glutatión- podľa chemickej štruktúry ide o tripeptid získaný v organizme z cysteínu, kyseliny glutámovej a glycínu. Je to jedna z pomerne bežných látok v našom tele. Funguje ako silný antioxidant a detoxikátor, ďalej premieňa malígne bunky na zdravé.

Väčšina glutatiónu sa nachádza v pečeni (časť sa uvoľňuje priamo do krvného obehu), ako aj v pľúcach a gastrointestinálnom trakte. Je nevyhnutný pre metabolizmus uhľohydrátov a tiež spomaľuje starnutie tým, že ovplyvňuje metabolizmus lipidov a zabraňuje vzniku aterosklerózy. Koncentrácia glutatión v starých bunkách je o 20-34% nižšia ako v mladých. Od úrovne glutatión v tele vekom ubúda, hromadia sa toxíny, čo možno spôsobuje proces starnutia ako takého.

Nedostatok glutatiónu primárne ovplyvňuje, čo spôsobuje zhoršenú koordináciu, myšlienkové procesy a triašku. Množstvo glutatiónu v tele s vekom klesá. V tomto smere by ho starší ľudia mali dostávať dodatočne. Výhodnejšie je však užívanie výživových doplnkov s obsahom cysteínu, kyseliny glutámovej a glycínu – teda látok, z ktorých sa glutatión syntetizuje. Najúčinnejší je príjem N-acetylcysteínu.

Ako antioxidant glutatión, prirodzene ničí škodlivé voľné radikály a ako detoxikačný prostriedok pomáha odstraňovať ťažké kovy a iné toxíny z tela. Čím viac toxínov prehltnete, tým intenzívnejšie musí pracovať vaša pečeň, prečisťovať telo. glutatión chráni pečeň pred poškodením alkoholom a inými toxínmi. Tvrdí to množstvo štúdií glutatión dokonca schopný zničiť rakovinu pečene.

Autor knihy zase tvrdí, že pravidelný príjem glutatión môže zastaviť alebo výrazne oddialiť proces starnutia. Autor prekladu opäť trvá na pravidelnom prijímaní.

Nakoniec štúdie ukázali, že glutatión poskytuje zlepšenú cerebrálnu cirkuláciu a zásobovanie, čo v kombinácii s jeho schopnosťou chrániť mozgové bunky pred chemickým útokom skutočne zlepšuje mentálne funkcie.

Donedávna existoval len jeden spôsob, ako zvýšiť úroveň glutatión v tele je príjem glutatión. Teraz si môžete vziať N-acetylcysteín,čo je prekurzor ( Prekurzory sú látky (medziprodukty), z ktorých sa získavajú akékoľvek konečné (cieľové) látky.) pre dve najdôležitejšie látky pre telo naraz: glutatión a glutatión peroxidáza. Výskum ukázal, že N-acetylcysteín efektívnejší zdroj glutatión než on sám glutatión, pretože viac ako polovica glutatión perorálne užívaný je zničený v tráviacom trakte.

Štúdia publikovaná v Proceedins of the National Academy of Science uvádza, že oboje glutatión, a N-acetylcysteín majú silný antivírusový účinok a sú schopné blokovať až 90% šírenia vírusu AIDS v tele. Antivírusový účinok je priamo úmerný prijatej dávke.

4,7 z 5

Acetylcysteín, tiež známy ako N-acetylcysteín alebo N-acetyl-L-cysteín, je mukolytické činidlo určené na uvoľnenie viskózneho hustého spúta pri mnohých respiračných stavoch. Acetylcysteín sa tiež používa na liečbu stavov vyplývajúcich z predávkovania paracetamolom. Okrem toho je súčasťou očných kvapiek látka acetylcysteín.

Chemický vzorec acetylcysteínu je: C5H9NO3S. Je to kryštalický prášok bielej alebo mierne žltkastej farby so špecifickým jemným zápachom. Prášok je vysoko rozpustný v alkohole a vode.

Liečivo sa vyrába v mnohých krajinách v rôznych dávkových formách:

• vo forme injekčného roztoku;
• vo forme prášku na prípravu roztoku na orálne podávanie;
• vo forme šumivých tabliet;
• vo forme roztokov na inhaláciu;
• vo forme očných roztokov.

V súlade s formou uvoľňovania môže byť použitie acetylcysteínu intravenózne (injekcie), perorálne (vo vnútri), lokálne (inhalácia, očné kvapky).

Prášky na prípravu perorálnych roztokov a šumivých tabliet vo väčšine krajín vrátane Ruska sa predávajú v lekárňach bez lekárskeho predpisu. Prípravky na intravenózne podanie a inhaláciu sa predávajú prísne podľa predpisov.

Mechanizmus účinku acetylcysteínu

Acetylcysteín (alebo N-acetylcysteín), vďaka prítomnosti sulfhydrylovej skupiny vo svojej molekule, štiepi disulfidové väzby, ktoré viažu mukoproteíny - hlienové proteíny. Pod vplyvom lieku sa spútum stáva menej hustým a zväčšuje sa, je ľahšie vykašliavať. V dôsledku zvýšenia objemu spúta a zvýšenia rýchlosti jeho vypúšťania sa zvyšuje detoxikačný účinok, pretože spúta obsahuje značné množstvo toxických odpadových produktov patogénov.

Sulfhydrylová skupina acetylcysteínu reaguje s niektorými intracelulárnymi receptormi, čím stimuluje produkciu glutatiónu. Glutatión je zase schopný potlačiť niektoré oxidačné reakcie lipidov, ktoré vedú k poškodeniu buniek. Acetylcysteín má teda aj antioxidačné vlastnosti.

Liečivo sa rýchlo a dobre vstrebáva v čreve. Jeho maximálna koncentrácia v krvnej plazme sa pozoruje 2-4 hodiny po požití. Acetylcysteín sa metabolizuje hlavne v pečeni.

Indikácie pre použitie acetylcysteínu

Najrozšírenejšie perorálne formy acetylcysteínu ako mukolytického činidla uľahčenie vykašliavania spúta. Podľa pokynov je acetylcysteín predpísaný pre nasledujúce ochorenia:

• akútna a chronická bronchitída;
• tracheitída bakteriálneho alebo vírusového pôvodu;
• zápal pľúc;
• bronchiektázie;
• atelektáza (pád, strata vzdušnosti) pľúc;
• bronchiálna astma;
• zápal prínosových dutín;
• cystická fibróza (ako súčasť komplexnej liečby).

Ako je uvedené v pokynoch, acetylcysteín je kontraindikovaný v prípade precitlivenosti osoby na tento liek, s pľúcnym krvácaním a hemoptýzou, s exacerbáciou peptického vredu.

Relatívne kontraindikácie pri užívaní acetylcysteínu sú nedostatočná funkcia a závažné poškodenie pečene a obličiek.

Pre deti v dojčenskom veku sa liek zvyčajne nepredpisuje.

Tehotným ženám sa acetylcysteín predpisuje iba vtedy, ak prínos pre matku ďaleko prevyšuje riziko vývojových patológií pre plod. Počas dojčenia je povolené užívať acetylcysteín.

Ako vedľajšie účinky sú zriedkavo zaznamenané alergické reakcie, nevoľnosť a vracanie, ťažkosť v žalúdku, stomatitída a bronchospazmus.

Dávkovanie lieku

Dávky lieku vypočíta lekár individuálne. Toto zohľadňuje nielen závažnosť klinických prejavov, ale aj vek a telesnú hmotnosť pacienta.

Existuje však všeobecná schéma, ktorá vyzerá takto:

• deťom vo veku 1-2 rokov sa predpisuje liek 100 mg 1-krát denne
• pacienti vo veku 2-6 rokov, podľa pokynov, sa acetylcysteín užíva dvakrát denne, 200 mg;
• deti staršie ako 6 rokov a dospelí užívajú liek 2-3 krát denne, 200 mg.

Pri akútnych ochoreniach bez komplikácií je dĺžka liečby zvyčajne 5-7 dní. Pri chronických ochoreniach sa liek užíva dlhodobo, v kurzoch. Dĺžku priebehu liečby určuje lekár.

Použitie acetylcysteínu pri iných ochoreniach

Pri mnohých ochoreniach sa acetylcysteín alebo N-acetylcysteín široko používa vo forme intravenóznych injekcií.. N-acetylcysteín vo forme roztokov na intravenózne podanie sa úspešne používa na liečbu predávkovania paracetamolom. Okrem toho je liek široko používaný v psychiatrii na liečbu rôznych typov duševných porúch, najmä schizofrénie, autizmu, bipolárnej poruchy a rôznych mánií. Droga sa tiež používa pri liečbe závislosti od niektorých drog a nadmerného gamblingu.

N-acetylcysteín je účinný pri liečbe stredne ťažkých a ľahkých traumatických poranení mozgu, poškodenia mozgu po ischemickej cievnej mozgovej príhode. V týchto prípadoch sa má liek podať čo najskôr po poranení alebo diagnóze mŕtvice.

Interakcia acetylcysteínu s inými liekmi

Acetylcysteín spomaľuje vstrebávanie mnohých antibiotík, preto by sa tento liek nemal užívať skôr ako 2 hodiny po užití antibiotika.

Použitie acetylcysteínu znižuje toxický účinok paracetamolu na pečeň.

Acetylcysteín zvyšuje účinok bronchodilatancií. A tiež - vazodilatačný účinok nitroglycerínu.

Farmakologická skupina: mukolytické lieky
Systematický (IUPAC) názov: kyselina (2R)-2-acetamido-3-sulfanylproová
Obchodné názvy: Acetadote, Fluimucil, Mucomyst, Parvolex
Aplikácia: orálna, injekčná, inhalačná
Biologická dostupnosť 4-10% (orálne)
Väzba na bielkoviny 80-83%
Metabolizmus: pečeň
Polčas rozpadu 5,6 hodiny
Vylučovanie: obličky (22 %), stolica (3 %)
Vzorec C5H9NO3S
Mol. hmotnosť 163,195

Acetylcysteín (ACC/Fluimucil), tiež známy ako N-acetylcysteín alebo N-acetyl-L-cysteín (NAC), je farmaceutický liek a doplnok stravy používaný predovšetkým ako mukolytické činidlo a na liečbu ( acetaminofén) predávkovanie. Liek sa tiež používa na saturáciu síranom pri chorobách, ako je autizmus, s vyčerpaním hladín a pridružených aminokyselín obsahujúcich síru. Acetylcysteín je derivát; acetylová skupina pripojená k atómu dusíka. Táto zlúčenina sa predáva ako doplnok stravy, ktorý podľa výrobcov pôsobí ako antioxidant a ochranca pečene. Droga sa používa ako prostriedok na potlačenie kašľa, pretože ruší disulfidové väzby v hliene a riedi ich, čím uľahčuje vykašliavanie. Prerušenie disulfidových väzieb slúži na zriedenie zásoby abnormálne hustého hlienu u pacientov s cystickou a pľúcnou fibrózou. Tiež známy ako: N-acetyl-L-cysteín, NAC, N-Ac
Prijaté proti:

Závislosti

Nie je kompatibilné s:

Aktívne uhlie (pretože to môže znížiť absorpciu N-acetylcysteínu)

Opis účinku acetylcysteínu (ACC / Fluimucil)

Acetylcysteín (ACC / Fluimucil) je derivát N-acetyl prírodnej aminokyseliny. Látka má veľmi silný a rýchlo pôsobiaci mukolytický účinok. Vďaka voľným sulfhydrylovým skupinám môže acetylcysteín štiepiť disulfidové väzby v glykoproteínovom hliene so súčasnou tvorbou hydrofilných komplexov, čo vedie k skvapalneniu tvorby a zníženiu viskozity hlienu v bronchiálnych sekrétoch. Acetylcysteín vykazuje antioxidačný účinok tým, že neutralizuje voľné radikály v zapálených alebo hypoxických bunkách. Acetylcysteín pôsobí ako protijed pri otrave alebo predávkovaní, pretože inaktivuje toxické metabolity a umožňuje udržiavať správnu hladinu, čím chráni pečeň pred poškodením. Acetylcysteín pôsobí najúčinnejšie do 8 hodín po otrave alebo predávkovaní; popisujú sa však prípady účinnosti lieku a pri otravách trvajúcich okolo 36 hodín. Acetylcysteín sa dobre vstrebáva z tráviaceho traktu, maximálnu koncentráciu v dýchacom trakte dosahuje po 0,5-3 hodinách. Metabolizuje sa hlavne v pečeni a vylučuje sa močom.

Lekárske použitie acetylcysteínu (ACC/Fluimucil)

Predávkovanie paracetamolom

Intravenózny acetylcysteín sa používa na liečbu predávkovania (acetaminofénom). Keď sa užíva vo veľkých množstvách, v tele sa hromadí malý metabolit nazývaný N-acetyl-para-benzochinónimín (NAPQI). Zvyčajne sa kombinuje s, ale pri nadmernom používaní sú telesné zásoby nedostatočné na inaktiváciu toxického NAPQI. Tento metabolit môže voľne reagovať s kľúčovými pečeňovými enzýmami, čím poškodzuje hepatocyty. To môže viesť k vážnemu poškodeniu pečene a dokonca k smrti v dôsledku akútneho zlyhania pečene. Acetylcysteín pôsobí tak, že zvyšuje telesné zásoby a spolu s tým sa priamo viaže na toxické metabolity. Tieto účinky slúžia na ochranu hepatocytov v pečeni pred toxicitou NAPQI. Aj keď je acetylcysteín rovnako účinný, keď sa podáva intravenózne alebo perorálne, nemusí byť dobre tolerovaný, keď sa užíva perorálne kvôli zlej perorálnej biologickej dostupnosti (pretože sú potrebné veľmi vysoké dávky lieku), kvôli jeho veľmi nepríjemnej chuti a zápachu. nežiaduce účinky, najmä nevoľnosť a vracanie. V predchádzajúcich štúdiách farmakokinetiky acetylcysteínu sa acetylácia nepovažovala za dôvod nízkej biologickej dostupnosti acetylcysteínu. Perorálny acetylcysteín má rovnakú biologickú dostupnosť ako prekurzory. Avšak 3% až 6% ľudí, ktorí užívajú intravenózne acetylcysteín, má vážne alergické reakcie podobné anafylaxii, ktoré môžu zahŕňať ťažkosti s dýchaním (v dôsledku bronchospazmu), nízky krvný tlak, vyrážku, angioedém a niekedy nevoľnosť a vracanie. Opakované dávky intravenózneho acetylcysteínu spôsobia progresívne zhoršenie týchto alergických reakcií. Štúdie ukázali, že tieto reakcie podobné anafylaxii sa vyskytujú najčastejšie u ľudí užívajúcich intravenózne acetylcysteín, napriek tomu, že sérové ​​hladiny nie sú dostatočne vysoké na to, aby sa považovali za toxické. V niektorých krajinách neexistujú žiadne špeciálne intravenózne prípravky na liečbu predávkovania. V týchto prípadoch sa liek na inhaláciu môže použiť intravenózne.

Mukolytická terapia

Acetylcysteín sa používa ako inhalant pre svoje mukolytické pôsobenie (rozpúšťanie hlienov) ako adjuvans pri ochoreniach dýchacích ciest s nadmernou tvorbou hlienu. Medzi takéto ochorenia patrí emfyzém, bronchitída, tuberkulóza, bronchiektázia, amyloidóza, pneumónia, cystická fibróza, chronická obštrukčná choroba pľúc a pľúcna fibróza. Liek sa používa aj po operáciách, na vykonávanie diagnostiky a v starostlivosti o pacientov s tracheotómiou. Pri cystickej fibróze je liek neúčinný. Nedávna práca publikovaná v Proceedings of the National Academy of Sciences však uvádza, že vysoké perorálne dávky acetylcysteínu modulujú zápal pri cystickej fibróze a že liek má potenciál pôsobiť proti redoxnej a zápalovej nerovnováhe pri cystickej fibróze. Perorálny acetylcysteín sa môže použiť aj ako mukolytické činidlo v menej závažných prípadoch. Acetylcysteín pôsobí tak, že znižuje viskozitu hlienu štiepením disulfidových väzieb, ktoré viažu proteíny prítomné v hliene (mukoproteíny).

Nefroprotektívny liek

Perorálny acetylcysteín sa používa na prevenciu rádioopaknej nefropatie (forma akútneho zlyhania obličiek). Niektoré štúdie ukazujú, že predchádzajúce podanie acetylcysteínu významne znižuje rádiokontrastnú nefropatiu, zatiaľ čo iné spochybňujú jeho účinnosť. Dospelo sa k záveru, že "N-acetylcysteín podávaný intravenózne a perorálne môže zabrániť nefropatii s účinkom závislým od dávky u pacientov s primárnou angioplastikou a môže zlepšiť výsledok ochorenia." s minimálnymi vedľajšími účinkami." Klinická štúdia z roku 2010 však zistila, že acetylcysteín je neúčinný pri prevencii nefropatie vyvolanej kontrastom. Táto štúdia s 2308 pacientmi zistila, že acetylcysteín nebol lepší ako placebo; bez ohľadu na to, či bol použitý acetylcysteín alebo placebo, výskyt nefropatie bol 13%. Acetylcysteín je stále široko používaný u ľudí so zlyhaním obličiek na prevenciu akútneho zlyhania obličiek.

Liečba hemoragickej cystitídy vyvolanej cyklofosfamidom

Acetylcysteín sa používa na liečbu hemoragickej cystitídy vyvolanej cyklofosfamidom, hoci v tomto prípade sa zvyčajne uprednostňuje mesna, pretože acetylcysteín môže znížiť účinnosť cyklofosfamidu.

Mikrobiologické využitie

Acetylcysteín sa môže použiť v Petrovovej metóde, t.j. pri skvapalňovaní a dekontaminácii spúta, pri príprave na diagnózu tuberkulózy. Vykazuje tiež významnú antivírusovú aktivitu proti vírusom chrípky A.

Kolagénové ochorenie pľúc

Acetylcysteín sa používa na liečbu intersticiálnej choroby pľúc, aby sa zabránilo progresii choroby.

Psychiatria

Acetylcysteín sa úspešne používa na liečbu rôznych psychiatrických porúch. Používa sa najmä na liečbu schizofrénie, bipolárnej poruchy, trichotilománie, dermatillománie, autizmu, obsedantno-kompulzívnej poruchy, drogovej závislosti (vrátane nikotínu, kanabisu, metamfetamínu, kokaínu atď.) a závislosti od hazardných hier. Schopnosť acetylcysteínu potláčať apoptózu indukovanú p53 a podporovať autofágiu môže byť faktorom jeho účinnosti pri liečbe neuropsychiatrických porúch.

syndróm polycystických vaječníkov

V malej prospektívnej štúdii porovnávajúcej acetylcysteín s metformínom (čo je štandardná liečba PCOS) sa ukázalo, že obe liečby viedli k významnému zníženiu indexu telesnej hmotnosti, hirsutizmu, indexu HOMA, voľného testosterónu a menštruačnej nepravidelnosti v porovnaní s východiskovou hodnotou. a oba postupy boli rovnako účinné.

Traumatické zranenie mozgu

Acetylcysteín sa ukázal ako účinný pri liečbe mierneho až stredného traumatického poškodenia mozgu, najmä pri znižovaní straty neurónov a pri znižovaní kognitívnych a neurologických symptómov, keď sa podáva bezprostredne po poranení.

ischémia

Acetylcysteín znižuje poškodenie spojené s ischemickým poškodením mozgu, keď sa podáva krátko po mŕtvici.

Mechanizmus účinku acetylcysteínu (ACC / Fluimucil)

Acetylcysteín slúži ako prekurzor, ktorý je biologickým antioxidačným prekurzorom, a preto sa využitie acetylcysteínu dopĺňa. L-cysteín tiež slúži ako cystínový prekurzor a ako substrát pre cystín-glutamátový antiporter v astrocytoch, čím zvyšuje uvoľňovanie glutamátu do extracelulárneho priestoru. Tento glutamát zase pôsobí na receptory mGluR2/3 a pri vyšších dávkach acetylcysteínu na mGluR5. tiež moduluje NMDA receptor pôsobením na redoxné miesto. Acetylcysteín má tiež určitú protizápalovú aktivitu, pravdepodobne prostredníctvom inhibície NF-kB a modulácie syntézy cytokínov. Môže tiež podporovať uvoľňovanie dopamínu v určitých oblastiach mozgu.

Komplexotvorné činidlo

Chémia

Acetylcysteín je N-acetylový derivát | |aminokyseliny]] a je prekurzorom pri tvorbe antioxidantu v tele. Tiolová (sulfhydrylová) skupina má antioxidačný účinok a dokáže redukovať voľné radikály.

Zdroje a štruktúra

biologický význam

Cysteín je limitujúcim faktorom pri syntéze glutatiónu.

Úprava a znenie

N-acetylcysteín je podobný L-cysteínu (je to jeho acetylovaná forma) a samotnému glutatiónovému enzýmu (je prekurzorom syntézy glutatiónu); boli vykonané štúdie o použití L-cysteínu a glutatiónu ako doplnku. Glutatión má obmedzené terapeutické využitie, pretože sa rýchlo hydrolyzuje v črevnom trakte, takže zvýšenie hladín glutatiónu pri perorálnom užívaní ako doplnok nie je klinicky významné.

Farmakológia

Sérum

200-400 mg N-acetylcholínu dosiahne maximálnu koncentráciu 350-400 μg / ml pri Tmax - 1-2 hodiny.

Vylučovanie z tela

Až 70 % N-acetylcysteínu sa nevylučuje močom. Hlavným renálnym metabolitom N-acetylcysteínu užívaným perorálne je močový sulfát.

Bioakumulácia minerálov

U hlodavcov došlo k zníženiu akumulácie tkaniva a zvýšenému vylučovaniu olova do moču. U ľudí bol zaznamenaný pokles obsahu olova v krvi. N-acetylcysteín má chelatačný účinok. Olovo je ťažký minerál, ktorý má toxický účinok a blokuje aktivitu glutatiónu. Toxický účinok olova priamo závisí od vyčerpania zásob glutatiónu v bunkách; je to kvôli vysokej afinite olova k tiolovej skupine. Predpokladá sa, že cysteín (prostredníctvom NAC) zmierňuje toxické účinky olova poskytnutím substrátu a znížením interakcie olova s ​​tiolovými skupinami. Výsledkom štúdií na zvieratách (na základe krvných biomarkerov a histologického vyšetrenia) bol zistený priaznivý účinok N-acetylcysteínu proti účinkom olova na tkanivá obličiek, mozgu a pečene. Predpokladá sa, že N-acetylcysteín zmierňuje toxické účinky olova, ktoré má vysokú afinitu k tiolovým skupinám, ktoré normálne znižujú koncentrácie glutatiónu v tele; poloha vonkajších tiolov môže udržiavať koncentráciu glutatiónu. Suplementácia 200-800 mg (400-800 mg dávka rozdelená do dvoch dní) N-acetylcysteínu počas 12 týždňov pracovníkmi, ktorí sú silne vystavení olovu, je schopná znížiť koncentrácie olova v krvi o 4,72 ± 7,08 % (žiadna dávka- závislosť).objavený). Pri užívaní N-acetylcysteínu (200-800 mg denne počas viac ako 12 týždňov) sa erytrocytový lipofuscín zníži o 11 %. To je však sekundárne pri znižovaní toxicity olova (zosieťuje v dôsledku oxidačného stresu a zvyšuje lipofucín). Pri perorálnom podaní v štandardnej dávke je schopný mať ochranný účinok proti toxicite olova, pravdepodobne znižuje koncentráciu olova v organizme a tým spôsobené následky.

Neurológia

Kinetika

N-acetylcysteín zvyšuje koncentráciu glutatiónu v nervovom tkanive hlodavcov, keď sa užíva perorálne, čo naznačuje, že NAC je schopný prekonať hematoencefalickú bariéru. Pri užívaní L-cysteínu sa takéto zvýšenie koncentrácie glutatiónu nepozoruje, pretože acetylácia N-acetylcysteínu spomaľuje jeho metabolizmus, predpokladá sa, že metabolizmus prvého prechodu obmedzuje distribúciu cysteínu v tele.

Glutamátergná neurotransmisia

Cystín-glutamátový antiport v astrocytoch sprostredkúva hladiny synaptického glutamátu a tiež vychytáva cystín (cysteínový dimér) výmenou za uvoľňovanie glutamátu, čo zahŕňa inhibičné metabotropné glutamátové receptory (skupina II) na glutamátergických nervových zakončeniach a znižuje následné uvoľňovanie synaptického glutamátu. Predpokladá sa, že príjem N-acetylcystienu poskytuje odpoveď substrátu na zníženie stimulácie glutamátergického systému. Pri užívaní liekov môže byť antiport znížený a jeho funkcie sú narušené; N-acetylcystín môže zastaviť pokles pozorovaný pri liekoch a zastaviť autoreguláciu transportéra. Predpokladá sa, že cysteín môže znížiť glutamátergickú neurotransmisiu znížením neurónového uvoľňovania glutamátu do synapsie (primárnym účinkom je podpora jeho uvoľňovania z astrocytov). Počas štúdie užívali závislí od kokaínu 2 400 mg N-acetylcysteínu. Hodnoty vykonané o hodinu neskôr (pomocou MRI a MRS) ukázali, že vysoké hladiny glutamátu u drogovo závislých (ktoré boli vyššie ako u zdravých ľudí) sa vrátili do normálu. Užívanie N-acetylcysteínu môže znížiť hladiny glutamátu (u ľudí s vysokými hladinami) jednu hodinu po požití. Oxidovaný a redukovaný glutatión je ligandom pre NMDA a AMPA receptory. Inhibujú aktivitu ligandov glutamátových väzbových miest a tiež zvyšujú väzbu antagonistu MK-801 (na NMDA receptory). Ovplyvňuje neurotransmisiu na úrovni receptora, znižuje signalizačnú schopnosť ligandov väzbových miest glutamátu, ale zvyšuje väzbu antagonistu MK-801.

Dopaminergná neurotransmisia

Uvoľňovanie dopamínu z neurónov sa zvyšuje v prítomnosti nízkej koncentrácie N-acetylcysteínu, ale vysoká koncentrácia látky (10 mmol) inhibuje proces. Môže to byť spôsobené tým, ako glutatión zvyšuje uvoľňovanie dopamínu vyvolané glutamátom. Intravenózne podanie N-acetylcysteínu spomalilo downreguláciu dopamínových transportérov u opíc, ktorým bol injekčne podaný metamfetamín. 3.4. Stres a úzkosť Uvádza sa, že N-acetylcysteín má v niektorých prípadoch priaznivé účinky pri úzkostných poruchách. Na základe viacerých prípadových štúdií bol napríklad zistený priaznivý účinok látky proti obhrýzaniu nechtov a dermatilománii.

Nervózna excitabilita

Boli vykonané dve štúdie na pacientoch s autizmom. Bolo zaznamenané, že excitabilita ako symptóm autizmu je výrazne znížená (v porovnaní s účinkom placeba) pri dennom príjme 900-2700 mg látky a štandardnej terapii.

obsedantný stav

Uskutočnili sa štúdie o použití N-acetylcysteínu na liečbu obsedantno-kompulzívnej poruchy, pretože niektoré oblasti mozgu (nucleus accumbens a rektálna cingulátna kôra) vykazujú podobnú reakciu pri drogovej závislosti a OCD a pri užívaní N- Je známe, že acetylcysteín má priaznivý vplyv na drogovú závislosť. Ľudia s OCD majú zvýšenú peroxidáciu lipidov v mozgu spojenú s nízkou hladinou vitamínu E v mozgu a zníženou aktivitou antioxidačných enzýmov (okrem zvýšených hladín superoxiddismutázy). Tieto oxidačné zmeny priamo súvisia so zhoršením symptómov. Podobnosti medzi drogovou závislosťou (preukázané priaznivé účinky) a OCD, ako aj prooxidačné vlastnosti OCD naznačujú, že suplementácia N-acetylcysteínu môže mať terapeutický účinok. Na myšom modeli OCD sa zistilo, že intraabdominálne podanie 150 mg/kg N-acetylcysteínu je prospešné (podľa testu zavŕtania balónika), zatiaľ čo dávka 50 – 100 mg/kg bola neúčinná. Zistilo sa tiež, že vitamín E je neúčinný v akejkoľvek dávke (10-100 mg/kg). Pri použití N-acetylcysteínu a nízkej dávky inhibítora spätného vychytávania serotonínu fluvoxamínu nebol zaznamenaný žiadny aditívny účinok. Bol zaznamenaný priaznivý účinok acetylcysteínu na zvieratá a iný antioxidant nemá rovnaký účinok. Štúdia zaznamenala, že závislí na kokaíne majú zvýšené hladiny glutamátu v mozgu a tieto zvýšené hladiny glutamátu sú spojené s impulzivitou; N-acetylcysteín znižuje hladinu glutamátu, ale na konci experimentu nebol stanovený stupeň impulzivity. Impulzivita je spojená s vysokými koncentráciami glutamátu v mozgu. Bola vykonaná prípadová štúdia u pacienta refraktérneho na štandardnú liečbu selektívnymi inhibítormi spätného vychytávania serotonínu (SSRI; pozorované v 20 % prípadov). Po dennom príjme 3000 mg N-acetylcysteínu liečba priniesla výsledok. V následnej štúdii 2400 mg N-acetylcysteínu denne počas 12 týždňov u pacientov refraktérnych na terapiu SSRI (a trpiacich OCD) zvýšilo účinnosť terapie (o viac ako 35 % na Yale Brownovej obsesívno-kompulzívnej škále) z 15. % až 52,6 %. Predbežné dôkazy naznačujú, že N-acetylcysteín môže zvýšiť účinnosť terapie SSRI na liečbu OCD, ale nie je známe, či N-acetylcysteín môže poskytnúť taký priaznivý účinok sám o sebe (keďže ide skôr o adjuvans terapia ako monoterapia). Ďalšou chorobou, ktorá je symptómami a liečbou podobná OCD (pretože ide o poruchu kontroly impulzov), je trichotilománia, ťahanie a požieranie vlasov na hlave alebo iných častiach tela. Existuje mnoho typov tejto choroby, niektoré z nich sú podobné príznakmi a patológiou ako OCD, niektoré závislosti. Preto sa skúma použitie N-acetylcysteínu na liečbu tohto ochorenia (pretože má priaznivý účinok pri liečbe OCD a závislosti). Prípadové štúdie zistili priaznivé účinky N-acetylcysteínu pri 1800 mg a 1200 mg denne (v jednej štúdii) počas 6 týždňov, po ktorých nasledovalo zvýšenie dávky (2400 mg). Príjem látky ukázal, že u ľudí trpiacich trichotilomániou sa znižujú celkové symptómy (o 31-45%, v závislosti od hodnotiacej stupnice), ako aj symptómy komorbidít, ako sú úzkosť (31% pokles) a depresia (34% zníženie). %). Predbežné dôkazy naznačujú, že N-acetylcysteín má priaznivý účinok pri liečbe trichotilománie, pravdepodobne vďaka svojmu účinnému účinku na liečbu závislosti a OCD (ochorenia podobné patologickým stavom ako trichotilománia).

závislosť

V otvorenej štúdii tínedžeri, ktorí priznali užívanie marihuany, užívali 2 400 mg (dvakrát 1 200 mg) N-acetylcysteínu perorálne počas štyroch týždňov. V dôsledku toho došlo k zníženiu príznakov závislosti (podľa prieskumu), nutkavosti a emocionality, nie však k úzkostnému očakávaniu. Záchvaty „cravingu“ kanabisu sa znížili o 25 % (účinok sa pozoruje po 2 týždňoch a potom pretrváva), ale hladina kanabinoidov v moči zostala rovnaká. Predbežné údaje naznačujú, že užívanie N-acetylcysteínu len mierne znižuje závislosť od marihuany a vykazuje anti-návykový účinok. Testovanie bolo vykonané na kokaíne závislých, ktorí abstinujú od užívania drog (podľa abstinenčného syndrómu). Počas dňa užívali 2400 mg N-acetylcysteínu (600 mg každých 6 hodín), v dôsledku čoho sa zistilo, že dve hodiny po prvej dávke (maximálna koncentrácia NAC v krvi) sa túžba neznížila, ale po 14 hodinách bol nižší, účinok pretrvával do 24 hodín po poslednej dávke liečiva. N-acetylcysteín môže znížiť túžbu užívať kokaín počas vysadenia drog. V štúdii na potkanoch sa zistilo, že samopodávanie nikotínu počas viac ako 21 dní znížilo expresiu GLT-1 a cystín-glutamátového antiportu v nucleus accumbens (prefrontálny kortex a amygdala neboli ovplyvnené). Výsledky experimentu ukázali, že užívanie 2400 mg N-acetylcysteínu počas 4 týždňov u fajčiarov znížilo frekvenciu fajčenia (v porovnaní s placebom) dva týždne po užití. Príjem nikotínu môže znížiť expresiu cystín-glutamátového antiportu a GLT-1 a príjem N-acetylcysteínu môže mať priaznivý účinok pri liečbe závislosti od nikotínu (znižuje počet vyfajčených cigariet, ale neznižuje chuť na fajčenie).

Vplyv na kardiovaskulárne zdravie

Krv

Denný príjem 400-800 mg/kg N-acetylcysteínu počas 12 týždňov zvyšuje koncentráciu glutatiónu v erytrocytoch o 5-6% v porovnaní s kontrolnou skupinou, ako aj zvýšenie aktivity G6PD o 17% (podľa výsledky prieskumu všetkých skupín).

Tkanivo kostrového svalstva a fyzická výkonnosť

V dôsledku užívania N-acetylcysteínu počas 6 dní pred intervalovým šprintovým testom, ktorý sa vykonával trikrát denne, výkon v nasledujúci deň zostal rovnaký, ale látka nemala žiadny vplyv na izokinetický test. ; táto štúdia je duplikovaná v Pubmed.

Únava

Užívanie 150 mg/kg N-acetylcysteínu (injekčne) pred opakovanými maximálnymi kontrakciami lýtkového svalu neovplyvnilo pokojový energetický výdaj, ale zvýšilo sa o 15 % oproti kontrole, čo naznačuje účinok proti únave. Výsledok bol získaný pomocou nízkych elektrických impulzov (10Hz), ktoré uviedli subjekty do stavu únavy. Priaznivé účinky N-acetylcysteínu boli zaznamenané v teste šprintérskych intervalov, ale žiadny účinok sa nezistil pred a po cvičení izokinetickej dynamometrie. Hoci N-acetylcysteín má priaznivé účinky proti únave, na dosiahnutie takéhoto účinku sú potrebné veľké dávky, a teda injekcie; ale ani v tomto prípade nie je účinok látky výrazný.

Vplyv na oxidáciu

glutatión

N-acetylcysteín pôsobí ako substrát pre glutatión. Glutatión (GSH) sekvestruje reaktívne formy kyslíka a dusíka v procese, ktorý premieňa glutatión (na glutatióndisulfid; GSSG), potom sa glutatióndisulfid redukuje na glutatión pomocou enzýmov glutatión-S-transferáza (GTS). Antioxidačný cyklus sa opakuje, kým sa glutatión nerozloží gama-glutamyltransferázou na voľné glutamáty a glycín-cysteínový dipeptid. V konečnom dôsledku môžu byť voľné aminokyseliny použité na regeneráciu glutatiónu, najprv pomocou glutamátcysteínligázy (na opätovné vytvorenie dipeptidu) a potom pomocou syntézy glutatiónu (na vytvorenie samotného glutatiónu); prvé štádium je limitujúce v dôsledku dostupnosti L-cysteínu. Glutatión sa zúčastňuje cyklu blokovania radikálov obsahujúcich kyslík a dusík, po niekoľkých cykloch sa rozkladá. Glutatión sa dá ľahko získať, ale limitujúcim faktorom je tu dostupnosť L-cysteínu; užívanie N-acetylcysteínu umožňuje L-cysteínu urýchliť resyntézu.

superoxid

Superoxid (O2-) je anión a voľný radikál, ktorý je blokovaný antioxidačným enzýmom superoxiddismutáza (SOD). N-acetylcysteín, podobne ako cysteín aj glutatión, má in vitro relatívne pomalú reakčnú rýchlosť na blokovanie O2-; okrem toho N-acetylcysteín vykazuje menej antioxidačných vlastností ako glutatión, ktorý je tiež dosť neúčinný. N-acetylcysteín nevykazuje ochranný účinok proti superoxidom ani priamo, ani prostredníctvom glutatiónu.

Peroxid vodíka

Peroxid vodíka (H2O2) je voľný radikál v tele. In vitro priamo pomaly interaguje s N-acetylcysteínom. N-acetylcysteín nie je sľubný lapač voľných radikálov.

Hydroxylová skupina

Tiolové antioxidanty, ako je glutatión a N-acetylcysteín, sú celkom dobré pri zachytávaní hydroxylových radikálov (OH-). N-acetylcysteín účinne vychytáva hydroxylové radikály (OH-) priamo aj prostredníctvom produkcie glutatiónu.

Kyselina chlórna

Kyselina chlórna (HClO) je oxidant získaný z myeloperoxidázy (MPO) po spojení chloridového aniónu a peroxidu vodíka; Enzým je najaktívnejší v neutrofiloch (typ imunitných buniek) počas oxidačného vzplanutia. N-acetylcysteín je pomerne silný vychytávač HOCl in vitro. N-acetylcysteín účinne blokuje kyselinu chlórnu.

Zápal a imunológia

Leukocyty

Podávanie 200-800 mg N-acetylcysteínu počas 12 týždňov malo za následok mierny pokles aktivity glutatión-S-transferázy v leukocytoch u pracovníkov vystavených olovu.

Eozinofily

Užívanie 600 mg N-acetylcysteínu počas 10 týždňov znížilo hladinu katiónového eozinofilného proteínu (ktorý sa uvoľňuje pri degranulácii eozinofilov) u jedincov s CHOCHP.

Účinok na orgány

Žalúdok

Užívanie 600 mg N-aceticysteínu popri štandardnej terapii zvyšuje úroveň eradikácie u pacientov s infekciou helicobacter pylori, ktorí trpia aj dyspepsiou (pálenie záhy), zo 60,7 % na 70 %.

Pečeň

Prvýkrát sa zistilo, že paracetamol znižuje toxicitu paracetamolu s N-acetylcysteínom v roku 1978 pri perorálnom podávaní 7 g každých 216 minút (17 dávok).

obličky

Suplementácia N-acetylcysteínom (100 mg/kg intraabdominálna injekcia) je schopná znížiť hladiny olova v krvi a tkanivách u potkanov (ktoré boli vopred vystavené olovu počas 8 týždňov), čo vedie k menšiemu poškodeniu obličiek.

Pľúca

N-acetylcysteín vykazuje mukolytické vlastnosti u jedincov trpiacich CHOCHP. N-acetylcysteín znižuje adhéziu imunitných buniek, keď sa užíva denne počas 10 mesiacov ako profylaktické činidlo, ale zistilo sa, že je neúčinný, keď sa užíva 8 týždňov.

Iné choroby

Chronická obštrukčná choroba pľúc

je ochorenie spojené s obmedzením prietoku vzduchu. Ochorenie nie je úplne reverzibilné a je spojené s abnormálnou zápalovou a oxidačnou odpoveďou na stresové faktory, najmä v pľúcnom tkanive. Pokračuje výskum priaznivých účinkov acetylcysteínu pri CHOCHP v dôsledku oxidačnej a zápalovej povahy ochorenia. Pri užívaní 600 mg N-acetylcysteínu dvakrát denne bola u jedincov s CHOCHP zaznamenaná nižšia hladina peroxidu vodíka v kondenzáte vydychovaného vzduchu (o 22 % po 15 dňoch, o 29 % po mesiaci a o 35 % po dvoch mesiacoch). To naznačuje nižšie úrovne oxidačného stresu v pľúcnych tkanivách, najmä z imunitných buniek, ako sú aktivované neutrofily a makrofágy. Pri užívaní placeba bolo zaznamenané zvýšenie H2O2, nebol žiadny vplyv na funkciu pľúc. Zníženie hladiny peroxidu vodíka môže byť spojené so zvýšením aktivity glutatiónperoxidázy. Denný príjem 600 mg N-acetylcysteínu počas 10 mesiacov znižuje adhéziu neutrofilov, zatiaľ čo užívanie počas 8 týždňov bolo neúčinné. Kortikosteroidy majú opačný účinok, pretože po 8 mesiacoch užívania inhibujú adhéziu o 31 %, ale v konečnom dôsledku zvyšujú adhéziu po 10 mesiacoch. Zníženie adhézie môže priamo súvisieť so zvýšením koncentrácie glutatiónu. Keďže denný príjem 600 mg N-acetylcysteínu znižuje faktor bunkovej adhézie ICAM-1 a IL-8, pokles týchto dvoch faktorov je negatívne spojený so zvýšením aktivity glutatiónperoxidázy. Krátkodobé podávanie N-acetylcysteínu môže spôsobiť zmeny v respiračných biomarkeroch, čo naznačuje potlačenie oxidačného stresu v pľúcnom tkanive. To naznačuje možnosť terapeutického použitia N-acetylcysteínu pri CHOCHP. N-acetylcysteín 600 mg dvakrát denne počas 3 rokov (štúdia BRONCUS) neznižuje rýchlosť zhoršovania funkcie pľúc. Štúdia BRONCUS poznamenala, že N-acetylcysteín nebol ochranný pri užívaní kortikosteroidov. To naznačuje, že adjuvantná terapia bola neúčinná. Dlhodobé užívanie N-acetylcysteínu sa ukázalo byť prospešné pri liečbe CHOCHP, ale N-acetylcysteín nemá žiadne adjuvantné vlastnosti s kortikosteroidmi. To naznačuje, že priaznivý účinok kortikosteroidov je podobný účinku ako N-acetylcysteín, ale kombinácia týchto dvoch liekov tento účinok zlepšuje. Denný príjem 600 mg N-acetylcysteínu počas jedného týždňa (súčasne so 40 mg prednizolónu a 5 mg salbutamolu) nepreukázal žiadny účinok N-acetylcysteínu na pľúcne funkcie ani príznaky dusenia u ľudí trpiacich akútnym CHOCHP. N-acetylcysteín je pri liečbe akútnej CHOCHP neúčinný.

autizmus

Súvisí so zvýšenou rýchlosťou oxidácie v mozgu, krvi a moči. N-acetylcysteín má terapeutický účinok na ľudí s autizmom, pretože tento stav je charakterizovaný nízkou hladinou glutatiónu v mozočku (34,2 %) a temporálnej kôre (44,6 %) v porovnaní so zdravými ľuďmi. Autizmus je tiež charakterizovaný genetickými zmenami v glutatiónovej dráhe. Navyše zvýšená hladina glutamátu veľmi neovplyvňuje patológiu autizmu (antagonisti glutamátu zmierňujú príznaky autizmu u zvierat). Suplementácia N-acetylcysteínom znižuje zvýšené hladiny glutamátu (mechanizmus, ktorý zdôrazňuje anti-návykové vlastnosti). N-acetylcystín zlepšuje symptómy autizmu vďaka svojim antioxidačným vlastnostiam, tiež znižuje nadmerné hladiny glutamátu v mozgu; hladiny oxidácie aj hladiny glutamátu sú u autistických jedincov abnormálne zvýšené v porovnaní so zdravými kontrolami. Prípadová štúdia preukázala sľubné účinky N-acetylcysteínu. V pilotnej štúdii (dvojito zaslepenej) počas prvých 4 týždňov pacienti užívali 900 mg N-acetylcysteínu denne, dvojnásobnú dávku (1 800 mg) počas nasledujúcich 4 týždňov, trojnásobok dávky (2 700 mg) počas posledných štyroch týždňov týždňov. Zistilo sa, že N-acetylcysteín je schopný znížiť pocity excitability (merané testom deviantného správania) po 12 týždňoch u autistických pacientov, ale neovplyvnil žiadne z mier spoločenskej zodpovednosti na stupnici ABC (škála SRS). alebo stupnica skreslenia odozvy (škála RBS). Experiment bol neskôr zopakovaný u autistov liečených risperidónom. Denný príjem 1200 g látky počas 8 týždňov prispel k zníženiu pocitu vzrušenia len na stupnici ABC. Predbežné dôkazy naznačujú, že N-acetylcysteín môže znížiť pocity vzrušenia u autistických jedincov, najmä pri liečbe. N-acetylcysteín však nepôsobí na žiadny iný príznak.

Sjögrenov syndróm

Jedna štúdia poznamenala, že užívanie N-acetylcysteínu zlepšilo očné príznaky Sjögrenovho syndrómu znížením podráždenosti a suchosti oka, ako aj znížením zápachu z úst a smädu.

Interakcie s živinami

Aktívne uhlie

N-acetylcysteín sa viaže na uhlie v čreve (96%). V priebehu štúdií sa zistilo, že pri spoločnej konzumácii 100 g aktívneho uhlia sa absorpcia N-acetylcysteínu (140 mg / kg) znížila o 39 % a maximálna plazmatická koncentrácia sa znížila o 26 %. %. Toto tvrdenie nie je plne podložené, pretože existujú dôkazy, že 60 g aktívneho uhlia neovplyvňuje kinetiku 140 mg/kg N-acetylcysteínu. Je možné, že N-acetylcysteín sa viaže na aktívne uhlie v čreve (aktívne uhlie sa viaže na toxíny a odstraňuje ich z tela). Preto by sa obe látky nemali používať spolu.

Etanol

Oxidačný stres sa zvyčajne meria hladinou a aktivitou glutatiónu. Súbežné podávanie N-acetylcysteínu a alkoholu inhibuje pokles hladín glutatiónu spôsobený alkoholom po 4 týždňoch a po šiestich mesiacoch. Oxidačný stres ovplyvňuje aj pečeň, krv a mozgové tkanivo. Pred začiatkom experimentu bol potkanom injekčne podaný etylalkohol, potom bol podaný etylalkohol spolu s N-acetylcysteínom. 15 dní po začiatku príjmu N-acetylcysteínu bol zaznamenaný ochranný účinok látky, pretože sa zistilo zníženie oxidačného stresu v pečeni. Ale pri užívaní N-acetylcysteínu po ukončení príjmu etylalkoholu bol ochranný účinok vyšší. N-acetylcysteín 30 minút pred dávkou etanolu vykazuje ochranný účinok, zatiaľ čo N-acetylcysteín 4 hodiny po dávke etanolu poškodenie zhoršuje. Táto štúdia tiež zaznamenala zníženie rozsahu histologického poškodenia u myší, ktoré boli predtým liečené N-acetylcysteínom. Predchádzajúce podanie (30 minút) N-acetylcysteínu pred požitím etylalkoholu znižuje stupeň poškodenia pečene u hlodavcov, zatiaľ čo podanie N-acetylcysteínu 4 hodiny po požití etanolu môže zhoršiť poškodenie spôsobené alkoholom. Mitochondriálna biogenéza u potkanov (meraná aktivitou génu PGC-1α) zosilnená etylalkoholom je potlačená o 1,7 g/kg N-acetylcysteínu, zatiaľ čo etylalkohol znižuje štrukturálnu integritu a funkciu mitochondrií bez ohľadu na pôsobenie N-acetylcysteínu. Štúdia hodnotiaca mitochondriálnu štruktúru tkaniva pečene potkana zistila, že suplementácia N-acetylcysteínom potlačila etanolom indukovanú zvýšenú mitochondriálnu biogenézu, ale pravdepodobne nechránila pred inými typmi mitochondriálneho poškodenia; k tomu dochádza súčasne so štandardným znížením oxidačného poškodenia.

Acetylcysteín ​​(ACC / Fluimucil): návod na použitie

Indikácie na použitie

Akútna a chronická bronchitída a bronchiolitída, bronchiektázie, cystická fibróza, emfyzém a iné ochorenia dýchacích ciest s množstvom hustého hlienu alebo hlienovo-hnisavým výtokom. V toxikológii sa používa ako protijed pri predávkovaní. Používa sa aj na dlhodobú mechanickú ventiláciu pri liečbe respiračného zlyhania, akútnej a chronickej sinusitídy, exsudatívneho zápalu stredného ucha, ako aj pri príprave na bronchografiu.

Acetylcysteín (ACC / Fluimucil): kontraindikácie

Precitlivenosť na niektorú zo zložiek lieku, ťažký astmatický záchvat. Nepoužívajte alebo buďte opatrní pri používaní lieku u pacientov s aktívnym peptickým vredom žalúdka a dvanástnika. Opatrnosť je potrebná aj u starších pacientov s ťažkým respiračným zlyhaním, astmou alebo pažerákovými varixmi. Nemal by sa používať u pacientov so zníženou expektoračnou schopnosťou pri absencii respiračnej fyzioterapie. Veľké dávky acetylcysteínu ako antidota môžu skrátiť protrombínový čas, treba sledovať koagulačné parametre. Zápach síry nenaznačuje zmenu vlastností lieku a je typický pre účinné látky obsiahnuté v lieku.

Acetylcysteín (ACC / Fluimucil): interakcia s inými liekmi

Súčasné užívanie liekov proti kašľu môže byť spojené so zadržiavaním riedkeho hlienu v prieduškách. Súčasné použitie s nitroglycerínom alebo nitrátmi zvyšuje ich vazodilatačný účinok a agregáciu krvných doštičiek. Neužívajte liek do dvoch hodín po užití antibiotík, najmä polosyntetických penicilínov, tetracyklínov, cefalosporínov a aminoglykozidov (pri použití acetylcysteínu ako antidota sú tieto opatrenia zbytočné). Nie je známe nič o možných interakciách acetylcysteínu s amoxicilínom, doxycyklínom, | erytromycínom]], tiamfenikolom a (acetylcysteín zvyšuje penetráciu do bronchiálnych sekrétov). Roztoky obsahujúce acetylcysteín by sa nemali miešať s inými liekmi.

Vedľajšie účinky acetylcysteínu (ACC / Fluimucil)

Nevoľnosť, vracanie, pálenie záhy, hnačka, bolesť hlavy, hučanie v ušiach, vodnatý výtok z nosa, stomatitída. Niekedy sa alergická reakcia prejavuje kožnou léziou vo forme svrbiacej vyrážky. Pri užívaní veľkých dávok môže dôjsť k rozšíreniu ciev a prudkému začervenaniu tváre, ako aj k nadmernému riedeniu hlienovohnisavého sekrétu (najmä u pacientov s neadekvátnym kašľovým reflexom). Veľmi zriedkavo možno v počiatočnom období užívania lieku pozorovať bronchokonstrikciu, hypersekréciu hlienu a ostrý suchý kašeľ. V procese užívania lieku inhaláciou možno pozorovať bronchospazmus a dýchavičnosť, najmä u pacientov s astmou. Precitlivenosť na acetylcysteín môže viesť k zápalu slizníc úst a nosa.

Návod na acetylcysteín

Acetylcysteín je mukolytický, expektoračný a detoxikačný liek. Všetky tieto účinky sú spôsobené prítomnosťou voľnej sulfhydrylovej skupiny v jeho chemickej štruktúre, ktorá ničí disulfidové väzby v kyslých mukopolysacharidoch spúta, znižuje viskozitu sekrécie sliznice a inhibuje polymerizáciu mukoproteínov. Tento liek súčasne riedi viskózny spút, čím výrazne zväčšuje jeho objem (v niektorých prípadoch si jeho použitie vyžaduje použitie elektrického odsávania, aby sa zabránilo "zaplaveniu" pľúc, najmä u dojčiat). Má tiež aktívny stimulačný účinok na bunky sliznice, zvyšuje syntézu glutatiónu a stimuluje detoxikačné procesy. Protizápalové vlastnosti acetylcysteínu sú spôsobené potláčaním tvorby reaktívnych kyslíkových metabolitov a voľných radikálov, ktoré spôsobujú rozvoj akútneho a chronického zápalu v tkanive pľúc a dýchacích ciest.

Pri perorálnom podaní sa acetylcysteín dobre vstrebáva, ale biologická dostupnosť tohto lieku je pomerne nízka (10%), pretože pri prechode pečeňou sa deacetyluje (metabolizuje) s následnou tvorbou cysteínu. Maximálna koncentrácia tohto liečiva v plazme sa dosiahne v priebehu jednej až troch hodín a väzba na plazmatické proteíny je 50%. Acetylcysteín sa nachádza v plodovej vode, čo súvisí s jeho dobrou penetráciou cez placentárnu bariéru. Tento liek vo forme neaktívnych metabolitov sa vylučuje hlavne obličkami (ako diacetylcysteín a anorganické sulfáty) a časť sa vylučuje v nezmenenej forme črevom.

Acetylcysteín sa používa v terapeutickej, pediatrickej praxi a otorinolaryngológii pri ochoreniach bronchopulmonálneho systému a ORL orgánov, ktoré sa vyznačujú ťažkým oddeľovaním spúta alebo hlienu (hlienopurulentná sekrécia) v dôsledku výrazného zápalového procesu na zmiernenie neproduktívneho dráždivého kašľa, riedkeho viskózny sekrét a transformovať neproduktívny kašeľ vlhký, po ktorom nasleduje vykašliavanie spúta.

Acetylcysteín alebo jeho analógy sa predpisujú na bronchitídu, tracheitídu, bronchiolitídu, laryngotracheitídu, pneumóniu, bronchiektáziu, bronchiálnu astmu, cystickú fibrózu a iné vrodené patológie pľúc a dýchacích ciest. Ako súčasť komplexnej liečby pľúcneho abscesu, intersticiálnych ochorení bronchopulmonálneho systému, emfyzému a atelektázy pľúc, ktoré sú charakterizované prítomnosťou bronchiálnej obštrukcie v dôsledku prítomnosti hlienovej zátky. A tiež na zápalové ochorenia v otolaryngológii: katarálny a purulentný zápal stredného ucha, sinusitída (sinusitída, čelná sinusitída a etmoiditída). Tento liek je široko používaný v pooperačných a poúrazových stavoch na odstránenie viskóznych sekrétov z dýchacieho traktu.

Acetylcysteín je antidotum paracetamolu a používa sa pri otravách drogami a predávkovaní paracetamolom.

Analógy acetylcysteínu

Analógy acetylcysteínu sú prípravky s hlavnou účinnou látkou, ktorou je acetylcysteín: ACC, Fluimucil, Mukonex, Mukomist, Acestin, ako aj Rinofluimucil nosový sprej, ktorý má vo svojom zložení acetylcysteín a tuaminoheptánsulfát.

Kontraindikácie pri užívaní acetylcysteínu a jeho analógov

Kontraindikácie pri použití acetylcysteínu sú:

• Choroby gastrointestinálneho traktu, charakterizované prítomnosťou erózií alebo ulceratívnych procesov v akútnej fáze (peptický vred žalúdka a / alebo dvanástnika, Crohnova choroba);
• prítomnosť hemoptýzy a pľúcneho krvácania v anamnéze;
• precitlivenosť na účinnú látku (acetylcysteín) alebo iné pomocné alebo formujúce zložky lieku;
• laktácia a tehotenstvo;
• detský vek: deti do dvoch rokov neužívajú liek vo forme granúl na prípravu roztoku v dávke 100 mg a 200 mg, deti do šiestich rokov - acetylcysteín​ vo forme granule v dávke 200 mg a deti do štrnásť rokov - liek v dávke 600 mg.

Starostlivo a pod neustálym dynamickým dohľadom ošetrujúceho lekára sa tento liek predpisuje pacientom s kŕčovými žilami pažeráka, ochoreniami nadobličiek, bronchiálnou astmou a zlyhaním pečene a / alebo obličiek.

N-acetylcysteín

N-acetylcysteín je synonymom názvu lieku Acetylcysteín, so skrátenou formou názvu ACC.

Acetylcysteín na inhaláciu

V závislosti od formy uvoľňovania sa acetylcysteín používa perorálne (ako roztok pripravený z granúl), parenterálne (v / v, v / m), inhalačne, lokálne alebo endobronchiálne. Dávkovací režim je individuálny a závisí od veku pacienta, nozologickej formy ochorenia a celkového stavu pacienta.

Inhalácia Acetylcysteín sa predpisuje jedna ampulka (300 mg) raz až dvakrát denne cez rozprašovač alebo iné inhalačné zariadenie (okrem parou zvlhčených inhalátorov) počas piatich až desiatich dní, s chronickým procesom a cystickou fibrózou môže tento liek byť predpísané a dlhšie kurzy.

Cena acetylcysteínu

Priemerná cena lieku Acetylcysteín ​​alebo jeho analógov je 130 - 300 rubľov v závislosti od formy uvoľňovania, výrobcu a dávky.

Recenzie acetylcysteínu

Acetylcysteín je široko používaný v klinickej praxi ako expektorans a protizápalové syntetické liečivo. V priebehu klinických štúdií boli teraz identifikované nové mechanizmy jeho farmakologického účinku - antioxidačné, glutatión-nahradzujúce a detoxikačné účinky N-AC. Táto skutočnosť umožňuje predpísať ho na liečbu intoxikácií rôznej etiológie, najmä pri otravách paracetamolom alebo soľami ťažkých kovov (olovom) pri toxických reakciách na podanie rádioaktívnych látok a ako adjuvans pri chemoterapii. Acetylcysteín sa tiež používa na prevenciu a liečbu kardiovaskulárnych patológií (arteriálna hypertenzia a ateroskleróza). K dnešnému dňu register klinických štúdií WHO študuje účinnosť N-acetylcysteínu v kardiochirurgii, liečbe kontrastom indukovanej nefropatie, onkologických ochorení a diabetes mellitus.

Majitelia patentu RU 2549433:

[0001] Vynález sa týka spôsobu liečenia cicavca s endometriózou. Táto metóda zahŕňa pulzné alebo prerušované perorálne podávanie počas 3-5 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasleduje 2-4-dňová prestávka alebo 1-3 po sebe nasledujúce dni, po ktorých nasleduje 1-2-dňová prestávka farmaceutickej kompozície obsahujúcej N-acetyl-L-cysteín, v časovom období najmenej dvoch mesiacov. N-acetyl-L-cysteín sa pri tejto metóde podáva v dávke 20 až 90 mg/kg/deň. Nárokovaný spôsob poskytuje výraznejší účinok na symptómy endometriózy v porovnaní s tradičným denným podávaním N-acetyl-L-cysteínu. 10 z.p. f-ly, 7 ill., 2 stoly, 3 pr.

OBLASŤ VYNÁLEZU

Predložený vynález sa týka farmaceutickej kompozície obsahujúcej N-acetyl-L-cysteín užitočnej pri liečbe endometriózy a indikácií spojených s endometriózou.

Endometrióza je treťou najčastejšou príčinou gynekologickej hospitalizácie v Spojených štátoch amerických a postihuje približne 14 miliónov žien v Európe. Široko používané miery výskytu endometriózy zahŕňajú 5-10% všetkých žien v reprodukčnom veku a 30-40% všetkých žien s problémami s neplodnosťou. Je to ochorenie charakterizované prítomnosťou tkaniva mimo maternicovej dutiny, ktoré je histologicky identické s endometriom, teda membránou, ktorá vystiela vnútro cicavčej maternice. Z tohto abnormálne umiestneného tkaniva sa vyvinú výrastky alebo lézie (tiež nazývané implantáty alebo uzliny), ktoré reagujú na menštruačný cyklus rovnakým spôsobom ako tkanivo endometria maternice: každý mesiac tkanivo rastie, rozpadá sa a vypadáva. Kým menštruačná krv vyteká z maternice, krv a tkanivo vyliate z endometriálnych výrastkov nemá východisko. To vedie k vnútornému krvácaniu, vytrhnutiu ciev a tkaniva z lézií a následnému chronickému zápalu.

Dva najčastejšie príznaky endometriózy sú bolesť a neplodnosť. Symptómy môžu zahŕňať: dysmenoreu, čo je bolesť pred alebo po menštruácii a bolesť počas alebo po sexe; chronická bolesť panvy alebo dolnej časti chrbta a čriev; silné menštruačné obdobia alebo špinenie a krvácanie medzi menštruáciami; bolestivé pohyby čriev alebo bolestivé močenie počas menštruácie; neplodnosť.

Príčina endometriózy je v súčasnosti neznáma a bolo navrhnutých niekoľko teórií na ospravedlnenie ektopickej migrácie a implantácie endometriálnych buniek. Nedávne údaje preukazujú súvislosť medzi výskytom endometriózy a zmeneným stavom tkaniva pôvodu: eutopického endometria. V odbore narastá názor, že nekontrolovaná migrácia, implantácia a rast endometriómov vznikajú z porúch v eutopických endometriálnych bunkách.

V súčasnosti neexistuje žiadny liek na endometriózu. Existuje veľa možností liečby a existujú spôsoby, ako minimalizovať príznaky spôsobené týmto stavom. S výnimkou použitia analgetík na liečbu bolesti je liečba endometriózy spojená najmä s potlačením funkcie vaječníkov pri sekrécii estrogénov a následne hormonálnou liečbou u rôznych subjektov až po indukciu menopauzy u väčšiny pacientov. ťažké prípady. chirurgia sa používa na odstránenie endometriómov, adhézií, peritoneálnych implantátov a hlbokých lézií lokalizovaných v rektovaginálnej priehradke alebo inde (tj močového mechúra, čreva) a na zmiernenie bolesti. K relapsom však dochádza po terapeutickej aj chirurgickej liečbe. Mladé ženy s endometriózou často čelia ťažkým rozhodnutiam ohľadom ich budúcej reprodukcie. Hormonálna liečba určená na potlačenie funkcie vaječníkov je nezlučiteľná s tehotenstvom.

N-acetyl-L-cysteín (ďalej len NAC) je dobre známy liek, ktorý sa používa najmä ako mukolytikum a pri liečbe otravy paracetamolom. V posledných rokoch bol tiež uznávaný pre ďalšie prospešné vlastnosti, ako sú protizápalové a antiproliferatívne účinky, a bol navrhnutý na liečbu mnohých rôznych porúch a symptómov, ako je schizofrénia, cukrovka a rakovina.

Predchádzajúce štúdie skúmajúce molekulárne mechanizmy, ktoré sú základom endometriózy a sú s ňou spojené, naznačili, že zvýšená rýchlosť bunkovej proliferácie pri endometrióze môže byť vyvolaná oxidačným stresom v endometriotickom tkanive spôsobenom voľnými radikálmi alebo ROS (reaktívne formy kyslíka - reaktívne formy kyslíka). Predpokladalo sa teda, že nové terapeutické stratégie pre endometriózu môžu byť založené na antioxidantoch a akceptoroch ROS, ako je NAC.

DOTERAJŠÍ ART

Charlotte Ngo a kol. navrhol (The American Journal of Pathology (2009), zväzok 175, č. I, strany 225-234), že oxidačný stres môže vyvolať alebo zvýšiť proliferáciu endometrioidných buniek pri endometrióze. Preto boli na liečbu endometriózy navrhnuté antioxidanty, ako je NAC. Štúdie na primárnych bunkových líniách od pacientov s endometriózou, ako aj na myšom modeli s implantovaným endometrioidným tkanivom pochádzajúcim z človeka, ukázali, že NAC odstránil príznaky oxidačného stresu, ako aj zvýšil proliferáciu v príslušných modeloch. Bolo teda navrhnuté, že antioxidanty, ako je NAC, môžu byť použité ako bezpečná a účinná liečba endometriózy.

Nastaran Foyouzi a kol. tiež navrhol (Fertility and Sterility (2004), Vol. 82, Supl. 3, strany 1019-1022), že antioxidanty, ako je NAC, možno použiť na liečbu endometriózy. Článok popisuje in vitro štúdiu, kde boli bunky izolované od zdravých jedincov, ako aj pacientov s endometriózou liečené iným antioxidantom, ako je NAC. Všetky antioxidanty inhibovali proliferáciu endometriálnych stromálnych buniek.

V Yan Wo a Sun-Wei Guo (Gynecologic and Obstetric Investigation (2006), zväzok 62, č. 4, strany 193-205; European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology, (2008), zväzok 137, strany 198 -203); patentová prihláška US 2007/0287676 Al) skúmala účinok NAC na proliferáciu a zastavenie bunkového cyklu v nesmrteľných ľudských endometriálnych stromálnych bunkách a porovnávala sa s inými činidlami navrhnutými na liečbu endometriózy. Ukázalo sa, že NAC má vplyv na proliferáciu aj zastavenie bunkového cyklu, aj keď nie taký výrazný ako inhibítory históndeacetylázy.

V štúdii S. Estanyho a kol. (Journal of Reproductive Immunology (2007), Vol. 75, strany 1-10) sa ukázalo, že antioxidačná aktivita NAC a iných antioxidačných činidiel na endometriálnych bunkách v kultúre zlepšila životaschopnosť oxidovaných buniek tým, že zabránila H202 indukovanej bunková cytotoxicita.

Ďalší súvisiaci doterajší stav techniky zahŕňa US 2003/0190381 Al, WO 2004/096206 A2, US 6239137 B1, US 2003/0119875 Al, US 2004/0014672 Al a WO 2005/0248822 A2.

Ďalší doterajší stav techniky opisujúci molekulárne pôsobenie NAC pri liečbe rakoviny zahŕňa T. Parasassi, et. al. (Cell Death and Differentiation (2005), zväzok 12, č. 10, strany 1285-1296); E. K. Krasnowska et. al. (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72) a A.C. Gustafsson a kol. al. (BMC Cancer (2005), 5:75).

PREDMETY VYNÁLEZU

Klinický výsledok liečby NAC pri endometrióze podľa vynálezcov nebol stanovený v doterajšom stave techniky, ani nebol navrhnutý účinný režim na liečbu endometriózy alebo použitie NAC na liečbu indikácií spojených s endometriózou.

Preto je hlavným cieľom tohto vynálezu poskytnúť riešenie problému získania farmaceutickej kompozície obsahujúcej N-acetyl-L-cysteín (NAC) na liečbu endometriózy a indikácií spojených s endometriózou u ľudí a cicavcov. Jedným aspektom tohto cieľa je poskytnúť farmaceutickú kompozíciu obsahujúcu N-acetyl-L-cysteín (NAC) na použitie v účinnom dávkovacom režime na liečbu endometriózy a symptómov spojených s endometriózou u cicavcov, vrátane ľudí.

ZHRNUTIE VYNÁLEZU

Bolo navrhnuté, že NAC by sa mohol použiť v nových terapeutických stratégiách pre endometriózu na základe jeho použitia ako antioxidantu a zachytávača ROS. Autori tohto opisu ukazujú, že NAC indukuje molekulárne a bunkové zmeny, ktoré nielen inhibujú proliferáciu, ale tiež indukujú diferenciáciu chorého tkaniva v porovnaní s normálnym tkanivom.

Tieto zistenia viedli vynálezcov k navrhnutiu nového predpisu NAC pri liečbe endometriózy a indikácií spojených s endometriózou u ľudí alebo cicavcov. Okrem toho? navrhovaný rozsah účinných dávok NAC pri liečbe endometriózy. V jednom uskutočnení tohto vynálezu môže byť predpísaný liečebný režim použitý napríklad na kontrolu frekvencie a intenzity symptómov bolesti (dysmenorea, dyspareunia a acyklická chronická panvová bolesť), na zmenšenie veľkosti endometriotických lézií, ktoré prípadne vymiznú. na zníženie recidívy po operácii a/alebo na zlepšenie oplodnenia. Vedľajšie účinky tejto liečby prakticky chýbajú a najmä táto liečba nezabráni otehotneniu.

Predložený vynález poskytuje farmaceutickú kompozíciu obsahujúcu N-acetyl-L-cysteín na použitie pri liečbe cicavca, vrátane človeka s endometriózou, kde je kompozícia určená na pulzné alebo prerušované perorálne podávanie počas časového obdobia dva mesiace alebo viac, N-acetyl-L-cysteín v dávke 20 až 90 mg/kg/deň a deň, keď sa podáva.

V jednom uskutočnení vynálezu je poskytnutá farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín na vyššie uvedené použitie, pričom kompozícia je určená na podávanie počas 3-5 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasleduje 2-4-dňová prestávka. . V ešte ďalšom uskutočnení je farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín určená na podávanie počas 1-3 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasledujú 1-2 dni prestávky.

V jednom uskutočnení vynálezu sa poskytuje farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín na vyššie uvedené použitie, pričom kompozícia je určená na podávanie N-acetyl-L-cysteínu v dávke 30 až 60 mg/kg/deň v deň podania. V ešte ďalšom uskutočnení je farmaceutická kompozícia určená na podávanie N-acetyl-L-cysteínu v dávke 30 až 45 mg/kg/deň v deň podávania.

V jednom uskutočnení vynálezu je poskytnutá farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín na použitie opísané vyššie, pričom farmaceutická kompozícia je chránená pred svetlom. V ešte ďalšom uskutočnení je farmaceutická kompozícia vo vode rozpustná tableta. V ešte ďalšom uskutočnení farmaceutická kompozícia obsahuje hydrogénuhličitan sodný. V jednom uskutočnení je farmaceutická kompozícia formulácia s pomalým uvoľňovaním a/alebo chránič žalúdka.

V jednom uskutočnení vynález poskytuje farmaceutickú kompozíciu obsahujúcu N-acetyl-L-cysteín na použitie pri liečbe bolesti spôsobenej endometriózou. V ešte ďalšom uskutočnení je farmaceutická kompozícia na použitie pri liečbe neplodnosti spôsobenej endometriózou. V ešte ďalšom uskutočnení je farmaceutická kompozícia určená na použitie pri predbežnej liečbe endometriózy u cicavcov pred laparoskopiou alebo chirurgickým zákrokom. V jednom uskutočnení je farmaceutická kompozícia na použitie pri liečbe cicavcov s endometriózou po laparoskopii alebo chirurgickom zákroku na prevenciu recidívy.

V jednom aspekte vynálezu je poskytnutý spôsob liečenia cicavca s endometriózou zahŕňajúci orálne podávanie farmaceutickej kompozície obsahujúcej N-acetyl-L-cysteín uvedenému cicavcovi v pulznom alebo prerušovanom režime počas obdobia dvoch mesiacov alebo viac N-acetyl-L-cysteínu v dávke, ktorá sa pri podávaní pohybuje od 20 do 90 mg/kg/deň a deň. V jednom uskutočnení spôsobu sa farmaceutická kompozícia podáva počas 3 až 5 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasledujú 2 až 4 dni prestávky. V ešte ďalšom uskutočnení sa farmaceutická kompozícia podáva počas 1-3 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasledujú 1-2 dni prestávky.

V jednom uskutočnení spôsobu je dávka N-acetyl-L-cysteínu 30 až 60 mg/kg/deň v deň podania. V ešte ďalšom uskutočnení spôsobu je dávka N-acetyl-L-cysteínu 30 až 45 mg/kg/deň v deň podania.

V jednom uskutočnení je spôsob na liečbu bolesti spôsobenej endometriózou. V iných uskutočneniach je spôsob určený na liečbu neplodnosti v dôsledku endometriózy, na predbežnú liečbu cicavcov s endometriózou pred laparoskopiou alebo chirurgickým zákrokom alebo na liečbu po laparoskopii alebo chirurgickom zákroku na prevenciu recidívy endometrioidných lézií.

STRUČNÝ POPIS GRAFIKA

Predložený vynález bude podrobnejšie vysvetlený v nasledujúcom opise s odkazom na priložené výkresy, kde:

Obrázok 1 ukazuje inhibičný účinok NAC na rast endometrioidných lézií u myší, ako je ukázané v príklade 1. Priemerná celková hmotnosť kontrolných (n=10) a NAC liečených (n=10) zvierat, 21 dní po implantácii, so štandardom chyba . Význam p<0,05. Во вставках над гистограммами воспроизведены типичные картины эндометриом для контроля (А) и обработки NAC (В). Полоска: 1 см;

Obrázok 2A ukazuje príkladné semikvantitatívne gély RT-PCR (polymerázová reťazová reakcia v reálnom čase), ako je ukázané v príklade 1. Obrázok 2B ukazuje zníženú expresiu COX-2 a MMP-9 v cystách myší liečených NAC, ako je ukázané v príklade 1 Semikvantitatívne hodnoty RT-PCR spriemerované z 5 kontrolných a 5 myší liečených NAC so štandardnou chybou;

Obrázok 3 ukazuje translokáciu E-kadherínu v cystách myší liečených NAC, ako je ukázané v príklade 1. Reprezentatívne obrázky imunofarbenia E-kadherínom v endometriómoch z kontrolných (A a B) a myší liečených NAC (C a D). V kontrolných vzorkách možno pozorovať difúzne hnedasté sfarbenie v celej cytoplazme epitelových buniek, zatiaľ čo vo vzorkách ošetrených NAC je toto farbenie jasne obmedzené na úrovni kontaktov bunka-bunka. Zväčšenie originálu 40x;

4 ukazuje oslabené farbenie Cox-2 v cystách zvierat liečených NAC, ako je ukázané v príklade 1. Reprezentatívne obrázky imunohistochemického farbenia cýst od kontrolných myší (A-C) a myší liečených NAC (D-F). V kontrolných vzorkách je viditeľná prítomnosť hnedastého sfarbenia vo viacerých oblastiach, zatiaľ čo vo vzorkách ošetrených NAC sa dá len ťažko zistiť. Zväčšenie originálu 40x;

Obrázok 5 ukazuje oslabené Ki-67 farbenie v cystách zvierat liečených NAC, ako je ukázané v príklade 1. Reprezentatívne obrázky imunohistochemického farbenia cýst od kontrolných myší (A-C) a myší liečených NAC (D-F). Šípky ukazujú na zafarbené, proliferujúce bunky. Zväčšenie originálu 40x;

6 je schematické znázornenie doterajšieho stavu techniky demonštrujúce niekoľko mechanizmov, ktoré fungujú, keď sa proliferujúce bunky, ktorých príkladom sú rakovinové bunky, liečia NAC. Tieto mechanizmy sú redukované na diferenciáciu terminálnych buniek. Príklady predkladaného opisu tiež ukazujú, že aspoň niektoré z týchto účinkov sa tiež vyskytujú, ak sa NAC podľa predkladaného vynálezu použije na liečbu endometriózy;

7 ukazuje výsledky predbežnej klinickej štúdie uskutočnenej na celkovom počte 64 žien, 33 liečených NAC a 31 neliečených kontrol. Zmena veľkosti cysty po troch mesiacoch liečby NAC bola meraná ultrazvukom ako maximálny priemer. Na obrázku je znázornená zmena veľkosti cýst v absolútnych číslach u liečených pacientov a kontrol. 7B ukazuje rovnaké porovnanie ako percentuálna zmena.

PODROBNÝ OPIS VYNÁLEZU

NAC vo všeobecnosti

N-acetyl-L-cysteín (NAC) je dobre známy farmaceutický liek s malou molekulou s chemickým vzorcom

Vlastnosti NAC súvisia najmä s jeho tiolovou skupinou, ktorá ho robí účinným vo väčšine biochemických dráh zahŕňajúcich tripeptid glutatión (GSH), prítomný vo všetkých ľudských tkanivách v relatívne vysokých koncentráciách, dokonca aj nad 10 mM. Cysteín je skutočne medzi tromi aminokyselinami obsahujúcimi GSH, takže NAC sa považuje za prekurzor GSH s jeho deacetylovaným cysteínom. NAC bol a je stále široko používaný ako mukolytické činidlo, keď spôsob účinku všeobecne súvisí s redoxnou degradáciou citlivých cysteíndisulfidových mostíkov v hlienových proteínoch. V skutočnosti je NAC zapojený do komplexného redoxného cyklu tiolových skupín, kde pôsobí niekoľko enzýmov. Cyklus tvorby a deštrukcie disulfidu, všeobecný mechanizmus, ktorým je regulovaná aktivita proteínov a bunková signalizácia, má skutočne mimoriadny fyziologický význam. Enzýmy, ako sú napríklad proteínové tyrozínfosfatázy a tyrozínkinázy, hrajú kľúčovú úlohu pri kontrole bunkového cyklu, bunkovej proliferácii a diferenciácii a mnohé z nich sú regulované redoxným stavom ich cysteínov.

Vo všeobecnosti, hoci podrobné mechanizmy účinku neboli presvedčivo objasnené, zdá sa, že NAC pôsobí na všetky biochemické dráhy, kde je zapojený GSH. Enzýmy a proteíny, ktorých aktivita je modulovaná GSH, pôsobia v niekoľkých procesoch buď priamo, alebo prostredníctvom siete signálnych dráh. V tejto situácii môže NAC pôsobiť podobne ako GSH alebo môže byť dokonca účinnejší ako GSH.

GSH napríklad zvyčajne tvorí konjugáty s reaktívnymi metabolitmi tvorenými paracetamolom a podporuje ich detoxikáciu. Keď sa však užije príliš veľa paracetamolu, GSH sa vyčerpá a metabolity paracetamolu začnú interagovať s bunkovými proteínmi, čo v konečnom dôsledku vedie k bunkovej smrti. Pri liečbe prechodného zlyhania pečene po otrave paracetamolom pôsobí NAC namiesto GSH pri detoxikácii metabolitov paracetamolu. Predpokladá sa, že NAC nemá prakticky žiadne nežiaduce vedľajšie účinky, ako nasvedčujú aj vysoké dávky NAC používané pri liečbe otravy paracetamolom – pravdepodobne okolo 40 g/deň pre pacienta s hmotnosťou 70 kg.

Na rozdiel od tripeptidu GSH, ktorý môže byť degradovaný už v žalúdku, jednoduchá molekula NAC voľne difunduje takmer do všetkých tkanív a buniek. Farmakokinetické štúdie NAC stanovili maximálnu plazmatickú koncentráciu dosiahnutú približne za jednu hodinu s polčasom eliminácie približne tri hodiny. Úplné uvoľnenie sa uskutoční medzi šiestou a dvanástou hodinou.

NAC ako antiproliferatívne, diferenciačné činidlo

Nedávno vynálezcovia zistili, že N-acetyl-L-cysteín (NAC) má výrazný antiproliferatívny účinok na rakovinové bunky epitelového pôvodu – rovnakého pôvodu ako bunky endometria (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296). Hoci rakovina a endometrióza sú prevažne nesúvisiace ochorenia, zdieľajú niektoré vlastnosti, ktoré nakoniec viedli vynálezcov k myšlienke, že NAC by mohol byť užitočný aj pri liečbe endometriózy. Najmä endometrióza, podobne ako rakovina, je proliferatívne ochorenie, aj keď s odlišným základným molekulárnym mechanizmom a etiológiou. Pozorovania získané pre rakovinu budú prezentované v tejto špecifikácii ako predpoklad pre účinky NAC a ako pravdepodobný spôsob účinku tiež pri endometrióze.

NAC sa použil na zastavenie proliferácie a vyvolanie diferenciácie v dvoch bunkových líniách adenokarcinómu a v primárnych normálnych keratinocytových bunkách, všetky bunky epitelového pôvodu. V týchto systémoch bola diferenciácia charakterizovaná morfologicky, biochemicky a analýzou génovej expresie (analýzou génovej expresie sa podrobne zaoberá BMC Cancer 2005, 5: 75).

V štúdii rakoviny nebol antiproliferatívny účinok NAC spojený s bunkovou smrťou alebo toxicitou, ale bol výsledkom aktivácie fyziologickej diferenciačnej dráhy, ktorú možno považovať za normalizáciu bunkových funkcií vzhľadom na pôvodné tkanivo.

Okrem zníženej proliferácie sa zmenila aj morfológia rakovinových buniek ošetrených NAC. In vitro, keď sa epitelové bunky aktívne množia, vykazujú nepravidelnú morfológiu – mezenchymálnu morfológiu – a často tvoria niekoľko mnohobunkových vrstiev. Na rozdiel od toho, keď bunky prechádzajú procesom diferenciácie na štruktúru a funkciu ich konečného cieľového tkaniva, prestávajú sa množiť, ich morfológia sa stáva pravidelnou polygonálnou, každá bunka je niekedy hrubšia a tvoria monovrstvu susedných buniek. Tento proces je sprevádzaný zvýšenými spojeniami bunka-bunka a bunka-substrát, čo je v súlade s posunom od proliferujúceho mezenchymálneho k adhezívnemu, menej mobilnému a diferencovanému fenotypu.

Vo všeobecnosti sa po pridaní NAC k rakovinovým bunkám zistila komplexná séria metabolických zmien, z ktorých všetky viedli k zastaveniu nekontrolovanej proliferácie a indukcii ich terminálnej diferenciácie, ako je znázornené v schéme znázornenej na obr.

Najmä ošetrenie NAC vyvolalo významné zvýšenie adhéznych komplexov bunka-bunka a bunka-substrát.Nekontrolovanú proliferáciu možno pripísať stavu, kedy bunky stratili kontaktnú inhibíciu a svoju schopnosť reagovať na diferenciačné signály. Bunky vstupujúce do diferenciačnej dráhy vykazujú výrazné zvýšenie komplexov bunkových spojení a tento proces sa tiež všeobecne označuje ako kontaktná inhibícia. Niektoré dôkazy naznačujú, že signály do buniek na vstup do koncového bodu diferenciácie vytvárajú zložky samotných medzibunkových komplexov. Tieto spojenia sú tiež cestou šírenia signálov medzi bunkami.

Migrujúce bunky, ako sú endometriálne bunky pri endometrióze, musia okrem zníženého množstva adhéznych komplexov mať a vylučovať dostatočné množstvo aktívnych matricových metaloproteináz, enzýmov určených na rozklad extracelulárnej matrice, aby umožnili migráciu cez extracelulárnu matricu. v tomto modeli rakoviny epitelu sa zistilo, že NAC potláča tento enzým, čo naznačuje, že migrácia buniek bola oneskorená. Príklad 1 tohto opisu tiež ukazuje, že NAC, keď sa používa podľa predkladaného vynálezu na liečbu endometriózy, potláča expresiu matricovej metaloproteinázy 9 (MMP-9). To naznačuje, že NAC môže interferovať s bunkovou migráciou z eutopického endometria do nových implantátov (prevencia recidívy) a v endometriotickom tkanive (prevencia ďalších lézií).

Známy účinok NAC súvisí aj s jeho protizápalovým účinkom, dôvodom jeho zaradenia do rodiny nesteroidných protizápalových liekov (NSAID). Profil génovej expresie buniek ošetrených NAC skutočne ukázal supresiu cyklooxygenázy-2 (COX-2), ktorej indukcia je spojená so zápalovými odpoveďami. Tento účinok NAC bol tiež potvrdený v endometriotickom tkanive v príklade 1 tohto opisu, čo naznačuje, že NAC môže tiež zmierniť symptómy spojené so zápalom pri endometrióze.

Ako príklad schopnosti NAC modulovať signálnu transdukciu v bunkách prostredníctvom redox-responzívneho stavu cysteínov bol študovaný enzým nereceptorová tyrozínkináza c-Src na in vitro modeli karcinómu hrubého čreva (CaCo-2) a vaječníkov. bunky karcinómu (OVCAR-3) (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72). c-Src je zapojený do proliferačného/diferenciačného prepínača a je aktívny pri zostavovaní/demontáži asociovaných komplexov a organizácii cytoskeletu. Táto kináza je upregulovaná a nadmerne exprimovaná v mnohých ľudských rakovinách, najmä pri karcinómoch hrubého čreva a vaječníkov. Pozoruhodné medzinárodné úsilie o vývoj liekov je skutočne zamerané na nájdenie špecifických inhibítorov c-Src. Namiesto toho sa zistilo, že jednoduchým ošetrením buniek adenokarcinómu NAC by sa cieľ potlačenia c-Src mohol dosiahnuť prostredníctvom mechanizmu súvisiaceho s redoxnými prechodmi v citlivých cysteínových zvyškoch v c-Src, ktorý je schopný túto kinázu „vypnúť“. , dodáva ho do endolyzozómov, kde je uložený alebo zničený. NAC, ktorý indukoval terminálnu diferenciáciu v bunkách adenokarcinómu, bol teda spojený s downreguláciou c-Src. Stojí za zmienku, že aktivita tejto kinázy sa zdá byť dôležitá počas deciduálnej fázy endometriálneho bunkového cyklu, čo naznačuje, že jej deregulácia sa podieľa na endometrióze (Endocrine Journal, 2008, 55(5): 795-810).

NAC a endometrióza

Ako bolo vysvetlené v predchádzajúcej časti, už bolo navrhnuté, že NAC by sa mohol použiť v nových terapeutických stratégiách pre endometriózu na základe jeho použitia ako antioxidantu a zachytávača ROS. Vo vyššie opísaných štúdiách rakoviny epitelu pôvodcovia tohto vynálezu zistili, že NAC má niektoré prospešné účinky iné ako antioxidačné a účinky akceptora ROS na epitelové rakovinové bunky a že takéto účinky by boli tiež užitočné pri liečbe endometrioidných buniek, ak endometrioidné bunky reagujú podobným spôsobom. Konkrétne sa očakávalo, že antiproliferatívne a diferenciačné účinky NAC zistené pri rakovine by sa mohli vyskytnúť aj pri použití NAC pri liečbe endometriózy.

Predpokladalo sa, že ak má NAC nasledujúce molekulárne účinky pozorované pri rakovine aj na endometrioidné tkanivo, môže byť užitočný pri liečbe endometriózy;

1) zvýšenie spojení bunka-bunka a bunka-substrát v súlade s posunom od proliferujúceho k diferencovanému fenotypu;

2) zníženie expresie matricových metaloproteináz spojených so znížením migrácie buniek;

3) znížená expresia cyklooxygenázy-2 (COX-2) spojená so zníženou zápalovou odpoveďou;

4) modulácia aktivity c-Src na reguláciu cyklu proliferácie/decidualizácie endometria a na podporu možného tehotenstva.

Preto sa predpokladalo, že NAC môže mať pri endometrióze nasledujúce fyziologické účinky:

1) zníženie proliferácie endometriálnych buniek;

2) zníženie lokálneho chronického zápalu, a tým zmiernenie bolesti s ním spojenej;

3) normalizácia zdrojového tkaniva, eutopického endometria, prostredníctvom pravidelnejšieho cyklu proliferácie-diferenciácie;

4) znížený počet ektopických endometriálnych buniek spojených so zníženou pohyblivosťou buniek v dôsledku zníženia tkanivových metaloproteináz a zníženého spojenia bunka-bunka a bunka-substrát;

5) reorganizácia konformácie estrogénových receptorov prostredníctvom opätovného zostavenia disulfidových mostíkov v príslušných cysteínových zvyškoch.

Vo všeobecnosti boli všetky predpokladané výsledky potvrdené buď priamo alebo nepriamo prostredníctvom odpovede pacientov v klinickej štúdii a prostredníctvom histologickej analýzy ich biopsií alebo na zvieracom modeli na úrovni morfológie, histológie, biochémie a molekulárnej biológie.

Vynálezcovia konkrétne zistili, že NAC skutočne znižuje expresiu cyklooxygenázy-2 (COX-2) a matricovej metaloproteinázy 9 (MMP-9) v endometriotickom tkanive. Tiež demonštrujú, že NAC indukuje relokalizáciu E-kadherínu z cytoplazmy do endometriotického tkaniva na medzibunkových spojeniach v tkanive ošetrenom NAC. To naznačuje zvýšenie medzibunkových spojení, čo je v súlade s poklesom bunkovej proliferácie. Iné účinky, ako je zvýšená expresia p21 a znížená expresia Ki-67, tiež naznačujú, že liečba NAC pri endometrióze vedie k zníženej proliferácii buniek. Vynálezcovia tiež demonštrujú, že tieto molekulárne účinky liečby endometriózy NAC vedú k zmenšeniu veľkosti endometriotických lézií, úľave od bolesti a žiaducemu tehotenstvu. Výhodou pri použití NAC na liečbu endometriózy alebo indikácií súvisiacich s endometriózou je, že nie sú potrebné konvenčné hormonálne liečby endometriózy, ktoré potláčajú funkciu vaječníkov. Použitie NAC teda porovnateľne zvyšuje pravdepodobnosť otehotnenia týchto pacientok. Predoperačná liečba NAC tiež viedla k pravidelnejším a kompaktnejším endometriómom, ktoré sa ľahšie odstránili a spôsobili veľmi malé krvácanie počas laparoskopie.

Schéma príjmu

Zo štúdie liečby NAC na bunkových líniách adenokarcinómu a primárnych normálnych keratinocytových bunkách (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296) sa dospelo k záveru, že účinná dávka NAC na vyvolanie antiproliferatívneho diferenciačného účinku sa líšila a závisela od typ bunky. Tkanivový pôvod teda určuje účinnú koncentráciu NAC, ktorá je potrebná na pozorovanie úplného blokovania proliferácie, pre každé tkanivo. Okrem toho dávka NAC tiež korelovala s malignitou buniek. Podrobnejšie, zatiaľ čo normálne bunky vyžadovali nízku dávku na zastavenie proliferácie a spustenie diferenciácie, bunky karcinómu s charakteristickou zlou prognózou vyžadovali vyššiu koncentráciu NAC.

Na účely tohto vynálezu bol navrhnutý dávkovací režim NAC na liečbu endometriózy u cicavcov, vrátane ľudí, na základe nasledujúcich kritérií:

1) dávka NAC za deň, ktorá je v súlade s inými súčasnými klinickými liečbami a ktorá sa považuje za bez nežiaducich vedľajších účinkov;

2) dávka, ktorá sa považuje za dostatočne vysokú na splnenie požiadavky abnormálne proliferujúcich buniek, aby sa dostali do diferenciačnej dráhy;

3) vzhľadom na hlásený pokles plazmatických hladín NAC po predĺženej liečbe (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), prerušenie liečby na približne polovicu každého týždňa sa považovalo za optimálnu biologickú odpoveď na liečbu po dobu dvoch mesiacov alebo dlhšie.

Kompozícia podľa predloženého vynálezu obsahujúca NAC na liečbu endometriózy alebo indikácie spojenej s endometriózou podľa jedného uskutočnenia sa má podávať v dávke od približne 20 do 90 mg/kg/deň. Spodná hranica je založená na dvojnásobku dávky použitej na mukolytický účinok, tj je známe, že má sám o sebe fyziologický účinok. Horná hranica je založená na predstave, že u mnohých pacientov sa zistilo, že vyššie dávky spôsobujú žalúdočné problémy. V ďalšom uskutočnení predloženého vynálezu kompozícia obsahuje NAC na podávanie v dávke približne 30-60 mg/kg/deň. Ukázalo sa, že spodná hranica je účinná pri endometrióze a o hornej hranici je známe, že nemá prakticky žiadne vedľajšie účinky. V ešte ďalšom uskutočnení predloženého vynálezu obsahuje kompozícia NAC na podávanie v dávke približne 30-45 mg/kg/deň. Prekvapivo sa ukázalo, že toto nízke dávkovanie je účinné pri endometrióze.

V jednom uskutočnení sa kompozícia má podávať počas časového obdobia, ktoré je dva mesiace alebo viac, alebo výhodne tri mesiace alebo viac. Aby sa predišlo poklesu hladiny NAC v plazme po dlhodobej liečbe, je možné podávať NAC v predpísanom dávkovaní intermitentným spôsobom, teda podľa intermitentného dávkovacieho/liečebného režimu. Prerušované podávanie alebo liečba znamená, že sa liečba na určitý čas preruší, t.j. že sa farmaceutická kompozícia podáva počas určitého časového obdobia, ako je niekoľko dní, po ktorých nasleduje prestávka v podávaní, keď sa farmaceutická kompozícia určitý čas nepodáva, napr. ako niekoľko dní. Prerušovaná liečba môže byť pravidelná, ako napríklad liečba počas pevne stanoveného počtu dní alebo týždňov, po ktorých nasleduje prestávka na stanovený počet dní alebo týždňov. Príklady zahŕňajú opakované režimy s liečbou počas 4 dní, po ktorých nasleduje prestávka na 3 dni každý týždeň, alebo liečba počas 2 týždňov, po ktorej nasleduje prestávka na 1 týždeň. Špeciálnym prípadom pravidelnej intermitentnej liečby je pulzná liečba, teda pravidelná liečba a dĺžka prestávky, ako napríklad podávanie každý druhý deň alebo podávanie počas dvoch dní, po ktorých nasledujú dva dni voľna atď. Možné sú aj nepravidelné prerušované liečebné režimy, ktoré sa nepravidelne opakujú alebo majú zložitejší režim, ktorý sa opakuje napríklad v závislosti od odpovede na liečbu. V rôznych ilustratívnych uskutočneniach tohto vynálezu sa predpísaná dávka NAC podáva počas 3-5 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasleduje 2-4dňová prestávka, alebo sa podáva počas 1-3 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasleduje 1-2dňová prestávka.

V jednom uskutočnení, s ohľadom na telesnú hmotnosť približne 60 kg, je dávka NAC v rozsahu 1,2 až 5,4 g/deň, výhodne 1,8 až 3,6 g/deň. Táto dávka môže byť rozdelená do dvoch alebo viacerých, výhodne troch alebo štyroch, denných podaní buď jednej alebo dvoch dávok (napr. piluliek), pričom každá dávka môže obsahovať napríklad 0,15-2,7 g NAC alebo výhodne 0,6-1,2 g NAC. Liečba zahŕňa podávanie vyššie uvedených dávok v pulzoch alebo prerušovane, napríklad každý druhý deň alebo počas troch až štyroch po sebe nasledujúcich dní každý týždeň, s prestávkou štyri až tri dni. Minimálne celkové trvanie liečby trvá od dvoch mesiacov, ak nie je stanovené maximálne trvanie. U pacientov s inou hmotnosťou, ako sú jedinci s vyššou alebo nižšou hmotnosťou, ako je uvedené, sa má denná dávka zodpovedajúcim spôsobom upraviť.

V jednom uskutočnení predloženého vynálezu obsahuje farmaceutická kompozícia na liečbu endometriózy alebo symptómov súvisiacich s endometriózou NAC v dávke 150-5400 mg, ktorá sa má podávať v dvoch alebo viacerých podaniach denne počas obdobia aspoň 2 mesiacov, napríklad aspoň 3 mesiace. Vo výhodnom uskutočnení tohto vynálezu farmaceutická kompozícia obsahuje NAC v dávke 230-3600 mg na podávanie v dvoch alebo viacerých podaniach denne počas obdobia aspoň 2 mesiacov, ako napríklad aspoň 3 mesiacov. Liečba zahŕňa podávanie vyššie uvedených dávok v pulzoch alebo prerušovane, napríklad každý druhý deň alebo počas troch až štyroch po sebe nasledujúcich dní každý týždeň s prestávkou na štyri až tri dni.

Farmaceutické kompozície

Farmaceutická kompozícia podľa tohto vynálezu môže byť pripravená spôsobom, ktorý je sám o sebe známy odborníkovi vo farmaceutickej oblasti. Kompozícia môže obsahovať účinné množstvo NAC v súlade s vynálezom, ako aj vhodný nosič alebo excipient, ktorý slúži ako prostriedok na dodávanie alebo médium pre aktívnu zložku. Takéto nosiče alebo excipienty sú v odbore známe a zahŕňajú pevné látky, ako je kyselina citrónová, citrát sodný, uhličitan sodný (kyselina) plus príchuť. Farmaceutická kompozícia je výhodne prispôsobená na perorálne podávanie. Takéto kompozície sa môžu podávať v rôznych formách, v súčasnosti výhodne vo forme tabliet. Možné sú aj iné formy, ako sú kapsuly, čapíky, roztoky, suspenzie, sirupy a podobne.

Vynález vyžaduje prísne hodnotenie farmaceutickej kvality prípravku NAC, aby sa získala účinná dávka. Preto by sa mali používať značky alebo certifikované generické lieky. NAC nie je stabilná molekula, jeho aktívny tiolový zvyšok možno ľahko oxidovať kyslíkom, svetlom a iným žiarením, takže sa nemusí dosiahnuť účinná dávka. Prípravok je teda výhodne chránený pred svetlom v rozpustných tabletách hydrogénuhličitanom sodným, ktorý pomáha pri čiastočnom odstránení kyslíka z vody počas rozpúšťania.

Bolo pozorované, že vysoké dávky NAC môžu spôsobiť bolesť brucha. Aby sa to prekonalo, je možné ponúknuť NAC v prostriedku na ochranu žalúdka, ktorý je vhodný na zabránenie uvoľňovania/rozpustnosti NAC v žalúdku. Takéto kompozície sú v odbore dobre známe a môžu sa použiť v predloženom vynáleze. Môžu sa napríklad použiť obaly tabliet, ktoré sú odolné voči žalúdočným tekutinám a umožňujú uvoľňovanie liečiva až v čreve po prechode žalúdkom. Bežne používané kompozície zahŕňajú polyméry, ako sú deriváty celulózy, kopolyméry metakrylátových aminoesterov. Povlak chráni jadro tablety pred degradáciou v kyslom prostredí žalúdka použitím polyméru citlivého na pH, ktorý po prechode žalúdkom napučiava alebo sa solubilizuje v reakcii na zvýšenie pH, aby sa uvoľnilo liečivo.

Ďalšou možnosťou je súčasne znížiť dávku NAC vstupujúceho do krvného obehu. Zavedenie NAC trikrát alebo viackrát denne môže byť pre pacienta náročné. Napriek tomu môže byť žiaduce opakované podávanie, aby sa dosiahla takmer konštantná koncentrácia NAC v sére. Na prekonanie týchto problémov môže byť pre pacienta jednoduchšie podávanie raz alebo dvakrát denne, napríklad ráno a večer. Jednou z možností je ponúknuť NAC vo formulácii s pomalým uvoľňovaním (tiež označované ako postupné uvoľňovanie alebo riadené uvoľňovanie). Takáto kompozícia umožňuje podávať väčšiu dávku v dlhších intervaloch, pretože je schopná znížiť rýchlosť difúzie a absorpcie NAC do krvného obehu. Dávka sa potom distribuuje do krvi počas dlhého časového obdobia v malých množstvách, napr. v priebehu 12 + 12 hodín v prípade režimu dvakrát denne. V odbore je dlho známych mnoho rôznych technológií a kompozícií na predĺžené uvoľňovanie a môžu sa použiť v predloženom vynáleze. V takýchto technológiách je účinná látka napríklad zapuzdrená v obale alebo matrici, ktorá je nerozpustná alebo menej rozpustná v telesnej tekutine, do ktorej sa podáva. Kompozície s kombinovaným účinkom pomalého uvoľňovania a ochrany žalúdka sú tiež možné a môžu sa použiť v predloženom vynáleze.

Použitie/lekárske indikácie podľa tohto vynálezu

Ukázalo sa, že tento vynález je užitočný v mnohých aspektoch súvisiacich s endometriózou a môže byť použitý ako na liečbu endometriózy, tak aj na liečbu rôznych indikácií spojených s endometriózou. Pod liečbou rôznych indikácií spojených s endometriózou rozumieme napríklad liečbu na zmiernenie symptómov ochorenia, akými sú bolesť a zápal; liečba na zvýšenie šance na otehotnenie; predbežná liečba pred chirurgickým zákrokom na uľahčenie odstránenia endometriálnych lézií a na zlepšenie výsledku operácie; liečba po operácii, aby sa zabránilo opätovnému výskytu lézií; a profylaktickú liečbu v prípade potvrdených, posúdených rizikových faktorov alebo prítomnosti dedičnej endometriózy.

Ukázalo sa, že NAC podľa predkladaného vynálezu znižuje veľkosť lézie a vracia proliferatívne tkanivo do diferencovanejšieho normálneho tkaniva. V jednom uskutočnení predkladaného vynálezu teda farmaceutická kompozícia obsahuje NAC na liečbu endometriózy na redukciu - prípadne vymiznutia - endometriómov, adhézií, peritoneálnych implantátov a hlbokých lézií lokalizovaných v rektovaginálnom septe alebo inde.

Ukázalo sa tiež, že NAC podľa predkladaného vynálezu zmierňuje symptómy bolesti spôsobenej endometriózou. V ďalšom uskutočnení tohto vynálezu teda farmaceutická kompozícia obsahuje NAC na zmiernenie bolesti spojenej s endometriózou.

V ešte ďalšom uskutočnení predloženého vynálezu obsahuje farmaceutická kompozícia NAC na vyvolanie požadovaného tehotenstva u pacientky s endometriózou.

V ešte ďalšom uskutočnení predkladaného vynálezu farmaceutická kompozícia obsahuje NAC na predbežné ošetrenie pred laparoskopiou alebo chirurgickým zákrokom v prípadoch endometriózy, na uľahčenie odstránenia hmoty, zníženie krvácania, aby boli tkanivá kompaktnejšie/menej krehké.

V ďalšom uskutočnení predloženého vynálezu obsahuje farmaceutická kompozícia NAC na prevenciu recidívy po laparoskopii alebo chirurgickom zákroku.

V ďalšom uskutočnení predloženého vynálezu obsahuje farmaceutická kompozícia NAC na použitie v prípade potvrdených, hodnotených rizikových faktorov na prevenciu endometriózy v dôsledku dedičného ochorenia.

Ďalej bude vynález ďalej opísaný a ilustrovaný pomocou nasledujúcich príkladov. Treba však poznamenať, že tieto príklady by sa nemali chápať ako obmedzenie vynálezu akýmkoľvek spôsobom.

Príklad 1 Účinok NAC v myšom modeli endometriózy

Materiály a metódy

Látky. Pokiaľ nie je uvedené inak, všetky chemikálie boli od Sigma-Aldrich, Miláno, Taliansko.

Zvieratá. 36 samíc myší BALB/C vo veku 6-8 týždňov bolo zakúpených od Charles River Italia (Calco, Taliansko). Pelety (obohatená štandardná strava; Mucedola, Miláno, Taliansko) a voda boli poskytnuté ad libitum. Zvieratá boli chované v 16/8 hodinovom cykle svetlo/tma za kontrolovaných podmienok. Pred akýmkoľvek invazívnym postupom boli myši anestetizované intraperitoneálnou injekciou 0,4 ml fyziologického roztoku obsahujúceho 2,5 % avertínu.

vyvolanie endometriózy. Indukcia endometriózy sa uskutočňovala podľa metódy opísanej v Somigliana et al, Hum Reprod 1999 Dec;14(12):2944-50. Chirurgické zákroky boli vykonávané v čistých podmienkach. Stručne, maternicové rohy syngénnych myší boli odstránené cez malý stredný rez v bruchu tesne pod pupkom a umiestnené do Petriho misky obsahujúcej fyziologický roztok pufrovaný fosfátmi (PBS). Fragmenty endometria sa získali jemným rozdrvením rohov maternice pomocou žiletky. Fragmenty sa suspendovali v 0,6 ml PBS a rýchlo sa inokulovali do brušnej dutiny myší príjemcov v pomere jeden darca k dvom príjemcom. Myši s indukovanou endometriózou boli náhodne rozdelené do dvoch skupín po 12 myšiach: kontrola a liečba NAC.

spracovanie NAC. Jeden deň po implantácii endometria myší z liečenej skupiny sa podrobili kŕmeniu sondou so 100 ul zásobného roztoku NAC vo vode s koncentráciou 10 mg/ml. Kontrolná skupina dostávala iba vodu. Zavedenie NAC pokračovalo denne počas 21 dní. Ak vezmeme do úvahy priemernú telesnú hmotnosť myši 22,5 ± 0,7, dávka NAC 1 mg/myš zodpovedá 44 mg/kg/deň. Nezistili sa žiadne známky toxicity dávky na základe telesnej hmotnosti – nezmenené na konci liečby – v súvislosti s príjmom potravy, starostlivosťou alebo úrovňou aktivity v porovnaní s kontrolami. Na konci liečby boli myši usmrtené dislokáciou krčných stavcov.

odber endometriómov. Na konci liečby sa zvieratá usmrtili a endometrioidné lézie sa opatrne vyrezali z okolitého tkaniva a stanovila sa ich celková hmotnosť a počet. Cysty boli buď okamžite fixované v 10% formalíne alebo zmrazené v tekutom dusíku a skladované pri -80 °C.

Histológia a imunohistochémia. Vzorky fixované formalínom sa zaliali do parafínu a tkanivové rezy (hrúbka 5 um) sa zafarbili pomocou hematoxylín-eozín. Všetky preparáty boli hodnotené skúseným patológom, ktorý konal ako slepý voči štúdii, a histologická diagnóza endometriózy bola založená na morfologickej identifikácii endometriálneho glandulárneho tkaniva a strómy.

Pre imunohistochémiu boli rezy zbavené parafínu a rehydratované v značkovom etanole. Na získanie antigénu boli rezy ohrievané mikrovlnami počas 6 minút v 0,1 M citrátovom pufri (pH 6,0) a aktivita endogénnej peroxidázy bola blokovaná inkubáciou počas 20 minút v 3% H202/metanol. Rezy sa premyli v PBS/TritonX-100, ponorili sa na 15 minút do 1% PBS-hovädzieho sérového albumínu (BSA), aby sa zablokovali nešpecifické väzbové miesta, a potom sa inkubovali s vybranou primárnou protilátkou zriedenou v 1% PBS-BSA. Na imunotest cyklooxygenázy (COX)-2 (polyklonálna od králika k myši, Cayman Chemical, Miláno, Taliansko), Ki-67 (polyklonálnej od králika k človeku, Monosan Xtra, DBA Italia, Segrate, Taliansko) a E-kadherínu (BD Biosciences, Miláno, Taliansko) inkubácia sa uskutočňovala cez noc pri 4 °C a riedenia boli 1:100, 1:600, 1:200. Imunohistochemické farbenie pokračovalo s použitím DAKO Cytomation LSAB2 System-HRP (Dako Italia, Miláno, Taliansko) a väzbové miesta protilátky sa vizualizovali pomocou králičieho roztoku polyklonálnych protilátok proti ľudskému streptokoku s komplexom avidín-biotín peroxidáza s použitím diaminobenzidínu ako chromogénu. Rezy boli kontrastne zafarbené hematoxylínom, dehydratované, umiestnené do kanadského balzamu a potom pozorované pod mikroskopom Leica. Expresia Ki-67 bola kvantifikovaná slepým spôsobom s dvoma nezávislými pozorovateľmi; každý pozorovateľ spočítal aspoň 200 buniek vo viac ako 10 náhodne vybraných poliach pre každú vzorku a index značenia Ki-67 bol vyjadrený ako percento.

Extrakcia RNA, semikvantitatívna RT-PCR (reverzná transkripčná polymerázová reťazová reakcia) a qRT-PCR (kvantitatívna RT-PCR). Celková RNA sa izolovala lýzou zmrazených endometriálnych cýst pomocou TissueLyser (QIAGEN, Miláno, Taliansko) s použitím činidla Trizol (Invitrogen, Miláno, Taliansko) podľa pokynov výrobcu. Jeden mikrogram celkovej RNA z každej vzorky bol štiepený 1 U DNázy I (Invitrogen) a reverzne transkribovaný 200 U reverznej transkriptázy Superscript III (Invitrogen) s použitím 250 ng náhodne vybraných primérov v 20 ul finálneho objemu. Rovnaký cDNA produkt získaný z každej vzorky sa použil na následnú PCR amplifikáciu so súbormi primérov získanými pre cieľové gény. Ako vnútorná kontrola sa použil konštitutívny gén 18S RNA. Negatívne kontrolné vzorky pozostávali z reakčnej zmesi a primerov bez cDNA templátu. Sekvencie primérov (tabuľka 1) boli vytvorené pomocou softvéru Primer-BLAST dostupného online na: http://www.ncdi.nlm.nih.gov/

Najprv sa vypočítal pomer medzi vzorkou a konštitutívnym génom synchrónnou amplifikáciou génovo špecifickej mRNA a 18S RNA v jednej reakčnej skúmavke. Keďže tento postup nebol úspešný pre všetky vzorky – možno kvôli relatívne malému počtu špecifických transkriptov a teda preferenčnej amplifikácii 18S mRNA – aby sa predišlo kvantitatívnym nepresnostiam vyplývajúcim z kompetitívnych efektov, cieľové gény a 18S cDNA vytvorené v jednom a rovnaké RT reakcie sa amplifikovali v oddelených skúmavkách. Na dokumentáciu exponenciálnej amplifikácie sa vytvoril graf amplifikácie pre 18S RNA a vybral sa vhodný počet cyklov. Semikvantitatívna PCR sa uskutočnila v reakčnom objeme 25 ul s 1 ul cDNA, 2 mM MgCl2, 0,2 mM dNTP, 0,5 uM každého priméru a 1,25 U Hotstart Taq polymerázy (QIAGEN). PCR amplifikácia sa uskutočnila pomocou iCycler (Bio-Rad, Miláno, Taliansko). Potom boli produkty PCR elektroforeticky separované na 1,5 % agarózovom géli a zafarbené etídium bromidom. Hladiny cieľovej mRNA sa hodnotili denzitometrickým skenovaním a normalizovali sa proti kontrolám naloženým 18S. Denzitometrické analýzy produktov PCR sa uskutočnili pomocou zobrazovacieho softvéru Quantity One (VersaDOC, Bio-Rad).

stôl 1
Sekvencia primerov, použite pre semikvantitatívnu qRT-PCR
Cieľová mRNA	Priméry	Následná sekvencia	Žíhanie (30 sekúnd)	Počet cyklov	PCR produkt (bp)
18S RNA NR_003278.1	priamy reverz	CGCGGTTCTATTTTGTTGGT	60 °C	18-24	219
AGTCGGCATCGTTTATGGTC
SOH-2 NM_011198.3	priamy reverz	CCCCCCAGTCAAAGACACT	60 °C	35	196
AGTTGCTCATCACCCCACTC
MMP-9 NM_013599.2	priamy reverz	TGAATCAGCTGGCTTTTGTG	60 °C	35	242
GTGGATAGCTCGGTGGTGTT
P21 (cdknla) NM_007669.4	priamy reverz	TCCACAGCGATATCCAGACA	60 °C	35	196
ACGAAGTCAAAGTTCCCACCG

výsledky

Účinok liečby NAC na rast endometriotických lézií. Dvadsaťjeden dní po indukcii endometriózy boli všetky experimentálne myši usmrtené a ich endometriómy boli odstránené a zozbierané. Z 12 kontrolných myší jedna uhynula a u jednej sa nevyvinuli endometriómy. Z 12 myší liečených NAC sa u dvoch nevyvinuli endometriómy. Morfologicky boli ektopické lézie veľké, cystické a vaskularizované: tvorili cysty naplnené tekutinou, ktoré mali buď bielu, červenú alebo občas hnedú farbu a boli prednostne lokalizované na peritoneu brušnej panvovej dutiny. V prílohách na obrázku 1.1 uvádzame reprezentatívne obrázky cýst z kontrolných (A) zvierat a zvierat liečených NAC (B). V priemere bolo pozorované významné zníženie hmotnosti v liečenej skupine (n=10) v porovnaní s kontrolami (n=10) (obrázok 1).

NAC znižuje expresiu COX-2 a MMP-9 a vypína proliferáciu. Analýza RT-PCR ukázala, že v porovnaní s cystami z kontrolných myší (n=5) liečba NAC (n=5) vyvolala významný pokles hladín mRNA COX-2 (-32 %) a MMP-9 (-34 %) , spoluvýznam p<0,01, которые нормализовали к экспрессии 18S (Фиг.2А и В). Ген Р21, обычно экспрессирующийся только, когда цикл пролиферации блокирован, ни разу не экспрессировался в 5 контролях, хотя он экспрессировался в 3 из 5 изучаемых NAC-обработанных образцах (типичный пример на Фиг.2А).

NAC uvádza do pohybu relokalizáciu E-kadherínu. Imunohistochemická detekcia E-kadherínu bola pozitívna v 100 % študovaných prípadov. Značenie bolo obmedzené na glandulárne epiteliálne bunky, zatiaľ čo žiadna zo vzoriek nevykazovala stromálne farbenie. Na bunkovej úrovni v cystách kontrolných myší pôvodcovia zistili, že farbenie E-kadherínom bolo rozptýlené po celej bunkovej cytoplazme, zatiaľ čo v cystách myší liečených NAC sa E-kadherín nachádzal hlavne pozdĺž medzibunkových spojov (obrázok 3). E-kadherín je súčasťou multiproteínového adhézneho komplexu, preto jeho zvýšená prítomnosť na hraniciach buniek indikuje zvýšenie medzibunkových adhézií. Okrem toho a v súlade s expresiou P21 opísanou vyššie je toto premiestnenie v súlade so stratou proliferatívneho správania v bunkách prepnutých na terminálnu diferenciáciu (Conacci-Sorrell a kol., J. Clin. Invest. 2002, 109: 987-991; Parasassi a kol., Cell Death Differ 2005, 12: 1285-1296).

Liečba NAC znižuje množstvo Cox-2 v endometriómoch. Imunohistochemická detekcia proteínu Cox-2 spojeného so zápalom ukázala, že v porovnaní s cystami z kontrolných myší vzorky odobraté z myší liečených NAC vykazovali skôr slabé zafarbenie, ktoré v niektorých prípadoch úplne chýbalo (obrázok 4).

NAC znižuje počet proliferujúcich buniek. Antigén Ki-67 (Ki-67) je klasický marker bunkovej proliferácie v bunkách pokojovej fázy, ktorým úplne chýba expresia Ki-67. Keď sa použili na farbenie cýst kontrolných myší, bolo možné detegovať niekoľko značených buniek (šípky v paneloch A-C na obrázku 5). Namiesto toho sa v cystách myší liečených NAC našlo veľmi málo značených buniek (šípky na paneloch D-F na obrázku 5). Štatistické vyhodnotenie uskutočnené na 8 zvieratách v každej skupine (10 obrázkov/200 myších buniek) poskytlo 54 % zníženie proliferujúcich buniek (tabuľka II).

Diskusia

Zvierací model endometriózy bol účinný pri indukcii ektopických endometriálnych implantátov. Iba jedno zviera v kontrolnej skupine a dve v skupine liečenej NAC nemali endometriómy.

Ako sa očakávalo, hmotnosť - v pomere k veľkosti - cýst bola nižšia u myší liečených NAC. Toto možno vysvetliť antiproliferatívnym účinkom NAC (Parasassi a kol., Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), ktorý je tu obšírne ilustrovaný analýzou génovej expresie a imunohistochémiou. Skutočne, P21, gén exprimovaný iba v diferencujúcich sa neproliferujúcich bunkách, bol pozorovaný u 60 % zvierat liečených NAC, zatiaľ čo u kontrolných zvierat nebol exprimovaný. Na rozdiel od toho proteín Ki-67, ktorý je exprimovaný iba v proliferujúcich bunkách, vykazoval 54% zníženie koncentrácie NAC v porovnaní s kontrolnými myšami.

Relevantné proteíny pri endometrióze, ako je MMP-9 (Collette a kol., Hum Reprod 2006; 21: 3059-3067) a Cox-2 (Carli a kol., Endocrinology 2009; 150: 3128-3137), vykazovali pokles po liečbe NAC. MMP-9 sa považuje za nevyhnutný pre pohyb buniek a invazívne správanie, zatiaľ čo Cox-2 je učebnicový enzým spojený so zápalom. Oba príbuzné gény vykazovali po liečbe NAC pokles približne o 30 %. Okrem toho sa množstvo Cox-2 študovalo aj histochemickým farbením v cystách a výsledky ukázali relevantné zoslabenie farbenia.

Na základe všeobecne akceptovaného konceptu, ktorý považuje cytoplazmatický E-kadherín za marker bunkového proliferatívneho správania, zatiaľ čo jeho prítomnosť v medzibunkovom adhéznom komplexe sa naopak považuje za marker aj ako induktor diferenciácie, vynálezcovia tiež študovali lokalizácia E-kadherínu v cystách kontrolných myší a myší liečených NAC. Výsledky sú v dokonalom súlade s predchádzajúcimi údajmi získanými pôvodcami o bunkách adenokarcinómu (Parasassi a kol., Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), čo naznačuje pohyb E-kadherínu z bunkovej cytoplazmy k hraniciam buniek. po liečbe NAC. Toto spojenie E-kadherínu s adhéznym komplexom je tiež v súlade s menej mobilným a menej invazívnym správaním buniek.

Záverom možno povedať, že vo všetkých uvažovaných ohľadoch môže NAC predstavovať optimálnu liečbu endometriózy. Pri prenesení na liečbu žien má tento liek významnú výhodu, v porovnaní s veľkosťou nežiaducich účinkov pri hormonálnej liečbe nemá prakticky žiadne vedľajšie účinky. Preto sa NAC môže použiť na zníženie veľkosti cýst, na zníženie lokálneho zápalu a súvisiacej chronickej bolesti a na zníženie recidívy po operácii. Tento posledný bod je spôsobený zníženou proliferáciou a zníženou pohyblivosťou buniek.

Príklad 2 Predbežná klinická štúdia účinku NAC pri liečbe endometriózy.

Účel štúdie. Táto pilotná klinická štúdia bola navrhnutá na liečbu žien s endometriózou pomocou NAC namiesto iných liečebných postupov. Jedinou možnou doplnkovou liečbou boli analgetiká na zmiernenie bolesti v prípade potreby.

Kritériá zaradenia pacienta. Do štúdie boli zaradené ženy s počiatočnou diagnózou endometriózy na základe bolesti a potvrdením ochorenia ultrasonografiou vaječníkov a pacientky s recidívou bolesti a/alebo ovariálneho endometriómu po laparoskopickej liečbe.

Pred liečbou sa merala intenzita symptómov bolesti pomocou 10-bodovej vizuálnej analógovej stupnice (VAS) a charakteristiky ovariálnych endometriómov pomocou transvaginálneho ultrazvuku. Počas liečby NAC boli iné liečby vylúčené, s výnimkou analgetika na liečbu bolesti v prípade potreby.

pacientov. Od februára 2008 do júla 2010 bolo do štúdie zaradených 64 žien s priemerným vekom 35±7 rokov (±SD) s diagnostikovanou ovariálnou endometriózou, z ktorých 33 bola predpísaná liečba NAC (priemerný vek: 37±6 rokov), pričom obaja 31 nesledovali NAC ani žiadnu inú liečbu a považovali sa za kontroly (priemerný vek: 33 ± 8 rokov). Všetky mali jednu alebo viac cýst v jednom alebo oboch vaječníkoch.

Liečba. Predpísaná dávka NAC bola blízka dávke použitej v štúdii na zvieratách, 30 mg/kg/deň. V praxi sa pri priemernej telesnej hmotnosti 60 kg všetkým registrovaným pacientom predpisovali tri perorálne dávky 600 mg NAC trikrát denne počas troch po sebe nasledujúcich dní každý týždeň so štyrmi dňami voľna. Výsledkom bolo 1,8 g NAC za deň, 5,4 g za týždeň, 21,6 g za mesiac. Tieto presné liečby boli založené na nasledujúcich úvahách: 1) dávka 1,8 g NAC denne je v súlade s inými súčasnými klinickými liečbami a považuje sa za bez nežiaducich vedľajších účinkov; 2) stanovené farmakokinetické parametre NAC, tri denné dávky 0,6 mg sa približujú takmer konštantným plazmatickým hladinám bez nepohodlia pre pacientov počas komplexnej liečby; 3) zistili hlásený pokles plazmatických hladín NAC po predĺženej liečbe (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), zastavenie liečby na približne polovicu každého týždňa poskytuje optimálnu biologickú odpoveď v dlhodobom horizonte liečby, napríklad dva až šesť mesiacov alebo dlhšie.

Kontrola. Intenzita symptómov bolesti (škála bolesti VAS) a veľkosť ovariálnych endometriómov (klinické a US vyšetrenie) sa hodnotili po prvých troch mesiacoch liečby. V prípade potreby bola po 3 mesiacoch vykonaná laparoskopická liečba.

výsledky

Údaje po prvom trojmesačnom období sledovania sú opísané nižšie.

Zmena veľkosti cysty (nezmenená, zväčšená alebo zmenšená) po troch mesiacoch liečby NAC, meraná ultrazvukom ako maximálny priemer, je znázornená na obrázku 7A (absolútny počet cýst) a obrázku 7B (percento cýst). Obrázky ukazujú porovnanie cýst u pacientov liečených NAC a cýst u neliečených kontrol. V percentách (obr. 7B) sa redukcia veľkosti cysty pozorovala v 38 % prípadov, zatiaľ čo u kontrol len menej ako 10 % prípadov vykazovalo spontánnu redukciu. Vzhľadom na zmenšenie veľkosti endometriómov sa niekoľko (21 z 33) pacientok rozhodlo zrušiť alebo odložiť plánovanú laparoskopiu.

Zmenila sa aj bolesť po liečbe NAC. Bolesť bola hodnotená pred a po troch mesiacoch liečby na 10-bodovej vizuálnej analógovej škále (VAS), kde nula predstavovala žiadnu bolesť a 10 predstavovalo najhoršiu bolesť, akú si možno predstaviť. Intenzita symptómov bola klasifikovaná ako neprítomná (0), mierna (1-4), stredná (5-7) alebo ťažká (8-10). Pacienti liečení NAC hlásili priemerné zníženie bolesti o 7,6±0,3 až 5,1±0,8 (p<0,01) после трех месяцев лечения.

Neboli hlásené žiadne škodlivé vedľajšie účinky.

Hoci pôvodcovia vynálezu nehodnotili, či si pacientky želali otehotnieť, a preto nemôžu charakterizovať štatistickú významnosť zistení, pôvodcovia tiež uvádzajú tri tehotenstvá, ktoré zjavne nie sú možné pri súčasne používaných terapiách endometriózy zameraných na potlačenie funkcie vaječníkov.

Pozoruhodné bolo pozorovanie opísané skúseným chirurgom, že pri laparoskopii po liečbe NAC bol endometrióm pravidelnejší a kompaktnejší a ľahšie sa odstránil, a preto bol spojený s významným znížením krvácania počas laparoskopie.

V ešte inom prípade uzol na rektovaginálnej priehradke zmizol, čo naznačuje účinnosť NAC mimo ovariálnych endometriómov.

Príklad 3 Účinky pulznej, prerušovanej a dennej liečby NAC na experimentálne indukovanú endometriózu: Vaginálna hypersenzitivita potkanov ako signál bolesti - pilotná štúdia

Materiály a metódy

Zvieratá. Použilo sa 16 dospelých neoplodnených samíc potkanov Sprague-Dawley. Na začiatku štúdie vážili 200 až 230 g a boli držané jednotlivo v miestnosti s kontrolovanou teplotou v plastových klietkach s lôžkom. Potkany mali voľný prístup k vode a krysej potrave a boli držané v 12-hodinovom cykle svetlo/tma so zapnutými svetlami o 7:00. Reprodukčný stav (pre-estrus, estrus, post-estrus a diestrus) sa určoval denným vaginálnym výplachom.

Experimentálny model a predchirurgický tréning. Pred indukciou endometriózy boli potkany trénované, aby vykonali vyhýbaciu reakciu na zastavenie expanzie vagíny produkovanej nafukovacím latexovým balónom. Malý, nenafúknutý latexový balónik bol pripojený k tenkému katétru namazanému pred vložením do stredu vaginálneho kanála. Nafúknutím balónika rôznymi objemami vzduchu sa natiahol vaginálny kanál. Tlak produkovaný každým expandovateľným objemom sa meral na kontrolu pomocou prevodníka tlaku s malým objemom. Testovacím zariadením bola malá valcová plexisklová komora navrhnutá tak, aby držala potkana takým spôsobom, aby sa mu zabránilo v otáčaní. Otvorenie zadnej časti komory umožnilo pripojiť katéter pripojený k vaginálnemu stimulátoru k stimulačnému zariadeniu. Fotosenzitívny prvok určoval polohu potkana v komore. Ak sa potkan v rámci vyhýbavej reakcie natiahol, svetelný lúč sa prerušil a expozícia sa zastavila. Potkany sa nechali usadiť v testovacej komore umiestnením do komory na 15 minút denne počas 5 dní. Potkany boli potom trénované počas tréningov, aby podstúpili mechanickú vyhýbaciu reakciu na zníženie vaginálnej distenzie, ktorá zahŕňala vytiahnutie hlavy potkana von, aby sa prerušil svetelný lúč. Všetky potkany boli trénované v vyhýbacích reakciách v 4 sedeniach. Po tréningu sa začalo testovanie.

Testovacie sedenia sa uskutočňovali 3-krát týždenne v dňoch, ktoré nenasledujú po sebe. Každá testovacia relácia zahŕňala sériu kontrolovaných pokusov o vyhýbanie sa. Každý pokus pozostával z rýchleho nafúknutia balónika (1 ml/s) na fixný objem, ktorý sa udržiaval buď dovtedy, kým potkan nevykonal vyhýbaciu odpoveď, alebo počas 15 sekúnd a balónik sa rýchlo vyfúkol. Rôzne expanzné objemy, vrátane kontrolného objemu (0,01 ml), boli injikované každý trikrát náhodne. Maximálna doba čakania 15 sekúnd sa považovala za žiadnu odpoveď.

Čas do odozvy a vyhýbacie reakcie sa merali ako funkcia objemu expanzie pre každú reláciu, ako je opísané v Cason AM a kol. (Horm Behav. (2003), zväzok 44, strany 123-31). Čím kratší je čas do odozvy a čím menší je objem odozvy, tým silnejšia je vyhýbacia reakcia u potkana. Pre každého potkana sa spojili vyhýbacie reakcie a tlak/objem pre všetky relácie u daného potkana (najmenej 12 sedení) a vypočítali sa priemerné hodnoty. Všetky štyri experimentálne skupiny (pozri nižšie) zistili, že východiskové vyhýbacie reakcie na vaginálnu distenziu pred operáciou endometriózy boli veľmi podobné.

vyvolanie endometriózy. Endometrióza u potkanov môže byť experimentálne vyvolaná autotransplantáciou častí maternice. Chirurgia endometriózy sa uskutočnila podľa protokolu pôvodne vyvinutého Vernonom a Wilsonom 1985 (Fertility and Sterility, 1985, zväzok 44, strany 684-694). Potkany v diestre boli anestetizované, umiestnené na vyhrievaciu podložku, aby sa udržala telesná teplota, a bola vykonaná operácia. V strednej línii brušnej dutiny sa urobil rez na otvorenie maternice. Štyri kusy maternicových rohov boli prišité okolo alternatívnej kaskády mezenterických artérií, ktoré vyživujú kaudálne tenké črevo. Pooperačné zotavenie bolo hladké a pravidelné cykly estru sa obnovili u všetkých potkanov do jedného týždňa.

ošetrenie NAC.

Všetky potkany boli liečené NAC v dávke 60 mg/kg/deň (ak je to vhodné, v deň podania) alebo placebom počas 8 týždňov po operácii. Potkany boli rozdelené do štyroch experimentálnych skupín:

Prvá skupina dostávala pulznú liečbu NAC, t.j. liečbu každý druhý deň.

Druhá skupina dostávala intermitentnú liečbu NAC, tj dennú liečbu počas 5 dní a 2 dni bez liečby (tj 2 dni bez liečby).

Tretia skupina dostávala dennú liečbu NAC.

Štvrtá skupina dostala simulovanú liečbu, t.j. liečbu placebom.

Po 8 týždňoch sa hodnotila vyhýbacia odpoveď na zastavenie vaginálnej distenzie, ako je opísané vyššie.

výsledky

Výsledky ukazujú, že vaginálna hyperalgézia (zvýšená citlivosť na bolesť) bola vyvolaná u potkanov po operácii maternice.

Vyhýbacia odozva (tj čas do odozvy a počet reakcií do 15 sekúnd pre danú mieru natiahnutia v porovnaní s kontrolnou skupinou) a vaginálny tlak boli stanovené pre rôzne objemy natiahnutia vaginálneho kanála. Sú uvedené výsledky pre štyri rôzne experimentálne skupiny (hodnoty pre skupinu s falošnou liečbou sa použili ako východiskové hodnoty).

Relatívne zníženie odozvy na vyhýbanie sa pri objeme natiahnutia 0,5 ml v porovnaní so skupinou so simulovanou liečbou bolo:

1. Pre skupinu ošetrenia pulzom NAC: 32 % zníženie vyhýbacej reakcie;

2. Pre skupinu s prerušovanou liečbou NAC: 28 % zníženie vyhýbavej odpovede;

3. Pre skupinu s dennou liečbou NAC: 18 % zníženie vyhýbavej odpovede.

Výsledky teda ukazujú, že účinok na zníženie bolesti vyvolaný liečbou NAC bol výraznejší v skupine s pulznou liečbou a v skupine s prerušovanou liečbou v porovnaní so skupinou s dennou liečbou.

1. Spôsob liečenia cicavca s endometriózou, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa pulzné alebo prerušované orálne podávanie počas 3 až 5 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasleduje 2 až 4 dňová prestávka, alebo 1 až 3 po sebe nasledujúce dni, po ktorých nasleduje 1 až 2 dňová prestávka liečiva. kompozíciu obsahujúcu N-acetyl-L-cysteín, počas obdobia aspoň dvoch mesiacov, kde sa N-acetyl-L-cysteín podáva v dávke 20 až 90 mg/kg/deň na deň podávania.

2. Použitie podľa nároku 1, kde N-acetyl-L-cysteín sa podáva v dávke 30 až 60 mg/kg/deň v deň podania.

3. Použitie podľa nároku 2, kde N-acetyl-L-cysteín sa podáva v dávke 30 až 45 mg/kg/deň v deň podania.

4. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín je chránená pred svetlom.

5. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín je vo vode rozpustná tableta.

6. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín obsahuje hydrogénuhličitan sodný.

7. Spôsob podľa nároku 1, v y z n a č u j ú c i s a t ý m, že farmaceutická kompozícia obsahujúca N-acetyl-L-cysteín obsahuje polymérny povlak tablety na báze derivátov celulózy alebo kopolymérov metakrylátových aminoesterov, ktorý poskytuje intestinálne uvoľňovanie liečiva.

8. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že sa používa na liečenie bolesti spôsobenej endometriózou.

LÁTKA: skupina vynálezov sa týka medicíny a týka sa stabilného zloženia nanoštruktúrovaného sildenafilu, ktorý inhibuje cGMP-špecifickú fosfodiesterázu typu 5 (PDEV), obsahujúci nanoštruktúrovanú sildenafilovú bázu alebo jej farmaceuticky prijateľné soli s priemernou veľkosťou častíc menšou ako asi 500 nm, stabilizátor, kde sa kompozícia získa v prietokovom kontinuálnom reaktore založenom na mikrofluidnej technológii a kde kompozícia má semiamorfnú štruktúru.(57) Vynález sa týka oblasti medicíny a je určený na ovplyvnenie mikrocirkulácie v kostnom tkanive pri experimentálnej osteoporóze a zlomeninách s ňou spojených. // 2540481

[0001] Vynález sa týka farmaceutického priemyslu a je to očný roztok obsahujúci riboflavín a vitamín E na ochranu vnútorných štruktúr očnej gule pred UV-A lúčmi alebo na liečbu keratokonu transepiteliálnym zosieťovaním.

Vynález sa týka farmaceutického priemyslu a ide o vyvážený infúzny roztok obsahujúci chlorid sodný, draselný a horečnatý, rozpúšťadlo a L-arginín sukcinát sodný vzorca: a zložky v roztoku sú v určitom hmotnostnom pomere. ÚČINOK: vynález poskytuje zvýšenú detoxikačnú aktivitu, nízku toxicitu a širokú oblasť klinickej aplikácie. 11 tab., 6 ex.

[0001] Vynález sa týka spôsobu liečenia cicavca s endometriózou. Táto metóda zahŕňa pulzné alebo prerušované perorálne podávanie počas 3-5 po sebe nasledujúcich dní, po ktorých nasleduje 2-4-dňová prestávka alebo 1-3 po sebe nasledujúce dni, po ktorých nasleduje 1-2-dňová prestávka farmaceutickej kompozície obsahujúcej N-acetyl-L-cysteín, v časovom období najmenej dvoch mesiacov. N-acetyl-L-cysteín sa pri tejto metóde podáva v dávke 20 až 90 mg/deň. Nárokovaný spôsob poskytuje výraznejší účinok na symptómy endometriózy v porovnaní s tradičným denným podávaním N-acetyl-L-cysteínu. 10 z.p. f-ly, 7 ill., 2 stoly, 3 pr.