अध्यक्ष: टी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा, एन.एफ. म्यासोएडोव्ह

सत्र १
अध्यक्ष: एन.एफ. म्यासोएडोव्ह, टी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा
मोठा हॉल
19 सप्टेंबर, 9:30 - 11:30

२५ मिएन.एफ. म्यासोएडोव्ह

पेप्टाइड्सवर आधारित औषधे

20 मिनिटेएस.ए. लिंबूर इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस, मॉस्को, रशिया

पेप्टाइड रेग्युलेशनची आण्विक अनुवांशिक यंत्रणा

15 मिनिटेआरयू. ओस्ट्रोव्स्काया

Noopept - कृतीची नवीन यंत्रणा आणि वापरासाठी संभावना

15 मिनिटे टी.एन. सोलर्टिन्स्काया 1, एम.व्ही. शोरोखोव्ह 1 , एन.एफ. Myasoedov 2 , L.A. अँड्रीवा २ 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ इव्होल्यूशनरी फिजियोलॉजी आणि बायोकेमिस्ट्री. त्यांना. सेचेनोव्ह रशियन एकेडमी ऑफ सायन्सेस, सेंट पीटर्सबर्ग; 2 इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस, मॉस्को, रशिया

सस्तन प्राण्यांमधील क्रॉनिक थकवा सिंड्रोममध्ये संज्ञानात्मक आणि मानसिक-भावनिक विकारांच्या न्यूरोपेप्टाइड सुधारणेची वैशिष्ट्ये (अभ्यासाचे उत्क्रांतीवादी पैलू)

15 मिनिटे I.I. बॉबिंतसेव्ह, O.I. सोरोकोलेटोवा, ए.ई. पांढरा कुर्स्क स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटी, कुर्स्क, रशिया

Gly-His-Lys (GHK) पेप्टाइड आणि त्याच्या स्ट्रक्चरल अॅनालॉग्सच्या चिंताग्रस्त आणि वेदनाशामक प्रभावांचा अभ्यास

सत्र 2
अध्यक्ष: एस.एन. कोचेत्कोव्ह, टी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा
मोठा हॉल
19 सप्टेंबर, 16:00 - 18:00

२५ मिएस.एन. कोचेत्कोव्ह

सामाजिकदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण संक्रमणांच्या विकासाचे नवीन अवरोधक

20 मिनिटेटी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री संस्था. एमएम.

प्रतिजैविक पेप्टाइड्सची उपचारात्मक क्षमता

15 मिनिटे व्ही.एन. कोकर्याकोव्ह१.२, ओ.व्ही. शामोवा 1,2, जी.एम. अलेशिना 1, एम.एन. बर्लोव्ह 1,2 , T.V. ओव्हचिनिकोवा 3 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ एक्सपेरिमेंटल मेडिसिन, सेंट पीटर्सबर्ग; 2 सेंट पीटर्सबर्ग स्टेट युनिव्हर्सिटी, सेंट पीटर्सबर्ग; 3 बायोऑर्गेनिक रसायनशास्त्र संस्था

प्राण्यांच्या उत्पत्तीच्या प्रतिजैविक पेप्टाइड्सची रचना आणि कार्ये यांच्या अभ्यासात नॅशनल स्कूल ऑफ बायोकेमिस्टची उपलब्धी

15 मिनिटे ओ.व्ही. शामोवा 1, 2, M.S. झारकोवा 1 , P.M. कोपेकिन 1 , T.A. लुक्यानोवा 1, ए.यु. आर्टामोनोव्ह 1, एस.व्ही. बालांडिन 3 , T.A. फिलाटेनकोवा 1 , ए.एस. नाझारोव १,२, के.ई. सफिउलिना 1, एम.एस. सुखरेव १, टी.यु. पाझिना 1, टी.एम. ग्रिंचुक 4, व्ही.एन. कोक्रीयाकोव्ह 1,2, टी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा 3, डी.एस. ऑर्लोव्ह 1.2 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ एक्सपेरिमेंटल मेडिसिन, सेंट पीटर्सबर्ग; 2 सेंट पीटर्सबर्ग स्टेट युनिव्हर्सिटी, सेंट पीटर्सबर्ग; 3 बायोऑर्गेनिक रसायनशास्त्र संस्था एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को; 4 इन्स्टिट्यूट ऑफ सायटोलॉजी आरएएस, सेंट पीटर्सबर्ग, रशिया

प्रोलिन-रिच पेप्टाइड्स ऑफ इननेट इम्युनिटी नवीन प्रतिजैविक आणि अँटीट्यूमर औषधांचा नमुना म्हणून

15 मिनिटे I.E. एलिसेव्ह 1, आय.एन. टेरटेरोव्ह 1, ओ.व्ही. शामोवा 2, एम.व्ही. कडगेल १ 1 सेंट पीटर्सबर्ग शैक्षणिक विद्यापीठ; 2 प्रायोगिक औषध संस्था, सेंट पीटर्सबर्ग, रशिया

अल्फा-हेलिकल अँटीमाइक्रोबियल पेप्टाइड्स डिझाइन करण्यासाठी एमिनो अॅसिड सिक्वेन्स पॅटर्न वापरणे

15 मिनिटेएम.एन. बर्लोव्ह१,२, ई.एस. उमन्याकोवा 1, ए.व्ही. सोकोलोव्ह 1, टी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा 3, व्ही.एन. कोक्रीयाकोव्ह 1.2 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ एक्सपेरिमेंटल मेडिसिन, सेंट पीटर्सबर्ग; 2 सेंट पीटर्सबर्ग स्टेट युनिव्हर्सिटी, सेंट पीटर्सबर्ग; 3 बायोऑर्गेनिक रसायनशास्त्र संस्था एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को, रशिया

C1q प्रथिनांसह cationic antimicrobial peptides चा परस्परसंवाद आणि पूरक सक्रियतेवर त्यांचा प्रभाव

सत्र 3
अध्यक्ष: एन.एफ. म्यासोएडोव्ह, एल.पी. ओव्हचिनिकोव्ह
मोठा हॉल
20 सप्टेंबर, 9:30 - 11:30

२५ मि एल.पी. ओव्हचिनिकोव्ह 1, एन.व्ही. बॉबकोवा २ 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ प्रोटीन आरएएस, पुश्चिनो; 2 इन्स्टिट्यूट ऑफ सेल बायोफिजिक्स आरएएस, पुश्चिनो, रशिया

YB-1 प्रोटीनवर आधारित अल्झायमर रोगाविरूद्ध नाविन्यपूर्ण औषधाचा विकास

20 मिनिटे ओ.एम. व्होल्पिना 1, डी.ओ. कोरोएव 1, टी.डी. व्होल्कोवा 1, ए.व्ही. कामिनीना 1, एम.पी. फिलाटोवा 1, एस.एम. बालसंयंत 1 , N.I. मेडविन्स्काया 2, पी.व्ही. नेक्रासोव्ह 2, आय.व्ही. नेस्टेरोवा 2 , ए.एन. समोखिन 2, N.V. बॉबकोवा २ 1 एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को; 2 इन्स्टिट्यूट ऑफ सेल बायोफिजिक्स आरएएस, पुश्चिनो, मॉस्को क्षेत्र, रशिया

अल्झायमर प्रकारातील न्यूरोडीजनरेटिव्ह प्रक्रियेत पेप्टाइड्सची संरक्षणात्मक क्रिया

15 मिनिटेए.व्ही. टॅलेरोवा फार्माकोलॉजी संशोधन संस्था. व्ही.व्ही. झाकुसोवा, मॉस्को, रशिया

मेंदू-व्युत्पन्न न्यूरोट्रॉफिक फॅक्टर GSB-106 चे डायपेप्टाइड मिमेटिक हे नवीन पिढीसाठी एक आशाजनक एंटीडिप्रेसेंट आहे

15 मिनिटे के.एन. कोल्यास्निकोवा, T.A. गुडाशेवा, एस.बी. सेरेडेनिन फार्माकोलॉजी संशोधन संस्था. व्ही.व्ही. झाकुसोवा, मॉस्को, रशिया

प्रतिस्थापित ग्लायप्रोलिन GZK-111 - चिंताग्रस्त आणि न्यूरोप्रोटेक्टिव्ह क्रियाकलापांसह एक नवीन डायपेप्टाइड

15 मिनिटे ए.व्ही. अवेटीस्यान 1, आर.ए. झिनोव्किन 1 , आर.ए. सिमोनियन 1, पी.व्ही. नेक्रासोव्ह 2 , ए.एन. समोखिन 2 , D.O. कोरोएव 3 , ओ.एम. व्होल्पिना 3, एन.व्ही. बॉबकोवा २ 1 रिसर्च इन्स्टिट्यूट ऑफ फिजिको-केमिकल बायोलॉजी. ए.एन. बेलोझर्स्की मॉस्को स्टेट युनिव्हर्सिटी, मॉस्को; 2 इन्स्टिट्यूट ऑफ सेल बायोफिजिक्स आरएएस, पुश्चिनो; 3 बायोऑर्गेनिक रसायनशास्त्र संस्था एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को, रशिया

RAGE एक्स्ट्रासेल्युलर डोमेनमधील सिंथेटिक पेप्टाइड्स बल्बेक्टॉमी उंदरांच्या मेंदूतील मायटोकॉन्ड्रिया पुनर्संचयित करतात

15 मिनिटेनरक. स्लोबोडिना 1.2, O.I. बोलशाकोवा 1, ए.एल. श्वार्ट्समन 1, एस.व्ही. सरंतसेवा १ 1 राष्ट्रीय संशोधन केंद्र "कुर्चाटोव्ह इन्स्टिट्यूट", सेंट पीटर्सबर्ग इन्स्टिट्यूट ऑफ न्यूक्लियर फिजिक्स. बी.पी. कॉन्स्टँटिनोव्हा, गॅचीना; 2 पीटर द ग्रेट सेंट पीटर्सबर्ग पॉलिटेक्निक युनिव्हर्सिटी, सेंट पीटर्सबर्ग, रशिया

अल्झायमर रोगाच्या उपचारासाठी आश्वासक संयुगे म्हणून एकत्रित पेप्टाइड्स

सत्र 4
अध्यक्ष : ई.डी. Sverdlov
मोठा हॉल
20 सप्टेंबर, 16:50 - 18:50

15 मिनिटे व्ही.ए. मिटकेविच, ए.ए. मकारोव आण्विक जीवशास्त्र संस्था. व्ही.ए. Engelhardt RAS, मॉस्को, रशिया

रिबोन्यूक्लीज बायनेसवर आधारित अँटीट्यूमर औषधाचा विकास

15 मिनिटेए.व्ही. स्टेपनोव्ह 1,2, A.A. बेलोगुरोव्ह 1,2, ए.जी. गॅबिबोव्ह 1.2 1 बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री संस्था. एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को; 2 कझान (व्होल्गा प्रदेश) फेडरल युनिव्हर्सिटी, कझान, रशिया

नॉन-हॉजकिनच्या लिम्फोमाच्या उपचारांसाठी बी-सेल रिसेप्टर लिगँडसह जोडलेल्या चिमेरिक टी-सेल प्रतिजन रिसेप्टर्सचा वापर

15 मिनिटे व्ही.ए. रिश्टर 1, ई.व्ही. कुलिगीना 1, ओ.व्ही. कोवल १, जी.व्ही. कोचेनेवा 2, ए.ए. Newise 1, A.A. मकार्तसोवा 1, ओ.एस. ट्रोइटस्काया १ 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ केमिकल बायोलॉजी अँड फंडामेंटल मेडिसिन एसबी आरएएस, नोवोसिबिर्स्क, रशिया 2 स्टेट रिसर्च सेंटर फॉर व्हायरोलॉजी अँड बायोटेक्नॉलॉजी, कोल्टसोवो, नोवोसिबिर्स्क प्रदेश, रशिया

Lactaptin ची अँटीट्यूमर कार्यक्षमता वाढवण्याचे मार्ग

15 मिनिटेए.ए. रोसेनक्रांट्स, टी.ए. स्लास्टनिकोवा, ए.व्ही. उलासोव्ह, ए.एस. सोबोलेव्हइन्स्टिट्यूट ऑफ जीन बायोलॉजी आरएएस; मॉस्को स्टेट युनिव्हर्सिटी एम.व्ही. लोमोनोसोव्ह, मॉस्को, रशिया

मॉड्युलर नॅनोट्रांसपोर्टर्स वापरून कर्करोगविरोधी एजंट्सचे लक्ष्यित इंट्रासेल्युलर वितरण

15 मिनिटेआय.व्ही. अलेक्सेंको इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस; बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री संस्था. एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को, रशिया

कर्करोगाच्या उपचारांसाठी जीन थेरपी औषधांच्या समस्या आणि संभावना

15 मिनिटेडी.व्ही. Sverchinsky, व्ही.एफ. लाझारेव्ह, आय.व्ही. गुझोवा, बी.ए. मार्गुलिस इन्स्टिट्यूट ऑफ सायटोलॉजी आरएएस, सेंट पीटर्सबर्ग, रशिया

Hsp70 चेपेरोन क्रियाकलापांचे मॉड्यूलेटर आणि त्यांची ट्यूमर क्षमता

15 मिनिटेएस.एस. लॅरिन, M.I. लुकाशिना, ए.व्ही. किबार्डिन, ए.व्ही. पोस्व्याटेन्को, ई.यू. लिस्युक, जी.पी. जॉर्जिव्ह इन्स्टिट्यूट ऑफ जीन बायोलॉजी आरएएस, मॉस्को, रशिया

द्वेषयुक्त ट्यूमरच्या निदान आणि थेरपीमध्ये आश्वासक मार्कर म्हणून ताण-प्रेरित MHC-सारखे रेणूंचे पडदा-बद्ध आणि विरघळणारे प्रकार

सत्र 5
अध्यक्ष: एन.एफ. म्यासोएडोव्ह, व्ही.ए. स्टोनिक
मोठा हॉल
21 सप्टेंबर, 9.30 - 11.30

२५ मिव्ही.ए. स्टोनिक पॅसिफिक इन्स्टिट्यूट ऑफ बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री. जी.व्ही. एलियाकोवा, रशियन एकेडमी ऑफ सायन्सेसच्या सुदूर पूर्व शाखा, व्लादिवोस्तोक, रशिया

सागरी नैसर्गिक संयुगांवर संशोधनापासून ते नवीन कल्पना आणि जीवशास्त्रापर्यंत

20 मिनिटे पी.व्ही. सर्जीव्ह 1.2, I.A. ऑस्टरमॅन 1,2, ई.एस. कोमारोवा १,२, ए.ए. बोगदानोव 1, ओ.ए. डोन्टसोवा 1.2 1 मॉस्को स्टेट युनिव्हर्सिटी एम.व्ही. लोमोनोसोवा, 2 स्कोल्कोवो इन्स्टिट्यूट ऑफ सायन्स अँड टेक्नॉलॉजी, मॉस्को, रशिया

नवीन प्रतिजैविकांचा शोध घ्या आणि त्यांच्या कृतीच्या यंत्रणेचा अभ्यास करा

15 मिनिटेया.आर. पणिकराटोवा 1, I.S. लेबेदेवा १, ओ.यू. सोकोलोव्ह 1 , D.A. कुप्रियानोव 2, ए.डी. रुमशिस्काया 3, एन.व्ही. कोस्ट 1, N.F. म्यासोएडोव्ह 1 1 FGBNU NTSPZ; - 2 ओओ फिलिप्स; रशियन फेडरेशन, मॉस्को, रशियाच्या आरोग्य मंत्रालयाचे 3 FGAU "LRTS".

फंक्शनल मॅग्नेटिक रेझोनान्स इमेजिंग (एफएमआरआय) वापरून मानवी मेंदूच्या न्यूरोनल नेटवर्कच्या क्रियाकलापांवर सेमॅक्सच्या प्रभावाचा अभ्यास

15 मिनिटेई.एफ. कोलेसानोव्हा, ई.ए. एगोरोवा, व्ही.एन. प्रोझोरोव्स्की, ओ.एम. इपाटोवा बायोमेडिकल केमिस्ट्री संशोधन संस्था. व्ही.एन. ओरेखोविच, मॉस्को, रशिया

नाविन्यपूर्ण औषधांमध्ये सिंथेटिक पेप्टाइड्स: पेप्टाइड इम्युनोजेन्स आणि ट्रान्सपोर्टर पेप्टाइड्स

15 मिनिटेबी.पी. चेलोबानोव 1,2 , ए.ए. फोकिना 1 , A.M. इलिना २, के.व्ही. क्लाबेन्कोवा 2 , ई.ए. बुराकोवा 1 , एम. फुजी 3 , होय. स्टेत्सेन्को 1,2 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ केमिकल बायोलॉजी अँड फंडामेंटल मेडिसिन एसबी आरएएस, नोवोसिबिर्स्क; 2 नोवोसिबिर्स्क स्टेट युनिव्हर्सिटी, नोवोसिबिर्स्क, रशिया; 3 किंडाई विद्यापीठ, फुकुओका, जपान

संभाव्य उपचारात्मक एजंट म्हणून ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड अॅनालॉग्सचे पेप्टाइड संयुग्म

15 मिनिटेए.ए. झामयत्निन(ml.) 1.2, A.V. बालाकिरेवा 1, एन.व्ही. गोरोखोवेट्स 1 , E.Yu. Zerniy 2, N.V. कुझनेत्सोवा 1, व्ही.ए. मकारोव 1, ए.आय. पेटुशकोवा 3, एल.व्ही. सव्वातीवा १ 1 आण्विक औषध संस्था, प्रथम मॉस्को राज्य वैद्यकीय विद्यापीठ. त्यांना. सेचेनोव्ह, मॉस्को; रिसर्च इन्स्टिट्यूट ऑफ फिजिको-केमिकल बायोलॉजी. ए.एन. बेलोझर्स्की मॉस्को स्टेट युनिव्हर्सिटी, मॉस्को; 3 जीवशास्त्र संकाय, लोमोनोसोव्ह मॉस्को स्टेट युनिव्हर्सिटी एम.व्ही. लोमोनोसोव्ह, मॉस्को, रशिया

प्रभावी ग्लूटेन डिटॉक्सिफिकेशनसाठी एंजाइमॅटिक एजंटची निर्मिती

सत्र 6
अध्यक्ष: व्ही.एम. लिपकिन, टी.व्ही. ओव्हचिनिकोवा
मोठा हॉल
21 सप्टेंबर, 16.15 - 18.15

15 मिनिटे I.A. ग्रिवेनिकोव्ह 1, ई.व्ही. नोवोसाडोवा 1 , S.A. अँटोनोव्ह 1, ई.एस. मनुइलोवा 1, ई.एल. आर्सेनेवा 1 , M.A. ग्रेफेनश्टिन 1, ए.एम. झाइकोवा 1, कोबिल्यान्स्की ए.जी. 1, व्ही.व्ही. सिमोनोव्हा 3, एल.जी. खस्पेकोव्ह 3, ओ.एस. लेबेदेवा 2, M.A. लागारकोवा 2, एस.एन. इल्लारिओश्किन 3, व्ही.झेड. टॅरंटुला 1 ,N.F. म्यासोएडोव्ह १ 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस; 2 रशियाच्या फेडरल मेडिकल अँड बायोलॉजिकल एजन्सीच्या भौतिक आणि रासायनिक औषधांसाठी फेडरल वैज्ञानिक आणि व्यावहारिक केंद्र; 3 सायंटिफिक सेंटर ऑफ न्यूरोलॉजी, रशियन एकेडमी ऑफ मेडिकल सायन्सेस, मॉस्को

प्रेरित मानवी प्लुरिपोटेंट स्टेम पेशींवर आधारित चाचणी प्रणाली

15 मिनिटे ई.व्ही. नोवोसाडोवा, ई.एल. अर्सेनेवा, ई.एस. मनुइलोवा, एम.ए. Grefenstein, N.F. म्यासोएडोव्ह, आय.ए. ग्रिवेनिकोव्ह इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस, मॉस्को, रशिया

मेलानोकॉर्टिन कुटुंबातील पेप्टाइड्स प्रेरित मानवी प्लुरिपोटेंट स्टेम पेशींच्या न्यूरोनल भिन्नतेदरम्यान न्यूरॉन-विशिष्ट जनुकांच्या अभिव्यक्तीमध्ये सुधारणा करण्यास सक्षम असतात.

15 मिनिटेए.पी. बोगाचुक 1, Z.I. स्टोरोझेवा 2, यु.ए. झोलोटारेव्ह 3, जी.आय. कोवालेव 4, व्ही.एन. अझेव्ह 5 , ए.एन. मुराशेव 5, डी.आय. Rzhevsky 5, G.B. टेलीगिन 5, व्ही.एम. लिपकिन १ 1 बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री संस्था. एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस; 2 फेडरल मेडिकल रिसर्च सेंटर फॉर मानसोपचार आणि नार्कोलॉजी. व्ही.पी. सर्बियन; 3 इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस; 4 संशोधन संस्था फार्माकोलॉजी आरएएस, मॉस्को, रशिया; 5 बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री संस्थेची शाखा. एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, पुश्चिनो, मॉस्को प्रदेश, रशिया

नवीन पेप्टाइड-आधारित न्यूरोप्रोटेक्टिव्ह औषधाचा प्रीक्लिनिकल अभ्यास

15 मिनिटेयु.ए. झोलोटारेव्ह 1, G.I. कोवालेव 2, एन.व्ही. कोस्ट 3 , ओ.यू. सोकोलोव्ह 3, ए.के. दादयान 1, व्ही.एस. Kozik 1, S.I. स्कार 1, E.V. वसिलीवा 2, ए.पी. बोगाचुक 4, व्ही.एम. लिपकिन 4, N.F. म्यासोएडोव्ह १ 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस; 2 रिसर्च इन्स्टिट्यूट ऑफ फार्माकोलॉजीचे नाव व्ही.व्ही. झाकुसोवा; 3 मानसिक आरोग्य संशोधन केंद्र; 4 बायोऑर्गेनिक रसायनशास्त्र संस्था एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को, रशिया

पार्किन्सन रोग आणि चिंता विकारांच्या मॉडेल्समध्ये नियामक पेप्टाइड एचएलडीएफ-6 ची चिंताग्रस्त आणि न्यूरोप्रोटेक्टिव्ह क्रियाकलाप

15 मिनिटे ए.के. दादयान 1, यु.ए. झोलोटारेव्ह 1, व्ही.एस. Kozik 1, S.I. स्कार 1, I.Yu. नागेव 1, व्ही.एन. अझेव्ह 2, ए.पी. बोगाचुक 3, व्ही.एम. लिपकिन ३, एन.एफ. म्यासोएडोव्ह १ 1 इन्स्टिट्यूट ऑफ मॉलिक्युलर जेनेटिक्स आरएएस, मॉस्को; 2 बायोऑर्गेनिक केमिस्ट्री संस्थेची शाखा. एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, पुश्चिनो; 3 बायोऑर्गेनिक रसायनशास्त्र संस्था एमएम. शेम्याकिन आणि यु.ए. ओव्हचिनिकोव्ह आरएएस, मॉस्को, रशिया

ट्रिटियम आणि ड्युटेरियम लेबल केलेल्या डेरिव्हेटिव्ह्जचा वापर करून प्रयोगशाळेतील प्राण्यांच्या ऊतींमध्ये एचएलडीएफ -6 पेप्टाइडच्या एसीटामाइड स्वरूपाचे फार्माकोकाइनेटिक्स.

एक्स विवो आणि व्हिव्होमध्ये जीन थेरपीच्या बहुतेक पद्धती क्लोन केलेल्या अनुवांशिक रचनांचा वापर करतात जे रुग्णाच्या शरीरात संश्लेषित नसलेल्या किंवा दोषपूर्ण स्वरूपात संश्लेषित केलेल्या प्रोटीनच्या कार्यात्मक स्वरूपाची जागा घेतात. तथापि, अनेक मानवी रोग (कर्करोग, जळजळ, विषाणूजन्य आणि परजीवी संसर्ग) याउलट, सामान्य प्रथिनांच्या अतिउत्पादनाशी संबंधित आहेत. या परिस्थितींवर उपचार करण्यासाठी थेरपी विकसित केली गेली आहे.

विशिष्ट oligonucleotides वापरून प्रणाली. असा छोटा ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड विशिष्ट जनुक किंवा mRNA मध्ये संकरित होऊ शकतो आणि ट्रान्सक्रिप्शन किंवा भाषांतराची पातळी कमी करू शकतो, ज्यामुळे पॅथॉलॉजीच्या संश्लेषणासाठी जबाबदार असलेल्या प्रथिनांचे प्रमाण कमी होते. एक ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड जो जनुकासह संकरित होतो आणि त्याचे लिप्यंतरण अवरोधित करतो त्याला "अँटीजेनिक" म्हणतात, आणि जो संबंधित mRNA सह संकरित होतो त्याला "अँटीसेन्स" (अँटीसेन्स आरएनए) म्हणतात. विशिष्ट जनुकांच्या लिप्यंतरणाच्या सक्रियतेस प्रतिबंध करण्यासाठी, विशेषत: डीएनए-बाइंडिंग प्रथिने (अॅक्टिव्हेटर प्रथिने) ला जोडणारे डबल-स्ट्रॅन्ड ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स देखील वापरले जाऊ शकतात. शेवटी, विशिष्ट mRNA आणि त्यावर संश्लेषित प्रोटीनचे प्रमाण कमी करण्यासाठी, ribozymes वापरले जाऊ शकतात - नैसर्गिक RNA अनुक्रम जे विशिष्ट RNA रेणूंना बांधतात आणि त्यांना कापतात.

भविष्यात, न्यूक्लिक अॅसिड-आधारित औषधांचा व्यापक वापर होण्याची शक्यता आहे, विविध "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड हे वैज्ञानिक संशोधन आणि क्लिनिकल चाचण्यांचे मुख्य उद्दिष्ट आहेत.

3.1 औषधे म्हणून अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स

"अँटीसेन्स" आरएनए (अँटीसेन्स आरएनए), ज्याचा वापर औषध म्हणून केला जाणार आहे, हा एक लहान (15-20 न्यूक्लियोटाइड्स) ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड आहे जो त्यास पूरक असलेल्या विशिष्ट mRNA साइटला बांधू शकतो आणि ते एन्कोड केलेल्या प्रोटीनचे भाषांतर रोखू शकतो, त्याद्वारे पॅथॉलॉजिकल प्रक्रिया दडपली जाते (चित्र 2).

सिंथेटिक "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचा उपचारात्मक प्रभाव लक्ष्य एमआरएनएच्या प्रवेशयोग्य साइटसह त्यांच्या संकरीकरणाच्या विशिष्टतेवर, सेल्युलर न्यूक्लीजच्या कृतीला प्रतिकार आणि सेलमध्ये वितरण प्रणालीची उपस्थिती यावर अवलंबून असतो. 15-20-न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम उच्च विशिष्टतेसह अद्वितीय mRNA सह संकरित होतात. लक्ष्य mRNA संश्लेषित करणार्‍या सेल कल्चरचा वापर करून "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या संचाची चाचणी करून संभाव्य लक्ष्य साइट निर्धारित केल्या जातात. हे करण्यासाठी, सेल्युलर प्रथिनांचे इलेक्ट्रोफोरेटिक पृथक्करण केले जाते, ज्यामध्ये भाषांतर दरम्यान किरणोत्सर्गी लेबल समाविष्ट केले जाते आणि रेडिओऑटोग्राफीचा वापर करून, "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सपैकी कोणत्या विशिष्ट प्रोटीनचे संश्लेषण कमी होते हे निर्धारित केले जाते. विविध आरएनए प्रतिलेखांमध्ये सर्वोत्तम लक्ष्य साइट निवडण्यासाठी कोणतेही सामान्य निकष नाहीत. ओलिगोन्यूक्लियोटाइड्स जे mRNA च्या 5' किंवा 3' टोकांना पूरक आहेत, एक्सॉन आणि इंट्रॉन सीमा आणि अगदी दुहेरी-अडकलेल्या प्रदेशांना देखील प्रभावी ठरू शकतात. अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स इंट्रासेल्युलर न्यूक्लीजद्वारे खराब होऊ शकतात, म्हणून नंतरच्या क्रियेपासून त्यांचे संरक्षण करणे महत्वाचे आहे जेणेकरून ते लक्ष्यासह संकरित करण्याची क्षमता गमावणार नाहीत. यासाठी, पायरीमिडीन बेस, रायबोज किंवा डीऑक्सीरिबोज एका विशिष्ट पद्धतीने बदलता येतात (चित्र 3). अशा प्रकारे, सध्या मोठ्या प्रमाणावर वापरल्या जाणार्‍या “अँटीसेन्स” ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्समध्ये, फॉस्फोडीस्टर बाँडचा मुक्त ऑक्सिजन अणू एसएच गटाने बदलला जातो (चित्र 3B ), परिणामी थायोफॉस्फेट बाँड तयार होतो. अशाप्रकारे सुधारित ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स पाण्यात विरघळतात, नकारात्मक शुल्क घेतात आणि एंडोन्यूक्लीजद्वारे क्लीव्ह होत नाहीत. जेव्हा लक्ष्य साइटवर संकरित केले जाते, तेव्हा ते डुप्लेक्स तयार करतात जे रिबोन्यूक्लिझ (RNase) सक्रिय करतात, एक अंतर्जात एन्झाइम जो अशा संकरित रेणूमध्ये mRNA चा क्लीव्ह करतो. अशा ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या पहिल्या नैदानिक ​​​​चाचण्या - "पहिल्या पिढीच्या" औषधांवर केल्या गेल्या आहेत. सायटोमेगॅलव्हायरसचे आरएनए, मानवी इम्युनोडेफिशियन्सी व्हायरस, तसेच कर्करोग, आतड्यांसंबंधी रोग आणि इतर रोगांच्या विकासासाठी जबाबदार जनुकांचे एमआरएनए हे लक्ष्य आहेत.

फॉस्फोरामाइड आणि पॉलिमाइड (पेप्टाइड) बंधांसह संश्लेषित "अँटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स - पेप्टाइड न्यूक्लिक अॅसिड्स (पेप्टाइड न्यूक्लिक अॅसिड, पीएनए) (चित्र 3 व्ही आणि डी ). असे रेणू न्यूक्लीजच्या क्रियेला खूप प्रतिरोधक असतात. साखरेच्या अवशेषांच्या 2'-कार्बन अणूला जोडलेले रासायनिक गट आणि पायरीमिडीन्सचे C-5 अणू देखील अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे संरक्षण करतात आणि लक्ष्य साइटवर त्यांचे बंधन सुलभ करतात (चित्र 3). 2डीआणि इ ). या आणि इतर बदलांचे सर्व फायदे आता गहनपणे अभ्यासले जात आहेत.

सेलमध्ये "अँटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे प्रवेश त्यांना लिपोसोममध्ये ठेवून मोठ्या प्रमाणात सुलभ केले जाऊ शकते. ही अत्यंत कार्यक्षम वितरण प्रणाली कमी एकाग्रतेवर "अँटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचा वापर करण्यास परवानगी देते. तथापि, जर लिपोसोम विशिष्ट अवयवांच्या विशिष्ट पेशींच्या एपिटोप्ससाठी विशिष्ट ऍन्टीबॉडीजसह संयुग्मित केले जातात, तर "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे लक्ष्यित वितरण करणे शक्य होईल.

आयोजित प्रीक्लिनिकल चाचण्यांनी दर्शविले आहे की "अँटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स अतिशय प्रभावी औषधे आहेत. कोरोनरी आणि कॅरोटीड धमन्यांच्या स्टेनोसिसच्या उपचारांसाठी त्यांच्या वापराच्या शक्यतेचा अभ्यास केला गेला आहे, ज्यामुळे हृदयविकाराचा झटका आणि स्ट्रोक होतो. या प्रकरणांमध्ये, ते अनेकदा अँजिओप्लास्टीचा अवलंब करतात, बलून कॅथेटरचा वापर करून धमन्यांचा विस्तार करतात, परंतु सुमारे 40% रुग्णांमध्ये स्टेनोसिस 6 महिन्यांनंतर पुन्हा दिसून येते, कारण अँजिओप्लास्टी गुळगुळीत स्नायू पेशींचा प्रसार आणि आतील भागात आंतरकोशिक पदार्थाचा स्राव उत्तेजित करते. त्याच्या विस्ताराच्या ठिकाणी धमनीचा थर. एका प्रयोगात, अँजिओप्लास्टी नंतर उंदरांच्या कॅरोटीड धमन्यांमध्ये, थायोफॉस्फेट बॉन्डसह अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स, एमआरएनए एन्कोडिंग प्रथिनांना पूरक, सस्तन प्राण्यांच्या पेशी चक्रासाठी महत्त्वाच्या आहेत; परिणामी, आवर्ती स्टेनोसेसची वारंवारता 90% कमी झाली. गुळगुळीत स्नायू पेशींचा प्रसार एथेरोस्क्लेरोसिस, मधुमेह मेल्तिस, कोरोनरी बायपास शस्त्रक्रियेनंतरच्या गुंतागुंतांमध्ये देखील होतो. कदाचित, या सर्व राज्यांना समान मार्गांनी नियंत्रित केले जाऊ शकते.

अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचा वापर व्हायरल इन्फेक्शन आणि मलेरियावर उपचार करण्यासाठी देखील केला जाऊ शकतो. याव्यतिरिक्त, "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडच्या तोंडी प्रशासनाचा वापर करून क्रॉन्स रोगाच्या उपचारासाठी पहिल्या टप्प्यातील क्लिनिकल चाचण्यांचे परिणाम लक्षात येण्याजोग्या दुष्परिणामांशिवाय स्पष्ट उपचारात्मक प्रभाव दर्शवितात. या प्रकरणात, इंटरसेल्युलर आसंजन प्रकार 1 साठी कोड केलेले लक्ष्य mRNA, जे क्रोहन रोग असलेल्या रुग्णांमध्ये जास्त प्रमाणात तयार होते. संधिवात, सोरायसिस आणि अल्सरेटिव्ह कोलायटिस यांसारख्या इतर दाहक रोगांच्या उपचारांसाठी समान ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडच्या परिणामकारकतेचा शोध घेण्याचा हेतू आहे.

तत्वतः, "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स क्रोमोसोमल टार्गेट डीएनए आणि ब्लॉक ट्रान्सक्रिप्शनसह तिहेरी हेलिक्स बनवू शकतात. तथापि, "अँटीजेनिक" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सची विशिष्टता अद्याप औषधांसाठी स्वीकारलेल्या मानकांची पूर्तता करत नाही.

सारांश

पुनरावलोकन विविध अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड तयारीच्या फार्माकोकिनेटिक वैशिष्ट्यांचा विचार करते. पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढीतील औषधांच्या फार्माकोकिनेटिक्सची तुलना केली गेली. आणि रेणूच्या रासायनिक बदलाच्या फार्माकोकाइनेटिक्सवरील प्रभावाचा देखील विचार केला.

कीवर्डमुख्य शब्द: अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स, फॉस्फोथिओएट ऑलिगोडिओक्सिन्युक्लियोटाइड्स, फार्माकोकाइनेटिक्स

परिचय

अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स (एएसओ) चे फार्माकोकिनेटिक गुणधर्म त्यांच्या भौतिक आणि रासायनिक गुणधर्मांचा विचार करताना उत्तम प्रकारे समजतात. फॉस्फोथिओएट एसीओचे चार्ज, आण्विक वजन आणि अॅम्फिपॅथिक स्वरूप यासारख्या पॅरामीटर्सचा त्यांच्या फार्माकोकिनेटिक्सवर स्पष्ट प्रभाव पडतो. रासायनिक रचना, विशेषतः, फॉस्फोथियोएट गट आणि 2'-मेथॉक्सिथिल (MOE), ASO च्या फार्माकोकिनेटिक गुणधर्मांवर विशेषतः महत्त्वपूर्ण प्रभाव पाडते.

पहिल्या पिढीतील फॉस्फोथिओएट ऑलिगोडिओक्सिन्युक्लियोटाइड्स (ODNs) चे शोषण, वितरण, चयापचय आणि उत्सर्जन यांचा प्रयोगशाळेतील प्राण्यांमध्ये आणि नैदानिक ​​​​अभ्यासांमध्ये विस्तृतपणे अभ्यास केला गेला आहे. फॉस्फोथिओएट एएसओ तयारीच्या फार्माकोकाइनेटिक्सची वैशिष्ट्ये खालीलप्रमाणे आहेत: पॅरेंटेरली प्रशासित फॉस्फोथिओएट ओडीएन त्वरीत रक्त प्लाझ्मामध्ये स्वतःला शोधतात, जेथे ते प्लाझ्मा प्रोटीनच्या हायड्रोफिलिक प्रदेशांना बांधतात आणि त्यामुळे ग्लोमेरुलर फिल्टरेशन टाळतात. हे हायड्रोफिलिक प्रदेश इतर हायड्रोफिलिक प्रदेशांपेक्षा वेगळे आहेत ज्यात लिपोफिलिक औषधे बांधली जातात आणि अशा प्रकारे ASO साठी प्लाझ्मा प्रोटीन बंधनकारक करण्यासाठी कमी स्पर्धा आहे. प्लाझ्मा गतिशास्त्र हे लहान वितरण टप्पा (अनेक तासांच्या क्रमाने) द्वारे दर्शविले जाते आणि त्यानंतर दिवस किंवा आठवड्यांच्या अर्ध्या आयुष्यासह निर्मूलनाचा टप्पा असतो. वितरणाच्या सुरुवातीच्या टप्प्यात ASO ला प्रथिनांचे बंधन आणि यकृत, मूत्रपिंड, लिम्फ नोड्स, अस्थिमज्जा आणि प्लीहा यांच्या ऊतींवर या कॉम्प्लेक्सचे वितरण समाविष्ट आहे, जे ASO च्या सर्वात सक्रिय बंधन आणि संचयनाची ठिकाणे आहेत. . हे स्पष्ट आहे की प्रारंभिक प्रथिने बंधनामुळे ASO निर्मूलनाचा टप्पा त्याच्या वितरणाच्या प्रारंभिक टप्प्याद्वारे निर्धारित केला जातो. प्रथिनांच्या संभाव्य संपृक्ततेमुळे , फार्माकोकिनेटिक वक्र (AUC) अंतर्गत क्षेत्र वाढत्या डोससह वाढते, कारण ASO त्यांच्या संपृक्ततेनंतर प्रथिनांना जोडत नाही, परंतु मुक्त स्वरूपात रक्तप्रवाहात प्रवेश करते. बंधनकारक केल्यावर, ASO सेल झिल्लीद्वारे सेल झिल्लीद्वारे सेल्युलर स्पेसमधून एकाग्रता ग्रेडियंटसह पेशींमध्ये प्रवेश करते, बहुधा वाहक प्रोटीनच्या मदतीने. पेशींमधील ASOs उपलब्ध लक्ष्यांशी बांधील असतात, परंतु मुख्यतः पेशींमधील ASOs बहुधा इंट्रासेल्युलर प्रथिनांना बांधतात. सेलमध्ये, सर्वव्यापी न्यूक्लीज, परंतु सायटोक्रोम P450 एंजाइम नाहीत, ASO तयारीचे चयापचय करतात. सायटोक्रोम P450 एंजाइम सामान्यत: लहान रेणू औषधांचे चयापचय करतात, ASO चयापचय प्रक्रियांमध्ये पारंपारिक लहान रेणू संयुगांसह स्पर्धा करत नाहीत, ज्यामुळे औषधांच्या परस्परसंवादाचा धोका कमी होतो. लघवीमध्ये एएसओचे उत्सर्जन हे शेवटी ऊतींमधील चयापचय आणि ऊतींच्या बाहेर आणि प्रणालीगत अभिसरणात चयापचय आणि मूळ पदार्थांचे समतोल स्थापित करण्याचा परिणाम आहे. प्रयोगशाळेतील प्राणी आणि मानवांमधील या प्रक्रिया खूप समान आहेत, म्हणूनच प्रयोगशाळेतील प्राणी आणि मानव यांच्यातील परस्परसंबंध ओळखणे शक्य नाही.

सध्या, “सेकंड जनरेशन” ASO कॉन्फिगरेशन, ज्यामध्ये MOE गटांना 3" आणि 5" टोकांवर न्यूक्लियोटाइड्सच्या 2" स्थानावर वैशिष्ट्यीकृत केले आहे, क्लिनिकल चाचण्यांमध्ये मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाते. हे कॉन्फिगरेशन अपरिवर्तित फॉस्फोथिओएट ODN च्या तुलनेत अधिक प्रगत संरचना आहे. , जी पहिल्या पिढीतील अँटीसेन्स औषधे आहेत. हे त्याची वाढलेली कार्यक्षमता, कमी झालेली विषारीता आणि वाढलेले अर्ध-आयुष्य यामुळे आहे. ASO च्या पहिल्या ते दुसऱ्या पिढीच्या संक्रमणाशी संबंधित अनेक घटक त्यांच्या फार्माकोकिनेटिक्सच्या सुधारणेशी थेट संबंधित आहेत.

ASO च्या रासायनिक संरचनेची वैशिष्ट्ये

फॉस्फोथिओएट कंकाल

अँटिसेन्स अ‍ॅक्टिव्हिटीसह औषधे तयार करण्याचे सर्वात जुने प्रयत्न अपरिवर्तित डीएनएच्या वापराशी संबंधित होते, जे दुर्दैवाने, न्यूक्लिझद्वारे ऱ्हासास अत्यंत संवेदनाक्षम होते. असे झाले की, सर्वव्यापी केंद्रके मूळ डीएनएचे फॉस्फोडीस्टेरेस बंध तोडतात, परिणामी अपरिवर्तित ASO चे अर्धे आयुष्य मिनिटे असते. हे जलद ऱ्हास हे असंशोधित अँटीसेन्स डीएनएच्या फार्माकोकिनेटिक प्रोफाइलचे प्रमुख वैशिष्ट्य होते. DNA च्या फॉस्फोडिएस्टर पाठीचा कणा फॉस्फोथिओएटमध्ये बदलल्याने ASO चे फार्माकोकिनेटिक प्रोफाइलमध्ये आमूलाग्र बदल झाला. या तयारींमध्ये, फॉस्फोथिओएट रचना फॉस्फोडीस्टर बाँडमधील एका सल्फर अणूला एक नॉन-ब्रिजिंग ऑक्सिजन अणूसह बदलते. ही रचना एएसओचा न्यूक्लीजचा प्रतिकार वाढवते आणि परिणामी, त्यांचे गतिज गुणधर्म सुधारते.

फॉस्फोथिओएट चिरालिटी

अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की एसीओच्या डायस्टर स्केलेटनच्या थियेशनमुळे केवळ न्यूक्लीजचा प्रतिकारच वाढतो असे नाही तर प्रत्येक फॉस्फोथिओएट बाँडमध्ये स्टिरीओइसोमर्सच्या अस्तित्वाची शक्यता निर्माण होण्यास देखील कारणीभूत ठरते. की कोणत्याही 20-mer ACO मध्ये 219 Sp किंवा Rp स्टिरिओसोमर्स असतात. न्यूक्लिझ प्रतिरोध आणि वाढीव प्रथिने बंधनकारक संयोजन ASO च्या फार्माकोकिनेटिक्सवर जोरदार प्रभाव पाडते. फॉस्फोथिओएट एएसओची स्थिरता वाढविण्यामुळे प्लाझ्मापासून औषधाचे अर्धे आयुष्य फॉस्फोडीस्टर एएसओच्या अर्ध्या आयुष्याच्या तुलनेत 30-60 मिनिटांपर्यंत वाढते, जे 1-2 मिनिटे आहे.

फॉस्फोथिओएट बाँडद्वारे फॉस्फोडीस्टरच्या बदलीमुळे न्यूक्लिझ प्रतिरोध आणि चिरॅलिटी चर्चा करण्यायोग्य आहे कारण या संरचनात्मक वैशिष्ट्याशी संबंधित भौतिक गुणधर्म पहिल्या आणि द्वितीय-पिढीच्या ASOs दोन्हीसाठी महत्त्वपूर्ण आहेत. फॉस्फोथियोएट एएसओच्या न्यूक्लीजचा प्रतिकार धातूच्या आयनच्या एक्सोन्युक्लिझच्या सक्रिय साइटवर नॉनब्रिजिंग ऑक्सिजनवर सल्फरच्या समीपतेमुळे उद्भवतो. या समीपतेमुळे सक्रिय साइटवरून धातूच्या आयनचे विस्थापन होऊ शकते. हा प्रभाव 3'–5' DNA पॉलिमरेझ एक्सोन्यूक्लिझ मॉडेलमध्ये प्रदर्शित झाला. क्ष-किरण क्रिस्टलोग्राफिक डेटा मेटल आयनच्या विस्थापनाबद्दल या गृहितकास समर्थन देतो. डीएनए पॉलिमरेझच्या एक्सोन्युक्लिझ क्रियाकलापासाठी स्टिरिओइसॉमर्सच्या संवेदनशीलतेतील स्पष्ट फरक सक्रिय साइटमध्ये ODN फॉस्फोथियोएट स्टिरिओइसॉमर्सच्या प्रस्तावित स्वरूपाशी सुसंगत आहेत. अशी शक्यता आहे की फॉस्फोरोथिओएट बाँडची चिरॅलिटी इतर न्यूक्लीजमध्ये त्याच प्रकारे व्यत्यय आणू शकते, म्हणजे, मेटल आयन विस्थापनाद्वारे, जरी भिन्न एक्सोन्यूक्लीसेस एंजाइमच्या सक्रिय साइटच्या स्वरूपावर अवलंबून Rp आणि Sp बाँडसाठी भिन्न प्राधान्ये दर्शवू शकतात.

वैकल्पिकरित्या, सल्फर डायस्टर बाँडमध्ये ऑक्सिजनची जागा घेऊ शकते. ऑक्सिजनच्या तुलनेत नकारात्मक चार्ज घेण्याच्या सल्फरच्या क्षमतेतील फरक, सक्रिय साइटमधील बदलांचा अंदाज लावणे शक्य करते. हा बदल बहुधा फॉस्फोडीस्टर बाँड्सच्या हायड्रोलिसिसमुळे झाला आहे आणि दोन नकारात्मक चार्ज केलेल्या ऑक्सिजन अणूंसह क्षणिक पेंटाव्हॅलेंट फॉस्फरसच्या निर्मितीमुळे असू शकतो. विषुववृत्तीय ऑक्सिजन अणूंपैकी एकाला सल्फरने बदलल्यास एन्झाइमच्या क्रियाकलापांवर नकारात्मक परिणाम होतील: (1) पाण्याचे बंधन कमी होते, ज्यामुळे अणूंवर स्थानिक नकारात्मक शुल्क स्थिर होते, ज्यामुळे सल्फरवर दुसरा नकारात्मक शुल्क मिळणे कठीण होते; आणि (2) सल्फरला Mg 2+ चे बंधन कमी केले. डायस्टेरिओमेरिक फॉस्फोरोथिओएट समावेशाच्या राइबोझाइम क्लीव्हेजच्या पातळीच्या अभ्यासात नंतरच्या प्रभावाचे पुरावे आहेत, जेव्हा Mg 2+ ची जोडणी फॉस्फोरोथिओएट राइबोझाइम्सच्या क्लीवेज प्रभावांना प्रतिबंधित करते. याव्यतिरिक्त, हे दर्शविले गेले आहे की फॉस्फोथियोएट बॉन्ड्सपासून पुढे कंकाल क्षेत्रांमध्ये न्यूक्लीज क्रियाकलापांमध्ये काही प्रमाणात घट झाली आहे, ज्यामुळे चिरालिटी प्रभावाचा प्रसार सूचित होतो. फॉस्फोडिएस्टर बॅकबोनच्या तुलनेत फॉस्फोथिओएट बॅकबोनभोवती पाण्याच्या रेणूंच्या व्यवस्थेतील बदलांद्वारे ही घटना उत्तम प्रकारे स्पष्ट केली जाते.

न्यूक्लिझ क्रियाकलापावरील स्टिरिओस्पेसिफिक प्रभाव फॉस्फोरोथिओएट एएसओच्या फार्माकोकिनेटिक्सवर लक्षणीय परिणाम करतात आणि हे रक्त प्लाझ्मामधील पहिल्या पिढीच्या फॉस्फोरोथिओएट एएसओच्या चयापचय दरामध्ये सर्वात स्पष्टपणे प्रकट होते. प्लाझ्मामधून एएसओ पूर्णपणे काढून टाकण्याचा दर कमी होतो, ज्यामुळे चयापचय मंदावते. दरातील हे बदल केवळ पहिल्या क्रमाच्या गतीशास्त्राच्या संदर्भात स्पष्ट केले जाऊ शकत नाहीत, परंतु ते Rp आणि Sp बाँडच्या संवेदनशीलतेतील फरकांद्वारे स्पष्ट केले जाऊ शकतात.

एक्सोन्यूक्लीज क्रियाकलापातील स्टिरीओस्पेसिफिक फरक द्वितीय-पिढीच्या ASO साठी कमी महत्त्वाचे आहेत. दुस-या पिढीच्या ASO मध्ये 3" आणि 5" च्या टोकांवर 2" फेरफार केले जातात, जे एक्सोन्यूक्लीझद्वारे त्यांचे विघटन रोखतात या वस्तुस्थितीमुळे आहे. सेराटिया मार्सेसेन्स या रोगजनकापासून विलग केलेल्या एंडोन्यूक्लीजचा वापर केल्याने, फॉस्फोरोथिओएट बॉण्ड्सच्या चिरालिटीचे परिणाम होतात. अभ्यास केला गेला. एक्सोन्यूक्लीज प्रमाणेच, फॉस्फोडायस्टर बाँड्सच्या हायड्रोलिसिससाठी ते एक नॉन-ब्रिजिंग ऑक्सिजन आहे. डायस्टेरियोमरमध्ये, सल्फर एमजी 2+ च्या जवळ स्थानिकीकरण केले जाते, परिणामी एन्झाईम कमी होते, तर डायस्टेरिओमर आरपीमध्ये ते होत नाही. काही सस्तन प्राण्यांच्या एंडोन्यूक्लीजशी सेरेटिया एंडोन्यूक्लीजमध्ये लक्षणीय समानता असल्याने, हे गृहीत धरले पाहिजे की ही यंत्रणा मोठ्या प्रमाणावर लागू असू शकते. फॉस्फोरोथिओएट बॉन्ड्सची स्टिरिओकेमिकल वैशिष्ट्ये इतर एंडोन्यूक्लीजच्या क्रियेवर कसा परिणाम करतात. माहीत नाही. तथापि, जर आम्ही असे गृहीत धरले की प्रतिक्रिया सेराटिया एंडोन्युक्लीज सारख्या योजनेनुसार पुढे जाते, तर आम्ही असे गृहीत धरू शकतो की सक्रिय साइटमध्ये आणि हे धातू आहे (कदाचित Mg 2+) आणि सल्फर न्यूक्लीजच्या क्रियेवर परिणाम करेल , जेव्हा ते धातूच्या आयनकडे केंद्रित असते. जर एंडोन्यूक्लीज चिरॅलिटीसाठी संवेदनशील असतील तर, प्रभावी दुसऱ्या पिढीतील औषधे तयार करण्याच्या समस्येच्या विकासासाठी याचा महत्त्वपूर्ण परिणाम होऊ शकतो. पहिल्या पिढीतील औषधांवरील चिरॅलिटीच्या प्रभावाप्रमाणेच दुसऱ्या पिढीतील औषधांच्या चयापचयावरील चिरॅलिटीच्या प्रभावामुळे त्यांच्या चयापचय प्रक्रियेत मंदी येऊ शकते. अशाप्रकारे, उदाहरणार्थ, असे गृहीत धरले जाऊ शकते की वेगाने चयापचय करणारे स्टिरिओइसॉमर्स निवडकपणे नष्ट केले जातील, केवळ हळूहळू चयापचयित आयसोमर्स कार्य करतील.

ASO प्रथिनांना बंधनकारक

असे आढळून आले की, फॉस्फोडीस्टर स्केलेटनसह एएसओच्या तुलनेत, फॉस्फोथियोएट संरचनांचे फार्माकोकिनेटिक्स प्रथिनांशी त्यांच्या बंधनामुळे लक्षणीयरित्या प्रभावित होतात. फॉस्फोडिएस्टर बॉण्ड्सच्या तुलनेत फॉस्फोथिओएट बॉण्ड्सची वाढलेली लिपोफिलिसिटी हा प्रोटीन बाइंडिंगचा रासायनिक आधार आहे. पाण्याशी आण्विक परस्परसंवाद जलीय द्रावणातील मॅक्रोमोलेक्यूल्सच्या स्वरूप आणि कार्याद्वारे निर्धारित केला जात असल्याने, ASO च्या संपूर्ण लांबीसह कंकालच्या लिपोफिलिसिटीमध्ये अगदी लहान बदल देखील ऑलिगोमरच्या पाण्याशी आणि प्रथिनेसारख्या मॅक्रोमोलेक्यूल्सच्या परस्परसंवादावर परिणाम करू शकतात.

प्रथम अंदाजानुसार, फॉस्फोथियोएट ODNs फॉस्फोडिएस्टर ODN पेक्षा अधिक यादृच्छिकपणे सेल्युलर प्रथिनांना बांधतात. फॉस्फोथिओएट एएसओ प्रथिनांना का चांगले बांधतात हे पूर्णपणे समजलेले नाही. संभाव्य स्पष्टीकरणे मेटल आयनांसह वाढलेली लिपोफिलिसिटी आणि जटिलता सूचित करतात.

फार्माकोलॉजी, फार्माकोकिनेटिक्स आणि फॉस्फोथियोएट एएसओ (पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढ्या दोन्ही) च्या टॉक्सिकॉलॉजीसाठी प्लाझ्मा प्रोटीन बंधनाचे महत्त्व जास्त सांगता येत नाही. मायक्रोमोलर एकाग्रता पातळीवर, 90% पेक्षा जास्त फॉस्फोथिओएट ओडीएन प्लाझ्मामध्ये बांधलेले असतात. प्रथिने बंधनाची टक्केवारी आणि सामर्थ्य यामध्ये विशिष्ट फरक आहेत, तसेच विविध प्रजातींमधील विशिष्ट प्रथिनांना ASO च्या बंधनात गुणात्मक फरक आहेत. प्रसारित प्रथिनांना फॉस्फोथिओएट एएसओचे बंधन या संयुगे रेनल ग्लोमेरुलीद्वारे फिल्टर होण्यापासून आणि मूत्रात उत्सर्जित होण्यापासून रोखते. संपृक्ततेच्या बाबतीत, उदाहरणार्थ, जेव्हा एएसओचा मोठा डोस दिला जातो, तेव्हा पूर्ण-लांबीच्या एएसओचे मूत्र उत्सर्जन वाढवले ​​जाते. प्रजातींच्या फरकांमुळे, विविध प्रजातींमधील संपृक्तता ASO च्या वेगवेगळ्या एकाग्रतेद्वारे निर्धारित केली जाते. उदाहरणार्थ, उंदीर किंवा मानवांच्या तुलनेत माऊस प्लाझ्मा प्रोटीन्समध्ये ASO ची कमी आत्मीयता असते. म्हणून, उंदरांमध्ये प्लाझ्मा प्रथिनांना एएसओ बंधनकारक करण्याच्या प्रक्रियेच्या संपृक्ततेचा परिणाम इतर प्रजातींच्या तुलनेत कमी एकाग्रतेवर होतो. प्लाझ्मा प्रोटीन बाइंडिंगमधील प्रजाती फरक हे इंटरस्पेसीज फार्माकोकिनेटिक्समधील फरकांचे महत्त्वपूर्ण घटक आहेत.

न्यूक्लीज रेझिस्टन्स आणि प्रोटीन बाइंडिंग, जे फॉस्फोथियोएट बॉन्ड्ससह ASO चे वैशिष्ट्य आहे, ASO थेरपीचे फार्माकोकाइनेटिक्स देखील बदलतात. अतिरिक्त रासायनिक संरचना, तयार केलेल्या औषधांच्या दुसऱ्या पिढीचे वैशिष्ट्य, त्यांच्या फार्माकोकिनेटिक्समध्ये इतर बदलांचा परिचय देतात.

ACO चे मेथॉक्साइथिल डेरिव्हेटिव्ह्ज

पहिल्या पिढीतील ODN ची काही वैशिष्ट्ये सुधारण्यासाठी दुसरी पिढी ASO विकसित केली गेली. अशाप्रकारे, MOE गटांमध्ये 2" पोझिशनमध्ये जोडलेल्या फॉस्फोथिओएट स्ट्रक्चर्समुळे न्यूक्लीजचा प्रतिकार वाढतो आणि प्रथिने बांधणीची कार्यक्षमता बदलते.

न्यूक्लीजला MOE प्रतिकार

हे दर्शविले गेले की एमओईची रचना एएसओच्या न्यूक्लीजच्या प्रतिकारांवर परिणाम करते. फॉस्फोथिओएट संरचना एक्सोन्यूक्लीज क्रियाकलाप कमी करत असताना, 2" स्थितीत असलेली रचना एक्सोन्यूक्लीझ क्रियाकलाप अक्षरशः काढून टाकते. न्यूक्लिझ प्रतिरोध हा (1) MOE साठी 2" हायड्रोजनच्या प्रतिस्थापनाचा परिणाम असू शकतो, (2) MOE चे स्टेरिक प्रभाव, किंवा (3) ASO सांगाड्याभोवती एक कठोर पाण्याचे कवच तयार करणे. न्यूक्लीजच्या प्रतिकाराची कारणे काहीही असली तरी, MOE गटाच्या उपस्थितीमुळे ASOs 2" स्थितीत बदलले जातात आणि बहुतेक सेल्युलर न्यूक्लीजच्या प्रभावापासून ते व्यावहारिकदृष्ट्या रोगप्रतिकारक बनतात. ASO स्केलेटनचा मध्यवर्ती भाग, ज्यामध्ये डीऑक्सीफॉस्फोथियोएट्सचा समावेश असतो, जवळपास नाही. न्यूक्लीज-मध्यस्थ क्लीवेजेसला प्रतिरोधक. चयापचयाच्या अधीन असलेल्या साइट्समधील पहिल्या आणि दुस-या पिढ्यांच्या ASO मधील फरक, चयापचय नमुन्यांमधील फरक देखील निर्धारित करतात.

केशिका जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस (सीजीई) किंवा लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी/मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी/एमएस) वापरून चयापचय पद्धतींचे मूल्यमापन करताना, एका न्यूक्लियोटाइडने लहान चयापचय आढळले नाहीत. बहुतेक, डीऑक्सी साइटमध्ये क्लीव्ह केलेले चयापचय आढळले (शक्यतो एंडोन्यूक्लीसेसद्वारे), चयापचयचा पुढील मार्ग म्हणजे क्लीव्हेज उत्पादनांचा आकार कमी करणे. सक्रिय एंडोन्युक्लीजच्या प्रभावाखाली एक्सोन्यूक्लिझ प्रतिरोध आणि मंद चयापचय दीर्घ अर्ध-आयुष्याने वैशिष्ट्यीकृत संयुगे तयार करण्यास कारणीभूत ठरते. .

प्रथिनांना MOE चे बंधन

प्रायोगिक अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की 2'-MOE रचना असलेल्या फॉस्फोथिओएट ASO ची प्लाझ्मा प्रथिने अपरिवर्तित फॉस्फोथिओएट ASO च्या तुलनेत कमी आत्मीयता आहे. सुमारे 18 ते 40 μM. त्याच वेळी, ASO च्या पूर्णपणे बदललेल्या MOE संरचनेत, प्लाझ्मा प्रोटीन्सची आत्मीयता थोडीशी कमी होते. ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडमध्ये एमओई स्ट्रक्चर्सच्या संख्येत वाढ झाल्याने प्लाझ्मा प्रोटीन्सच्या आत्मीयतेमध्ये आणखी घट का परिणाम होत नाही हे स्पष्ट नाही, परंतु हे ASO दुय्यम संरचनेच्या वैशिष्ट्यांमुळे असू शकते.

एमओई संरचनांशी संबंधित प्रथिने आत्मीयतेतील घट काही भौतिक गुणधर्मांद्वारे न्याय्य ठरू शकते. सुधारित MOE ASO ला बदल न केलेल्यांपासून वेगळे करणारा कदाचित सर्वात महत्त्वाचा भौतिक घटक म्हणजे पाण्याच्या आण्विक शेलची उपस्थिती, जी MOE बाजूच्या साखळीतून उद्भवते. हायड्रोकार्बन पाठीचा कणा "चेलेट" पाण्याचे रेणू (आणि शक्यतो धातूचे आयन) मधील MOE पर्याय, जलीय कवच तयार करतात आणि "चिकट" सल्फर रेणू आणि प्लाझ्मा किंवा सेल्युलर प्रथिने यांच्यातील संभाव्य संपर्क कमी करतात. प्रथिनांना एएसओ बंधनकारक करण्याची डिग्री त्यांच्या मूत्रातून उत्सर्जनाशी उलटपणे संबंधित आहे. फॉस्फोथियोएट बॉण्ड्स आणि 2'-MOE पर्यायांचा परिचय प्रोटीन बंधनात बदल करतो आणि परिणामी, ASO चे गुणधर्म बदलतात.

ASO चे शोषण, वितरण, चयापचय आणि उत्सर्जन

सक्शन

ASO च्या प्रशासनाचा पॅरेंटरल मार्ग

अभ्यासांनी स्थापित केले आहे की आण्विक वजन (सुमारे 7000 डी) आणि ASO च्या नकारात्मक शुल्कामुळे, गॅस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रॅक्टमधून या औषधांचे शोषण मर्यादित आहे. म्हणूनच त्यांच्या प्रशासनाचा पॅरेंटरल मार्ग सहसा वापरला जातो. त्वचेखालील, इंट्राव्हेनस इन्फ्यूजन किंवा इंट्राविट्रिअल इंजेक्शनचा वापर पहिल्या पिढीतील औषधे देण्यासाठी केला जातो. दुस-या पिढीतील ASO ची खालची प्रक्षोभक क्रिया त्यांना त्वचेखालील प्रशासनासाठी अधिक योग्य बनवते. त्वचेखालील इंजेक्शन्स आणि इंट्राव्हेनस इन्फ्यूजनसह प्लाझ्मामध्ये या औषधांचे फार्माकोकिनेटिक्स तुलनात्मक आहेत. प्रयोगशाळेतील प्राण्यांमधील अभ्यास दर्शविते की, अंततः, एएसओचे वितरण इंजेक्शन साइट आणि लिम्फ नोड्स वगळता विविध अवयवांमध्ये देखील तुलना करता येते.

त्वचेखालील प्रशासनानंतर, प्रथम आणि द्वितीय पिढीचे दोन्ही ASOs इंजेक्शन साइटवरून प्रणालीगत अभिसरणात वेगाने शोषले जातात. क्लिनिकल अभ्यासात, दुसऱ्या पिढीच्या ASO च्या त्वचेखालील प्रशासनानंतर, जास्तीत जास्त एकाग्रता (टी कमाल) पर्यंत पोहोचण्याची वेळ 1.5 ते 4.7 तासांपर्यंत असते, डोसच्या श्रेणीमध्ये 25 ते 200 मिलीग्राम 1 मिली स्थिर मात्रा असते. त्वचेखालील डोसची जैवउपलब्धता प्रशासित डोसच्या 36 ते 82% पर्यंत असते. प्रीक्लिनिकल आणि क्लिनिकल अभ्यास सूचित करतात की ASO ची जैवउपलब्धता एकाग्रतेसह वाढते.

इंजेक्शन साइटवरील ASO चे गतीशास्त्र स्थानिक प्रतिसाद तसेच त्यांच्या प्रणालीगत गतीशास्त्र आणि वितरणावर परिणाम करू शकते. इंजेक्शन साइटवर ASO ची एकाग्रता कमी करणे काल्पनिकपणे इंजेक्शनला स्थानिक प्रतिसाद कमी करते. इंजेक्शन साइटवर एएसओची एकाग्रता कमी करण्याचा एक दृष्टीकोन म्हणजे द्रावण पातळ करणे आणि परिणामी, त्वचेखालील डेपोमधून शोषण्याचे पृष्ठभाग क्षेत्र वाढवणे. सैद्धांतिकदृष्ट्या, द्रावणांचे सौम्य करणे आणि मोठ्या सक्शन पृष्ठभागाच्या क्षेत्रामुळे स्थानिक एकाग्रता कमी करणे आणि स्थानिक प्रतिक्रिया कमी करणे आवश्यक आहे. सिस्टीमिक शोषणाच्या वाढीसह समान प्रभावांची अपेक्षा केली जाऊ शकते. म्हणून, डोस आणि व्हॉल्यूममधील बदल संभाव्य चल म्हणून मानले जाऊ शकतात. तथापि, आजही, कमी मात्रा आणि तुलनेने उच्च सांद्रता असलेले त्वचेखालील इंजेक्शन लागू केलेल्या सामग्रीची उच्च जैवउपलब्धता दर्शवतात.

ASO चे स्थानिक प्रशासन

एएसओ प्रशासनाच्या विविध पद्धतींचा अभ्यास दर्शवितो की त्यांचे एरोसोल फॉर्म, गुदाशय प्रशासन आणि इंट्राविट्रिअल इंजेक्शन्स स्थानिक प्रशासनाचे साधन म्हणून वापरले जातात. फुफ्फुसीय रोगांच्या उपचारांसाठी, एरोसोलचा वापर करून फुफ्फुसांमध्ये एएसओची तुलनेने उच्च सांद्रता तयार करणे शक्य आहे.

उंदरांमध्ये पहिल्या पिढीतील ODN च्या गतीशास्त्राचा अभ्यास करण्यात आला आहे. हे स्थापित केले गेले आहे की अशा औषधांचे गतीशास्त्र डोसवर अवलंबून असते, क्लीयरन्स फुफ्फुसाचा असतो आणि अर्धा आयुष्य सुमारे 2 तास असते. याउलट, दुस-या पिढीच्या सुधारित MOE ASO चे अभ्यास 4 दिवसांपेक्षा जास्त अर्धे आयुष्य दर्शवतात. इतर सामयिक उपचारांप्रमाणे, इनहेलेशनचा फायदा म्हणजे ऊतींमध्ये उच्च स्थानिक सांद्रता निर्माण करण्याची क्षमता ज्यामध्ये सामान्यतः लागू केलेले पदार्थ जमा होत नाहीत. फुफ्फुसांमध्ये, एएसओ सहसा पॅरेंटरल प्रशासनानंतर जमा होत नाही. स्थानिक प्रशासन देखील क्वचितच प्रणालीगत प्रभावांना कारणीभूत ठरते. उदाहरणार्थ, जेव्हा माकडांना ASO 0.1 mg/kg च्या डोसमध्ये इनहेलेशनद्वारे दिले गेले (1 आठवड्यात तीन डोस), फुफ्फुसातील औषधाची एकाग्रता अंदाजे 1 μg/g होती. परंतु याच माकडांमध्ये, यकृत आणि मूत्रपिंडातील एकाग्रता फुफ्फुसातील एकाग्रतेच्या अंदाजे 5% होती, जे लक्षणीय लहान प्रणालीगत प्रभाव दर्शवते.

साहित्य डेटा सूचित करते की एएसओचे रेक्टल प्रशासन अल्सरेटिव्ह कोलायटिसच्या उपचारांसाठी यशस्वीरित्या वापरले जाते. इनहेलेशनच्या विरूद्ध, जेथे इंजेक्ट केलेला पदार्थ कमी प्रमाणात वापरला जाऊ शकतो, उपचारासाठी वापरल्या जाणार्‍या एनीमामध्ये पहिल्या पिढीतील 240 मिलीग्राम पदार्थ (अॅलिकाफोर्सन) असू शकतो. या प्रकरणात, रेक्टल एपिथेलियम इंजेक्ट केलेल्या पदार्थाच्या संपर्कात आहे, तथापि, उच्च चार्ज केलेल्या ODN च्या खराब पारगम्यतेमुळे, औषधाचे किमान शोषण तसेच सामान्य प्रणालीगत प्रभाव आहे. आकडेमोडीवरून असे दिसून येते की आतड्यांतील एपिथेलियममध्ये ASO ची एकाग्रता प्रशासनानंतर 12 तासांनी 20 μg/g आहे. मानवांमध्ये जैवउपलब्धता 0.03 ते 2.14% पर्यंत असते आणि ASO ची जास्तीत जास्त एकाग्रता प्लाझ्मामध्ये केवळ 0.126 μg/ml असते. लक्षणीय प्रणालीगत शोषणाची अनुपस्थिती आणि औषधाच्या उच्च स्थानिक एकाग्रतेचा उपचारांवर सकारात्मक प्रभाव पडतो.

पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढ्यांमधील एएसओ तयारीच्या इंट्राविट्रिअल इंजेक्शन्सचा अभ्यास केला गेला. या प्रकरणात, पदार्थ अगदी कमी प्रमाणात डोळ्यात टोचले जातात. इंजेक्शन साइटच्या पृथक्करणामुळे, औषधाचा प्रणालीगत प्रभाव आणखी मोठ्या प्रमाणात कमी होतो. डोळ्यात, काचेचे शरीर आणि डोळयातील पडदा, ASO वेगवेगळ्या दराने प्रवेश करतात: ते डोळयातील पडदाच्या तुलनेत काचेच्या शरीरात अधिक वेगाने प्रवेश करते. स्थानिक चयापचय आणि डोळ्यातून पसरणे हे दोन्ही औषध काढून टाकण्यास हातभार लावतात. आधीच नमूद केल्याप्रमाणे, कमी प्रमाणात, प्रशासित औषधाचा प्रणालीगत प्रभाव कमी आहे. तथापि, प्रणालीगत वितरणाची यंत्रणा इतर बहुतेक औषधांसारखीच आहे.

ASO चे प्रवेश प्रशासन

दुस-या पिढीतील एएसओ टू न्यूक्लिसेसची प्रख्यात स्थिरता आतड्यात औषधाची स्थिरता सुनिश्चित करते, ज्यामुळे पुढील शोषण शक्य होते. तथापि, रेणूचा आकार आणि ACO चे शुल्क औषधाचे शोषण मर्यादित करतात. आतड्यातून शोषल्यानंतर, ASO चे गतिशास्त्र त्याच्या पॅरेंटरल प्रशासनासारखेच असते. यकृत हे एएसओ जमा होण्याच्या मुख्य ठिकाणांपैकी एक असले तरी, यकृताद्वारे प्रथम पास होणारा परिणाम हा एएसओ औषधाच्या गतीशास्त्रावर परिणाम करणारा महत्त्वाचा घटक नाही.

शरीरात ASO चे वितरण

परफ्यूजन आणि ऊतक आत्मीयतेची भूमिका

ASO आणि इतर औषधांचे वितरण पारगम्यता, रक्त पुरवठ्याची तीव्रता, प्लाझ्मा प्रथिने, ऊतक आणि पेशींना बंधनकारक यावर अवलंबून असते. असे दिसून आले आहे की ऊतींमध्ये पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढीतील फॉस्फोथिओएट ASO चे वितरण त्यांच्या एकाधिक नकारात्मक शुल्कासह आणि प्रथिनांशी त्यांचे बंधन कमीत कमी रक्त पुरवठ्यावर अवलंबून असते आणि सेलमध्ये त्यांच्या वाहतुकीवर परिणाम करणाऱ्या घटकांवर जास्त अवलंबून असते.

प्लाझ्मा ते ऊतींचे अंतर्गत वितरण तुलनेने जलद आहे, अंतःशिरा प्रशासनानंतर निर्मूलन अर्ध-आयुष्य 30-90 मिनिटे आहे. त्वचेखालील प्रशासनानंतर ASO चे अर्धे आयुष्य इंट्राव्हेनस प्रशासनापेक्षा जास्त असते. हा फरक शोषणासाठी लागणाऱ्या वेळेमुळे आहे आणि फार्माकोकिनेटिक्समधील इतर फरकांमुळे नाही.

पहिल्या आणि दुस-या पिढीच्या औषधांच्या गतीशास्त्राच्या अभ्यासाने त्याचे थोडे फरक लक्षात घेतले. दुस-या पिढीतील ASO न्यूक्लीजची अधिक स्थिरता त्यांच्या प्रथिनांना कमी बंधनकारकतेने भरपाई दिली जाते. यासह, पहिल्या पिढीतील मूळ ASO आणि त्याच्या चयापचयांची (एकूण ASO) बेरीज अखंड दुसऱ्या पिढीच्या औषधाशी (ISIS 13650) तुलना केली जाते तेव्हा पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढीतील औषधांची फार्माकोकाइनेटिक प्रोफाइल समान किंवा जवळजवळ अभेद्य असतात. अन्यथा, exonucleases द्वारे ASO चा जलद नाश दुसऱ्या पिढीच्या औषधांच्या तुलनेत पहिल्या पिढीतील औषधांचे अर्धे आयुष्य कमी करेल. दोन्ही पिढ्यांच्या औषधांचे वितरण डोसवर अवलंबून असते.

वर नमूद केल्याप्रमाणे, इंजेक्शन साइट किंवा आतड्यांमधून शोषल्यानंतर, ASOs प्लाझ्मा प्रोटीनशी बांधले जातात. दोन प्लाझ्मा प्रथिने जे विशेषत: फॉस्फोथियोएट ASO ला बांधतात ते अल्ब्युमिन आणि अल्फा-2-मॅक्रोग्लोबुलिन आहेत. आणखी एक सामान्य प्रथिने, आम्ल ग्लायकोप्रोटीन, ASO बांधत नाही. लक्ष्य ऊतींमध्ये ASO च्या वितरणासाठी प्रथिने बंधनकारक खूप महत्वाचे आहे. बाइंडिंग कमी करणाऱ्या रासायनिक रचनांमुळे ऊतींमधील औषधाच्या एकाग्रतेत लक्षणीय घट होते, रेनल ग्लोमेरुलीद्वारे त्याचे गाळण्याची प्रक्रिया वाढते आणि मूत्रात उत्सर्जन होते. तयारीच्या सांगाड्यामध्ये किंवा MOE संरचनेच्या उपस्थितीत डायस्टर बाँडसह ASO वापरताना ही घटना पाहिली जाऊ शकते. प्रथिनांसाठी डायस्टर्स आणि एमओई स्ट्रक्चर्स (किंवा दोन्ही) च्या आत्मीयतेत घट झाल्यामुळे एएसओ रक्तप्रवाहात अधिक मुक्तपणे प्रसारित होऊ देते, ज्यामुळे मूत्रात त्याचे उत्सर्जन तीव्र होते.

पॅरेंटरल फर्स्ट आणि सेकंड जनरेशन एएसओ सह सर्व अभ्यासांमध्ये, आम्ही प्लाझ्मामधून एएसओचे रेखीय क्लिअरन्स पाहिले नाही. औषधाच्या वाढत्या डोससह क्लीयरन्स कमी झाला, आणि म्हणूनच, त्याची जैवउपलब्धता प्रशासित डोसच्या अपेक्षेपेक्षा जास्त होती. प्रारंभिक मंजुरी ऊतींमध्ये एएसओच्या वितरणामुळे होते आणि त्याच वेळी, ऊतकांद्वारे औषधाचे शोषण दिसून आले होते, एएसओसह त्यांच्या संपृक्ततेची शक्यता गृहीत धरू शकते. एएसओच्या परिचयाच्या परिणामी संपृक्ततेच्या प्रक्रियेचा अभ्यास यकृत फागोसाइट्स वापरून केला जाऊ शकतो. जेव्हा ASO ते कुप्फर पेशींचे बंधन संपृक्ततेपर्यंत पोहोचते, तेव्हा आत्मीयता कमी होणे सुरू होईल. उंदरांना ASO चे त्यानंतरचे प्रशासन नॉन-फॅगोसाइटिक यकृत पेशींमध्ये ASO चे वितरण सुधारते आणि परिणामी, नियंत्रणाच्या तुलनेत हेपॅटोसाइट्समधील औषधीय क्रिया सुधारते. याउलट, 1 µg/ml पेक्षा कमी प्लाझ्मा एकाग्रतेवर, ASO अधिक सक्रियपणे कुप्फर पेशींना बांधते आणि हिपॅटोसाइट्समध्ये कमी जमा होते.

ASO च्या प्लाझ्मा प्रथिनांना बंधनकारक करण्याच्या प्रक्रियेच्या अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की हा परिणाम पेशींच्या पृष्ठभागावरील ऊतकांमधील कॉम्प्लेक्सच्या जलद वितरणासह आहे. सेल्युलर बाइंडिंगची अचूक यंत्रणा स्थापित केली गेली नसली तरी, असे गृहित धरले जाऊ शकते की ASOs प्लाझ्मा प्रथिने किंवा सेल्युलर प्रथिनांना बंधनकारक असतात जोपर्यंत मुक्त बंधनकारक साइट आहेत. बंधनकारक ASOs नंतर सेल झिल्लीमध्ये एकाग्रता ग्रेडियंटसह एका इंट्रासेल्युलर प्रोटीनची देवाणघेवाण करून वितरीत केले जातात.

अशा प्रकारे, पेशींमध्ये ASO प्रवेशाची प्रेरक शक्ती म्हणजे एकाग्रता ग्रेडियंट. सायटोप्लाझम आणि न्यूक्लियस दरम्यान ASO च्या शटल हालचालीचे वर्णन केले आहे. सर्वसाधारणपणे, हे स्पष्ट आहे की प्रथिने बंधनकारक अडथळ्यांद्वारे ACO ची हालचाल सुलभ करते जे सामान्यतः उच्च चार्ज केलेल्या हायड्रोफिलिक रेणूंच्या हालचालींना प्रतिबंधित करते. ही झिल्ली शटल यंत्रणा ASO साठी एक गृहितक राहिली आहे, परंतु पूर्वी ऑर्गनोमेटलिक संयुगांसाठी वर्णन केले गेले आहे. एक्सट्रासेल्युलर मॅट्रिक्सपासून इंट्रासेल्युलर स्पेसमध्ये एएसओची वाहतूक इम्युनोहिस्टोकेमिकल पद्धतींचा वापर करून उंदरांच्या यकृतामध्ये आणि दुसऱ्या पिढीच्या ASO (एस. हेन्री, बी. मोलिटोरिस) साठी फ्लोरोसेंट लेबलसह महत्त्वपूर्ण मायक्रोस्कोपी वापरून उंदरांच्या मूत्रपिंडात दृश्यमान करण्यात आली.

पेशीबाह्य ते इंट्रासेल्युलर स्पेसमध्ये ASO ची वाहतूक नियंत्रित करणार्‍या प्रथिनांची ओळख माहित नाही, परंतु असे मानले जाते की प्रथिने-ASO कॉम्प्लेक्सचे सेलशी बंधनकारक कार्य फॅगोसाइटिक रिसेप्टर वापरून केले जाते. फॅगोसाइट्स, जसे की कुप्फर पेशी, टिश्यू मॅक्रोफेजेस आणि प्रॉक्सिमल ट्यूब्यूल पेशी, एएसओसाठी उच्च आत्मीयता असल्याने, त्यांच्या पेशीच्या पृष्ठभागावर असे रिसेप्टर्स शोधण्याच्या शक्यतेबद्दल कोणीही विचार करू शकतो.

तथापि, SR-A I/II फॅगोसाइटिक रिसेप्टर नसलेल्या ट्रान्सजेनिक उंदरांमध्ये ASO चे सेल्युलर वितरण आणि फार्माकोडायनामिक्स नियंत्रण सिंजेनिक प्राण्यांपेक्षा वेगळे नव्हते. अशा प्रकारे, स्कॅव्हेंजर रिसेप्टर म्हणून ओळखला जाणारा हा रिसेप्टर यकृत आणि मूत्रपिंडांद्वारे कॉम्प्लेक्सच्या शोषणासाठी जबाबदार असल्याचे दिसत नाही. ACO-प्रोटीन कॉम्प्लेक्सच्या एंडोसाइटोसिसच्या प्रक्रियेत सामील असलेल्या इतर स्वीकारकर्ता संरचनांची भूमिका अभ्यासली गेली नाही.

पडदा प्रथिने वाहक म्हणून कार्य करतात , सर्व जीवांमध्ये असतात. मुख्य औषध वाहक आहेत: ABC ( एटीपी-बाइंडिंग कॅसेट ट्रान्सपोर्टर्स)आणि SLC (सोल्युट कॅरियर फॅमिली). हे ज्ञात आहे की वाहतूकदारांद्वारे मध्यस्थी केलेल्या प्रक्रियेचा वापर करून जैविक झिल्लीद्वारे पदार्थांच्या हस्तांतरणाचा दर संपृक्ततेद्वारे दर्शविला जातो. ज्ञात वैशिष्ट्यांसह SLC कुटुंबातील अनेक सदस्यांचे वर्णन केले आहे , मुख्यतः न्यूक्लियोसाइड्स, न्यूक्लिओसाइड शर्करा आणि फॉस्फेट शर्करा यांच्या वाहतुकीसाठी. असे मत आहे की भविष्यातील अभ्यास बहुधा ASO इंटरमेम्ब्रेन ट्रान्सपोर्टच्या प्रक्रियेशी संबंधित असतील.

हे स्पष्ट आहे की, विविध अवयव आणि ऊतींद्वारे तयार केलेल्या संरचनेच्या संचयामध्ये आणि त्यांच्या डोसवर अशा संयुगेच्या क्लिअरन्स आणि वितरणावर अवलंबून असलेल्या वरील फरकांव्यतिरिक्त, ऊतींमधील ASO चे वितरण वाहतूक प्रणालींवर प्रभाव टाकते, व्यक्तींच्या रक्त प्रवाहाची वैशिष्ट्ये, शरीरात औषधाचा संभाव्य निवास वेळ आणि शेवटी, ASO सह ऊतक संपृक्तता. एएसओच्या ऊती वितरणाच्या प्रक्रियेत या घटकांची महत्त्वपूर्ण भूमिका असूनही, असे मानले जाते की पेशीच्या पृष्ठभागावर एएसओचे प्रारंभिक बंधन हे विश्लेषण केलेल्या यंत्रणेतील एक निर्धारक घटक आहे. हा निष्कर्ष या वस्तुस्थितीवर आधारित आहे की यकृत आणि मूत्रपिंड हे ASO बंधनकारक होण्याची प्रारंभिक ठिकाणे आहेत ज्यात ASO प्रशासनानंतर पहिल्या 24 तासांमध्ये काही अतिरिक्त संचय होतो. यकृत आणि मूत्रपिंडांमध्ये एएसओच्या वितरण मापदंडांचा अभ्यास करताना, पहिल्या 24 तासांमध्ये अवयवांमध्ये औषधाच्या एकाग्रतेमध्ये अंशात्मक वाढ दिसून आली. हे ASO च्या सेल्युलर आणि सबसेल्युलर पुनर्वितरणाच्या काळात घडते, परंतु संभाव्यतः, प्राथमिक वितरण अवयवांमध्ये ASO साठी या अवयवांच्या अधिक आत्मीयतेमुळे कालांतराने अधिक सामग्री जमा झाली पाहिजे. या आत्मीयतेसाठी जबाबदार असलेल्या प्रथिनांमध्ये लॅमिनिन आणि फायब्रिनोजेन आणि फायब्रोब्लास्ट ग्रोथ फॅक्टर (FGF) साठी हेपरिन सारखी बंधनकारक जागा असू शकतात. सेलशी ASO चा प्रारंभिक संवाद या प्रथिनांच्या बंधनामुळे असू शकतो, परंतु वर नमूद केल्याप्रमाणे या प्रथिनांच्या स्वरूपाचा फारसा अभ्यास केला गेला नाही.

शरीरातील औषधांच्या वितरणामध्ये पेशींसह विशिष्ट ASO बंधनकारक साइट्सच्या संयोजनाचे महत्त्व लक्षात घेता, एखाद्याने वेगवेगळ्या अवयवांना भिन्न रक्तपुरवठा यासारख्या महत्त्वाच्या घटकाची देखील नोंद घ्यावी, ज्याची शक्यता फॉस्फोथिओएटच्या भिन्न वितरणावर प्रभाव टाकू शकते. ASO स्पष्ट आहे. विविध लेखकांच्या मते, पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढ्यांच्या डझनभर पदार्थांच्या मालिकेसह कार्य त्यांचे समान वितरण आणि भिन्न प्रजातींच्या व्यक्तींमध्ये लक्षणीय समान वितरण दर्शवते. मूत्रपिंड, यकृत, लिम्फ नोड्स, प्लीहा आणि अस्थिमज्जा हे अवयव आहेत जे ASO आणि त्यांच्या चयापचयांची सर्वात जास्त रक्कम जमा करतात. फुफ्फुस आणि हृदय एएसओ जमा करत नाहीत हे सूचित करते की यकृत आणि मूत्रपिंडांमध्ये एएसओचे स्पष्ट संचय स्पष्ट करण्यासाठी, त्यांच्या चांगल्या रक्तपुरवठ्याचे केवळ एक स्पष्टीकरण पुरेसे नाही. उदाहरणार्थ, मूत्रपिंडात सर्वोत्तम रक्त परिसंचरण असलेली क्षेत्रे ग्लोमेरुली आहेत आणि ते जास्त ASO असलेले क्षेत्र नाहीत. याउलट, प्रॉक्सिमल ट्यूबल्समध्ये, रक्त परिसंचरण कमी सक्रिय आहे. तथापि, प्रॉक्सिमल ट्यूब्यूल्सच्या पेशी मोठ्या संख्येने सक्रियपणे फॅगोसाइटिक पेशींद्वारे वैशिष्ट्यीकृत आहेत, मुक्त ASO जमा करतात, तसेच प्रॉक्सिमल ट्यूबल्समध्ये सामान्यतः पुनर्शोषित केल्या जाणार्‍या प्रथिनांशी संबंधित ASOs. परिणामी, रेनल कॉर्टेक्स आणि प्रॉक्सिमल ट्यूबलर एपिथेलियममध्ये फॉस्फोथियोएट एएसओची सर्वोच्च एकाग्रता असते, दोन्ही पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढीत.

हे देखील लक्षात घेतले पाहिजे की यकृताचा रक्त पुरवठा (ml/g टिश्यू) मूत्रपिंडाच्या अंदाजे 20% आहे. मूत्रपिंड आणि यकृत यांच्यातील परफ्यूजनमध्ये 4-5-पट फरकांमुळे या अवयवांमध्ये ASO च्या एकाग्रतेमध्ये 4-5-पट फरक होत नाही. फेनेस्ट्रेटेड केशिका ASO आणि रक्त प्रवाह यांच्यातील संपर्काचे क्षेत्र वाढवतात आणि म्हणूनच, मूत्रपिंडाच्या तुलनेत यकृताच्या अपुरा परफ्यूजनची भरपाई करू शकते.

वितरणादरम्यान प्लाझ्मा प्रथिनांना ASO बंधनकारक

जरी ASO सह पेशींचे संपृक्तता अंततः अवयवांमध्ये त्यांच्या वितरणावर परिणाम करते, ASO चे प्लाझ्मा प्रोटीनशी बंधनकारकतेमुळे मूत्रपिंड आणि यकृतातील वितरण वेगवेगळ्या मालिकेत बदलू शकते. प्रथिने बंधनात अनुक्रमिक फरक आहेत. प्लाझ्मा प्रथिनांना एएसओ बंधनकारक कमी झाल्यामुळे, यकृतामध्ये त्यांचे संचय कमी होते आणि मूत्रपिंडांमध्ये त्यांचे संचय वाढते. याउलट, उच्च बंधनासह, रक्तप्रवाहात मुक्त स्वरूपात ASO ची एकाग्रता कमी प्रमाणात असेल, मूत्रपिंडात कमी आणि इतर अवयवांमध्ये जास्त जमा होईल. प्रथिनांना ASO बंधनकारक होणे आणि वारंवार अंतःशिरा आणि त्वचेखालील प्रशासनानंतर उंदीर आणि माकडांच्या मूत्रपिंडात त्यांचे संचय यांच्यात एक व्यस्त संबंध आहे.

क्लिनिकल चाचण्यांसाठी ASO साठी प्रथिने बंधनकारक निवड निकष म्हणून वापरले जाऊ शकते. आजपर्यंत, प्रथिने बंधनकारक ठरवणे ही एक प्रायोगिक प्रक्रिया आहे ज्यामध्ये कोणती मालिका प्रथिनांना कमी किंवा जास्त बांधेल हे सांगण्याचा कोणताही मार्ग नाही.

इतर अवयवांना ASO चे वितरण

पहिल्या आणि दुसर्‍या पिढीतील फॉस्फोथियोएट एएसओच्या वितरणाचा क्रम विचारात न घेता, मूत्रपिंड आणि यकृत, तसेच प्लीहा आणि लिम्फ नोड्स, हाडे आणि ऍडिपोसाइट्सच्या साइटोप्लाझममध्ये या औषधांच्या स्थानिकीकरणाचा एक वैशिष्ट्यपूर्ण नमुना दिसून येतो. लिम्फॉइड टिश्यूमध्ये एएसओचे संचय अंशतः हिस्टिओसाइट्स आणि इतर मोनोन्यूक्लियर पेशींच्या फागोसाइटिक क्रियाकलापांद्वारे स्पष्ट केले जाऊ शकते. हेमॅटॉक्सिलिन स्टेनिंग वापरून हिस्टिओसाइट फॅगोलायसोसोम्स आणि मॅक्रोफेज टिश्यूमध्ये ASO ची कल्पना करणे शक्य आहे. हे दर्शविले गेले आहे की ASOs एंडोसाइटोसिसमधून जातात, एंडोसोममध्ये स्थानिकीकरण करतात आणि या संरचनांमध्ये राहतात. फागोलिसोसोम्समध्ये एएसओचे प्रमाण बहुतेकदा असे असते की ते हेमॅटॉक्सिलिन स्टेनिंगद्वारे (जवळजवळ आण्विक डीएनए सारखे) निर्धारित केले जाऊ शकते. फागोलायसोसोममधील ASO बहुधा प्लीहा आणि लिम्फॉइड अवयवांमध्ये जमा झालेला बहुसंख्य ASO बनवतो. याव्यतिरिक्त, हाडे आणि अस्थिमज्जाच्या फागोसाइटिकली सक्रिय पेशी या ऊतींमध्ये ASO जमा करतात, ज्याची त्यांच्या पेशींमध्ये बेसोफिलिक ग्रॅन्यूलच्या उपस्थितीने पुष्टी केली जाते.

स्नायू (कंकाल आणि ह्रदयाचा दोन्ही) मध्ये लक्षणीय प्रमाणात ASO नसतात. तथापि, इम्युनोहिस्टोकेमिकल किंवा ऑटोरेडिओग्राफिक पद्धतींचा वापर करून स्नायूंची बारीक तपासणी केल्यास स्नायू स्ट्रोमा मॅक्रोफेजच्या फॅगोलायसोसोममध्ये ASO सामग्री दिसून येते आणि हे संचय स्नायू आणि हृदयातील ASO एकाग्रतेच्या मोजमापावर अंशतः परिणाम करू शकते.

ऍडिपोसाइट्सच्या सायटोप्लाझममध्ये एएसओचे संचय उपचारात्मक दृष्टिकोनातून महत्त्वपूर्ण आहे. विशेषत: कारण, अॅडिपोसाइट्समध्ये जमा झालेल्या बहुतेक पदार्थांच्या विपरीत, ASO हे हायड्रोफिलिक असतात. इम्युनोहिस्टोकेमिकल पद्धती स्पष्टपणे दर्शवतात की ASO ऍडिपोसाइट्सच्या सायटोप्लाज्मिक अंशामध्ये आढळते, तर ASO चरबीच्या व्हॅक्यूओलमध्ये जवळजवळ अनुपस्थित आहे. डाग पडण्याची तीव्रता साइटोप्लाझममधील पदार्थाचे महत्त्वपूर्ण संचय दर्शवते. उदाहरणार्थ, माकडांमध्ये ISIS 113715 सह 13 आठवड्यांच्या उपचारानंतर 10 mg/kg/g/आठवड्याच्या डोसमध्ये, यकृतातील एकाग्रता 301 ± 88.1 μg/g होती, परंतु ऍडिपोज टिश्यूमध्ये फक्त 37.3 ± 14.4 μg/g होते. समान प्राणी.

नॉन-फॅट घटक एकूण चरबीच्या वस्तुमानाच्या 10% बनवतात हे लक्षात घेऊन, ASO एकाग्रतेचे सुधारणे, हे सूचक लक्षात घेऊन, यकृतातील त्याच्या एकाग्रतेची तुलना दर्शवते. ऍडिपोसाइट्समध्ये ASO ची महत्त्वपूर्ण एकाग्रता सूचित करते की ते या पेशी प्रकाराच्या अनुवांशिक रोगांवर उपचार करण्यासाठी वापरले जाऊ शकतात: हार्मोन्स आणि साइटोकिन्सचे स्रोत. अशाप्रकारे, असे आढळून आले की जेव्हा ISIS 113715 25 mg/kg च्या डोसमध्ये आठवड्यातून दोनदा प्रशासित केले जाते तेव्हा ASO ची फार्माकोलॉजिकल सक्रिय सांद्रता उंदरांच्या ऍडिपोसाइट्समध्ये नोंदविली जाते आणि यकृत आणि दोन्हीमध्ये PTP-1B लक्ष्य जनुकाची अभिव्यक्ती कमी करते. ऍडिपोसाइट्स अशीच निरीक्षणे ASO ISIS 113715 ने उपचार केलेल्या माकडांमध्ये करण्यात आली. त्वचेखालील चरबीची बायोप्सी वैद्यकीयदृष्ट्या करता येते आणि सक्रिय ASO चरबीमध्ये जमा होत असल्याने, चरबीचा वापर बायोप्सीसाठी केला जाऊ शकतो आणि थेट औषधीय प्रभाव (mRNA घट) आणि ऊतींमधील औषधाच्या एकाग्रतेचे मोजमाप केले जाऊ शकते. मानवी उती.

फॉस्फोथिओएट एएसओ इतर ऊतींना देखील वितरीत केले जातात. इम्युनोहिस्टोकेमिकल अभ्यास दर्शविते की एंडोथेलियल पेशी mRNA पातळी कमी करण्यासाठी पुरेशा एकाग्रतेवर ASO जमा करतात, ज्यामुळे त्यांना औषधीय हस्तक्षेपाचे संभाव्य लक्ष्य बनते. काही ऊतींमध्ये, त्यांची एकाग्रता फार्माकोलॉजिकल प्रभावासाठी पुरेशी जास्त नसते. उदाहरणार्थ, परिपक्व लिम्फोसाइट्स एएसओ जमा करत नाहीत आणि टी पेशींद्वारे अँटिसेन्स क्रियाकलाप मर्यादित असतात.

हाडांच्या पेशी, विशेषत: phagocytically सक्रिय osteoblasts, ASO जमा करू शकतात आणि हा परिणाम उपचारात्मक हेतूंसाठी वापरला जाऊ शकतो. याव्यतिरिक्त, स्वादुपिंडाच्या आयलेट पेशी देखील ASO जमा करतात. पहिल्या आणि दुसर्‍या पिढीतील दोन्ही ASO अत्यंत चार्ज केलेले, हायड्रोफिलिक रेणू आहेत जे रक्त-मेंदू किंवा रक्त-वृषणासंबंधी अडथळे ओलांडत नाहीत. तथापि, स्नायूंप्रमाणे, शोधण्यायोग्य एएसओ असलेले मॅक्रोफेजेस अंडकोषांच्या इंटरस्टिशियल प्रदेशात स्थानिकीकृत केले जातात. अंडाशय एका अडथळ्याने विभक्त होत नाहीत, म्हणून ASO अंडाशयांमध्ये परिमाणात्मकपणे मोजले जाऊ शकते आणि स्ट्रोमामध्ये इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्रीद्वारे दृश्यमान केले जाऊ शकते.

मेंदूच्या पेशी आणि कार्डिओमायोसाइट्समध्ये प्लाझ्मा ASO चे मर्यादित वितरण या ऊतींना अँटिसेन्स हस्तक्षेपासाठी संभाव्य लक्ष्य बनवते, जरी मेंदू आणि स्नायूंमध्ये विशिष्ट आयन चॅनेल प्रथिनांचे निवडक प्रतिबंध किंवा अभिव्यक्ती उपचारात्मकदृष्ट्या फायदेशीर असू शकते. तथापि, या ऊतकांमधील ASO चे मर्यादित वितरण एक फायदा म्हणून पाहिले जाऊ शकते. मेंदू आणि हृदयामध्ये एएसओच्या महत्त्वपूर्ण एकाग्रतेच्या अनुपस्थितीमुळे मध्यवर्ती मज्जासंस्थेला (सीएनएस) नुकसान होण्याचा धोका कमी होतो आणि अवांछित कार्डियाक इफेक्ट्सचे प्रकटीकरण कमी होते. आधी नमूद केल्याप्रमाणे, सीएनएस संरचना, विशेषत: मेंदू, इंट्राथेकल, इंट्राव्हेंट्रिक्युलर इन्फ्युजन किंवा इंजेक्शनद्वारे थेट प्रशासन केंद्रीय मज्जासंस्थेमध्ये ASO चे वितरणास कारणीभूत ठरते आणि उपचारात्मकदृष्ट्या उपयुक्त ठरू शकते.

गर्भधारणेदरम्यान, गर्भ अँटिसेन्स औषधांच्या प्रभावापासून पूर्णपणे संरक्षित आहे. ASO च्या ट्रान्सप्लेसेंटल किनेटिक्सच्या अभ्यासाने गर्भामध्ये त्याचे संचय प्रकट केले नाही; प्लेसेंटातील उंदीरांमध्ये ASO ची निम्न पातळी लक्षात आली. हे परिणाम उंदीर, उंदीर आणि ससे मधील विविध दुस-या पिढीच्या ASO च्या टेराटोजेनिसिटी अभ्यासामध्ये सातत्याने प्रतिरूपित केले गेले आहेत. प्लेसेंटा, अत्यंत सुगंधित असूनही, एएसओचे उच्च संचय असलेला अवयव नाही.

सर्वसाधारणपणे, प्रस्तुत तथ्ये दर्शवितात की ASO चे वितरण हे ASO क्रियाकलापाची तीव्रता निर्धारित करणार्‍या मुख्य घटकांपैकी एक आहे. ASO वितरणातील फरक मुख्यत्वे या औषधांसाठी टिश्यू ट्रॉपिझमशी आणि थोड्या प्रमाणात परफ्यूजनशी संबंधित असल्याचे दिसून येते.

चयापचय

पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढीतील अँटीसेन्स औषधे न्यूक्लिझद्वारे चयापचय केली जातात, सायटोक्रोम P450-प्रकारच्या ऑक्सिडेस प्रणालीद्वारे नव्हे, जी पारंपारिक लिपोफिलिक लहान रेणू औषधांचे चयापचय करण्यासाठी वापरली जातात. ASO हे सायटोक्रोम P450 isoenzymes साठी सब्सट्रेट नाही किंवा ते वैद्यकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण एकाग्रतेवर त्याच्या क्रियाकलापांना प्रेरित किंवा प्रतिबंधित करत नाही. एक्सोन्यूक्लीज-मध्यस्थ ASO क्लीवेज, जो चयापचय आणि पहिल्या पिढीच्या फॉस्फोथिओएट ODN च्या क्लिअरन्सचा प्रमुख मार्ग आहे, द्वितीय-पिढीच्या ASO साठी दुय्यम आहे. Exonuclease क्रियाकलाप दोन तुकड्यांद्वारे मर्यादित आहे: एक MOE 3' शेवटी आणि दुसरा MOE 5' शेवटी.

एएसओ चयापचय साठी जबाबदार एन्झाइम

दुसऱ्या पिढीतील ASO चे चयापचय करणारे विशिष्ट एंजाइम ज्ञात नाहीत. न्यूक्लीज हे सर्वव्यापी आहेत आणि बहुतेक ऊतींमध्ये खराब झालेले ASO चयापचय शोधणे शक्य आहे. हिपॅटिक आणि रेनल होमोजेनेट्स दोघेही निकोटीनामाइड अॅडेनाइन डायन्यूक्लियोटाइड फॉस्फेट (एनएडीपीएच) किंवा एडेनोसाइन 5-ट्रायफॉस्फेट (एटीपी) सारख्या बहिर्जात ऊर्जा स्रोतांचा समावेश न करता विट्रोमध्ये दुसऱ्या पिढीतील ASO चयापचय करण्यास सक्षम आहेत. प्रारंभिक क्लीवेजचा परिणाम दोन उत्पादनांमध्ये होतो, प्रत्येक 5" आणि 3" MOE संरक्षित टोकाने वैशिष्ट्यीकृत आहे. हे चयापचय प्रथिनांशी बांधले जात नाहीत आणि त्यामुळे ते ऊतकांमधून बाहेर टाकले जातात. चयापचय ते तयार होण्यापेक्षा वेगाने काढून टाकले जात असल्याने, ऊतींमध्ये चयापचयांचा व्यावहारिकपणे संचय होत नाही. अशा प्रकारे, ऊतींमधील एएसओ चयापचय निर्देशांक म्हणून ऊतींमधील चयापचयांचे प्रमाण निश्चित करणे शक्य नाही.

ऊतींमधून एएसओ काढून टाकण्याचा दर त्यांच्या चयापचयवर अवलंबून असल्याने, विविध ऊतकांमधील एएसओच्या चयापचयातील फरकांचा अंदाज या औषधांच्या अर्धायुष्याच्या आधारे वैशिष्ट्यीकृत ऊतकांमधून काढला जाऊ शकतो. चार द्वितीय-पिढीच्या ASO च्या डेटाच्या आधारे, असा निष्कर्ष काढला जातो की या वर्गातील सदस्यांचे वर्तन समान आहे, परंतु 4-13 आठवड्यांपर्यंत औषधाने उपचार केलेल्या माकडांच्या यकृत आणि मूत्रपिंडांपासून त्यांच्या अर्ध्या आयुष्यात थोडा फरक आहे. . हे दर्शविले गेले आहे की यकृत आणि मूत्रपिंड पासून ACO ISIS 104838 आणि 112989 तयारीचे अर्धे आयुष्य खूप समान आहे. हे डेटा सूचित करतात की ASO च्या काही मालिकेसाठी वेगवेगळ्या अवयवांमध्ये चयापचय दरामध्ये कोणतेही महत्त्वपूर्ण फरक नाहीत. तथापि, ISIS 107248, 113715 आणि 301012 साठी ऊतींच्या अर्धायुष्यातील फरक ओळखण्यात आला आहे. यकृत आणि किडनीमधील ASO औषधांच्या चयापचय दरामध्ये आढळून आलेले फरक असे सूचित करतात की वेगवेगळ्या ऊतकांमधील चयापचय दरामध्ये फरक असू शकतो. , किंवा काही उत्पादन मालिका किंवा परिणामांसाठी अधिक जटिल गतीशास्त्र मर्यादित कालावधीत घेतलेल्या नमुन्यांची संख्या दर्शवते.

एएसओच्या दुसऱ्या पिढीच्या उत्सर्जनाच्या प्रक्रियेचा तपशीलवार अभ्यास, यकृत पेशींच्या विविध प्रकारच्या त्यांच्या उत्सर्जनाच्या वेगवेगळ्या दरांची उपस्थिती दर्शवितो. रेनल कॉर्टेक्सच्या प्रॉक्सिमल ट्युब्युलर पेशींसारख्या काही पेशींच्या प्रकारांमध्ये फागोलायसोसोम्समध्ये ASO असते, त्यामुळे या प्रकारच्या अपटेकमुळे वेगवेगळ्या ऊतींमधील औषधांच्या चयापचय दरांमध्ये फरक होण्याची शक्यता असते. याव्यतिरिक्त, अशी शक्यता आहे की एएसओ कंकालच्या संरचनेतील विशिष्ट अनुक्रम एंडोन्यूक्लीसेसद्वारे क्लीव्हेजसाठी भिन्न संवेदनशीलतेद्वारे दर्शविले जाऊ शकतात.

एएसओ पाठीचा कणामधील न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमासाठी बॅक्टेरियल एक्सोन्यूक्लीसेस उच्च प्रमाणात विशिष्टता प्रदर्शित करतात, संभाव्यत: विषाणूंपासून संरक्षणासाठी. सस्तन प्राण्यांच्या पेशींमधील न्यूक्लीजची बरीचशी क्रिया ट्रान्सक्रिप्शन आणि डीएनए दुरुस्तीच्या यंत्रणेशी संबंधित असते आणि अशा प्रकारे सस्तन प्राण्यांची प्रजाती विशिष्टता बॅक्टेरियल एंडोन्यूक्लीसेसपेक्षा भिन्न असू शकते. या सिंथेटिक एएसओच्या अपचयसाठी प्रतिकृती प्रक्रिया आणि दुरुस्तीच्या घटनेशी संबंधित एन्झाइमची क्रिया तितकीच जबाबदार आहे की नाही हे माहित नाही. ssDNA च्या उच्च एकाग्रतेवर, ASO नैसर्गिक सब्सट्रेटशी प्रभावीपणे स्पर्धा करू शकतात. न्यूक्लिझ कुटुंबातील अनेक एंजाइम ASO चे अपचय करण्यास सक्षम आहेत. एएसओ मेटाबॉलिझममध्ये सामील असलेल्या विशिष्ट एन्झाईम्सचे निर्धारण हे अँटीसेन्स औषधांच्या विकासासाठी महत्त्वाचे नाही, परंतु चयापचय मार्गांची अधिक चांगली समज नवीन तंत्रज्ञानाच्या विकासासाठी उपयुक्त ठरेल.

ASO चयापचय

CGE शी चयापचय प्रोफाइलची तुलना करताना पहिल्या आणि दुसऱ्या पिढीतील ASO च्या चयापचयातील फरक स्पष्टपणे दिसून येतो. जेव्हा LC/MS डिटेक्टरमध्ये ऊतक किंवा लघवीचे नमुने विश्लेषित केले जातात तेव्हा चयापचय प्रक्रियांचे स्वरूप स्पष्ट होते. सामान्यतः, पहिल्या पिढीतील फॉस्फोरोथिओएट ODNs चे ASO चयापचयांच्या कॅस्केडमध्ये चयापचय केले जाते, प्रत्येक एक एक्सोन्युक्लीजद्वारे सिंगल न्यूक्लियोटाइड क्लीवेजेसच्या परिणामी एका न्यूक्लियोटाइडने भिन्न असतो. अशाप्रकारे, 20-मेरच्या परिचयानंतर, म्हणजेच 20 न्यूक्लियोटाइड्स, पहिल्या पिढीतील ODN, प्लाझ्मा आणि ऊतकांमध्ये 19-मेरपासून सुरू होणारी आणि पुढे लहान ASO पर्यंत सलग संक्षिप्त ASO ची कुटुंबे असतात.

दुस-या पिढीतील ASO चयापचय मध्ये प्रारंभिक क्लीवेज मध्यस्थी
endonucleases, दोन ASO च्या निर्मितीकडे नेतो, एक MOE च्या 3' शेवटी आणि दुसरा MOE च्या 5' टोकासह. असुरक्षित टोक असलेल्या उत्पादनांचे क्लीव्हेज 5'-एक्सोन्युक्लीझ किंवा 3'-एक्सोन्युक्लीझद्वारे केले जाऊ शकते. एकत्रित एंडो- आणि एक्सोन्यूक्लीज क्रियाकलापांचे परिणाम म्हणजे साखळी-संक्षिप्त क्लीवेज उत्पादनांचा एक कॅस्केड आहे, अनेक, जर सर्वच नसतील तर, चाचणी प्राणी किंवा मानवांकडून गोळा केलेल्या मूत्रात आढळू शकतात. उपचार केलेल्या प्राण्यांच्या किंवा दुसऱ्या पिढीच्या ASO सह उपचार केलेल्या रुग्णांच्या मूत्रात चयापचय असू शकतात जे दोन संभाव्य 15-mer ते दोन संभाव्य 5-mer MOE आणि प्रत्येक मध्यवर्ती चयापचयांचे एकाधिक संयोजन असू शकतात.

MOE च्या टोकांच्या लांबीपेक्षा लहान चयापचय ऊतींमध्ये उपस्थित असतील जर MOE चे टोक स्वतः न्यूक्लीजसाठी सब्सट्रेट असतील. हे चयापचय सामान्यत: मास स्पेक्ट्रल विश्लेषणाद्वारे शोधले जात नाहीत, असे सूचित करतात की, नियमानुसार, चयापचय दरम्यान कोणतेही MOE मोनोन्यूक्लियोटाइड सोडले जात नाहीत. तथापि, या सामान्यीकरणाला काही अपवाद आहेत. न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमांच्या मर्यादित संख्येसाठी , दुसऱ्या पिढीतील ASO सिंगल न्यूक्लियोटाइड ट्रिम्स ऊती आणि प्लाझ्मामध्ये आढळतात – एकतर CGE किंवा LC/MS: चयापचय exonuclease पाचन परिणाम असल्याचे दिसून येते. हे चयापचय प्रारंभिक वितरणामध्ये पाहिले जाऊ शकतात. असे मानले जाते की ते रक्ताच्या प्लाझ्मामध्ये त्वरीत दिसतात. MOE मोनोन्यूक्लियोटाइड्स, जे चयापचय दरम्यान तयार होतात, फॉस्फोरिलेशनसाठी सब्सट्रेट्स नाहीत आणि त्यामुळे न्यूक्लियोटाइड ट्रायफॉस्फेट्समध्ये आणि शेवटी, अंतर्जात न्यूक्लियोटाइड्समध्ये समाविष्ट होण्याची शक्यता नाही. MOE मोनोन्यूक्लियोटाइड्स DNA संश्लेषणासाठी जबाबदार असलेल्या एन्झाईम्सना प्रतिबंधित करत नाहीत. अशा प्रकारे, MOE मोनोन्यूक्लियोटाइड्स, तयार झाल्यास, अंतर्जात न्यूक्लियोटाइड्समध्ये समाविष्ट केले जाऊ नयेत.

दुस-या पिढीच्या ASO च्या deoxynucleotides चा मध्य भाग exonuclease क्लीवेजच्या अधीन आहे, ज्यामुळे एक न्यूक्लियोटाइड सोडला जातो. मोनोडिओक्सिन्युक्लियोटाइड्स, जे एक्सोन्यूक्लीज क्लीवेजद्वारे तयार केले जातात, थिओफॉस्फेट गटाचा अपवाद वगळता, अंतर्जात न्यूक्लियोटाइड्ससारखे असतात, जे सैद्धांतिकदृष्ट्या उपस्थित असू शकतात. तथापि, थायोफॉस्फेट गट ऑक्सिडेशन आणि सल्फरच्या नुकसानास अयोग्य आहे, ज्यामुळे टर्मिनल फॉस्फेट गट अंतर्जात न्यूक्लियोटाइड्स सारखा बनतो. म्हणून, MOE मोनोन्यूक्लियोटाइड्सच्या विपरीत, कोणतेही सोडलेले डीऑक्सीन्यूक्लियोटाइड अंतर्जात न्यूक्लियोटाइड्सच्या इंट्रासेल्युलर डेपोमध्ये नैसर्गिकरित्या समाविष्ट केले जाईल. थिओफॉस्फेट गट राखून ठेवणारे न्यूक्लियोटाइड्स एक किंवा दोन फॉस्फेट गट जोडण्यासाठी सब्सट्रेट्स असतील, परिणामी मिश्रित न्यूक्लियोटाइड थायोफॉस्फेट डाय- किंवा ट्रायफॉस्फेट बनतात. फॉस्फोरिलेशन शक्य आहे, परंतु अल्फा थायोफॉस्फेटच्या उपस्थितीमुळे प्रतिक्रिया थर्मोडायनामिकदृष्ट्या प्रतिकूल बनते.

निष्कर्ष

वर्णन केलेल्या डेटा आणि औषधांच्या फार्माकोकिनेटिक्सच्या अभ्यासाची प्रासंगिकता तसेच औषधे घेतल्यानंतर शरीरात होणार्‍या प्रक्रियांची संपूर्ण माहिती घेण्यासाठी विविध प्राणी प्रजातींवर मॉडेल्स तयार करणे हे स्पष्ट आहे. रशियामध्ये अशा औषधांचा अभ्यासही सुरू आहे.

साहित्य

1. Adjei A.A., Dy G.K., Erlichman C. et al. ISIS 2503 ची फेज I चाचणी, H-ras चे अँटिसेन्स इनहिबिटर, प्रगत कर्करोग असलेल्या रूग्णांमध्ये gemcitabine च्या संयोगाने. // चिकित्सालय. कर्करोग रा. 2003 व्हॉल. ९, #१. पृष्ठ 115.

2. बेनिमेत्स्काया एल., लोईके जे.डी., लोईके जी. एट अल. Mac-1 (CD11b/CD18) एक ODN-बाइंडिंग प्रोटीन आहे. // नॅट. मेड. 1997 खंड. 3, क्रमांक 4. पृष्ठ ४१४.

3. बेनिमेत्स्काया एल., टॉन्किन्सन जे.एल., कोझिओल्किविझ एम. एट अल. फॉस्फोरोथिओएट ODN चे मूलभूत फायब्रोब्लास्ट ग्रोथ फॅक्टर, रीकॉम्बिनंट सोल्युबल सीडी 4, लॅमिनिन आणि फायब्रोनेक्टिन पी-चिरालिटी स्वतंत्र मध्ये बंधनकारक. // Nucl. ऍसिडस् Res. 1995 व्हॉल. 23, क्र. 21. पृष्ठ 4239.

4. बिजस्टरबोश एम.के., मनोहरन एम., रंप ई.टी. वगैरे वगैरे. फॉस्फोरोथिओएट अँटीसेन्स ओडीएनचे इन विट्रो भाग्य: एंडोथेलियल पेशींवर स्कॅव्हेंजर रिसेप्टर्सचे प्रमुख सेवन. // Nucl. ऍसिडस् Res. 1997 खंड. २५, क्र. १६. पृष्ठ 3290.

5. बिजस्टरबॉश एम.के., रंप ई.टी., डी व्रुह आर.एल. वगैरे वगैरे. प्लाझ्मा प्रोटीन बाइंडिंगचे मॉड्युलेशन आणि कोलेस्टेरॉल संयुग्मनद्वारे फॉस्फोरोथिओएट ओडीएनचे इन विट्रो लिव्हर सेल अपटेक. // Nucl. ऍसिडस् Res. 2000 व्हॉल. 28, क्रमांक 14. पी. 2717.

6. ब्राऊन डी.ए., कांग एस.एच., ग्र्याझनोव्ह एस.एम. वगैरे वगैरे. विशिष्ट प्रोटीन बाइंडिंगवर ODN च्या फॉस्फोरोथिओएट बदलाचा प्रभाव. // जे. बायोल. केम. 1994 व्हॉल. २६९, क्र. ४३. R. 26801.

7. बटलर एम., क्रुक आर.एम., ग्रॅहम एम.जे. वगैरे वगैरे. फॉस्फोरोथियोएट ओडीएन वर्ग A स्कॅव्हेंजर रिसेप्टर नॉकआउट आणि जंगली-प्रकारचे उंदीर मध्ये समान वितरीत करतात. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 2000 व्हॉल. 292, क्रमांक 2. पृष्ठ ४८९.

8. बटलर M., Hayes C.S., Chappell A., Murray S.F., Yaksh T.L., Hua X.Y. उंदरांमध्ये इंट्राथेकल प्रशासनानंतर 2_-O-(2-मेथॉक्साइथिल)-सुधारित ASO चे स्पाइनल वितरण आणि चयापचय. // न्यूरोसायन्स. 2005 व्हॉल. 131, क्रमांक 3. पृष्ठ 705.

9. बटलर एम., स्टेकर के., बेनेट सी.एफ. सामान्य उंदीर ऊतींमध्ये फॉस्फोरोथिओएट ODN चे सेल्युलर वितरण. //लॅब. गुंतवणूक करा. 1997 खंड. 77, क्रमांक 4. पृ. ३७९.

10. Cossum P.A., Sasmor H., Dellinger D. et al. 14C-लेबल असलेल्या फॉस्फोरोथिओएट ASO ISIS 2105 चा उंदरांना अंतःशिरा प्रशासनानंतर विल्हेवाट लावणे. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 1993 व्हॉल. 267, क्रमांक 3. पृ. 1181.

11. कॉसम पी.ए., ट्रॉंग एल., ओवेन्स एस.आर. वगैरे वगैरे. 14C-लेबल असलेल्या फॉस्फोरोथियोएट ASO, ISIS 2105 चे फार्माकोकाइनेटिक्स, उंदरांना इंट्राडर्मल प्रशासनानंतर. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 1994 व्हॉल. २६९, क्रमांक १. पृ. ८९.

12. क्रुक एस.टी., ग्रॅहम एम.जे., झुकरमन जे.ई. वगैरे वगैरे. उंदरांमध्ये अनेक नवीन ASO अॅनालॉग्सचे फार्माकोकिनेटिक गुणधर्म. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 1996 व्हॉल. २७७, क्रमांक २. पृष्ठ 923.

13. ड्रायव्हर S.E., Robinson G.S., Flanagan J., Shen W., Smith L.E.H., Thomas D.W., Roberts P.C. भ्रूण जनुक अभिव्यक्तीचे ASO-आधारित प्रतिबंध. // नॅट. बायोटेक्नॉल. 1999 व्हॉल. 17. पृ. 1184.

14. एकस्टाईन एफ. फॉस्फोरोथियोएट ओडीएन: त्यांचे मूळ काय आहे आणि त्यांच्याबद्दल अद्वितीय काय आहे? // अँटिसेन्स न्यूक्ल. ऍसिड औषध देव. 2000 व्हॉल. १०, #२. आर. ११७.

15. गॉस एच.जे., ओवेन्स एस.आर., विनिमन एम., कूपर एस., कमिन्स एल.एल. फॉस्फोरोथिओएट एएसओ मेटाबोलाइट्सची ऑनलाइन एचपीएलसी इलेक्ट्रोस्प्रे मास स्पेक्ट्रोमेट्री. // गुदद्वारासंबंधीचा. केम. 1997 खंड. 69, क्रमांक 3. पृ. ३१३.

16. गेरी आर.एस. अँटिसेन्स थेरपीटिक्ससाठी पीके/पीडी संबंधांचे वर्तमान मूल्यांकन. // वर्ल्ड काँग्रेस ऑफ फार्मसी अँड फार्मास्युटिकल सायन्सेस, नाइस, फ्रान्स, 2002.

17. गेरी आर.एस., ब्रॅडली जे.डी., वातानाबे टी. एट अल. ISIS 113715 साठी फार्माकोकाइनेटिक परस्परसंवादाचा अभाव, 2_-O-methoxyethyl सुधारित अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड लक्ष्यित प्रोटीन टायरोसिन फॉस्फेट 1B मेसेंजर RNA, तोंडावाटे मेटफॉर्मिन, ग्लिपिझाइड किंवा रोसिग्लिटाझोनसह. // चिकित्सालय. फार्माकोकिनेट. 2006 व्हॉल. 45, क्रमांक 8. पृ. ७८९.

18. गेरी आर.एस., लीड्स जे.एम., फिचेट जे. इ. फॉस्फोरोथियोएट एएसओ अँटीसेन्स इनहिबिटर ऑफ सी-राफ-१ किनेज एक्सप्रेशन.// ड्रग मेटाबच्या उंदरांमध्ये फार्माकोकिनेटिक्स आणि मेटाबॉलिझम. डिस्पोज. 1997 खंड. २५, क्र. ११. आर. १२७२.

19. गेरी आर.एस., लीड्स जे.एम., हेन्री एस.पी., मॉन्टेथ डी.के., लेविन ए.ए. कर्करोगाच्या उपचारासाठी अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड इनहिबिटर: 1. फॉस्फोरोथिओएट ओडीएनचे फार्माकोकिनेटिक गुणधर्म. // अँटीकॅन्सर ड्रग देस. 1997 खंड. 12, क्रमांक 5. आर. ३८३.

20. गेरी आर.एस., लीड्स जे.एम., शानाहान डब्ल्यू. एट अल. 3 अँटिसेन्स फॉस्फोरोथियोएट ASOs साठी स्वतंत्र प्लाझ्मा आणि टिश्यू फार्माकोकिनेटिक्स अनुक्रम: माऊस टू मॅन. // अमेरिकन असोसिएशन ऑफ फार्मास्युटिकल सायंटिस्ट, फार्म मध्ये. संशोधन, प्लेनम प्रेस, सिएटल, वॉशिंग्टन. 1996. आर. एस.

21. गेरी आर.एस., टेंग सी.एल., ट्रुओंग एल. एट अल. प्रथम बीगल कुत्र्यांमध्ये अंशतः सुधारित काइमरिक अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे यकृताचा निष्कर्ष काढा. // अमेरिकन असोसिएशन ऑफ फार्मास्युटिकल सायंटिस्टच्या वार्षिक बैठकीत, इंडियानापोलिस, IN, 2000. पी. 216.

22. गेरी आर.एस., उशिरो-वातानाबे टी., ट्रुओंग एल एट अल. उंदरांमध्ये 2_-O-(2-methoxyethyl)-सुधारित ASO अॅनालॉग्सचे फार्माकोकिनेटिक गुणधर्म. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 2001 व्हॉल. 296, क्रमांक 3. R. 890.

23. गेरी R.S., Yu R.Z., Levin A.A. फॉस्फोरोथिओएट अँटीसेन्स ओडीएनचे फार्माकोकिनेटिक्स. // कुर्र. मत. गुंतवणूक करा. औषधे 2001 व्हॉल. २, #४. आर. ५६२.

24. गेरी R.S., Yu R.Z., Watanabe T. et al. ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टर-अल्फा फॉस्फोरोथियोएट 2_-O-(2-मेथॉक्साइथिल) सुधारित अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे फार्माकोकाइनेटिक्स: प्रजातींमध्ये तुलना. // औषध मेटाब. डिस्पोज. 2003 व्हॉल. 31, क्रमांक 11. पृष्ठ 1419.

25. जियाकोमिनी के.एम., सुगियामा वाय. मेम्ब्रेन ट्रान्सपोर्टर्स आणि ड्रग रिस्पॉन्स, गुडमन अँड गिलमनच्या द फार्माकोलॉजिकल बेस ऑफ थेरप्युटिक्समध्ये, 11वी आवृत्ती, ब्रंटन, एलएल, एड., मॅकग्रा-हिल, न्यूयॉर्क, 2006. पी. 41.

26. ग्लेव्ह एम., ची के.एन. प्रोस्टेट आणि इतर कर्करोगांमध्ये हार्मोन आणि केमोसेन्सिटिव्हिटी वाढविण्यासाठी क्लस्टरिन, सायटोप्रोटेक्टिव्ह जीन नॉक-डाउन. // Ann. NY Acad. विज्ञान 2005. खंड 1058. P.1.

27. ग्लेव्ह एम., मियाके एच. प्रोस्टेट कर्करोगात एंड्रोजन- आणि केमो-संवेदनशीलता वाढविण्यासाठी सायटोप्रोटेक्टिव्ह जीन, क्लस्टरिनला लक्ष्य करणार्‍या अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचा वापर. // जागतिक जे. उरोल. 23. 2005. क्रमांक 1. पृष्ठ 38.

28. ग्लोव्हर जे.एम., लीड्स जे.एम., मांट टी.जी. वगैरे वगैरे. टप्पा I सुरक्षा आणि इंटरसेल्युलर आसंजन रेणू-1 अँटिसेन्स ओडीएन (ISIS 2302) चे फार्माकोकिनेटिक प्रोफाइल. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 1997 खंड. 282, क्रमांक 3. आर. ११७३.

29. ग्रॅहम एम.जे., क्रुक एस.टी., मॉन्टेथ डी.के. वगैरे वगैरे. इंट्राव्हेनस प्रशासनानंतर उंदराच्या यकृतामध्ये फॉस्फोरोथिओएट एएसओचे इन विट्रो वितरण आणि चयापचय. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 1998 व्हॉल. 286, क्रमांक 1. पृ. ४४७.

30. गुवाकोवा M.A., Yakubov L.A., Vlodavsky I., Tonkinson J.L., Stein C.A. फॉस्फोरोथियोएट ओडीएन मूलभूत फायब्रोब्लास्ट ग्रोथ फॅक्टरशी बांधले जातात, सेल पृष्ठभागाच्या रिसेप्टर्सला त्याचे बंधन प्रतिबंधित करतात आणि बाह्य मॅट्रिक्सवरील कमी आत्मीयता बंधनकारक साइटवरून काढून टाकतात. // जे. बायोल. केम. 1995 व्हॉल. 270. P.2620.

31. हेन्री एस.पी., डेनी के.एच., टेम्पलिन एम.व्ही., यू आर.झेड., लेविन ए.ए. ICAM-1 च्या मानवी आणि म्युरिन अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड इनहिबिटरचे पुनरुत्पादक कार्यक्षमतेवर, गर्भाचा विकास आणि उंदरांमध्ये प्रसवोत्तर विकासावर प्रभाव. // जन्म दोष रा. Bdev. पुनरुत्पादन. टॉक्सिकॉल. 2004 व्हॉल. ७१, क्र.६. पृष्ठ 359.

32. हुआ X.Y., मूर A., Malkmus S. et al. स्पाइनल प्रोटीन किनेज सी अल्फा एक्सप्रेशनला अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडद्वारे प्रतिबंधित केल्याने मॉर्फिन इन्फ्यूजन-प्रेरित सहिष्णुता कमी होते. // न्यूरोसायन्स. 2002 व्हॉल. 113, क्रमांक 1. पृष्ठ 99.

33. जॅक्सन जे.के., ग्लीव्ह एम.ई., ग्लिव्ह जे., बर्ट एच.एम. अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स ते क्लस्टरिनद्वारे अँजिओजेनेसिसचा प्रतिबंध. // एंजियोजेनेसिस. 2005 व्हॉल. 8, क्रमांक 3. पृष्ठ 229.

34. कॅस्टेलीन जे.जे.पी., वेडेल एम.के., बेकर बी.एफ. वगैरे वगैरे. अपोलीपोप्रोटीन बी आणि कमी-घनता लिपोप्रोटीन कोलेस्टेरॉलच्या अल्प-मुदतीच्या वापरामुळे ऍपोलिपोप्रोटीन बी. // अभिसरण. 2006 व्हॉल. 114, क्रमांक 16. पृ. १७२९.

35. कोझिओल्किविझ एम., क्राकोविक ए., क्विन्कोव्स्की एम., बोक्झकोव्स्का एम., स्टेक डब्ल्यू.जे. स्टिरिओडिफरन्स - ऑलिगो (न्यूक्लियोसाइड फॉस्फोरोथिओट्स) च्या पी चिरालिटीचा जीवाणू RNase H. // Nucl च्या क्रियाकलापांवर प्रभाव. ऍसिडस् Res. 1995. खंड 23, क्रमांक 24. R. 5000.

36. लीड्स जे.एम., गेरी आर.एस. फॉस्फोरोथिओएट एएसओचे फार्माकोकिनेटिक गुणधर्म मानवांमध्ये, अँटिसेन्स रिसर्च अँड अॅप्लिकेशन्समध्ये, 1st एड., क्रुक, एस. टी., एड., स्प्रिंगर, हेडलबर्ग, 1998. पी. 217.

37. लीड्स जे.एम., हेन्री एस.पी., गेरी आर.एस., बर्किन टी.ए., लेविन ए.ए. सायनोमोल्गस माकडांमध्ये फॉस्फोरोथिओएट ऑलिगोडिओक्सिन्युक्लियोटाइडच्या त्वचेखालील आणि अंतःशिरा प्रशासनाच्या फार्माकोकिनेटिक्सची तुलना. // अँटिसेन्स न्यूक्ल. ऍसिड औषध देव. 2000. खंड 10, क्रमांक 6. आर. ४३५.

38. लेविन ए.ए. फॉस्फोरोथिओएट अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या फार्माकोकिनेटिक्स आणि टॉक्सिकॉलॉजीमधील समस्यांचे पुनरावलोकन. // बायोचिम. बायोफिज. acta 1999. खंड 1489, क्रमांक 1. आर. ६९.

39. लेविन ए.ए., गेरी आर.एस., लीड्स जे.एम. वगैरे वगैरे. फॉस्फोरोथिओएट एएसओचे फार्माकोकिनेटिक्स आणि विषारीपणा, जैवतंत्रज्ञान आणि सुरक्षितता मूल्यांकन, 2रा संस्करण., थॉमस, जे.ए., एड., टेलर आणि फ्रान्सिस, फिलाडेल्फिया, पीए, 1998. पी. 151.

40. लेविन ए.ए., हेन्री एस.पी., बेनेट सी.एफ. वगैरे वगैरे. मॉडर्न बायोटेक्नॉलॉजीमधील नॉव्हेल थेरपीटिक्स फ्रॉम लॅबोरेटरी टू ह्युमन टेस्टिंग, 1st एड., ऑक्सेंडर डी.एल. आणि पोस्ट L.E., eds., Springer-Verlag, Heidelberg, Germany, 1998, p. 131.

41. लेविन ए.ए., हेन्री एस.पी., मॉन्टीथ डी., टेम्पलिन एम. अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे विषाक्तता. // अँटिसेन्स ड्रग टेक्नॉलॉजी मध्ये, क्रोक, एस. टी., एड., मार्सेल डेकर, न्यूयॉर्क, 2001. पी. 201.

42. लोके S.L., स्टीन C.A., झांग X.H. वगैरे वगैरे. जिवंत पेशींमध्ये ASO वाहतुकीचे वैशिष्ट्य. //प्रोक. Natl. Acad. विज्ञान संयुक्त राज्य. 1989 खंड. 86. पृष्ठ 3474.

43. लॉरेन्झ पी., मिस्टेली टी., बेकर बी.एफ., बेनेट सी.एफ., स्पेक्टर डी.एल. न्यूक्लियोसाइटोप्लाज्मिक शटलिंग: अँटिसेन्स फॉस्फोरोथिओएट ओडीएनच्या विट्रो प्रॉपर्टीमध्ये एक कादंबरी. // Nucl. ऍसिडस् Res. 2000 व्हॉल. 28, क्रमांक 2. पृष्ठ 582.

44. खाण कामगार P.B., Geary R.S., Matson J. et al. ऍलिकाफोर्सन (ISIS 2302) ची जैवउपलब्धता आणि उपचारात्मक क्रियाकलाप सक्रिय अल्सरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या व्यक्तींना रेक्टल रिटेन्शन एनीमा म्हणून प्रशासित केले गेले. // आजार फार्माकॉल. तेथे. 2006 व्हॉल. 23, क्र. 10. आर. १४२७.

45. Mou T.C., ग्रे D.M. Ff जनुक 5 प्रोटीनसाठी फॉस्फोरोथियोएट-सुधारित ऑलिगोमर्सची उच्च बंधनकारकता C-5 प्रोपाइन किंवा 2_-O-मिथाइल बदलांच्या जोडणीद्वारे नियंत्रित केली जाते. // Nucl. ऍसिडस् Res. 2002 व्हॉल. 30, क्रमांक 3. आर. ७४९.

46. ​​निकलिन पी.एल., क्रेग एस.जे., फिलिप्स जे.ए. प्राण्यांमध्ये फॉस्फोरोथियोएट्सचे फार्माकोकिनेटिक गुणधर्म-शोषण, वितरण, चयापचय आणि निर्मूलन, अँटिसेन्स रिसर्च अँड अॅप्लिकेशन्समध्ये, 1ली आवृत्ती, क्रुक, एस.टी., एड., स्प्रिंगर, बर्लिन, 1998. पी. 141.

47. पेंग बी., अँड्र्यूज जे., नेस्टोरोव्ह आय. एट अल. उंदरामध्ये ऊतींचे वितरण आणि अँटिसेन्स फॉस्फोरोथिओएट ASO ISIS 1082 चे शारीरिकदृष्ट्या आधारित फार्माकोकाइनेटिक्स. // अँटिसेन्स न्यूक्ल. ऍसिड औषध देव. 2001 व्हॉल. 11, #1. पृष्ठ 15.

48. फिलिप्स जे.ए., क्रेग एस.जे., बेली डी. इ. फार्माकोकिनेटिक्स, चयापचय आणि 20-मेर फॉस्फोरोथिओएट ओडीएन (सीजीपी 69846A) चे अंतस्नायु आणि त्वचेखालील प्रशासनानंतर निर्मूलन. // बायोकेम. फार्माकॉल. 1997 खंड. ५४, क्र.६. आर. ६५७.

49. सवाई के., महातो आर.आय., ओका वाय., ताकाकुरा वाय., हशिदा एम. विलग परफ्यूज्ड रॅट किडनीमध्ये एएसओचे डिस्पोझिशन: त्यांच्या मूत्रपिंडाच्या शोषणात स्कॅव्हेंजर रिसेप्टर्सचा सहभाग. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 1996 व्हॉल. २७९, क्रमांक १. पृ. २८४.

50. सेवेल एल.के., गेरी आर.एस., बेकर बी.एफ. वगैरे वगैरे. ISIS 104838 ची फेज I चाचणी, ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टर-अल्फा लक्ष्यित करणारे 2_-मेथोक्साइथिल सुधारित अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 2002 व्हॉल. 303, क्रमांक 3. आर. १३३४.

51 स्लिम जी., गेट एम.जे. हॅमरहेड राइबोझाइम्सच्या क्लीव्हेजच्या यंत्रणेच्या अभ्यासामध्ये फॉस्फोरोथियोएट-युक्त ऑलिगोरिबोन्यूक्लियोटाइड्स कॉन्फिगरेशन परिभाषित केले आहेत. // Nucl. ऍसिडस् Res. 1991 व्हॉल. 19, क्रमांक 6. R. 1183.

52. Snyder R.M., Mirabelli C.K., Crook S.T. सेल्युलर असोसिएशन, इंट्रासेल्युलर वितरण, आणि अनुक्रमिक लिगँड एक्सचेंज प्रतिक्रियांद्वारे ऑरानोफिनचा प्रवाह. // बायोकेम. फार्माकॉल. 1986 व्हॉल. 35, क्रमांक 6. पृष्ठ 923.

53. Soucy N.V., Riley J.P., Templin M.V. वगैरे वगैरे. इंट्राव्हेनस इन्फ्युजन नंतर उंदरांमध्ये फॉस्फोरोथिओएट एएसओचे माता आणि गर्भ वितरण. // जन्म दोष रा. Bdev. पुनरुत्पादन. टॉक्सिकॉल. 2006 व्हॉल. ७७, क्रमांक १. पृष्ठ 22.

54. स्पिट्झर एस., एकस्टाईन एफ. ऑलिगोडिओक्सायरिबोन्यूक्लियोटाइड्समधील फॉस्फोरोथियोएट गटांद्वारे डीऑक्सीरिबोन्यूक्लीसेसचे प्रतिबंध. // Nucl. ऍसिडस् Res. 1988 व्हॉल. १६, #२४. R. 11691.

55. स्टॅव्हचेन्स्की एस., गेरी आर.एस., चो एम. फार्माकोकाइनेटिक्स आणि उंदीरांमध्ये अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड (आयएसआयएस 2302) चा यकृताचा पहिला पास प्रभाव. // अमेरिकन असोसिएशन ऑफ फार्मास्युटिकल सायंटिस्टच्या वार्षिक बैठकीत, इंडियानापोलिस, IN, 2000. पी. 216.

56. टेम्पलिन एम.व्ही., लेविन ए.ए., ग्रॅहम एम.जे. वगैरे वगैरे. फॉस्फोरोथियोएट ASO चे फार्माकोकिनेटिक आणि विषारीपणा प्रोफाइल उंदरांच्या फुफ्फुसात इनहेलेशन डिलीव्हरीनंतर. // अँटिसेन्स न्यूक्ल. ऍसिड औषध देव. 2000 व्हॉल. 10, क्रमांक 5. आर. 359.

57. टेप्लोवा एम., मिनासोव जी., तेरेश्को व्ही. एट अल. क्रिस्टल स्ट्रक्चर आणि 2_-O-(2-मेथॉक्साइथिल)-RNA चे सुधारित एंटीसेन्स गुणधर्म. // नॅट. रचना. बायोल. 1999. खंड 6, क्रमांक 6. R.535.

58. Villalona-Calero M.A., Ritch P., Figueroa J.A. वगैरे वगैरे. प्रगत नॉन-स्मॉल सेल फुफ्फुसाचा कर्करोग असलेल्या रुग्णांमध्ये सिस्प्लॅटिन आणि जेमसिटाबाईनच्या संयोगाने LY900003 चा टप्पा I/II अभ्यास, प्रोटीन किनेज सी-अल्फाचा अँटीसेन्स इनहिबिटर. // चिकित्सालय. कर्करोग रा. 2004 व्हॉल. 10, क्रमांक 18 पं. 1. पृ. 6086.

59. वातानाबे T.A., Geary R.S., Levin A.A. मानवी ICAM-1 (ISIS 2302) ला लक्ष्य करणार्‍या अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडचे प्लाझ्मा प्रोटीन बंधन. // ASOs. 2006 व्हॉल. 16, क्रमांक 2. पृ. १६९.

60. व्हाईट ए.पी., रीव्हस के.के., स्नायडर ई. इ. सिंगल-स्ट्रँडेड फॉस्फोडीस्टर आणि फॉस्फोरोथिओएट ऑलिगोडिओक्सायरिबोन्यूक्लियोटाइड्सचे हायड्रेशन. // Nucl. ऍसिडस् Res. 1996 व्हॉल. 24, क्र. 16. आर. ३२६१.

61. विल्सन डी.एम. 3रा, Ape1 अॅबॅसिक एंडोन्यूक्लिझ क्रियाकलाप मॅग्नेशियम आणि पोटॅशियम एकाग्रतेद्वारे नियंत्रित केला जातो आणि पर्यायी DNA संरचनांवर मजबूत असतो. // जे. मोल. बायोल. 2005 व्हॉल. ३४५, क्र.५. पृष्ठ 1003.

62. यू डी., कंदिमल्ला ई.आर., रोस्की ए. आणि इतर. स्टिरीओ-समृद्ध फॉस्फोरोथिओएट ओडीएन: संश्लेषण, जैवभौतिक आणि जैविक गुणधर्म. // Bioorg. मेड. केम. 2000. खंड 8, क्रमांक 1. आर. २७५.

63. Yu R.Z., Baer B., Chappel A. et al. प्लाझ्मामधील फॉस्फोरोथिओएट ODN च्या निर्धारासाठी अतिसंवेदनशील गैर-स्पर्धात्मक संकरीकरण-लिगेशन एन्झाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परखचा विकास. // गुदद्वारासंबंधीचा. बायोकेम. 2002 व्हॉल. 304, क्रमांक 1. पृ. १९.

64. Yu R.Z., Geary R.S., Leeds J.M. वगैरे वगैरे. उंदीर आणि माकडामध्ये मानवी हरास एमआरएनएला लक्ष्य करणार्‍या अँटीसेन्स फॉस्फोरोथियोएट एएसओच्या फार्माकोकाइनेटिक्स आणि टिश्यू डिस्पोझिशनची तुलना. // जे. फार्म. विज्ञान 2001 व्हॉल. ९०, #२. पृ. १८२.

65. Yu R.Z., Geary R.S., Levin A.A. अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या फार्माकोकायनेटिक आणि फार्माकोकायनेटिक/फार्माकोडायनामिक मूल्यांकनासाठी नवीन परिमाणात्मक जैव विश्लेषण पद्धतींचा वापर. // कुर्र. मत. औषध डिस्को. देव 2004 व्हॉल. ७, #२. आर. १९५.

66. Yu R.Z., किम T.W., Hong A. et al. मानवी अपोलीपोप्रोटीन B-100 ला लक्ष्य करत, दुसऱ्या पिढीतील अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड ISIS 301012 च्या माऊसपासून मनुष्यापर्यंत क्रॉस प्रजातींची फार्माकोकिनेटिक तुलना. // औषध मेटाब. डिस्पोज. 2007 व्हॉल. 35. पृ. 460.

67. यू आर.झेड., झांग एच., गेरी आर.एस. वगैरे वगैरे. उंदरांमध्ये फास एमआरएनएला लक्ष्य करणार्‍या अँटीसेन्स फॉस्फोरोथिओएट एएसओचे फार्माकोकिनेटिक्स आणि फार्माकोडायनामिक्स. // जे. फार्माकॉल. कालबाह्य. तेथे. 2001 व्हॉल. 296, क्रमांक 2. पृ. ३८८.

68. झिंकर बी.ए., रॉन्डिनोन सी.एम., ट्रेव्हिलियन जे.एम. वगैरे वगैरे. PTP1B antisense oligonucleotide PTP1B प्रोटीन कमी करते, रक्तातील ग्लुकोज सामान्य करते आणि मधुमेही उंदरांमध्ये इंसुलिन संवेदनशीलता सुधारते. //प्रोक. Natl. Acad. विज्ञान संयुक्त राज्य. 2002 व्हॉल. ९९, #१७. पृष्ठ 1137.

5507 0

हे अनेक मार्गांनी साध्य केले जाऊ शकते: विशिष्ट जनुक किंवा mRNA सह संबंधित ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडचे संकरीकरण, प्रोटीन ट्रान्सक्रिप्शन घटक अवरोधित करणे, RNA एन्झाईम्सच्या क्लीव्हेजच्या परिणामी mRNA चे प्रमाण कमी करणे इ. त्यापैकी काही तत्त्वांचा विचार करा.

रिबूलिगोन्यूक्लियोटाइड जो विशिष्ट mRNA ला बांधतो आणि त्याद्वारे एन्कोड केलेल्या प्रथिनाचे भाषांतर रोखतो त्याला "antisense" mRNA म्हणतात. ही यंत्रणा जीन्सचे नियमन करण्यासाठी काही जीवाणू वापरतात (चित्र 3.20). प्रॅक्टिसमध्ये, कृत्रिमरित्या तयार केलेली जीन्स वापरली जातात, ज्यामध्ये डीएनए इन्सर्ट अशा अभिमुखतेमध्ये असते की त्यांचे प्रतिलेख लक्ष्य mRNA (चित्र 3.21) च्या संदर्भात अँटिसेन्स असतात.

तांदूळ. ३.२०. अँटिसेन्स आरएनए द्वारे बॅक्टेरियोफेरिटिन (बीएफआर) जनुकाचे नियमन

तांदूळ. ३.२१. सिंथेटिक अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडद्वारे एमआरएनए भाषांतराचा प्रतिबंध

हे सिद्ध झाले आहे की सिंथेटिक अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचा वापर केला जाऊ शकतो, तथापि, त्यांचा उपचारात्मक प्रभाव सेल्युलर न्यूक्लीजच्या क्रियेवरील प्रतिकार, वितरण प्रणाली आणि त्यांच्या संकरीकरणाच्या विशिष्टतेवर जोरदारपणे अवलंबून असेल. विशिष्ट mRNA वर सर्वात प्रभावी लक्ष्य साइट निश्चित करण्यासाठी, लक्ष्य mRNA संश्लेषित करणार्‍या पेशींच्या संस्कृतीसह 15-20 बेस लांब अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या संचाची चाचणी केली जाते. संश्लेषित प्रथिनांची रचना इलेक्ट्रोफोरेसीसद्वारे निर्धारित केली जाते आणि हे स्थापित केले जाते की कोणत्या ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड परिचयामुळे लक्ष्य प्रोटीनचे संश्लेषण कमी होते.

न्यूक्लीज क्लीव्हेजपासून संरक्षण करण्यासाठी, सुधारित ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स संश्लेषित केले जातात, परंतु संकरित करण्याची क्षमता गमावत नाहीत. अंजीर वर. 3.22 सुधारित न्यूक्लियोटाइड्सची संरचना दर्शविते, ज्याच्या प्रभावीतेचा सखोल अभ्यास केला जात आहे. उदाहरणार्थ, असे दिसून आले आहे की ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स फॉस्फोडीस्टर बाँडच्या मुक्त ऑक्सिजनच्या बदली सल्फर (रचना b) सह प्रभावीपणे पूरक लक्ष्य RNA सह संकरित होतात आणि परिणामी RNA-DNA डुप्लेक्स इंट्रासेल्युलर रिबोन्यूक्लीज H सक्रिय करतात.

हे अंतर्जात एंझाइम अशा संकरीत आरएनए अनुक्रमाचे हायड्रोलायझेशन करते. अशा ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्ससह, आशादायक क्लिनिकल चाचण्या आधीच केल्या गेल्या आहेत, ज्यामध्ये सायटोमेगॅलॉइरस, एचआयव्ही आणि कर्करोगाच्या विकासासाठी जबाबदार असलेल्या काही आरएनएचे लक्ष्य होते.

तांदूळ. ३.२२. ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड बदल: a - सामान्य फॉस्फोडीस्टर बाँड; b - थायोफॉस्फेट बाँड; c - फॉस्फामाइड बाँड; d - 2"-0-मिथिलरिबोज; e - C-5-प्रॉपिनाइलसाइटोसिन

अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या प्रभावी वितरणासाठी, ते सहसा लिपोसोममध्ये पॅक केले जातात, ज्यामध्ये विशिष्ट लिगँड्ससह सुधारित केले जाते जे लक्ष्यित वितरण प्रदान करतात (आम्ही हे तंत्र आधीच पाहिले आहे जेव्हा आम्ही उपचारात्मक जनुकांच्या नॉन-व्हायरल वितरणाच्या पद्धतींचा विचार केला आहे). आजपर्यंत, अनेक चाचण्या केल्या गेल्या आहेत आणि व्हायरल इन्फेक्शन आणि मलेरियाच्या उपचारांसाठी गुळगुळीत स्नायू पेशींचा अवांछित प्रसार (अँजिओप्लास्टी, कोरोनरी बायपास शस्त्रक्रिया, एथेरोस्क्लेरोसिस) रोखण्यासाठी अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सची उच्च उपचारात्मक परिणामकारकता दिसून आली आहे. .

राइबोझाईम्सच्या कृती आणि संरचनेचे सिद्धांत - न्यूक्लिझ क्रियाकलापांसह नैसर्गिक आरएनए, अंजीर मध्ये दर्शविले आहे. ३.२३.
असे आढळून आले आहे की हे लहान-अडकलेले RNA त्यांच्या mRNA क्लीव्ह करून विषाणूजन्य जीन्स, ऑन्कोजीन, वाढीचे घटक आणि इतर उपचारात्मकदृष्ट्या महत्त्वाच्या जनुकांची अभिव्यक्ती प्रभावीपणे दाबण्यास सक्षम आहेत. सब्सट्रेट-बाइंडिंग क्रम बदलून, विशिष्ट mRNA साठी विशिष्ट रिबोझाइम्स मिळवणे शक्य आहे. उत्प्रेरक डोमेनला एन्कोडिंग करून सिंथेटिक oligodeoxyribonucleotide च्या लिप्यंतरणाद्वारे आणि त्याच्या बाजूला असलेल्या प्रदेशांना संकरित करून रिबोझाइम्स थेट सेलमध्ये संश्लेषित केले जाऊ शकतात.

तांदूळ. ३.२३. ribozymes द्वारे mRNA चे विच्छेदन. बाण क्लीवेज साइट दर्शवितो.

असा ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड युकेरियोटिक अभिव्यक्ती वेक्टरमध्ये घातला जातो आणि सेलमध्ये ठेवला जातो. परिणामी आरएनए उत्स्फूर्तपणे एक सक्रिय रचना प्राप्त करतो, तथाकथित हॅमरहेड आकार. विविध रचना आणि क्रियाकलापांचे अनेक राइबोझाइम्स रासायनिक संश्लेषित केले गेले आहेत. उदाहरणार्थ, रशियन एकेडमी ऑफ सायन्सेस (नोवोसिबिर्स्क) च्या सायबेरियन शाखेच्या रासायनिक जीवशास्त्र आणि प्रायोगिक औषध संस्थेच्या न्यूक्लिक अॅसिडच्या प्रयोगशाळेत, वाढीव क्रियाकलाप आणि स्थिरतेसह सिंथेटिक राइबोझाइम्स मिळविण्यासाठी अनेक वर्षे संशोधन केले जात आहे.

इंट्रासेल्युलर न्यूक्लीजद्वारे अकाली क्लीव्हेजपासून संरक्षण वाढविण्यासाठी, राइबोझाइमचे विविध डेरिव्हेटिव्ह मिळवले जातात - मेथिलेटेड 2 "-हायड्रॉक्सिल (चित्र 3.22, डी) गट, बायनरी स्ट्रक्चर्स इ. सह. राइबोझाइम रेणूची रचना F च्या प्रभावीतेवर लक्षणीय परिणाम करते. 3.24 विविध संरचनांच्या संश्लेषित राइबोझाईमसह mdr1 mRNA क्लीवेजचे गतीशास्त्र दाखवते.

तांदूळ. ३.२४. सुधारित बायनरी (1,3) आणि पूर्ण-लांबीच्या (2,4) राइबोझाइम्ससह MDR1 mRNA च्या 190-mer 5'-टर्मिनल फ्रॅगमेंटचे क्लीवेज: a - वेगळ्या विशिष्ट साइटसह RNA संरचना; b - क्लीवेज उत्पादनांचे संचय ( A.G. Venyaminova, IBKhiFM, Novosibirsk द्वारे प्रदान केलेले साहित्य)

आण्विक थेरपीमध्ये एक विशेष स्थान तथाकथित प्रोड्रग सक्रियकरण पद्धतींनी व्यापलेले आहे. उदाहरणार्थ, कर्करोगासाठी जीन थेरपीच्या पद्धतींपैकी एक म्हणजे हर्पस सिम्प्लेक्स विषाणू एचएसव्हीटीके द्वारे आधीच नमूद केलेल्या थायमिडीन किनेज जनुकाचे उत्पादन गॅन्सिक्लोव्हिर (जीसीव्ही, ग्वानोसिनचे एक व्युत्पन्न) सक्रिय डेरिव्हेटिव्ह वापरून ट्यूमर पेशींचा नाश करणे. आम्हाला

ट्यूमर पेशी HSVtk जनुकाच्या सहाय्याने व्हिव्होमध्ये सक्रिय प्रवर्तकाच्या अंतर्गत संक्रमित केल्या जातात आणि काही दिवसांनंतर, गॅन्सिक्लोव्हिर प्रशासित केले जाते, जे व्हायरल थायमिडीन किनेज ते मोनोफॉस्फेट आणि नंतर यजमान सेल किनेसद्वारे ट्रायफॉस्फेटमध्ये फॉस्फोरिलेटेड केले जाते. हे व्युत्पन्न डीएनए पॉलिमरेझला प्रतिबंधित करते आणि डीएनए संश्लेषण थांबवते, ज्यामुळे वाढणाऱ्या पेशींचा मृत्यू होतो. इंटरसेल्युलर संपर्कांद्वारे, गॅन्सिक्लोव्हिर ट्रायफॉस्फेट शेजारच्या अपरिवर्तित पेशींमध्ये प्रवेश करतो आणि अशा प्रकारे अतिरिक्त दहा ट्यूमर पेशी नष्ट करतो.

स्वतःच्या पेशीच्या मृत्यूस कारणीभूत असलेल्या जनुकाला "आत्महत्या" जनुक म्हणतात (आमच्या बाबतीत ते थायमिडीन किनेज जनुक आहे), आणि "प्रॉड्रग" हा शब्द औषधाच्या निष्क्रिय स्वरूपाचा संदर्भ देतो (या प्रकरणात ते आहे. ganciclovir). हा दृष्टीकोन जीन अॅक्टिव्हेटर-प्रोड्रग संयोजनाचे इतर प्रकार तयार करण्यासाठी वापरला गेला आहे, परंतु GCV-HSVtk प्रणालीची परिणामकारकता अनेक प्रीक्लिनिकल चाचण्यांमध्ये आधीच सिद्ध झाली आहे.

जीन थेरपी ही एक नवीन वैद्यकीय शिस्त आहे, ज्याची निर्मिती आपल्या डोळ्यांसमोर होत आहे. काही यश आणि आशादायक शक्यता असूनही, अनेक आव्हाने आहेत ज्यांवर मात करणे बाकी आहे.

काही समस्या औषध आणि आण्विक जीवशास्त्राच्या पलीकडे आहेत. हे नैतिक आणि राजकीय मुद्दे आहेत. आपण आधीच लक्षात घेतल्याप्रमाणे, आम्ही केवळ सोमाटिक पेशींसाठी अनुवांशिक थेरपीच्या पद्धतींचा विचार केला. याचा अर्थ असा की केलेल्या दुरुस्त्या एका विशिष्ट अवयव किंवा ऊतीपुरती मर्यादित आहेत, "दुरुस्त" जनुक पुढील पिढीकडे जाणार नाहीत. जंतू पेशी (शुक्राणू किंवा अंडी) किंवा फलित पेशींच्या जीनोटाइपमधील बदल पिढ्यानपिढ्या पुढे जाणे आवश्यक आहे.

सध्या, सोमाटिक पेशींच्या जनुक थेरपीला वैद्यकीय हस्तक्षेपाची मानक पद्धत म्हणून वर्गीकृत केले जाते. याउलट, जर्म सेल जीन थेरपी ही तांत्रिकदृष्ट्या खूपच गुंतागुंतीची, समस्याप्रधान आणि अप्रत्याशित आहे. त्यामुळे या क्षेत्रातील प्रयोगांना अनेक देशांमध्ये बंदी आहे.

80 च्या शेवटी. युनायटेड स्टेट्समध्ये, सोमाटिक सेल अनुवांशिक थेरपीच्या क्षेत्रात नियमांची स्थापना करण्यात आली आहे. ते रुग्णांची निःपक्षपाती आणि प्रातिनिधिक निवड आणि त्यांची जागरूकता (उपचार किती धोकादायक आहे, त्याच्या यशाची संभाव्यता काय आहे, इ.), रुग्ण आणि केलेल्या अभ्यासांबद्दल माहितीची गोपनीयता, हानी न करता सर्व हाताळणी योग्यरित्या अंमलात आणण्याची हमी देतात. , दोन्ही विशिष्ट रुग्णांसाठी आणि सर्वसाधारणपणे मानवी लोकसंख्येसाठी.

सोमॅटिक पेशींच्या उपचारांमुळे स्थितीत सुधारणा होते आणि अनुवांशिक रोग असलेल्या रुग्णांचे आयुष्य लक्षणीय वाढवते, परंतु "सुधारित" जनुक वारशाने मिळत नाही, असे मानले जाते की यामुळे अनुवांशिक रोगांचे संचय होऊ शकते. मानवी लोकसंख्या. तथापि, लोकसंख्येच्या अनुवांशिकतेनुसार, प्रभावी उपचारांच्या परिणामी हानिकारक जनुकांच्या वारंवारतेत लक्षणीय वाढ होण्यास हजारो वर्षे लागतात.

वर. व्होइनोव, टी.जी. व्होलोव्हा

न्यूक्लियोटाइड्स- न्यूक्लियोसाइड्सचे फॉस्फोरिक एस्टर, न्यूक्लियोसाइड फॉस्फेट्स. मुक्त न्यूक्लियोटाइड्स, विशेषत: एटीपी, सीएएमपी, एडीपी, ऊर्जा आणि माहितीच्या इंट्रासेल्युलर प्रक्रियांमध्ये महत्त्वाची भूमिका बजावतात आणि ते न्यूक्लिक अॅसिड आणि अनेक कोएन्झाइमचे घटक देखील असतात.

दोन न्यूक्लियोटाइड रेणू असलेल्या संयुगे म्हणतात dinucleotides, तीन पैकी trinucleotides, थोड्या संख्येतून - oligonucleotides, आणि अनेकांपैकी polynucleotides, किंवा न्यूक्लिक अॅसिड.

मॉर्फोलिनो(इंग्रजी) मॉर्फोलिनो) हे सिंथेटिक ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स आहेत जे आण्विक जीवशास्त्रामध्ये जनुक अभिव्यक्ती बदलण्यासाठी वापरले जातात. अँटिसेन्स ऑलिगोमेरिक मॉर्फोलिनोचा वापर इतर रेणूंना विशिष्ट न्यूक्लिक अॅसिड अनुक्रमांमध्ये प्रवेश करण्यापासून रोखण्यासाठी केला जातो. मॉर्फोलिन ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स आरएनए रेणूंच्या पृष्ठभागावर लहान सिंगल-स्ट्रँडेड प्रदेश (सुमारे 25 न्यूक्लियोटाइड्स) अवरोधित करतात.

अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सक्रोमोसोममधील डीएनए न्यूक्लियोटाइड्सचे लांब अनुक्रम आहेत. जर एखादे जनुक व्यक्त करायचे असेल, तर या जनुकाच्या प्रतिलेखनाची प्रक्रिया सुरू केली जाते, परिणामी mRNA संश्लेषित होते.

सिंथेटिक अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचा उपचारात्मक प्रभाव लक्ष्य mRNA च्या प्रवेशयोग्य साइटसह त्यांच्या संकरीकरणाच्या विशिष्टतेवर, सेल्युलर न्यूक्लीजच्या क्रियेला प्रतिकार आणि सेलमध्ये वितरण प्रणालीची उपस्थिती यावर अवलंबून असतो.

आजपर्यंत, जीनोमच्या विशिष्ट क्षेत्रांच्या क्रियाकलापांचे सर्वात प्रभावी लक्ष्यित शटडाउन अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स (एओएन) द्वारे केले जाते. AON वापरण्याचे धोरण लक्ष्य mRNA सह DNA रेणूंच्या वॉटसन-क्रिक परस्परसंवादावर आधारित आहे. DNA-mRNA heteroduplex च्या निर्मितीमुळे M-RNA निष्क्रिय होते आणि त्यानंतर प्रथिने संश्लेषण बंद होते.

दुस-या शब्दात, अँटिसेन्स मेकॅनिझम म्हणजे लक्ष्यित आरएनएच्या पूरक साइटवर ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडचे बंधन आणि या आरएनएच्या इंट्रासेल्युलर फंक्शनचे दडपण.

तथापि, हे साधे आणि आकर्षक सैद्धांतिक मॉडेल वास्तविकतेत अधिक क्लिष्ट असल्याचे दिसून आले. तीन प्रकारचे अँटिसेन्स रेणू ज्ञात आहेत: तुलनेने लहान सिंथेटिक ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स; antisense RNA, उत्प्रेरक क्रियाकलाप असलेल्या, antisense ribozyme जनुकाद्वारे संक्रमणानंतर सेलमध्ये व्यक्त केले जाते.

अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सवर आधारित औषधांची निर्मिती ही औषधांच्या विकासातील नवीन दिशांपैकी एक आहे. हे तंत्रज्ञान संशोधकाला सर्वोच्च विशिष्टतेसह सेलमधील जवळजवळ कोणत्याही प्रक्रियेवर थेट परिणाम करण्याची संधी देते. एखादे विशिष्ट प्रथिन कर्करोगाच्या पेशींच्या वाढीस चालना देत असेल, तर योग्य अँटीसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड वापरून, हे प्रथिन पेशीमध्ये पुन्हा कधीच संश्लेषित होणार नाही याची खात्री करता येते. अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स इतके विशिष्ट आहेत की सेलमधील इतर कोणत्याही प्रथिनांवर परिणाम होणे जवळजवळ अशक्य आहे. या विशिष्टतेमुळे कर्करोगाच्या पारंपारिक उपचारांमध्ये अनेकदा दिसणारे दुष्परिणाम कमी होतील.

निष्क्रियतेची यंत्रणा अद्याप पूर्णपणे स्पष्ट नाही. परंतु कदाचित हे या वस्तुस्थितीमुळे आहे की दुहेरी-अडकलेले आरएनए सामान्य पेशींचे वैशिष्ट्यहीन आहे. प्रत्येक प्रथिनांच्या संश्लेषणासाठी सिग्नल एकच mRNA असल्याने, विशिष्ट प्रथिनेसाठी असा सिग्नल बंद केला जाऊ शकतो किंवा अशा पूरक क्रमाचा वापर करून "नॉक आउट" केला जाऊ शकतो.

अंजीर.4 अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइडच्या ऑपरेशनची यंत्रणा

अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सवर आधारित औषधांसह उपचारांची एक महत्त्वाची समस्या म्हणजे सेल एन्झाईम्स - न्यूक्लीजद्वारे अशा औषधांचा नाश करणे. ऑलिगोडिओक्सिन्युक्लियोटाइड्स न्यूक्लीजद्वारे खराब होतात, म्हणून नंतरच्या क्रियेपासून त्यांचे संरक्षण करणे खूप महत्वाचे आहे जेणेकरून ते लक्ष्यासह संकरित करण्याची क्षमता गमावू नये. हे करण्यासाठी, सेल्युलर प्रथिनांचे इलेक्ट्रोफोरेटिक पृथक्करण केले जाते, ज्यामध्ये भाषांतर दरम्यान किरणोत्सर्गी लेबल समाविष्ट केले जाते आणि रेडिओऑटोग्राफीचा वापर करून, "एंटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सपैकी कोणत्या विशिष्ट प्रोटीनचे संश्लेषण कमी होते हे निर्धारित केले जाते. विविध आरएनए प्रतिलेखांमध्ये सर्वोत्तम लक्ष्य साइट निवडण्यासाठी कोणतेही सामान्य निकष नाहीत. ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स जे 5'- किंवा 3'-कॉनप mRNA, एक्सॉन आणि इंट्रॉन सीमा आणि अगदी दुहेरी-अडकलेल्या प्रदेशांना पूरक आहेत ते प्रभावी असू शकतात. ऑलिगोडिओक्सिन्युक्लियोटाइड्स इंट्रासेल्युलर न्यूक्लीजद्वारे खराब होतात; म्हणून, नंतरच्या क्रियेपासून त्यांचे संरक्षण करणे महत्वाचे आहे जेणेकरून ते लक्ष्यासह संकरित करण्याची क्षमता गमावू नये. यासाठी, पायरीमिडीन बेस आणि डीऑक्सीरिबोजमध्ये विशिष्ट पद्धतीने बदल करता येतात.

अशाप्रकारे, सध्या मोठ्या प्रमाणावर वापरल्या जाणार्‍या "अँटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्समध्ये, फॉस्फोडीस्टर बाँडचा मुक्त ऑक्सिजन अणू सल्फो गटाने बदलला जातो, परिणामी थायोफॉस्फेट बाँड तयार होतो. अशाप्रकारे सुधारित ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स पाण्यात विरघळतात, नकारात्मक शुल्क घेतात आणि एंडोन्यूक्लीजद्वारे क्लीव्ह होत नाहीत. लक्ष्य साइटसह संकरित केल्यावर, ते RNA-DNA डुप्लेक्स तयार करतात जे रिबोन्यूक्लीज (RNase) H सक्रिय करतात, एक अंतर्जात एन्झाइम जो संकरित रेणूमध्ये mRNA क्लीव्ह करतो. अशा ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स, पहिल्या पिढीतील औषधांच्या पहिल्या क्लिनिकल चाचण्या केल्या गेल्या आहेत. सायटोमेगॅलव्हायरसचे आरएनए, मानवी इम्युनोडेफिशियन्सी व्हायरस, तसेच कर्करोग, आतड्यांसंबंधी रोग आणि इतर रोगांच्या विकासासाठी जबाबदार जनुकांचे एमआरएनए हे लक्ष्य आहेत.

फॉस्फोरामाइड आणि पॉलिमाइड (पेप्टाइड) बंधांसह संश्लेषित "अँटीसेन्स" ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स. असे रेणू न्यूक्लीजच्या क्रियेला खूप प्रतिरोधक असतात. साखरेच्या अवशेषांच्या 2' कार्बन अणूला जोडलेले रासायनिक गट आणि पायरीमिडीन्सचे C-5 अणू देखील अँटिसेन्स ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सचे संरक्षण करतात आणि लक्ष्य साइटवर त्यांचे बंधन सुलभ करतात. ). या आणि इतर बदलांचे सर्व फायदे आता गहनपणे अभ्यासले जात आहेत.