khí, vì hệ vi sinh vật trong nhiễm trùng kỵ khí thường hỗn hợp. Đồng thời, khi kê đơn thuốc, bác sĩ phải đánh giá thành phần định tính và định lượng của hệ vi sinh vật. Các tác nhân hoạt động chống lại mầm bệnh kỵ khí bao gồm: penicillin, cephalosporin, champhenicol, fluoroquinolo, metranidazole, carbapenem và các loại khác. Một số loại thuốc có tác dụng hạn chế.

Để kiểm soát môi trường sống của vi khuẩn, trong hầu hết các trường hợp, can thiệp phẫu thuật được sử dụng, thể hiện ở việc điều trị các mô bị ảnh hưởng, dẫn lưu áp xe, đảm bảo lưu thông máu bình thường. Không nên bỏ qua phương pháp phẫu thuật vì nguy cơ biến chứng nguy hiểm đến tính mạng.

Đôi khi được sử dụng liệu pháp phụ trợ và cũng vì những khó khăn liên quan đến việc xác định chính xác tác nhân gây nhiễm trùng nên phương pháp điều trị theo kinh nghiệm được áp dụng.

Với sự phát triển của nhiễm trùng kỵ khí trong khoang miệng, cũng nên bổ sung càng nhiều trái cây và rau tươi vào chế độ ăn càng tốt. Hữu ích nhất là táo và cam. Hạn chế là thức ăn thịt và thức ăn nhanh.

nhiễm trùng kỵ khí

Căn nguyên, sinh bệnh học, liệu pháp kháng sinh.

Lời tựa ................................................. ............... .................................... .. 1

Giới thiệu ................................................. . ............................................... 2

1.1 Định nghĩa và đặc điểm .................................................... ............ .... 2

1.2 Thành phần của hệ vi sinh vật chính của con người .......... 5

2. Các yếu tố gây bệnh của vi sinh vật kỵ khí ............. 6

2.1. Vai trò của hệ vi sinh vật nội sinh kỵ khí trong bệnh lý

người ................................................. ....................................................… ……. số 8

3. Các dạng nhiễm khuẩn kỵ khí chính .................................................... 10

3.1. Nhiễm trùng màng phổi ............................................................ .............. ........….. 10

3.2. Nhiễm trùng bàn chân đái tháo đường ............................................................ ............................... . 10

3.3. Nhiễm khuẩn huyết và nhiễm trùng huyết .............................................................. ................ ................. mười một

3.4. Uốn ván................................................. .................................... mười một

3.5. Bệnh tiêu chảy................................................. ............................................ 12

3.6. Nhiễm trùng vết thương và mô mềm do phẫu thuật ....................... 12

3.7. Nhiễm trùng sinh khí ở mô mềm .................................................. ... 12

3.8. Hoại tử cơ clostridia .................................................... ..................... ... 12

3.9. Nhiễm trùng vết thương hoại tử phát triển chậm…13

3.10. Nhiễm trùng trong phúc mạc .......................................................... ………….. 13

3.11. Đặc điểm áp xe kỵ khí thực nghiệm ..... 13

3.12. Viêm đại tràng giả mạc................................................ .................... ..........14

3.13. Nhiễm khuẩn sản phụ khoa .................................................. .........14

3.14. Nhiễm khuẩn kỵ khí ở bệnh nhân ung thư……………..15

4. Chẩn đoán xét nghiệm.................................................... ................. ................................15

4.1. Tài liệu nghiên cứu .................................................................. ................... .....................15

4.2. Các giai đoạn nghiên cứu vật liệu trong phòng thí nghiệm .................................................. ....16

4.3. Nghiên cứu trực tiếp tài liệu .............................................................. ........................16

4.4. Các phương pháp và hệ thống tạo điều kiện kỵ khí..................................16

4.5. Môi trường dinh dưỡng và canh tác .................................................. 17

5. Điều trị kháng sinh điều trị nhiễm khuẩn kỵ khí .......................................... ... 21

5.1. Đặc điểm của các loại thuốc kháng sinh chính,

được sử dụng trong điều trị nhiễm trùng kỵ khí ....................................21

5.2. Phối hợp thuốc beta-lactam và thuốc ức chế

beta-lactamase ................................................................ ................................................................. ..24

5.3. Ý nghĩa lâm sàng của xét nghiệm độ nhạy cảm kỵ khí

vi sinh vật đối với thuốc kháng vi sinh vật.......……………...24

6. Điều chỉnh hệ vi sinh đường ruột ..............................................26

1. Phần kết luận................................................. ............................................27
2. Tác giả……………………………………………………………….27

Lời tựa

Những năm gần đây được đặc trưng bởi sự phát triển nhanh chóng của nhiều lĩnh vực vi sinh học nói chung và lâm sàng, điều này có lẽ là do cả sự hiểu biết đầy đủ hơn của chúng ta về vai trò của vi sinh vật trong sự phát triển của bệnh và nhu cầu của các bác sĩ liên tục sử dụng thông tin về nguyên nhân. của bệnh, đặc tính của mầm bệnh với mục tiêu quản lý thành công bệnh nhân và đạt được kết quả khả quan của hóa trị liệu hoặc điều trị dự phòng bằng hóa chất. Một trong những lĩnh vực phát triển nhanh chóng của vi sinh học là vi khuẩn kỵ khí lâm sàng. Ở nhiều nước trên thế giới, phần vi sinh này được chú ý đáng kể. Các phần dành cho bệnh kỵ khí và nhiễm trùng kỵ khí được đưa vào chương trình đào tạo cho các bác sĩ thuộc các chuyên khoa khác nhau. Thật không may, ở nước ta, phần vi sinh này, cả về đào tạo chuyên gia và khía cạnh chẩn đoán trong công việc của các phòng thí nghiệm vi khuẩn học, đã không được quan tâm đúng mức. Hướng dẫn phương pháp "Nhiễm trùng kỵ khí" bao gồm các phần chính của vấn đề này - định nghĩa và phân loại, đặc điểm của vi sinh vật kỵ khí, sinh cảnh chính của vi khuẩn kỵ khí trong cơ thể, đặc điểm của các dạng nhiễm trùng kỵ khí, hướng và phương pháp phòng thí nghiệm. chẩn đoán, cũng như kháng khuẩn phức tạp -rapia (tác nhân kháng khuẩn, tính kháng/độ nhạy cảm của vi khuẩn, phương pháp xác định và khắc phục). Đương nhiên, hướng dẫn không nhằm mục đích đưa ra câu trả lời chi tiết cho tất cả các khía cạnh của nhiễm trùng kỵ khí. Rõ ràng là các nhà vi sinh học muốn làm việc trong lĩnh vực vi khuẩn kỵ khí cần phải trải qua một chu kỳ đào tạo đặc biệt, nắm vững hơn các vấn đề về vi sinh, thiết bị phòng thí nghiệm, phương pháp chỉ định, nuôi cấy và xác định vi khuẩn kỵ khí. Ngoài ra, kinh nghiệm tích lũy được khi tham gia các hội thảo đặc biệt và hội nghị chuyên đề về nhiễm trùng kỵ khí ở cấp quốc gia và quốc tế. Những khuyến nghị về phương pháp này được gửi đến các nhà vi khuẩn học, bác sĩ thuộc các chuyên khoa khác nhau (bác sĩ phẫu thuật, bác sĩ trị liệu, bác sĩ nội tiết, bác sĩ sản phụ khoa, bác sĩ nhi khoa), sinh viên khoa y và sinh học, giáo viên của các trường đại học y và trường y.

Giới thiệu

Những ý tưởng đầu tiên về vai trò của vi sinh vật kỵ khí trong bệnh lý ở người đã xuất hiện từ nhiều thế kỷ trước. Trở lại thế kỷ thứ 4 trước Công nguyên, Hippocrates đã mô tả chi tiết phòng khám uốn ván và vào thế kỷ thứ 4 sau Công nguyên, Xenophon đã mô tả các trường hợp viêm nướu loét hoại tử cấp tính ở binh lính Hy Lạp. Hình ảnh lâm sàng của bệnh xạ khuẩn được Langenbeck mô tả năm 1845. Tuy nhiên, vào thời điểm đó vẫn chưa rõ vi sinh vật nào gây ra các bệnh này, đặc tính của chúng là gì, cũng như khái niệm về bệnh kỵ khí không có cho đến năm 1861, khi Louis Pasteur xuất bản tác phẩm kinh điển về nghiên cứu Vibrio. rượu bơ và gọi những sinh vật sống trong điều kiện thiếu không khí là "sinh vật kỵ khí" (17). Sau đó, Louis Pasteur (1877) đã phân lập và nuôi cấy Clostridium septicum , và Israel năm 1878 ông mô tả xạ khuẩn. Tác nhân gây bệnh uốn ván là Clostridium tetani - được xác định vào năm 1883 bởi N. D. Monastyrsky, và vào năm 1884 bởi A. Nikolayer. Các nghiên cứu đầu tiên về bệnh nhân nhiễm trùng kỵ khí lâm sàng được thực hiện bởi Levy vào năm 1891. Vai trò của vi khuẩn kỵ khí trong sự phát triển của nhiều bệnh lý y tế lần đầu tiên được mô tả và tranh luận bởi Veiloon. và Zuber năm 1893-1898. Họ đã mô tả nhiều loại nhiễm trùng nghiêm trọng do vi sinh vật kỵ khí gây ra (hoại thư phổi, viêm ruột thừa, áp xe phổi, não, xương chậu, viêm màng não, viêm xương chũm, viêm tai giữa mãn tính, nhiễm khuẩn huyết, viêm cận tử cung, viêm bartholin, viêm khớp có mủ). Ngoài ra, họ đã phát triển nhiều phương pháp tiếp cận phương pháp để phân lập và nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí (14). Do đó, vào đầu thế kỷ 20, nhiều vi sinh vật kỵ khí đã được biết đến, ý tưởng về ý nghĩa lâm sàng của chúng đã được hình thành và một kỹ thuật thích hợp để nuôi cấy và phân lập vi sinh vật kỵ khí đã được tạo ra. Kể từ những năm 60 cho đến nay, tính cấp bách của vấn đề nhiễm trùng kỵ khí tiếp tục gia tăng. Điều này là do cả vai trò căn nguyên của các vi sinh vật kỵ khí trong cơ chế bệnh sinh và sự phát triển khả năng kháng các loại thuốc kháng khuẩn được sử dụng rộng rãi, cũng như diễn biến nghiêm trọng và tỷ lệ tử vong cao của các bệnh mà chúng gây ra.

1.1. Định nghĩa và đặc tính

Trong vi sinh học lâm sàng, vi sinh vật thường được phân loại dựa trên mối quan hệ của chúng với oxy và carbon dioxide trong khí quyển. Điều này dễ dàng kiểm chứng khi ủ vi sinh vật trên thạch máu ở các điều kiện khác nhau: a) trong không khí bình thường (21% oxy); b) trong điều kiện tủ ấm CO 2 (15% oxy); c) trong điều kiện vi hiếu khí (5% oxy) d) điều kiện kỵ khí (0% oxy). Sử dụng phương pháp này, vi khuẩn có thể được chia thành 6 nhóm: vi khuẩn hiếu khí bắt buộc, vi hiếu khí vi hiếu khí, vi khuẩn kỵ khí tùy nghi, vi khuẩn kỵ khí hiếu khí, vi khuẩn kỵ khí vi hiếu khí, vi khuẩn kỵ khí bắt buộc. Thông tin này hữu ích cho việc xác định ban đầu cả vi khuẩn hiếu khí và kỵ khí.

hiếu khí. Để tăng trưởng và sinh sản, vi khuẩn hiếu khí bắt buộc cần môi trường chứa oxy phân tử ở nồng độ 15-21% hoặc CO; lồng ấp. Mycobacteria, Vibrio cholerae và một số loại nấm là những ví dụ về vi khuẩn hiếu khí bắt buộc. Những vi sinh vật này thu được phần lớn năng lượng của chúng thông qua quá trình hô hấp.

vi hiếu khí(microaerophilic aerobes). Chúng cũng cần oxy để sinh sản, nhưng ở nồng độ thấp hơn nồng độ có trong bầu không khí trong phòng. Gonococci và Campylobacter là những ví dụ về vi khuẩn vi hiếu khí và thích môi trường có hàm lượng O2 khoảng 5%.

vi khuẩn kị khí vi hiếu khí. Vi khuẩn có khả năng phát triển trong điều kiện yếm khí và vi hiếu khí, nhưng không thể phát triển trong tủ ấm CO2 hoặc môi trường không khí.

kỵ khí. Vi sinh vật kỵ khí là vi sinh vật không cần oxy để sống và sinh sản. Vi khuẩn kỵ khí bắt buộc là vi khuẩn chỉ phát triển trong điều kiện kỵ khí, tức là. trong môi trường không có oxy.

vi sinh vật hiếu khí. Có khả năng phát triển trong môi trường có chứa oxy phân tử (không khí, tủ ấm CO2), nhưng chúng phát triển tốt nhất trong điều kiện kỵ khí.

kỵ khí tùy tiện(hiếu khí tùy tiện). Có thể tồn tại trong điều kiện có hoặc không có oxy. Nhiều vi khuẩn phân lập được từ bệnh nhân là vi khuẩn kỵ khí tùy tiện (vi khuẩn đường ruột, liên cầu, tụ cầu).

người thích capnophile. Một số vi khuẩn phát triển tốt hơn khi có nồng độ CO 2 cao được gọi là capnophiles, hoặc sinh vật ưa nước. Bacteroides, fusobacteria, vi khuẩn ưa huyết sắc tố là capnophiles, vì chúng phát triển tốt hơn trong môi trường có 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Các nhóm vi sinh vật kỵ khí chính được trình bày trong bảng 1. (42, 43,44).

BànTôi. Các vi sinh vật kỵ khí quan trọng nhất

chi	các loại		một mô tả ngắn gọn về
vi khuẩn	TẠI. mảnh vụn TẠI. vulgatus TẠI. distansonis TẠI. eggerthii		Gram âm, bào tử không hình que
Prevotella	P. melaninogenus P. bivia P. buccalis P. ngà răng P. trung gian
porphyromonas	P. asaccharolyticum P. nội nha P. nướu răng			Gram âm, bào tử không hình que
Ctostridium	C. perfringens C. ramosum C. tự hoại C. novyi C. bào tử C. sordelii C. tetani C. botulinum C. khó khăn		Trực khuẩn gram dương, trực khuẩn hình que hoặc sinh bào tử
xạ khuẩn	VÀ. Người israel A. trâu bò
Pseudoramibacter *	P. alactolyticum		Gram dương, trực khuẩn, không sinh nha bào
		E. đậu lăng trực tràng E. limosum	Gram dương, trực khuẩn, không sinh nha bào
Bifidobacterium		B. eriksonii B. vị thành niên B.breve	gậy gram dương
Propionobacterium		P. mụn trứng cá P. avidum P. hạt P. propionica**	Gram dương. que không sinh bào tử
Lactobacillus		L. catenaforme L. acidophilus	gậy gram dương
liên cầu khuẩn		P. Magnus P. saccharolyticus P. asaccharolyticus
liên cầu khuẩn		P. kỵ khí P. trung gian P.micros P. sản phẩm	Cầu khuẩn gram dương, không sinh bào tử
veilonella		V. parvula	Cầu khuẩn gram âm, không sinh nha bào
Fusobacterium		F. hạt nhân F. necrophorum F. varium F. xác chết	hình thoi gậy
campylobacter		C. bào thai C.jejuni	Gram âm, mảnh, hình xoắn ốc, không sinh nha bào

* Vi khuẩn alaclolyticum phân loại lại như Pseudoramibacter alactolyticum (43,44)

** trước đây lông nhện propionica (44)

*** từ đồng nghĩa F. pseudonecrophorum, F. hoại tử sinh học TỪ(42,44)

1.2. Thành phần của hệ vi sinh vật chính của con người

Nguyên nhân của các bệnh truyền nhiễm đã trải qua những thay đổi đáng kể trong những thập kỷ gần đây. Như đã biết, mối nguy hiểm chính đối với sức khỏe con người trước đây là các bệnh truyền nhiễm cấp tính: sốt thương hàn, kiết lỵ, nhiễm khuẩn salmonella, bệnh lao và nhiều bệnh khác, lây truyền chủ yếu qua đường ngoại sinh. Mặc dù những bệnh nhiễm trùng này vẫn còn quan trọng về mặt xã hội và hiện nay ý nghĩa y học của chúng đang tăng trở lại, nhưng nhìn chung, vai trò của chúng đã giảm đi đáng kể. Đồng thời, có sự gia tăng vai trò của các vi sinh vật cơ hội, đại diện cho hệ vi sinh vật bình thường của cơ thể con người. Thành phần của hệ vi sinh vật bình thường của con người bao gồm hơn 500 loài vi sinh vật. Hệ vi sinh vật bình thường sống trong cơ thể con người phần lớn được đại diện bởi vi khuẩn kỵ khí (Bảng 2).

Vi khuẩn kỵ khí sống trên da và màng nhầy của con người, thực hiện quá trình biến đổi vi sinh vật của các chất nền có nguồn gốc ngoại sinh và nội sinh, tạo ra nhiều loại enzyme, độc tố, hormone và các hợp chất hoạt tính sinh học khác được hấp thụ và liên kết với các thụ thể bổ sung và ảnh hưởng đến cơ thể. chức năng của tế bào và cơ quan. Kiến thức về thành phần của hệ vi sinh vật bình thường cụ thể của các vùng giải phẫu nhất định rất hữu ích để hiểu nguyên nhân của các quá trình lây nhiễm. Tổng số loài vi sinh vật sống trong một vùng giải phẫu nhất định được gọi là hệ vi sinh vật bản địa. Hơn nữa, việc phát hiện các vi sinh vật cụ thể với số lượng đáng kể ở khoảng cách xa hoặc ở nơi cư trú khác thường chỉ nhấn mạnh sự tham gia của chúng vào quá trình phát triển quá trình lây nhiễm (11, 17, 18, 38).

Đường hô hấp. Hệ vi sinh vật của đường hô hấp trên rất đa dạng và bao gồm hơn 200 loài vi sinh vật thuộc 21 chi. 90% vi khuẩn trong nước bọt là vi khuẩn kỵ khí (10, 23). Hầu hết các vi sinh vật này không được phân loại theo các phương pháp phân loại hiện đại và không có ý nghĩa đối với bệnh học. Đường hô hấp của người khỏe mạnh thường bị các vi sinh vật sau xâm chiếm nhiều nhất - liên cầu viêm phổi- 25-70%; h aemophilus cúm- 25-85%; liên cầu sinh mủ- 5-10%; Neisseria viêm màng não- 5-15%. Các vi sinh vật kỵ khí như Fusobacterium, vi khuẩn xoắn ốc, liên cầu khuẩn, liên cầu khuẩn, veilonella và một số loại xạ khuẩn tìm thấy ở hầu hết tất cả những người khỏe mạnh. Vi khuẩn Coliform được tìm thấy trong đường hô hấp ở 3-10% người khỏe mạnh. Sự gia tăng xâm lấn đường hô hấp của các vi sinh vật này đã được tìm thấy ở những người nghiện rượu, những người mắc bệnh nặng, ở những bệnh nhân được điều trị bằng kháng sinh ức chế hệ vi sinh bình thường, cũng như ở những người bị suy giảm chức năng hệ thống miễn dịch.

Bảng 2. Hàm lượng định lượng vi sinh vật trong sinh cảnh

cơ thể người bình thường

Quần thể vi sinh vật trong đường hô hấp thích nghi với những hốc sinh thái nhất định (mũi, hầu, lưỡi, khe nướu). Sự thích nghi của vi sinh vật với các sinh cảnh này được xác định bởi ái lực của vi khuẩn đối với một số loại tế bào hoặc bề mặt nhất định, nghĩa là nó được xác định bởi tính hướng tế bào hoặc mô. Ví dụ, liên cầu nước bọt bám tốt vào biểu mô má và chiếm ưu thế trong thành phần của niêm mạc má. vi khuẩn bám dính-

riy cũng có thể giải thích cơ chế bệnh sinh của một số bệnh. liên cầu sinh mủ bám tốt vào biểu mô hầu họng và thường gây viêm họng, E. coli có ái lực với biểu mô bàng quang nên gây viêm bàng quang.

Da thú. Hệ vi sinh vật bản địa của da được đại diện bởi vi khuẩn chủ yếu thuộc các chi sau: tụ cầu, vi khuẩn, covi khuẩn rynobacterium, Propionobacterium, Brevibacterium và Acinetobacter. Cũng thường có mặt là các loại nấm men thuộc chi Pityrosporium. Vi khuẩn kỵ khí được đại diện chủ yếu bởi vi khuẩn gram dương thuộc chi đề nghị- onobacterium (thông thường Propionobacterium mụn trứng cá). cầu khuẩn gram dương (liên cầu khuẩn spp.) và Vi khuẩn gram dương thuộc chi Vi khuẩn hiện diện ở một số cá nhân.

niệu đạo. Vi khuẩn cư trú ở niệu đạo xa là tụ cầu, liên cầu không tan huyết, bạch hầu, và trong một số ít trường hợp, các thành viên khác nhau của họ Enterobacteriaceae. Vi khuẩn kỵ khí được đại diện ở mức độ lớn hơn bởi vi khuẩn gram âm - vi khuẩnvàFusobacterium spp..

âm đạo. Khoảng 50% vi khuẩn từ dịch tiết của cổ tử cung và âm đạo là vi khuẩn kỵ khí. Hầu hết các vi khuẩn kỵ khí được đại diện bởi lactobacilli và peptostreptococci. Prevo-kể thường được tìm thấy - P. bivia và P. disiens. Ngoài ra, vi khuẩn Gram dương thuộc chi di động và Clostridium.

ruột. Trong số 500 loài sống trong cơ thể con người, có khoảng 300 đến 400 loài sống trong ruột. Các vi khuẩn kỵ khí sau đây được tìm thấy với số lượng lớn nhất trong ruột - vi khuẩn, Bifidobacterium, Clostridium, Vi khuẩn, Lactobacillusvàpeptostrepto- cầu trùng. Bacteroids là vi sinh vật chiếm ưu thế. Người ta đã xác định rằng đối với một tế bào Escherichia coli có hàng nghìn tế bào vi khuẩn.

2. Các yếu tố gây bệnh của vi sinh vật kỵ khí

Khả năng gây bệnh của vi sinh vật có nghĩa là khả năng gây bệnh tiềm tàng của chúng. Sự xuất hiện của khả năng gây bệnh ở vi khuẩn có liên quan đến việc chúng thu được một số đặc tính cung cấp khả năng bám, xâm nhập và lây lan trong cơ thể vật chủ, chống lại cơ chế bảo vệ của nó và gây tổn thương cho các cơ quan và hệ thống quan trọng. Đồng thời, người ta biết rằng độc lực của vi sinh vật là một đặc tính đa xác định, chỉ được thực hiện đầy đủ trong cơ thể của vật chủ nhạy cảm với mầm bệnh.

Hiện nay, một số nhóm yếu tố gây bệnh được phân biệt:

a) chất kết dính, hoặc các yếu tố gắn kết;

b) các yếu tố thích ứng;

c) xâm lấn, hoặc các yếu tố thâm nhập

d) viên nang;

e) độc tố tế bào;

e) nội độc tố;

g) ngoại độc tố;

h) độc tố enzym;

i) các yếu tố điều chỉnh hệ thống miễn dịch;

j) siêu kháng nguyên;

k) protein sốc nhiệt (2, 8, 15, 26, 30).

Các giai đoạn và cơ chế, phạm vi phản ứng, tương tác và mối quan hệ ở cấp độ phân tử, tế bào và sinh vật giữa vi sinh vật và sinh vật chủ rất phức tạp và đa dạng. Kiến thức về các yếu tố gây bệnh của vi sinh vật kỵ khí và ứng dụng thực tế của chúng để phòng bệnh vẫn chưa đầy đủ. Bảng 3 trình bày các nhóm yếu tố gây bệnh chính của vi khuẩn kỵ khí.

Bảng 3. Các yếu tố gây bệnh của vi sinh vật kỵ khí

giai đoạn tương tác		Hệ số		các loại
độ bám dính		Polysacarit dạng nang Fimbria Hemagglutinin
Cuộc xâm lăng		photpholipaza C Protease
Chấn thương các loại vải	ngoại độc tố tan máu Protease collagenaza fibrinolysin Neuraminidaza heparinaza Chondriitin sulfat glucuronidaza Độc tố tế bào N-acetyl-glucosaminidase độc tố ruột chất độc thần kinh		P. melaninogena P. melaninogena
Các yếu tố ức chế hệ thống miễn dịch	Sản phẩm chuyển hóa Lipopolysaccharid (O-kháng nguyên) Protease globulin miễn dịch (G, A, M) C 3 và C 5 convertase Protease a 2 -microglobulin Sản phẩm chuyển hóa Acid béo của vi khuẩn kỵ khí Hợp chất lưu huỳnh oxy hóa khử beta-lactamase		Hầu hết các vi sinh vật kỵ khí
Yếu tố kích hoạt thiệt hại	Lipopolysacarit (O-kháng nguyên) cấu trúc bề mặt

Hiện nay người ta đã xác định rằng các yếu tố gây bệnh của vi sinh vật kỵ khí được xác định về mặt di truyền. Các gen của nhiễm sắc thể và plasmid, cũng như các transposon mã hóa các yếu tố gây bệnh khác nhau, đã được xác định. Việc nghiên cứu chức năng của các gen này, cơ chế và kiểu biểu hiện, truyền và lưu thông trong quần thể vi sinh vật là một vấn đề rất quan trọng.

2.1. Vai trò của hệ vi sinh vật nội sinh kỵ khí trong bệnh lý ở người

Các vi sinh vật kỵ khí của hệ vi sinh vật bình thường thường trở thành tác nhân gây bệnh của các quá trình lây nhiễm khu trú ở các bộ phận giải phẫu khác nhau của cơ thể. Bảng 4 cho thấy tần suất của hệ vi sinh vật kỵ khí trong quá trình phát triển bệnh lý. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

Có thể đưa ra một số khái quát quan trọng về nguyên nhân và cơ chế bệnh sinh của hầu hết các loại nhiễm trùng kỵ khí: 1) nguồn vi sinh vật kỵ khí là hệ vi sinh vật bình thường của bệnh nhân từ đường tiêu hóa, hô hấp hoặc niệu sinh dục của chính họ; 2) những thay đổi về tính chất của mô do chấn thương và/hoặc thiếu oxy tạo điều kiện thích hợp cho sự phát triển của nhiễm trùng kỵ khí thứ cấp hoặc cơ hội; 3) nhiễm trùng kỵ khí, theo quy luật, là do nhiều loại vi khuẩn và thường do hỗn hợp của một số loại vi sinh vật kỵ khí và hiếu khí gây ra, hiệp đồng tác động gây hại; 4) nhiễm trùng đi kèm với sự hình thành và giải phóng mùi nồng nặc trong khoảng 50% trường hợp (vi khuẩn yếm khí không hình thành bào tử tổng hợp axit béo dễ bay hơi gây ra mùi này); 5) nhiễm trùng được đặc trưng bởi sự hình thành khí, hoại tử mô, phát triển áp xe và hoại thư; 6) nhiễm trùng phát triển trong quá trình điều trị bằng kháng sinh aminoglycoside (vi khuẩn kháng chúng); 7) quan sát thấy dịch tiết có màu đen (porphyromonas và prevotella tạo ra sắc tố màu nâu sẫm hoặc đen); 8) nhiễm trùng có một quá trình cận lâm sàng kéo dài, chậm chạp; 9) có những thay đổi mô hoại tử rộng rãi, sự khác biệt giữa mức độ nghiêm trọng của các triệu chứng lâm sàng và khối lượng thay đổi phá hủy, chảy máu ít trên vết mổ.

Mặc dù vi khuẩn kỵ khí có thể gây nhiễm trùng nghiêm trọng và gây tử vong, nhưng việc bắt đầu nhiễm trùng thường phụ thuộc vào trạng thái của các yếu tố bảo vệ cơ thể, tức là. chức năng hệ thống miễn dịch (2, 5, 11). Các nguyên tắc điều trị các bệnh nhiễm trùng này bao gồm loại bỏ mô chết, dẫn lưu, phục hồi lưu thông máu đầy đủ, loại bỏ các chất lạ và sử dụng liệu pháp kháng khuẩn tích cực phù hợp với mầm bệnh, với liều lượng và thời gian thích hợp.

Bảng 4. Vai trò căn nguyên của hệ vi sinh vật kỵ khí

trong giai đoạn phát triển bệnh tật

Bệnh tật	Số khám	Tần suất phân lập vi khuẩn yếm khí
Đầu và cổ Áp xe đầu không do chấn thương Viêm xoang mạn tính Nhiễm trùng khoang quanh hàm
lồng xương sườn viêm phổi khát vọng Áp xe phổi
bụng Áp xe hoặc viêm phúc mạc Viêm ruột thừa áp xe gan
đường sinh dục nữ các loại hỗn hợp Áp xe vùng chậu Quá trình viêm			33 (100%) 22 (88%)
mô mềm vết thương nhiễm trùng áp xe da Loét chân tay do tiểu đường Viêm mô tế bào không do clostridium
nhiễm khuẩn huyết Tất cả các nền văn hóa Nhiễm trùng trong ổ bụng Sảy thai tự hoại

3. Các dạng nhiễm kỵ khí chính

3.1. nhiễm trùng phổi

Các vi sinh vật kỵ khí có ý nghĩa căn nguyên trong bệnh lý này là đại diện của hệ vi sinh vật bình thường của khoang miệng và đường hô hấp trên. Chúng là tác nhân gây ra các bệnh nhiễm trùng khác nhau, bao gồm viêm phổi hít, viêm phổi hoại tử, nhiễm xạ khuẩn và áp xe phổi. Các tác nhân gây bệnh chính của bệnh phổi phổi được trình bày trong Bảng 5.

Bảng 5. Vi khuẩn kỵ khí gây bệnh

màng phổi sự nhiễm trùng

Các yếu tố góp phần vào sự phát triển của nhiễm trùng màng phổi kỵ khí ở bệnh nhân bao gồm hít phải hệ vi sinh vật bình thường (do mất ý thức, khó nuốt, sự hiện diện của các dị vật cơ học, tắc nghẽn, vệ sinh răng miệng kém, hoại tử mô phổi) và lây lan qua đường máu. của vi sinh vật. Như có thể thấy từ Bảng 5, viêm phổi do hít phải thường được gây ra bởi các sinh vật trước đây được gọi là loài "vi khuẩn đường miệng" (hiện là loài Prevotella và Porphyromonas), Fusobacterium và Peptostreptococcus. Phổ vi khuẩn phân lập được từ viêm mủ màng phổi kỵ khí và áp xe phổi gần như giống nhau.

3.2. Nhiễm trùng bàn chân đái tháo đường

Trong số hơn 14 triệu bệnh nhân tiểu đường ở Hoa Kỳ, hôi chân là nguyên nhân nhiễm trùng nhập viện phổ biến nhất. Loại nhiễm trùng này thường bị bệnh nhân bỏ qua trong giai đoạn đầu và đôi khi các bác sĩ điều trị không đúng cách. Nhìn chung, bệnh nhân không tìm cách khám cẩn thận và thường xuyên các chi dưới và không tuân theo các khuyến cáo của bác sĩ về chế độ chăm sóc và đi lại. Vai trò của vi khuẩn kỵ khí trong sự phát triển nhiễm trùng bàn chân ở bệnh nhân tiểu đường đã được xác định từ nhiều năm trước. Các loại vi sinh vật chính gây ra loại nhiễm trùng này được trình bày trong Bảng 6.

Bảng 6. Vi sinh vật hiếu khí và kỵ khí gây

nhiễm trùng bàn chân ở bệnh nhân tiểu đường

hiếu khí	kỵ khí
Proteus mirabili	Bacteroides fragilis
Pseudomonas aeruginosa	các loài khác thuộc nhóm B. fragilis
vi khuẩn sinh hơi trong ruột	Prevotella melaninogenica
Escherichia coli	các loài khác của Prevotella\ Porphyromonas
Klebsiella viêm phổi	Fusobacterium nucleatum
	vi khuẩn fusobacteria khác
	liên cầu khuẩn
Staphylococcus aureus	các loại clostridia khác

Người ta đã xác định rằng 18-20% bệnh nhân tiểu đường bị nhiễm trùng hiếu khí/kỵ khí hỗn hợp. Trung bình, 3,2 loài vi sinh vật hiếu khí và 2,6 loài kỵ khí được phát hiện trên một bệnh nhân, trong số vi khuẩn kỵ khí, peptostreptococci chiếm ưu thế. Bacteroids, prevotella và clostridia cũng thường được phát hiện. Từ vết thương sâu, một nhóm vi khuẩn đã được phân lập trong 78% trường hợp. Hệ vi sinh hiếu khí gram dương (tụ cầu và liên cầu) được phát hiện ở 25% bệnh nhân và hệ vi sinh hiếu khí hình que gram âm được phát hiện ở khoảng 25% bệnh nhân. Khoảng 50% trường hợp nhiễm kỵ khí là hỗn hợp. Những nhiễm trùng này nghiêm trọng hơn và thường phải cắt cụt chi bị ảnh hưởng.

3.3. nhiễm khuẩn huyết và nhiễm trùng huyết

Tỷ lệ vi sinh vật kỵ khí trong sự phát triển của nhiễm khuẩn huyết dao động từ 10 đến 25%. Hầu hết các nghiên cứu cho thấy rằng TẠI.mảnh vụn và các loài khác trong nhóm này, cũng như vi khuẩn thetaiotaomicron là nguyên nhân phổ biến nhất của nhiễm khuẩn huyết. Clostridia có tần suất tiếp theo (đặc biệt là Clostridium perfringens) và peptostreptococci. Chúng thường bị cô lập trong nền văn hóa thuần túy hoặc trong các hiệp hội. Trong những thập kỷ gần đây, ở nhiều nước trên thế giới, tần suất nhiễm trùng kỵ khí đã gia tăng (từ 0,67 lên 1,25 trường hợp trên 1000 người nhập viện). Tỷ lệ tử vong ở bệnh nhân nhiễm trùng huyết do vi sinh vật kỵ khí là 38-50%.

3.4. Uốn ván

Uốn ván là một bệnh nhiễm trùng nghiêm trọng và thường gây tử vong nổi tiếng kể từ thời Hippocrates. Trong nhiều thế kỷ, căn bệnh này là một vấn đề cấp bách liên quan đến vết thương do súng, bỏng và chấn thương. tranh cãi Clostridium uốn ván được tìm thấy trong phân người và động vật và phân bố rộng rãi trong môi trường. Ramon và các đồng nghiệp vào năm 1927 đã đề xuất thành công việc chủng ngừa độc tố để phòng ngừa bệnh uốn ván. Nguy cơ mắc bệnh uốn ván cao hơn ở những người trên 60 tuổi do giảm hiệu quả/mất khả năng miễn dịch chống độc bảo vệ sau tiêm vắc xin. Liệu pháp điều trị bao gồm sử dụng globulin miễn dịch, làm sạch vết thương, điều trị kháng khuẩn và chống độc, chăm sóc điều dưỡng liên tục, thuốc an thần và thuốc giảm đau. Hiện nay bệnh uốn ván sơ sinh đang được đặc biệt quan tâm.

3.5. Bệnh tiêu chảy

Có một số vi khuẩn kỵ khí gây bệnh tiêu chảy. Vi khuẩn kỵ khí nhà sản xuất succinic- vi khuẩn hình xoắn ốc di động với roi lưỡng cực. Tác nhân gây bệnh được bài tiết qua phân của chó và mèo bị nhiễm trùng không triệu chứng, cũng như từ những người bị tiêu chảy. chủng độc tố ruột TẠI.mảnh vụn. Năm 1984 Mayer chỉ ra vai trò của các chủng sinh độc tố TẠI.mảnh vụn trong cơ chế bệnh sinh của tiêu chảy. Các chủng độc tố của mầm bệnh này được phân lập từ bệnh tiêu chảy ở người và động vật. Không thể phân biệt chúng với các chủng thông thường bằng các phương pháp sinh hóa và huyết thanh học. Trong thí nghiệm, chúng gây tiêu chảy và các tổn thương đặc trưng của ruột già và ruột non với tăng sản mật mã. Enterotoxin có trọng lượng phân tử 19,5 kD và không bền với nhiệt. Cơ chế bệnh sinh, phổ và tần suất mắc bệnh, cũng như liệu pháp điều trị tối ưu, vẫn chưa được phát triển đầy đủ.

3.6. Nhiễm trùng kỵ khí phẫu thuật của vết thương và mô mềm

Các tác nhân truyền nhiễm được phân lập từ vết thương phẫu thuật phần lớn phụ thuộc vào loại can thiệp phẫu thuật. Theo nguyên tắc, nguyên nhân gây ra siêu âm trong các can thiệp phẫu thuật sạch không đi kèm với việc mở đường tiêu hóa, niệu sinh dục hoặc đường hô hấp là đường phố. aureus. Trong các loại vết thương siêu âm khác (bị nhiễm bẩn sạch, nhiễm bẩn và bẩn), một hệ vi sinh vật đa vi khuẩn hỗn hợp của các cơ quan bị cắt bỏ bằng phẫu thuật thường được phân lập nhất. Trong những năm gần đây, đã có sự gia tăng vai trò của hệ vi sinh vật cơ hội trong sự phát triển của các biến chứng như vậy. Hầu hết các vết thương bề ngoài được chẩn đoán muộn hơn giữa ngày thứ tám và thứ chín sau phẫu thuật. Nếu nhiễm trùng phát triển sớm hơn - trong vòng 48 giờ đầu tiên sau phẫu thuật, thì đây là điển hình của nhiễm trùng hoại tử do một số loài clostridia hoặc liên cầu khuẩn tán huyết beta gây ra. trong những các trường hợp có sự gia tăng đáng kể về mức độ nghiêm trọng của bệnh, nhiễm độc rõ rệt, nhiễm trùng phát triển nhanh chóng tại địa phương với sự tham gia của tất cả các lớp mô cơ thể trong quá trình này.

3.7. tạo khí nhiễm trùng mô mềm

Sự hiện diện của khí trong các mô bị nhiễm bệnh là một dấu hiệu lâm sàng đáng ngại, và trong quá khứ, bệnh nhiễm trùng này thường được các bác sĩ liên kết với sự hiện diện của mầm bệnh hoại tử khí do clostridial. Hiện nay người ta đã biết rằng nhiễm trùng sinh khí ở bệnh nhân phẫu thuật là do hỗn hợp các vi sinh vật kỵ khí như Clostridium, liên cầu khuẩn hoặc là vi khuẩn, hoặc một trong các loại vi khuẩn coliform hiếu khí. Các yếu tố thúc đẩy sự phát triển của dạng nhiễm trùng này là các bệnh mạch máu ở chi dưới, tiểu đường, chấn thương.

3.8. hoại tử cơ clostridia

Hoại tử khí là một quá trình phá hủy mô cơ kết hợp với tiếng lạo xạo cục bộ, nhiễm độc toàn thân nghiêm trọng do clostridia tạo khí kỵ khí Clostridia là vi khuẩn kỵ khí bắt buộc gram dương phân bố rộng rãi trong đất bị nhiễm phân động vật. Ở người, chúng thường cư trú trong đường tiêu hóa và đường sinh dục nữ. Đôi khi chúng có thể được tìm thấy trên da và trong khoang miệng. Loài quan trọng nhất trong số 60 loài đã biết là Clostridium perfringens. Vi sinh vật này chịu đựng tốt hơn với oxy trong khí quyển và phát triển nhanh. Nó là một độc tố alpha, phospholipase C (lecithinase), phân hủy lecithin thành phosphorylcholine và diglyceride, cũng như collagenase và protease, gây phá hủy mô. Sản xuất độc tố alpha có liên quan đến tỷ lệ tử vong cao trong chứng hoại thư khí. Nó có đặc tính tán huyết, phá hủy tiểu cầu, gây tổn thương mạnh mẽ cho mao mạch và phá hủy mô thứ cấp. Trong 80% trường hợp, hoại tử cơ là do TỪ.perfringens. Ngoài ra, nguyên nhân của bệnh này có liên quan TỪ.tiểu thuyết, TỪ. vách ngăn, TỪ.lưỡng tính- tinh thần. Các loại Clostridium C khác. histolithicum, TỪ.bào tử, TỪ.sự sụp đổ, TỪ.terti có ý nghĩa bệnh nguyên thấp.

3.9. Nhiễm trùng vết thương hoại tử phát triển chậm

Nhiễm trùng vết thương nặng đe dọa tính mạng Có thể xuất hiện đến 2 tuần sau khi nhiễm trùng, đặc biệt ở bệnh nhân tiểu đường

đau ốm. Thông thường, đây là những bệnh nhiễm trùng da hỗn hợp hoặc đơn bào. Nhiễm trùng đơn bào là tương đối hiếm. trong khoảng 10% trường hợp và thường được quan sát thấy ở trẻ em. Tác nhân gây bệnh là liên cầu nhóm A, Staphylococcus aureus và liên cầu kỵ khí (Peptostreptococci). Staphylococci và liên cầu tan máu được phân lập với tần suất như nhau ở khoảng 30% bệnh nhân. Hầu hết trong số họ bị nhiễm bên ngoài bệnh viện. Hầu hết người lớn bị viêm hoại tử các chi (2/3 trường hợp các chi bị ảnh hưởng). Ở trẻ em, thân và háng thường liên quan nhiều hơn. Nhiễm trùng đa vi khuẩn bao gồm một số quá trình gây ra bởi hệ vi sinh vật kỵ khí. Trung bình, khoảng 5 loại chính được phân biệt với vết thương. Tỷ lệ tử vong trong các bệnh như vậy vẫn còn cao (khoảng 50% trong số những bệnh nhân ở dạng nặng). Người lớn tuổi thường có tiên lượng xấu. Tỷ lệ tử vong ở những người trên 50 tuổi là hơn 50% và ở bệnh nhân tiểu đường - hơn 80%.

3.10. nhiễm trùng trong phúc mạc

Nhiễm trùng trong ổ bụng là khó chẩn đoán sớm và điều trị hiệu quả nhất. Một kết quả thành công chủ yếu phụ thuộc vào chẩn đoán sớm, can thiệp phẫu thuật kịp thời và đầy đủ, và sử dụng phác đồ kháng sinh hiệu quả. Bản chất đa vi khuẩn của hệ vi khuẩn liên quan đến sự phát triển của viêm phúc mạc do thủng trong viêm ruột thừa cấp lần đầu tiên được thể hiện vào năm 1938 người thay thế. Số lượng vi sinh vật hiếu khí và kỵ khí được phân lập từ các vị trí nhiễm trùng trong ổ bụng phụ thuộc vào bản chất của hệ vi sinh vật hoặc cơ quan bị thương. Dữ liệu tổng quát chỉ ra rằng số lượng trung bình các loài vi khuẩn được phân lập từ tâm điểm lây nhiễm nằm trong khoảng từ 2,5 đến 5. Đối với vi sinh vật hiếu khí, những dữ liệu này là 1,4–2,0 loài và 2,4–3,0 loài vi sinh vật kỵ khí. Ít nhất 1 loại vi khuẩn kỵ khí được phát hiện ở 65-94% bệnh nhân. Trong số các vi sinh vật hiếu khí, Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus, Enterobacter thường được phát hiện nhất và các vi sinh vật kỵ khí - Bacteroides, Peptostreptococci, Clostridia. Bacteroides chiếm từ 30% đến 60% trong tất cả các chủng vi sinh vật kỵ khí được phân lập. Theo kết quả của nhiều nghiên cứu, 15% trường hợp nhiễm trùng là do kỵ khí và 10% là do hệ vi sinh vật hiếu khí, và theo đó, 75% là do các hiệp hội gây ra. Điều quan trọng nhất trong số họ- e.coli và TẠI.mảnh vụn. Theo N. S. Bogomolova và L. V. Bolshakov (1996), nhiễm khuẩn kỵ khí

là nguyên nhân của sự phát triển của các bệnh răng miệng ở 72,2% trường hợp, viêm phúc mạc ruột thừa - ở 62,92% trường hợp, viêm phúc mạc do bệnh phụ khoa - ở 45,45% bệnh nhân, viêm đường mật - ở 70,2%. Hệ vi sinh vật kỵ khí thường được phân lập nhất trong viêm phúc mạc nặng ở giai đoạn nhiễm độc và giai đoạn cuối của bệnh.

3.11. Đặc điểm của áp xe kỵ khí thực nghiệm

trong thí nghiệm TẠI.mảnh vụn bắt đầu sự phát triển của áp xe dưới da. Các sự kiện ban đầu là sự di cư của bạch cầu đa nhân và sự phát triển của phù nề mô. Sau 6 ngày, 3 vùng được xác định rõ ràng: bên trong - bao gồm các khối hoại tử và các tế bào viêm và vi khuẩn bị biến đổi thoái hóa; vùng giữa được hình thành từ trục bạch cầu và vùng bên ngoài được thể hiện bằng một lớp collagen và mô sợi. Mật độ vi khuẩn từ 10 8 đến 10 9 trong 1 ml mủ. Áp xe được đặc trưng bởi khả năng oxy hóa khử thấp. Rất khó điều trị vì vi khuẩn phá hủy thuốc chống vi trùng, cũng như thoát khỏi các yếu tố bảo vệ của vật chủ.

3.12. Viêm đại tràng giả mạc

Viêm đại tràng giả mạc (PMC) là một bệnh đường tiêu hóa nghiêm trọng được đặc trưng bởi các mảng xuất tiết trên niêm mạc đại tràng. Bệnh này được mô tả lần đầu tiên vào năm 1893, rất lâu trước khi thuốc kháng sinh ra đời và việc sử dụng chúng cho mục đích y học. Hiện nay người ta đã xác định được rằng yếu tố căn nguyên của bệnh này là Clostridium khó tính. Vi phạm hệ vi sinh đường ruột do sử dụng kháng sinh là nguyên nhân dẫn đến sự phát triển của MVP và sự lây lan rộng rãi của các bệnh nhiễm trùng do TỪ.khó tính, phổ lâm sàng của các biểu hiện rất khác nhau - từ vận chuyển và tiêu chảy ngắn hạn, tự phát cho đến sự phát triển của MVP. Số bệnh nhân viêm đại tràng do C. khó tính, ở bệnh nhân ngoại trú 1-3 trên 100.000 và ở bệnh nhân nhập viện 1 trên 100-1000.

Cơ chế bệnh sinh. Khu trú trong ruột người với các chủng độc tố TỪ,khó tính là nhân tố quan trọng trong sự phát triển của PMC. Tuy nhiên, vận chuyển không có triệu chứng xảy ra ở khoảng 3-6% người lớn và 14-15% trẻ em. Hệ vi sinh đường ruột bình thường đóng vai trò là rào cản đáng tin cậy đối với sự xâm chiếm của các vi sinh vật gây bệnh. Nó dễ bị rối loạn bởi kháng sinh và rất khó hồi phục. Tác dụng rõ rệt nhất đối với hệ vi sinh vật kỵ khí là cephalosporin thế hệ 3, clindamycin (nhóm lincomycin) và ampicillin. Theo quy định, tất cả bệnh nhân MVP đều bị tiêu chảy. Đồng thời, phân ở dạng lỏng có lẫn máu và chất nhầy. Có sung huyết và sưng niêm mạc ruột. Viêm loét đại tràng hoặc viêm trực tràng thường được ghi nhận, đặc trưng bởi các hạt, niêm mạc xuất huyết. Hầu hết bệnh nhân mắc bệnh này đều bị sốt, tăng bạch cầu, bụng căng tức. Sau đó, các biến chứng nghiêm trọng có thể phát triển, bao gồm nhiễm độc chung và cục bộ, hạ đường huyết. Các triệu chứng tiêu chảy liên quan đến kháng sinh bắt đầu vào ngày thứ 4-5 của liệu pháp kháng sinh. Trong phân của những bệnh nhân này, S. khó tính trong 94% trường hợp, trong khi ở người lớn khỏe mạnh, vi sinh vật này chỉ được phân lập trong 0,3% trường hợp.

TỪ.khó tính tạo ra hai loại ngoại độc tố có hoạt tính cao - A và B. Độc tố A là một loại độc tố gây tăng tiết và tích tụ chất lỏng trong ruột, cũng như phản ứng viêm với hội chứng xuất huyết. Độc tố B là một độc tố tế bào. Nó được trung hòa bởi huyết thanh kháng ung thư đa trị. Độc tố tế bào này được tìm thấy ở khoảng 50% bệnh nhân bị viêm đại tràng do kháng sinh mà không hình thành màng giả và ở 15% bệnh nhân bị tiêu chảy do kháng sinh với kết quả soi đại tràng sigma bình thường. Hành động gây độc tế bào của nó dựa trên sự khử trùng hợp của vi sợi actin và làm hỏng khung tế bào của tế bào ruột. Gần đây, ngày càng có nhiều dữ liệu xuất hiện trên TỪ.khó tính như một tác nhân lây nhiễm bệnh viện. Về vấn đề này, mong muốn cách ly bệnh nhân phẫu thuật, người mang vi sinh vật này, để tránh lây lan nhiễm trùng trong bệnh viện. TỪ.khó tính nhạy cảm nhất với vancomycin, metronidazole và bacitracin. Do đó, những quan sát này xác nhận rằng các chủng sản xuất độc tố TỪ.khó tính gây ra nhiều loại bệnh, bao gồm tiêu chảy, viêm đại tràng và MVP.

3.13. Nhiễm khuẩn sản phụ khoa

Có thể hiểu được các mô hình phát triển nhiễm trùng cơ quan sinh dục nữ trên cơ sở nghiên cứu chuyên sâu về microbiocenosis của âm đạo. Hệ vi sinh vật bình thường của âm đạo phải được coi là hàng rào bảo vệ chống lại các mầm bệnh phổ biến nhất.

Các quá trình rối loạn sinh học góp phần hình thành bệnh viêm âm đạo do vi khuẩn (BV). BV có liên quan đến sự phát triển của các biến chứng như nhiễm trùng mô mềm sau phẫu thuật kỵ khí, viêm nội mạc tử cung sau sinh và sau phá thai, sảy thai sớm, nhiễm trùng ối (10). Nhiễm trùng sản phụ khoa có bản chất là đa vi khuẩn. Trước hết, tôi muốn lưu ý vai trò ngày càng tăng của vi khuẩn kỵ khí trong sự phát triển của các quá trình viêm cấp tính của các cơ quan vùng chậu - viêm cấp tính của các phần phụ tử cung, viêm nội mạc tử cung sau sinh, đặc biệt là sau khi sinh mổ, các biến chứng sau phẫu thuật trong phụ khoa (viêm màng ngoài tim, áp xe, nhiễm trùng vết thương) (5 ). Các vi sinh vật được phân lập phổ biến nhất từ ​​các bệnh nhiễm trùng đường sinh dục nữ bao gồm vi khuẩn mảnh vụn, cũng như các loại liên cầu khuẩn và liên cầu khuẩn. Streptococci nhóm A thường không được tìm thấy trong nhiễm trùng vùng chậu. Liên cầu nhóm B thường gây nhiễm trùng huyết ở bệnh nhân sản khoa mà cửa vào là đường sinh dục. Những năm gần đây, các bệnh viêm nhiễm sản phụ khoa ngày càng nhiều TỪ.trachomatis. Trong số các quá trình nhiễm trùng phổ biến nhất của đường tiết niệu sinh dục là viêm màng bụng, viêm nội mạc tử cung sau khi mổ lấy thai, nhiễm trùng vòng bít âm đạo sau khi cắt bỏ tử cung, nhiễm trùng vùng chậu sau phá thai nhiễm trùng. Hiệu quả của clindamycin trong các bệnh nhiễm trùng này dao động từ 87% đến 100% (10).

3.14. Nhiễm trùng kỵ khí ở bệnh nhân ung thư

Nguy cơ nhiễm trùng ở bệnh nhân ung thư cao hơn hẳn so với những bệnh nhân phẫu thuật khác. Tính năng này được giải thích bởi một số yếu tố - mức độ nghiêm trọng của bệnh tiềm ẩn, suy giảm miễn dịch, một số lượng lớn các thủ tục chẩn đoán và điều trị xâm lấn, khối lượng lớn và chấn thương của các can thiệp phẫu thuật, sử dụng các phương pháp điều trị rất tích cực - radio và hóa trị . Ở những bệnh nhân được phẫu thuật khối u đường tiêu hóa, áp xe dưới cơ hoành, dưới gan và trong phúc mạc do nguyên nhân kỵ khí phát triển trong giai đoạn hậu phẫu. Các tác nhân gây bệnh chiếm ưu thế vi khuẩn phân mảnh- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., cầu khuẩn gram dương. Trong những năm gần đây, ngày càng có nhiều báo cáo về vai trò quan trọng của vi khuẩn kỵ khí không sinh bào tử trong sự phát triển của tình trạng nhiễm trùng và sự phân lập của chúng khỏi máu trong quá trình nhiễm khuẩn huyết (3).

4. Xét nghiệm chẩn đoán

4.1. Tài liệu đang nghiên cứu

Chẩn đoán phòng thí nghiệm nhiễm trùng kỵ khí là một nhiệm vụ khá khó khăn. Thời gian nghiên cứu từ khi bệnh phẩm được chuyển từ phòng khám đến phòng xét nghiệm vi sinh và cho đến khi có được phản hồi đầy đủ chi tiết là từ 7 đến 10 ngày, điều này không thể làm hài lòng các bác sĩ lâm sàng. Thông thường, kết quả phân tích vi khuẩn sẽ được biết khi bệnh nhân xuất viện. Ban đầu, câu hỏi cần được trả lời: liệu vi khuẩn kỵ khí có trong nguyên liệu hay không. Điều quan trọng cần nhớ là vi khuẩn kỵ khí là thành phần chính của hệ vi sinh vật địa phương của da và niêm mạc, hơn nữa, việc phân lập và xác định chúng phải được thực hiện trong các điều kiện thích hợp. Sự khởi đầu thành công của nghiên cứu về vi sinh lâm sàng của nhiễm trùng kỵ khí phụ thuộc vào việc thu thập chính xác tài liệu lâm sàng phù hợp.

Trong thực hành phòng thí nghiệm thông thường, các vật liệu sau thường được sử dụng nhất: 1) tổn thương nhiễm trùng từ đường tiêu hóa hoặc đường sinh dục nữ; 2) vật liệu từ khoang bụng với viêm phúc mạc và áp xe; 3) máu từ bệnh nhân nhiễm trùng huyết; 4) tiết dịch trong các bệnh viêm mãn tính của đường hô hấp (viêm xoang, viêm tai giữa, viêm xương chũm); 5) vật liệu từ phần dưới của đường hô hấp trong trường hợp viêm phổi hít; 6) dịch não tủy trong viêm màng não; 7) nội dung của áp xe não; 8) vật liệu địa phương cho các bệnh răng miệng; 9) nội dung của áp xe bề mặt: 10) nội dung của vết thương bề mặt; 11) vật liệu của vết thương bị nhiễm trùng (phẫu thuật và chấn thương); 12) sinh thiết (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Các giai đoạn nghiên cứu vật liệu trong phòng thí nghiệm

Chẩn đoán và điều trị thành công nhiễm trùng kỵ khí chỉ có thể thực hiện được với sự hợp tác quan tâm của các nhà vi trùng học và bác sĩ lâm sàng có hồ sơ phù hợp. Lấy mẫu đầy đủ để thử nghiệm vi sinh là rất quan trọng. Phương pháp lấy vật liệu phụ thuộc vào vị trí và loại quá trình bệnh lý. Nghiên cứu trong phòng thí nghiệm dựa trên chỉ định và xác định loài tiếp theo của các vi sinh vật kỵ khí và hiếu khí có trong vật liệu thử nghiệm bằng các phương pháp truyền thống và nhanh, cũng như xác định độ nhạy cảm của các vi sinh vật được phân lập đối với thuốc hóa trị liệu kháng vi sinh vật (2).

4.3. Kiểm tra vật liệu trực tiếp

Có nhiều thử nghiệm trực tiếp nhanh cho thấy rõ ràng sự hiện diện của vi khuẩn kỵ khí với số lượng lớn trong vật liệu thử nghiệm. Một số trong số chúng khá đơn giản và rẻ tiền và do đó có lợi thế hơn nhiều xét nghiệm đắt tiền trong phòng thí nghiệm.

1. 3 a p a x. Vật liệu Fetid luôn chứa vi khuẩn kỵ khí, chỉ một số ít trong số chúng là không mùi.

2. Sắc ký khí lỏng (GLC). Đề cập đến số lượng các phương pháp chẩn đoán nhanh. GLC cho phép bạn xác định các axit béo chuỗi ngắn trong mủ (acetic, propionic, isovaleric, isocaproic, caproic) gây ra mùi. Với sự trợ giúp của GLC, theo quang phổ của các axit béo dễ bay hơi, có thể thực hiện việc xác định loài của các vi sinh vật có trong đó.

3. Huỳnh quang. Nghiên cứu vật liệu (mủ, mô) dưới ánh sáng cực tím ở bước sóng 365 nm cho thấy huỳnh quang màu đỏ đậm, điều này được giải thích là do sự hiện diện của vi khuẩn sắc tố đen thuộc nhóm Basteroides và Porphyromonas, đồng thời cho thấy sự hiện diện của vi khuẩn kỵ khí.

4. Soi vi khuẩn. Trong nghiên cứu về nhiều chế phẩm được nhuộm bằng phương pháp Gram, phết tế bào cho thấy sự hiện diện của các tế bào tiêu điểm viêm, vi sinh vật, đặc biệt là trực khuẩn gram âm đa hình, cầu khuẩn gram dương nhỏ hoặc trực khuẩn gram dương.

5. Miễn dịch huỳnh quang. Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp và gián tiếp là các phương pháp rõ ràng và giúp phát hiện các vi sinh vật kỵ khí trong vật liệu thử nghiệm.

6. Phương pháp ELISA. ELISA cho phép xác định sự có mặt của kháng nguyên cấu trúc hoặc ngoại độc tố của vi sinh vật kỵ khí.

7. Phương pháp sinh học phân tử. Sự phân bố, độ nhạy và độ đặc hiệu lớn nhất trong những năm gần đây đã được thể hiện bằng phản ứng chuỗi polymerase (CPR). Nó được sử dụng để phát hiện vi khuẩn trực tiếp trong vật liệu và để nhận dạng.

4.4. Các phương pháp và hệ thống tạo điều kiện kỵ khí

Vật liệu được lấy từ các nguồn thích hợp và đựng trong vật chứa hoặc phương tiện vận chuyển thích hợp cho mục đích này phải được chuyển ngay đến phòng thí nghiệm. Tuy nhiên, có bằng chứng cho thấy các vi khuẩn kỵ khí có ý nghĩa lâm sàng trong khối lượng lớn mủ hoặc trong môi trường vận chuyển kỵ khí tồn tại trong 24 giờ. Điều quan trọng là môi trường đã cấy phải được ủ trong điều kiện yếm khí hoặc đặt trong bình chứa CO2 và được bảo quản cho đến khi được chuyển sang một hệ thống ủ đặc biệt. Có ba loại hệ thống kỵ khí thường được sử dụng trong các phòng thí nghiệm lâm sàng. Các hệ thống được sử dụng rộng rãi hơn là loại microanaerostat (GasPark, BBL, Cockeysville), đã được sử dụng trong các phòng thí nghiệm trong nhiều năm, đặc biệt là trong các phòng thí nghiệm nhỏ và mang lại kết quả khả quan. Các đĩa Petri có cấy vi khuẩn kỵ khí được đặt bên trong bình đồng thời với túi tạo khí đặc biệt và chất chỉ thị. Nước được thêm vào túi, bình được hàn kín, CO2 và H2 được giải phóng khỏi túi với sự có mặt của chất xúc tác (thường là palladi). Với sự có mặt của chất xúc tác, H2 phản ứng với O2 để tạo thành nước. CO2 là điều cần thiết cho sự phát triển của vi khuẩn kỵ khí, vì chúng là capnophiles. Methylene xanh được thêm vào như là một chỉ thị của điều kiện yếm khí. Nếu hệ thống tạo khí và chất xúc tác hoạt động hiệu quả thì kim chỉ thị sẽ bị đổi màu. Hầu hết các vi khuẩn kỵ khí cần ít nhất 48 giờ nuôi cấy. Sau đó, buồng được mở ra và các cốc được kiểm tra lần đầu tiên, điều này không thuận tiện lắm vì vi khuẩn kỵ khí rất nhạy cảm với oxy và nhanh chóng mất khả năng sống.

Gần đây, các hệ thống kỵ khí đơn giản hơn đã được đưa vào thực tế - túi kỵ khí. Một hoặc hai đĩa hạt có túi tạo khí được đặt trong túi polyetylen trong suốt, hàn kín và ủ trong điều kiện ổn nhiệt. Độ trong suốt của túi polyetylen giúp dễ dàng thực hiện theo dõi định kỳ sự phát triển của vi sinh vật.

Hệ thống thứ ba để nuôi cấy vi sinh vật kỵ khí là buồng kín tự động có vách kính phía trước (trạm kỵ khí) với găng tay cao su và tự động cung cấp hỗn hợp khí không có oxy (N2, H2, CO2). Nguyên liệu, cốc, ống nghiệm, viên xét nghiệm định tính sinh hóa và kháng sinh đồ sẽ được đưa vào tủ này thông qua một cửa sập đặc biệt. Tất cả các thao tác được thực hiện bởi một nhà vi khuẩn học trong găng tay cao su. Nguyên liệu và món ăn trong hệ thống này có thể được xem hàng ngày và cây trồng có thể được ủ từ 7-10 ngày.

Ba hệ thống này có những ưu điểm và nhược điểm riêng, nhưng chúng có hiệu quả để phân lập vi khuẩn kỵ khí và nên có trong mọi phòng thí nghiệm vi khuẩn học. Thường thì chúng được sử dụng đồng thời, mặc dù độ tin cậy cao nhất thuộc về phương pháp canh tác trong trạm kỵ khí.

4.5. Môi trường dinh dưỡng và canh tác

Việc nghiên cứu các vi sinh vật kỵ khí được thực hiện trong một số giai đoạn. Sơ đồ chung để phân lập và xác định vi khuẩn kỵ khí được thể hiện trong Hình 1.

Một yếu tố quan trọng trong sự phát triển của vi khuẩn kỵ khí là sự sẵn có của một tập hợp các chủng vi khuẩn điển hình, bao gồm các chủng tham chiếu từ các tập hợp ATCC, CDC và VPI. Điều này đặc biệt quan trọng để theo dõi môi trường dinh dưỡng, để xác định sinh hóa của các mẫu nuôi cấy thuần khiết và để đánh giá hoạt động của thuốc kháng khuẩn. Có nhiều loại môi trường cơ bản được sử dụng để chuẩn bị môi trường nuôi cấy kỵ khí đặc biệt.

Môi trường dinh dưỡng cho vi sinh vật kỵ khí phải đáp ứng các yêu cầu cơ bản sau: 1) đáp ứng nhu cầu dinh dưỡng; 2) đảm bảo sự phát triển nhanh chóng của vi sinh vật; 3) được giảm thiểu một cách thỏa đáng. Việc cấy ban đầu vật liệu được thực hiện trên các đĩa thạch máu hoặc môi trường chọn lọc được trình bày trong Bảng 7.

Ngày càng nhiều, việc phân lập các vi khuẩn kỵ khí bắt buộc từ vật liệu lâm sàng được thực hiện trên môi trường bao gồm các tác nhân chọn lọc ở một nồng độ nhất định, cho phép phân lập một số nhóm vi khuẩn kỵ khí nhất định (20, 23) (Bảng 8).

Thời gian ủ và tần suất kiểm tra các đĩa đã cấy phụ thuộc vào vật liệu thử nghiệm và thành phần của hệ vi sinh vật (bảng 9).

Tài liệu đang nghiên cứu vết thương có thể tháo rời, nội dung áp xe, Chọc hút khí phế quản, v.v. Vận chuyển đến phòng thí nghiệm: trong cây bách, trong phương tiện vận chuyển đặc biệt (đặt ngay vật liệu vào phương tiện) kính hiển vi vật liệu nhuộm gram

Trồng trọt và phân lập văn hóa thuần túy cốc hiếu khí cho 35±2°C so với 18-28 giờ kỵ khí 5-10% С0 2 1. thạch máu máy điều hòa không khí Gaz-Pak (H 2 + C0 2) 35±2°C từ 48 giờ đến 7 ngày 2. Thạch máu Schaedler 35±2°C từ 48 giờ đến 7 ngày 3. Phương tiện chọn lọc để nhận dạng kỵ khí từ 48 giờ đến 2 tuần 4. Môi trường lỏng (thioglycol)

Nhận biết. Các nền văn hóa tinh khiết từ các khuẩn lạc bị cô lập 1. Nhuộm Gram và Orzeszko để phát hiện bào tử 2. Hình thái khuẩn lạc 3. Mối quan hệ của loại khuẩn lạc với oxy 4. Sơ bộ phân biệt theo độ nhạy cảm với kháng sinh 5. Xét nghiệm sinh hóa Xác định độ nhạy cảm với kháng sinh 1. Phương pháp pha loãng trong thạch hoặc canh thang 2. Phương pháp đĩa giấy (khuếch tán)

Cơm. 1. Phân lập và định danh vi sinh vật kỵ khí

vi sinh vật kỵ khí

Thứ Tư	Mục đích
Thạch máu Brucella (Thạch máu kỵ khí CDC, Thạch máu Shadler) (Thạch BRU)	Không chọn lọc, để cô lập vi khuẩn kỵ khí có trong vật liệu
Bile Esculin Agar cho Bacteroids(WWE thạch)	Chọn lọc và vi phân; để phân lập vi khuẩn thuộc nhóm Bacteroides fragilis
Thạch máu Kanamycin-vancomycin(KVLB)	Chọn lọc cho hầu hết các thể không hình thành bào tử vi khuẩn gram âm
Thạch Phenyl Etyl(ĐẬU XANH)	Ức chế sự phát triển của Proteus và các vi khuẩn đường ruột khác; kích thích sự phát triển của vi khuẩn kỵ khí gram dương và gram âm
Canh thang thioglycol(THẠO)	Đối với các tình huống đặc biệt
thạch lòng đỏ(EYA)	Phân lập clostridia
Thạch cycloserin-cefoxitin-fructose(CCFA) hoặc thạch mannite cycloserine (CMA) hoặc thạch máu mannite cycloserine (CMBA)	Chọn lọc cho C. difficile
Tinh thể-tím-erythromycin-thạch mới(CVEB)	Phân lập Fusobacterium nucleatum và Leptotrichia buccalis
Thạch gingivalis vi khuẩn(BGA)	Phân lập Porphyromonas gingivalis

Bảng 8. Các tác nhân chọn lọc đối với vi khuẩn kị khí bắt buộc

sinh vật	đại lý chọn lọc
Bắt buộc kỵ khí từ vật liệu lâm sàng	neomycin (70mg/l) axit nalidixic (10 mg/l)
Actinomyces spp.	metronidazol (5 mg/l)
Vi khuẩn spp. Fusobacterium spp.	axit nalidixic (10 mg/l) + vancomycin (2,5 mg/l)
Vi khuẩn urealytica	axit nalidixic (10 mg/l) teicoplanin (20 mg/l)
Clostridium difficile	cycloserine (250 mg/l) cefoxitin (8 mg/l)
Fusobacterium	rifampicin (50 mg/l) neomycin (100 mg/l) vancomycin (5 mg/l)

Việc tính toán các kết quả được thực hiện bằng cách mô tả các đặc tính nuôi cấy của vi sinh vật đã phát triển, sắc tố của khuẩn lạc, huỳnh quang, tán huyết. Sau đó, một tiêu bản được chuẩn bị từ các khuẩn lạc, nhuộm Gram, và do đó vi khuẩn Gram âm và Gram dương được phát hiện, các đặc tính hình thái và vi thể được mô tả. Sau đó, các vi sinh vật của từng loại khuẩn lạc được cấy chuyền và nuôi cấy trong môi trường thioglycol có bổ sung hemin và vitamin K. Hình thái của khuẩn lạc, sự hiện diện của sắc tố, tính chất tan huyết và đặc điểm của vi khuẩn trong vết nhuộm Gram giúp có thể sơ bộ nhận biết và phân biệt các vi khuẩn yếm khí. Kết quả là, tất cả các vi sinh vật kỵ khí có thể được chia thành 4 nhóm: 1) Gr + cầu khuẩn; 2) Trực khuẩn Gr+ hoặc cầu khuẩn: 3) Gr-cocci; 4) Trực khuẩn Gr hoặc coccobacilli (20, 22, 32).

Bảng 9. Thời gian ủ bệnh và tần suất nghiên cứu

nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí

Loại cây trồng	Thời gian ủ bệnh*	Tần suất học tập
Máu		Hàng ngày cho đến ngày 7 và sau ngày 14
chất lỏng		hằng ngày
Áp xe, vết thương		hằng ngày
hàng không Đờm Khí quản Dịch tiết phế quản		hằng ngày Một lần hằng ngày hằng ngày
niệu sinh dục Âm đạo, tử cung Tiền liệt tuyến		hằng ngày hằng ngày hằng ngày Một lần
phân		hằng ngày
kỵ khí Brucella xạ khuẩn		hằng ngày 3 lần một tuần 1 lần mỗi tuần

* cho đến khi thu được kết quả âm tính

Ở giai đoạn thứ ba của nghiên cứu, việc xác định lâu hơn được thực hiện. Việc xác định cuối cùng dựa trên việc xác định các đặc tính sinh hóa, đặc điểm sinh lý và di truyền, các yếu tố gây bệnh trong xét nghiệm trung hòa độc tố. Mặc dù mức độ hoàn chỉnh của việc xác định vi khuẩn kỵ khí có thể khác nhau rất nhiều, nhưng một số xét nghiệm đơn giản với xác suất cao cho phép xác định các mẫu nuôi cấy vi khuẩn kỵ khí thuần túy - nhuộm Gram, khả năng vận động, độ nhạy cảm với một số loại kháng sinh bằng cách sử dụng đĩa giấy và các đặc tính sinh hóa.

5. Kháng sinh điều trị nhiễm trùng kỵ khí

Các chủng vi sinh vật kháng kháng sinh phát sinh và bắt đầu lây lan ngay sau khi sử dụng rộng rãi kháng sinh trong thực hành lâm sàng. Cơ chế hình thành tính kháng kháng sinh của vi sinh vật rất phức tạp và đa dạng. Chúng được phân loại thành chính và có được. Sức đề kháng mắc phải được hình thành dưới ảnh hưởng của thuốc. Các cách hình thành chính của nó như sau: a) khử hoạt tính và biến đổi thuốc bằng hệ thống enzyme của vi khuẩn và chuyển nó sang dạng không hoạt động; b) giảm tính thấm của các cấu trúc bề mặt của tế bào vi khuẩn; c) vi phạm cơ chế vận chuyển vào tế bào; d) thay đổi về ý nghĩa chức năng của mục tiêu đối với thuốc. Các cơ chế kháng thu được của vi sinh vật có liên quan đến những thay đổi ở cấp độ di truyền: 1) đột biến; 2) tái tổ hợp di truyền. Các cơ chế truyền trong và ngoài loài của các yếu tố di truyền ngoài nhiễm sắc thể - plasmid và transposon, kiểm soát sự kháng thuốc của vi sinh vật đối với kháng sinh và các loại thuốc hóa trị liệu khác - đóng một vai trò cực kỳ quan trọng (13, 20, 23, 33, 39). Thông tin về tình trạng kháng thuốc kháng sinh ở các vi sinh vật kỵ khí đã được thu thập từ cả nghiên cứu dịch tễ học và di truyền/phân tử. Dữ liệu dịch tễ học chỉ ra rằng kể từ khoảng năm 1977, đã có sự gia tăng khả năng kháng thuốc của vi khuẩn kỵ khí đối với một số loại kháng sinh: tetracycline, erythromycin, penicillin, ampicillin, amoxicillin, ticarcillin, imipenem, metronidazole, chloramphenicol, v.v. Khoảng 50% vi khuẩn kháng lại penicilin G và tetracyclin.

Khi kê đơn liệu pháp kháng sinh cho nhiễm trùng hiếu khí-kỵ khí hỗn hợp, cần trả lời một số câu hỏi: a) nhiễm trùng khu trú ở đâu?; b) vi sinh vật nào thường gây nhiễm trùng nhất ở khu vực này?; c) mức độ nghiêm trọng của bệnh là gì?; d) chỉ định lâm sàng cho việc sử dụng kháng sinh là gì?; e) sự an toàn của việc sử dụng kháng sinh này là gì?; e) chi phí của nó là bao nhiêu?; g) đặc tính kháng khuẩn của nó là gì?; h) thời gian sử dụng thuốc trung bình để khỏi bệnh là bao lâu?; i) nó có qua hàng rào máu não không?; j) nó ảnh hưởng như thế nào đến hệ vi sinh bình thường?; k) Có cần dùng thêm kháng sinh để xử lý quy trình này không?

5.1. Đặc điểm của các loại thuốc kháng sinh chính được sử dụng trong điều trị nhiễm trùng kỵ khí

P e n i c i l l i n s. Trong lịch sử, penicillin G đã được sử dụng rộng rãi để điều trị các bệnh nhiễm trùng hỗn hợp. Tuy nhiên, các vi khuẩn kỵ khí, đặc biệt là vi khuẩn thuộc nhóm Bacteroides fragilis có khả năng sinh beta-lactamase và phá hủy penicillin làm giảm hiệu quả điều trị của thuốc. Nó có độc tính từ thấp đến trung bình, ít ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật bình thường, nhưng ít hoạt động chống lại vi khuẩn kỵ khí sinh beta-lactamase và bị hạn chế đối với vi sinh vật hiếu khí. Penicillin bán tổng hợp (naflacin, oxacillin, cloxacillin và dicloxacillin) ít hoạt động hơn và không đủ để điều trị nhiễm trùng kỵ khí. Một nghiên cứu ngẫu nhiên so sánh về hiệu quả lâm sàng của penicillin và clindamycin trong điều trị áp xe phổi cho thấy việc sử dụng clindamycin ở bệnh nhân làm giảm thời gian sốt và sản xuất đờm tương ứng là 4,4 so với 7,6 ngày và 4,2 so với 8 ngày. Trung bình, 8 (53%) trong số 15 bệnh nhân được điều trị bằng penicillin đã được chữa khỏi, trong khi tất cả 13 bệnh nhân (100%) được điều trị bằng clindamycin đều được chữa khỏi. Clindamycin hiệu quả hơn penicillin trong điều trị bệnh nhân áp xe phổi kỵ khí. Trung bình, hiệu quả của penicillin là khoảng 50-55% và clindamycin - 94-95%. Đồng thời, sự hiện diện của các vi sinh vật kháng penicillin đã được ghi nhận trong nguyên liệu, nguyên nhân thường xuyên khiến penicillin mất tác dụng, đồng thời cho thấy clindamycin là thuốc được lựa chọn để điều trị khi bắt đầu điều trị.

T e tra c và c lin y. Tetracycline cũng được đặc trưng bởi nồng độ thấp

có độc tính và ảnh hưởng tối thiểu đến hệ vi sinh bình thường. Tetracycline trước đây cũng là thuốc được lựa chọn, vì hầu hết tất cả các vi khuẩn kỵ khí đều nhạy cảm với chúng, nhưng kể từ năm 1955, tình trạng kháng thuốc ngày càng gia tăng. Doxycycline và monocycline hoạt động mạnh hơn trong số này, nhưng một số lượng đáng kể vi khuẩn kỵ khí cũng kháng lại chúng.

Chl o r a m f e n i c o l. Cloramphenicol có ảnh hưởng đáng kể đến hệ vi sinh bình thường. Loại thuốc này cực kỳ hiệu quả đối với vi khuẩn thuộc nhóm B. fragilis, xâm nhập tốt vào các mô và dịch cơ thể, đồng thời có hoạt tính trung bình đối với các vi khuẩn kỵ khí khác. Về vấn đề này, nó đã được sử dụng như một loại thuốc được lựa chọn để điều trị các bệnh đe dọa đến tính mạng, đặc biệt là những bệnh liên quan đến hệ thần kinh trung ương, vì nó dễ dàng xâm nhập vào hàng rào máu não. Thật không may, chloramphenicol có một số nhược điểm (ức chế tạo máu phụ thuộc vào liều). Ngoài ra, nó có thể gây ra chứng thiếu máu bất sản không phụ thuộc vào liều đặc ứng. Một số chủng C. perfringens và B. fragilis có khả năng khử nhóm p-nitro của chloramphenicol và khử hoạt tính của nó một cách chọn lọc. Một số chủng B. fragilis có khả năng kháng cao với chloramphenicol vì chúng tạo ra acetyltransferase. Hiện nay, việc sử dụng chloramphenicol để điều trị nhiễm trùng kỵ khí đã giảm đáng kể do lo ngại phát triển các tác dụng phụ về huyết học và sự xuất hiện của nhiều loại thuốc mới, hiệu quả.

K l i n d a m i c i n. Clindamycin là dẫn xuất 7(S)-chloro-7-deoxy của lincomycin. Biến đổi hóa học của phân tử lincomycin dẫn đến một số ưu điểm: hấp thu tốt hơn từ đường tiêu hóa, tăng gấp tám lần hoạt tính chống lại cầu khuẩn gram dương hiếu khí, mở rộng phổ hoạt động chống lại nhiều vi khuẩn kỵ khí gram dương và gram âm, cũng như cũng như động vật nguyên sinh (Toxoplasma và Plasmodium). Chỉ định điều trị cho việc sử dụng clindamycin khá rộng (Bảng 10).

vi khuẩn gram dương. Sự tăng trưởng của hơn 90% chủng S. aureus bị ức chế khi có mặt clindamycin ở nồng độ 0,1 µg/ml. Ở nồng độ có thể dễ dàng đạt được trong huyết thanh, clindamycin có hoạt tính chống lại Str. pyogenes, Str. viêm phổi, Str. viridans. Hầu hết các chủng trực khuẩn bạch hầu cũng nhạy cảm với clindamycin. Đối với vi khuẩn hiếu khí gram âm Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serratia, Pseudomonas, kháng sinh này không có hoạt tính. Cầu khuẩn kỵ khí gram dương, bao gồm tất cả các loại peptococci, peptostreptococci, cũng như propionobacteria, bifidumbacteria và lactobacilli, thường rất nhạy cảm với clindamycin. Clostridia đáng kể về mặt lâm sàng cũng nhạy cảm với nó - C. perfringens, C. tetani, cũng như các clostridia khác, thường được tìm thấy trong các bệnh nhiễm trùng trong phúc mạc và vùng chậu.

Bảng 10. Chỉ định sử dụng clindamycin

Sinh cảnh	Bệnh
đường hô hấp trên	Viêm amidan, viêm họng, viêm xoang, viêm tai giữa, ban đỏ
đường hô hấp dưới	Viêm phế quản, viêm phổi, viêm mủ màng phổi, áp xe phổi
Da và mô mềm	Viêm da mủ, nhọt, viêm mô tế bào, chốc lở, áp xe, vết thương
Xương và khớp	Viêm xương tủy, viêm khớp nhiễm khuẩn
cơ quan vùng chậu	Viêm nội mạc tử cung, viêm mô tế bào, nhiễm trùng âm đạo, áp xe buồng trứng
Khoang miệng	áp xe nha chu, viêm nha chu
Nhiễm khuẩn huyết, viêm nội tâm mạc

Vi khuẩn kỵ khí gram âm - bacteroids, fusobacteria và veillonella - rất nhạy cảm với clindamycin. Nó được phân phối tốt trong nhiều mô và chất lỏng sinh học, do đó trong hầu hết chúng đều đạt được nồng độ điều trị đáng kể, nhưng nó không xâm nhập vào hàng rào máu não. Đặc biệt quan tâm là nồng độ của thuốc trong amidan, mô phổi, ruột thừa, ống dẫn trứng, cơ, da, xương, dịch khớp. Clindamycin tập trung ở bạch cầu trung tính và đại thực bào. Các đại thực bào phế nang tập trung clindamycin trong tế bào (30 phút sau khi dùng, nồng độ vượt quá nồng độ ngoại bào 50 lần). Nó làm tăng hoạt động thực bào của bạch cầu trung tính và đại thực bào, kích thích hóa ứng động, ức chế sản xuất một số độc tố vi khuẩn.

M e t r o n i d a z o l. Loại thuốc hóa trị liệu này được đặc trưng bởi độc tính rất thấp, có khả năng diệt khuẩn đối với vi khuẩn kỵ khí và không bị bất hoạt bởi beta-lactamase của vi khuẩn. Bacteroides rất nhạy cảm với nó, nhưng một số cầu khuẩn kỵ khí và trực khuẩn Gram dương kỵ khí có thể kháng lại. Metronidazole không có tác dụng chống lại hệ vi sinh vật hiếu khí và trong điều trị nhiễm trùng ổ bụng, nó phải được kết hợp với gentamicin hoặc một số aminoglycoside. Có thể gây giảm bạch cầu thoáng qua. Sự kết hợp metronidazole-gentamicin và clindamycin-gentamicin không khác nhau về hiệu quả trong điều trị nhiễm trùng ổ bụng nghiêm trọng.

C e f o k s i t và n. Loại kháng sinh này thuộc nhóm cephalosporin, có độc tính thấp và trung bình và theo quy luật, không bị bất hoạt bởi beta-lactamase của vi khuẩn. Mặc dù có báo cáo về các trường hợp phân lập được các chủng vi khuẩn kỵ khí kháng thuốc do sự hiện diện của protein gắn kháng sinh làm giảm sự vận chuyển thuốc vào trong tế bào vi khuẩn. Khả năng kháng cefoxitin của vi khuẩn B. fragilis dao động từ 2 đến 13%. Nó được khuyến cáo để điều trị nhiễm trùng vùng bụng vừa phải.

C e f o t e t a n. Thuốc này hoạt động mạnh hơn đối với các vi sinh vật kỵ khí gram âm so với cefoxitin. Tuy nhiên, khoảng 8% đến 25% các chủng B. fragilis đã được phát hiện là có khả năng kháng lại nó. Nó có hiệu quả trong điều trị nhiễm trùng phụ khoa và ổ bụng (áp xe, viêm ruột thừa).

C e f gặp a z o l. Nó có phổ tương tự như cefoxitin và cefotetan (hoạt tính mạnh hơn cefoxitin, nhưng kém hoạt động hơn cefotetan). Có thể được sử dụng để điều trị nhiễm trùng nhẹ đến trung bình.

C e f a pera z o n. Nó được đặc trưng bởi độc tính thấp, hoạt động cao hơn so với ba loại thuốc trên, nhưng từ 15 đến 28% các chủng vi khuẩn kỵ khí kháng thuốc đã được xác định. Rõ ràng nó không phải là thuốc được lựa chọn để điều trị nhiễm trùng kỵ khí.

C e f t i z o k c i m. Nó là một loại thuốc an toàn và hiệu quả trong điều trị nhiễm trùng chân ở bệnh nhân tiểu đường, viêm phúc mạc do chấn thương, viêm ruột thừa.

M e r o p e n e m. Meropenem, một carbapenem mới được methyl hóa ở vị trí 1, kháng lại hoạt động của dehydrogenase 1 ở thận, làm thoái hóa nó. Nó hoạt động mạnh hơn khoảng 2-4 lần so với imipenem đối với các vi khuẩn gram âm hiếu khí, bao gồm các đại diện của enterobacteria, hemophilus, pseudomonas, neisseria, nhưng hoạt động kém hơn một chút đối với staphylococci, một số liên cầu khuẩn và enterococci. Hoạt tính của nó chống lại vi khuẩn kỵ khí gram dương tương tự như hoạt tính của imipenem.

5.2. Sự kết hợp giữa thuốc beta-lactam và thuốc ức chế beta-lactamase

Sự phát triển của các chất ức chế beta-lactamase (clavulanate, sulbactam, tazobactam) là một hướng đi đầy hứa hẹn và cho phép sử dụng các chất beta-lactam mới được bảo vệ khỏi quá trình thủy phân khi sử dụng đồng thời: a) amoxicillin - axit clavulanic - có phổ hoạt tính kháng khuẩn cao hơn hơn amoxicillin đơn độc và có hiệu quả gần với sự kết hợp của kháng sinh - penicillin-cloxacillin; b) axit ticarcillin-clavulanic - mở rộng phổ hoạt động kháng khuẩn của kháng sinh chống lại các vi khuẩn sản xuất beta-lacgamase như staphylococci, hemophilus, Klebsiella và vi khuẩn kỵ khí, bao gồm cả vi khuẩn. Nồng độ ức chế tối thiểu của hỗn hợp này thấp hơn 16 lần so với ticarcillin; c) ampicillin-sulbactam - khi kết hợp theo tỷ lệ 1: 2, phổ của chúng mở rộng đáng kể và bao gồm tụ cầu, hemophilus, Klebsiella và hầu hết các vi khuẩn kỵ khí. Chỉ 1% bacteroids kháng lại sự kết hợp này; d) cefaperazon-sulbactam - theo tỷ lệ 1:2 cũng mở rộng đáng kể phổ kháng khuẩn; e) piperacillin-tazobactam. Tazobactam là một chất ức chế beta-lactam mới hoạt động trên nhiều beta-lactamase. Nó ổn định hơn axit clavulanic. Phối hợp này có thể coi là thuốc đơn trị liệu theo kinh nghiệm các nhiễm khuẩn nặng do nhiều loại vi khuẩn như viêm phổi, nhiễm khuẩn ổ bụng, nhiễm khuẩn mô mềm hoại tử, nhiễm khuẩn phụ khoa; f) imipenem-cilastatin - imipenem là một thành viên của nhóm kháng sinh mới gọi là carbapenem. Nó được sử dụng kết hợp với cilastatin theo tỷ lệ 1:1. Hiệu quả của chúng tương tự như clindamycin-aminoglycoside trong điều trị nhiễm trùng phẫu thuật kỵ khí hỗn hợp.

5.3. Ý nghĩa lâm sàng của việc xác định độ nhạy cảm của vi sinh vật kỵ khí với thuốc chống vi trùng

Sự đề kháng ngày càng tăng của nhiều vi khuẩn kỵ khí đối với các chất chống vi trùng đặt ra câu hỏi về cách thức và thời điểm xác định độ nhạy cảm với kháng sinh là hợp lý. Chi phí của thử nghiệm này và thời gian cần thiết để có được kết quả cuối cùng càng làm tăng thêm tầm quan trọng của vấn đề này. Rõ ràng là điều trị ban đầu đối với nhiễm trùng kỵ khí và hỗn hợp nên theo kinh nghiệm. Nó dựa trên bản chất cụ thể của bệnh nhiễm trùng và một phổ nhất định của hệ vi khuẩn trong một bệnh nhiễm trùng nhất định. Nên tính đến tình trạng sinh lý bệnh và việc sử dụng kháng sinh trước đó có thể làm thay đổi hệ vi sinh vật bình thường và tổn thương, cũng như kết quả nhuộm Gram. Bước tiếp theo là xác định sớm hệ vi sinh vật chiếm ưu thế. Thông tin về phổ độ nhạy kháng khuẩn cụ thể của hệ vi sinh vật chiếm ưu thế. Thông tin về phổ độ nhạy kháng khuẩn của loài vi sinh vật chiếm ưu thế sẽ cho phép chúng tôi đánh giá mức độ phù hợp của chế độ điều trị được lựa chọn ban đầu. Trong điều trị, nếu quá trình nhiễm trùng không thuận lợi, cần sử dụng phép xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn thuần khiết với kháng sinh. Năm 1988, một nhóm làm việc đặc biệt về vi khuẩn kỵ khí đã xem xét các khuyến nghị và chỉ định xét nghiệm tính nhạy cảm với kháng sinh ở vi khuẩn kỵ khí.

Việc xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn kỵ khí được khuyến nghị trong các trường hợp sau: a) cần xác định những thay đổi về độ nhạy cảm của vi khuẩn kỵ khí đối với một số loại thuốc; b) nhu cầu xác định phổ hoạt động của thuốc mới; c) trong trường hợp đảm bảo theo dõi vi khuẩn học của từng bệnh nhân. Ngoài ra, một số tình huống lâm sàng cũng có thể chỉ ra nhu cầu thực hiện nó: 1) trong trường hợp phác đồ kháng sinh ban đầu được lựa chọn không thành công và tình trạng nhiễm trùng kéo dài; 2) khi việc lựa chọn một loại thuốc chống vi trùng hiệu quả đóng một vai trò quan trọng trong kết quả của bệnh; .3) khi việc lựa chọn thuốc trong trường hợp cụ thể này là khó khăn.

Cần lưu ý rằng, từ quan điểm lâm sàng, có những điểm khác: a) tăng sức đề kháng của vi khuẩn kỵ khí đối với thuốc chống vi trùng là một vấn đề lâm sàng lớn; b) có sự bất đồng giữa các bác sĩ lâm sàng về hiệu quả lâm sàng của một số loại thuốc chống nhiễm trùng kỵ khí; c) có sự khác biệt về kết quả độ nhạy cảm của vi sinh vật với thuốc in vitro và hiệu quả của chúng in vivo; r) Diễn giải các kết quả được chấp nhận đối với vi khuẩn hiếu khí có thể không phải lúc nào cũng áp dụng cho vi khuẩn kỵ khí. Quan sát độ nhạy cảm/kháng thuốc của 1200 chủng vi khuẩn được phân lập từ các sinh cảnh khác nhau cho thấy một phần đáng kể trong số chúng có khả năng kháng cao với các loại thuốc được sử dụng rộng rãi nhất (Bảng 11).

Bảng 11. Tính kháng của vi khuẩn kỵ khí đối với

kháng sinh thường dùng

vi khuẩn	thuốc kháng sinh		Tỷ lệ phần trăm của các hình thức kháng thuốc
liên cầu khuẩn	Penicillin Erythromycin Clindamycin
Clostridium perfringens	Penicilin Cefoxitin Metronidazol Erythromycin Clindamycin
Bacteroides fragilis	Cefoxitin Metronidazol Erythromycin Clindamycin
veilonella	Penicillin Metronidazol Erythromycin

Đồng thời, nhiều nghiên cứu đã thiết lập nồng độ ức chế tối thiểu của các loại thuốc phổ biến nhất đủ để điều trị nhiễm trùng kỵ khí (Bảng 12).

Bảng 12 Nồng độ ức chế tối thiểu

kháng sinh cho vi sinh vật kỵ khí

Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) là nồng độ thấp nhất của kháng sinh có tác dụng ức chế hoàn toàn sự phát triển của vi sinh vật. Một vấn đề rất quan trọng là tiêu chuẩn hóa và kiểm soát chất lượng xác định độ nhạy cảm của vi sinh vật với kháng sinh (các xét nghiệm được sử dụng, tiêu chuẩn hóa chúng, chuẩn bị môi trường, thuốc thử, đào tạo nhân viên thực hiện xét nghiệm này, sử dụng các mẫu nuôi cấy tham chiếu: B. fragilis-ATCC 25285); B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

Trong sản phụ khoa, penicilin, một số cephalosporin thế hệ 3-4, lincomycin, cloramphenicol được dùng để điều trị nhiễm khuẩn kỵ khí. Tuy nhiên, các loại thuốc chống kỵ khí hiệu quả nhất là đại diện của nhóm 5-nitroimidazole - metronidazole, tinidazole, ornidazole và clindamycin. Hiệu quả điều trị bằng metronidazole đơn thuần là 76-87% tùy theo bệnh và 78-91% với tinidazole. Phối hợp imidazol với aminoglycosid, cephalosporin thế hệ 1-2 làm tăng tỷ lệ điều trị thành công lên tới 90-95%. Một vai trò quan trọng trong điều trị nhiễm trùng kỵ khí thuộc về clindamycin. Sự kết hợp của clindamycin với gentamicin là một phương pháp tham khảo để điều trị các bệnh viêm mủ ở cơ quan sinh dục nữ, đặc biệt là trong các trường hợp nhiễm trùng hỗn hợp.

6. Điều chỉnh hệ vi sinh đường ruột

Trong thế kỷ qua, hệ vi sinh đường ruột bình thường của con người là chủ đề được nghiên cứu tích cực. Nhiều nghiên cứu đã chứng minh rằng hệ vi sinh vật bản địa của đường tiêu hóa đóng một vai trò quan trọng trong việc đảm bảo sức khỏe của sinh vật chủ, đóng một vai trò quan trọng trong sự trưởng thành và duy trì chức năng của hệ thống miễn dịch, cũng như đảm bảo một số quá trình trao đổi chất. Điểm khởi đầu cho sự phát triển của các biểu hiện rối loạn sinh học trong ruột là sự ức chế hệ vi sinh vật kỵ khí bản địa - bifidobacteria và lactobacilli, cũng như kích thích sinh sản của hệ vi sinh vật cơ hội - enterobacteria, staphylococci, streptococci, clostridia, candida. I. I. Mechnikov đã xây dựng các quy định khoa học chính liên quan đến vai trò của hệ vi sinh vật bản địa trong ruột, hệ sinh thái của nó và đưa ra ý tưởng thay thế hệ vi sinh vật có hại bằng hệ vi sinh vật có lợi để giảm nhiễm độc cơ thể và kéo dài tuổi thọ của con người. Ý tưởng của I. I. Mechnikov đã được phát triển thêm trong quá trình phát triển một số chế phẩm vi khuẩn được sử dụng để điều chỉnh hoặc "bình thường hóa" hệ vi sinh vật của con người. Chúng được gọi là "eubiotics" hoặc "probiotics" và chứa vi khuẩn sống hoặc

vi khuẩn khô thuộc chi Bifidobacterium và Lactobacillus. Hoạt động điều hòa miễn dịch của một số eubiotic đã được chứng minh (kích thích sản xuất kháng thể, hoạt động của đại thực bào phúc mạc được ghi nhận). Điều quan trọng nữa là các chủng vi khuẩn eubiotic có nhiễm sắc thể kháng thuốc kháng sinh và việc sử dụng kết hợp chúng làm tăng tỷ lệ sống sót của động vật. Các dạng sữa lên men phổ biến nhất là lactobacterin và bifidumbacterin (4).

7. Kết luận

Nhiễm kỵ khí là một trong những vấn đề nan giải của y học hiện đại (đặc biệt là ngoại khoa, phụ khoa, trị liệu, nha khoa). Khó khăn trong chẩn đoán, đánh giá dữ liệu lâm sàng không chính xác, sai sót trong điều trị, điều trị bằng kháng sinh, v.v. dẫn đến tỷ lệ tử vong cao ở bệnh nhân nhiễm trùng kỵ khí và hỗn hợp. Tất cả điều này chỉ ra sự cần thiết phải nhanh chóng loại bỏ cả sự thiếu kiến ​​​​thức hiện có trong lĩnh vực vi khuẩn học này và những thiếu sót đáng kể trong chẩn đoán và điều trị.