Čo je africký mor ošípaných (ASF)?

Ide o nákazlivé septické ochorenie domácich ošípaných vrátane okrasných a diviakov. Ochorenie sa môže prejaviť akútne, subakútne, chronicky a asymptomaticky, charakterizované horúčkou, hemoragickou diatézou, zápalovými a nekrodystrofickými zmenami v parenchýmových orgánoch. Inkubačná doba je od 3 do 15 dní a letalita môže dosiahnuť 100%. ASF je v Rusku registrovaná od roku 2007.

Existuje vakcína proti ASF?

Špecifické prostriedky na prevenciu ASF neboli vyvinuté.

Je ASF nebezpečný pre ľudí?

Aké sú príznaky ASF?

V akútnej forme sú charakteristické: horúčka do 41-42 ° C počas 3-7 dní, depresia, hemodynamické poruchy - cyanóza (modrá) alebo hyperémia (začervenanie) kože uší, brucha, perinea a chvosta . ASF je sprevádzaná hnačkami, niekedy s prímesou krvi, krvavým výtokom z nosovej dutiny, klonickými kŕčmi, abortom u gravidných prasníc. Smrť zvierat nastáva spravidla 5. – 10. deň od začiatku ochorenia. Prežívajúce zvieratá zostávajú nosičmi vírusu po celý život.

Čo spôsobuje ASF?

Pôvodcom ASF je vírus obsahujúci DNA z rodu Asfivirus, čeľade Asfarviridae, veľkosť jeho viriónu je ~200 nm. Pre vírus ASF bolo identifikovaných niekoľko séroimunotypov a genotypov. Nachádza sa v krvi, lymfe, vnútorných orgánoch, sekrétoch a výlučkoch chorých zvierat. Vírus je odolný voči vysychaniu a rozkladu, ničí sa tepelným spracovaním pri teplote 70 °C po dobu najmenej 0,5 hodiny; má cytopatický účinok a hemadsorpčné vlastnosti.

Ako sa prenáša ASF?

Hlavným zdrojom pôvodcu ASF sú domáce ošípané a diviaky, choré, choré a/alebo uhynuté na ASF, ako aj ich orgány, krv, tkanivá, sekréty, výlučky.

Prenos patogénu ASF sa uskutočňuje priamym kontaktom ošípanej domácej vrátane dekoratívnej, diviaka s chorým alebo uhynutým zvieraťom, potravinových výrobkov a surovín z nich získaných, kontaktom s krmivom, odevom, predmetmi životného prostredia. kontaminované patogénom ASF vrátane pôdy, vody, povrchov priestorov, zariadení, vozidiel a technických prostriedkov.

Aké opatrenia sú zavedené na boj proti ASF?

V epizootickom ohnisku sú zhabané všetky ošípané a z nich získané živočíšne produkty.

V prvej ohrozenej zóne (v okruhu najmenej 5 km od epizootického ohniska), v chovoch, ktoré nie sú zaradené do IV oddelenia, sa všetky ošípané a z nich získané živočíšne produkty sťahujú alebo posielajú na zabitie a spracovanie do podnikov so sídlom v prvá ohrozená zóna.

V druhej ohrozenej zóne (územie susediace s prvou ohrozenou zónou s polomerom do 100 km od hraníc epizootického ohniska) sa na zistenie cirkulácie vírusu ASF vykonávajú pozorovania klinického stavu. ošípaných s odberom vzoriek od všetkých ošípaných podozrivých z ochorenia a ich laboratórnych testov na ASF

Ako skoro je možné opäť chovať ošípané v bývalom ohnisku ASF?

V bývalom epizootickom ohnisku a prvej ohrozenej zóne - 1 rok po zrušení karantény. Vo voľných priestoroch, ktoré nie sú po likvidácii ošípaných obsadené, je povolené umiestniť a držať zvieratá iných druhov (vrátane vtákov) do uplynutia určenej doby.

Pre chovy ošípaných pracujúce v uzavretom režime - s povolením osobitnej komisie 8 mesiacov po zrušení karantény, s negatívnym výsledkom na ASF pri veterinárnom vyšetrení a zavedení biologickej kontroly skupiny zvierat na obdobie aspoň 60 dní.

Ako sa chrániť pred ASF?

• zabezpečiť chov ošípaných vo voľnom výbehu;
• dodržiavať veterinárne pravidlá pre chov ošípaných;
• predchádzať znečisťovaniu životného prostredia živočíšnym odpadom;
• zabezpečiť dobytok ošípaných na očkovanie vykonávané veterinárnou službou (proti klasickému moru ošípaných, erysipelu);
• každých desať dní liečiť ošípané a miestnosť na ich údržbu od hmyzu sajúceho krv (kliešte, vši, blchy), neustále bojovať proti hlodavcom;
• nedovážať ošípané bez súhlasu Štátnej veterinárnej služby;
• nepoužívať nedekontaminované krmivá živočíšneho pôvodu, najmä odpad z bitúnkov;
• obmedziť väzby so znevýhodnenými územiami;
• bezodkladne hlásiť všetky prípady ochorenia ošípaných štátnym veterinárnym inštitúciám v služobných priestoroch.

Ako materiál bol použitý dodatok k príkazu Ministerstva poľnohospodárstva Ruska z 31. mája 2016 č.

Zdroj: Usmernenia pre veterinárnych lekárov pripravené OSN FAO

V rámci celosvetového sektora živočíšnej výroby zohráva kľúčovú úlohu sektor ošípaných ako zdroj živočíšnych bielkovín. Rastúci celosvetový dopyt po mäse viedol k tomu, že bravčové mäso sa stalo základným potravinovým produktom v dôsledku rýchleho rastu ošípaných, efektívnej konverzie krmiva, rýchleho obratu a plodnosti. Bravčové mäso je najviac konzumovaným suchozemským mäsom, ktoré predstavuje viac ako 37 % celosvetovej spotreby mäsa, nasleduje kuracie mäso (35,2 %) a hovädzie mäso (21,6 %) (FAO, 2013).

V posledných desaťročiach bol zaznamenaný stabilný rast v sektore ošípaných (obr. 1), ale v rôznych krajinách sveta nie je tempo rastu jednotné. Veľké populácie sú v Číne a častiach juhovýchodnej Ázie, ako je Vietnam, západná Európa, stredné a východné Spojené štáty americké, Stredná Amerika a južná Brazília. V Afrike, kde je ASF endemický, počet ošípaných neustále narastá, čo poukazuje na rozšírenie praktík chovu ošípaných na kontinente, kde sú v súčasnosti prežúvavce dominantným domácim zvieracím druhom. Náboženské a kultúrne faktory vo veľkej miere ovplyvňujú distribúciu ošípaných, napríklad v moslimských oblastiach je ošípaných málo alebo žiadne (obr. 2).

Tento sektor je charakterizovaný hlbokou priepasťou medzi tradičnou, maloobjemovou produkciou na živobytie na jednej strane a priemyselnou produkciou ošípaných s rastúcou vertikálnou integráciou na strane druhej. Samozrejme, medzi nimi existuje množstvo medzitypov fariem.

V posledných desaťročiach sa komerčná produkcia ošípaných výrazne zintenzívnila. Na obmedzenom počte veľkých fariem sa chová veľké množstvo niekoľkých najproduktívnejších plemien ošípaných, s tým zodpovedajúcim zvýšením produkcie hospodárskych zvierat. Systémy výroby vo veľkom meradle dosiahli vysokú úroveň uniformity tým, že sa spoliehali na rovnaký genetický materiál, a teda mohli využívať podobné krmivá a infraštruktúru. Hoci veľkovýroba dokáže uspokojiť rastúci podiel celosvetového dopytu po bravčovom mäse, asi 43 percent ošípaných sa stále chová na malých dvoroch, najmä v rozvojových krajinách (Robinson et al. 2011).

V rozvojových krajinách sa väčšina ošípaných stále chová na tradičných, malých, samozásobiteľských farmách, kde slúžia ako viac než len zdroj mäsa. V týchto nízko nákladových systémoch generuje chov ošípaných pridanú hodnotu premenou domáceho odpadu na bielkoviny a zároveň poskytuje hnoj na hnojenie polí a rybníkov. Bravčové mäso preto prispieva k výžive a potravinovej bezpečnosti, zatiaľ čo živé zvieratá sú finančnou záchrannou sieťou, zohrávajú významnú úlohu v kultúrnych tradíciách a poskytujú dodatočné prostriedky na školné, lekársku starostlivosť a malé investície.

Tieto dve veľmi odlišné výrobné skupiny majú rôzne priority vo výrobných postupoch alebo investíciách do biologickej bezpečnosti na prevenciu a kontrolu chorôb ošípaných. V skutočnosti sú dvory charakterizované nízkou biologickou bezpečnosťou, zastaranými poľnohospodárskymi postupmi a technológiou a slabým povedomím o predpisoch týkajúcich sa zdravia zvierat (hlásenie ohnísk, riadenie dopravy a prepravy, certifikácia, očkovanie atď.), ktoré zohrávajú dôležitú úlohu pri zavádzaní, šírení a kontrolu ASF a mnohých iných chorôb ošípaných.

vírus ASF

Pôvodcom ASF je jedinečný arbovírus obsahujúci obalenú cytoplazmatickú DNA, ktorý je jediným členom čeľade Asfarviridae (obrázok 3). Hoci sa predtým predpokladalo, že existuje iba jeden sérotyp ASFV, nedávne štúdie klasifikovali 32 izolátov ASFV do ôsmich rôznych séroskupín na základe testu oneskorenia hemadsorpcie (HAd) (Malogolovkin et al., 2015). Genetická charakterizácia všetkých doteraz známych izolátov vírusu ASF však preukázala 23 genotypov spojených s geografickými polohami, pričom početné podskupiny ilustrujú zložitosť epidemiológie ASF (obrázok 4). Genotyp odráža variabilitu segmentu vodného génu a proteínu (\/P772) a používa sa predovšetkým na fylogenetické a molekulárne epidemiologické účely (napr. na určenie zdroja ohnísk). Podľa našich najlepších vedomostí neurčuje virulenciu ani iné parametre choroby.

Zvieratá, ktoré boli infikované

V prirodzenom lesnom cykle sú rezervoárom a prirodzeným hostiteľom vírusu ASF bezočné kliešte Ornithodoros (tiež známe ako juhoafrické jedovaté roztoče), ako aj africké divé ošípané. Kliešte prenášajú vírus uhryznutím.

Všetci členovia čeľade ošípaných (Suidae) sú náchylní na infekciu, ale klinické ochorenie sa pozoruje len u domácich a divých ošípaných, ako aj u ich blízkeho príbuzného * divého európskeho prasaťa. Divoké africké ošípané sú asymptomatickými prenášačmi ASFV a sú rezervoárom vírusu v častiach Afriky (obrázok 5). Patria sem africké diviaky (Phacochoerus africanus a P. aethiopicus), klasy štetkovité (Potamochoerus porcus a Potamochoerus larvatus) a veľké prasatá lesné (Hylochoerus meinertzhageni).

Geografické rozloženie ASF

ASF v súčasnosti prevláda v subsaharskej Afrike, východnej Európe, na Kaukaze a na talianskom ostrove Sardínia. So zvýšenou cirkuláciou ASF narastajú obavy, že sa vírus rozšíri do iných častí sveta. Každá krajina s chovom ošípaných je ohrozená. Skúsenosti ukazujú, že choroba sa môže dostať do ktorejkoľvek krajiny, ktorá nie je zasiahnutá vírusom a ktorá sa nachádza tisíce míľ ďaleko, najmä prostredníctvom mäsa, ktoré prichádza na palubu lietadiel a lodí a následne sa nesprávne zlikviduje mäsom alebo mäsom prepravovaným jednotlivými cestujúcimi. Zvlášť znepokojujúca je možnosť rozšírenia vírusu do východnej Ázie. V Číne, ktorá je vo veľkej miere závislá od produkcie bravčového mäsa a má takmer polovicu svetovej populácie domácich ošípaných, by epidémia ASF mala katastrofálne následky pre výrobu a obchod s výrobkami z ošípaných s vážnymi dôsledkami pre globálnu potravinovú bezpečnosť.

Oficiálne informácie o stave a dátumoch prepuknutia ASF možno získať z globálneho informačného systému o zdraví zvierat WAHIS, ktorý prevádzkuje Svetová organizácia pre zdravie zvierat (OIE).

Afriky

ASF sa považuje za endemický vo väčšine subsaharskej Afriky (obrázok 6) a je tiež vysoko dynamický, pretože sa často vyskytuje v nových oblastiach. Táto dynamika je spôsobená najmä obrovským rastom sektora ošípaných v Afrike, keďže v niektorých krajinách (napr. Madagaskar, Namíbia, Uganda) sa populácie ošípaných za menej ako desaťročie zdvojnásobili (FAOSTAT – http://www.fao.org/ faostat/). Ďalším dôležitým dôvodom je nárast pohybu osôb a tovaru. Rast v sektore ošípaných pokračuje napriek neorganizovaným a nebezpečným marketingovým systémom, ktoré nepodnecujú výrobcov, aby investovali do zlepšenia produkcie bravčového mäsa.

Väčšina rastu sa pozoruje v súkromných dvoroch s nízkou úrovňou biologickej bezpečnosti, čo vytvára problémy z hľadiska šírenia choroby. Okrem toho, s nástrojmi, ktoré sú v súčasnosti k dispozícii, je eradikácia ASF v Afrike veľmi náročná úloha, pretože neexistuje žiadna vakcína ani kompenzačné mechanizmy. Preto by sa úsilie v oblasti prevencie a kontroly malo zamerať na metódy na zlepšenie živočíšnej výroby, biologickej bezpečnosti a ochrany oblastí bez chorôb (prostredníctvom regulácie obchodu a programov rozvoja sektora ošípaných, ktoré sa zameriavajú na vzdelávacie a preventívne opatrenia). Zároveň je potrebné pripomenúť, že dynamika ASF sa v jednotlivých subregiónoch líši.

východnej Afriky

Africký mor ošípaných bol prvýkrát zistený v Keni v roku 1909 po dovoze európskych domácich ošípaných do krajiny (Montgomery, 1921). Vo východnej Afrike vírus pretrváva v lesnom cykle medzi africkými diviakmi a kliešťami Ornithodoros. Prvé ohniská sa vyskytli u ošípaných, ktoré vlastnili európski osadníci, a zistilo sa, že postavením plotov okolo farmy by sa mohli eliminovať africké diviaky a kliešte, a tak by sa ošípané mohli chrániť pred infekciou. Chov ošípaných sa však odvtedy v regióne stal veľmi populárnym a veľké množstvo zvierat je v nebezpečných podmienkach alebo sa voľne pasú. To viedlo k opakovanému prepuknutiu ASF, najmä v dôsledku pohybu a prepravy ošípaných a bravčového mäsa, a nie v dôsledku voľne žijúcich živočíchov. Nárast chovu ošípaných na predmestí viedol k prepuknutiu nákazy v okolí veľkých miest ako Kampala, Nairobi, Mombasa a Dar es Salaam. Cyklus medzi domácimi ošípanými a kliešťami Ornithodoros bol zistený aj v Keni (Gagliardo et al. 2011).

južná Afrika

Africký lesný cyklus diviakov je prítomný v severných častiach subregiónu (Botswana, Malawi, Mozambik, Namíbia, Zambia, Zimbabwe a severovýchod Južnej Afriky). V Malawi a Mozambiku je cyklus zahŕňajúci domáce ošípané a kliešte definovaný ako „veľmi pravdepodobný“. Angola a Mozambik pravidelne hlásia ohniská, zatiaľ čo iné krajiny sporadicky zaznamenali ohniská ASF spojené s africkými diviakmi. Zimbabwe v roku 2015, po viac ako 2 rokoch, ohlásilo prvé prepuknutie u ošípaných vo voľnom výbehu. V severovýchodnej časti Južnej Afriky, kde je značná časť afrických diviakov infikovaných vírusom ASF, bola zriadená kontrolná zóna, v ktorej je chov ošípaných povolený len za prísnych podmienok biologickej bezpečnosti. Sporadické ohniská sa však stále vyskytujú v dôsledku nezákonných aktivít. Zvyšok Južnej Afriky, Lesotho a Svazijska historicky zostali bez ASF, hoci v roku 2012 Juhoafrická republika zažila prvé nekontrolovateľné prepuknutie za posledných päťdesiat rokov v dôsledku nezákonného pohybu ošípaných do tejto oblasti. Ostrovy v Indickom oceáne zostali bez ASF až do roku 1997, kedy bol vírus zavlečený na Madagaskar, kde sa odvtedy stal endemickým.

V roku 2007 zažil Maurícius inváziu vírusu, ktorý bol v nasledujúcom roku zlikvidovaný. Subregión vykazuje vysokú úroveň genetickej variability (obrázok 2) spojenú s prítomnosťou lesného cyklu.

Stredná Afrika

Demokratická republika Kongo a Republika Kongo sú historicky endemické. Je pravdepodobné, že lesný cyklus je chybný aspoň v niektorých častiach týchto krajín, keďže infikované africké diviaky boli hlásené v Konžskej republike (Plowright a kol. 1994; Saliki a kol. 1985).

Iné srrany v regióne tiež hlásili ohniská, najmä Kamerun, ktorý zažil svoju prvú inváziu v roku 1982, krátko po zdvojnásobení populácie ošípaných. V roku 1973 zažil ostrovný štát Svätý Tomáš a Princov ostrov epidémie, ktoré boli rýchlo eradikované. V roku 2010 Čad ohlásil prvé prepuknutie na juhu krajiny, aj keď sporadické správy o ASF v Čade v 80. rokoch 20. storočia (Plowright et al. 1994). Je zaujímavé, že genotyp ASF IX, ktorý sa tradične vyskytuje vo východnej Afrike, ako aj genotyp I boli nedávno hlásené v tejto oblasti (obrázok 2).

Západná Afrika

Prvá oficiálna správa OIE o ASF v západnej Afrike bola zo Senegalu v roku 1978, ale izolát vírusu z Dakaru z roku 1959 potvrdzuje, že vírus tam bol zavlečený najmenej o dve desaťročia skôr. Zdá sa, že v západnej Afrike táto choroba postihovala južný Senegal a jeho susedov (Guinea-Bissau, Gambia a Kapverdy) až do roku 1996, kedy Pobrežie Slonoviny zažilo prvé prepuknutie, po ktorom nasledovala epizootika postihujúca väčšinu krajín v regióne. významná produkcia ošípaných (Benin, Nigéria, Togo, Ghana a Burkina Faso). Choroba sa odvtedy stala endemickou vo väčšine týchto krajín, s výnimkou Pobrežia Slonoviny, kde bola eradikovaná do jedného roka pred novou inváziou v roku 2014. Niger a Mali hlásili svoje prvé ohniská v rokoch 2009 a 2016. Ukázalo sa, že lesný cyklus zahŕňajúci diviaky alebo kliešte rodu Ornithodoros sa nepodieľa na udržiavaní vírusu. V obehu cirkuluje iba genotyp I|, čo naznačuje skôr zavedenie ako evolúciu vírusu v oblasti (obrázok 2).

Východná Európa a Kaukaz

V roku 2007 sa ASF objavil v Gruzínsku. ASF genotypu II pochádza z juhovýchodnej Afriky a s najväčšou pravdepodobnosťou bol dovezený loďou ako odpad, buď premenený na krmivo pre ošípané, alebo zlikvidovaný na mieste dostupnom pre pasúce sa ošípané. Choroba sa rýchlo šírila na Kaukaze (Arménsko v roku 2007 a Azerbajdžan v roku 2008) a Ruskej federácii (2007). V posledných rokoch sa choroba postupne rozšírila na západ, najprv na Ukrajinu (2012) a Bielorusko (2013), potom do Európskej únie (Litva, Poľsko, Lotyšsko a Estónsko, 2014) a Moldavska (2016) (obrázok 6). .

Jedna z hlavných ciest infekcie vo východnej Európe je cez obchodný reťazec s bravčovým mäsom, keď sa dováža lacné kontaminované bravčové mäso a výrobky z neho z infikovaných oblastí. Kŕmenie ošípaných odpadom a nesprávna likvidácia jatočných tiel spôsobuje infekciu u vnímavých populácií ošípaných. Skutočnosť, že ASFV zostáva nákazlivý niekoľko týždňov a dokonca mesiacov v tkanivách a výrobkoch z bravčového mäsa, mu umožňuje pretrvávať v prostredí (napr. telá zvierat) a v chladenom a mrazenom mäse a mäsových výrobkoch.

V členských štátoch EÚ postihnutých ASF zohrávajú diviaky hlavnú úlohu pri infekcii, šírení a udržiavaní ASF. Ako k tomu dôjde, nie je úplne jasné, ale predpokladá sa, že to do značnej miery závisí od hustoty populácie diviakov a ich interakcie s ošípanými na farmách ošípaných s nízkou biologickou bezpečnosťou (vo voľnom výbehu a pasúce sa ošípané). Predpokladá sa, že v tomto procese zohrávajú úlohu aj jatočné telá infikovaných zvierat a potravinový odpad obsahujúci kontaminované bravčové mäso.

Stručne povedané, ASF je v súčasnosti pevne etablovaný, t. j. endemický v niektorých regiónoch Kaukazu a východnej Európy, kde spôsobuje nielen vážne problémy v obchode, ale spôsobuje aj značné škody na malochovoch ošípaných.

Predchádzajúce invázie ASF mimo Afriky

V Európe ASF prvýkrát vstúpila do Portugalska zo západnej Afriky v roku 1957. Po zničení choroby sa genotyp I ASFV opäť objavil v krajine v roku 1960 a potom sa rozšíril po celej Európe (v Taliansku - v roku 1967; v Španielsku - v roku 1969; vo Francúzsku - v roku 1977; na Malte - v roku 1978; v r. Belgicko – v roku 1985 a v Holandsku v roku 1986). Zasiahla aj Karibik (Kuba – 197171980; Dominikánska republika – 1978; Haiti – 1979) a Brazíliu (1978). Situáciu sa podarilo dostať pod kontrolu všetkým krajinám, s výnimkou Španielska a Portugalska, kde boj s chorobou trval niekoľko desaťročí až do 90. rokov minulého storočia, ako aj talianskeho stredomorského ostrova Sardínia, kde sa ASF stala endemickou od r. v čase, keď vírus napadol v roku 1978, cirkuloval najmä medzi ošípanými vo voľnom výbehu a diviakmi.

Prenos

Vírus ASF má rôzne cykly – tradične existuje cyklus lesa, cyklus kliešť-prasa a vnútorný cyklus (prasa-prasa). Novšie bol opísaný cyklus diviakov, ktorý sa niekedy môže vyskytnúť spolu s vyššie uvedenými cyklami. Lesný cyklus sa vyskytuje len v častiach Afriky a zahŕňa komplex afrických diviakov a kliešťov Ornithodoros moubata. Cyklus roztoč-prasa zahŕňa ošípané a kliešte rodu Ornithodoros spp., ktoré sú opísané ako zamorujúce časti Afriky a Pyrenejského polostrova.

K prenosu z lesného cyklu (africké divé ošípané) do domáceho cyklu (farmy ošípaných) dochádza nepriamym prenosom kliešťov. To sa môže stať, keď sa ošípané a africké diviaky dostanú do kontaktu, najmä keď sa africké diviaky zahrabú na farmách, alebo keď sa kliešte dostanú do dedín cez mŕtve telá afrických kancov zabitých na jedlo.

lesný infekčný cyklus

Tento cyklus zahŕňa prirodzených hostiteľov ASFV, t.j. Africké diviaky a mäkké kliešte komplex Ornithodoros moubata, ktoré pôsobia ako biologické vektory v južnej a východnej Afrike. Vo vzťahu k iným africkým regiónom je však dostupných málo informácií. Okrem toho je ešte potrebné objasniť špecifickú úlohu iných voľne žijúcich afrických ošípaných, ako je prasa Bush.

Prenos ASFV je udržiavaný prenosom vírusu z kliešťa na afrického kanca (obr. 7). Africké diviaky sa nakazia uhryznutím kliešťa Ornithodoros počas prvých 68 týždňov života, keď sú v nore (obrázok 8). Následne sa u nich rozvinie virémia a infikujú ďalšie kliešte. Po krátkom období prítomnosti vírusu v krvi (23 týždňov) sa mladé africké diviaky zotavia a nevykazujú žiadne klinické príznaky.

V endemických oblastiach môže mať protilátky proti ASFV až 100 percent afrických diviakov. Vírus možno zvyčajne izolovať z lymfatických uzlín afrických kancov akéhokoľvek veku, hoci virémia dostatočná na infikovanie kliešťov bola zistená len u novorodencov zahrabaných v norách. Je pravdepodobné, že africké diviaky zažívajú opakované reinfekcie, keď ich napadnú kliešte, pričom malé množstvá vírusu zostávajú latentné v lymfatických uzlinách.

Populácie kliešťov môžu zostať infikované a nákazlivé po dlhú dobu v dôsledku transstupňového, sexuálneho a transovariálneho prenosu vírusu v populácii, čo umožňuje vírusu prežiť aj v neprítomnosti viremických hostiteľov. Infikované kliešte zohrávajú dôležitú úlohu pri dlhodobom udržiavaní choroby, pričom prežívajú mesiace v norách a až niekoľko rokov po infikovaní infikovaným hostiteľom.

Infekčný cyklus medzi ošípanou a kliešťom

Na Pyrenejskom polostrove EASF ľahko našiel vhodného hostiteľa - Ornithodoros erraticus, pôvodný kliešť, ktorý žil v útulkoch pre prasatá. Kliešte sa potom zapojili do udržiavania ASF a jeho prenosu na ošípané, napriek absencii divokých afrických ošípaných. Cyklus bol opísaný aj v častiach Afriky a bol dobre zdokumentovaný na Madagaskare, Malawi a Mozambiku, aj keď sa nezdá, že by kliešte zohrávali veľkú úlohu pri prenose vírusu v rámci populácie ošípaných (Haresnape a Mamu 1986; Kwembo et al., 2015 Ravaiomanana a kol., 2010).

Ukázalo sa, že niekoľko druhov kliešťov Ornithodoros je kompetentnými vektormi ASFV v terénnych aj experimentálnych podmienkach (tabuľka 1). To, čo sa deje v laboratóriu, však nemusí nevyhnutne odrážať to, čo sa deje v teréne. Aby sa kliešte Ornithodoros stali kompetentnými vektormi v teréne, ošípané musia byť preferovanými hostiteľmi, a ak nie sú k dispozícii, prirodzený prenos vírusu bude pravdepodobne naďalej obmedzený. Vektorová kompetencia sa môže veľmi líšiť aj v rámci druhu alebo skupín blízko príbuzných druhov v závislosti od vlastností konkrétnej populácie. Aj keď boli kliešte Ornithodoros hlásené z aktuálne zasiahnutých oblastí Kaukazu a južnej východnej Európy, nič nenasvedčuje tomu, že by boli zapojené do epizootického cyklu ASF alebo že by skutočne mohli prenášať chorobu.

Infekčný cyklus domácich ošípaných

V tomto cykle, najbežnejšom u domácich ošípaných, vírus pretrváva u ošípaných bez prítomnosti diviakov a kliešťov (obrázok 9). Vírus sa môže šíriť priamym oronazálnym kontaktom prostredníctvom kontaktu so sekrétmi infikovaných ošípaných, prostredníctvom požitého bravčového mäsa alebo iných kontaminovaných produktov alebo nepriamo prostredníctvom kontaminovaných predmetov.

Vírus sa prenáša z jednej farmy na druhú takmer výlučne v dôsledku ľudského zásahu, ako je preprava zvierat alebo zariadení, kŕmenie kontaminovanou potravou atď. Tento spôsob prenosu si vyžaduje veľké, neustále sa dopĺňajúce populácie ošípaných, aby sa vírus udržal v obehu. Avšak dokonca aj v neprítomnosti infikovaných ošípaných vírus niekedy pretrváva v chladenom alebo mrazenom mäse, čo mu umožňuje dlho pretrvávať a znovu sa objaviť, keď sú tieto mäsové výrobky kŕmené ošípanými.

Infekčný cyklus diviakov

Vo východnej Európe, na Kaukaze a na Sardínii zohrávajú populácie diviakov dôležitú úlohu pri udržiavaní vírusu v obehu a infikovaní, najmä tam, kde je voľný výbeh alebo sa ošípané prehrabávajú v odpadkoch. Je to možné aj v dôsledku iných porušení biologickej bezpečnosti, ako je vyhadzovanie kontaminovaného krmiva alebo zvyškov jedla, ohrady, ktoré umožňujú kontakt medzi zvieratami z nosa na nos atď. Úlohu môže zohrávať aj preprava diviakov do poľovných revírov a/alebo na účely kontroly, ako aj poľovníci (obrázok 7).

Úloha diviaka v tomto procese však stále nie je úplne pochopená. Na Kaukaze a v Ruskej federácii, kde sú hustoty diviakov relatívne nízke, ich infekcia netrvala dlho a bola udržiavaná najmä vírusmi z domácich ošípaných. Keď sa však ASF presunula na západ do hustých populácií diviakov v Poľsku a pobaltských krajinách (obrázok 98), počas roka sa pozorovalo konzistentné prenášanie a nepretržité ohniská. V týchto regiónoch je diviak považovaný za skutočný epidemiologický rezervoár tohto vírusu, pričom väčšina prípadov sa vyskytuje v letných mesiacoch.

V tých častiach východnej Európy, kde teploty zostávajú po väčšinu zimy pod 0 °C, sa odohráva nový, dovtedy nevídaný epidemiologický scenár. Vírus prítomný v infikovaných jatočných telách na poliach a lesoch zostáva infekčný až do jari, kedy môžu diviaky (a možno aj ošípané vo voľnom výbehu, aj keď je to zriedkavé) naraziť na takéto telá, zožrať ich a nakaziť sa (obr. 9A).

Zásahy človeka, ako je lov, kŕmenie, oplotenie atď., majú vážne dôsledky na rozvoj epizootií v populáciách diviakov. Lov môže spôsobiť, že diviaky uniknú poľovníkom do iných oblastí, čím sa rozšíri ASF, ale môže byť tiež veľmi užitočný pri kontrole hustoty zvierat (a tým aj prenosu vírusu). Rôzne typy lovu môžu mať aj rôzne efekty, ako je napríklad riadený lov alebo lov žien atď. Podobne môže prikrmovanie zvýšiť prenos vírusu v dôsledku veľkého počtu diviakov, ktoré sa zhromažďujú na kŕmnych miestach, no zároveň umožňuje väčšiemu počtu diviakov prežiť drsné zimné podmienky.

Prenos ASF a pretrvávanie ASF

Inkubačná doba je obdobie od okamihu infekcie (t. j. keď sa vírus dostane do zvieraťa) do začiatku ochorenia (t. j. keď zviera vykazuje klinické príznaky). V prípade ASF sa toto obdobie pohybuje od 4 do 19 dní v závislosti od vírusu, vnímavého hostiteľa a cesty infekcie. Vylučovanie vírusu môže začať až dva dni pred objavením sa klinických príznakov. Obdobie, počas ktorého ošípaná vylučuje vírus, sa môže líšiť v závislosti od virulencie konkrétneho kmeňa ASFV: ošípané infikované menej virulentným kmeňom ASFV môžu byť perzistentne infekčné aj viac ako 70 dní po infekcii.

Vírus sa vylučuje slinami, slzami, nosovými sekrétmi, močom, výkalmi a sekrétmi z pohlavného traktu. Najmä krv obsahuje veľké množstvo vírusu. Preto sa ošípané môžu nakaziť kontaktom s mnohými rôznymi zdrojmi infekcie, najmä infikovanými ošípanými, kontaminovaným bravčovým mäsom a inými výrobkami z ošípaných (napr. potravinový odpad) a predmetmi (napr. podstielka). Tieto infikované zvieratá a kontaminované materiály môžu byť prepravované vozidlami a ľuďmi na veľké vzdialenosti.

Hoci ASF je spojená s vysokou úmrtnosťou (väčšina infikovaných zvierat uhynie), nie je taká nákazlivá ako niektoré iné cezhraničné choroby zvierat, ako je slintačka a krívačka. To znamená, že ASF sa zvyčajne šíri pomaly a niektoré zvieratá nemusia byť infikované vírusom.

Vo vhodnom prostredí bohatom na bielkoviny zostáva ASFV stabilný v širokom rozsahu teplôt a úrovní pH po dlhú dobu, je tiež odolný voči autolýze a rôznym dezinfekčným prostriedkom. Teda ani hniloba, ani proces zrenia, ani mrazenie mäsa ho nemôžu inaktivovať. V dôsledku toho vírus prežíva v sekrétoch, jatočných telách, čerstvom mäse a niektorých mäsových výrobkoch rôzne časové obdobia. Môže zostať infekčný najmenej 11 dní vo výkaloch, 15 týždňov v chladenom mäse (a pravdepodobne dlhšie v mrazenom mäse) a mesiace v kostnej dreni alebo údenej šunke a klobáse, pokiaľ nie je varený alebo údený pri vysokej teplote (tabuľka 2). Spôsob prípravy je veľmi dôležitý pre šírenie ASF. Nedostatočne tepelne upravené, nedovarené, naložené alebo solené mäso, ako aj krv, mŕtve telá alebo krmivo z nich pripravené, môžu byť zdrojom infekcie, ak sa kŕmia ošípané alebo sa likvidujú s komunálnym odpadom na miestach, kde ich môžu zožrať ošípané alebo divá zver. kancov. Varenie mäsa pri teplote 70 °C počas 30 minút inaktivuje vírus (obrázok 10).

Zavedenie nových ošípaných do stáda alebo ošípaných často vedie k tomu, že sa jednotlivci navzájom napádajú a hryzú. V prípade voľne chovaných alebo pasúcich sa ošípaných môže dôjsť k infekcii kontaktom s infikovanými túlavými zvieratami, diviakmi, ich kadávermi alebo zvyškami potravy. Okrem toho sa vírus môže preniesť použitím rovnakej ihly na vakcináciu alebo liečbu viacerých ošípaných. Prenos vírusu umelým oplodnením sa nepreukázal, no možnosť nie je vylúčená.

Prenos vektorom je možný aj uhryznutím infikovaných kliešťov Ornithodoros. Ukázalo sa, že niektorý hmyz cicajúci krv, menovite Stomoxys calcitrans, je schopný udržať a prenášať ASFV aspoň 24 hodín po kontakte s chorým jedincom (Mellore et al. 1987), čo je obzvlášť dôležité pri prenose v rámci stáda.

Infekcia cez veľké vodné plochy, ako sú rieky a jazerá, sa zdá byť nepravdepodobná, pretože koncentrácia vírusu po zriedení vodou je nižšia ako infekčné úrovne.

Údaje z klinického obrazu a pitvy

Ochorenie je spravidla charakterizované náhlym úhynom ošípaných bez ohľadu na vek alebo pohlavie. Zvieratá izolované od zvyšku stáda, ako sú prasnice s mladými dojčiacimi prasiatkami, sa môžu infekcii vyhnúť kvôli pomerne nízkej nákazlivosti ASF. Rýchlosť šírenia choroby v rámci stáda (a počet obetí) sa môže meniť od niekoľkých dní do niekoľkých týždňov v závislosti od typu chovu ošípaných, manažmentu a opatrení biologickej bezpečnosti. V skutočnosti je ASF, hoci je vysoko smrteľná, menej častá ako niektoré iné cezhraničné choroby zvierat, ako je slintačka a krívačka. Okrem toho si niektoré pôvodné plemená ošípaných v Afrike vyvinuli určitý stupeň tolerancie voči ASF. Diviaky z dôvodu príslušnosti k rovnakému druhu ako domáce ošípané vykazujú rovnaký klinický obraz.

Klinické príznaky spojené s infekciou ASFV sú veľmi variabilné (pozri tabuľku 3) a závisia od rôznych faktorov: virulencia vírusu, plemeno ošípaných, cesta prenosu, infekčná dávka a lokálna endemita.

Podľa ich virulencie sa ASFV delia do troch hlavných skupín: izoláty s vysokou virulenciou, strednou virulenciou a nízkou virulenciou (obrázok 11). Klinické formy ASF sa pohybujú od hyperakútnych (veľmi akútnych) po asymptomatické (nerozoznateľné). Ako je znázornené na obrázku 11, vysoko virulentné izoláty ASFV spôsobujú hyperakútne a akútne formy ochorenia, stredne virulentné izoláty spôsobujú akútne a subakútne formy. Izoláty s nízkou virulenciou boli opísané v endemických oblastiach (okrem cirkulujúcich virulentných vírusov), sú charakterizované miernejšími symptómami a niekedy sú spojené so subklinickým alebo chronickým ASF. Výskyt (tj podiel postihnutých zvierat) bude závisieť od izolátu vírusu a cesty prenosu.

Hoci to nie je presne známe, uvádza sa, že inkubačná doba prirodzenej infekcie sa pohybuje od 4 do 19 dní. Klinický priebeh ochorenia môže byť menej ako sedem dní po infekcii v akútnej forme, až niekoľko týždňov alebo dokonca mesiacov v chronickej forme. Miera úmrtnosti závisí od virulencie izolátu, môže byť až 1007 % u vysoko virulentných kmeňov postihujúcich ošípané všetkých vekových kategórií, ale môže byť nižšia ako 20 % v chronickej forme. V druhom prípade je ochorenie často smrteľné u gravidných a mladých ošípaných, ktoré sú choré na iné choroby alebo sú oslabené z iného dôvodu. Miera prežitia proti vysoko virulentným kmeňom pozorovaná v niektorých endemických oblastiach môže byť vyššia, pravdepodobne v dôsledku adaptácie ošípaných na vírus.

Super ostrý tvar

Vyznačuje sa vysokou teplotou (41-42°C), stratou chuti do jedla a letargiou. Náhla smrť môže nastať v priebehu 1-3 dní pred vznikom akýchkoľvek klinických príznakov. Často neexistujú žiadne klinické príznaky alebo poškodenie orgánov.

akútna forma

Po inkubačnej dobe 4-7 dní (zriedkavo až 14 dní) u zvierat s akútnou formou ASF stúpne teplota na 40-42 °C a chuť do jedla zmizne; zvieratá vyzerajú ospalo a slabo, chúlia sa k sebe a ležia na podlahe (obr. 12), ich dýchanie sa zvyšuje.

Smrť často nastáva do 6-9 dní u vysoko virulentných kmeňov alebo do 11-15 dní u stredne virulentných izolátov. U domácich ošípaných úmrtnosť často dosahuje 90-100 percent. Rovnaké príznaky sa pozorujú u diviakov a divých ošípaných. Akútne formy sa ľahko zamieňajú s inými chorobami, najmä s klasickým morom ošípaných, erysipelom ošípaných, otravou, salmonelózou a inými septikemickými stavmi (pozri nasledujúcu kapitolu o diferenciálnej diagnostike). Infikované ošípané môžu vykazovať jeden alebo viacero z nasledujúcich klinických príznakov:

• modrofialové oblasti a krvácania (bodkované alebo rozšírené) na ušiach, bruchu a/alebo zadných nohách (obr. 12);
• výtok z očí a nosa;
• sčervenanie kože hrudníka, brucha, perinea, chvosta a nôh (obr. 12);
• zápcha alebo hnačka, ktorá môže prejsť zo sliznice na krvavú (melena);
• zvracať;
• potrat u gravidných prasníc vo všetkých štádiách gravidity;
• krvavá pena z úst/nosa a výtok z očí (obr. 15);
• oblasť okolo chvosta môže byť kontaminovaná krvavými výkalmi (obrázok 12).

U diviakov je ťažké spozorovať sfarbenie a krvácanie na koži kvôli tmavšej farbe kože a hustej srsti. To isté platí pre tmavé plemená ošípaných.

Jatočné telá ošípaných, ktoré uhynú v akútnom štádiu ochorenia, môžu zostať v dobrom stave, hoci môžu vykazovať vonkajšie klinické príznaky. Najznámejšie výsledky pitvy (obrázok 13): zväčšené, edematózne a úplne hemoragické lymfatické uzliny, ktoré vyzerajú ako krvné zrazeniny (najmä gastrointestinálne a obličkové); zväčšená, drobivá slezina tmavočervená až čierna so zaoblenými okrajmi; a petechiálne (presné) krvácania v obličkovej kapsule.

Pri pitve sa zvyčajne zistia tieto javy:

1. Krvácanie pod kožou;
2. Nadbytočná tekutina v srdci (hydroperikard – nahromadenie žltkastej tekutiny) a telových dutinách (hydrotorax, ascites) (obr. 15);
3. Petechie na povrchu srdca (epikard), močového mechúra a obličiek (v kortikálnej vrstve obličky a obličkovej panvičky) (obr. 14);
4. V pľúcach je možná hyperémia a petechie, pena v priedušnici a prieduškách a ťažký alveolárny a intersticiálny pľúcny edém (obr. 15);
5. Petechie, ekchymóza (rozsiahle krvácanie) a prebytok zrazenej krvi v žalúdku a tenkom a hrubom čreve (obr. 14);
6. Hyperémia pečene a krvácanie do žlčníka.

Infikované diviaky vo východnej Európe vykazujú rovnaké pitevné znaky a majú rovnaké klinické príznaky, ale
vzhľadom na ich hustú tmavú srsť sú vonkajšie klinické príznaky menej zreteľné (obrázok 16).

Subakútna forma

Subakútna forma ochorenia je spôsobená stredne virulentnými izolátmi a môže sa vyskytnúť v endemických oblastiach. Ošípané zvyčajne uhynú do 7-20 dní, pričom úmrtnosť je 30-70 percent. Ošípané, ktoré prežili, sa zotavia za mesiac. Klinické príznaky sa podobajú (aj keď sú zvyčajne menej intenzívne) príznakom akútnej formy ochorenia, až na to, že vaskulárne zmeny sú menej výrazné s krvácaním a edémom.

Častým príznakom je intermitentná horúčka, ktorá je sprevádzaná depresiou a stratou chuti do jedla. Pohyb zvierat môže byť bolestivý a kĺby sú často opuchnuté nahromadenou tekutinou a fibrínom. Môžu sa vyskytnúť príznaky sťaženého dýchania a zápalu pľúc. Gravidné prasnice môžu podstúpiť potrat. Serózna perikarditída (tekutina okolo srdca) sa často vyvinie do pokročilejších foriem fibrinóznej perikarditídy.

Chronická forma

V chronickej forme je často úmrtnosť nižšia ako 30%. Táto forma bola opísaná v krajinách, kde sa ASF dlhodobo vyskytuje, ako je Španielsko, Portugalsko a Angola. Chronická forma pochádza z prirodzene oslabených vírusov alebo z očkovacieho vírusu uvoľneného počas výskumu vakcinácie, o ktorom sa predpokladá, že sa vyskytol na Pyrenejskom polostrove v 60. rokoch 20. storočia. Klinické príznaky začínajú 14 až 21 dní po infekcii miernou horúčkou, po ktorej nasleduje mierna respiračná tieseň a opuch kĺbov (stredný až závažný). Toto je často sprevádzané sčervenaním kože, ktorá napučiava a stáva sa nekrotickou (obrázok 17). Ďalšie pitevné nálezy zahŕňajú pneumóniu s kazeóznou nekrózou (niekedy s fokálnou mineralizáciou) v pľúcach, fibrinóznu perikarditídu a edematózne lymfatické uzliny, ktoré môžu byť čiastočne hemoragické (hlavne mediastinálne lymfatické uzliny) (obrázok 17).

Odlišná diagnóza

Africký mor ošípaných sa nie vždy prejavuje úplným súborom klinických príznakov opísaných v predchádzajúcej časti. V počiatočných štádiách ochorenia alebo keď ide o malý počet zvierat, môže byť ťažké stanoviť klinickú diagnózu. Diagnóza ASF je často hypotetická a symptómy sa môžu zamieňať s inými chorobami a/alebo stavmi. Okrem toho mnohé choroby ošípaných (a diviakov) môžu mať úmrtnosť podobnú tej, ktorá sa pozoruje pri akútnom prepuknutí ASF. diagnóza nie je definitívna, kým ju nepotvrdí laboratórium.

Okrem hlavných diferenciálnych diagnóz uvedených v tejto kapitole (tabuľka 4) možno zvážiť aj iné generalizované septikémie a hemoragické stavy.

Klasický mor ošípaných

Najdôležitejšou diferenciálnou diagnózou ASF je klasický mor ošípaných, tiež známy ako cholera ošípaných, ktorý je spôsobený pestivírusom z čeľade Flaviviridae. Rovnako ako v prípade ASF sa vyskytuje v rôznych klinických prejavoch alebo formách. Akútny CSF má takmer rovnaké klinické príznaky a pitevné nálezy ako akútny ASF a má tiež vysokú úmrtnosť. Klinické príznaky môžu zahŕňať vysokú horúčku, anorexiu, depresiu, krvácanie (do kože, obličiek, mandlí a žlčníka), konjunktivitídu, respiračné príznaky, slabosť, preplnené zvieratá, modrá koža a smrť do 2 až 10 dní. Jediným spôsobom, ako ich rozlíšiť, je laboratórne potvrdenie. Bolo by nerozumné pokúšať sa očkovať zvieratá proti CSF pred potvrdením diagnózy, pretože ASF môže počas očkovania šíriť nevyškolený personál.

Reprodukčný a respiračný syndróm ošípaných (PRRS)

PRRS, niekedy označovaná ako "choroba modrého ucha", je charakterizovaná zápalom pľúc u rastúcich a dokončovacích ošípaných a potratmi u gravidných prasníc. To je často sprevádzané horúčkou, sčervenaním a najmä modrastým zafarbením kože uší. Charakteristická je aj hnačka. Hoci úmrtnosť na PRRS vo všeobecnosti nie je vysoká, vysoko patogénne vírusy PRRS zdecimovali v posledných rokoch celé stáda ošípaných v Číne, Vietname a východnej Európe, ktoré sa vyznačujú vysokou mortalitou, vysokou horúčkou, letargiou, anorexiou, kašľom, dýchavičnosťou, krívaním a cyanóza/modrá (koža uší, končatín a perinea).

Nálezy pri pitve zahŕňajú poškodenie pľúc (intersticiálna pneumónia) a lymfatických orgánov (atrofia týmusu a edém a krvácanie do lymfatických uzlín) a petechiálne krvácania v obličkách.

Dermatitída a nefropatický syndróm prasiatok (PDNS)

Toto je jedna z chorôb súvisiacich s cirkovírusom-2 u ošípaných. LDNP zvyčajne postihuje rastúce ošípané a ošípané v konečnom štádiu výkrmu. Hoci klinické príznaky hovoria samy za seba, neexistujú žiadne špecifické diagnostické testy.

Syndróm je charakterizovaný tmavočervenými až fialovými kožnými léziami, ktoré sú zvyčajne najvýraznejšie v zadnom trupe a perineu, hoci v závažných prípadoch môže byť postihnutý aj bok a iliakálne brucho. Lézie na stenách krvných ciev spôsobené nekrotizujúcou vaskulitídou (zápal krvných ciev) sú mikroskopicky ľahko odlíšiteľné od lézií pri ASF. Ochorenie sprevádza aj nechutenstvo, depresia a ťažká nefróza (zápal obličiek), ktorá býva príčinou smrti. Lymfatické uzliny môžu byť tiež zväčšené. Výskyt je vo všeobecnosti nízky, ale postihnuté ošípané umierajú veľmi často.

Prasací erysipel

Toto bakteriálne ochorenie, spôsobené Erysipelothrix rhusiopathiae, postihuje ošípané všetkých vekových kategórií a môže postihnúť ošípané v malých aj rozsiahlych chovoch ošípaných a komerčných intenzívnych systémoch. Ochorenie sa môže prejaviť v akútnej alebo subakútnej forme. Akútna forma, ktorá sa zvyčajne vyskytuje u mladých ošípaných, je charakterizovaná náhlou smrťou, hoci úmrtnosť je zvyčajne oveľa nižšia ako u ASF.

Dva alebo tri dni po infekcii sa u chorých ošípaných môžu vyvinúť veľmi charakteristické kožné lézie v tvare diamantu v dôsledku nekrotizujúcej vaskulitídy (zápalu krvných ciev). U dospelých ošípaných je to zvyčajne jediný klinický prejav ochorenia. Rovnako ako pri akútnom ASF môže byť slezina hyperemická A viditeľne stvrdnutá. pitevné nálezy zahŕňajú aj prekrvenie pľúc a periférnych lymfatických uzlín, ako aj krvácanie do kôry obličiek, srdca a serózu žalúdka. Izolácia baktérie môže potvrdiť diagnózu a ošípané dobre reagujú na liečbu penicilínom. Mikroskopické zmeny sú iného charakteru ako pri ASF.

Aujeszkyho choroba

Aujeszkyho choroba, známa aj ako pseudobesnota, spôsobuje vážne neurologické a reprodukčné problémy a často býva smrteľná. Hoci môžu byť infikované takmer všetky cicavce, najčastejšie sú postihnuté ošípané a sú rezervoárom. Najviac sú postihnuté mladé zvieratá, úmrtnosť počas prvých dvoch týždňov života dosahuje 100%. Prasiatka zvyčajne dostanú horúčku, prestanú jesť, objavia sa neurologické príznaky (tras, kŕče, paralýza) a často uhynú do 24-36 hodín.

U starších ošípaných (starších ako dva mesiace) sa môžu vyvinúť podobné príznaky, ale zvyčajne majú respiračné príznaky a zvracanie a úmrtnosť nie je taká vysoká. Prasnice a kance väčšinou vykazujú respiračné príznaky, ale gravidné prasnice môžu potratiť alebo porodiť slabé prasiatka s triaškou. Fokálne nekrotické a encefalomyelitické lézie môžu byť v mozgu, mozočku, nadobličkách a iných vnútorných orgánoch, ako sú pľúca, pečeň alebo slezina. Biele škvrny v pečeni u plodov alebo veľmi mladých prasiatok sú pre túto infekciu veľmi charakteristické.

Salmonelóza (a iné bakteriálne septikémie)

Salmonelóza zvyčajne postihuje mladé ošípané. Ak sa liečba začne včas, zvieratá dobre reagujú na antibiotickú liečbu. Diagnóza je potvrdená bakteriologickou kultiváciou. Príznaky podobné ASF zahŕňajú horúčku, stratu chuti do jedla, respiračné alebo gastrointestinálne poruchy a začervenané, zapálené telo v čase porážky.

Zvieratá môžu zomrieť 3-4 dni po infekcii. Ošípané, ktoré uhynú na septickú salmonelózu, vykazujú cyanózu uší, nôh, chvosta a brucha. Nálezy pri pitve môžu zahŕňať petechiálne krvácania v obličkách a na povrchu srdca, zväčšenú slezinu (ale s normálnou farbou), opuch mezenterických lymfatických uzlín, zväčšenú pečeň a prekrvenie pľúc.

Otrava

Keď náhle uhynie veľké množstvo ošípaných, treba zvážiť možnosť otravy. Niektoré toxické látky môžu spôsobiť rovnaký druh krvácania ako pri ASF. A hoci jed na potkany na báze kumarínu, ako napríklad warfarín, môže spôsobiť masívne krvácanie, je pravdepodobnejšie, že postihne niekoľko ošípaných ako celé stádo.

Niektoré plesňové toxíny v plesnivom krmive, ako je aflatoxín a stachybotryotoxín, môžu spôsobiť krvácanie a vážnu úmrtnosť. Náhodná alebo zlomyseľná otrava pesticídmi môže mať za následok smrť ošípaných všetkých vekových kategórií, ale smrť všetkých ošípaných v priebehu 24 – 48 hodín, s malými alebo žiadnymi klinickými príznakmi, bez zistených lézií pri pitve, pomôže rozlíšiť tento výsledok od ASF. Je nepravdepodobné, že by otravu sprevádzala horúčka.

Časti v tejto kapitole boli a sú prevzaté z Správnej praxe núdzového manažmentu FAO (GEMP): The Essentials (FAO, 2011), v ktorej je možné nahliadnuť do ďalších podrobností.

Je rozumné mať vždy pripravenú vyšetrovaciu súpravu na miestnom veterinárnom úrade, aby veterinárny lekár mohol začať čo najskôr s minimálnym oneskorením. Vybavenie by malo v ideálnom prípade obsahovať digitálny fotoaparát, OCR a prostriedok rýchlej komunikácie (mobilný telefón, ale môže obsahovať aj rádio), ako aj všetko potrebné vybavenie na odber vzoriek, správne balenie a prepravu vzoriek (GEMP, 2011).

Podozrenie na ASF zvyčajne nahlásia samotní farmári alebo súkromný veterinárny lekár. V prípade podozrenia na prepuknutie ASF na farme/chovu by sa mali bezprostredne pred laboratórnym potvrdením vykonať nasledujúce kroky na základe predpokladu terénnej diagnózy ASF:

• Zozbierajte údaje o farme a dotknutých zvieratách (pozri rámček 1).
• Infikované a podozrivé farmy musia byť okamžite umiestnené do karantény, t.j. žiadne osoby, vozidlá, zvieratá alebo produkty z ošípaných by nemali opustiť farmu ani byť na ňu privedené, kým sa nepotvrdí diagnóza.
• Zriaďte dezinfekčné miesta pre ľudí a vozidlá pri vchodoch a východoch z budovy, v ktorej sa chovajú ošípané. Zamestnanci a návštevníci musia zabezpečiť, aby obuv, odev a vybavenie boli pri odchode z farmy dezinfikované. Ak musí prísť veterinárny lekár alebo iní zamestnanci do kontaktu s chorými zvieratami alebo potenciálne kontaminovaným materiálom, musia používať osobné ochranné pracovné prostriedky.
• Vykonávať prehliadky v každej miestnosti farmy, klinické vyšetrenie jednotlivých zvierat a posmrtné vyšetrenie uhynutých (alebo zabitých) zvierat. Pri vykonávaní klinického vyšetrenia podozrivých zvierat je potrebný systematický prístup.
• Je tiež dôležité zaznamenať svoje zistenia počas postupu v prieskume. Vyplnený formulár vám pomôže efektívne vykonať túto úlohu. Pri výskyte väčšieho počtu zvierat je potrebné uprednostniť, ktoré zvieratá vyšetrovať. Najprv je potrebné vykonať vyšetrenie zvierat so zjavnými klinickými príznakmi.

• Príslušné vzorky by sa mali odobrať čo najskôr a okamžite zaslať do laboratória na diagnostiku (pozri časť Odber vzoriek). V prípade, že mnohé zvieratá vykazujú klinické príznaky, vzorky od piatich z nich by mali stačiť na stanovenie diagnózy.
• Vykonajte vyšetrovanie ohniska (známe aj ako epidemiologické vyšetrovanie).
• Susedia farmári alebo tí, ktorí nedávno kúpili alebo predali zvieratá z tejto farmy, t.j. ohrozené kontaktné osoby musia byť upovedomené, aby mohli otestovať svoje zvieratá (a nahlásiť všetky zistené príznaky veterinárnym orgánom) a zastaviť pohyb ošípaných a produktov z a do týchto ošípaných. Poskytovatelia služieb, ktorí nedávno navštívili tieto farmy, by mali byť tiež informovaní.

• Dokonca aj pri správnom čistení a dezinfekcii by zamestnanci zapojení do vyšetrovania ohniska na potenciálne infikovanej farme nemali navštevovať iné farmy najmenej 24 hodín, aby sa predišlo možnosti náhodného rozšírenia choroby.
• Pokiaľ ide o prepuknutie choroby vo voľnom výbehu alebo na pastve ošípaných, prvým krokom je vrátiť všetky nekryté zvieratá a držať ich v uzavretých priestoroch alebo aspoň priviazané.

Ako vykonať vyšetrovanie ohniska

Táto časť je prevzatá z online návodu EuFMD.

Vyšetrenie ohniska, známe aj ako epidemiologické vyšetrovanie, by malo určiť:

a) Ako dlho choroba trvá?

b) možné zdroje choroby;

c) aké pohyby zvierat, ľudí, vozidiel alebo iných predmetov by mohli viesť k šíreniu choroby;

d) rozsah problému spočítaním počtu prípadov, definovaním epidemiologických jednotiek a hodnotením rizikovej populácie. Tieto informácie sú rozhodujúce pri rozhodovaní o efektívnej stratégii kontroly a pri monitorovaní implementácie stratégie kontroly, keď už boli tieto opatrenia prijaté.

Prvým krokom je definovanie epidemiologickej jednotky (jednotky), ktorá by mala zahŕňať všetky ošípané s podobnou úrovňou rizika infekcie. Pôjde o všetky vnímavé zvieratá pod rovnakým systémom riadenia alebo biologickej bezpečnosti, t.j. zvyčajne farmy. Táto jednotka sa však môže rozšíriť na úroveň dediny, ak medzi farmami neexistujú skutočné hranice. Je dôležité si uvedomiť, že geograficky oddelené farmárske jednotky môžu byť v rovnakom systéme riadenia a byť súčasťou tej istej epidemiologickej jednotky.

Časový rámec/grafovanie pomáha určiť, kedy je podozrenie, že došlo k infekcii a prenosu choroby, a poskytuje príležitosť na usmernenie vyšetrovania ohniska. Tento graf sa používa na určenie časového okna, kedy by mohlo dôjsť k zavedeniu vírusu (na základe inkubačnej doby) a šíreniu na iné miesta (na základe obdobia izolácie vírusu).

Po vytvorení plánu je ďalším krokom jeho použitie na vystopovanie zdroja vírusu a jeho ďalšie šírenie, aby sa nadviazali kontakty, ktoré by mohli viesť k prenosu vírusu v rámci vypočítaného času. Medzi rizikové faktory šírenia choroby patria:

• pohyb zvierat alebo produktov živočíšneho pôvodu (napr. bravčové mäso);
• zamestnanci, ktorí navštevujú priestory a sú v priamom kontakte so zvieratami na iných farmách, ako napríklad veterinár alebo iní farmári;
• poľnohospodárski pracovníci navštevujúci iné chovy dobytka;
• pohyb vozidiel alebo zariadení medzi chovmi dobytka;
• priamy kontakt zvierat na hraniciach farmy;
• divé ošípané alebo výrobky z nich.

Po identifikácii možných zdrojov infekcie je dôležité uprednostniť ďalšie epidemiologické vyšetrenia. To umožňuje rýchle vyšetrenie a identifikáciu všetkých kontaktov, ktoré môžu prispieť k ďalšiemu šíreniu choroby. Prednosť by mali mať tie kontakty, ku ktorým došlo v období, keď bola možná infekcia.

Toto plánovanie je obzvlášť dôležité, keď sú personál a zdroje obmedzené, čo sa často stáva. Dôležité sú aj typy kontaktov. Prednosť by mala dostať:

• veľké farmy s väčším počtom zvierat;
• „križovatky“, kde sa stretávajú zvieratá z viacerých miest vrátane trhov s dobytkom a bitúnkov;
• farmy, kde dochádza k pravidelnému pohybu zvierat, napríklad od obchodníkov s dobytkom;
• priamy kontakt so zvieratami, napríklad pri nákupe zvierat;
• priľahlé miestnosti, kde sú ošípané.

Existujú rôzne spôsoby, ako preskúmať možné kontakty:

Rozhovor

Efektívne vedenie pohovoru si vyžaduje určité zručnosti, najmä v situácii, keď je farmár pravdepodobne pod silným stresom. Farmári sa často obávajú cudzích ľudí a najmä vládnych úradníkov. Je mimoriadne dôležité nájsť si čas na vybudovanie dôvery s opýtaným. Taktiež neplánujte navštíviť viac ako jednu farmu denne. Ponúkame vám niekoľko nápadov, ktoré nájdete v rámčeku 2.

Iné zdroje informácií

Skontrolujte záznamy o pohybe hospodárskych zvierat a personálu. Cenné informácie môžu poskytnúť aj veterinárne záznamy, denníky, nákladné listy a faktúry či potvrdenky z dodávok. Pamätajte, že farmár môže byť v takýchto chvíľach veľmi rozrušený, je pre neho ťažké zapamätať si a sprostredkovať všetky podrobnosti, a preto sa poznámky stávajú ešte cennejším zdrojom informácií.

Okrem rozhovoru s farmárom by ste mali starostlivo skontrolovať priestory. Priestory je potrebné obísť po vonkajšom obvode a zistiť, či nedochádza ku kontaktu so susednými ošípanými alebo diviakmi. Niekedy je užitočné urobiť si náčrt priestoru s vyznačením miesta, kde sa chovajú zvieratá, skupín zvierat, vstupu a výstupu a jeho hraníc.

Na účely epidemiologického vyšetrovania a sledovania môže byť užitočné kontaktovať iných návštevníkov priestorov, ako sú veterinári, zberači mlieka alebo technici umelého oplodnenia.

Zabezpečenie biologickej bezpečnosti pri návšteve farmy

V tejto časti bol použitý materiál z online školiaceho kurzu EuFMD. Podrobné video demonštrujúce kroky uvedené nižšie si môžete pozrieť na adrese: https://www.youtube.com/watch?v=ljS-53r0FJk&feature=youtu.be

Pred odchodom:

• Nezabudnite z vozidla odstrániť všetko nepotrebné vybavenie.
• Usporiadajte "čisté" a "špinavé" miesta na zadnom sedadle a kufri vášho auta, vyložené plastovou fóliou.
• Uistite sa, že si so sebou prinesiete všetko potrebné vybavenie. Na tento účel má zmysel vypracovať kontrolný zoznam (pozri rámček 3). Je užitočné mať k dispozícii štandardný zoznam vybavenia potrebného na nastavenie miesta dezinfekcie. Takýto zoznam môže byť vo vašom núdzovom pláne alebo vo vašej príručke.

Po príchode

• Auto nesmie vstúpiť na územie (nechajte ho pri vjazde na farmu).
• Vyberte si vhodné miesto na čistom a suchom povrchu (najlepšie betóne) pre miesto dezinfekcie, pričom jasne označte čisté a špinavé strany (brány).
• Odstráňte všetko nepotrebné oblečenie a predmety (napríklad sako, kravatu, hodinky) a vyberte všetko z vreciek.
• Elektronické vybavenie (napríklad mobilný telefón) potrebné na farme by malo byť umiestnené v zapečatenom plastovom vrecku, aby sa uľahčilo následné čistenie a dezinfekcia. Telefón na farme nikdy nevyberajte z tašky, dá sa použiť len vtedy, ak je zároveň v igelitke.
• Vezmite si z auta všetky veci potrebné na dezinfekciu, aby ste ich odviezli na farmu.
• Možno si budete musieť priniesť vlastnú vodu na výrobu čistiacich a dezinfekčných prostriedkov.

Školenie

• Položte plastovú fóliu na čistú stranu dezinfekčného bodu.
• Umiestnite predmety, ktoré si so sebou prinesiete na farmu, na špinavú stranu miesta na dezinfekciu (ako sú čierne plastové vrecká a nádoby na vzorky).
• Zmiešajte vodu, ktorú ste si priniesli so saponátom, v jednom vedre a dezinfekčný prostriedok v dvoch vedrách. Dve vedrá – jedno so saponátom a jedno s dezinfekčným prostriedkom – zostanú na špinavej strane, použijete ich na odstránenie nečistôt, ktoré ste „nazbierali“ na farme. Ďalšie dezinfekčné vedro s vlastnou kefou bude na čistej strane.
• Často je dezinfekčný prostriedok špecifický, určený na použitie v prípade konkrétneho ochorenia. Koncentráciu a čas expozície treba starostlivo sledovať.

Obliekanie (na čistej strane)

• Vyzujte si topánky a nechajte ich na plastovej fólii.
• Jednorazový ochranný oblek sa najprv oblečie a potom sa zastrčí do čižiem. Rukavice musia byť pripevnené lepiacou páskou.
• Nepremokavé kombinézy (ak to poveternostné podmienky vyžadujú) by mali zakrývať čižmy. Má vlastné vrstvy jednorazových rukavíc, ktoré sa dajú vymeniť, keď sa zašpinia.
• Návleky na topánky musia pokrývať aspoň podrážku a spodok gumených čižiem.
• Nasaďte si ochrannú kapucňu a ešte raz skontrolujte zoznam predtým, ako zostúpite z plastovej fólie a vydáte sa na farmu.

Odizolovanie (na špinavej strane)

• Pred opustením priestorov použite prípravky dostupné na farme na čistenie veľmi znečistených priestorov.
• Pred ponorením do dezinfekčného prostriedku na požadovanú dobu umyte nádobu na vzorku čistiacim prostriedkom a kefou a potom ju vložte do vrecka na vzorky na čistej strane.
• Umyte a vydezinfikujte tašku s telefónom a inými podobnými predmetmi, ktoré ste si vzali na farmu.
• Odstráňte návleky na topánky a vložte ich na špinavú stranu do plastových vrecúšok. Pred čistením topánok saponátom a kefou zrolujte nepremokavú kombinézu (ak ju máte na sebe) na hornú časť topánok, najmä spodnú časť (prípadne pomocou skrutkovača na čistenie podrážok). Potom použite prací prostriedok na vypranie celého obleku vrátane kapucne.
• Odstráňte druhý pár rukavíc (vonkajšie) a vložte ich do vrecka na špinavú stranu predtým, ako nevypranú nepremokavú kombinézu zložíte a vložíte do dezinfekčného roztoku. Po potrebnom čase v roztoku sa musí vložiť do vrecka na čistej strane.
• Čižmy je možné v prípade potreby opäť rýchlo oprať a riadne vydezinfikovať.
• Prvý pár rukavíc (vnútorné) by ste si mali zložiť a vložiť do vrecka na špinavú stranu pred vyzlečením vnútorného obleku (pri vyzúvaní obleku by ste mali vytiahnuť nohy z topánok a potom si môžete topánky znova obuť) . Oblek je potrebné vložiť do tašky na špinavú stranu.

Na čistej strane

• Vytiahnite nohy z topánok a stúpnite na čistú stranu plachty predtým, ako si vezmete topánky a dezinfikujete ich na čistej strane (na dezinfekciu potrebujete ďalšie vedro). Nakoniec ich vložte do vrecka na čistú stranu. Tu je tiež potrebné dezinfikovať ruky a okuliare, ako aj tvár (dezinfekčnými obrúskami).
• Opätovne použiteľné vybavenie a vzorky by mali byť vložené do dvojitého vrecka a uchovávané uzavreté.

Môžete si znova obuť bežné topánky.

• Ak sú vedrá na špinavej strane vaše vlastné, treba ich vydezinfikovať, vložiť do dvoch vriec a až potom ich možno odniesť. Akékoľvek vedrá z farmy by mali byť ponechané na špinavej strane.
• Vrecia je potrebné umiestniť na znečistené miesto v aute.
• Požiadajte farmára, aby v prípade potreby odniesol odpad na spracovanie.
• Po opustení fariem by mali byť vzorky/zariadenia okamžite zaslané na diagnostiku.
• Ak nemáte nablízku ošípané, môžete ísť domov, potom sa osprchovať a dôkladne si umyť vlasy. Všetko oblečenie, ktoré ste mali v ten deň na sebe, dajte na 30 minút do dezinfekcie a vyperte pri teplote nad 60°C. Ak tam, kde žijete, sú ošípané, robte to všetko inde.
• Nenavštevujte žiadne miesto, kde sa chovajú ošípané aspoň tri dni.

Spolu s postupmi samodezinfekcie je potrebné auto umyť a vydezinfikovať. Pred začatím návštevy sa uistite, že auto je bez nepotrebných vecí a je čisté. Umiestnite kúsok plastovej fólie do častí vozidla, kde je zariadenie uložené, a rozdeľte ho na dve časti: čistú a špinavú. Nezabudnite dodržiavať miestne predpisy na dezinfekciu vozidiel.

Pred opustením postihnutej oblasti by ste mali, ak je to možné, umyť a vydezinfikovať vonkajšok vozidla a potom zopakovať tento postup vo vnútri aj mimo vozidla po návrate na základňu.

• Odstráňte všetky plastové fólie, ktoré boli prekryté cez auto, a riadne ich zlikvidujte.
• Umyte vonkajšok auta pomocou podložky alebo hadice a jednorazovej špongie, aby ste odstránili všetky viditeľné nečistoty. Nezabudnite vyčistiť skryté miesta, ako sú podbehy, behúň pneumatík a spodok auta.
• Po odstránení všetkých nečistôt nastriekajte dezinfekčný prostriedok na vonkajšiu stranu stroja.
• Zbavte stroj nečistôt, odstráňte všetky nečistoty (dbajte na správnu likvidáciu odpadu).
• Utrite volant, pedále, radiacu páku, ručnú brzdu atď. handričkou namočenou v dezinfekčnom prostriedku.

Ak je podozrenie na ASF u diviakov

Po prvé, je veľmi dôležité mať jasnú definíciu podozrenia na ASF u diviakov. Takéto definície sa budú pravdepodobne líšiť v závislosti od epidemiologickej situácie v regióne/krajine a môžu sa sprísniť so zvyšujúcim sa rizikom. Definícia sa vo všeobecnosti vzťahuje na každého diviaka s klinickými príznakmi alebo abnormálnym správaním, alebo akékoľvek ulovené zviera s léziami (zistené po pitve), alebo akékoľvek diviaky nájdené uhynuté alebo zabité pri dopravných nehodách (najmä vo vysoko rizikových oblastiach).

Podozrenie, že môžu byť nakazené diviaky, väčšinou hlásia poľovníci, hoci lesníci, turisti, hubári atď. môže to aj nahlásiť. Líši sa v jednotlivých krajinách, no poľovníci môžu zohrávať veľmi významnú úlohu pri zisťovaní choroby. Ak chcete získať ich spoluprácu, budete potrebovať určitú motiváciu, napríklad peniaze. Je dôležité, aby každý poľovník v rizikovej oblasti bol vyškolený na to, aby rozpoznal klinické príznaky ASF, aby vedel, aký typ vzorky odobrať a ako, aby o tom včas informoval úrady a vedel, ako zlikvidovať uhynuté telo. . Poľovníci musia tiež zabezpečiť, aby bol každý ulovený diviak porazený v určenej oblasti a aby sa vnútornosti alebo vedľajšie produkty riadne zlikvidovali, napríklad umiestnením do určených nádob alebo jám.

Ak je podozrenie na zdravie zvieraťa, poľovníci možno budú musieť skladovať celé telo v chladničke (zvyčajne v poľovníckom dome), kým nebudú k dispozícii laboratórne výsledky.

Podozrivé mŕtve telá nájdené v lese by sa mali, ak je to možné, vyzdvihnúť a previezť (autom, saňami atď.) na bezpečné miesto na spálenie alebo likvidáciu. Okrem toho môžu byť na mieste zničené spaľovaním alebo skládkovaním.

V prípade klinického podozrenia je potrebné okamžite vykonať nasledujúce opatrenia:

• Zbierajte údaje o postihnutých zvieratách (počet, vek, pohlavie, patologické lézie, umiestnenie atď.).
• Zabezpečte dezinfekciu všetkých, ktorí boli v kontakte s telom zvieraťa, jeho obuvou, odevom a vybavením. Ak veterinárny lekár a ostatní zamestnanci prídu do kontaktu s chorými/uhynutými zvieratami alebo potenciálne kontaminovaným materiálom, musia používať osobné ochranné prostriedky.
• Vykonávať klinické vyšetrenie a postmortálne vyšetrenie zvierat.
• Odoberte vhodné vzorky a čo najskôr ich prineste do laboratória na diagnostiku (pozri časť Laboratórna diagnostika ASF, strana 39) V niektorých prípadoch, najmä ak sú jatočné telá na odľahlých miestach, musia lovci odobrať vzorky sami.
• Vykonajte vyšetrovanie ohniska (epidemiologické vyšetrovanie).
• Informujte susedných farmárov o udalosti, aby mohli skontrolovať klinické príznaky u svojich zvierat a zatvoriť ich.
• Aj po riadnom vyčistení a dezinfekcii by zamestnanci, ktorí sa podieľajú na vyšetrovaní potenciálne nakazeného diviaka z dôvodu prepuknutia choroby, nemali navštevovať farmy aspoň 48 hodín, aby sa zabránilo neúmyselnému šíreniu choroby.

Pri vykonávaní epidemiologického vyšetrovania týkajúceho sa voľne žijúcich zvierat sa protokoly budú líšiť od protokolov používaných na farmách, pričom sa zohľadnia rôzne charakteristiky populácie. Opýtanými nebudú majitelia zvierat, ale ľudia, ktorí les pravidelne navštevujú, napríklad vedúci alebo členovia miestneho poľovníckeho klubu, miestni lesníci a pod. Otázky môžu zahŕňať:

• Kto poľoval v okolí – miestni aj hosťujúci poľovníci?
• Uskutočnili sa za posledný mesiac alebo dva poľovačky (s šľahačmi)?
• Aké sú geografické hranice rezervácie?
• Aká je hospodárska prax v zálohe?
• Aké sú opatrenia biologickej bezpečnosti?
• Čo je poľovnícka hygiena?
• Vyskytujú sa v oblasti nejaké populácie domácich ošípaných?
• Okamžité opatrenia na úrovni farmy v prípade podozrenia na ohnisko

Štandardné operačné postupy (SOP) (GEMP, 2011)

SOP sú dôležité na zabezpečenie riadneho vyšetrenia podozrivých prípadov. Mali by zahŕňať:

• bezpečnostné poznámky pre vyšetrovateľov a majiteľov domácich zvierat;
• zoznam zariadení, ktoré sa majú odobrať, vrátane zariadenia na odber vzoriek;
• kritériá na stanovenie stupňa kontaminácie oblasti a na základe toho biologicky bezpečný vstupný bod;
• prijatie opatrení biologickej bezpečnosti pri vstupe a výstupe z miesta;
• obmedzenia pohybu hospodárskych zvierat, potravín, personálu, vozidiel a vybavenia pri príchode;
• potrebné vyšetrenia (počet a druh zvierat); odber vzoriek zo zvierat s podobnými vlastnosťami;
• manipulácia so vzorkami;
• postup odosielania vzoriek na testovanie; a - postup oznamovania predbežných zistení príslušným orgánom.

Špecializovaný diagnostický tím (GEMP, 2011)

Odporúča sa prideliť špecializovaný diagnostický tím (alebo tímy), ktorý je možné okamžite mobilizovať. Členovia tímu musia byť vybavení a pripravení vyraziť v krátkom čase. Na túto misiu si tím musí vziať so sebou všetko vybavenie potrebné na vyšetrenie ohniska, zber a prepravu diagnostických vzoriek a rýchlu komunikáciu. Tím musí cestovať na miesto ohniska v sprievode miestneho veterinárneho personálu vrátane miestneho veterinára. Tím musí vykonať klinické vyšetrenie, zhromaždiť anamnézu, vykonať predbežné epidemiologické vyšetrenie, vysledovať pohyb podozrivých zvierat a zhromaždiť širokú škálu diagnostických vzoriek pre podozrenie na ochorenie, ako aj pre akékoľvek iné endemické alebo exotické choroby, ktoré môžu byť zahrnuté. v diferenciálnej diagnostike. Tím musí tieto vzorky dopraviť do laboratória. Musí tiež prijať nevyhnutné okamžité opatrenia na kontrolu choroby v mieste ohniska a musí mať na to zákonnú právomoc. Okrem toho musí mať právomoc vydávať okamžité pokyny miestnym veterinárnym úradníkom. Tím by mal okamžite oznámiť regionálnemu/regionálnemu veterinárnemu lekárovi a hlavnému veterinárnemu lekárovi vyhodnotenie situácie, vrátane krokov prijatých na potvrdenie diagnózy a odporúčaní pre ďalšiu stratégiu kontroly choroby, vrátane vytvorenia infikovaných oblastí a oblastí dohľadu. Zloženie diagnostického tímu sa môže líšiť v závislosti od okolností, ale môže zahŕňať:

• veterinárny patológ z centrálneho alebo krajského veterinárneho diagnostického laboratória;
• epidemiológ špecialista, pokiaľ možno s praxou alebo odborným vzdelaním v oblasti cezhraničných a vznikajúcich chorôb a najmä v oblasti suspektného ochorenia;
• veterinárny lekár s rozsiahlymi skúsenosťami v oblasti endemických chorôb;
• akéhokoľvek špecialistu potrebného na konkrétne vyšetrenie.

Odber vzoriek, balenie a preprava vzoriek

Táto praktická príručka je určená terénnym a laboratórnym tímom.

Výber vzorky

Východiskovým bodom pre akékoľvek laboratórne vyšetrenie ASF je odber vzoriek. Dôležitým hľadiskom je tu účel vyšetrovania, ako je diagnostika choroby, dohľad nad chorobou alebo zdravotná certifikácia. Ktoré zvieratá by sa mali odobrať, bude závisieť od účelu odberu vzoriek.

Napríklad pri vyšetrovaní ohniska (pasívny dohľad) sú cieľovou skupinou choré a uhynuté zvieratá, ale ak chcete zistiť, či sú zvieratá náchylné na ochorenie (aktívny dohľad), mali by sa odobrať vzorky najstarších zvierat.

Zamestnanci, ktorí odoberajú vzorky (a vykonávajú klinické vyšetrenia), by mali byť vyškolení v tom, ako imobilizovať ošípané (počas klinického vyšetrenia a odberu vzoriek).

Tím na odber vzoriek by si mal priniesť dostatočné zásoby a vybavenie na odber vzoriek (pozri rámček 4) od určitého počtu zvierat s rezervou pre prípad, že by sa materiály/zariadenia stali nepoužiteľnými (napr. netesné vysávače atď.). Nezabudnite si tiež priniesť všetko, čo potrebujete na zber údajov, osobnú ochranu/biologickú bezpečnosť a prepravu vzorky (pozri časť „Vzorky prepravných materiálov“ v rámčeku 4).

Na zozbieranie všetkých potrebných vzoriek a informácií na mieste sa odporúča použiť formulár na odber vzoriek v teréne. Ak sa vzorky majú zaslať do regionálneho/medzinárodného referenčného laboratória, odporúča sa odobrať vzorky v dvoch vyhotoveniach, aby bolo možné jednu odoslať a druhú uskladniť, čím sa predíde potrebe rozmrazovať a alikvotne/oddeľovať vzorky na prepravu.

Vzorky by sa mali odoberať z komunity pomocou správnych metód, aby sa zabránilo nadmernému stresu a zraneniu zvieraťa alebo sebapoškodzovaniu. Vzorky by sa mali odoberať za sterilných podmienok, aby sa zabránilo krížovej kontaminácii, a pre každé jednotlivé zviera by sa mali vždy použiť nové ihly, aby sa zabránilo prenosu choroby. Všetky vzorky čakajúce na testovanie by sa mali považovať za infikované a podľa toho by sa s nimi malo zaobchádzať. Všetky materiály použité na odber vzoriek na farme by sa mali zlikvidovať v súlade s národnými predpismi, napr. vriec a preprava späť do laboratória na autoklávovanie/správnu likvidáciu.

Diagnostické laboratóriá vyžadujú, aby boli vzorky dodané do laboratória v dobrom stave a jasne a trvalo označené.

Typy vzoriek

a. Plná krv

Odoberte plnú krv z jugulárnej žily, dolnej dutej žily alebo ušnej žily pomocou sterilných skúmaviek (vakutainerov) s antikoagulantom (EDTA - fialová zátka). Ak už zviera uhynulo, je možné odobrať krv zo srdca, ale treba to urobiť okamžite. Vyhnite sa použitiu heparínu (zelená zátka), pretože môže inhibovať PCR a/alebo poskytnúť falošne pozitívny výsledok pri identifikácii hemadsorpcie (HAd). Krv je cieľom detekcie vírusu pomocou PCR a izolácie vírusu. Plazma oddelená počas procesu centrifugácie sa môže použiť na detekciu protilátok pomocou nepriameho imunoperoxidázového testu (IPT) alebo nepriameho fluorescenčného testu na protilátky (nMFA).

Mikroobjemové testovanie suchou krvnou škvrnou (DBS) na karte filtračného papiera je pohodlný spôsob odberu a skladovania krvi na ďalšiu detekciu DNA a/alebo protilátok. Tieto karty sú veľmi užitočné v odľahlých oblastiach alebo keď nie je k dispozícii chladiaci reťazec, ako je lov alebo vidiecke oblasti v trópoch. Testy na detekciu ASSF alebo protilátkového genómu sú však pri DBS menej citlivé ako pri plnej krvi alebo sére. Vzorky DBS sú odber niekoľkých kvapiek krvi pomocou lancety alebo sterilnej ihly zo striekačky zo žily alebo kože na špeciálne vyrobený absorpčný filtračný papier (kartu). Krv papier dôkladne nasiakne a do niekoľkých hodín zaschne. Vzorky sa skladujú v plastových vreckách s nízkou priepustnosťou pre plyny s pridaným sušidlom na zníženie vlhkosti. Môžu sa skladovať pri izbovej teplote aj v tropickom podnebí.

b. Sérum

Odoberte plnú krv z jugulárnej žily, dolnej dutej žily alebo ušnej žily alebo v čase pitvy pomocou sterilných odsávačiek bez antikoagulancia (červená zátka). Keď sa krv odošle do laboratória na získanie séra, musí sa inkubovať 14 – 18 hodín pri teplote 4 ± 3 °C, aby sa oddelila zrazenina. Zrazenina sa odstráni a po 10 až 15 minútach odstreďovania sa získa supernatant (sérum). Ak je sérum červené, znamená to, že vzorka je hemolyzovaná, čo môže viesť k falošne pozitívnej reakcii v teste ELISA. K hemolýze zvyčajne dochádza, keď je zviera, napríklad diviak, už mŕtve. Sérum môže byť okamžite testované metódami detekcie protilátok a vírusov alebo skladované pri teplote<-70 °С до дальнейшего использования. Для обнаружения антител температура хранения может быть -20 °С, но для обнаружения вируса это не оптимально.

v. Vzorky tkanív a orgánov

Hoci na testovanie na prítomnosť ASFV možno použiť všetky orgány a tkanivá ošípaných (hlavne pri akútnych a subakútnych formách ochorenia), preferovanými orgánmi sú slezina, lymfatické uzliny, pečeň, mandle, srdce, pľúca a obličky. Z nich sa za najdôležitejšie považujú slezina a lymfatické uzliny, pretože zvyčajne obsahujú veľké množstvo vírusu. Kostná dreň je užitočná aj v prípade uhynutých divých zvierat, pretože môže byť jediným tkanivom, ktoré je relatívne dobre zachované, ak je zviera už nejaký čas mŕtve. Na kontrolu prítomnosti izolátov s nízkou virulenciou je možné vyšetriť vnútrokĺbové tkanivá kĺbov. Vzorky sa odporúča skladovať pri teplote 4 °C a doručiť do laboratória čo najskôr (do 48 hodín). Ak to z technických príčin nie je možné, vzorky možno skladovať buď v mrazničke alebo v tekutom dusíku. Na histopatologické vyšetrenie možno paralelne použiť vzorky v 10 % pufrovanom formalíne. Hoci ich nemožno použiť na ďalšie testovanie izolácie vírusov, možno ich použiť na PCR a imunohistochémiu.

Na detekciu vírusu pomocou PCR, izoláciu vírusu a/alebo antigénu pomocou ECBA by sa mala pripraviť 10 % (w/v) homogenizovaná tkanivová suspenzia vo fyziologickom roztoku pufrovanom fosfátom. Po odstredení sa odporúča prefiltrovať supernatant a ošetriť ho 0,1 % antibiotikom počas 1 hodiny pri 4 ± 3 °C. Homogenizovaná tkanivová suspenzia sa môže okamžite použiť na detekciu ASFV a genómu alebo sa môže skladovať pri< -70 °С для дальнейшего использования. Для ПЦР рекомендуется обработать разведенный 1/10 супернатант параллельно с неразведенным материалом. Экссудаты тканей, полученных, главным образом, из селезенки, печени и легких, очень полезны для проверки на наличие антител с использованием ИПТ и нМФА (Гайардо, 2015 г.).

d) Vzorky mäkkých roztočov

Mäkké kliešte Ornithodoros môžu byť testované na ASFV a genóm. Kliešte možno nájsť v norách afrických kancov, štrbinách/dierach v chlievoch a príležitostne v norách hlodavcov vo vnútri chlievov ošípaných. Rôzne druhy kliešťov majú rôzne preferované biotopy a biotopy. Existujú tri spôsoby zberu roztočov: manuálny zber, zachytávanie oxidu uhličitého a vákuové odsávanie. Po odbere by kliešte mali zostať živé alebo skladované v tekutom dusíku, aby sa zabezpečilo optimálne zadržanie vírusu v kliešťoch a zabránilo sa degradácii DNA.

Balenie a preprava vzoriek

Na získanie správnej diagnózy je dôležité vybrať správne vzorky, starostlivo ich zabaliť, označiť a pri správnej kontrole teploty rýchlo odoslať do laboratória. Diagnóza ASF je naliehavá a vzorky by sa mali zaslať do najbližšieho vhodného laboratória najkratšou cestou. Vzorky musia byť sprevádzané sprievodným dokumentom, v ktorom je uvedený počet a typ vzoriek, druh zvierat, miesto odberu (adresa, kraj, oblasť, okres, krajina pôvodu). Mal by tiež obsahovať zoznam požadovaných testov, meno osoby predkladajúcej vzorky, pozorované klinické príznaky, významné lézie, chorobnosť, úmrtnosť, počet postihnutých zvierat, anamnézu a typy zvierat, ktorých sa to týka. V prípade spoločenských zvierat by sa mal poskytnúť majiteľ, názov farmy a typ chovu a zoznam diferenciálnych diagnóz. Je potrebné dbať na to, aby každá vzorka mohla byť spojená so zvieraťom, z ktorého bola odobratá.

Minimálne požadované informácie sa však môžu v jednotlivých laboratóriách líšiť. Pred odberom vzoriek je rozumné zavolať do laboratória, aby sa dodržal správny postup odoslania vzoriek a aby sa zabezpečilo, že bude možné analyzovať predpísaný počet vzoriek alebo že sa vzorky uložia na požadovaný čas.

Vzorky by mali doraziť do laboratória čo najskôr, aby sa predišlo zhoršeniu kvality a zabezpečili sa najlepšie výsledky. Musia sa prepravovať za bezpečných podmienok, aby sa zabránilo kontaminácii iných zvierat alebo ľudí počas prepravy a aby sa zabránilo kontaminácii samotných vzoriek. Zaslané vzorky musia byť dodané s dostatočným chladiacim materiálom, ako sú ľadové balíčky, aby sa zabránilo degradácii. Pamätajte, že presnú diagnózu možno urobiť len vtedy, keď sú vzorky v dobrom stave.

Pozemná doprava

Pri preprave vzoriek do najbližšieho laboratória sa musia dodržiavať národné pravidlá a predpisy, a to aj v prípade, že vzorky prepravujú veterinári. Pre Európu je hlavným dokumentom Európska dohoda o medzinárodnej cestnej preprave nebezpečného tovaru (ADR). V ostatných regiónoch sa musia dodržiavať národné predpisy a predpisy.

Ak nie sú k dispozícii, mali by sa postupovať podľa vzorových nariadení OSN uvedených v príručke OIE pre diagnostické testy a vakcíny pre suchozemské zvieratá (2016; kapitoly 1.1.2 a 1.1.3).

Trojité balenie by sa malo používať aj v prípade cestnej prepravy. Podrobný príklad charakteristík trojbalenia je znázornený na obrázku 27.

Letecká doprava

Vzorky sa musia prepravovať v súlade s predpismi3 pomocou systému „trojitého balenia“. Najmä ak sa vzorky prepravujú letecky, odosielateľ musí dodržiavať medzinárodné predpisy pre nebezpečný tovar (DGR) Medzinárodnej asociácie leteckých prepravcov (IATA) a balenie musí spĺňať pokyny pre balenie 650 v DGR.

Diagnostické vzorky pre africký mor ošípaných sa považujú za nebezpečné a musia byť riadne zabalené a označené, aby sa zabránilo šíreniu vírusu. Preto je potrebné použiť materiály, ktoré spĺňajú technické požiadavky (t. j. príslušné požiadavky IATA na prepravu diagnostických vzoriek, ako je tlaková skúška 95 kPa, skúška pádom). Ak chcete nájsť dodávateľov takýchto nádob a obalov, hľadajte na internete pomocou kľúčových slov ako „95 kPa“ a „UN3373“ a „lialka“, „tuba“ alebo „vrecko“ a týmto spôsobom môžete získať potrebné informácie.

• primárne kontajnery. Vzorky by sa mali skladovať vo vzduchotesnej, vodotesnej, sterilnej nádobe (nazývanej „primárna nádoba“), ako je znázornené na obrázku 27. Každá primárna nádoba by nemala obsahovať viac ako 1 liter. Veko každej nádoby musí byť utesnené lepiacou páskou alebo parafilmom. Tieto primárne utesnené nádoby musia byť oddelene zabalené do výplňového a absorpčného materiálu, ktorý v prípade úniku z nádob alebo liekoviek môže absorbovať kvapalinu a chrániť pred nárazom. Je dôležité označiť každú nádobu vodotesným atramentom, aby bolo možné identifikovať zviera, z ktorého bola vzorka odobratá.
• sekundárne balenie. Všetky tieto primárne nádoby by mali byť umiestnené v sekundárnych nepriepustných, hermeticky uzavretých, vodotesných nádobách vyrobených z plastu alebo kovu. Sekundárny obal musí bez úniku odolať vnútornému tlaku 95 kPa (0,95 baru) v teplotnom rozsahu -40 °C až 55 °C. Absorpčný materiál musí byť umiestnený aj vo vnútri druhej nádoby. Ak je do jednej sekundárnej nádoby umiestnených niekoľko krehkých primárnych nádob, každá by mala byť zabalená alebo oddelená od ostatných, aby sa zabránilo kontaktu.

VÝSTRAHA 1) suchý ľad sa nesmie umiestňovať do primárnej alebo sekundárnej nádoby z dôvodu nebezpečenstva výbuchu. 2) Primárny zásobník musí byť schopný bez úniku odolať vnútornému tlaku 95 kPa (0,95 baru) v teplotnom rozsahu 740 °C až 55 °C.

• Pevný vonkajší obal. Sekundárny kontajner musí byť zabalený vo vonkajšom obale s použitím vhodného materiálu vložky. Musí úspešne prejsť testom pádu z výšky 1,2 m a mať špeciálne označenie UN3373. Vonkajší obal nesmie obsahovať viac ako 4 litre kvapaliny alebo viac ako 4 kg pevných látok. Uvedené množstvá nezahŕňajú ľad, suchý ľad alebo tekutý dusík, ktoré sa používajú na udržanie vzoriek v chlade.

Vzorky odosielané pri 4°C, zvyčajne na krátke zásielky (1-2 dni)
Takéto vzorky zabalené tak, ako je uvedené vyššie, sa musia prepravovať s chladivami (dostatočnými na udržanie požadovanej teploty) v izolovanom a bezpečnom obale v súlade s pokynmi MAAE pre balenie (IAEA) č. 650, ak sa prepravujú letecky.

Vzorky sa dodávajú zmrazené (-20 °C alebo -70 °C)
V prípade zásielok dlhších ako tri dni musia byť vzorky tiež zabalené podľa špecifikácie s dostatočným množstvom suchého ľadu pridaného v izolovanom vrecku na udržanie teploty. Je dôležité zabezpečiť, aby bol sekundárny obal v strede škatule, pretože keď sa suchý ľad „topí“, sekundárna nádoba môže vytekať. Oxid uhličitý (CO2) uvoľnený v dôsledku „topenia“ suchého ľadu znižuje pH a inaktivuje vírus; preto musia byť všetky primárne a sekundárne nádoby hermeticky uzavreté. Keď sa na udržanie vzoriek počas prepravy v chlade používa suchý ľad, vonkajší obal musí byť odvzdušnený (t. j. nie hermeticky uzavretý), aby sa predišlo zvyšovaniu tlaku, ktorý by mohol nádobu roztrhnúť. Nikdy nezmrazujte plnú krv alebo sérum obsahujúce koagulant.

1. Označovanie nebezpečenstva a označovanie

Vonkajšia časť škatule (pevný vonkajší obal) musí mať toto označenie:

1. označenie „Biologická látka, kategória B“ (obrázok 28) a vedľa nej správny prepravný názov: „Biologická látka, kategória B“ („Biologická látka, kategória B“);
2. celé meno, adresa a telefónne číslo odosielateľa;
3. celé meno, adresa a telefónne číslo príjemcu;
4. celé meno a telefónne číslo zodpovednej osoby, ktorá vie o zásielke, napr.: zodpovedná osoba: meno, priezvisko ‚+ 123 4567 890;
5. nálepka s nápisom: „skladovať pri 4 stupňoch Celzia“ alebo „skladovať pri -70 stupňoch Celzia“.
   Pri použití suchého ľadu:
6. znak "suchý ľad" (obrázok 29);
7. UN číslo a správny expedičný názov pre suchý ľad so slovami „AKO CHLADIŤ“. Čistá hmotnosť suchého ľadu v kilogramoch musí byť zreteľne uvedená vedľa (Obrázok 29), napríklad: UN 1845, SUCHÝ ĽAD, AKO CHLADIACA LÁTKA, NET. ## KG.

2. dokumentácia

K vzorkám zaslaným do laboratória musí byť priložený sprievodný dokument, ktorého formulár predtým laboratórium predložil, alebo ak nie je k dispozícii, sprievodný list. Tento list by mal obsahovať informácie o majiteľovi zvieraťa, názov farmy a oblasti, typ systému chovu zvierat, podrobnosti o postihnutom zvierati/zvieratách, históriu, klinické príznaky a údaje z pitvy. Je tiež potrebné špecifikovať požadované testy. Prepravná dokumentácia: ak zásielka prekračuje štátne hranice, niekedy sa vyžaduje povolenie na dovoz alebo vývoz, ako aj kópia povolenia od prijímajúceho laboratória, že môžu prijať infekčnú látku na diagnostické účely atď. Takéto požiadavky sa v jednotlivých krajinách líšia. Je vhodné sa vopred opýtať v laboratóriu príjemcu, aké doklady sú potrebné na dovoz diagnostických vzoriek.

3. Doprava

Pred odoslaním vzoriek čo najskôr kontaktujte prijímajúce laboratórium a informujte ich o plánovanej zásielke, uveďte podrobnosti, približný dátum a čas príchodu. Najlepšie je využiť kuriérsku službu od dverí k dverám, ktorá doručí priamo do laboratória. Po odoslaní vzoriek bude kuriérska služba povinná poskytnúť prijímajúcemu laboratóriu názov svojej spoločnosti a poštový identifikátor, číslo nákladného listu a/alebo leteckého nákladného listu, ak existuje. Ak sa vzorky prepravujú letecky, je potrebné vopred dohodnúť s prijímajúcim laboratóriom prevzatie zásielky po prílete na letisko (niektoré medzinárodné laboratóriá majú tento systém, ale nie všetky). Prijímaciemu laboratóriu by sa mal čo najskôr poskytnúť názov leteckej spoločnosti, číslo letu a číslo leteckého nákladného listu. Ľudia majú zakázané nosiť so sebou infekčné látky ako zapísanú alebo príručnú batožinu alebo na sebe.

Transport izolovaného/kultivovaného vírusu ASF

Izolovaný/kultivovaný ASFV sa musí prepravovať ako infekčná látka kategórie A. UN číslo UN2900, správny expedičný názov Infekčné látky postihujúce zvieratá (vírus afrického moru ošípaných) . Musí sa použiť obal v súlade s obalovou inštrukciou 620. Nebezpečné štítky a označenia na vonkajšej strane škatule sa tiež líšia.

Predpisy o nebezpečnom tovare vyžadujú, aby všetci zamestnanci zapojení do prepravy absolvovali primerané školenie. Je to dôležité najmä pri preprave infekčných látok kategórie A, kde musí byť personál vyškolený v súlade s požiadavkami, vrátane absolvovania špeciálnych kurzov, absolvovania skúšok a získania certifikátu (na obdobie dvoch rokov). Ďalšie informácie nájdete v usmerneniach WHO pre prepravu infekčných látok.

Laboratórna diagnostika ASF

Keďže neexistuje žiadna vakcína, včasné a včasné zistenie choroby je nevyhnutné na zavedenie prísnych sanitárnych opatrení a opatrení biologickej bezpečnosti na zabránenie šírenia choroby. Diagnóza ASF znamená identifikáciu zvierat, ktoré sú alebo boli predtým infikované ASF. Pre získanie príslušných informácií pre realizáciu kontrolných a eradikačných programov je potrebné vykonať diagnostiku, ktorá zahŕňa detekciu a identifikáciu špecifických antigénov ASFV alebo DNA a protilátok. Pri výbere diagnostického testu (obrázok 30) je dôležité zvážiť priebeh ochorenia. Keďže zvieratá môžu byť v rôznych štádiách ochorenia, testy na detekciu vírusu aj na detekciu protilátok by sa mali vykonávať počas prepuknutia choroby a v rámci programov kontroly/eradikácie choroby.

Inkubačná doba prirodzenej infekcie sa pohybuje od 4 do 19 dní. Počas dvoch dní pred nástupom klinických príznakov začnú zvieratá infikované ASF vylučovať veľké množstvo vírusu. Vylučovanie vírusu sa môže líšiť v závislosti od virulencie konkrétneho kmeňa ASFV. Sérologická konverzia nastáva okolo siedmeho až deviateho dňa po infekcii a protilátky je možné detegovať po celý zvyšok života zvieraťa (obr. 30).

Pozitívny test na prítomnosť vírusu (t. j. antigénu) naznačuje, že testované zvieratá boli infikované už v čase odberu vzoriek. Na druhej strane pozitívny test ASF na protilátky indikuje súčasnú alebo minulú infekciu, keď sa zviera zotavilo (a môže zostať séropozitívne po celý život).

Od konca roku 2015 epidemiologické sérologické údaje vo východnej Európe poukazujú na výrazný nárast výskytu séropozitívnych zvierat, ktorý je badateľný najmä v populácii diviakov v znevýhodnených krajinách EÚ. Tieto výsledky naznačujú, že niektoré zvieratá prežijú viac ako mesiac a môžu sa zotaviť z ASF a v niektorých prípadoch dokonca zostávajú subklinicky infikované, ako bolo predtým pozorované na Pyrenejskom polostrove, v Amerike a Afrike. Preto sú metódy detekcie protilátok potrebné na získanie úplných informácií na implementáciu programov kontroly a eradikácie chorôb.

Detekcia vírusu ASF

Detekcia genómu ASFV pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR)
Polymerázová reťazová reakcia (PCR) sa používa na detekciu genómu ASFV vo vzorkách odobratých z ošípaných (krv, orgány atď.) a kliešťov. Malé fragmenty vírusovej DNA sa amplifikujú pomocou PCR na detegovateľné množstvá. Všetky validované PCR testy dokážu odhaliť vírusovú DNA ešte pred nástupom klinických príznakov. PCR umožňuje diagnostikovať ASF v priebehu niekoľkých hodín od príchodu vzoriek do laboratória. Pri detekcii ASFV je PCR citlivou, špecifickou a rýchlou alternatívou k izolácii vírusu. PCR má vyššiu senzitivitu a špecificitu ako alternatívne metódy detekcie antigénu, ako je ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) alebo priama fluorescenčná protilátka (MFA). Príliš vysoká citlivosť PCR však predstavuje riziko krížovej kontaminácie, preto je potrebné prijať vhodné opatrenia na minimalizáciu tohto rizika.

Konvenčné a real-time PCR odporúčané v usmerneniach OIE pre diagnostické testy a vakcíny pre suchozemské zvieratá (2016) sú plne overené a sú dobrými nástrojmi na rutinnú diagnostiku tohto ochorenia. Iné testy PCR v reálnom čase sú citlivejšie ako tie, ktoré odporúčajú usmernenia OIE a možno ich použiť na zistenie genómu ASFV u zotavených zvierat. Rôzne sady primérov a sond používané v týchto molekulárnych metódach sú navrhnuté tak, aby amplifikovali lokus v kódujúcej oblasti VP72, dobre preštudovanej a vysoko konzervovanej oblasti genómu ASFV. Široká škála izolátov patriacich do všetkých 22 známych vírusových genotypov p72 môže byť detegovaná pomocou týchto metód PCR dokonca aj v inaktivovaných alebo degradovaných vzorkách.

PCR by sa mala zvoliť v prípade hyperakútnej, akútnej alebo subakútnej infekcie ASF. Okrem toho, keďže PCR deteguje vírusový genóm, reakcia môže byť pozitívna, aj keď sa počas izolácie vírusu nenájde žiadny vírus, vďaka čomu je PCR veľmi užitočným nástrojom na detekciu ASFV DNA u ošípaných infikovaných nízko alebo stredne virulentnými kmeňmi. Hoci pomocou PCR nie je možné určiť infekčnosť vírusu, táto metóda poskytuje informácie o jeho množstve.

Izolácia vírusu ASF
Izolácia vírusu je založená na inokulácii vzorky do citlivých primárnych bunkových kultúr prasačieho pôvodu, monocytov a makrofágov. Ak je vo vzorke prítomný ASFV, bude sa replikovať vo vnímavých bunkách, čo vyvolá cytopatický efekt (CPE) v infikovaných bunkách. Bunkový pisis a CPE sa zvyčajne vyskytujú po 4872 hodinách hemadsorpcie. Dôležitosť tohto zistenia spočíva v jeho špecifickosti, pretože žiadny z iných prasacích vírusov nie je schopný hemadsorpcie v kultúrach leukocytov. Keď sa vírus replikuje v týchto kultúrach, väčšina kmeňov ASFV indukuje hemadsorpčnú reakciu (HAd) adsorbovaním červených krviniek ošípaných na leukocyty infikované ASFV za vzniku takzvaných „rozet“ (obr. 31).

Je však dôležité poznamenať, že CPE pri absencii hemadsorpcie môže byť spôsobená cytotoxicitou inokula, prítomnosťou iných vírusov, ako je ADV, alebo nehemadsorbujúcim sa izolátom VASF. V týchto prípadoch musí byť prítomnosť ASFV v bunkovom sedimente potvrdená inými virologickými testami, ako je MFA, alebo pomocou PCR. Ak sa nepozoruje žiadna zmena alebo ak sú MFA a PCR negatívne, supernatant by sa mal subinkulovať do čerstvých kultúr až do 375 pasáží, kým sa ASFV nevylúči.

Izolácia vírusu a identifikácia pomocou GAd sa odporúčajú ako referenčné testy na potvrdenie pozitívnych výsledkov predbežného pozitívneho testu na antigén (ELISA, PCR alebo MFA). Tieto testy sa odporúčajú aj vtedy, keď už bol ASF potvrdený inými metódami, najmä v prípade prvého ohniska ASF v oblasti. Okrem toho je izolácia vírusu povinná, ak je vaším cieľom získať vírusový materiál na následnú charakterizáciu molekulárnymi a biologickými metódami.

Detekcia antigénu ASF metódou priamej fluorescenčnej protilátky (MFA)
MFA sa môže použiť na detekciu antigénu ASFV v tkanivách ošípaných. Test spočíva v mikroskopickej detekcii vírusových antigénov na náteroch-odtlačkoch alebo tenkých kryorezoch orgánového tkaniva. Intracelulárne antigény sa detegujú pomocou špecifických protilátok konjugovaných s fluoresceín izotiokyanátom (FITC). MFA sa môže použiť aj na detekciu antigénu ASFV v kultúrach leukocytov, ktoré nevykazujú AHAD, a teda možno identifikovať kmene ASFV, ktoré sa nehemadsorbujú. MFA môže tiež rozlišovať medzi CPE spôsobeným ASFV a CPE vyvolaným inými vírusmi alebo cytotoxicitou inokula. Na zabezpečenie správnej interpretácie sklíčok sa používajú pozitívne a negatívne kontroly. Je to vysoko citlivý test pre prípady hyperakútnej a akútnej ASF a dá sa vykonať pomerne rýchlo. Je to spoľahlivý test, ale vo väčšine prípadov sa nahrádza PCR a reagencie nie sú vždy dostupné. Je však dôležité poznamenať, že pri subakútnej a chronickej forme ochorenia je citlivosť MFA oveľa nižšia (40 %).

Detekcia antigénu ASF metódou antigén-ELISA
Vírusové antigény možno detegovať aj pomocou enzýmovej imunoanalýzy (ELISA), ktorá je lacnejšia ako PCR a umožňuje testovanie vzoriek vo veľkom meradle v krátkom čase bez špeciálneho laboratórneho vybavenia.

Rovnako ako v prípade MFA je však pri subakútnej a chronickej forme ochorenia výrazne znížená citlivosť antigén-ELISA. Okrem toho sú vzorky v teréne často v zlom stave, čo môže tiež znížiť citlivosť testu. Preto sa odporúča použiť antigén-ELISA (alebo akýkoľvek iný ELISA test) len ako „skupinový“ test spolu s inými virologickými a sérologickými testami.

Detekcia protilátok ASF

Sérologické testy sú najčastejšie používané diagnostické testy kvôli ich jednoduchosti, relatívne nízkej cene a skutočnosti, že nevyžadujú veľké množstvo špecializovaného vybavenia alebo laboratória. Keďže neexistuje žiadna vakcína proti ASF, prítomnosť protilátok proti ASF vždy indikuje súčasnú alebo prekonanú infekciu. Okrem toho sa protilátky ASFV objavia krátko po infekcii a pretrvávajú niekoľko rokov. Pri hyperakútnych a akútnych infekciách však ošípané často uhynú skôr, ako hladiny protilátok dosiahnu detekovateľné hladiny. Preto sa odporúča odoberať vzorky a detegovať vírusovú DNA už v skorých štádiách prepuknutia.

Na detekciu protilátok proti ASF sa odporúčajú tieto testy: ELISA na skríning protilátok a ako potvrdenie imunoblotovanie (IB) alebo nepriame fluorescenčné protilátky (nMFA). Nepriamy imunoperoxidázový test (IPT) možno použiť ako alternatívny potvrdzujúci test na detekciu protilátok ASF v sére a tkanivovom exsudáte. Môže byť použitý s veľkým počtom vzoriek, nevyžaduje drahé vybavenie fluorescenčného mikroskopu a poskytuje dostatočnú citlivosť.

Detekcia protilátok ASF testom ELISA
ELISA je veľmi užitočná technika a je široko používaná vo veľkých sérologických štúdiách mnohých chorôb zvierat. Niektoré z najvýznamnejších charakteristík tejto metódy sú vysoká citlivosť a špecifickosť, rýchlosť vykonávania, nízke náklady a jednoduchá interpretácia výsledkov. Veľké populácie môžu byť rýchlo kontrolované pomocou automatizovaného zariadenia.

Na detekciu protilátok proti ASF vo vzorkách séra používa ELISA značenie protilátok určitými enzýmami. Keď sa antigén a protilátka na seba naviažu, enzým spôsobí reakciu, ktorá spôsobí zmenu farby, čím identifikuje prítomnosť ASF. Na detekciu protilátok ASF sa v súčasnosti používajú rôzne komerčné a laboratórne metódy, ako je nepriama alebo blokujúca ELISA.

Nesprávne spracované alebo zle konzervované sérum (v dôsledku nevhodného skladovania alebo prepravy) a hemolyzované vzorky môžu viesť až k 20 % falošne pozitívnych výsledkov. Preto by sa všetky pozitívne a sporné vzorky po teste ELISA mali testovať alternatívnymi sérologickými potvrdzujúcimi metódami.

Imunoblotting (IB) je rýchly a citlivý test na detekciu a charakterizáciu proteínov. Využíva špecifické deterministické rozpoznávanie antigén-protilátka. Tento test používa antigénové prúžky, ktoré nesú vírusové antigény. Test zahŕňa solubilizáciu, elektroforetickú separáciu a prenos proteínov na membrány (zvyčajne sa používa nitrocelulóza). Membrána sa prekryje primárnymi protilátkami proti špecifickému cieľu a potom sa označia sekundárne protilátky, aby sa vizualizovala pozitívna reakcia.

Prvé vírusové proteíny, ktoré indukujú protilátky špecifické pre ASF u ošípaných, vždy reagujú na IB u všetkých infikovaných zvierat. U zvierat, ktoré prežili, sa reakcie stanú pozitívnymi so sérami získanými od zvierat 7-9 dní po infekcii a až niekoľko mesiacov po infekcii. Séra zo zvierat očkovaných proti iným vírusom môžu vyvolať falošne pozitívne reakcie. V takýchto prípadoch by sa mali použiť alternatívne konfirmačné metódy, ako je IPT alebo MFA.

Detekcia protilátok ASF pomocou nepriamych fluorescenčných protilátok (nMFA)
Test je založený na detekcii protilátok ASF naviazaných na monovrstvu obličkových buniek africkej opice zelenej infikovaných adaptovaným ASFV. Reakcia antigén-protilátka sa deteguje pomocou konjugátu značeného fluoresceínom. Pozitívne vzorky vykazujú špecifickú fluorescenciu v cytoplazme infikovaných buniek. nMFA je rýchla metóda na detekciu protilátok ASF v sére, plazme alebo tkanivovom exsudáte s vysokou citlivosťou a špecifickosťou.

Detekcia protilátok ASF pomocou testu nepriamej imunoperoxidázy (IPT)
IPT je fixná bunková imunocytochemická metóda na stanovenie tvorby komplexu antigén-protilátka pod vplyvom peroxidázy. Pri tejto metóde sú obličkové bunky opice zelenej infikované izolátom ASFV prispôsobeným týmto bunkovým kultúram. Infikované bunky sú fixované a použité ako antigény na stanovenie prítomnosti špecifických anti-ASF protilátok vo vzorkách. Podobne ako MFA, aj IPT je rýchla, vysoko citlivá a vysoko špecifická metóda na detekciu protilátok ASF v sére, plazme alebo tkanivovom exsudáte. Interpretácia výsledkov je jednoduchšia ako pri MFA vďaka použitému enzymatickému zobrazovaciemu systému.

Stručne povedané, môžeme povedať, že moderné diagnostické testy umožňujú s istotou diagnostikovať ASF kombináciou metód na detekciu vírusu aj protilátok. PCR v reálnom čase je najpoužívanejšou virologickou diagnostickou metódou na citlivú, špecifickú a rýchlu detekciu ASFV DNA. Kvôli možnosti krížovej kontaminácie musí byť jeden pozitívny výsledok PCR od jedného zvieraťa z prirodzeného prostredia (napr. diviak) alebo jeden pozitívny výsledok PCR od jednej skupiny zvierat potvrdený dodatočnými virologickými testami v kombinácii so sérologickými, patologickými a epidemiologické výsledky. Pretože PCR zisťuje prítomnosť vírusovej DNA a nie živého vírusu, dôrazne sa odporúča vykonať izoláciu vírusu z infikovaných vzoriek pred potvrdením prepuknutia, ak je ovplyvnená nová oblasť.

Vzhľadom na obmedzenia rôznych metód sú overené testy ECBA najlepšou metódou na detekciu protilátok proti ASF, najmä na skríning vzoriek séra. Potvrdzujúce testy ako IB, nMFA alebo IPT sú kľúčom k identifikácii falošne pozitívnych výsledkov od ECB. Okrem toho sú nMFA a IPT odporúčanými metódami na analýzu tkanivových exsudátov a vzoriek plazmy, ktoré poskytujú úplný epidemiologický obraz a umožňujú určiť čas infekcie.

Presná diagnóza ASF by mala byť založená na virologických a sérologických výsledkoch, ako aj na klinických, patologických a epidemiologických údajoch. V tabuľke 5 sú uvedené charakteristiky hlavných laboratórnych metód diagnostiky ASF.

Prevencia a kontrola

Africký mor ošípaných sa líši od väčšiny iných cezhraničných chorôb zvierat tým, že neexistuje žiadna vakcína ani liek na prevenciu alebo liečbu choroby. Preto je obzvlášť dôležité, aby regióny bez tejto choroby takými zostali aj v budúcnosti. Prevencia zavlečenia ASFV do populácií domácich a diviakov a kontrola a eradikácia choroby hneď, ako sa zistí, sú najlepšími spôsobmi, ako minimalizovať vplyv tejto choroby. Existujú však aj úspešné príklady eradikácie ASF, napríklad v Brazílii, Portugalsku, Španielsku alebo na Pobreží Slonoviny.

Prevencia začína zavedením tvrdých opatrení na hraniciach a zvyšovaním povedomia medzi všetkými zainteresovanými stranami. Včasná detekcia, včasná diagnóza, včasná reakcia a dobrá komunikácia sú rozhodujúce pre minimalizáciu šírenia choroby po zavedení. Aby sme pochopili, ktoré opatrenia budú najúčinnejšie, je dôležité mať na pamäti, ako sa ASF prenáša: t.j. predovšetkým pri premiestňovaní infikovaného bravčového mäsa a výrobkov z neho (infekcia sa vyskytuje po jedle); priamym kontaktom so živými zvieratami vrátane divých ošípaných; a cez uhryznutie kliešťom Ornithodoros.

Opatrenia možno prijať na inštitucionálnej alebo individuálnej (napr. farmárskej) úrovni, pričom väčšina týchto opatrení zahŕňa zlepšenie biologickej bezpečnosti. Preventívne a kontrolné opatrenia možno vykonávať prostredníctvom súkromných alebo verejných iniciatív, ale dosiahnutie optimálnej úrovne si zvyčajne vyžaduje kombináciu oboch. Poľnohospodári zohrávajú kľúčovú úlohu, ale môžu potrebovať technickú a finančnú podporu.

Ďalšie informácie nájdete v dvoch usmerneniach FAO: Správna prax riadenia núdzových situácií (GEMP): Základy (FAO, 2011) a Správna prax biologickej bezpečnosti v sektore ošípaných (FAO, 2010).

Povedomie
Zvyšovanie povedomia, ako aj poskytovanie informácií/technickej pomoci a školenia všetkým zainteresovaným stranám má priamy pozitívny vplyv na vykonávanie všetkých činností v oblasti prevencie, kontroly a dohľadu nad chorobami. Preto sa zvyšovanie informovanosti považuje za nákladovo najefektívnejšie opatrenie. Informovanosť pomáha výrobcom ošípaných robiť rýchle a efektívne rozhodnutia pri implementácii preventívnych a kontrolných opatrení.

Osoby, ktoré sú v kontakte s ošípanými, by si mali byť vedomé toho, ako predchádzať ASF a ako na ňu reagovať. Patria sem veterinári a farmári, ako aj všetci, ktorí sú zapojení do trhového reťazca, t.j. osoby podieľajúce sa na preprave, predaji, porážke a porážke ošípaných; poskytovatelia služieb (napr. súkromní veterinárni lekári, distribútori krmiva atď.); a v niektorých prípadoch aj široká verejnosť. V prípade diviakov sú cieľovou skupinou aj poľovníci, lesníci a ťažbári.

Je veľmi dôležité nadviazať pravidelné kontakty medzi veterinárnou službou (profesionálmi alebo poloprofesionálmi) a chovateľmi/obchodníkmi s hospodárskymi zvieratami. Malo by ísť nielen o bežné návštevy, ale aj o „domáce návštevy“ na vyšetrenie a poskytnutie pomoci v súvislosti s ochorením. Poľnohospodári tak získajú istotu, že vyhľadajú oficiálnu veterinárnu pomoc, keď čelia nezvyčajným a potenciálne ničivým chorobám, ako je ASF. Tento prístup zdola nahor tiež umožní zohľadnenie vstupov poľnohospodárov pri vývoji nástrojov prevencie, riadenia a stratégie. Pre tie krajiny, kde je súkromný sektor poskytovateľom oficiálnych veterinárnych služieb, je potrebná ďalšia interakcia medzi nimi a veterinárnymi orgánmi (GEMP, 2011).

Všetky zainteresované strany by si mali uvedomiť potenciálnu závažnosť ASF, ako ju odhaliť a predchádzať jej (t. j. klinický obraz) a potrebu okamžite nahlásiť akékoľvek podozrenie na ASF veterinárnej službe (t. j. pasívny dohľad). To druhé je obzvlášť dôležité, pretože farmári môžu vnímať smrť veľkého počtu ošípaných ako „normálnu“. Mali by sa oznámiť aj opatrenia na zníženie pravdepodobnosti infekcie. Je potrebné zdôrazniť nebezpečenstvo kŕmenia sa potravinovým odpadom a iné porušenia biologickej bezpečnosti, najmä pre drobných poľnohospodárov a súkromný sektor. Ak sa ASF dostane do krajiny, problém by sa mal dobre propagovať v tlači, pričom by sa malo zdôrazniť dôležitosť posilnenia biologickej bezpečnosti na všetkých úrovniach, pravidelnej kontroly ošípaných a urýchleného hlásenia podozrivých lézií a úmrtí úradom. Dokonca aj informácie o kontrolných politikách, ako je zabíjanie, kompenzácia a zarybňovanie, pomôžu farmárom pochopiť ich úlohu v tomto procese a posilnia ich ochotu spolupracovať.

Obchodníci s dobytkom, obchodníci a díleri sú často prehliadaní, napriek tomu, že ide o dôležitú cieľovú skupinu, ktorú je potrebné informovať. Pohyb zvierat, ktorý vykonávajú obchodníci, je často kľúčovým faktorom pri šírení epizootických chorôb, ako je ASF. Budovanie dôvery medzi veterinárnymi orgánmi a subjektmi zaoberajúcimi sa obchodovaním so zvieratami je rovnako dôležité ako medzi poľnohospodármi. Hlavné témy by mali byť všeobecné, aj keď by sa mal klásť dôraz na dôležitosť získavania zvierat z oblastí bez chorôb, aby nekupovali alebo nepredávali choré ošípané alebo ošípané zo skupín, kde sa vyskytli prípady choroby, a aby dodržiavať pravidlá karantény, očkovania, testovania, identifikácie zvierat a ich účtovania. Treba však zdôrazniť potenciálny vplyv ASF na domáci a medzinárodný obchod (GEMP, 2011).

Rozvoj a šírenie informácií a školenia vykonávajú skôr vládne agentúry (a niekedy aj mimovládne organizácie) prostredníctvom poľnohospodárskych služieb a advokačných služieb, a nie súkromným sektorom. Existuje mnoho spôsobov, ako sprostredkovať informácie, ako sú letáky, brožúry, plagáty, televízne a rozhlasové správy, stretnutia organizované náboženskými vodcami alebo dedinskými staršími atď. Formát závisí od cieľovej skupiny. V niektorých prípadoch je však potrebná dôkladnejšia príprava. Pokiaľ ide o materiály na zvyšovanie povedomia, existuje niekoľko formátov, od online kurzov až po tradičné osobné školenia. Keď je potrebné poskytnúť informácie veľkému počtu ľudí, model vlaku trénera môže byť najlepším prístupom. Tento prístup sa tiež označuje ako „kaskádové školenie“, pretože tieto programy sú určené na školenie ľudí, ktorí zase budú školiť ostatných.

Prevencia
Riziko zavlečenia ASFV (alebo akéhokoľvek iného patogénu) sa zníži, ak sa správne postupy biologickej bezpečnosti uplatňujú nielen na farme, ale v každej fáze dodávateľského reťazca, ako sú trhy so živými zvieratami, bitúnky, preprava zvierat atď. Osobitná pozornosť by sa mala venovať malým komerčným prevádzkam, ako sú dvory, ktoré majú nízke normy biologickej bezpečnosti, trhy, kde sa zvieratá hrnú z mnohých zdrojov. Sú kľúčom k šíreniu ASF a hoci platia rovnaké koncepcie biologickej bezpečnosti, špeciálne pre ne boli vyvinuté osobitné opatrenia a pokyny.

Opatrenia biologickej bezpečnosti by sa mali používať na zabránenie vstupu patogénov do stáda alebo farmy (vonkajšia biologická bezpečnosť) a na zabránenie alebo spomalenie šírenia choroby u neinfikovaných zvierat v stáde alebo na farme po infekcii (vnútorná biologická bezpečnosť) a na zastavenie infekcie iné v interiéri alebo divé ošípané. S vládou nariadenými nariadeniami o biologickej bezpečnosti na farmách sa potreby a očakávania líšia podľa farmárskeho systému a miestnych geografických a sociálno-ekonomických podmienok (od veľkých, krytých fariem až po malé dedinské farmy na pasúce sa ošípané). Globálne otázky biologickej bezpečnosti sú relevantné pre všetky výrobné systémy, ale sú obzvlášť problematické pre malé domácnosti v rozvojových krajinách a krajinách s transformujúcou sa ekonomikou. Široká škála možností na zlepšenie biologickej bezpečnosti, napríklad niekedy také jednoduché ako zlepšenie vedenia záznamov, však znamená, že všetky farmy môžu zlepšiť svoje postupy prevencie a kontroly chorôb.

Schopnosť poľnohospodárov implementovať opatrenia biologickej bezpečnosti na farmách závisí od charakteristík ich výrobného systému, ich technických znalostí a finančných zdrojov. Tí, ktorí sú zodpovední za zlepšovanie programov biologickej bezpečnosti, musia mať dôkladné znalosti o rôznych systémoch a porozumieť ľuďom zapojeným do produkcie ošípaných, napríklad prečo chovajú zvieratá a aké zdroje majú. Zohľadnením týchto faktorov budú môcť rozvíjať udržateľné stratégie biologickej bezpečnosti na farmách a pozdĺž výrobných a hodnotových reťazcov.

Existujú rozdiely medzi opatreniami biologickej bezpečnosti na farmách pred vypuknutím (biologická izolácia) a po jej výskyte (biologická ochrana), hoci tieto opatrenia dobrej prevencie a manažmentu spolu úzko súvisia. Aby bolo možné odlíšiť metódy prevencie ASF od celkovej prevencie chorôb, je potrebné vziať do úvahy spôsoby prenosu ASF. Niektoré z najdôležitejších opatrení biologickej bezpečnosti sú uvedené nižšie. Viac informácií o biologickej bezpečnosti možno nájsť v usmerneniach FAO pre správnu prax v oblasti biologickej bezpečnosti v sektore ošípaných.

Kŕmenie zvyškov potravy
Krmivo je dôležitým kontrolným bodom pre šírenie ASF a iných chorôb. Potravinový odpad je svojou povahou pohodlný, cenovo dostupný, ale veľmi nebezpečný spôsob kŕmenia. Kŕmenie vnútorností predstavuje veľmi vysoké riziko potenciálneho infikovania zdravej populácie ošípaných celým radom chorôb. Ideálnym riešením by bol účinný zákaz kŕmenia vnútorností, ale je nepravdepodobné, že by sa presadil na úrovni domácností, keďže ide proti hlavnému motívu chovu ošípaných, t. minimálne náklady na kŕmenie kvôli plytvaniu potravinami alebo pastvinám. V žiadnom prípade by sa ošípaným nemal podávať potravinový odpad obsahujúci bravčové mäso, ale mal by sa variť 30 minút za občasného miešania a kŕmiť ošípané vychladené.

Obmedzenie pohybu ošípaných
Mala by sa podporovať výstavba maštalí, ktoré umožňujú hygienické podmienky. Oplotený obvod tiež zabráni priamemu kontaktu a šíreniu potenciálneho ochorenia z domácich ošípaných na diviaky (a diviaky) a naopak z divokých afrických ošípaných na domáce ošípané. Oplotený obvod môže tiež obmedziť prístup diviakov a domácich ošípaných k podstielke, vnútornostiam alebo kadáverom zvierat, ktoré môžu byť kontaminované. Plot nielenže drží ošípané domáce vo vnútri objektu a divé vonku, ale musí ísť aj do podzemia do hĺbky aspoň pol metra, pretože ošípané môžu pod plotom prehrabávať zem. Vo všeobecnosti by úrady mali zabrániť zriaďovaniu chovov ošípaných, pretože tie poskytujú ošípaným prístup k potenciálne infikovaným vnútornostiam alebo zvyškom zvierat, umožňujú kontakt s infikovanými diviakmi, inými ošípanými vo voľnom výbehu alebo diviakmi.

Rovnako ako kŕmenie odpadom, ani tradičné spôsoby chovu ošípaných však nie je ľahké zmeniť, pretože mnohé farmy sa môžu rozhodnúť, že chovať (a kŕmiť) ošípané v takýchto podmienkach nemá zmysel. Významná časť odvetvia chovu ošípaných funguje na princípe, že ošípané sa môžu voľne pásť. Akýkoľvek posun smerom k uzavretejšiemu systému s následným zvýšením nákladov na krmivo teda pravdepodobne vyvolá odpor mnohých malých farmárov.

Je ťažké zaviesť účinný systém biologickej bezpečnosti, ak ošípané trávia väčšinu dňa voľným prehrabávaním sa v odpadkoch. Napriek tomu však možno odporučiť niekoľko jednoduchých opatrení s minimálnymi nákladmi na peniaze a čas. Je možné použiť obvodové oplotenie okolo celej obce, pretože sa predpokladá, že ošípané z tej istej obce majú rovnaký zdravotný stav. Toto riešenie však nie je vždy praktické. Je užitočné si všimnúť výhody izolácie pri predchádzaní krádežiam, dopravným nehodám a predátorom. Vo všeobecnosti by sa pri udržiavaní biologickej bezpečnosti na farmách pod holým nebom mala venovať väčšia pozornosť kontrole krmiva, vody a pastvín, ako aj voľne žijúcich živočíchov a návštevníkov.

Čistenie a dezinfekcia
Na farme sa vybavenie a zariadenia musia často čistiť a dezinfikovať. Ošípané, vybavenie, vozidlá atď. musia byť pred dezinfekciou očistené od organickej kontaminácie. Zamestnanci a vozidlá (obuv, vybavenie a pod.) musia byť dezinfikovaní pri vstupe / vstupe na farmu a výstupe / výstupe z farmy. Medzi dezinfekčné prostriedky, ktoré sa ukázali ako účinné, patria čistiace prostriedky, chlórnany a glutaraldehyd. VASF je citlivý na éter a chloroform. Vírus sa inaktivuje hydroxidom sodným 8/1000 (30 minút), chlórnanmi - 2,3% chlórom (30 minút), 3/1000 formalínom (30 minút), 3% ortofenylfenolom (30 minút) a zlúčeninami jódu (OIE, 2013.) . Dostupné sú aj účinné komerčné produkty. Je potrebné zvážiť vplyv týchto látok na životné prostredie. Zariadenie, ktoré sa nedá ľahko dezinfikovať, by malo byť vystavené slnečnému žiareniu.

Iné opatrenia biologickej bezpečnosti

• Počet návštevníkov by sa mal obmedziť na minimum a vstup by mal byť povolený až po vyčistení a dezinfekcii topánok alebo výmene oblečenia a obuvi, najmä v prípade vysoko rizikových návštevníkov, ako sú majitelia hospodárskych zvierat a veterinárny personál. Ľudia pracujúci s ošípanými by sa mali vyhýbať kontaktu s inými populáciami ošípaných.
• Vozidlá nesmú vchádzať do farmy a nakladanie a vykladanie najmä ošípaných musí prebiehať mimo obvodu oplotenia. Nákladné autá prepravujúce ošípané musia byť po vykládke vyčistené a dezinfikované.
• Vybavenie by sa medzi farmami/dedinami nemalo vymieňať bez riadneho čistenia a dezinfekcie.
• Pracovníci by mali mať k dispozícii pracovný odev a obuv určenú len na tento účel.
• Ak je to možné, farmy by mali fungovať ako uzavreté stáda s obmedzeným prísunom nových zvierat.
• Novozískané zvieratá musia pochádzať zo spoľahlivých zdrojov a musia byť v karanténe (t.j. držané v izolácii na účely pozorovania) najmenej 14 dní.
• Farmy by mali byť umiestnené vo vhodnej vzdialenosti od seba.
• Pri chove ošípaných by sa mala dodržiavať veková segregácia (podľa systému „prázdny-zaneprázdnený“).
• Uhynuté ošípané, odpadové vody a zvyšky jatočných tiel, ktoré zostali po zabití, musia byť riadne zlikvidované, mimo dosahu diviakov a domácich ošípaných na výbehu.
• Ošípané, ktoré boli na živom trhu, by sa nemali vracať na farmu. Ak ich však privezú späť, kým je, musia byť držané v karanténe 14 dní pred zavedením do stáda.
• Personál musí byť vyškolený v správnej sanitácii a hygienických postupoch a rozpoznávaní chorôb.
• Držte voľne žijúce vtáky, škodcov a iné zvieratá mimo chlievov, krmiva pre zvieratá a vodných systémov.

Analýza rizík a postupy dovozu a vývozu
Koncept biologickej bezpečnosti možno uplatniť aj na národnej úrovni. Rovnako ako na farme, jediný spôsob, ako zabrániť vstupu ASF do krajín bez tejto infekcie, je prísna politika bezpečného dovozu ošípaných a vysokorizikových produktov, t.j. bravčové mäso a výrobky z neho, semeno ošípaných, kože atď. Takéto preventívne opatrenia pomáhajú znižovať výskyt ochorenia a jeho následkov. Podrobné pokyny možno nájsť v Medzinárodnom kódexe zdravia suchozemských zvierat OIE (2016). GEMP (2011) poskytuje nasledovné:

• Malo by sa udržiavať primerané povedomie, aby bolo možné včas varovať pred zmenami v distribúcii a epidemiológii v postihnutých krajinách a obchodných partneroch. Mali by sa zhromažďovať informácie o vstupných miestach dodávateľských reťazcov ošípaných a bravčového do krajiny, distribúcii chovov podľa ich výrobného cyklu, o diviakoch, predaji zvierat, bitúnkoch atď. Tieto údaje pomôžu pri analýze rizík všetkých potenciálnych vstupných a distribučných ciest. Toto by sa malo vykonávať pravidelne a v závislosti od hodnotenia rizika. Prijaté opatrenia musia byť dynamické a primerané stupňu rizika.
• Zabrániť zavlečeniu patogénu v rámci legitímneho dovozu prostredníctvom dodatočných cielených obmedzení v súlade s uznávanými medzinárodnými normami. Obmedzenia dovozu znížia riziká existujúce v obchode a zabezpečia maximálnu účinnosť „karanténnej bariéry“.
• Colné orgány, regulačné orgány a karanténne orgány musia účinne „zachytávať“ nelegálne/neregulované potraviny a iné nebezpečné materiály na medzinárodných letiskách, námorných prístavoch a hraničných priechodoch. Zhabané materiály by mali byť zničené alebo bezpečne zlikvidované a nemali by sa hádzať do dosahu ľudí alebo zvierat. Nedávne udalosti naznačujú, že by sa mala venovať osobitná pozornosť správnej likvidácii potravinového odpadu z lietadiel, lodí alebo vozidiel prichádzajúcich zo znevýhodnených krajín, pokiaľ možno spaľovaním alebo, ak je to možné, spracovaním nepotravinových živočíšnych surovín.
• Zvážte testovanie výrobkov na určité choroby pred a po dovoze v závislosti od úrovne rizika.
• Vytvoriť a rozšíriť cezhraničnú výmenu informácií so susednými vládami.

Kontrola
Pri podozrení na ohnisko je dôležité okamžite prijať vhodné opatrenia. Veterinári, ako aj majitelia fariem, pracovníci a iné zainteresované strany musia urobiť všetko, čo je v ich silách, aby obmedzili a zabránili ďalšiemu šíreniu tejto choroby. Pretože zvieratá infikované ASF začínajú vylučovať vírus 48 hodín pred objavením sa klinických príznakov, je kritická eliminácia krmiva, podstielky a zvierat (živých aj zabitých) z infikovaných priestorov.

Po zistení a potvrdení choroby je potrebné:

1. uchýliť sa k núdzovému plánu;
2. zhodnotiť počiatočné ohnisko (napr. veľkosť, geografické rozšírenie, epidemiológiu) a určiť, aké kontrolné opatrenia môžu byť potrebné;
3. okamžite a v plnom rozsahu zaviesť kontrolné opatrenia;
4. monitorovať pokrok a upravovať politiky;
5. pokračovať vo výmene informácií a údajov so susednými správnymi orgánmi;
6. komunikovať s verejnosťou a všetkými zainteresovanými stranami vrátane OIE (GEMP, 2011).

Opatrenia prijaté na kontrolu a eradikáciu choroby budú do značnej miery závisieť, prinajmenšom spočiatku, od toho, ako rozšírená je choroba a aká závažná bola invázia predtým, ako bola objavená. Čím širšie je šírenie choroby a čím viac fariem postihuje, tým je menej pravdepodobné, že zabíjanie bude účinné ako prostriedok eradikácie. Porážka je najefektívnejším opatrením, ak sa môže uskutočniť v priebehu prvých dní. Aby ste to dosiahli, musíte rýchlo identifikovať chorobu a poraziť postihnuté zvieratá ihneď po zistení, za čo sa vypláca kompenzácia. Ak to nie je možné, možno bude potrebné zaviesť kontroly pohybu zvierat a iné činnosti. Preto je mimoriadne dôležité stanoviť geografickú distribúciu a počet zasiahnutých fariem na začiatku prepuknutia choroby (t. j. epidemiologický dohľad). Zvyčajne takzvaný „indexový prípad“ (prvý nájdený prípad) nie je v skutočnosti prvým prípadom (GEMP, 2011).

Rovnako dôležité sú opatrenia v konečnom štádiu, keď klinické prejavy ochorenia ustanú. Ak ohniská infekcie zostanú nepovšimnuté, výsledky kampane na eradikáciu choroby môžu byť anulované. Keď sa zdá, že klinické prejavy choroby zmizli a už nedochádza k žiadnym sociálno-ekonomickým stratám, nemali by sme strácať ostražitosť ani opustiť snahy o dohľad a kontrolu. Ak sa sledovanie predčasne ukončí, ASF sa môže znovu objaviť.

Pohotovostné plánovanie (GEMP, 2011)

Príprava na núdzové situácie je kľúčom k efektívnemu zvládaniu núdzových situácií. Príprava by sa však mala uskutočniť v štádiu varovania, teda v „dobe mieru“. Je dôležité dohodnúť sa vopred a jasne pochopiť, kto je za čo zodpovedný, a vytvoriť jednotný reťazec príkazov a komunikačných línií. V čase mieru sa rozdelenie zodpovednosti často vyskytuje inak. Kľúčovým prínosom plánovania je, že predurčuje ľudí, ktorí sa do procesu zapoja, a núti ich dôkladne premýšľať o problémoch, ktoré môžu nastať. To umožňuje predchádzať možným chybám alebo nedostatkom ešte pred prepuknutím.

Účasť farmárov môže významne prispieť k núdzovému plánovaniu. Vidiecke komunity s väčšou pravdepodobnosťou budú spolupracovať v núdzových situáciách, ak vidia, že sa prijímajú rýchle a rozhodné opatrenia, ktoré im v konečnom dôsledku prospejú. Mali by si byť tiež vedomí toho, že prispeli k plánovaniu a že ich vstup bol zohľadnený.

Tieto plány a pokyny sú „živými“ dokumentmi, ktoré by sa mali pravidelne prehodnocovať a aktualizovať (najmenej každých päť rokov), aby odrážali všetky zmeny, ktoré sa odvtedy udiali.

Účastníci by mali byť pravidelne školení v oblasti zisťovania chorôb, hlásenia a reakcií, vyšetrovania a analýzy ohniska atď. Pravidelné simulačné a terénne školenia za účasti všetkých zainteresovaných napomáhajú implementácii havarijných plánov a prevádzkových pokynov v praxi. Pravidelné školenia a prax sú kľúčovým aspektom pri udržiavaní reálnych kontrolných kapacít, ako aj pri vypĺňaní medzier v existujúcom systéme.

Právny rámec (GEMP 2011)

Na rýchle prijatie opatrení na kontrolu choroby je potrebná príslušná zákonná autorita. Patrí medzi ne právo vstúpiť na farmu (na účely dohľadu, prevencie a kontroly), zabíjať a ničiť infikované a kontaktované zvieratá, zaviesť karanténu a kontroly pohybu, identifikovať infikované a obmedzené oblasti, poskytnúť náhradu atď.

Udelenie zákonných právomocí si vyžaduje čas, preto musia byť ustanovené v „dobe mieru“. Keďže nie je možné vypracovať súbor pravidiel pre každú chorobu, mal by existovať spoločný súbor právnych právomocí a nariadení, ktoré by sa vzťahovali na choroby uvedené na oznamovanie a kontrolu.

Niekedy je potrebné získať podporu polície a orgánov činných v trestnom konaní, napríklad pri obmedzovaní pohybu hospodárskych zvierat, zavádzaní karantény a ochrane personálu.

V krajinách s federálnym systémom by mala v celej krajine platiť jednotná a konzistentná legislatíva. To isté by sa malo dodržiavať medzi krajinami v bezcolných (t. j. neobmedzený zahraničný obchod) regiónoch zvierat a živočíšnych produktov, ako je Hospodárske spoločenstvo západoafrických štátov (ECOWAS), Juhoafrické rozvojové spoločenstvo (SADC), spoločný trh pre Štáty východnej a južnej Afriky (SOMEBA), Východoafrické spoločenstvo (EAC), Eurázijská hospodárska únia (EHS) alebo Európska únia (EÚ).

Financovanie (GEMP, 2011)

Skúsenosti ukázali, že oneskorenie pri získavaní finančných prostriedkov je jednou z hlavných prekážok rýchlej reakcie na neočakávané ohniská. Okamžitá aplikácia aj skromných súm pomôže vyhnúť sa značným výdavkom v budúcnosti. Pokročilé finančné plánovanie je preto dôležitou súčasťou pripravenosti. Finančný plán by mal pokrývať súčasné náklady (napr. dohľad, analýza rizík), ako aj náklady, ktoré môžu vzniknúť počas mimoriadnej udalosti (napr. kontrola). Takéto náklady by mali byť zahrnuté do pohotovostného plánu.

Financovanie môže pokryť náklady na celú kampaň. Spravidla pokrývajú iba počiatočné štádiá, ďalšie čerpanie finančných prostriedkov nastáva po preskúmaní kampane a finančných prostriedkov potrebných na dokončenie eradikácie choroby. V niektorých krajinách by bolo lepšie, keby prostriedky na núdzové programy proti niektorým chorobám poskytovala nielen vláda, ale aj súkromný sektor (zdieľanie nákladov).

Komunikácia
Dôležitým aspektom kontroly chorôb je komunikácia so zainteresovanými stranami na všetkých úrovniach, od farmárov až po širokú verejnosť. Najlepšie je dohodnúť sa, kto bude robiť pohovor a obmedziť komunikáciu len na zasvätených a vyškolených jednotlivcov.

Ovládanie pohybu
K šíreniu ASF dochádza najmä v dôsledku ľudskej činnosti, a nie v dôsledku pohybu diviakov alebo iných prenášačov infekcie. Šírenie nákazy v dôsledku pohybu živých zvierat a živočíšnych produktov je možné kontrolovať obmedzením ich pohybu, čo by mala podporiť legislatíva. Najlepšie je, ak majitelia zvierat alebo živočíšnych produktov sami pochopia, že splnenie požiadavky je v ich záujme.

Bohužiaľ, často sa pri podozrení na vypuknutie choroby chovatelia ošípaných ponáhľajú s predajom zvierat na zabitie. Predaj kontaminovaného mäsa z chorých zvierat je vážnym rizikom. Choré ošípané, dokonca aj v inkubačnej dobe choroby, môžu šíriť ASF, najmä ak sa zviera predáva živé.

Po prepuknutí alebo podozrení na prípad na farme by mala byť čo najskôr zavedená prísna karanténa, t.j. farmu by nemali opustiť ošípané, bravčové mäso ani potenciálne kontaminované materiály. Nikto by nemal opustiť farmu bez toho, aby sa prezliekol alebo vydezinfikoval oblečenie a obuv. Ošípané vo voľnom výbehu by mali byť zahnané do interiéru a zamknuté.

V oblasti prepuknutia choroby (obmedzená zóna) musia úrady zabrániť akémukoľvek nezákonnému obchodovaniu s mŕtvymi alebo chorými zvieratami a ich produktmi. Presné hranice týchto zakázaných oblastí nemusia byť kruhové, ale mali by sa brať do úvahy a mali by sa použiť prírodné bariéry a administratívne hranice a všetky relevantné informácie. Hranice týchto zón musia byť zreteľne označené dopravnými značkami.

Aby sa zabránilo šíreniu choroby, môžu byť vytvorené rôzne zóny a obdobia obmedzenia pohybu zvierat. Takéto obmedzenia budú najúčinnejšie, ak budú mať minimálny vplyv na majiteľov domácich zvierat. Odporúča sa:

1. všetky chovy ošípaných boli zaregistrované a registrácia všetkých zvierat bola vykonaná;
2. všetky vnímavé zvieratá v týchto chovoch sa podrobovali pravidelným veterinárnym vyšetreniam;
3. vnímavé zvieratá (alebo produkty ich spracovania) neboli vyvezené z farmy;
4. výnimkou je nútené zabitie pod úradným dohľadom.

Inšpekcia zvierat a zriaďovanie kontrolných stanovíšť sú dôležitou súčasťou procesu zavádzania dopravnej kontroly. Kontrolné body na hlavných cestách však môžu spôsobiť neprijateľné narušenie dopravy alebo byť neúmerne drahé. Okrem toho môžu byť ošípané pašované z zakázanej oblasti ich ukrytím vo vozidlách alebo pozdĺž nestrážených vedľajších ciest (GEMP, 2011).

Vyrazenie a likvidácia
Infikované a aktívne vylučujúce zvieratá sú najväčším zdrojom ASF. Takéto zvieratá môžu viesť aj k nepriamej kontaminácii kontamináciou predmetov (fomity), vrátane vozidiel, odevov a najmä obuvi. Replikácia ASF sa zastaví, keď zviera uhynie. Mŕtve telá zvierat však môžu zostať kontaminované aj dlhú dobu po smrti, a preto je potrebná rýchla a účinná likvidácia (GEMP, 2011).

Vyradenie zahŕňa zabitie infikovaných zvierat a zvyčajne všetkých ostatných vnímavých zvierat na farme a niekedy v susedných chovoch alebo v kontakte, t.j. tí, ktorí prišli do kontaktu v dôsledku pohybu zvierat, ľudí alebo vozidiel. Výlučne na základe zemepisnej polohy je veľmi zriedkavé vyrábať porážku vo veľkom, najmä prstencovú. Zabíjanie zvierat sa musí vykonávať lokálne a humánne, s použitím šetrných metód. Výrobná kapacita pri takomto hromadnom zabíjaní môže byť preťažená, preto je potrebné starostlivé plánovanie zdrojov, vybavenia a personálu. Platí to najmä vtedy, keď ide o likvidáciu veľkých komerčných stád ošípaných.

Po vyrazení by mali byť mŕtve telá zlikvidované lokálne, ak je to možné, bezpečným spôsobom, t.j. musia byť spálené, kompostované, recyklované alebo zakopané, aby sa zabránilo prístupu divých ošípaných, diviakov a iných mrchožrútov (vrátane ľudí). Likvidácia veľkého množstva ošípaných v krátkom čase je veľký problém ako z hľadiska logistiky, tak aj z hľadiska ekológie.

Jediným väčším problémom likvidácie je, že majitelia ošípaných namietajú proti zabíjaniu zvierat bez včasnej a primeranej náhrady. Bez vhodných kompenzačných mechanizmov je pravdepodobné, že farmári nebudú vždy hlásiť prepuknutie choroby a choroba sa rozšíri nelegálnym pohybom infikovaných zvierat a produktov. Preto bez riadneho kompenzačného programu nemožno použiť žiadne vyraďovacie kampane.

Čistenie a dezinfekcia
Likvidáciu jatočných tiel musí sprevádzať dôkladné vyčistenie a dezinfekcia všetkých priestorov, vozidiel a vybavenia. Hoci dezinfekcia vhodnými látkami pomáha eliminovať vírus, ASF môže prežiť v prostredí bohatom na bielkoviny po dlhú dobu a za rôznych podmienok.

Organické látky musia byť odstránené z chlievov, zariadení, vozidiel a všetkých povrchov, ktoré boli v kontakte s kontaminovaným materiálom. Autá (najmä spodok karosérie, podstielka, ak sa prepravovali živé ošípané, telo) a zamestnancov (obuv, vybavenie atď.) musia byť vyčistené a následne dezinfikované pri vstupe/vstupe a výstupe/výstupe z fariem.

Medzi osvedčené účinné dezinfekčné prostriedky patria detergenty, chlórnany a glutaraldehydy. VASF je citlivý na éter a chloroform. Vírus sa inaktivuje roztokom 8/1000 hydroxidu sodného (30 minút), chlórnanov - 2,3% chlóru (30 minút), 3/1000 formalínu (30 minút), 3% ortofenylfenolu (30 minút) a zlúčenín jódu (OIE, 2013). Dostupné sú aj účinné komerčné produkty. Je potrebné zvážiť vplyv týchto látok na životné prostredie. Zariadenia, ktoré sa ťažko dezinfikujú, by mali byť vystavené slnečnému žiareniu.

Kompenzácia (GEMP, 2011)

Kompenzačná politika je základným kameňom akejkoľvek politiky kontroly chorôb, ktorá vyžaduje zabíjanie zvierat alebo ničenie majetku. Kompenzácia je kľúčom k tomu, aby poľnohospodári včas informovali orgány o prepuknutí choroby. Zatiaľ čo niektorí môžu kompenzáciu považovať za nákladnú, stimul, ktorý vytvára na včasné a rýchle varovanie, zníži celkové náklady na riešenie epidémie. Celkovo je to veľmi pravdepodobná príležitosť na úsporu peňazí.

Odškodnenie môže mať mnoho podôb, o ktorých sa veľa diskutovalo a diskutuje. Aby bolo možné implementovať presnú kompenzačnú stratégiu, všetky aspekty musia byť starostlivo analyzované, berúc do úvahy miestny kontext a za účasti všetkých zainteresovaných strán. Náhrada môže byť v hotovosti alebo tovarom, ako sú náhradné zvieratá. Ale bez ohľadu na typ kompenzácie – hotovosť alebo zvieratá, s farmármi by sa malo podľa možnosti konzultovať skôr, ako prepukne. Výhodou hotovosti je, že umožňuje chovateľom vybrať si druh a počet zvierat, ktoré chcú kúpiť a v neposlednom rade aj načasovanie. Platba v hotovosti však môže viesť ku korupcii a krádeži.

Za všetky zvieratá zabité v rámci povinného zabitia by sa mala vyplácať kompenzácia, či už boli infikované alebo zabité z dôvodu možného vystavenia infekcii, alebo za dobré životné podmienky zvierat, ako sa to niekedy stáva. V skutočnosti vláda kúpi zvieratá a potom ich zabije. Náhradu treba zaplatiť aj za tovar a majetok zničený počas povinnej vyraďovacej kampane. Vzhľadom na to, že náhrada je primárne určená na to, aby povzbudila poľnohospodárov, aby včas hlásili ohniská, nemala by sa vyplácať za zvieratá, ktoré uhynuli alebo boli zabité výrobcom pred potvrdením ohniska.

Kompenzácia je účinná len vtedy, keď je vyplatená krátko po vzniknutých stratách. Preto je potrebné vopred naplánovať, akým spôsobom bude odškodnenie vyplácané tým, ktorí naň majú nárok.

Výška kompenzácie by mala vychádzať z reálnej trhovej hodnoty zvierat v čase zabitia a, ak je to možné, z ich úplnej trhovej hodnoty. Niektorí odborníci však odporúčajú, aby kompenzácia bola tesne pod trhovou hodnotou, pričom argumentujú, že aj farmári by mali prispieť napríklad 10 percentami. Neadekvátne alebo príliš štedré kompenzačné mechanizmy môžu podporovať správanie, ktoré je škodlivé pre kontrolný systém.

Nedostatok primeranej a včasnej kompenzácie za zabitie zvierat môže viesť k:

1. že ohnisko nebude hlásené;
2. zabíjanie zvierat farmármi pre ich vlastnú spotrebu alebo predaj;
3. skrývanie zvierat alebo ich premiestňovanie do iných priestorov;
4. nesprávna likvidácia jatočného tela zvieraťa na miestach dostupných pre domáce alebo divé ošípané.

Príliš štedré odškodné môže povzbudiť nepoctivých farmárov, ktorí sa spoliehajú na to, že ak sa zvieratá nakazia, dostanú odškodné.

Výrobcovia utrpia najvážnejšie straty v dôsledku výrobných strát počas prepuknutia choroby, nie v dôsledku uhynutých zvierat alebo obmedzení pohybu (napríklad preto, že nemôžu predávať zvieratá). Tieto straty sa však nedajú predvídať, pretože závisia od celkového trvania a závažnosti ohniska. Preto sú potrebné iné podporné mechanizmy (napr. finančné a sociálne, okrem kompenzácie), ktoré by mali byť zahrnuté do plánu pomoci postihnutým poľnohospodárom.

Dopĺňanie hospodárskych zvierat

Po eradikácii choroby je ďalším krokom v systéme riadenia ASF obnovenie produkcie na farme alebo v regióne. Po masívnom prepuknutí nie sú niektorí majitelia ochotní doplniť zásoby alebo pokračovať v chove hospodárskych zvierat. Väčšina farmárov sa však stále chce vrátiť k tradičnému spôsobu života a doplniť stavy ošípaných.

Pred začatím tohto procesu by ste sa mali uistiť, že patogén na farme je zničený. To sa dá dosiahnuť čistením a dezinfekciou, ktorá by sa mala vykonať dvakrát. Okrem toho je žiaduce zlepšiť systém biologickej bezpečnosti na farme pred zarybnením. Po vyčistení a dezinfekcii prázdnych miestností by malo uplynúť aspoň 40 dní, táto lehota však vždy závisí od situácie a dá sa stanoviť až po analýze rizík. Ak sa zavedú indikátorové ošípané (sentinely), čo sa dôrazne odporúča, potom by sa mal (klinicky a sérologicky) sledovať stav zvierat, aby sa identifikovali možné reinfekcie. Ak sa po 40 dňoch nepozorujú žiadne príznaky infekcie, tieto kontrolné ošípané sa môžu použiť ako súčasť programu zarybňovania.

Ošípané na zarybnenie, ak je to možné, by sa mali nakupovať v rovnakej oblasti alebo v jej blízkosti. Takéto zvieratá sú prispôsobené miestnym podmienkam a farmári sú zvyčajne veľmi dobre oboznámení s ich potrebami. Nákup z viacerých zdrojov znamená nákup zvierat, ktoré majú rozdielny zdravotný a imunitný stav. Miešanie rôznych zvierat vytvára stresovú situáciu a môže viesť ku krížovej infekcii.

Kontrola roztočov

Likvidácia roztočov Ornithodoros zo zamorených ošípaných je náročná úloha, najmä v starších budovách, kvôli dlhovekosti roztočov, ich odolnosti a schopnosti ukryť sa v štrbinách, do ktorých akaricídy nedokážu preniknúť. Zničenie biotopu kliešťa (napríklad ošetrenie trhlín, kde sa kliešte ukrývajú alebo výstavba nových štruktúr z materiálov, ktoré nemajú trhliny) pomáha znižovať ich počet a možnosť prenosu. Zamorené priestory by sa nemali používať ako chlievy. Musia byť izolované tak, aby sa do nich ošípané nemohli dostať, alebo zničené a prestavané na inom mieste. Ak sú poľnohospodári schopní obnoviť predtým kontaminované priestory, malo by sa to urobiť. Toto je tiež vhodná chvíľa na zváženie zlepšenia biologickej bezpečnosti.

Akaricídy a iné pesticídy je možné aplikovať na dezinfekciu podstielky alebo v závislosti od prípravku priamo na kožu ošípaných.

Pretože hmyz cicajúci krv môže mechanicky šíriť ASFV v stáde, odporúča sa, aby sa programy kontroly hmyzu vykonávali v zamorených priestoroch.

Manažment voľne žijúcich živočíchov

Neexistujú žiadne realistické opatrenia, ktoré by sa dali prijať na zabránenie prenosu ASF v populáciách diviakov a kliešťov Ornithodoros. Jedinou možnosťou je zaviesť preventívne opatrenia na ochranu domácich ošípaných pred infekciou. V častiach južnej a východnej Afriky, kde dochádza k lesnému infekčnému cyklu, výstavba vhodných výbehov alebo trvalého ustajnenia pre domáce ošípané úspešne preukázala úplnú ochranu už viac ako storočie. Ploty a steny by mali siahať aspoň 0,5 m hlboko do zeme, aby sa zabránilo prístupu afrických kancov, ktorí sa zahrabávajú do zeme. Odporúčaná výška plotu je 1,8 metra. Okrem toho v Južnej Afrike, v oblastiach, kde sa vyskytuje lesný cyklus infekcie, sa kontrola kliešťov Ornithodoros u afrických diviakov a v norách vykonáva pozdĺž obvodu fariem.

Ak ASF postihuje populáciu diviakov alebo diviakov, účinná kontrola sa stáva oveľa zložitejšou. Stratégiou je minimalizovať kontakt medzi diviakmi a domácimi ošípanými oplotením chlievov, obmedzením počtu voľných výbehov alebo diviakov a zabezpečením správnej likvidácie kuchynského odpadu a uhynutých zvierat. Existujú rôzne názory na to, ako najlepšie kontrolovať ASF v populáciách diviakov. Odstraňovanie tiel diviakov počas epidémie a následná dekontaminácia týchto oblastí, hoci sú drahé, sa vo východnej Európe široko a úspešne využívajú. Intenzívny lov môže byť kontraproduktívny, pretože môže prinútiť diviakov presťahovať sa do iných oblastí. Kŕmenie môže udržať diviaky v známej, dobre definovanej oblasti, čím sa obmedzí šírenie diviakov a šírenie vírusu. Kŕmenie však tiež podporí úzky kontakt medzi zvieratami, čím sa uľahčí prenos chorôb. Oplotenie otvorených plôch, aby sa zabránilo pohybu zveri, je náročné a nákladné nielen z hľadiska výstavby, ale aj údržby. To narúša pohyb a migráciu vo voľnej prírode a jeho účinnosť je otázna, pretože diviaky budú vedieť nájsť cestu pod alebo cez plot. Problematické je aj používanie odstrašujúcich prostriedkov. Poľovníci a poľovnícke kluby, ako aj lesnícke služby sú dôležitými partnermi pri dohľade a kontrole ASF v populáciách diviakov.

Zónovanie a rozčlenenie

Ak sa choroba vyskytuje iba v jednej časti krajiny, zónovanie sa stáva dôležitou stratégiou postupnej eradikácie a eradikácie vírusu bez toho, aby sa bránilo obchodu zo zón bez výskytu chorôb. Na uplatnenie zónovania musia vnútroštátne orgány vymedziť infikované zóny a zóny bez výskytu chorôb a presadzovať prísne kontroly pohybu ošípaných a produktov medzi nimi. Kompartmentalizácia je ďalší prístup založený na vytváraní subpopulácie s vlastným dodávateľským reťazcom v rámci spoločného systému riadenia biologickej bezpečnosti. Tieto subpopulácie sú jasne definované a oddelené od ostatných subpopulácií s odlišným alebo potenciálne odlišným statusom. Departmentalizácia je veľmi vhodná pre komerčné chovy ošípaných a umožňuje pokračovať v podnikateľskej činnosti aj v infikovanej oblasti. Náklady a zodpovednosť za kompartmenty sú v zodpovednosti výrobcu a jeho dodávateľov, ale monitorovanie a schvaľovanie zostávajú v zodpovednosti príslušných veterinárnych orgánov.

Kira Stoletová

Africký mor ošípaných je vírusové ochorenie s veľmi vysokou úmrtnosťou, ktoré nie je škodlivé pre ľudí. Synonymá - Montgomeryho choroba, africká horúčka, juhoafrický mor ošípaných, ASF. Patológia je veľmi nebezpečná, rýchlo sa šíri a vedie k veľkým ekonomickým stratám. Klinické príznaky sú mierne, laboratórna diagnostika môže potvrdiť konečnú diagnózu. Choré zvieratá dnes nepodliehajú liečbe, na ich prevenciu sa prijímajú preventívne opatrenia.

Etiológia ochorenia

Čo je to africký mor a aký patogén je spôsobený. Príčinou patológie je vírus, ktorého genetický materiál je obsiahnutý v DNA, z rodiny Asfaviride, rodu Asfivirus. Tento vírus má úžasnú odolnosť voči rôznym nepriaznivým vplyvom prostredia:

• prežíva pri pH od 2 do 13 jednotiek (v kyslom aj alkalickom prostredí);
• v kyslých uhorkách a údeninách zostávajú aktívne týždne alebo dokonca mesiace;
• pri teplote 5 ° C prežije 7 rokov;
• pri teplote 18-20°C - 18 mesiacov;
• pri teplote 37°C - 30 dní;
• počas pasterizácie pri teplote 60 ° C prežije 10 minút;
• žije v mŕtvolách ošípaných od 17 dní do 10 týždňov;
• vo výkaloch - 160 dní, v moči - až 60 dní;
• v zemi počas leta a jesene je možné skladovať až 112 dní, v zime a na jar - až 200 dní.

Vďaka vysokej odolnosti vírusu sa africký mor ošípaných a pôvodca ochorenia môžu prenášať na veľmi veľké vzdialenosti. Zničiť ho možno iba spálením mŕtvol ošípaných, použitím vysokých dávok dezinfekčných prostriedkov (hasené vápno, formaldehyd a pod.). Vírus je navyše mimoriadne virulentný, už malé dávky môžu spôsobiť akútne ochorenie.

Epidemiológia

Prvé prípady ochorenia boli zaznamenané začiatkom dvadsiateho storočia v Južnej Afrike, odtiaľ sa rozšírilo do Portugalska, Španielska a ďalších krajín južnej Európy. V 70-80 rokoch bola patológia zaregistrovaná v Južnej a Severnej Amerike, ZSSR. Teraz je choroba vážnou hrozbou, kvôli nej sa ošípané v Afrike takmer nechovajú, ich počet v Európe a Amerike klesá. V roku 2007 bolo zaznamenané ohnisko v Gruzínsku, v roku 2015 - na Ukrajine, od roku 2008 je africký mor, ako hlásia veterinárne služby, pravidelne zaznamenaný v európskej časti Ruska.

Zdrojom patológie sú choré ošípané a nosiče vírusov. Aj keď sa zviera zotaví, pokračuje vo vylučovaní patogénu až do konca svojho života, preto sú v ohnisku epizoocie všetky hospodárske zvieratá zničené. Prirodzeným ohniskom sú africké druhy ošípaných, najmä divé. Majú infekciu v latentnej a chronickej forme, veľmi zriedkavo v akútnej forme. Na vírus sú náchylnejšie domáce ošípané, najmä európske plemená. Aj u diviakov v Európe je úmrtnosť na rovnakej úrovni ako u domestikovaných.

Vírus afrického moru ošípaných sa prenáša vzduchom, alimentárnou cestou. Hlavnými predmetmi a vecami, ktorými sa ošípané nakazia, sú voda a potraviny (najmä krmivo, v ktorom sa používa zvieracie mäso), predmety starostlivosti, kontaminovaná podstielka. Vírus sa môže prenášať v oblečení a obuvi ľudí, ktorí sa starajú o choré morčatá. Často sa vírus dostane do krvného obehu prostredníctvom kliešťov, ktoré sú jeho prirodzeným rezervoárom. Infekciu môžu prenášať muchy a iný krv sajúci hmyz. Domáce vtáky a hlodavce často prenášajú patogén mechanicky.

Patogenéza choroby

Vnímavosť domácich ošípaných na vírus je veľmi vysoká, preto je ochorenie také nebezpečné. Do tela sa patogén dostáva sliznicami a pokožkou aj pri mikroskopickom poškodení, niekedy sa dostane do krvného obehu uštipnutím hmyzom. Z miesta vstupu vírus vstupuje do buniek imunitného systému (makrofágy, neutrofily, monocyty), ako aj do endotelových buniek krvných ciev. V týchto štruktúrach sa patogén množí.

Po replikácii vírus opúšťa bunky a ničí ich. V cievach a lymfatických uzlinách sa objavujú ložiská nekrózy. Priepustnosť ciev prudko stúpa, v ich lúmene sa tvoria krvné zrazeniny, okolo poškodených štruktúr vzniká zápal. Anestetizované lymfatické uzliny sa nachádzajú v rôznych orgánoch. V dôsledku porážky imunitného systému sa schopnosť tela ošípaných chrániť a odolávať iným chorobám prudko znižuje. Prejavujú príznaky afrického moru, čo rýchlo vedie k smrti zvieraťa.

Klinika pre africký mor

Inkubačná doba trvá 5-10 dní. Vírusový africký mor ošípaných sa môže vyskytovať v troch formách: fulminantná, akútna a chronická. V prvom prípade trvá 2-3 dni a na 100% končí smrťou. Prvé príznaky a príznaky afrického moru ošípaných v takýchto prípadoch nemajú čas na rozvoj. Farmár môže nájsť večer úplne zdravé stádo mŕtve.

V druhom prípade sú klinické prejavy výraznejšie.

Existujú tieto príznaky afrického moru ošípaných:

• horúčka do 40-42 ° C;
• kašeľ, prasa sa začne dusiť;
• vracanie s postriekaním krvou;
• ochrnutie zadných nôh;
• zápcha, menej často - krvavá hnačka;
• z nosných priechodov a kukátka vyteká číra, purulentná alebo krvavá tekutina;
• na stehnách na vnútornej strane, v blízkosti uší, na žalúdku sú viditeľné fialové škvrny, ktoré sa pri stlačení nerozjasňujú;
• modriny sú viditeľné na spojovke, podnebí, jazyku;
• na niektorých miestach sa môžu objaviť hnisavé pustuly a rany.

Choré prasa sa snaží schovať v ďalekom rohu maštale, leží na boku, nedvíha sa na nohy, odvíja sa mu chvost. Gravidné prasnice pri infekcii strácajú prasiatka. 1-3 dni pred smrťou sa teplota u zvierat znižuje.

Africký mor ošípaných v chronickej a asymptomatickej forme je extrémne zriedkavý a slabo sa prejavuje. Takéto varianty sú typickejšie pre voľne žijúce druhy v prirodzených ohniskách choroby. Klinický obraz nie je výrazný, zvieratá s takýmto priebehom patológie postupne slabnú, trpia zápchou, majú menšie príznaky bronchitídy. Niekedy sa na koži a slizniciach nachádzajú petechiálne krvácania alebo škvrny. Chronické ochorenie sa môže skončiť uzdravením, ale vírus zostáva v krvi, prasatá ostávajú jeho nositeľmi navždy. Keď sa u ošípaných zistia príznaky zdĺhavej patológie, laboratórna diagnostika je povinná.

Patologické zmeny a diagnostika

Pri podozrení na ASF je povinné selektívne vyšetrenie tiel. Patologické zmeny a histologické príznaky afrického moru sú nasledovné:

• Koža na bruchu, pod prsiami, za ušami, na vnútorných stranách stehien je červená alebo tmavofialová.
• Ústa, nos, priedušnica vyplnená ružovou penou.
• Lymfatické uzliny sú značne zväčšené, vzor na reze je mramorový, sú viditeľné viacnásobné krvácania, niekedy uzlina pripomína súvislý hematóm s čiernymi zrazeninami.
• Slezina je veľká, s viacerými krvácaniami, oblasťami nekrózy.
• Zväčšené sú aj obličky s krvácaním v parenchýme a na stenách rozšírenej obličkovej panvičky.
• Pľúca sú plné krvi, odtieň sivý s červenou, v parenchýme sú mnohopočetné podliatiny, príznaky zápalu pľúc, medzi alveolami sa nachádzajú vláknité pásy (príznaky fibrózneho zápalu).
• Pečeň je naplnená krvou, značne zväčšená, farba je šedá s ílovitým odtieňom, nerovnomerná.
• Sliznica čriev a žalúdka opuchne, zisťujú sa na nich krvácania.
• Pri chronickej patológii sa bronchitída nachádza na oboch stranách, zvýšenie lymfatických uzlín v pľúcach.
• V asymptomatickej forme sú viditeľné iba zmeny v lymfatických uzlinách: majú mramorový vzor.

Africký mor ošípaných má príznaky podobné bežnému moru tohto živočíšneho druhu. Na rozlíšenie 2 ochorení je povinná laboratórna diagnostika. Používa sa metóda PCR, fluorescenčné protilátky, hemadsorpcia. Robia sa aj biologické testy, materiál chorých zvierat sa podáva ošípaným zaočkovaným proti obyčajnému moru. Ak vykazujú patológiu, diagnóza je potvrdená.

Liečba a prevencia

Špecifická liečba, podobne ako vakcína, ešte nebola vynájdená. Nie je dovolené ani skúšať liečiť prasničky symptomatickými liekmi, pretože budú naďalej vylučovať patogény. Prevencia afrického moru ošípaných pozostáva z opatrení v zameraní a zabránenia zavlečenia vírusov z iných miest.

Aktivity v ohnisku

Ak sa u ošípaných nájde čo i len najmenší náznak možnej ASF, celé stádo sa musí zlikvidovať. Na potvrdenie diagnózy sa vykonáva predbežná laboratórna diagnostika. Najmä v prípadoch, keď klinický obraz nie je úplne jasný. Opatrenia prijaté v ohnisku potvrdenej infekcie pozostávajú z nasledujúcich položiek:

• Dvory a farmy, kde sa zistí africký mor ošípaných, podliehajú prísnej karanténe.
• Všetky zvieratá sú usmrtené akoukoľvek bezkrvnou metódou.
• Všetky jatočné telá sú spálené a nie je možné ich vyniesť z karantény.
• Je vhodné spáliť mŕtvoly spolu s ošípanými a úžitkovými miestnosťami.
• Zariadenie, zvyšky krmiva, podstielka, oblečenie ľudí, ktorí sa starajú o ošípané, tiež podliehajú zničeniu.
• Popol sa zmieša s haseným vápnom a zakope sa do hĺbky aspoň meter.
• Priestory, ktoré nemožno spáliť, sú dôkladne dezinfikované. Použite lúh sodný 3% alebo formaldehyd 2%.
• Rovnaké opatrenia sa vykonávajú na všetkých chovoch ošípaných, ktoré sa nachádzajú v okruhu 25 km od infikovanej zóny, zabíjajú sa aj úplne zdravé ošípané.
• Kliešte a iný krv sajúci hmyz, hlodavce, túlavé zvieratá sú vyhubené na celom území.
• Kým trvá karanténa (v priemere 40 dní), nie je možné vyvážať a predávať produkty získané zo zvierat (nie nevyhnutne bravčové mäso) mimo zóny.
• Po dobu 6 mesiacov od vzniku ohniska je zakázané vyvážať a predávať akékoľvek rastlinné poľnohospodárske produkty.
• Ošípané by sa nemali chovať počas celého roka v celej karanténnej oblasti, celý tento čas hrozí druhé prepuknutie.

Veterinárne služby musia zabezpečiť, aby sa udalosti uskutočnili, na to existujú určité články zákona v Rusku a iných krajinách. Takéto prísne pravidlá a kontrolné opatrenia umožňujú aspoň čiastočne zastaviť šírenie choroby do iných regiónov. Bohužiaľ spôsobujú farmám obrovské ekonomické škody. Mnohé krajiny vyvinuli systém materiálneho odškodnenia, ktorý však nepokrýva všetky straty. Ako sa vykonávajú činnosti v ohnisku infekcie, môžete vidieť na videu.

• Je potrebné vylúčiť prítomnosť cudzincov v chlievoch.
• Ošípané sa najlepšie chovajú bez chôdze.
• Priestory sú pravidelne dezinfikované a dezinfikované.
• Zvieratá sú kŕmené výlučne priemyselným krmivom, ktoré sa spracováva pri teplote nie nižšej ako 80°C.
• Farmy chránia pred prenikaním voľne žijúcich vtákov a zvierat, túlavých psov a mačiek.
• Zariadenie, ktoré neprešlo špeciálnym spracovaním, nemožno v stodole použiť.
• Všetka preprava, ktorá vstupuje na farmu, musí byť starostlivo spracovaná.
• Porážka ošípaných sa vykonáva na špeciálnych miestach, kde zvieratá a jatočné telá vyšetrujú veterinárni lekári.
• Zvieratá si môžete kúpiť iba v prípadoch, keď majú všetky veterinárne osvedčenia.
• Pred nákupom musíte zistiť, či sa v oblasti nachádza ASF.
• Všetky ostatné choroby zvierat sú očkované.
• Ak má zviera akékoľvek príznaky, určite o tom informujte veterinárnu službu.

Niektorí ľudia sa pýtajú, je africký mor ošípaných nebezpečný pre ľudí alebo nie? Pre ľudí nie je choroba nebezpečná. Ale spolu s produktmi sa môže preniesť na iné ošípané v regióne. Najmä v prípadoch, keď sú zvieratá kŕmené odpadom z potravinárskeho priemyslu. Preto je prísne zakázané vyvážať akékoľvek produkty zo znevýhodnených území, aj keď sa ich nikto nechystá predávať.

Africký mor ošípaných (ASF)

(stručné referenčné informácie pre manažérov a zamestnancov podnikov na chov ošípaných, ako aj občanov držiacich ošípané na súkromných dvoroch)

AFRICAN mor ošípaných (Africká horúčka , Východoafrický mor , Montgomeryho choroba) obzvlášť nebezpečné vysoko nákazlivévírusové ochorenie domácich a divých ošípaných, vyznačujúce sa rýchlym šírením, vysokou mortalitou postihnutých zvierat a vysokými ekonomickými škodami.

Africký mor ošípaných nepredstavuje nebezpečenstvo pre ľudský život a zdravie!

Epizootologická situácia v Rusku

Od roku 2007 do súčasnosti je ASF registrovaná na území 21 zakladajúcich subjektov Ruskej federácie. Odvtedy bolo identifikovaných 235 nepriaznivých bodov a 25 objektov infikovaných vírusom. V roku 2011 bol ASF prvýkrát zistený v regiónoch Leningrad, Murmansk, Archangelsk, Tver, Kursk, Nižný Novgorod, Kostroma, Saratov, Oreburg v Kalmyckej republike. Zvlášť akútna situácia pre ASF je stále zachovaná na území Krasnodar a Rostovskej oblasti. V roku 2011 bolo v Kubani zničených asi 67 000 ošípaných kvôli ASF, škoda sa odhaduje na 1 miliardu rubľov.

Zdroje patogénu

Zdrojom pôvodcu ochorenia sú choré a uzdravené ošípané. Prenos vírusu u jednotlivých zvierat trvá až 2 roky alebo viac. Vírus sa z tela infikovaných zvierat vylučuje krvou pri krvácaní z nosa a iných typov, výkalmi, močom, sekrétmi slizníc nosovej dutiny a slinami. Zvieratá sa nakazia najmä konzumáciou krmiva kontaminovaného vírusom. Infekcia je možná aj cez dýchaciu cestu, cez poškodenú kožu a uhryznutím infikovaných kliešťov – nosičov a rezervoárov vírusu ASF, v ktorých vírus pretrváva dlhé roky.

Vírus sa šíri prostredníctvom infikovaných zvieracích nosičov, vrátane tých v inkubačnej dobe, ako aj prostredníctvom rôznych infikovaných predmetov. Zvlášť nebezpečné sú produkty porážky infikovaných ošípaných (mäso, mäsové výrobky, bravčová masť, krv, kosti, kože atď.)

Vírusom infikované potraviny a odpad z bitúnkov používané na kŕmenie ošípaných bez dôkladného varenia sú hlavnou príčinou infekcie afrického moru ošípaných. Zdravé zvieratá sa nakazia, keď sú držané spolu s chorými a nosičmi vírusov, ako aj keď sú v infikovaných miestnostiach a vozidlách. Vírus môžu šíriť ľudia, rôzne druhy domácich a voľne žijúcich zvierat, hmyz, hlodavce, ktoré boli v infikovaných oblastiach.

Odolnosť voči vírusu ASF

Vírus je odolný voči fyzikálnym a chemickým faktorom. Pri teplote 5°Cvydrží až 7 rokov, 18°C ​​- až 18 mesiacov, 37°C - 30 dní, 50°C - 60 minút, 60°C - 10 minút, pri mínusových teplotách - niekoľko rokov. Éter zničí vírus do 15 minút. Formalín, fenolové a chlór obsahujúce lieky rýchlo ničia vírus. Patogén pretrváva v mŕtvolách ošípaných až 10 týždňov, v mäse chorých zvierat - až 155 dní, v údenej šunke - až 5 mesiacov, v hnoji - až 3 mesiace.

Africký mor ošípaných (ASF, Montgomeryho choroba) je nákazlivé ochorenie, ktoré sa vyskytuje akútne, subakútne, chronicky, asymptomaticky a je charakterizované horúčkou, hemoragickou diatézou, zápalovými a nekrodystrofickými zmenami v parenchýmových orgánoch. Ochorenie bolo zaznamenané v Afrike, Španielsku, Portugalsku, Francúzsku, Brazílii a na Kube. Ošípané všetkých vekových skupín a plemien ochorejú kedykoľvek počas roka. Vírus opísal Montgomery v roku 1921 a umiestnil ho do samostatnej rodiny.

Klinické príznaky a patologické zmeny. Sú podobné tým v CSF. ASF sa prejavila ako intenzívna hemoragická septikémia, vysoko nákazlivé, rýchlo postupujúce ochorenie, ktoré spôsobilo smrť všetkých kontaminovaných zvierat. V prirodzených podmienkach trvá inkubačná doba 5-7 dní, v experimente sa jej doba líšila v závislosti od kmeňa a dávky vírusu. Existuje hyperakútny, akútny, subakútny, chronický a latentný priebeh ochorenia. Častejšie sa pozoruje superakútny a akútny priebeh.

O super ostrov V priebehu telesnej teploty u chorého zvieraťa stúpa na 40,5 - 42 ° C, výrazne sa prejavuje depresia a dýchavičnosť. Zviera viac leží a po 24-72 hodinách zomrie. O Ostrom(najcharakteristickejší) priebeh ochorenia, teplota stúpne na 40,5-42 °C a deň pred smrťou zvieraťa klesá. Súčasne so zvýšením teploty sa objavujú prvé príznaky ochorenia: depresívny stav, paréza zadných končatín. Na koži uší, ňufáku, bruchu, perineu a spodnej časti krku sa objavujú červenofialové škvrny. Paralelne s tým sa objavujú príznaky zápalu pľúc: dýchanie sa stáva krátkym, častým, prerušovaným, niekedy sprevádzaným kašľom. Príznaky poruchy trávenia sú mierne: zvyčajne sa pozoruje dlhotrvajúca zápcha, výkaly sú tvrdé, pokryté hlienom. V niektorých prípadoch je hnačka s krvou. V atonálnom štádiu ochorenia sú zvieratá v kóme, ktorá trvá 24-48 hodín, telesná teplota klesá pod normálnu hodnotu a po 4-10 dňoch od momentu zvýšenia teploty zviera uhynie.

Subakútna Priebeh symptomatológie je podobný akútnemu, ale príznaky ochorenia sa vyvíjajú menej intenzívne. Choroba trvá 15-20 dní, ošípané väčšinou uhynú. U jednotlivých prežívajúcich jedincov vzniká chronický priebeh ochorenia, ktorý je charakterizovaný intermitentnou horúčkou, vyčerpanosťou, zakrpatením, miernym nebolestivým edémom kĺbov zápästia, metatarzu, falanga, podkožia papule a dolnej čeľuste, nekrózou kože, keratitída. Zvieratá ochorejú 2 až 15 mesiacov, smrť spravidla nastáva po zapojení do infekčného procesu pľúc. Klinicky sa väčšina vyliečených zvierat zmení na zdravých nosičov patogénu, t.j. vyvinie sa u nich latentný priebeh ASF. Patogenéza chronického priebehu ASF má určité podobnosti s takými ochoreniami, ako je INAN, aleutská norková choroba atď. Táto podobnosť sa prejavuje v perzistencii vírusu, slabej, ak nie úplne chýbajúcej, vírus-neutralizačnej aktivite séra a hypergamaglobulinémii . Ten je zjavne spôsobený neustálou antigénnou stimuláciou perzistentným vírusom, pretože sa uvoľňuje z orgánov väčšiny chronicky infikovaných zvierat a jeho titer koreluje so zvýšením hladiny gama globulínov a AT.

Za posledných 20 rokov v Portugalsku, Španielsku, Angole a ďalších krajinách došlo k zmene formy prejavu ASF – výrazne sa znížila úmrtnosť, zvýšil sa počet prípadov inaparentnej infekcie a latentného nosičstva.

latentný tok Je typický pre prirodzených prenášačov vírusu – prasa bradavičnaté, prasatá lesné a krovinaté v Afrike a ošípané domáce v Španielsku a Portugalsku. Klinicky táto forma nie je vyjadrená a prejavuje sa len intermitentnou virémiou. Keď sú v strese, vylučujú vírus a infikujú zdravé ošípané. Najmenej 3 druhy diviakov nájdené v Afrike môžu byť nositeľmi vírusu ASF bez viditeľných klinických príznakov choroby. Ak sa však tento vírus dostane do domácich ošípaných, spôsobí vysoko nákazlivé hyperakútne horúčkovité ochorenie s fatálnym koncom. Jednotliví jedinci, ktorí prežijú túto formu ochorenia, sú zvyčajne odolní voči masívnej dávke vysokopatogénneho homológneho kmeňa. Hoci v sére takýchto rekonvalescentných ošípaných je možné detegovať vysoké titre špecifických (CS, PA) protilátok, ich imunologický význam zostáva nejasný. Takéto zvieratá sú takmer vždy chronicky infikované a nesú v krvi AT aj vírus.

U ošípaných, ktoré uhynuli na akútnu alebo subakútnu formu ochorenia, je tučnota zachovaná, rigor mortis výrazná, koža laloka, ventrálna časť brušných stien, vnútorný povrch stehien, miešok je začervenaný resp. fialovofialová. Nosová dutina a priedušnica sú naplnené ružovkastou spenenou tekutinou. Lymfatické uzliny jatočného tela a vnútorných orgánov sú zväčšené, povrchy rezu sú mramorové. Často sú tmavo červené, takmer čierne a pripomínajú krvnú zrazeninu. Slezina je zväčšená, má čerešňovú alebo tmavočervenú farbu, mäkkú konzistenciu, jej okraje sú zaoblené, dužina je šťavnatá, ľahko sa zoškrabáva z povrchu rezu. Pľúca sú pletorické, zväčšené, šedo-červenej farby. Interlobulárne spojivové tkanivo je silne impregnované serózno-fibrinóznym exsudátom a objavuje sa vo forme širokých prameňov, ktoré jasne obmedzujú pľúcne laloky a laloky. Často sa zistia krvácania s malým ohniskom pod pleurou a ložiská katarálnej pneumónie. Obličky sú často zväčšené, tmavočervenej farby, s bodkovanými krvácaniami. Obličková panvička je edematózna, posiata bodkovanými krvácaniami. Niekedy sa hemorágie nachádzajú na pozadí anémie obličiek. Pečeň je zväčšená, pletorická, nerovnomerne natretá sivasto-hlinitou farbou. Sliznica žlčníka je opuchnutá, posiata petechiálnymi krvácaniami, ktoré sú tiež lokalizované v seróznej membráne. Sliznica tráviaceho traktu je začervenaná, opuchnutá, miestami (najmä pozdĺž záhybov) s krvácaním. V niektorých prípadoch sú krvácania lokalizované v seróznej membráne hrubého čreva. Cievy mozgu sú naplnené krvou, dreň je edematózna, s krvácaním.

V chronickom priebehu ochorenia sa patomorfologické zmeny prejavujú prudkým nárastom bronchiálnych lymfatických uzlín a obojstranným poškodením pľúc. Asymptomatický priebeh je charakterizovaný mramorovým sfarbením portálnych alebo bronchiálnych lymfatických uzlín a ložiskovými léziami pľúc. histologické zmeny. Pri akútnom a subakútnom priebehu ochorenia je hemodynamika v lymfatických uzlinách a slezine prudko narušená v dôsledku mukoidného opuchu a fibrinoidnej nekrózy stien krvných ciev; devastácia lymfoidného tkaniva a rozpad buniek typom karyorexie. V centrálnom nervovom systéme a v parenchýmových orgánoch sú zaznamenané zápalovo-dystrofické zmeny rôznej závažnosti. IF vírus a jeho AG sa nachádzajú v makrofágoch, retikulárnych bunkách, lymfocytoch a Kupfferových bunkách, v megakaryocytoch a hemocytoblastoch odtlačkov sleziny, lymfatických uzlín, kostnej drene, pečene a pľúc chorých zvierat. Perinukleárne inklúzie sú viditeľné.

V chronickom priebehu je patologický proces lokalizovaný hlavne v bronchiálnych lymfatických uzlinách a pľúcach. Súčasne sa zaznamenávajú zmeny vlastné serózno-hemoragickej lymfadenitíde a krupózno-nekrotickej pneumónii. Prechod zápalu na srdcovú košeľu a myokard je možný. Asymptomatický priebeh ochorenia obmedzeného charakteru sa prejavuje nerovnomernou hyperémiou bronchiálnych alebo portálnych lymfatických uzlín, fokálnym serózno-katalovým alebo serózno-fibrinóznym zápalom pľúc. U chorých ošípaných vírus spočiatku spôsobuje hyperpláziu lymfoidných buniek. V procese jeho rozmnožovania a akumulácie väčšina z nich (70-80%) umiera podľa typu karyopyknózy a karyorexie. V kultúre buniek kostnej drene a leukocytov prasacej krvi sa erytrocyty adsorbujú na povrchu buniek infikovaných vírusom ASF, keď titer vírusu dosiahne 103,5-4,0 HAEzo/ml. V perinukleárnej zóne infikovaných buniek sa objavujú inklúzie, ktoré sa nachádzajú v miestach syntézy vírusu. Neskôr sa infikované bunky zaokrúhľujú, strácajú vzájomný kontakt a odlupujú sa od steny.

Patogenéza. AT V prirodzených podmienkach sa vírus do tela ošípaných dostáva cez dýchacie, tráviace, poškodenú kožu a sliznice. Nukleová kyselina vírusu indukuje reštrukturalizáciu bunkového metabolizmu a aktivuje hydrolytické enzýmy, čo vedie k zvýšenej proliferácii buniek lymfoidného tkaniva. Proliferujúce bunky poskytujú priaznivé prostredie pre reprodukciu vírusu. V tele sa vírus rýchlo šíri krvou a lymfatickými cievami, postihuje lymfoidné tkanivo, kostnú dreň a steny ciev. Jeho pôsobenie sa zhoršuje rozvojom alergických reakcií, ktoré sa prejavujú zvýšením počtu žírnych buniek, eozinofilov, ako aj rozvojom opuchu sliznice a fibrinoidnej nekrózy cievnych stien.

Vírus ASF sa množí v bunkách lymfoidného a retikuloendoteliálneho tkaniva. V akútnom priebehu ochorenia utlmuje imunitný systém, ničí alebo mení funkcie lymfoidných buniek, v chronických alebo latentných prípadoch narúša pomer subpopulácií leukocytov, funkciu makrofágov, syntézu a aktivitu mediátorov bunkových buniek. imunita. Patologické procesy, ktoré sa vyvíjajú v neskorom štádiu akútneho priebehu ASF (prudké zhoršenie celkového stavu, zvýšenie vaskulárnej permeability, mnohopočetné krvácanie), ako aj počas dlhého priebehu ochorenia (krupózna nekrotická pneumónia, infiltrácia tkaniva s lymfoidnými bunkami, nekróza kože, artritída, hypergamaglobulinémia) sú spôsobené hyperergickými, alergickými a autoimunitnými procesmi. Alergické a autoalergické procesy zohrávajú významnú úlohu v patogenéze ASF. V akútnom priebehu ochorenia sa dramaticky menia vlastnosti krvi (leukopénia, zvýšená adhézia leukocytov, aktivácia enzýmov v krvi a orgánoch), závažné degeneratívne zmeny v RES bunkách, mnohopočetné krvácania v dôsledku zhoršenej priepustnosti cievnej steny, aktivácia fosfatázy a vymiznutie glykogénu v pečeni.

V chronickom priebehu ASF sa zisťuje systémový prejav alergickej reakcie prechádzajúci do autoimunitného ochorenia s poškodením cieľových orgánov. V léziách sa zistilo ukladanie komplexov antigén-protilátka s fixáciou komplementu. V období recidívy ochorenia sa zisťujú cyklické zmeny v obraze bielej krvi, autoimunitné poškodenie neutrofilov a inhibícia fagocytárnej aktivity. Pri subakútnom a chronickom priebehu ASF sa v mieste opätovného zavedenia vírusu často vyvinú rozsiahle lokálne zápalové procesy, nazývané nádorové útvary. Sú to rozsiahle opuchy v submandibulárnom priestore a krku s priemerom až 30-40 cm.Súčasne nie sú vyjadrené bolesť a zvýšenie lokálnej teploty. Avšak v priebehu 12-14 dní sa tieto formácie zvyšujú, čo je sprevádzané zvýšením teploty a zhoršením celkového stavu zvierat. Pri porážke a pitve takýchto ošípaných sa vytvárajú útvary, ktoré nie sú jasne obmedzené na normálne tkanivá s ťažkým edémom pozdĺž periférie a nekrózou v centrálnej časti. V tkanivách bola preukázaná akumulácia vírusu v nehemadsorbujúcej forme až do 107,5 TCC50/ml a špecifický AG detegovaný v CSC a IF. Histovyšetrením sa zistili zmeny charakteristické pre hyperergický zápal: infiltrácia tkanív lymfoidno-histiocytárnymi elementmi s prímesou eozinofilov, neutrofilov a plazmocytov.

K lokalizácii patologického procesu prispievajú zápalovo-alergické reakcie v mieste opätovného zavedenia vírusu alebo jeho AG. Alergickú senzibilizáciu pri ASF možno zistiť intradermálnym alergickým testom. Alergény sú koncentrované materiály obsahujúce vírus, inaktivované U- Lúče, ktoré sa vstrekujú intradermálne. V mieste vpichu alergénu u zvierat infikovaných vírusom ASF sa po 24-48 hodinách rozvinie zápalová reakcia sprevádzaná infiltráciou vrstvy spojivového tkaniva kože mononukleárnymi bunkami, ktorá sa prejavuje hyperémiou a opuchom od 10. do priemeru 40 mm. Alergická reakcia sa zistí od 3 do 150 dní po infekcii u 68,7 % zvierat. Vyššie uvedené informácie naznačujú, že alergické alebo autoalergické reakcie zohrávajú významnú úlohu v patogenéze a imunogenéze ASF.

Morfológia a chemické zloženie. Virióny sú zaoblené častice s priemerom 175-215 nm, pozostávajúce z hustého nukleoidu, dvojvrstvovej ikozaedrickej kapsidy a vonkajšieho obalu. Nukleoid obsahuje DNA a proteín a je obklopený vrstvou priehľadnou pre elektróny. Dvojvrstvová kapsida pozostáva z 1892-2172 kapsomérov. Vonkajší lipoproteínový obal viriónov má typickú štruktúru a nie je nevyhnutný na prejavenie infekčných vlastností vírusu. Medzi vonkajším plášťom a kapsidou je vrstva priehľadná pre elektróny. Plávajúca hustota v CsCl je 1,19-1,24 g/cm3, sedimentačný koeficient je 1800-8000S. Infekčnosť vírusu pretrváva pri 5 ° C počas 5-7 rokov, pri izbovej teplote - 18 mesiacov, pri 37 °С - 10-30 dní. Vírus je stabilný pri pH 3-10, citlivý na tukové rozpúšťadlá a inaktivovaný pri 56 °C počas 30 minút.

Konce DNA sú kovalentne spojené a obsahujú invertované opakovania, podobné tým v DNA poxvírusov. DNA nie je infekčná. Vo viriónoch vírusu ASF sa našlo 54 polypeptidov. Virióny sú spojené s niekoľkými enzýmami nevyhnutnými na syntézu skorých mRNA.

Vírus ASF sa rozmnožuje v cytoplazme buniek, ale pre jeho rozmnožovanie je nevyhnutná aj funkcia jadra. V infikovaných bunkách sa našlo 106 vírusovo špecifických proteínov, z ktorých 35 sa syntetizuje pred replikáciou vírusovej DNA (skoré proteíny) a 71 po replikácii DNA (neskoré proteíny). Virióny dozrievajú v cytoplazme a získavajú vonkajší obal, keď pučia cez cytoplazmatickú membránu. Vírus sa množí v tele ošípaných a kliešťov rodu Ornithodoros. U ošípaných sa vírus replikuje v monocytoch, makrofágoch a retikuloendoteliálnych bunkách. U samíc kliešťov vírus pretrváva viac ako 100 dní, prenáša sa transovariálne a transfázicky.

Je známe, že prienik vírusov do tela je sprevádzaný tvorbou VNA. Výnimkou je predovšetkým vírus ASF. Infekcia týmto vírusom neindukuje syntézu VNA u zvierat, hoci v krvnom sére sa detegujú KSA, PA a typovo špecifické inhibičné GA AT. Neprítomnosť VNA má za následok neschopnosť tela viazať a eliminovať vírus, čo následne vedie k mimoriadne vysokej úmrtnosti infikovaných zvierat. Na druhej strane uvedený paradoxný jav ruší pokusy o vytvorenie účinnej vakcíny, pretože oslabené kmene vírusu spôsobujú chronický priebeh ochorenia ošípaných a predĺžené prenášanie vírusu, čo je z epizootologického hľadiska veľmi nebezpečné.

Vírus ASF má odlišné charakteristiky vírusov irido a poxvírusov. Je to jediný zástupca jedinečnej rodiny. DNA kóduje viac ako 100 polypeptidov, z ktorých viac ako 30 sa našlo v purifikovaných vírusových prípravkoch. S viriónmi je spojených množstvo enzymatických aktivít, vrátane DNK-dependentnej RNA polymerázy, fosfatohydrolázovej aktivity, ako aj proteínkinázy a kyslej fosfatázy. DNA-dependentná RNA polymeráza sa nachádza na periférii kapsidy a hydroláza ATP sa nachádza medzi kapsidou a nukleoidom. Kapsidu tvoria prevažne polypeptidy s mol. m., 73 a 37 kD. S kapsidou je spojená aj DNA-dependentná RNA polymeráza, ktorá sa podieľa na počiatočných štádiách reprodukcie vírusu. DNA je dvojvláknová štruktúra. 100-106 D, pozostávajúce zo 170 tisíc p. 58 nm dlhý s kovalentnými koncovými väzbami vo forme invertovaných opakovaní 2,7 tisíc bp.

Vírus ASF má 20-stranný tvar, jeho veľkosť je 175-215 nm, je pokrytý dvojvrstvovým lipoproteínovým obalom, ktorý má antigénnu afinitu k hostiteľským tkanivám. Nasleduje trojvrstvová kapsida z periodicky umiestnených kapsomér, vo vnútri je nukleoproteín z hustých fibríl obsahujúci DNA. Povrchová membrána a kapsida obsahujú veľké množstvo lipidov. DNA vírusu ASF ks. BA71V má dĺžku 170101 bp. a 151 otvorených čítacích rámcov. Sekvenovanie DNA ukázalo, že vírus ASF zaberá medzipoxvírusy a iridovírusy a patrí do nezávislej rodiny vírusov. Pôsobením restriktázy ECo-R-l bolo detegovaných 28 fragmentov DNA (hodnota 0,3-21,9 kD), čo je 96 % celej molekuly, a 11-50 fragmentov (0,3-76,6 kD) bolo detegovaných inými restriktázami. Bola získaná expresia 16 fragmentov DNA v E. coli, lokalizácia 80 miest bola určená molekulárnou hybridizáciou a bola zostavená mapa umiestnenia fragmentov. Odhalili sa rozdiely medzi jednotlivými izolátmi a variantmi vírusu, ako aj mechanizmus a sekvencia syntézy vírusovo špecifických proteínov, ich úloha v patogenéze ochorenia.

Podľa iných údajov sa v zložení viriónov a infikovaných buniek našlo 28-37 vírusovo špecifických proteínov, podľa iných údajov bolo zaregistrovaných 100 štrukturálnych a 162 neštrukturálnych vírusovo špecifických proteínov s hmotnosťou 11,5-245 kD. Boli identifikované hlavné polypeptidy (172, 73, 46, 36, 15, 12 kD), skoré a neskoré proteíny, glykoproteíny (54, 34, 24, 5, 15 kD), bola stanovená príbuznosť s proteínmi AT 25. Predpokladá sa, že skoré proteíny sa syntetizujú z koncových úsekov DNA a neskoré z jej centrálnej časti. Vírusovo špecifické proteíny v infikovaných bunkách sú umiestnené nasledovne: v membránových proteínoch - 220, 150, 24, 14, 2 kD, vo viroplastoch - 220, 150, 87, 80, 72, 60 kD, v bunkovom jadre - 220, 150, 27 kD. Stanovilo sa určité poradie umiestnenia jednotlivých proteínov vo virióne (začínajúc od povrchu) - 24, 14, 12, 72, 17, 37 a 150 kD. Boli skonštruované fyzikálne mapy DNA virulentného kmeňa vírusu ASF K-73 (sérotyp 2) a z neho izolovaného avirulentného variantu KK-262, adaptované na kultúru buniek obličiek ošípaných (PPK-666). Každý kmeň má svoju vlastnú, odlišnú fyzickú mapu DNA, s určitou podobnosťou. Proteíny 32 a 35 kD sú kmeňovo špecifické. Virión obsahoval DNA polymerázu, proteínkinázu a ďalšie enzýmy, ktoré sú nevyhnutné pre skorú syntézu vírusovo špecifických štruktúr.

Vírus ASF je heterogénny. Ide o heterogénnu populáciu pozostávajúcu z klonov, ktoré sa líšia hemadsorpciou, virulenciou, infekčnosťou, tvorbou plakov a antigénnymi vlastnosťami. Biologické vlastnosti vírusu použitého na experimentálnu infekciu ošípaných sa líšia od vírusových izolátov izolovaných neskôr z tých istých ošípaných. V roku 1991 bola publikovaná správa o aktuálnych údajoch o architektúre morfogenézy a distribúcii štruktúrnych polypeptidov vo virióne ASF. Na základe všeobecného plánu štruktúry vírusu ASF, lokalizácie viroplastov v infikovaných bunkách, bol vírus zaradený do skupiny iridovírusov. R. M. Chumak vyslovil hypotézu o hybridnom pôvode vírusu ASF, ktorého predkami boli vírusy skupiny pravých kiahní a jeden z hmyzích iridovírusov. Podľa názoru autora by mal byť tento vírus zaradený do samostatnej rodiny, kam budú neskôr priradené ďalšie vírusy.

A. D. Sereda a V. V. Makarov identifikovali izolát špecifický glykopeptid vírusu ASF. Tri glykozylované polypeptidy s mol. 51, 56, 89 kD a tri rádioaktívne značené monochromatické zložky obalu s mol. m 9, 95, 230 kD, ktorých biochemická povaha nebola objasnená. Päť vírusom indukovaných glykozylovaných polypeptidov s mol. m.13, 33, 34, 38, 220 kD boli identifikované v bunkách Vera infikovaných vírusom ASF. Zdá sa, že polypeptid (110–140 kD) priamo súvisí s GAD AG, ktorého existencia bola predtým posudzovaná iba podľa fenoménu GAD. Autori ukázali, že oligosacharidové proteíny tvoria asi 50 % hmotnosti glykozylovaného polypeptidu (110–140 kD). Lipidové zloženie vírusu ASF závisí od systému bunkovej kultúry.

Reštrikčná analýza a krížová hybridizácia reštrikčných fragmentov ukázali, že genóm izolátu vírusu CAM/82 ASF sa nemení počas pasážovania na ošípaných (pre 20 pasáží) a v kultivovaných bunkách kostnej drene ošípaných (pre 17 pasáží). Genóm vírusu ASF je celkom stabilný počas prenosu vírusu v prirodzených a experimentálnych podmienkach. Porovnanie údajov fyzikálneho mapovania a biologických vlastností kmeňov vírusu ASF umožnilo predpokladať, že ľavá terminálna oblasť obsahuje oblasti DNA, ktoré priamo súvisia s takými prejavmi fenotypu vírusu, ako je virulencia a imunogenicita. Tento predpoklad je založený na skutočnosti, že u avirulentných kmeňov dochádza k strate veľkej časti DNA v tejto oblasti, zatiaľ čo u prirodzených izolátov je dĺžka ľavej koncovej oblasti oveľa významnejšia. Na základe získaných výsledkov boli skonštruované fyzikálne mapy genómov referenčných kmeňov ASFV všetkých 4 sérotypov a bola vykonaná certifikácia vakcinačných kmeňov, ktorá umožňuje ďalšiu kontrolu prípadných zmien v genóme. Použitím primerov komplementárnych k nukleotidovým sekvenciám štruktúrneho génu VP2 proteínu VASHF bol vyvinutý testovací systém na identifikáciu VASHF pomocou PCR. Otvorený čítací rámec B438L, umiestnený na fragmente EcoRI-L genómu vírusu afrického moru ošípaných (VALS), kóduje proteín so 438 zvyškami s mol. 49,3 kDa, ktorý má RGD bunkový pripájací motív a nie je homológny s proteínmi z databáz. Gén B438L sa transkribuje až v neskorom štádiu infekcie VALS. Proteín bol exprimovaný v Escherichia coli, purifikovaný a použitý na získanie králičieho antiséra, ktoré rozpoznáva proteín s mol. 49 kD v bunkách infikovaných VALS. Tento proteín je syntetizovaný v neskorom štádiu infekcie všetkými študovanými kmeňmi VALV, nachádza sa v továrňach na cytoplazmatické vírusy a je štrukturálnou zložkou purifikovaných viriónov VASF.

Genómy izolátov vírusu afrického moru ošípaných izolovaných v Kamerune v rokoch 1982-1985 sú nerozoznateľné reštrikčnou analýzou. Izolát CAM/87 sa mierne líši od izolátov z rokov 1982-1985. Významné rozdiely sa však našli v DNA izolátu CAM/86 použitím 4-reštrikčných enzýmov v 2-fragmentoch (v pravej koncovej oblasti a v centrálnej oblasti).

Udržateľnosť. Vírus ASF je výnimočne stabilný v širokom rozsahu teplôt a prostredí pH, vrátane sušenia, mrazenia a rozkladu. Môže zostať životaschopný po dlhú dobu vo výkaloch, krvi, pôde a na rôznych povrchoch - drevo, kov, tehla. V mŕtvolách ošípaných sa inaktivuje najskôr po 2 mesiacoch, vo výkaloch - do 16 dní, v pôde - do 190 dní a v chladničke pri -30 - 60 ° C - od 6 do 10 rokov. Slnečné lúče bez ohľadu na infikované predmety (betón, železo, drevo) po 12 hodinách úplne inaktivujú vírus ASF (st. Dolizi-74) a ks. Mfuti-84 - za 40-45 minút. V podmienkach prasárne pri 24°C došlo k prirodzenej inaktivácii vírusu (ks Dolizi-74) za 120 dní a ks. Mfuti-84 - za 4 dni. Ako optimálny na dezinfekciu infikovaných priestorov sa ukázal 0,5% roztok formalínu. Zmrazenie neovplyvňuje biologickú aktivitu vírusu, ale je počiatočným štádiom poškodenia genómu. Vírus s perkolom je odolný voči DNáze po zmrazení pri -20 ° C a -70 ° C a poškodzuje sa pri -50 ° C. Sušenie vírusu bez stabilizátora spôsobuje stratu jeho infekčnosti.mes.

Pri plánovaní veterinárnych a sanitárnych opatrení sa berie do úvahy dlhodobá stabilita patogénu v krvi, exkrementoch a mŕtvolách. Keďže vírus zostáva životaschopný v infikovaných chlievoch 3 mesiace, toto obdobie zodpovedá expozícii, po ktorej je povolený dovoz novej šarže ošípaných. Stabilita vírusu je ovplyvnená zložením a pH média, v ktorom je suspendovaný, obsahom bielkovín a minerálnych solí, stupňom hydratácie a povahou skúmaného materiálu obsahujúceho vírus. Pri 5 °C zostáva aktívny 5-7 rokov, pri izbovej teplote - až 18 mesiacov, pri 37 °C - 10-30 dní. Pri 37 °C sa jeho infekčnosť znížila o 50 % do 24 H V médiu s 25 % séra a 8 hodín v médiu bez séra. Pri 56 °C zostalo malé množstvo vírusu infekčné dlhšie ako 1 hodinu, takže v praxi používaná 30-minútová inaktivácia séra pri 56 °C na zničenie patogénu nestačí.Pri 60 °C bol inaktivovaný do 20 minút.a v alkalickom prostredí.Väčšina dezinfekčných prostriedkov (kreolín, lysol, 1,5% roztok NaOH) ju neinaktivuje.Najväčší virucídny účinok na ňu majú prípravky aktívne s chlórom (5% roztok chloramínu, chlórnany sodné a vápenaté s 1 -2 % aktívny chlór, bielidlo) pri 4-hodinovej expozícii Hydroxid sodný vo forme 3 % roztoku sa odporúča na dezinfekciu iba v horúcej forme (pri teplote 80-85 °C). Pri dezinfekcii dávajte pozor sa venuje dôkladnému mechanickému čisteniu a oplachovaniu horúcou vodou, pretože organické látky z hnoja môžu znížiť účinnosť dezinfekcie.

AG štruktúra. Je to zložité s vírusom. Pôvodca obsahuje antigény skupiny KS-, precipitujúce a typické GAD. Boli nájdené proteíny viažuce DNA, vrátane hlavných a vedľajších proteínov s mol. m od 12 do 130 kD. Ich celkový počet dosahuje 15, z toho 7 štrukturálnych. Proteíny P14 a P24 sú umiestnené na periférii viriónu a P12, P17, P37 a P73 - v medzivrstve; bol objavený proteín P150 - hlavný vírusový proteín, ktorý sa nachádza v nukleoide alebo v jednom z vrcholov (rohov) viriónu. Všetky eukaryotické bunky majú špeciálny proteín pozostávajúci z látok z aminokyselinových zvyškov a kovalentne naviazaný na rôzne bunkové proteíny (napríklad histón). Toto spojenie zabezpečuje enzým UBS konfigurujúci ubikvitín. Jeden z proteínov kódovaných vírusom ASF je schopný aktivovať ubikvitín.

Otázky o povahe infekčnej hypertenzie, ktorá vyvoláva tvorbu VNA, sú stále otvorené. Iná situácia je s AG, ktoré indukujú tvorbu AT, ktoré oneskorujú hemadsorpciu. Séra s anti-HAD vlastnosťami sú široko používané všetkými výskumníkmi, ktorí študujú problém ASF. Polypeptidy s mol. m.120, 78, 69, 56, 45, 39, 28, 26, 24, 16 a 14 kD sa najintenzívnejšie detegujú na elektroforegramoch a imunoblotogramoch purifikovaných prípravkov vírusu ASF. Zmes proteáz a pankreatickej lipázy v nízkych koncentráciách odstraňuje polypeptidy z týchto prípravkov mol. m 120 a 78 kD, v stredných koncentráciách - polypeptidy s mol. m. 69, 56, 45, 39, 28 a 14 kD, vo vysokých koncentráciách - polypeptid s mol. m.26 kD. Polypeptid s mol. 21 kDa, ktorý nereagoval v imunoblote so špecifickým antivírusovým sérom, bol odolný voči kombinovanému pôsobeniu proteáz a lipázy. Ošetrenie vírusu Tritonom X-100 a éterom viedlo k zvýšeniu aktivity DNA-dependentnej RNA polymerázy spojenej s vírusom a ošetrenie éterom a následné opätovné vyzrážanie viedlo k výraznému zníženiu aktivity v precipitovanom prípravku. Ošetrenie vírusu éterom neovplyvnilo jeho aktivitu. Na základe získaných výsledkov a literárnych údajov bola navrhnutá schéma usporiadania vírusových polypeptidov a enzýmov v štruktúre viriónu.

AG variabilita a príbuznosť. Na základe oneskorenia hemadsorpcie boli identifikované dve AG A- a B-skupiny (typy) a jedna podskupina C vírusu ASF. V rámci A-, B-skupiny a C-podskupiny bolo identifikovaných mnoho sérotypov tohto patogénu. Dve genetické skupiny (CAM/88 a CAM/86) vírusu afrického moru ošípaných izolovaného v Kamerune spôsobujú podobné klinické príznaky a lézie u domácich ošípaných. 3-6 dní po infekcii sa rozvinie horúčka, strata chuti do jedla, letargia, strata koordinácie, triaška, hnačka a dýchavičnosť. Existuje hyperémia pľúc a výskyt krvácania v obličkách a viscerálnych lymfatických uzlinách. Titre vírusov u ošípaných infikovaných izolátmi rôznych skupín sa štatisticky nelíšili.

Pomocou imunotestov a RZGA sa stanovilo 7 referenčných kmeňov z každej skupiny: L-57; L-60; Hinde-2; Rhodesia; Dakar; 2743; Mozambik. Referenčné kmene zahŕňajú - ks. Hinde; č. 2447; 262; Magadi; Spencer; L-60 a Rodézia. Imunobloting MAB odhalil 6 skupín a reštrikčná analýza odhalila 4 skupiny a 3 podskupiny. Toto je referenčný kus. Uganda, Spencer, Tengani, Angola, L-60, E-75. Existujú správy o vysokej variabilite vírusu ASF, pokiaľ ide o antigenicitu, virulenciu a iné vlastnosti, ako aj o existencii jeho zmiešaných populácií, ktoré je ťažké oslabiť. Napríklad ks. Kerovara-12, izolovaný z prasaťa bradavičnatého v Tanzánii, vykazuje typickú heterogenitu populácie ASF. Vlastnosti vírusu sú vzájomne prepojené s patologickými a imunologickými procesmi v tele infikovaných ošípaných. Väčšina izolátov izolovaných počas epizoocie z domácich ošípaných v Afrike mala rôzne GA AG. Izoláty pasážované in vivo v prasačích makrofágoch sa menia rýchlejšie a hlbšie ako pri pasážovaní vo Vero bunkách. U afrických izolátov sa ukázali ako najvariabilnejšie proteíny P150, P27, P14 a P12, u neafrických izolátov - P150 a P14 sa proteín P12 nemení a P72 - hlavný AG - bol stabilný pri diagnostikovaní EL1SA. . Rozdiely AH medzi kmeňmi vírusu ASF nemožno určiť pomocou pevnej fázy ELISA, RDP a IEOP, keďže tieto metódy odhaľujú iba spoločné AG pre všetky kmene vírusu ASF. Dá sa to dosiahnuť iba depléciou kultivovaného antigénu ASFV heterotypickým sérom. Ako vyplýva z vyššie uvedených skutočností, sérologická a imunologická pluralita vírusu ASF je jednou z jeho hlavných vlastností.

Lokalizácia vírusov. Vírus sa nachádza vo všetkých orgánoch a tkanivách chorých zvierat. Objavuje sa v krvi pri počiatočnom zvýšení teploty a nachádza sa tam až do smrti zvieraťa v titroch od 103 do 108 GAd5o / ml - Pri chronickom priebehu ochorenia titer vírusu v krvi rýchlo klesá, virémia je prerušovaná. Pri absencii virémie môže pretrvávať dlhý čas (až 480 dní) v slezine a lymfatických uzlinách. Presná lokalizácia vírusu v latentnom priebehu ochorenia nebola stanovená. V pôvodne infikovaných orgánoch (lymfoidné tkanivo v hltane) zostal vírus v titri okolo 107 HAD50L až do smrti zvieraťa. Jeho najvyššie titre (10 s) boli pozorované v tkanivách obsahujúcich veľké množstvo retikuloendotelových prvkov: slezina, kostná dreň, pečeň, čo je v súlade s detekciou významných lézií v týchto tkanivách. Primárnym miestom lokalizácie vírusu sú mandle. Jeho prítomnosť v leukocytoch od 1. dňa infekcie naznačuje, že patogén je zavedený do iných tkanív leukocytmi. Výskyt vírusu v slezine a kostnej dreni po 2 dňoch a rýchle zvýšenie titra vírusu v týchto tkanivách naznačuje, že sú miestom sekundárnej reprodukcie patogénu.

Z tela infikovaných zvierat sa vírus vylučuje krvou, nosnými výlučkami, stolicou, močom, slinami a pravdepodobne aj pľúcami s vydychovaným vzduchom. U väčšiny zvierat, ktoré prežili, je nosič vírusu takmer doživotný. Vírus môže byť pravidelne izolovaný z krvi, lymfatických uzlín, pľúc, sleziny. Je ťažké ho izolovať od iných tkanív. K vylučovaniu vírusu dochádza 2-4 dni po nástupe horúčky. Stresové faktory prispievajú k exacerbácii infekcie a uvoľneniu vírusu do vonkajšieho prostredia. Sezónnosť vylučovania vírusu je zároveň spojená s pôrodom. V kliešťoch Ornithodoas sa vírus ASF množí v črevách a potom sa šíri do slinných žliaz a reprodukčných orgánov. Kliešte môžu zostať trvalo infikované a prenášať vírus až 3 roky; spolu s prasatami bradavičnatými vytvárajú trvalý rezervoár vírusu pre domáce ošípané. Kliešte sú schopné ho prenášať transovariálne a transfa-zovo. Koncentrácia vírusu v kliešťoch je vyššia ako u ošípaných prenášajúcich vírus.

činnosť AG. V sérach rekonvalescentov sa objavujú precipitujúce SC a zadržiavajúce GAd AT, ktoré neovplyvňujú CPP vírusu. PA a KSA nie sú typovo špecifické, sú spoločné pre všetkých jedincov, zatiaľ čo AT, ktoré inhibujú GAd, sú striktne typovo špecifické a používajú sa na typizáciu vírusu ASF. KSA a PA nie sú spojené s tvorbou imunity. BHA sa netvoria, ale v obrane funguje mechanizmus sprostredkovaný AT. Tieto protilátky sú aktívne v dvoch systémoch: A) In in vitrobunková cytotoxicita závislá od protilátky; b) lýza závislá od komplementu. Séra rekonvalescentných zvierat špecificky zadržiavajú GAD v kultúrach infikovaných homológnym vírusom ASF. Titer takéhoto AT dosiahne svoje maximum 35-42 dní po klinickom zotavení zvierat. Vírus ASF nespôsobuje tvorbu VNA a humorálne zložky imunitnej odpovede majú malý význam. Neschopnosť produkovať VNA proti vírusu ASF je pravdepodobne spôsobená vlastnosťami samotného patogénu.

Interakcia vírusu s AT. Jedným z dôvodov nedostatku vedomostí o imunológii ASF je nedostatočná neutralizácia AT vírusu, hlavnej vlastnosti iných vírusov, ktoré sú tradičným základom pre štúdium ich imunogenicity od objavenia sérologických reakcií. V tomto ohľade existuje iba jeden zoopatogénny analóg - parvovírus aleutskej choroby norkov, ale je známa aj nízka schopnosť neutralizovať typických predstaviteľov iridovírusov. Uskutočnilo sa mnoho pokusov o štúdium tohto jedinečného javu, ale zatiaľ nebolo ponúknuté žiadne uspokojivé vysvetlenie; Existuje mnoho verzií – od absencie viriónových glykoproteínov až po antigénne mimikry a heterogenitu. V snahe objasniť túto problematiku autori postupne študovali výsledky interakcie vírusu s AT, vírusu s citlivými bunkami v kultúre a komplexu vírus + AT s citlivými bunkami. Ukázalo sa, že imunitný komplex (AG+AT) voľne preniká do citlivých buniek a vírus si zachováva svoju pôvodnú reprodukčnú aktivitu. V ASF je neutralizácia vírusu in vitro sprevádzaná opačným účinkom - zvýšenou vírusovou reprodukciou a rozsiahlou patológiou v dôsledku šírenia infikovaných monocytov makrofágov.

Otázka interakcie vírusu ASF s AT si vyžaduje ďalšie experimentálne štúdium. U séropozitívnych natívnych zvierat sa špecifické CSA a PA nachádzajú v krvi v titroch až do 1:128 a 1:64, v tomto poradí. Špecifické protilátky v krvi prasiatok sa objavia až po odbere kolostra od séropozitívnych prasníc. Hladina AT v kolostre bola rovnaká alebo vyššia ako ich koncentrácia v krvi.

experimentálna infekcia. Mačky, psy, myši, potkany, králiky, sliepky, holuby, ovce, kozy, dobytok a kone sú voči experimentálnej infekcii imúnne. V experimentálne infikovaných argasidových kliešťoch Ornithodoros turicata bol vírus detekovaný biotestom v priebehu roka. V črevách kliešťa bola zistená najskoršia a najdlhšia prítomnosť vírusu. K jeho rýchlej distribúcii a replikácii v iných tkanivách dochádza prostredníctvom hemolymfy. Už 24 hodín po infekcii. AH bola detegovaná pomocou MFA. Po 2-3 týždňoch sa vírus našiel v hemocytoch a do 6.-7. týždňa - vo väčšine tkanív.

Kultivácia. Na kultiváciu vírusu ASF možno použiť prasničky vo veku 3-4 mesiacov, ktoré sa infikujú akoukoľvek metódou. Častejšie sa infikujú intramuskulárne v dávke 104 – 106 HAd50 S rozvojom klinických príznakov ochorenia na 4. – 6. deň po infekcii sa zvieratá usmrtia a krv a slezina sa použijú ako materiál obsahujúci vírus, v r. ktorý vírus akumuluje v titri 106-8 HAd50.Pokusy o kultiváciu vírusu ASF neboli úspešné u iných živočíšnych druhov.

Kultúry krvných leukocytov a makrofágov kostnej drene ošípaných boli citlivé na vírus. Bunky sa infikujú zvyčajne na 3. – 4. deň rastu v dávke 103 HAD vírusu na 1 ml živného média. Po 48-72 hodinách sa hromadí v bunkových kultúrach v titre JO6-7 5 HAD 50/ml - vírusom ASF infikovaných väčšinu makrofágov (monocytov), ​​ak nie všetky, tak len asi 4 % Polymorfonukleárne leukocyty v periférnej krvi. B- a T-lymfocyty, ktoré sú v pokoji alebo sú stimulované PHA, liposacharidom alebo mitogénom z americkej fytolacca, nie sú na vírus citlivé. Ten sa replikuje výlučne v makrofágoch a nachádza sa v najvyšších titroch v erytrocytoch ošípaných. Do bunky sa dostáva prevažne receptorovo nezávislým spôsobom, k jeho replikácii dochádza v cytoplazme, ale pre syntetické procesy je nevyhnutná účasť jadra. Je možná infekcia viac ako jednou časticou vírusu, čo znamená prítomnosť niekoľkých jeho subpopulácií v jednej bunke a ich interakciu. Počet buniek obsahujúcich AG na povrchu dosiahne maximálnu úroveň po 13-14 hodinách. V infikovaných bunkách zostáva veľké množstvo nepoužitého materiálu špecifického pre vírus, ktorý má membránovú, valcovú alebo excentrickú štruktúru. Predpokladá sa, že ich škrupiny obsahujú GAD AG.

Vírus sa množí v kultúrach leukocytov a kostnej drene ošípaných s rozvojom GAD a CPP bez adaptácie. Pri optimálnej dávke infekcie sa GAd prejavuje po 18-24 hodinách, CPP - po 48-72 hodinách a je charakterizovaná tvorbou cytoplazmatických inklúzií, po ktorých nasleduje únik cytoplazmy a objavenie sa mnohojadrových obrovských buniek (tieňové bunky) . Do buniek CV-1 alebo Vero vstupuje adsorpčnou endocytózou alebo endocytózou sprostredkovanou receptormi. "Vyzliekanie" viriónov sa vyskytuje v endozómoch alebo iných kyslých intracelulárnych vezikulárnych organelách. Keď sa ASFV inkubuje s mononukleárnymi bunkami periférnej krvi ošípaných, inhibuje proliferatívnu odpoveď lymfocytov na fytohemaglutinín a iné lektíny. Predpokladá sa, že táto inhibícia je indukovaná rozpustnými frakciami, ktoré sú uvoľňované periférnymi mononukleárnymi bunkami po spoločnej inkubácii s vírusom. HAD vírusu v infikovaných kultúrach je natoľko špecifický, že sa používa ako hlavný test pri diagnostike ochorenia. V iných typoch bunkových kultúr sa vírus nemnoží bez predchádzajúcej adaptácie. Je prispôsobený množstvu homo- a heterológnych kultúr: kontinuálne bunkové línie obličky ošípanej (PP a RK), oblička opice zelenej (MS, CV), obličky makaka Vero bunky atď. V literatúre sa málo pozornosti venuje vplyv sacharidových zložiek, ktoré môžu tvoriť 50 až 90 % hmotnosti glykoproteínov, na imunogenicitu vírusu: jednou z príčin slabej imunogenicity obaleného glykoproteínu (gp 120) vírusu imunodeficiencie (HIV) je že 50 % Jeho hmotnosť je spôsobená „atmosférou“ cukrov, ktoré môžu hrať negatívnu úlohu, napríklad brániť AT v prístupe k miestu fixácie na obale HIV, t.j. vitálne oblasti HIV sú „chemicky“ chránené pred pôsobením imunitného systému. systém. Je možné, že príčinou neneutralizácie vírusu ASF môže byť prítomnosť vysoko glykozylovaných proteínov na povrchu viriónov. Koexistenciu glykozylovaných zložiek neznámej povahy v obale viriónov ASF opísali Mudel Wahl et al. v roku 1986.

Prítomnosť takýchto zložiek na bunkových membránach môže tiež prispieť k úniku z iných efektorových mechanizmov imunitného systému hostiteľa a zvýšiť jeho patogenitu. Štúdia subcelulárnej lokalizácie a aktivity transprenyltransferázy vírusu ASF v infikovaných bunkách ukázala, že enzým je integrálnym membránovým proteínom a vykazuje aktivitu geranylgeranyldifosfátsyntázy fenyltransferázy v membránových frakciách, čo je 25-násobné zvýšenie tvorby geranylgeranyldifosfátu v infikovaných bunkách. Proteín viazaný na membránu teda syntetizuje prevažne trans-GGDP syntetázu. reprodukčné vlastnosti. Na štúdium ultraštrukturálnej organizácie replikácie sa použili metódy in situ hybridizácie, autorádiografie a elektrónovej mikroskopie. DNA Vírus ASF v infikovaných bunkách Vera. V ranom štádiu syntézy vírusovej DNA vytvára husté ložiská v jadre v blízkosti jadrovej membrány a v neskoršom štádiu je výlučne v cytoplazme. Sedimentácia v alkalickom koncentračnom gradiente sacharózy ukázala, že v ranom štádiu sú v jadre malé fragmenty DNA (= 6-12 S) a v neskoršom štádiu sú v cytoplazme označené dlhšie fragmenty (= 37-46 S). Pulzné značenie ukázalo, že tieto fragmenty sú prekurzormi zrelej zosieťovanej vírusovej DNA.

Formy hlava-hlava sa našli v strednom a neskorom štádiu. Tieto údaje naznačujú, že replikácia DNA vírusu ASF nasleduje de novo štartovací mechanizmus so syntézou krátkych fragmentov DNA, ktoré sa potom menia na dlhé fragmenty. Ligácia alebo predĺženie týchto molekúl poskytuje dvojjednotkové štruktúry s dimérnymi koncami, ktoré môžu vytvárať genómové DNA V dôsledku vytvorenia miestne špecifického jednovláknového zlomu, preskupenia a ligácie. Biochemické metódy na analýzu zostavovania, zostavovania a tvorby obalu vírusu ASF sa použili na štúdium bunkových procesov, ktoré sú dôležité pre obalenie vírusu v membránových cisternách. Zostavenie kapsidy ASFV na membrány endoplazmatického retikula (ER) a obalenie cisterny ER je inhibované, keď je ATP alebo vápnik vyčerpaný v dôsledku inkubácie s A23187 a EDTA alebo s taxiharpínom, inhibítorom ER kalciovej ATPázy. EM metóda ukázala, že bunky zbavené Ca2 nedokážu zostaviť ikosaedrické častice VASF. Namiesto toho miesta montáže obsahujú hrebeňovité alebo baňaté štruktúry, v zriedkavých prípadoch prázdne uzavreté 5-uholníkové štruktúry. Nábor kapsidového proteínu VALS z cytosolu do membrán ER nevyžaduje rezervy ATP alebo Ca2+. Avšak následné štádiá zostavenia kapsidy a tvorby škrupiny závisia od ATP a sú regulované gradientom Ca2+ v membránových cisternách ER.

Vlastnosti GA a GAd. Vírus nemá vlastnosti GA. Pri násobení in vitro v kultúrach leukocytov alebo buniek kostnej drene ošípaných sa pozoruje fenomén adsorpcie erytrocytov na povrchu postihnutých buniek. Erytrocyty sa prichytia na stenu leukocytu, vytvoria okolo neho charakteristickú korunku a niekedy bunku zo všetkých strán uzavrú, v dôsledku čoho postihnuté leukocyty vyzerajú ako moruše. Čas objavenia sa HAD závisí od inokulovanej dávky vírusu a môže sa objaviť už po 4 hodinách, ale vo väčšine prípadov - po 18-48 hodinách a pri nízkych titroch vírusu - po 72 hodinách. počet postihnutých buniek sa zvýši, potom sa začnú vymazávať a prejaví sa CPD vírusu. Citlivosť RGAD závisí od vlastností vírusu a stupňa jeho akumulácie v infikovanej bunkovej kultúre. Zisťuje sa pod svetelným mikroskopom, keď titer infekčnosti v kultúre nie je nižší ako 104 LD50/ml - Podľa niektorých autorov závisí čas nástupu HAD od titra vírusu v skúmanej vzorke materiálu. Zníženie titra vírusu ASF má za následok zníženie citlivosti RAD. V tejto súvislosti je v niektorých prípadoch nevyhnutné vykonať až tri po sebe idúce sériové "slepé" pasáže vírusu v kultúre leukocytov alebo kostnej drene, aby sa potvrdila jeho prítomnosť v testovanom materiáli v prípade variantu HAD. .

Niekedy sa izolujú nehemadsorbujúce kmene vírusu, ktoré majú iba výrazné cytopatogénne vlastnosti. Pri ich prechode do bunkovej kultúry aspoň 50-krát a infekcii ošípaných sa hemadsorpcia neobnovila. V Južnej Afrike bol nehemadsorbujúci kmeň izolovaný z domácich ošípaných počas prirodzenej epizoocie. Neskôr tam bol izolovaný nehemadsorbujúci variant zo suspenzií roztočov O. moubata zozbieraných v ložiskách infekcie.

Keďže špecifický GAD charakterizuje virulenciu kmeňov ASF, izolácia menej virulentných nehemadsorbujúcich vírusov z ošípaných s chronickou pneumóniou je veľmi zaujímavá. Jednotlivé nehemadsorbujúce sa izoláty alebo klony však môžu byť vysoko virulentné. Mechanizmus reakcie GAD, ako aj lokalizácia AG zodpovedných za GAD, neboli stanovené. Úloha vonkajších membrán viriónov pri ich väzbe na erytrocyty je dôležitá, pretože virióny, ktoré nemajú membrány, sa na erytrocytoch neadsorbujú. Antigény zahrnuté v GAD sú lokalizované v obaloch viriónov pochádzajúcich z cytoplazmatických membrán hostiteľských buniek.

ASF pri počiatočnej manifestácii zvyčajne prebieha akútne a subakútne s úhynom až 97 % populácie ošípaných. V izolovaných chovoch v tropických podmienkach sú príčinou sekundárnych ložísk choré ošípané – latentné nosiče patogénu. Vírus ASF v Kongu teda cirkuluje medzi miestnymi zvieratami vo forme ťažko zistiteľnej nehemadsorbujúcej sa populácie bez toho, aby spôsoboval viditeľné symptómy ochorenia a vytváral u miestnych ošípaných pozitívne imunitné pozadie. Epizootologický prieskum miestnej populácie ošípaných naznačuje, že za určitých podmienok zohrávajú domáce ošípané ako rezervoár vírusu v prírode významnú úlohu v epizootológii AMO. U séropozitívnych natívnych zvierat sa špecifické KSA a PA nachádzajú v krvi v titroch do 1:128 a 1:64, v tomto poradí.

Na štúdium tvorby pasívnej imunity sa uskutočnili experimenty s prasiatkami rôzneho veku získanými zo séropozitívnych zvierat. V krvi nenarodených plodov, ako aj prasiatok bez kolostra, špecifické AT chýbali. Vírus tiež nebol izolovaný z týchto zvierat. Špecifické AT v krvi prasiatok sa objavili až po odbere kolostra od séropozitívnych prasníc. Dynamika špecifického AT v krvi 82 prasiatok séropozitívnych prasníc bola sledovaná počas 5-mesačného obdobia. Pri kontrolnej infekcii 2-5 mesačných prasiatok, v ktorých krvi boli CSA a PA zistené v titroch 1:16-1:32 a 1:2-1:4, všetky zvieratá uhynuli s klinickými príznakmi ASF. Séropozitívne prasiatka rovnakého veku v kontakte s nimi boli odolné voči infekcii.

Vírus ASF môže perzistovať tak u vnímavých ošípaných, ako aj in vitro v bunkovej kultúre. V afrických podmienkach sa domáce ošípané môžu nakaziť kontaktom s divými prasatami bradavičnatými (Phaco choerus) a kríkovými ošípanými (Patomochoerus), u ktorých spôsobuje latentnú infekciu. Roztoče Argas O. moubata porcinus sú prirodzeným rezervoárom a nosičom vírusu ASF. Kliešte Ornithodorina (prenášače vírusu ASF) môžu žiť 9 rokov, vírus ASF v ich populácii pretrváva dlhodobo. O. turicata sa vyskytuje v Severnej Amerike v Uta, Colorado, Kansas, Oklahoma, Texas, Nové Mexiko, Arizona, Kalifornia a Florida. Kliešte môžu migrovať až 8 km od svojho biotopu. Okrem O. turicata môžu vírus ASF prenášať aj chrastiace druhy kliešťov: O. puertoriceusis, O. tolaje, O. dugersi.

Stabilita vírusu v uhynutých kliešťoch, ako aj jeho rozmnožovanie a perzistencia u 70-75% kliešťov počas 13-15 mesiacov. Článkonožce získavajú vírus cicaním chorých zvierat v období virémie. Vírus sa množí v článkonožcoch, ktoré majú dlhú dobu perzistencie, a napokon ho roztoče prenášajú na zdravé ošípané pri kŕmení. ASFV bol izolovaný z koxálnej tekutiny, slín, exkrétov, malpighických ciev a genitálneho exsudátu z prirodzene a experimentálne infikovaných kliešťov, ako aj z vajíčok a nýmf prvého štádia infikovaných samíc. U tohto druhu kliešťa je teda možný transovariálny a transspermálny prenos vírusu. To prispieva k udržaniu a cirkulácii vírusu v populácii, a to aj pri absencii pravidelného kontaktu nosičov s infikovanými zvieratami. Agens stačí vniesť do populácie kliešťov raz a dôjde k jeho obehu bez ohľadu na kontakt tejto populácie s citlivými zvieratami v budúcnosti. Vzhľadom na dlhú životnosť kliešťov (10-12 rokov) môže ohnisko ochorenia, ak sa vyskytne, existovať nekonečne dlho. V oblastiach, kde k tomu došlo, sa možnosť eradikácie ASF javí ako pochybná.

Hlavná cesta rýchleho šírenia patogénu a vzniku nových ohnísk choroby je teda pravdepodobne alimentárna. Dýchacia cesta prispieva k jej šíreniu v rámci epizootického ohniska a prenosná cesta prispieva k vytváraniu perzistentných prirodzených ložísk. V dôsledku blízkeho biologického vzťahu medzi vírusom a argazidovými roztočmi môže existovať prirodzené ohnisko bez opätovného zavedenia vírusu na neurčitý čas. Hoci kmeň Malawi Lil20P (MAL) vírusu AHS bol izolovaný z kliešťov Ornithodorus sp., pokusy experimentálne infikovať tieto kliešte kŕmením kmeňa MAL boli neúspešné. 10 populácií kliešťov O. porcinus porcinus a jedna populácia kliešťov O. porcinus domesticus bolo kŕmených VALS MAL. 10 dní po infekcii obsahovalo ASFV menej ako 25 % kliešťov. U viac ako 90 % roztočov nebol VALS zistený 5 týždňov po inokulácii. Po orálnej inokulácii VAS MAL roztočom O. porcinus porcinus sa titer VALS po 4-6 týždňoch znížil 1000-násobne a dostal sa pod detekčný limit. Avšak po inokulácii VALS izolátu Pretoriuskop/90/4/l (Pr4) sa titer VALS zvýšil 10-násobne po 10 dňoch a 50-násobne po 14 dňoch. V strednom čreve kliešťov naočkovaných ASFV sa našla expresia skorých, ale nie neskorých vírusových génov a nebola pozorovaná žiadna syntéza ASFV DNA.

Virióny potomstva sú zriedkavo prítomné v kliešťoch po orálnej inokulácii VALS. Ak sú prítomné, sú spojené so silnou cytopatológiou fagocytárnych epitelových buniek stredného čreva (MEC). Pri parenterálnom podaní VALS MAL sa v hemokoeli vytvorí perzistentná infekcia, ale pozoruje sa oneskorená generalizácia MAL a jej titer vo väčšine tkanív je 10-1000-krát nižší ako po infekcii VALS Pr4. Ultraštrukturálna analýza ukázala, že MAL VALS sa replikuje v mnohých typoch buniek, ale nie v EXSC, a Rg4 VALS sa môže replikovať v EXSC. Replikácia MAL VALS je teda v ESC kliešťoch obmedzená.

ASF na Madagaskare bola potvrdená PCR a sekvenovaním nukleotidov po izolácii vírusu. Po inokulácii leukocytov nebola pozorovaná žiadna hemadsorpcia alebo CPE, ale vírusová replikácia v bunkách bola potvrdená pomocou PCR. Stanovenie vírusového genómu ASF sa uskutočnilo amplifikáciou vysoko premenenej oblasti kódujúcej proteín p72. 99,2 % identita sa našla medzi kmeňmi Maladasi a vírusom izolovaným v roku 1994 počas vypuknutia v Mazambike. Sérologické štúdie sa uskutočnili na 449 vzorkách séra, výsledkom čoho bolo zistenie, že v rokoch 1996 až 1999 bolo z ošípaných izolovaných iba 3-5 % sér. boli pozitívne.

V prírodných podmienkach sú domáce a divé ošípané choré na africký mor. U niektorých divých afrických ošípaných je toto ochorenie subklinické. Takéto zvieratá predstavujú veľké nebezpečenstvo pre ošípané kultúrnych plemien. V prírode existuje začarovaný kruh cirkulácie tohto vírusu medzi divými prasatami prenášajúcimi vírus a kliešťami (rod Ornithodorus). Vírus ASF je heterogénna populácia pozostávajúca z klonov s rôznymi biologickými charakteristikami, pokiaľ ide o GAD, virulenciu, infekčnosť, veľkosť plaku a vlastnosti antigénu. Virulencia izolátu je určená virulenciou dominantného klonu v populácii a nie množstvom zavedeného vírusu. Pasáž izolátov vírusu ASF u ošípaných a v bunkovej kultúre Vero môže viesť k zmene pomeru rôznych klonov vo vírusovej populácii a k ​​zmene všetkých jej charakteristík. Kultúrne a virulentné vlastnosti patogénu ASF sú modifikované počas prirodzeného priebehu epizoocie a počas experimentálnej selekcie. Kultúrne a virulentné vlastnosti vírusu ASF sú extrémne labilné: môže stratiť svoju schopnosť HA, znížiť svoju virulenciu až po úplnú stratu počas prirodzeného vývoja epizoocie a pri experimente pri pasážovaní v tkanivových kultúrach.

Imunita a špecifická profylaxia. Alergické alebo autoalergické reakcie zohrávajú významnú úlohu v patogenéze a imunogenéze ASF. Pôsobením oslabených vírusových kmeňov na lymfoidné bunky sa syntetizujú defektné AT, ktoré nie sú schopné neutralizovať vírus. Vytvárajú sa komplexy antigén-protilátka, ktoré sa koncentrujú v tkanivách cieľových orgánov, čo vedie k narušeniu ich funkcií a rozvoju alergických a autoimunitných procesov; pozorujú stimuláciu bunkovej imunity - lýzu infikovaných buniek senzibilizovanými lymfocytmi, uvoľňovanie mediátorov bunkovej imunity: lymfotoxínu, faktora inhibície migrácie blastickej transformácie a pod. Vývoj týchto procesov závisí od biologických vlastností použité kmene a jednotlivé charakteristiky organizmu (stav imunitného systému).

Určitú úlohu v patogenéze ochorenia zohráva interakcia vírusu s erytrocytmi a porušenie mechanizmu zrážania krvi. Účinok vírusu na bunky lymfoidného systému a erytrocyty je charakterizovaný ich deštrukciou alebo zmenou funkcie, ako aj rozvojom alergických a autoimunitných procesov.

Zvieratá, ktoré boli choré alebo očkované (inaktivovaným materiálom alebo oslabeným vírusom), majú určitý stupeň odolnosti voči homológnemu izolátu vírusu (oneskorenie úhynu ošípaných), zmena závažnosti klinických príznakov ochorenia, zotavenie a úplný nedostatok odpovede na kontrolu infekcie). Nedostatok špecifickej ochrany proti izolátom izolovaným v iných oblastiach naznačuje ich AH a imunologické rozdiely.

S. Anderson pozoroval dlhodobý prenos vírusu a jeho prihojenie po opätovnej infekcii u zotavených a očkovaných zvierat. Pasívna a kolostrálna imunita je slabo vyjadrená. AT dostatočne neneutralizuje vírus. Príčiny slabého imunitného napätia, ako aj neutralizačnej aktivity AT sú spojené so znakmi antigénnej štruktúry vírusu (blokovanie antigénu lipidmi, kompetícia alebo maskovanie ochranného antigénu druhovým antigénom vírusu resp. hostiteľ), ako aj so zmenou funkcie lymfoidných buniek - porušením interakcie vírusu a antigénu s makrofágmi a ich spolupráce s T- a B-lymfocytmi. Prvý predpoklad podporuje slabá alebo zmenená odpoveď na inaktivované antigénne liečivá u citlivých aj iných živočíšnych druhov. V podmienkach nízkej aktivity AT sú zosilnené bunkové imunitné odpovede, ktoré sú nevyhnutné na blokovanie infekcie a tiež spôsobujú rozvoj hypersenzitivity oneskoreného typu, alergické a autoimunitné komplikácie.

Proces ochrany pri ASF je prezentovaný ako dynamická rovnováha medzi etiologickými faktormi (vírus) a imunitnými obrannými mechanizmami. Môže byť prevládajúca v oboch smeroch, závisí to od vlastností aplikovaných kmeňov a stavu imunitného systému zvieraťa. Neexistujú žiadne spoľahlivé profylaktické lieky proti ASF. Nikomu sa nepodarilo získať inaktivované vakcíny proti ASF klasickými metódami s použitím moderných metód. Väčšina zaočkovaných zvierat uhynula pri kontrolnej infekcii a po dlhej chorobe prežila len nepatrná časť z nich. Výsledky testovania inaktivovanej vakcíny naznačujú, že pri anomálii imunity pri ASF má primárny význam štruktúra AG a ich vzájomná interakcia, a nie stav imunitného systému makroorganizmu.

Účinnejšie boli preparáty zo živého oslabeného vírusu, vyvolávali slabú postvakcinčnú reakciu, chránili 50-90% zaočkovaných zvierat pred infekciou homologickým vírusom. Najvýraznejšími nevýhodami živých vakcín je však dlhotrvajúce prenášanie vírusu po vakcinácii, vznik komplikácií u niektorých imúnnych zvierat, prihojenie virulentného vírusu u očkovaných zvierat bez klinických príznakov ochorenia, čo je nebezpečné aj v praktických podmienkach. Vzhľadom na tieto nedostatky bola spochybnená otázka použitia živých atenuovaných vakcín na elimináciu ohnísk ochorenia v kombinácii s inými veterinárnymi a sanitárnymi opatreniami.

Množstvo imunologických typov patogénu a existencia zmiešaných alebo modifikovaných vírusových populácií výrazne obmedzuje používanie takýchto liekov. Existujú však informácie o výbere účinných prostriedkov na liečbu chorých ošípaných a odstránení nosičov vírusu, ktoré možno použiť v kombinácii s oslabenými kmeňmi vírusu. Zborník zo stretnutia expertov ASF Európskeho hospodárskeho spoločenstva (1978-1987) a ďalšie správy načrtávajú vývoj vedeckého výskumu zameraného na vytvorenie komponentných, chemických a geneticky upravených vakcín. Za týmto účelom sa študuje jemná arteriálna štruktúra patogénu ASF a infikovaných buniek, štruktúra a funkcie genetického materiálu a pomocou moderných metód molekulárnej biológie, genetiky, mAb sa hľadajú ochranné antigény. Tieto smery môžu viesť k vývoju nových prístupov k vývoju účinných a neškodných vakcín proti ASF. Gén 9GL vírusu ASF je homológny s kvasinkovým génom ERV1 zapojeným do oxidatívnej fosforylácie a bunkového rastu a s génom ALV s hepatotrofnou frakciou.

Gén 9GL kóduje proteín so 119 zvyškami (I) a je vysoko konzervovaný vo všetkých študovaných terénnych izolátoch ASF. Ukázalo sa, že som neskorý proteín VASV. Mutant kmeňa MAL s deléciou génu 9GL (A9GL) sa množí 100-krát horšie v makrofágoch a vytvára malé plaky v porovnaní s rodičom MAL. I ovplyvňuje normálne dozrievanie viriónov: 90-99% viriónov v makrofágoch infikovaných mutantom A9GL má acentrické nukleoidné štruktúry. Úmrtnosť ošípaných je 100 % pri infekcii kmeňom MAL a pri infekcii mutantom A9GL všetky ošípané prežijú a majú dočasnú horúčku. Všetky ošípané infikované mutantom A9GL zostávajú klinicky normálne a ich titer virémie je znížený 100-10 000-krát. Všetky ošípané, ktoré boli predtým exponované mutantom A9GL, prežili následnú expozíciu letálnou dávkou ASFV MAL. Mutant A9GL sa teda môže použiť ako živá atenuovaná vakcína VALS.