Глутатион- според химичната структура е трипептид, който се получава в организма от цистеин, глутаминова киселина и глицин. Това е едно от доста често срещаните вещества в нашето тяло. Той действа като мощен антиоксидант и детоксикатор, като допълнително трансформира злокачествените клетки в здрави.

Повечето глутатион се намират в черния дроб (някои се освобождават директно в кръвния поток), както и в белите дробове и стомашно-чревния тракт. Необходим е за въглехидратния метаболизъм, а също така забавя стареенето, като повлиява липидния метаболизъм и предотвратява появата на атеросклероза. Концентрация глутатионв старите клетки тя е с 20-34% по-ниска, отколкото в младите. Тъй като нивото глутатионв тялото намалява с възрастта, натрупват се токсини, което може би причинява процеса на стареене като такъв.

Дефицитът на глутатион засяга предимно, причинявайки нарушена координация, мисловни процеси и тремор. Количеството глутатион в тялото намалява с възрастта. В тази връзка възрастните хора трябва да го получават допълнително. За предпочитане е обаче да се използват хранителни добавки, съдържащи цистеин, глутаминова киселина и глицин - тоест вещества, от които се синтезира глутатион. Най-ефективен е приемът на N-ацетилцистеин.

Като антиоксидант глутатион, естествено унищожава вредните свободни радикали и като детоксикатор помага за отстраняването на тежки метали и други токсини от тялото. Колкото повече токсини сте погълнали, толкова по-интензивно трябва да работи черният ви дроб, прочиствайки тялото. Глутатионпредпазва черния дроб от увреждане от алкохол и други токсини. Това твърдят редица изследвания глутатиондори способен да унищожи рак на черния дроб.

Авторът на книгата, отново твърди, че редовният прием глутатионможе да спре или значително да забави процеса на стареене. Авторът на превода отново настоява за периодичен прием.

И накрая, проучванията показват, че глутатионът осигурява подобрено мозъчно кръвообращение и снабдяване, което, съчетано със способността му да защитава мозъчните клетки от химическа атака, всъщност подобрява умствената функция.

Доскоро имаше само един начин за повишаване на нивото глутатионв тялото е приемането на глутатион. Сега можете да вземете N-ацетил цистеин,който е предшественикът ( Прекурсорите са вещества (междинни продукти), от които се получават всякакви крайни (целеви) вещества.) за две най-важни вещества за тялото наведнъж: глутатиони глутатион пероксидаза. Изследванията показват, че N-ацетил цистеинпо-ефективен източник глутатионотколкото себе си глутатион,защото повече от половината глутатионприет през устата се разрушава в храносмилателния тракт.

Проучване, публикувано в Proceedins of the National Academy of Science, посочва, че и двете глутатион, и N-ацетил цистеинимат мощен антивирусен ефект и са в състояние да блокират до 90% от разпространението на вируса на СПИН в организма. Антивирусният ефект е правопропорционален на приетата доза.

4,7 от 5

Ацетилцистеинът, известен също като N-ацетилцистеин или N-ацетил-L-цистеин, е муколитичен агент, предназначен да облекчи вискозни, гъсти храчки при редица респираторни състояния. Ацетилцистеинът се използва и като лечение на състояния, произтичащи от предозиране на парацетамол. В допълнение, веществото ацетилцистеин е част от капките за очи.

Химичната формула на ацетилцистеин е: C5H9NO3S. Това е кристален прах с бял или леко жълтеникав цвят със специфичен, фин мирис. Прахът е силно разтворим в алкохол и вода.

Лекарството се произвежда в много страни, в различни лекарствени форми:

• под формата на инжекционен разтвор;
• под формата на прах за приготвяне на разтвор за перорално приложение;
• под формата на ефервесцентни таблетки;
• под формата на разтвори за инхалация;
• под формата на очни разтвори.

В съответствие с формата на освобождаване, употребата на ацетилцистеин може да бъде интравенозна (инжекции), орална (вътрешна), локална (инхалация, капки за очи).

Прахове за приготвяне на перорални разтвори и ефервесцентни таблетки в повечето страни, включително Русия, се продават в аптеките без лекарско предписание. Препаратите за интравенозно приложение и инхалации се продават стриктно по рецепти.

Механизъм на действие на ацетилцистеин

Ацетилцистеин (или N-ацетилцистеин), поради наличието на сулфхидрилна група в неговата молекула, разцепва дисулфидните връзки, които свързват мукопротеини - протеини на слуз. Под въздействието на лекарството храчките стават по-малко плътни и се увеличават по обем, по-лесно се отхрачват. В резултат на увеличаване на обема на храчките и увеличаване на скоростта на отделянето им, ефектът на детоксикация се засилва, тъй като храчките съдържат значително количество токсични отпадъчни продукти на патогени.

Сулфхидрилната група на ацетилцистеина реагира с някои вътреклетъчни рецептори, стимулирайки производството на глутатион. Глутатионът, от своя страна, е в състояние да потисне определени реакции на липидно окисление, които водят до увреждане на клетките. По този начин ацетилцистеинът има и антиоксидантни свойства.

Лекарството се абсорбира бързо и добре в червата. Максималната му концентрация в кръвната плазма се наблюдава 2-4 часа след приема. Ацетилцистеинът се метаболизира главно в черния дроб.

Показания за употреба на ацетилцистеин

Най-широко използваните перорални форми на ацетилцистеин като муколитичен агентулесняване на отхрачването на храчките. Съгласно инструкциите, ацетилцистеинът се предписва за следните заболявания:

• остър и хроничен бронхит;
• трахеит от бактериален или вирусен произход;
• пневмония;
• бронхиектазии;
• ателектаза (спадане, загуба на въздух) на белия дроб;
• бронхиална астма;
• синузит;
• кистозна фиброза (като част от комплексното лечение).

Както е посочено в инструкциите, ацетилцистеинът е противопоказан в случай на свръхчувствителност на човек към това лекарство, с белодробно кървене и хемоптиза, с обостряне на пептична язва.

Относителни противопоказания за приемане на ацетилцистеин са функционална недостатъчност и тежко увреждане на черния дроб и бъбреците.

За деца в ранна детска възраст лекарството обикновено не се предписва.

Бременните жени се предписват на ацетилцистеин само ако ползата за майката значително надвишава риска от патологии на развитието на плода. По време на кърмене е разрешено приемането на ацетилцистеин.

Като странични ефекти рядко се отбелязват алергични реакции, гадене и повръщане, тежест в стомаха, стоматит и бронхоспазъм.

Дозировка на лекарството

Дозировката на лекарството се изчислява от лекаря индивидуално. Това отчита не само тежестта на клиничните прояви, но и възрастта и телесното тегло на пациента.

Има обаче обща схема, която изглежда така:

• деца на 1-2 години се предписват лекарството 100 mg 1 път на ден
• пациенти на възраст 2-6 години, съгласно инструкциите, ацетилцистеин се приема два пъти дневно, 200 mg;
• деца над 6-годишна възраст и възрастни приемат лекарството 2-3 пъти на ден, 200 mg.

При остри заболявания без усложнения продължителността на лечението обикновено е 5-7 дни. При хронични заболявания лекарството се приема продължително време, на курсове. Продължителността на курса на лечение се определя от лекаря.

Употреба на ацетилцистеин при други заболявания

При редица заболявания ацетилцистеинът или N-ацетилцистеинът се използва широко под формата на интравенозни инжекции.. N-ацетилцистеинът под формата на разтвори за интравенозно приложение успешно се използва за лечение на предозиране на парацетамол. В допълнение, лекарството се използва широко в психиатрията за лечение на различни видове психични разстройства, по-специално шизофрения, аутизъм, биполярно разстройство и различни мании. Също така, лекарството се използва при лечение на пристрастяване към определени лекарства и прекомерен хазарт.

N-ацетилцистеинът е ефективен при лечението на умерени и леки травматични мозъчни увреждания, мозъчни увреждания след исхемичен инсулт. В тези случаи лекарството трябва да се приложи възможно най-скоро след нараняване или диагностициране на инсулт.

Взаимодействие на ацетилцистеин с други лекарства

Ацетилцистеинът забавя абсорбцията на много антибиотици, така че това лекарство не трябва да се приема по-рано от 2 часа след приема на антибиотика.

Употребата на ацетилцистеин намалява токсичния ефект на парацетамола върху черния дроб.

Ацетилцистеинът засилва ефекта на бронходилататорите. И също така - съдоразширяващият ефект на нитроглицерина.

Фармакологична група: муколитични лекарства
Систематично (IUPAC) наименование: (2R)- 2-ацетамидо-3-сулфанилпроева киселина
Търговски наименования: Acetadote, Fluimucil, Mucomyst, Parvolex
Приложение: перорално, инжекционно, инхалационно
Бионаличност 4-10% (орално)
Свързване с протеини 80-83%
Метаболизъм: черен дроб
Полуживот 5,6 часа
Екскреция: бъбреци (22%), фекалии (3%)
Формула C5H9NO3S
Mol. тегло 163.195

Ацетилцистеин (ACC/Fluimucil), известен също като N-ацетилцистеин или N-ацетил-L-цистеин (NAC), е фармацевтично лекарство и хранителна добавка, използвана предимно като муколитичен агент и за лечение на ( ацетаминофен) предозиране. Лекарството се използва и за насищане със сулфат при заболявания като аутизъм, с изчерпване на нивата и свързаните със сяра съдържащи аминокиселини. Ацетилцистеинът е производно; ацетилова група, свързана с азотния атом. Това съединение се предлага на пазара като хранителна добавка, която според производителите действа като антиоксидант и защитник на черния дроб. Лекарството се използва като средство за потискане на кашлицата, тъй като разрушава дисулфидните връзки в слузта и я разрежда, което улеснява кашлицата. Разрушаването на дисулфидните връзки служи за разреждане на доставката на необичайно гъста слуз при пациенти с кистозна и белодробна фиброза. Известен също като: N-ацетил-L-цистеин, NAC, N-Ac
Приема се срещу:

Зависимости

Не е съвместим с:

Активен въглен (тъй като последният може да намали абсорбцията на N-ацетилцистеин)

Описание на действието на ацетилцистеин (ACC / Fluimucil)

Ацетилцистеин (ACC / Fluimucil) е производно на естествената N-ацетил аминокиселина. Веществото има много мощен и бързо действащ муколитичен ефект. Благодарение на свободните сулфхидрилни групи, ацетилцистеинът може да разцепи дисулфидните връзки в гликопротеиновата слуз с едновременното образуване на хидрофилни комплекси, което води до втечняване на образуването и намаляване на вискозитета на слузта в бронхиалните секрети. Ацетилцистеинът проявява антиоксидантен ефект чрез неутрализиране на свободните радикали във възпалени или хипоксични клетки. Ацетилцистеинът действа като антидот при отравяне или предозиране, тъй като инактивира токсичните метаболити и позволява да се поддържат правилни нива, предпазвайки черния дроб от увреждане. Ацетилцистеинът действа най-ефективно в рамките на 8 часа след отравяне или предозиране; обаче са описани случаи на ефективност на лекарството и в случай на отравяне с продължителност около 36 часа.Ацетилцистеинът се абсорбира добре от стомашно-чревния тракт, достигайки максимална концентрация в дихателните пътища след 0,5-3 часа.Метаболизира се главно в черния дроб и се екскретира в урината.

Медицински употреби на ацетилцистеин (ACC/Fluimucil)

Предозиране на парацетамол

Интравенозният ацетилцистеин се използва за лечение на предозиране (на ацетаминофен). Когато се приема в големи количества, второстепенен метаболит, наречен N-ацетил-пара-бензохинонимин (NAPQI), се натрупва в тялото. Обикновено се комбинира с, но при прекомерна употреба запасите в тялото са недостатъчни, за да инактивират токсичния NAPQI. Този метаболит може свободно да реагира с ключови чернодробни ензими, като по този начин уврежда хепатоцитите. Това може да доведе до сериозно увреждане на черния дроб и дори смърт от остра чернодробна недостатъчност. Ацетилцистеинът действа чрез увеличаване на телесните запаси и, заедно с това, директно свързване с токсични метаболити. Тези действия служат за защита на хепатоцитите в черния дроб от токсичността на NAPQI. Въпреки че ацетилцистеинът е еднакво ефективен, когато се прилага интравенозно или перорално, той може да не се понася добре, когато се приема перорално поради лоша орална бионаличност (тъй като са необходими много високи дози от лекарството), поради неговия много неприятен вкус и мирис и поради до странични ефекти, особено гадене и повръщане. В предишни проучвания върху фармакокинетиката на ацетилцистеин, ацетилирането не се счита за причина за ниската бионаличност на ацетилцистеин. Оралният ацетилцистеин е идентичен по отношение на бионаличността на прекурсорите. Въпреки това, 3% до 6% от хората, които приемат интравенозен ацетилцистеин, изпитват тежки алергични реакции, подобни на анафилаксия, които могат да включват затруднено дишане (поради бронхоспазъм), ниско кръвно налягане, обрив, ангиоедем и понякога гадене и повръщане. Повтарящите се дози интравенозен ацетилцистеин ще причинят прогресивно влошаване на тези алергични реакции. Проучванията показват, че тези подобни на анафилаксия реакции се появяват най-често при хора, приемащи интравенозен ацетилцистеин, въпреки че серумните нива не са достатъчно високи, за да се считат за токсични. В някои страни няма специални интравенозни формули за лечение на предозиране. В тези случаи лекарството за инхалация може да се използва интравенозно.

Муколитична терапия

Ацетилцистеинът се използва като инхалатор поради неговото муколитично действие (разтваряне на слуз) като адювант при респираторни заболявания с прекомерно производство на слуз. Такива заболявания включват емфизем, бронхит, туберкулоза, бронхиектазии, амилоидоза, пневмония, кистозна фиброза, хронична обструктивна белодробна болест и белодробна фиброза. Лекарството се използва и след операция, за извършване на диагностика и при лечение на пациенти с трахеотомия. Лекарството е неефективно при кистозна фиброза. Въпреки това, скорошна статия, публикувана в Proceedings of the National Academy of Sciences, съобщава, че високите перорални дози ацетилцистеин модулират възпалението при кистозна фиброза и че лекарството има потенциала да противодейства на редокс и възпалителния дисбаланс при кистозна фиброза. Оралният ацетилцистеин може също да се използва като муколитичен агент в по-леки случаи. Ацетилцистеинът действа чрез намаляване на вискозитета на слузта чрез разцепване на дисулфидни връзки, които свързват протеините, присъстващи в слузта (мукопротеини).

Нефропротективно лекарство

Орален ацетилцистеин се използва за предотвратяване на рентгеноконтрастна нефропатия (форма на остра бъбречна недостатъчност). Някои проучвания показват, че предварителното приложение на ацетилцистеин значително намалява рентгеноконтрастната нефропатия, докато други поставят под въпрос ефективността му. Беше направено заключението, че "N-ацетилцистеинът, прилаган интравенозно и перорално, може да предотврати нефропатия с дозозависим ефект при пациенти с първична ангиопластика и може да подобри изхода от заболяването." с минимални странични ефекти. Клинично проучване от 2010 г. обаче установи, че ацетилцистеинът е неефективен за предотвратяване на индуцирана от контраст нефропатия. Това проучване на 2308 пациенти установи, че ацетилцистеинът не превъзхожда плацебо; независимо дали е използван ацетилцистеин или плацебо, честотата на нефропатия е 13%. Ацетилцистеинът все още се използва широко при хора с бъбречна недостатъчност за предотвратяване на остра бъбречна недостатъчност.

Лечение на хеморагичен цистит, индуциран от циклофосфамид

Ацетилцистеинът се използва за лечение на индуциран от циклофосфамид хеморагичен цистит, въпреки че в този случай месна обикновено се предпочита, тъй като ацетилцистеинът може да намали ефективността на циклофосфамид.

Микробиологична употреба

Ацетилцистеинът може да се използва в метода на Петров, т.е. при втечняване и обеззаразяване на храчки, при подготовка за диагностика на туберкулоза. Той също така показва значителна антивирусна активност срещу вируси на грип А.

Колагенова белодробна болест

Ацетилцистеинът се използва при лечението на интерстициална белодробна болест, за да се предотврати прогресирането на болестта.

Психиатрия

Ацетилцистеинът успешно се използва за лечение на различни психиатрични разстройства. По-специално, той се използва за лечение на шизофрения, биполярно разстройство, трихотиломания, дерматиломания, аутизъм, обсесивно-компулсивно разстройство, пристрастяване към наркотици (включително никотин, канабис, метамфетамин, кокаин и др.) и пристрастяване към хазарта. Способността на ацетилцистеина да потиска р53-индуцираната апоптоза и да насърчава аутофагията може да бъде фактор за неговата ефективност при лечението на невропсихиатрични разстройства.

синдром на поликистозни яйчници

В малко проспективно проучване, сравняващо ацетилцистеин с метформин (което е стандартното лечение за PCOS), е показано, че и двете лечения водят до значително намаляване на индекса на телесна маса, хирзутизма, индекса HOMA, свободния тестостерон и менструалните нередности в сравнение с изходното ниво. и двете процедури бяха еднакво ефективни.

Черепно-мозъчна травма

Доказано е, че ацетилцистеинът е ефективен при лечението на леко до умерено травматично мозъчно увреждане, по-специално за намаляване на загубата на неврони и за намаляване на когнитивните и неврологични симптоми, когато се прилага веднага след нараняване.

Исхемия

Ацетилцистеинът намалява увреждането, свързано с исхемично мозъчно увреждане, когато се прилага малко след инсулт.

Механизъм на действие на ацетилцистеин (ACC / Fluimucil)

Ацетилцистеинът служи като пролекарство, което е биологичен антиоксидантен прекурсор и следователно употребата на ацетилцистеин се допълва. L-цистеинът също, от своя страна, служи като прекурсор на цистин и като субстрат за цистин-глутаматния антипортер в астроцитите, като по този начин увеличава освобождаването на глутамат в извънклетъчното пространство. Този глутамат от своя страна действа върху mGluR2/3 рецепторите, а при по-високи дози ацетилцистеин – върху mGluR5. също така модулира NMDA рецептора чрез действие върху редокс мястото. Ацетилцистеинът също има известна противовъзпалителна активност, вероятно чрез инхибиране на NF-kB и модулиране на синтеза на цитокини. Може също така да насърчи освобождаването на допамин в определени области на мозъка.

Комплексообразуващ реагент

Химия

Ацетилцистеинът е производно на N-ацетил | |аминокиселини]] и е предшественик при образуването на антиоксидант в тялото. Тиоловата (сулфхидрилна) група има антиоксидантен ефект и може да намали свободните радикали.

Източници и структура

биологично значение

Цистеинът е ограничаващият фактор в синтеза на глутатион.

Промяна и формулировка

N-ацетилцистеинът е подобен на L-цистеин (това е неговата ацетилирана форма) и на самия ензим глутатион (той е предшественик на синтеза на глутатион); са проведени проучвания за употребата на L-цистеин и глутатион като добавка. Глутатионът има ограничена терапевтична употреба, тъй като бързо се хидролизира в чревния тракт, така че повишаването на нивата на глутатион, когато се приема перорално като добавка, не е клинично значимо.

Фармакология

Серум

200-400 mg N-ацетилхолин достигат пикова концентрация от 350-400 μg / ml при Tmax - 1-2 часа.

Екскреция от тялото

До 70% от N-ацетилцистеин не се екскретира в урината. Основният бъбречен метаболит на N-ацетилцистеин, приеман перорално, е уринарният сулфат.

Биоакумулиране на минерали

При гризачи се наблюдава намаляване на тъканното натрупване и повишена екскреция на олово в урината. При хората е отбелязано намаляване на оловото в кръвта. N-ацетилцистеинът има хелатираща активност. Оловото е тежък минерал, който има токсичен ефект и блокира активността на глутатиона. Токсичният ефект на оловото зависи пряко от изчерпването на запасите от глутатион в клетките; това се дължи на високия афинитет на оловото към тиоловата група. Смята се, че цистеинът (чрез NAC) смекчава токсичните ефекти на оловото, като осигурява субстрат и намалява взаимодействието на оловото с тиоловите групи. В резултат на проучвания върху животни (на базата на кръвни биомаркери и хистологично изследване) е разкрит благоприятен ефект на N-ацетилцистеин срещу ефектите на оловото върху тъканите на бъбреците, мозъка и черния дроб. Смята се, че N-ацетилцистеинът смекчава токсичните ефекти на оловото, което има висок афинитет към тиоловите групи, които обикновено потискат концентрациите на глутатион в тялото; позицията на външните тиоли може да поддържа концентрацията на глутатион. Добавянето на 200-800 mg (400-800 mg доза, разделена на два дни) N-ацетилцистеин за 12 седмици от работници, които са силно изложени на олово, е в състояние да намали концентрациите на олово в кръвта с 4,72+/-7,08% (без доза- зависимост).открит). Еритроцитният липофусцин се намалява с 11% при приемане на N-ацетилцистеин (200-800 mg дневно за повече от 12 седмици). Но това е вторично за намаляване на токсичността на оловото (напречни връзки в резултат на оксидативен стрес и повишаване на липофуцина). Когато се приема перорално в стандартна доза, той е в състояние да има защитен ефект срещу оловна токсичност, вероятно намалявайки концентрацията на олово в тялото и последствията, причинени от него.

Неврология

Кинетика

N-ацетилцистеинът повишава концентрацията на глутатион в нервната тъкан на гризачи, когато се приема перорално, което предполага, че NAC може да премине кръвно-мозъчната бариера. При приемане на L-цистеин не се наблюдава такова увеличение на концентрацията на глутатион, тъй като ацетилирането на N-ацетилцистеин забавя неговия метаболизъм, смята се, че метаболизмът на първо преминаване ограничава разпределението на цистеин в тялото.

Глутаматергична невротрансмисия

Цистин-глутаматният антипорт в астроцитите медиира синаптичните нива на глутамат и също така поема цистин (цистеинов димер) в замяна на освобождаване на глутамат, което включва инхибиторни метаботропни глутаматни рецептори (група II) върху глутаматергичните нервни окончания и намалява последващото синаптично освобождаване на глутамат. Смята се, че приемът на N-ацетилцистиен осигурява субстратен отговор за намаляване на стимулацията на глутаматергичната система. При приемане на лекарства антипортът може да бъде намален и неговите функции са нарушени; N-ацетилцистинът може да спре спада, наблюдаван при лекарствата, и да спре авторегулацията на транспортера. Смята се, че цистеинът може да намали глутаматергичната невротрансмисия чрез намаляване на невронното освобождаване на глутамат в синапса (основното действие е да се насърчи освобождаването му от астроцитите). По време на изследването зависимите от кокаин приемали 2400 mg N-ацетилцистеин. Показанията, взети един час по-късно (чрез MRI и MRS), показват, че високите нива на глутамат при наркозависимите (което е по-високо, отколкото при здравите хора) се връщат към нормалното. Приемането на N-ацетилцистеин може да понижи нивата на глутамат (при хора с високи нива) един час след приема. Окисленият и редуциран глутатион е лиганд за NMDA и AMPA рецепторите. Те инхибират активността на лигандите на мястото на свързване на глутамат и също така повишават свързването на антагониста MK-801 (към NMDA рецепторите). Той засяга невротрансмисията на рецепторно ниво, намалява способността за сигнализиране на лигандите на глутаматното място за свързване, но увеличава свързването на антагониста MK-801.

Допаминергична невротрансмисия

Освобождаването на допамин от невроните се увеличава при наличие на ниска концентрация на N-ацетилцистеин, но висока концентрация на веществото (10 mmol) инхибира процеса. Това може да се дължи на начина, по който глутатионът повишава предизвиканото от глутамат освобождаване на допамин. Интравенозното приложение на N-ацетилцистеин забавя регулирането на допаминовите транспортери при маймуни, инжектирани с метамфетамин. 3.4. Стрес и безпокойство В някои случаи се съобщава, че N-ацетилцистеин има благоприятен ефект при тревожни разстройства. Например, в резултат на няколко казуси, е установен благоприятният ефект на веществото срещу гризане на нокти и дерматиломания.

Нервна възбудимост

Проведени са две проучвания върху пациенти с аутизъм. Отбелязано е, че възбудимостта, като симптом на аутизма, е значително намалена (в сравнение с ефекта на плацебо) при дневен прием на 900-2700 mg от веществото и стандартна терапия.

обсесивно състояние

Проведени са проучвания за употребата на N-ацетилцистеин за лечение на обсесивно-компулсивно разстройство, тъй като някои области на мозъка (nucleus accumbens и кората на ректалния цингуларен кортекс) показват подобен отговор при пристрастяване към наркотици и OCD, и приемането на N- Известно е, че ацетилцистеинът има благоприятен ефект върху пристрастяването към наркотици. Хората с ОКР имат повишена липидна пероксидация в мозъка, свързана с ниски нива на витамин Е в мозъка и намалена активност на антиоксидантните ензими (с изключение на повишени нива на супероксид дисмутаза). Тези оксидативни промени са пряко свързани с влошаването на симптомите. Приликите между пристрастяването към наркотици (доказани благоприятни ефекти) и OCD, както и прооксидативните свойства на OCD предполагат, че добавянето на N-ацетилцистеин може да има терапевтичен ефект. При миши модел на OCD е отбелязано, че интраабдоминалното приложение на 150 mg/kg N-ацетилцистеин е от полза (както е оценено чрез теста за вкопаване на балон), докато доза от 50-100 mg/kg е неефективна. Установено е също, че витамин Е е неефективен при всяка доза (10-100 mg/kg). Не е отбелязан адитивен ефект при употребата на N-ацетилцистеин и ниска доза от инхибитора на обратното захващане на серотонина флувоксамин. Отбелязва се благоприятен ефект на ацетилцистеина върху животни, а другият антиоксидант няма същия ефект. Проучването отбелязва, че зависимите от кокаин имат повишени нива на глутамат в мозъка и тези повишени нива на глутамат са свързани с импулсивност; N-ацетилцистеинът понижава нивото на глутамат, но в края на експеримента степента на импулсивност не е установена. Импулсивността е свързана с високи церебрални концентрации на глутамат. Беше проведено проучване на случай на пациент, рефрактерен на стандартна терапия със селективни инхибитори на обратното захващане на серотонина (SSRIs; наблюдавани в 20% от случаите). След дневен прием на 3000 мг N-ацетилцистеин терапията даде резултат. В последващо проучване 2400 mg N-ацетилцистеин дневно в продължение на 12 седмици при пациенти, рефрактерни на терапия със SSRI (и страдащи от OCD), повишават ефективността на терапията (повече от 35% по скалата на Yale Brown Obsessive-Compulsive Scale) от 15 % до 52.6%. Предварителните данни сочат, че N-ацетилцистеинът може да повиши ефикасността на терапията със SSRI за лечение на OCD, но не е известно дали N-ацетилцистеинът може да осигури такъв благоприятен ефект сам по себе си (тъй като е по-скоро адювант терапия, отколкото монотерапия). Друго заболяване, което е подобно по симптоми и лечение на ОКР (тъй като е нарушение на контрола на импулсите) е трихотиломания, скубане и изяждане на коса по главата или други части на тялото. Има много разновидности на това заболяване, някои от тях са подобни по симптоми и патология на OCD, някои на пристрастяване. Поради това се проучва използването на N-ацетилцистеин за лечение на това заболяване (тъй като има благоприятен ефект при лечението на OCD и пристрастяване). Казуси откриват благоприятни ефекти на N-ацетилцистеин при 1800 mg и 1200 mg дневно (в едно проучване) в продължение на 6 седмици, последвано от увеличаване на дозата (2400 mg). Приемът на веществото показва, че при хора, страдащи от трихотиломания, намаляват общите симптоми (с 31-45%, в зависимост от скалата за оценка), както и симптомите на съпътстващи заболявания, като тревожност (31% намаление) и депресия (34% намаление). %). Предварителните данни сочат, че N-ацетилцистеинът има благоприятен ефект при лечението на трихотиломания, вероятно поради ефективния му ефект върху лечението на пристрастяване и OCD (заболявания, сходни по патология с трихотиломания).

пристрастяване

В открито проучване тийнейджъри, които са признали, че са употребявали марихуана, са приемали 2400 mg (два пъти по 1200 mg) N-ацетилцистеин перорално в продължение на четири седмици. В резултат на това се наблюдава намаляване на симптомите на пристрастяване (според проучването), компулсивност и емоционалност, но не и тревожно очакване. Пристъпите на „жажда” за канабис намаляват с 25% (ефектът се наблюдава след 2 седмици и продължава след това), но нивото на канабиноидите в урината остава същото. Предварителните данни показват, че приемането на N-ацетилцистеин само леко намалява зависимостта от марихуана, показвайки ефект против пристрастяване. Тестването е извършено върху кокаинозависими, които се въздържат от употреба на наркотици (според синдрома на отнемане). През деня те приемат 2400 mg N-ацетилцистеин (600 mg на всеки 6 часа), в резултат на което се отбелязва, че два часа след първата доза (пикова концентрация на NAC в кръвта), желанието не намалява, но е по-малко след 14 часа, ефектът се запазва в рамките на 24 часа след последната доза от лекарственото вещество. N-ацетилцистеинът може да намали желанието за употреба на кокаин по време на абстиненция. В проучване при плъхове беше отбелязано, че самоприлагането на никотин за повече от 21 дни намалява експресията на GLT-1 и цистин-глутаматния антипорт в nucleus accumbens (префронталната кора и амигдалата не са засегнати). Резултатите от експеримента показват, че приемането на 2400 mg N-ацетилцистеин в продължение на 4 седмици при пушачи намалява честотата на пушене (в сравнение с плацебо) две седмици след приема. Приемът на никотин може да намали експресията на цистин-глутаматния антипорт и GLT-1, а приемът на N-ацетилцистеин може да има благоприятен ефект при лечението на никотинова зависимост (намалява броя на изпушените цигари, но не намалява желанието за пушене).

Въздействие върху сърдечно-съдовото здраве

Кръв

Ежедневният прием на 400-800 mg / kg N-ацетилцистеин в продължение на 12 седмици повишава концентрацията на глутатион в еритроцитите с 5-6%, в сравнение с контролната група, както и повишаване на активността на G6PD с 17% (според резултатите от проучване на всички групи).

Скелетна мускулна тъкан и физическо представяне

В резултат на приемането на N-ацетилцистеин в продължение на 6 дни преди интервалния спринт тест, който се провежда три пъти на ден, представянето на следващия ден остава същото, но веществото няма никакъв ефект върху изокинетичния тест ; това проучване е дублирано в Pubmed.

Умора

Приемането на 150 mg/kg N-ацетилцистеин (чрез инжектиране) преди повтарящи се пикови контракции на мускулите на прасеца не повлиява енергийната продукция в покой, но се увеличава с 15% спрямо контролата, което предполага ефект против умора. Резултатът е получен чрез ниски електрически импулси (10Hz), които въвеждат субектите в състояние на умора. Благоприятните ефекти на N-ацетилцистеин са отбелязани в теста за интервал на спринт, но не е открит ефект преди и след изокинетична динамометрия. Въпреки че N-ацетилцистеинът има благоприятни ефекти против умора, за постигане на такъв ефект са необходими големи дози и следователно инжекции; но дори и в този случай ефектът на веществото не е изразен.

Ефект върху окисляването

Глутатион

N-ацетилцистеинът действа като субстрат за глутатион. Глутатионът (GSH) отделя реактивни кислородни и азотни видове в процес, който превръща глутатиона (в глутатион дисулфид; GSSG), след което глутатион дисулфидът се редуцира до глутатион от ензимите глутатион-S-трансфераза (GTS). Антиоксидантният цикъл се повтаря, докато глутатионът се разгради от гама-глутамил трансфераза до свободни глутамати и глицин-цистеин дипептид. В крайна сметка свободните аминокиселини могат да се използват за регенериране на глутатион, първо с глутамат цистеин лигаза (за пресъздаване на дипептида) и след това със синтез на глутатион (за създаване на самия глутатион); първият етап е ограничаващ скоростта поради наличието на L-цистеин. Глутатионът участва в цикъла за блокиране на кислород- и азотсъдържащи радикали, след няколко цикъла се разлага. Глутатионът може лесно да се възстанови, но ограничаващият фактор тук е наличието на L-цистеин; приемането на N-ацетилцистеин позволява на L-цистеин да ускори ресинтезата.

супероксид

Супероксидът (O2-) е анион и свободен радикал, който се блокира от антиоксидантния ензим супероксид дисмутаза (SOD). N-ацетилцистеинът, подобно на цистеина и глутатиона, има относително бавна скорост на реакция in vitro за блокиране на O2-; освен това N-ацетилцистеинът проявява по-малко антиоксидантни свойства от глутатиона, което също е доста неефективно. N-ацетилцистеинът не показва защитен ефект срещу супероксиди нито директно, нито чрез глутатион.

Водороден прекис

Водородният пероксид (H2O2) е свободен радикал в тялото. Той директно взаимодейства бавно с N-ацетилцистеин in vitro. N-ацетилцистеинът не е обещаващ ловец на свободни радикали.

Хидроксилна група

Тиоловите антиоксиданти като глутатион и N-ацетилцистеин са доста добри в изчистването на хидроксилните радикали (OH-). N-ацетилцистеинът ефективно пречиства хидроксилните радикали (OH-) както директно, така и чрез производството на глутатион.

Хипохлорна киселина

Хипохлорната киселина (HClO) е окислител, получен от миелопероксидаза (MPO) след комбинацията от хлориден анион и водороден пероксид; Ензимът е най-активен в неутрофилите (вид имунна клетка) по време на окислителен взрив. N-ацетилцистеинът е доста мощен поглъщач на HOCl in vitro. N-ацетилцистеинът ефективно блокира хипохлорната киселина.

Възпаление и имунология

Левкоцити

Приложението на 200-800 mg N-ацетилцистеин в продължение на 12 седмици води до леко намаляване на активността на глутатион-S-трансферазата в левкоцитите при работници, изложени на олово.

Еозинофили

Приемът на 600 mg N-ацетилцистеин в продължение на 10 седмици намалява нивото на катионен еозинофилен протеин (който се освобождава, когато еозинофилите дегранулират) при индивиди с ХОББ.

Ефект върху органите

Стомах

Приемът на 600 mg N-ацетицистеин, в допълнение към стандартната терапия, повишава нивото на ерадикация при пациенти с инфекция с Helicobacter pylori, които също страдат от диспепсия (киселини), от 60,7% на 70%.

Черен дроб

За първи път се съобщава, че парацетамол намалява токсичността на парацетамол с N-ацетилцистеин през 1978 г., с перорално приложение на 7 g на всеки 216 минути (17 дози).

бъбреци

Добавянето на N-ацетилцистеин (100 mg/kg интраабдоминална инжекция) е в състояние да намали нивата на олово в кръвта и тъканите при плъхове (които са били предварително изложени на олово в продължение на 8 седмици), което води до по-малко увреждане на бъбреците.

Бели дробове

N-ацетилцистеинът проявява муколитични свойства при лица, страдащи от ХОББ. N-ацетилцистеинът намалява адхезията на имунните клетки, когато се приема ежедневно в продължение на 10 месеца като профилактичен агент, но е установено, че е неефективен, когато се приема в продължение на 8 седмици.

Други заболявания

Хронична обструктивна белодробна болест

е заболяване, свързано с ограничаване на въздушния поток. Заболяването не е напълно обратимо и е свързано с необичаен възпалителен и оксидативен отговор на стресови фактори, особено в белодробната тъкан. Продължават изследванията за благоприятните ефекти на ацетилцистеин при ХОББ, поради оксидативния и възпалителния характер на заболяването. При приемане на 600 mg N-ацетилцистеин два пъти на ден се наблюдава по-ниско ниво на водороден пероксид в издишания въздушен кондензат при лица, страдащи от ХОББ (с 22% след 15 дни, с 29% след месец и с 35% след два месеца). Това предполага по-ниски нива на оксидативен стрес в белодробните тъкани, особено от имунни клетки като активирани неутрофили и макрофаги. При приема на плацебо се наблюдава повишаване на H2O2, няма ефект върху белодробната функция. Намаляването на нивото на водороден пероксид може да бъде свързано с повишаване на активността на глутатион пероксидазата. Ежедневният прием на 600 mg N-ацетилцистеин в продължение на 10 месеца намалява адхезията на неутрофилите, докато приемът в продължение на 8 седмици е неефективен. Кортикостероидите имат обратен ефект, тъй като инхибират адхезията с 31% след 8 месеца употреба, но в крайна сметка увеличават адхезията след 10 месеца. Намаляването на адхезията може да бъде пряко свързано с повишаване на концентрацията на глутатион. Тъй като ежедневният прием на 600 mg N-ацетилцистеин намалява фактора на клетъчна адхезия ICAM-1 и IL-8, намаляването на тези два фактора е отрицателно свързано с повишаване на активността на глутатион пероксидазата. Краткосрочното приложение на N-ацетилцистеин може да причини промени в респираторните биомаркери, което предполага потискане на оксидативния стрес в белодробните тъкани. Това предполага възможността за терапевтично използване на N-ацетилцистеин при ХОББ. N-ацетилцистеин 600 mg два пъти дневно в продължение на 3 години (проучване BRONCUS) не намалява скоростта на влошаване на белодробната функция. Проучването BRONCUS отбелязва, че N-ацетилцистеинът не е защитен при приема на кортикостероиди. Това предполага, че адювантната терапия е била неефективна. Доказано е, че дългосрочната употреба на N-ацетилцистеин е полезна при лечението на ХОББ, но N-ацетилцистеинът няма адювантни свойства с кортикостероидите. Това предполага, че благоприятният ефект на кортикостероидите е подобен на този на N-acetylcysteine, но комбинацията от двете лекарства подобрява този ефект. Ежедневният прием на 600 mg N-ацетилцистеин за една седмица (едновременно с 40 mg преднизолон и 5 mg салбутамол) не разкрива никакъв ефект на N-ацетилцистеин върху белодробната функция или симптоми на задушаване при хора, страдащи от остър ХОББ. N-ацетилцистеинът е неефективен при лечението на остра ХОББ.

аутизъм

Свързва се с повишена скорост на окисление в мозъка, кръвта и урината. N-ацетилцистеинът има терапевтичен ефект при хора с аутизъм, тъй като това състояние се характеризира с ниски нива на глутатион в малкия мозък (34,2%) и темпоралната кора (44,6%) в сравнение със здрави хора. Аутизмът също се характеризира с генетични промени в пътя на глутатиона. В допълнение, повишените нива на глутамат не влияят значително на патологията на аутизма (глутаматните антагонисти облекчават симптомите на аутизъм при животни). Добавката с N-ацетилцистеин намалява повишените нива на глутамат (механизъм, който подчертава свойствата против пристрастяване). N-ацетилцистинът подобрява симптомите на аутизъм поради антиоксидантните си свойства, също така намалява прекомерните нива на глутамат в мозъка; както нивата на окисление, така и нивата на глутамат са необичайно повишени при аутистични индивиди в сравнение със здрави контроли. Казус демонстрира обещаващите ефекти на N-ацетилцистеин. В пилотно проучване (двойно-сляпо) за първите 4 седмици пациентите са приемали 900 mg N-ацетилцистеин дневно, удвоете дозата (1800 mg) за следващите 4 седмици, утройте дозата (2700 mg) за последните четири седмици. Установено е, че N-ацетилцистеинът е способен да намали чувството на възбудимост (измерено чрез теста за девиантно поведение) след 12 седмици при пациенти с аутизъм, но не повлиява нито една от мерките за социална отговорност по скалата за оценка ABC (SRS скала). или скала за изкривяване на реакцията (скала RBS). По-късно експериментът е възпроизведен при аутисти, лекувани с рисперидон. Ежедневният прием на 1200 g от веществото в продължение на 8 седмици допринесе за намаляване на чувството на възбуда само по скалата ABC. Предварителните данни сочат, че N-ацетилцистеинът може да намали чувството на възбуда при аутисти, особено когато са подложени на терапия. Но N-ацетилцистеинът не действа върху други симптоми.

Синдром на Sjögren

Едно проучване отбелязва, че приемането на N-ацетилцистеин подобрява очните симптоми на синдрома на Sjögren чрез намаляване на раздразнителността и сухотата на очите, както и намаляване на лошия дъх и жаждата.

Взаимодействия с хранителни вещества

Активен въглен

Отбелязано е, че N-ацетилцистеинът се свързва с въглен в червата (96%). В хода на проучванията е установено, че при съвместна консумация на 100 g активен въглен, абсорбцията на N-ацетилцистеин (140 mg / kg) е намалена с 39%, а пиковите нива на плазмена концентрация са намалени с 26. %. Това твърдение не е напълно подкрепено, тъй като има доказателства, че 60 g активен въглен не повлияват кинетиката на 140 mg/kg N-ацетилцистеин. Възможно е N-ацетилцистеинът да се свърже с активния въглен в червата (активният въглен се свързва с токсините и ги извежда от тялото). Следователно двете вещества не трябва да се използват заедно.

Етанол

Оксидативният стрес обикновено се измерва с нивото и активността на глутатиона. Едновременното приложение на N-ацетилцистеин и алкохол инхибира намаляването на нивата на глутатион, причинено от алкохола след 4 седмици и след шест месеца. Оксидативният стрес също засяга черния дроб, кръвта и мозъчната тъкан. Преди началото на експеримента, плъховете се инжектират с етилов алкохол, след което етилов алкохол се прилага заедно с N-ацетилцистеин. 15 дни след началото на приема на N-ацетилцистеин е отбелязан защитен ефект на веществото, тъй като е установено намаляване на оксидативния стрес в черния дроб. Но когато приемате N-ацетилцистеин след спиране на приема на етилов алкохол, защитният ефект е по-висок. N-ацетилцистеинът 30 минути преди дозата етанол показва защитен ефект, докато N-ацетилцистеинът 4 часа след дозата етанол влошава увреждането. Това проучване също отбелязва намаляване на степента на хистологично увреждане при мишки, които преди това са били третирани с N-ацетилцистеин. Предварителното приложение (30 минути) на N-ацетилцистеин преди поглъщането на етилов алкохол намалява степента на увреждане на черния дроб при гризачи, докато прилагането на N-ацетилцистеин 4 часа след поглъщането на етанол може да влоши увреждането, предизвикано от алкохола. Митохондриалната биогенеза при плъхове (измерена чрез активността на гена PGC-1α), усилена от етилов алкохол, се потиска от 1,7 g/kg N-ацетилцистеин, докато етиловият алкохол намалява структурната цялост и функцията на митохондриите, независимо от действието на N-ацетилцистеин. Проучване, оценяващо митохондриалната структура на чернодробната тъкан на плъх, установи, че добавянето на N-ацетилцистеин потиска индуцираната от етанол засилена митохондриална биогенеза, но вероятно не предпазва от други видове митохондриални увреждания; това се случва едновременно със стандартното намаляване на окислителното увреждане.

Ацетилцистеин (ACC / Fluimucil): инструкции за употреба

Показания за употреба

Остри и хронични бронхити и бронхиолити, бронхиектазии, кистозна фиброза, емфизем и други респираторни заболявания с обилно отделяне на гъста слуз или мукопурулентен секрет. В токсикологията се използва като антидот при предозиране. Използва се и за продължителна механична вентилация при лечение на дихателна недостатъчност, остър и хроничен синузит, ексудативен среден отит, както и при подготовка за бронхография.

Ацетилцистеин (ACC / Fluimucil): противопоказания

Свръхчувствителност към някоя от съставките на лекарството, тежък астматичен пристъп. Не използвайте или внимавайте, когато използвате лекарството при пациенти с активна пептична язва на стомаха и дванадесетопръстника. Трябва да се внимава и при пациенти в старческа възраст с тежка дихателна недостатъчност, астма или варици на хранопровода. Не трябва да се използва при пациенти с намалена отхрачваща способност при липса на дихателна физиотерапия. Големи дози ацетилцистеин като антидот могат да съкратят протромбиновото време, трябва да се следят коагулационните параметри. Миризмата на сяра не показва промяна в свойствата на лекарството и е типична за активните вещества, съдържащи се в лекарството.

Ацетилцистеин (ACC / Fluimucil): взаимодействие с други лекарства

Едновременната употреба на лекарства за кашлица може да бъде свързана със задържане на разредена слуз в бронхите. Едновременната употреба с нитроглицерин или нитрати повишава техния вазодилатиращ ефект и тромбоцитната агрегация. Не използвайте лекарството в рамките на два часа след приема на антибиотици, особено полусинтетични пеницилини, тетрациклини, цефалоспорини и аминогликозиди (при използване на ацетилцистеин като антидот, тези предпазни мерки не са необходими). Нищо не се знае за възможните взаимодействия на ацетилцистеин с амоксицилин, доксициклин, | еритромицин]], тиамфеникол и (ацетилцистеинът повишава проникването в бронхиалните секрети). Разтворите, съдържащи ацетилцистеин, не трябва да се смесват с други лекарства.

Странични ефекти на ацетилцистеин (ACC / Fluimucil)

Гадене, повръщане, киселини, диария, главоболие, шум в ушите, водниста секреция от носа, стоматит. Понякога алергичната реакция се проявява чрез кожна лезия под формата на сърбящ обрив. При прием на големи дози може да има разширяване на кръвоносните съдове и рязко зачервяване на лицето, както и прекомерно изтъняване на мукопурулентни секрети (особено при пациенти с неадекватен кашличен рефлекс). Много рядко в началния период на употреба на лекарството може да се наблюдава бронхоконстрикция, хиперсекреция на слуз и остра суха кашлица. В процеса на приемане на лекарството чрез вдишване може да се наблюдава бронхоспазъм и задух, особено при пациенти с астма. Свръхчувствителността към ацетилцистеин може да доведе до възпаление на лигавицата на устата и носа.

Инструкция за ацетилцистеин

Ацетилцистеинът е муколитично, отхрачващо и детоксикиращо лекарство. Всички тези ефекти се дължат на наличието в неговата химическа структура на свободна сулфхидрилна група, която разрушава дисулфидните връзки в мукополизахаридите на киселата храчка, намалява вискозитета на лигавичния секрет и инхибира полимеризацията на мукопротеините. Това лекарство едновременно разрежда вискозните храчки, като значително увеличава обема им (в някои случаи употребата му изисква използването на електрическо засмукване, за да се предотврати "наводняване" на белите дробове, особено при кърмачета). Освен това има активно стимулиращо действие върху клетките на лигавицата, повишава синтеза на глутатион и стимулира процесите на детоксикация. Противовъзпалителните свойства на ацетилцистеина се дължат на потискането на образуването на реактивни кислородни метаболити и свободни радикали, които причиняват развитието на остро и хронично възпаление в тъканите на белите дробове и дихателните пътища.

Когато се приема перорално, ацетилцистеинът се абсорбира добре, но бионаличността на това лекарство е доста ниска (10%), поради факта, че при преминаване през черния дроб се деацетилира (метаболизира) с последващо образуване на цистеин. Максималната концентрация на това лекарство в плазмата се достига в рамките на един до три часа, а свързването с плазмените протеини е 50%. Ацетилцистеинът се намира в амниотичната течност, което се свързва с доброто му проникване през плацентарната бариера. Това лекарство под формата на неактивни метаболити се екскретира главно чрез бъбреците (като диацетилцистеин и неорганични сулфати), а част се екскретира непроменена от червата.

Ацетилцистеинът се използва в терапевтичната, педиатричната практика и отоларингологията при заболявания на бронхобелодробната система и УНГ органи, които се характеризират със затруднено отделяне на храчки или лигавица (мукопурулентен секрет) поради изразен възпалителен процес за облекчаване на непродуктивна дразнеща кашлица, тънка. вискозен секрет и трансформира непродуктивна мокра кашлица, последвана от отхрачване на храчки.

Ацетилцистеин или неговите аналози се предписват за бронхит, трахеит, бронхиолит, ларинготрахеит, пневмония, бронхиектазия, бронхиална астма, кистозна фиброза и други вродени патологии на белите дробове и дихателните пътища. Като част от комплексната терапия на белодробен абсцес, интерстициални заболявания на бронхопулмоналната система, емфизем и ателектаза на белите дробове, които се характеризират с наличие на бронхиална обструкция поради наличието на лигавична запушалка. А също и при възпалителни заболявания в отоларингологията: катарален и гноен отит, синузит (синузит, фронтален синузит и етмоидит). Това лекарство се използва широко в следоперативни и посттравматични състояния за отстраняване на вискозни секрети от дихателните пътища.

Ацетилцистеинът е антидот на парацетамола и се използва при лекарствени отравяния и предозиране на парацетамол.

Аналози на ацетилцистеин

Аналозите на ацетилцистеин са препарати с основна активна съставка, която е ацетилцистеин: ACC, Fluimucil, Mukonex, Mukomist, Acestin, както и назален спрей Rinofluimucil, който съдържа ацетилцистеин и туаминохептан сулфат.

Противопоказания за приемане на ацетилцистеин и неговите аналози

Противопоказания за употребата на ацетилцистеин са:

• Заболявания на стомашно-чревния тракт, характеризиращи се с наличие на ерозии или язвени процеси в острата фаза (пептична язва на стомаха и / или дванадесетопръстника, болест на Crohn);
• наличието на хемоптиза и белодробно кървене в историята;
• свръхчувствителност към активното активно вещество (ацетилцистеин) или други спомагателни или формиращи компоненти на лекарството;
• кърмене и бременност;
• детска възраст: деца под две години не използват лекарството под формата на гранули за приготвяне на разтвор в доза от 100 mg и 200 mg, деца под шест години - ацетилцистеин под формата на гранули в доза от 200 mg и деца под четиринадесет години - лекарство в доза от 600 mg.

Внимателно и под постоянно динамично наблюдение на лекуващия лекар, това лекарство се предписва на пациенти с разширени вени на хранопровода, заболявания на надбъбречните жлези, бронхиална астма и чернодробна и / или бъбречна недостатъчност.

N-ацетилцистеин

N-Acetylcysteine ​​​​е синоним на името на лекарството Acetylcysteine, със съкратената форма на името ACC.

Ацетилцистеин за инхалация

В зависимост от формата на освобождаване, ацетилцистеинът се използва перорално (като разтвор, приготвен от гранули), парентерално (в / в, в / м), инхалация, локално или ендобронхиално. Дозовият режим е индивидуален и зависи от възрастта на пациента, нозологичната форма на заболяването и общото състояние на пациента.

Вдишване Ацетилцистеинът се предписва една ампула (300 mg) от един до два пъти на ден чрез пулверизатор или друго оборудване за инхалация (с изключение на парни влажни инхалатори) в продължение на пет до десет дни, с хроничен процес и кистозна фиброза, това лекарство може се предписват и по-дълги курсове.

Цена на ацетилцистеин

Средната цена на лекарството Ацетилцистеин или неговите аналози е 130-300 рубли, в зависимост от формата на освобождаване, производителя и дозата.

Отзиви за ацетилцистеин

Ацетилцистеинът се използва широко в клиничната практика като отхрачващо и противовъзпалително синтетично лекарство. В хода на клиничните проучвания вече са идентифицирани нови механизми на неговото фармакологично действие - антиоксидантните, глутатион-заместващите и детоксикиращите ефекти на N-AC. Този факт позволява да се предписва за лечение на интоксикации с различна етиология, по-специално при отравяне с ацетаминофен или соли на тежки метали (олово) при токсични реакции при прилагане на рентгеноконтрастни вещества и като адювант при химиотерапия. Ацетилцистеинът се използва и за профилактика и лечение на сърдечно-съдова патология (артериална хипертония и атеросклероза). Към днешна дата регистърът на клиничните изпитвания на СЗО изучава ефикасността на N-ацетилцистеин в сърдечната хирургия, лечението на индуцирана от контраст нефропатия, онкологични заболявания и захарен диабет.

Собствениците на патент RU 2549433:

Изобретението се отнася до метод за лечение на бозайник с ендометриоза. Този метод включва импулсно или интермитентно перорално приложение за 3-5 последователни дни, последвано от 2-4 дни почивка или за 1-3 последователни дни, последвано от 1-2 дни почивка на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, за период от поне два месеца. N-ацетил-L-цистеин при този метод се прилага в доза от 20 до 90 mg/kg/ден. Заявеният метод осигурява по-значим ефект върху симптомите на ендометриоза в сравнение с традиционното ежедневно приложение на N-ацетил-L-цистеин. 10 з.п. f-ly, 7 ил., 2 таблици, 3 pr.

ОБЛАСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Настоящото изобретение се отнася до фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, полезен при лечението на ендометриоза и показания, свързани с ендометриоза.

Ендометриозата е третата водеща причина за гинекологична хоспитализация в Съединените щати и засяга приблизително 14 милиона жени в Европа. Широко използваните нива на заболеваемост от ендометриоза включват 5-10% от всички жени в репродуктивна възраст и 30-40% от всички жени с проблеми с безплодието. Това е заболяване, характеризиращо се с наличието извън маточната кухина на тъкан, която е хистологично идентична с ендометриума, т.е. мембраната, която покрива вътрешността на матката на бозайниците. Тази необичайно разположена тъкан се развива в израстъци или лезии (наричани също импланти или възли), които реагират на менструалния цикъл по същия начин, по който го прави ендометриалната тъкан на матката: всеки месец тъканта расте, разпада се и се отделя. Докато менструалната кръв изтича от матката, кръвта и тъканта, отделени от ендометриалните израстъци, нямат изход. Това води до вътрешно кървене, разкъсване на кръвоносните съдове и тъкан от лезии и последващо хронично възпаление.

Двата най-чести симптома на ендометриозата са болка и безплодие. Симптомите могат да включват: дисменорея, която е болка преди или след менструален цикъл и болка по време на или след секс; хронична болка в таза или долната част на гърба и червата; обилна менструация или зацапване и кървене между менструациите; болезнени движения на червата или болезнено уриниране по време на менструални периоди; безплодие.

Причината за ендометриозата понастоящем е неизвестна и са предложени няколко теории, които оправдават ектопичната миграция и имплантирането на ендометриални клетки. Последните данни установяват връзка между появата на ендометриоза и промененото състояние на първоначалната тъкан: еутопичния ендометриум. Има нарастващо убеждение в областта, че неконтролираната миграция, имплантиране и растеж на ендометриоми възникват от нарушения в еутопичните ендометриални клетки.

Понастоящем няма лечение за ендометриоза. Има много възможности за лечение и има начини за минимизиране на симптомите, причинени от това състояние. С изключение на употребата на аналгетици за лечение на болката, лечението на ендометриозата е свързано главно с потискане на функцията на яйчниците при секрецията на естрогени и следователно хормонални лечения при различни субекти, до предизвикване на менопауза при повечето тежки случаи. хирургията се използва за отстраняване на ендометриоми, сраствания, перитонеални импланти и дълбоки лезии, разположени в ректовагиналната преграда или другаде (т.е. пикочен мехур, черва) и за облекчаване на болката. Въпреки това, рецидиви се появяват както след терапевтично, така и след хирургично лечение. Младите жени с ендометриоза често са изправени пред трудни решения относно бъдещата си репродукция. Хормоналните лечения, предназначени да потискат функцията на яйчниците, са несъвместими с бременността.

N-ацетил-L-цистеин (наричан по-долу NAC) е добре известно лекарство, което се използва главно като муколитичен агент и при лечение на отравяне с парацетамол. През последните години той беше признат и за други полезни свойства като противовъзпалителни и антипролиферативни ефекти и беше предложен за лечение на редица различни разстройства и симптоми като шизофрения, диабет и рак.

Предишни проучвания, изследващи молекулярните механизми, лежащи в основата и свързани с ендометриозата, предполагат, че повишените скорости на клетъчна пролиферация при ендометриоза може да бъдат предизвикани от оксидативен стрес в ендометриозната тъкан, причинен от свободни радикали или ROS (реактивни кислородни видове - реактивни кислородни видове). По този начин се предполага, че новите терапевтични стратегии за ендометриоза могат да се основават на антиоксиданти и акцептори на ROS като NAC.

ПРЕДШЕСТВО НА ТЕХНИКАТА

Шарлот Нго и др. предполагат (The American Journal of Pathology (2009), том 175, No. I, страници 225-234), че оксидативният стрес може да индуцира или засили пролиферацията на ендометриоидни клетки при ендометриоза. Следователно, антиоксиданти като NAC са предложени за лечение на ендометриоза. Проучвания в първични клетъчни линии от пациенти с ендометриоза, както и в миши модел, имплантиран с човешка ендометриоидна тъкан, показват, че NAC премахва признаците на оксидативен стрес, както и повишената пролиферация в съответните модели. По този начин се предполага, че антиоксиданти като NAC могат да се използват като безопасно и ефективно лечение на ендометриоза.

Nastaran Foyouzi и др. също предполага (Fertility and Sterility (2004), Vol. 82, Suppl. 3, pages 1019-1022), че антиоксиданти като NAC могат да се използват за лечение на ендометриоза. Статията описва in vitro проучване, при което клетки, изолирани от здрави субекти, както и пациенти с ендометриоза, са лекувани с друг антиоксидант, като NAC. Всички антиоксиданти инхибират пролиферацията на ендометриални стромални клетки.

В Yan Wo и Sun-Wei Guo (Gynecologic and Obstetric Investigation (2006), Vol.62, No. 4, pages 193-205; European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology, (2008), Vol.137, pages 198 -203); патентна заявка US 2007/0287676 A1) изследва ефекта на NAC върху пролиферацията и спирането на клетъчния цикъл в безсмъртни човешки ендометриални стромални клетки и в сравнение с други средства, предложени за лечение на ендометриоза. Доказано е, че NAC има ефект както върху пролиферацията, така и върху спирането на клетъчния цикъл, въпреки че не е толкова изразен, колкото инхибиторите на хистон деацетилазата.

В проучване на S. Estany и сътр. (Journal of Reproductive Immunology (2007), Vol. 75, pages 1-10) беше показано, че антиоксидантната активност на NAC и други антиоксидантни агенти върху ендометриални клетки в култура подобрява жизнеспособността на окислените клетки чрез предотвратяване на H 2 O 2 -индуцирани клетъчна цитотоксичност.

Друго свързано ниво на техниката включва US 2003/0190381 A1, WO 2004/096206 A2, US 6239137 B1, US 2003/0119875 A1, US 2004/0014672 A1 и WO 2005/048822 A2.

Друго предшестващо състояние на техниката, описващо молекулярното действие на NAC при лечението на рак, включва Т. Parasassi, et. ал. (Клетъчна смърт и диференциация (2005), том 12, номер 10, страници 1285-1296); Е. К. Красновска и др. ал. (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72) и A.C. Gustafsson et. ал. (BMC Cancer (2005), 5:75).

ОБЕКТИ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Клиничният резултат от лечението с NAC при ендометриоза, според изобретателите, не е определен в нивото на техниката, нито е предложен ефективен режим за лечение на ендометриоза или използването на NAC за лечение на показания, свързани с ендометриоза.

Следователно, основната цел на настоящото изобретение е да осигури решение на проблема за получаване на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин (NAC) за лечение на ендометриоза и свързани с ендометриоза показания при хора и бозайници. Един аспект на тази цел е да се осигури фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин (NAC) за използване в ефективен режим на дозиране за лечение на ендометриоза и симптоми, свързани с ендометриоза при бозайници, включително хора.

РЕЗЮМЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Предполага се, че NAC може да се използва в нови терапевтични стратегии за ендометриоза, базирани на употребата му като антиоксидант и поглъщащ ROS. Авторите на настоящото описание показват, че NAC индуцира молекулярни и клетъчни промени, които не само инхибират пролиферацията, но също така индуцират диференциацията на болната тъкан спрямо нормалната тъкан.

Тези открития накараха настоящите изобретатели да предложат нова рецепта за NAC при лечението на ендометриоза и свързани с ендометриоза индикации при пациент или бозайник. Освен това? предложен диапазон от ефективни дози NAC при лечението на ендометриоза. В едно изпълнение на настоящото изобретение, предписаният режим на лечение може да се използва, например, за контролиране на честотата и интензитета на симптомите на болка (дисменорея, диспареуния и ациклична хронична болка в таза), за намаляване на размера на ендометриозните лезии, които в крайна сметка изчезват , за намаляване на рецидивите след операция и/или за подобряване на оплождането. Странични ефекти от това лечение практически липсват и по-специално това лечение не предотвратява бременността.

Настоящото изобретение осигурява фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за използване при лечението на бозайник, включително човек с ендометриоза, където съставът е предназначен за импулсно или интермитентно перорално приложение за период от време два месеца или повече, N-ацетил-L-цистеин в доза от 20 до 90 mg/kg/ден на ден, когато се прилага.

В едно изпълнение на изобретението е осигурен фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за горната употреба, където съставът е предназначен да се прилага в продължение на 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дни почивка . В още едно друго изпълнение, фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, е предназначен да се прилага в продължение на 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дни почивка.

В едно изпълнение на изобретението е осигурен фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за горната употреба, където съставът е предназначен за прилагане на N-ацетил-L-цистеин в доза от 30 до 60 mg/kg/ден в деня на приложение. В още едно друго изпълнение, фармацевтичният състав е за приложение на N-ацетил-L-цистеин в доза от 30 до 45 mg/kg/ден в деня на приложение.

В едно изпълнение на изобретението е осигурен фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за употребата, описана по-горе, където фармацевтичният състав е защитен от светлина. В още едно друго изпълнение, фармацевтичният състав е водоразтворима таблетка. В още едно друго изпълнение, фармацевтичният състав съдържа натриев бикарбонат. В едно изпълнение, фармацевтичният състав е формулировка с бавно освобождаване и/или стомашен протектор.

В едно изпълнение, изобретението осигурява фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин за използване при лечението на болка, причинена от ендометриоза. В още едно друго изпълнение, фармацевтичният състав е за използване при лечението на безплодие, причинено от ендометриоза. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав е за използване при предварително лечение на бозайници с ендометриоза преди лапароскопия или операция. В едно изпълнение, фармацевтичният състав е за използване при лечението на бозайници с ендометриоза след лапароскопия или операция за предотвратяване на рецидив.

В един аспект на изобретението е осигурен метод за лечение на бозайник с ендометриоза, включващ перорално прилагане на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин на споменатия бозайник в импулсен или прекъсващ режим за период от два месеца или повече от N-ацетил-L-цистеин в доза, която варира от 20 до 90 mg/kg/ден на ден, когато се прилага. В едно изпълнение на метода, фармацевтичният състав се прилага в продължение на 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дни почивка. В още едно изпълнение, фармацевтичният състав се прилага в продължение на 1-3 последователни дни, последвано от 1-2 дни почивка.

В едно изпълнение на метода, дозата на N-ацетил-L-цистеин е 30 до 60 mg/kg/ден в деня на приложение. В още едно изпълнение на метода, дозата на N-ацетил-L-цистеин е 30 до 45 mg/kg/ден в деня на приложение.

В едно изпълнение, методът е за лечение на болка, причинена от ендометриоза. В други изпълнения, методът е за лечение на безплодие, дължащо се на ендометриоза, за предварително лечение на бозайници с ендометриоза преди лапароскопия или операция, или за лечение след лапароскопия или операция, за предотвратяване на рецидив на ендометриоидни лезии.

КРАТКО ОПИСАНИЕ НА ГРАФИКАТА

Настоящото изобретение ще бъде обяснено по-подробно в следващото описание, с позоваване на придружаващите чертежи, където:

Фигура 1 показва инхибиторния ефект на NAC върху растежа на ендометриоидни лезии при мишки, както е показано в Пример 1. Средно общо тегло на контролни (n=10) и третирани с NAC (n=10) животни, 21 дни след имплантирането, със стандартен грешка Значение стр<0,05. Во вставках над гистограммами воспроизведены типичные картины эндометриом для контроля (А) и обработки NAC (В). Полоска: 1 см;

Фигура 2А показва примерни полуколичествени RT-PCR (полимеразна верижна реакция в реално време) гелове, както е показано в Пример 1. Фигура 2В показва намалена експресия на СОХ-2 и ММР-9 в кисти на третирани с NAC мишки, както е показано в Пример 1 Полуколичествени RT-PCR стойности, осреднени от 5 контролни и 5 NAC-третирани мишки със стандартна грешка;

Фигура 3 показва транслокация на Е-кадхерин в кисти на мишки, третирани с NAC, както е показано в Пример 1. Представителни изображения на имунооцветяване с Е-кадхерин в ендометриоми от контролни (А и В) и мишки, третирани с NAC (С и D). В контролните проби може да се наблюдава дифузно кафеникаво оцветяване в цитоплазмата на епителните клетки, докато в проби, третирани с NAC, това оцветяване е ясно ограничено на нивото на клетъчно-клетъчните контакти. Увеличение на оригинала 40x;

4 показва атенюирано оцветяване с Cox-2 в кисти от животни, третирани с NAC, както е показано в Пример 1. Представителни изображения на имунохистохимично оцветяване на кисти от контролни мишки (A-C) и от мишки, третирани с NAC (D-F). В контролните проби се открива забележимо наличие на кафеникаво оцветяване в няколко области, докато то трудно може да бъде открито в пробите, третирани с NAC. Увеличение на оригинала 40x;

Фигура 5 показва отслабено оцветяване с Ki-67 в кисти на животни, третирани с NAC, както е показано в Пример 1. Представителни изображения на имунохистохимично оцветяване на кисти от контролни мишки (A-C) и мишки, третирани с NAC (D-F). Стрелките сочат към оцветени, пролифериращи клетки. Увеличение на оригинала 40x;

6 е схематично представяне на предшестващото състояние на техниката, демонстриращо няколко действащи механизма, когато пролифериращи клетки, които са илюстрирани с ракови клетки, се третират с NAC. Тези механизми се свеждат до крайна клетъчна диференциация. Примерите от настоящото описание също така показват, че поне някои от тези ефекти възникват също, ако NAC съгласно настоящото изобретение се използва за лечение на ендометриоза;

7 показва резултатите от предварително клинично проучване, проведено върху общо 64 жени, 33 третирани с NAC и 31 нелекувани контроли. Промяната в размера на кистата след три месеца лечение с NAC се измерва чрез ултразвук като максимален диаметър. Фигура показва промяната в размера на кистите в абсолютни числа при лекувани пациенти и контроли. 7B показва същото сравнение като процентна промяна.

ПОДРОБНО ОПИСАНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

NAC като цяло

N-ацетил-L-цистеин (NAC) е добре известно фармацевтично лекарство с малка молекула с химическа формула

Свойствата на NAC са свързани главно с неговата тиолова група, което го прави ефективен в повечето биохимични пътища, включващи трипептид глутатион (GSH), присъстващ във всички човешки тъкани при относително високи концентрации, дори над 10 mM. Цистеинът наистина е сред трите аминокиселини, съдържащи GSH, така че NAC се счита за прекурсор на GSH с неговия деацетилиран цистеин. NAC е бил и все още се използва широко като муколитичен агент, когато начинът на действие обикновено е свързан с редокс разграждането на чувствителни цистеин дисулфидни мостове в слузни протеини. Всъщност NAC участва в сложния редокс цикъл на тиоловите групи, където действат няколко ензима. Наистина, цикълът на образуване и разрушаване на дисулфида, общият механизъм, чрез който се регулира протеиновата активност и клетъчното сигнализиране, е от изключително физиологично значение. Ензими като протеинови тирозин фосфатази и тирозин кинази, например, играят ключова роля в контрола на клетъчния цикъл, клетъчната пролиферация и диференциация и много от тях се регулират от редокс състоянието на техните цистеини.

Като цяло, въпреки че подробните механизми на действие не са окончателно изяснени, NAC изглежда действа върху всички биохимични пътища, където е включен GSH. Ензимите и протеините, чиято активност се модулира от GSH, действат в няколко процеса, директно или чрез мрежа от сигнални пътища. В тази ситуация NAC може да действа подобно на GSH или може да бъде дори по-ефективен от GSH.

GSH, например, обикновено образува конюгати с реактивни метаболити, образувани от парацетамол, и насърчава тяхната детоксикация. Въпреки това, когато се приеме твърде много парацетамол, GSH се изчерпва и метаболитите на парацетамол започват да взаимодействат с клетъчните протеини, което в крайна сметка води до клетъчна смърт. При лечението на преходна чернодробна недостатъчност след отравяне с парацетамол, NAC действа вместо GSH при детоксикацията на метаболитите на парацетамол. Смята се, че NAC практически няма нежелани странични ефекти, както се посочва и от високите дози NAC, използвани при лечението на отравяне с парацетамол - вероятно около 40 g/ден за пациент с тегло 70 kg.

За разлика от трипептида GSH, който може да се разгради още в стомаха, простата молекула NAC дифундира свободно в почти всички тъкани и клетки. Фармакокинетичните проучвания на NAC са определили пикова плазмена концентрация, достигана за около един час, с елиминационен полуживот от приблизително три часа. Пълното освобождаване става между шест и дванадесет часа.

NAC като антипролиферативен, диференциращ агент

Наскоро изобретателите откриха, че N-ацетил-L-цистеин (NAC) има подчертан антипролиферативен ефект върху раковите клетки от епителен произход - същия произход като ендометриалните клетки (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296). Въпреки че ракът и ендометриозата са предимно несвързани заболявания, те споделят някои свойства, които в крайна сметка доведоха изобретателите до идеята, че NAC може да бъде полезен и при лечението на ендометриоза. По-специално, ендометриозата, подобно на рака, е пролиферативно заболяване, макар и с различен основен молекулярен механизъм и етиология. Наблюденията, получени за рак, ще бъдат представени в тази спецификация като предпоставка за ефектите на NAC и като вероятен начин на действие също и при ендометриоза.

NAC се използва за спиране на пролиферацията и индуциране на диференциация в две клетъчни линии на аденокарцином и в първични нормални кератиноцитни клетки, всички клетки от епителен произход. В тези системи диференциацията се характеризира морфологично, биохимично и чрез анализ на генната експресия (анализът на генната експресия е обстойно разгледан в BMC Cancer 2005, 5: 75).

В проучване за рак, антипролиферативният ефект на NAC не е свързан с клетъчна смърт или токсичност, а вместо това е резултат от активирането на път на физиологична диференциация, което може да се разглежда като нормализиране на клетъчните функции по отношение на тъканта на произход.

В допълнение към намалената пролиферация, морфологията на третираните с NAC ракови клетки също се променя. In vitro епителните клетки, когато активно се размножават, проявяват неправилна морфология - мезенхимна морфология - и често образуват няколко многоклетъчни слоя. Обратно, когато клетките претърпят процес на диференциация към структурата и функцията на крайната им целева тъкан, те спират да пролиферират, тяхната морфология става правилна многоъгълна, всяка клетка понякога е по-дебела и те образуват монослой от съседни клетки. Този процес е придружен от увеличени връзки клетка-клетка и клетка-субстрат, в съответствие с преминаването от пролифериращ мезенхимален към адхезивен, по-малко подвижен и диференциран фенотип.

Като цяло, сложна поредица от метаболитни промени бяха открити след добавянето на NAC към раковите клетки, всички от които доведоха до спиране на неконтролираната пролиферация и индуциране на тяхната крайна диференциация, както е изобразено на схемата, показана на Фиг.6.

Особено лечението с NAC индуцира значително увеличение на адхезионните комплекси клетка-клетка и клетка-субстрат.Неконтролираната пролиферация може да се отдаде на състояние, при което клетките са загубили контактното инхибиране и тяхната способност да реагират на сигнали за диференциация. Клетките, навлизащи в пътя на диференциация, показват значително увеличение на клетъчно-клетъчните свързващи комплекси и този процес обикновено се нарича контактно инхибиране. Някои доказателства сочат, че сигналите към клетките за навлизане в крайната точка на диференциация генерират компоненти на самите междуклетъчни комплекси. Тези връзки също са път за разпространение на сигнали между клетките.

Мигриращите клетки, като клетките на ендометриума при ендометриоза, трябва, освен че имат намалено количество адхезионни комплекси, да имат и секретират достатъчно активни матрични металопротеинази, ензими, предназначени да разграждат извънклетъчния матрикс, за да позволят миграция през извънклетъчния матрикс. в този модел на епителен рак беше установено, че NAC потиска този ензим, което предполага, че клетъчната миграция е забавена. Също така, Пример 1 от това разкритие наистина показва, че NAC, когато се използва съгласно настоящото изобретение за лечение на ендометриоза, потиска експресията на матриксна металопротеиназа 9 (ММР-9). Това предполага, че NAC може да повлияе на клетъчната миграция както от еутопичния ендометриум към нови импланти (предотвратяване на рецидив), така и в ендометриозната тъкан (предотвратяване на допълнителни лезии).

Известният ефект на NAC също е свързан с неговия противовъзпалителен ефект, причината за добавянето му към семейството на нестероидните противовъзпалителни лекарства (НСПВС). Профилът на генната експресия на третирани с NAC клетки наистина показва потискане на циклооксигеназа-2 (COX-2), чието индуциране е свързано с възпалителни реакции. Също така, този ефект на NAC беше потвърден в ендометриозна тъкан в Пример 1 на това разкритие, което показва, че NAC може също да облекчи симптомите, свързани с възпаление при ендометриоза.

Като пример за способността на NAC да модулира сигналната трансдукция в клетките чрез редокс-реагиращия статус на цистеините, ензимната нерецепторна тирозин киназа c-Src е изследвана в in vitro модел на карцином на дебелото черво (CaCo-2) и яйчник. карциномни (OVCAR-3) клетки (Free Radicals Biology and Medicine 2008, 45(11): 1566-72). c-Src участва в превключвателя на пролиферация/диференциация и е активен в сглобяването/разглобяването на свързаните комплекси и цитоскелетната организация. Тази киназа се регулира нагоре и се свръхекспресира при редица човешки ракови заболявания, особено при карциноми на дебелото черво и яйчниците. Значително международно усилие за разработване на лекарства наистина е насочено към намирането на специфични инхибитори на c-Src. Вместо това беше установено, че чрез просто третиране на аденокарциномни клетки с NAC, целта за потискане на c-Src може да бъде постигната чрез механизъм, свързан с редокс преходи в чувствителни цистеинови остатъци в c-Src, способен да "изключи" тази киназа , доставяйки го в ендолизозоми, където се съхранява или унищожава. По този начин, NAC, който индуцира терминална диференциация в аденокарциномни клетки, се свързва с понижаване на c-Src. Струва си да се отбележи, че активността на тази киназа изглежда важна по време на децидуалната фаза на ендометриалния клетъчен цикъл, което предполага, че нейната дерегулация е включена в ендометриозата (Endocrine Journal, 2008, 55(5): 795-810).

NAC и ендометриоза

Както беше обяснено в предишния раздел, по-рано беше предложено, че NAC може да се използва в нови терапевтични стратегии за ендометриоза, базирани на употребата му като антиоксидант и поглъщащ ROS. В проучванията за епителен рак, описани по-горе, настоящите изобретатели откриха, че NAC има някои полезни ефекти, различни от антиоксидантни и ROS акцепторни ефекти върху епителните ракови клетки, и че такива ефекти също биха били полезни при лечението на ендометриоидни клетки, ако ендометриоидните клетки реагират по подобен начин. По-специално, очакваше се, че антипролиферативните и диференциращите ефекти на NAC, открити при рак, могат също да се появят при употребата на NAC при лечението на ендометриоза.

Смята се, че ако NAC има следните молекулярни ефекти, наблюдавани при рак, също и върху ендометриоидната тъкан, той може да бъде полезен при лечението на ендометриоза;

1) увеличаване на връзките клетка-клетка и клетка-субстрат в съответствие с преминаването от пролифериращ към диференциран фенотип;

2) намаляване на експресията на матрични металопротеинази, свързано с намаляване на клетъчната миграция;

3) намалена експресия на циклооксигеназа-2 (COX-2), свързана с намален възпалителен отговор;

4) модулиране на активността на c-Src за регулиране на цикъла на ендометриална пролиферация/децидуализация и за насърчаване на възможна бременност.

Поради това се предполага, че NAC може да има следните физиологични ефекти при ендометриоза:

1) намаляване на пролиферацията на ендометриални клетки;

2) намаляване на локалното хронично възпаление и по този начин облекчаване на свързаната с него болка;

3) нормализиране на изходната тъкан, еутопичния ендометриум, чрез по-редовен цикъл на пролиферация-диференциация;

4) намален брой ектопични ендометриални клетки, свързани с намален клетъчен мотилитет, дължащ се както на намаляване на тъканните металопротеинази, така и на намалени връзки клетка-клетка и клетка-субстрат;

5) реорганизация на конформацията на естрогенните рецептори чрез повторно сглобяване на дисулфидни мостове в съответните цистеинови остатъци.

Като цяло, всички предполагаеми резултати бяха потвърдени пряко или косвено чрез отговора на пациентите в клиничното проучване и чрез хистологичен анализ на техните биопсии или, в животински модел, на ниво морфология, хистология, биохимия и молекулярна биология.

По-специално, изобретателите са открили, че NAC действително намалява експресията на циклооксигеназа-2 (СОХ-2) и матриксната металопротеиназа 9 (ММР-9) в ендометриоидната тъкан. Те също така демонстрират, че NAC индуцира релокализация на Е-кадхерин от цитоплазмата към ендометриозната тъкан при междуклетъчните връзки в тъканта, третирана с NAC. Това показва увеличаване на междуклетъчните връзки, което е в съответствие с намаляване на клетъчната пролиферация. Наистина, други ефекти като повишена експресия на p21 и намалена експресия на Ki-67 също показват, че лечението с NAC при ендометриоза води до намалена клетъчна пролиферация. Изобретателите също демонстрират, че тези молекулярни ефекти от NAC лечението на ендометриоза водят до намаляване на размера на ендометриозните лезии, облекчаване на болката и желана бременност. Предимство при използването на NAC за лечение на ендометриоза или индикации, свързани с ендометриоза, е, че не са необходими конвенционални хормонални лечения за ендометриоза, които потискат функцията на яйчниците. По този начин употребата на NAC сравнително увеличава вероятността тези пациентки да забременеят. Предоперативното лечение с NAC също доведе до по-правилни и компактни ендометриоми, които бяха по-лесни за отстраняване и причиниха много малко кървене по време на лапароскопия.

Схема за прием

От проучване за лечение с NAC върху аденокарциномни клетъчни линии и първични нормални кератиноцитни клетки (Cell Death and Differentiation 2005, 12(10): 1285-1296), беше направено заключението, че ефективната доза NAC за индуциране на антипролиферативен ефект на диференциация варира и зависи от тип клетка. По този начин произходът на тъканта диктува ефективната концентрация на NAC, която е необходима за пълно блокиране на пролиферацията, която трябва да се наблюдава, трябва да се определи за всяка тъкан. В допълнение, дозата на NAC също е свързана със злокачествеността на клетките. По-подробно, докато нормалните клетки изискват ниска доза, за да спрат пролиферацията и да започнат диференциация, карциномните клетки с характерна лоша прогноза изискват по-висока концентрация на NAC.

За целите на настоящото изобретение, режим на дозиране на NAC за лечение на ендометриоза при бозайник, включително хора, е проектиран въз основа на следните критерии:

1) доза NAC на ден, която е в съответствие с други настоящи клинични лечения и се счита за свободна от нежелани странични ефекти;

2) доза, която се счита за достатъчно висока, за да отговори на изискването за необичайно пролифериращи клетки, за да ги постави на пътя на диференциация;

3) като се има предвид докладваното понижение на плазмените нива на NAC след продължително лечение (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), прекъсване на лечението с приблизително половината от всяка седмица се счита за оптимален биологичен отговор на лечение за два месеца или повече.

Състав от настоящото изобретение, съдържащ NAC за лечение на ендометриоза или индикация, свързана с ендометриоза, съгласно едно изпълнение, трябва да се прилага в доза от около 20 до 90 mg/kg/ден. Долната граница се основава на двойно по-висока доза, използвана за муколитичен ефект, т.е. известно е, че има физиологичен ефект сам по себе си. Горната граница се основава на идеята, че е установено, че по-високите дози причиняват стомашни проблеми при много пациенти. В друго изпълнение на настоящото изобретение, съставът съдържа NAC за приложение в доза от приблизително 30-60 mg/kg/ден. Доказано е, че долната граница е ефективна при ендометриоза, а за горната е известно, че практически няма странични ефекти. В още едно изпълнение на настоящото изобретение, съставът съдържа NAC за приложение в доза от приблизително 30-45 mg/kg/ден. Изненадващо, тази ниска доза е доказано ефективна при ендометриоза.

В едно изпълнение, съставът трябва да се прилага за период от време, който е два месеца или повече, или за предпочитане три месеца или повече. За да се предотврати намаляване на нивото на NAC в плазмата след продължително лечение, е възможно да се прилага NAC в предписаната дозировка по интермитентен начин, т.е. според интермитентна схема на дозиране/лечение. Периодично приложение или лечение означава, че лечението се прекъсва за периоди, т.е. че фармацевтичният състав се прилага за период от време, като например няколко дни, последвано от прекъсване на прилагането, когато фармацевтичният състав не се прилага за период от време, като например като няколко дни. Периодичното лечение може да бъде редовно, като лечение за определен брой дни или седмици, последвано от почивка за определен брой дни или седмици. Примерите включват повторни режими с лечение в продължение на 4 дни, последвано от почивка от 3 дни всяка седмица, или лечение в продължение на 2 седмици, последвано от почивка от 1 седмица. Специален случай на редовно интермитентно лечение е импулсното лечение, т.е. редовното лечение и продължителността на паузата, като приложение през ден или приложение за два дни, последвано от два дни почивка и т.н. Също така са възможни нередовни интермитентни схеми на лечение, които се повтарят нередовно или имат по-сложен режим, който се повтаря, например в зависимост от отговора на лечението. В различни илюстративни изпълнения на настоящото изобретение предписаната доза NAC се прилага в продължение на 3-5 последователни дни, последвани от 2-4 дни почивка, или се прилага в продължение на 1-3 последователни дни, последвани от 1-2 дни почивка.

В едно изпълнение, по отношение на телесно тегло от приблизително 60 kg, дозата на NAC е в диапазона от 1.2 до 5.4 g/ден, за предпочитане 1.8 до 3.6 g/ден. Тази доза може да бъде разделена на две или повече, за предпочитане три или четири дневни приема на една или две дози (напр. хапчета) всяка, като всяка доза може да съдържа, например, 0,15-2,7 g NAC или за предпочитане 0,6-1,2 g NAC. Лечението включва прилагане на горните дози на импулси или интермитентно, например всеки втори ден или в продължение на три до четири последователни дни всяка седмица, с прекъсване съответно от четири до три дни. Минималната обща продължителност на лечението е от два месеца, при липса на максимална продължителност. При пациенти с друго тегло, като например лица с тегло повече или по-малко от указаното, дневната доза трябва да се коригира съответно.

В едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичен състав за лечение на ендометриоза или симптоми, свързани с ендометриоза, включва NAC в доза от 150-5400 mg, която се прилага в две или повече администрации на ден за период от най-малко 2 месеца, като поне 3 месеца. В предпочитано изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC в доза от 230-3600 mg за приложение в две или повече приема на ден за период от най-малко 2 месеца, като например поне 3 месеца. Лечението включва прилагане на горните дози на импулси или интермитентно, например всеки втори ден или в продължение на три до четири последователни дни всяка седмица с прекъсване съответно от четири до три дни.

Фармацевтични състави

Фармацевтичният състав съгласно настоящото изобретение може да бъде получен по начин, известен сам по себе си на специалиста във фармацевтичната област. Съставът може да съдържа ефективно количество NAC в съответствие с изобретението, както и подходящ носител или ексципиент, който служи като средство за доставяне или среда за активния ингредиент. Такива носители или ексципиенти са известни в областта и включват твърди вещества като лимонена киселина, натриев цитрат, натриев карбонат (киселина) плюс ароматизатор. Фармацевтичният състав е за предпочитане адаптиран за орално приложение. Такива състави могат да се прилагат в различни форми, понастоящем за предпочитане под формата на таблетки. Възможни са и други форми като капсули, супозитории, разтвори, суспензии, сиропи или други подобни.

Изобретението изисква строга оценка на фармацевтичното качество на NAC препарата, за да се получи ефективна доза. Следователно трябва да се използват марки или сертифицирани генерични лекарства. NAC не е стабилна молекула, неговият активен тиолов остатък може лесно да се окисли от кислород, светлина и друга радиация, така че може да не се достигне ефективна доза. Следователно препаратът е за предпочитане защитен от светлина, в разтворими таблетки, с натриев бикарбонат, който подпомага частичното отстраняване на кислорода от водата по време на разтварянето.

Наблюдавано е, че високите дози NAC могат да причинят коремна болка. За да се преодолее това, е възможно да се предложи NAC в стомашен защитен състав, подходящ за предотвратяване на освобождаването/разтворимостта на NAC в стомаха. Такива състави са добре известни в областта и могат да бъдат използвани в настоящото изобретение. Например, могат да се използват покрития на таблетки, които са устойчиви на стомашни течности и позволяват лекарството да бъде освободено само в червата, след като е преминало през стомаха. Обикновено използваните състави включват полимери като целулозни производни, съполимери на метакрилатни амино естери. Покритието предпазва сърцевината на таблетката от разграждане в киселата среда на стомаха чрез използване на pH чувствителен полимер, който набъбва или се разтваря след преминаване през стомаха в отговор на повишаване на pH за освобождаване на лекарството.

Друга възможност е да се намали дозата NAC, влизаща в кръвния поток едновременно. Въвеждането на NAC три или повече пъти на ден може да бъде трудно за пациента. Въпреки това може да е желателно многократно приложение, за да се постигне почти постоянна серумна концентрация на NAC. За да се преодолеят тези проблеми, прилагането веднъж или два пъти на ден, например сутрин и вечер, може да бъде по-лесно за пациента. Единият вариант е да се предложи NAC във формула с бавно освобождаване (наричана също продължително освобождаване или контролирано освобождаване). Такъв състав прави възможно прилагането на по-голяма доза на по-дълги интервали, тъй като е в състояние да намали скоростта на дифузия и поемане на NAC в кръвния поток. След това дозата се разпределя в кръвта за продължителен период от време в малки количества, например в рамките на 12+12 часа в случай на режим на прием два пъти дневно. Много различни технологии и състави за продължително освобождаване са отдавна известни в областта и могат да бъдат използвани в настоящото изобретение. При такива технологии активното вещество е, например, капсулирано в обвивка или матрица, която е неразтворима или по-малко разтворима в телесната течност, в която се прилага. Състави с комбиниран ефект на бавно освобождаване и защита на стомаха също са възможни и могат да бъдат използвани в настоящото изобретение.

Употреби/медицински показания на настоящото изобретение

Показано е, че настоящото изобретение е полезно в много аспекти, свързани с ендометриозата и може да се използва както за лечение на ендометриоза, така и за лечение на различни показания, свързани с ендометриоза. Под лечение на различни индикации, свързани с ендометриоза, разбирайте, например, лечение за облекчаване на симптоми на заболяването, като болка и възпаление; лечение за увеличаване на шанса за бременност; предварително лечение преди операция за улесняване на отстраняването на ендометриалните лезии и за подобряване на резултата от операцията; лечение след операция за предотвратяване на рецидив на лезии; и профилактично лечение при потвърдени, оценени рискови фактори или наличие на наследствена ендометриоза.

Показано е, че NAC от настоящото изобретение намалява размера на лезията и връща пролиферативната тъкан към по-диференцирана, нормална тъкан. По този начин, в едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за лечение на ендометриоза за намаляване - в крайна сметка изчезване - ендометриоми, сраствания, перитонеални импланти и дълбоки лезии, разположени в ректовагиналния септум или другаде.

NAC от настоящото изобретение също е показано, че облекчава симптомите на болка, причинена от ендометриоза. Така, в друго изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за облекчаване на болка, свързана с ендометриоза.

В още едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за предизвикване на желана бременност при пациент с ендометриоза.

В още едно изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за предварително третиране преди лапароскопия или операция в случаи на ендометриоза, за улесняване на масовото отстраняване, намаляване на кървенето, за да направи тъканите по-компактни/по-малко крехки.

В друго изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за предотвратяване на рецидив след лапароскопия или операция.

В друго изпълнение на настоящото изобретение, фармацевтичният състав съдържа NAC за използване в случай на потвърдени, оценени рискови фактори за превенция на ендометриоза, дължаща се на наследствено заболяване.

По-нататък изобретението ще бъде допълнително описано и илюстрирано с помощта на следващите примери. Трябва да се отбележи обаче, че тези примери не трябва да се тълкуват като ограничаващи изобретението по никакъв начин.

Пример 1 Ефект на NAC в миши модел на ендометриоза

Материали и методи

вещества. Освен ако не е отбелязано, всички химикали са от Sigma-Aldrich, Милано, Италия.

Животни. 36 женски BALB/C мишки на възраст 6-8 седмици бяха закупени от Charles River Italia (Calco, Италия). Пелети (обогатена стандартна диета; Mucedola, Милано, Италия) и вода бяха предоставени ad libitum. Животните се държат на 16/8 часов цикъл светлина/тъмнина при контролирани условия. Преди всяка инвазивна процедура, мишките бяха анестезирани чрез интраперитонеално инжектиране на 0, 4 ml физиологичен разтвор, съдържащ 2, 5% авертин.

предизвикване на ендометриоза. Индукцията на ендометриоза се извършва, като се следва методът, описан в Somigliana et al, Hum Reprod 1999 Dec;14(12):2944-50. Хирургичните интервенции са извършени при чисти условия. Накратко, маточните рога на сингенни мишки бяха отстранени през малък среден разрез в корема точно под пъпа и поставени в петриево блюдо, съдържащо фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS). Фрагменти от ендометриума бяха получени чрез фино раздробяване на маточните рога с помощта на бръснарско ножче. Фрагментите се суспендират в 0.6 ml PBS и бързо се инокулират в коремната кухина на реципиентните мишки в съотношение един донор към двама реципиенти. Мишки с индуцирана ендометриоза бяха разделени на случаен принцип в две групи от по 12 мишки всяка: контрола и лечение с NAC.

NAC обработка. Един ден след имплантирането на ендометриума на мишки от третираната група бяха подложени на хранене в епруветка със 100 μl от 10 mg/ml изходен разтвор на NAC във вода. Контролната група получава само вода. Въвеждането на NAC продължава ежедневно в продължение на 21 дни. Като се има предвид средно телесно тегло на мишка от 22,5±0,7, доза NAC от 1 mg/мишка съответства на 44 mg/kg/ден. Нямаше признаци на токсичност на дозата въз основа на телесното тегло - непроменено в края на лечението - във връзка с приема на храна, оформяне или нива на активност в сравнение с контролите. В края на лечението мишките бяха убити чрез изместване на шийните прешлени.

събиране на ендометриоми. В края на лечението, животните бяха умъртвени и ендометриоидните лезии бяха внимателно изрязани от околната тъкан и тяхното общо тегло и брой бяха оценени. Кистите или незабавно се фиксират в 10% формалин, или се замразяват в течен азот и се съхраняват при -80°C.

Хистология и имунохистохимия. Фиксирани с формалин проби се поставят в парафин и тъканни срезове (с дебелина 5 µm) се оцветяват с помощта на хематоксилин-еозин. Всички слайдове са оценени от опитен патолог, който е действал сляпо за изследването, а хистологичната диагноза на ендометриозата се основава на морфологичната идентификация на ендометриалната жлезиста тъкан и строма.

За имунохистохимия, срезовете бяха депарафинизирани и рехидратирани в марков етанол. За извличане на антиген, срезовете се подлагат на микровълнова фурна за 6 минути в 0.1 М цитратен буфер (рН 6.0) и ендогенната пероксидазна активност се блокира чрез инкубиране за 20 минути в 3% Н202/метанол. Срезовете се промиват в PBS/TritonX-100, потапят се за 15 минути в 1% PBS-говежди серумен албумин (BSA), за да се блокират неспецифични места на свързване, и след това се инкубират с избраното първично антитяло, разредено в 1% PBS-BSA. За имуноанализ на циклооксигеназа (COX)-2 (поликлонален от заек към мишка, Cayman Chemical, Милано, Италия), Ki-67 (поликлонален от заек към човек, Monosan Xtra, DBA Italia, Segrate, Италия) и Е-кадхерин (BD Biosciences, Милано, Италия) инкубацията се извършва една нощ при 4°C и разрежданията са съответно 1:100, 1:600, 1:200. Имунохистохимичното оцветяване беше продължено с помощта на DAKO Cytomation LSAB2 System-HRP (Dako Italia, Милано, Италия) и местата на свързване на антитяло бяха визуализирани със заешки анти-човешки стрептококинов разтвор на авидин-биотин пероксидазен комплекс поликлонални антитела, използвайки диаминобензидин като хромоген. Срезовете бяха насрещно оцветени с хематоксилин, дехидратирани, поставени в канадски балсам и след това прегледани под микроскоп Leica. Експресията на Ki-67 беше количествено определена на сляпо с двама независими наблюдатели; всеки наблюдател преброи най-малко 200 клетки в повече от 10 произволно избрани полета за всяка проба и Ki-67 индексът за маркиране беше изразен като процент.

Екстракция на РНК, полуколичествена RT-PCR (полимеразна верижна реакция с обратна транскрипция) и qRT-PCR (количествена RT-PCR). Общата РНК се изолира чрез лизиране на замразени ендометриални кисти с TissueLyser (QIAGEN, Милано, Италия), като се използва реагент Trizol (Invitrogen, Милано, Италия) съгласно инструкциите на производителя. Един микрограм от общата РНК от всяка проба се усвоява с 1 U DNase I (Invitrogen) и се транскрибира обратно с 200 U Superscript III обратна транскриптаза (Invitrogen), като се използват 250 ng произволно избрани праймери в краен обем от 20 µl. Същият cDNA продукт, получен от всяка проба, се използва за последваща PCR амплификация с набори от праймери, получени за целевите гени. Конститутивният 18S РНК ген се използва като вътрешен контрол. Отрицателните контролни проби се състоят от реакционната смес и праймери без cDNA шаблон. Праймерни последователности (Таблица 1) бяха генерирани с помощта на софтуера Primer-BLAST, достъпен онлайн на: http://www.ncdi.nlm.nih.gov/

Първо, съотношението между пробата и конститутивния ген беше изчислено чрез синхронна амплификация на ген-специфична иРНК и 18S РНК в една реакционна епруветка. Тъй като тази процедура не беше успешна за всички проби - може би поради сравнително малкия брой специфични транскрипти и по този начин преференциалното усилване на 18S mRNA - за да се предотвратят количествени неточности в резултат на конкурентни ефекти, целевите гени и 18S cDNA, създадени в едно и същата RT реакция се усилва в отделни епруветки. За да се документира експоненциална амплификация, беше генерирана графика на амплификация за 18S РНК и беше избран подходящият брой цикли. Полуколичествена PCR се извършва в 25 μl реакционен обем с 1 μl cDNA, 2 mM MgCl2, 0.2 mM dNTP, 0.5 μM всеки праймер и 1.25 U Hotstart Taq полимераза (QIAGEN). PCR амплификацията се извършва с помощта на iCycler (Bio-Rad, Милано, Италия). След това PCR продуктите се разделят електрофоретично върху 1.5% агарозен гел и се оцветяват с етидиев бромид. Целевите нива на mRNA бяха оценени чрез денситометрично сканиране и нормализирани спрямо контроли, заредени с 18S. Денситометрични анализи на PCR продукти бяха извършени с помощта на софтуер за изображения Quantity One (VersaDOC, Bio-Rad).

маса 1
Праймерна последователност, използвайте за полуколичествена qRT-PCR
Целева иРНК	Грундове	Последователност	Отгряване (за 30 секунди)	Брой цикли	PCR продукт (bp)
18S РНК NR_003278.1	директен реверс	CGCGGTTCTATTTTGTTGGT	60°C	18-24	219
AGTCGGCATCGTTTATGGTC
СОХ-2 NM_011198.3	директен реверс	CCCCCACAGTCAAAGACACT	60°C	35	196
AGTTGCTCATCACCCCACTC
ММР-9 NM_013599.2	директен реверс	TGAATCAGCTGGCTTTTGTG	60°C	35	242
GTGGATAGCTCGGTGGTGTT
P21 (cdknla) NM_007669.4	директен реверс	TCCACAGCGATATCCAGACA	60°C	35	196
ACGAAGTCAAAGTTCCACCG

резултати

Ефект от лечението с NAC върху растежа на ендометриозните лезии. Двадесет и един дни след индуцирането на ендометриоза, всички експериментални мишки бяха умъртвени и техните ендометриоми бяха отстранени и събрани. От 12-те контролни мишки една умря и една не разви ендометриоми. От 12 мишки, третирани с NAC, две не са развили ендометриоми. Морфологично ектопичните лезии са големи, кистозни и васкуларизирани: те се състоят от пълни с течност кисти, които са или бели, червени или понякога кафяви на цвят и са локализирани за предпочитане в перитонеума на коремно-тазовата кухина. Във вмъкванията на Фигура 1.1 представяме представителни изображения на кисти от контролни (A) и третирани с NAC (B) животни. Средно се наблюдава значително намаление на теглото в групата на лечение (n=10) в сравнение с контролите (n=10) (Фигура 1).

NAC намалява експресията на COX-2 и MMP-9 и спира пролиферацията. RT-PCR анализът показа, че в сравнение с кисти от контролни мишки (n=5), лечението с NAC (n=5) предизвиква значително намаляване на нивата на mRNA на COX-2 (-32%) и MMP-9 (-34%) , ко значение p<0,01, которые нормализовали к экспрессии 18S (Фиг.2А и В). Ген Р21, обычно экспрессирующийся только, когда цикл пролиферации блокирован, ни разу не экспрессировался в 5 контролях, хотя он экспрессировался в 3 из 5 изучаемых NAC-обработанных образцах (типичный пример на Фиг.2А).

NAC задвижва преместването на E-cadherin. Имунохистохимичното откриване на Е-кадхерин е положително в 100% от изследваните случаи. Етикетирането е ограничено до жлезисти епителни клетки, докато никоя от пробите не показва стромално оцветяване. На клетъчно ниво, в кисти на контролни мишки, изобретателите откриха, че оцветяването с Е-кадхерин е разпръснато в клетъчната цитоплазма, докато в кисти на мишки, третирани с NAC, Е-кадхеринът се открива главно по протежение на междуклетъчните връзки (Фигура 3). Е-кадхеринът е част от мултипротеинов адхезивен комплекс; следователно повишеното му присъствие в клетъчните граници показва увеличаване на междуклетъчните адхезии. Освен това и в съответствие с експресията на Р21, описана по-горе, това преместване е в съответствие със загубата на пролиферативно поведение в клетки, преминали към крайна диференциация (Conacci-Sorrell et al, J. Clin. Invest. 2002, 109: 987-991; Parasassi et al, Cell Death Differ 2005, 12: 1285-1296).

Лечението с NAC намалява количеството на Cox-2 в ендометриомите. Имунохистохимичното откриване на свързания с възпалението Cox-2 протеин показва, че в сравнение с кисти от контролни мишки, пробите, събрани от мишки, третирани с NAC, показват доста слабо оцветяване, което в някои случаи напълно липсва (Фигура 4).

NAC намалява броя на пролифериращите клетки. Антигенът Ki-67 (Ki-67) е класически маркер за клетъчна пролиферация в неподвижни клетки във фаза на покой, при които напълно липсва експресия на Ki-67. Когато се използват за оцветяване на кистите на контролни мишки, могат да бъдат открити няколко белязани клетки (стрелки в панели A-C на Фигура 5). Вместо това, много малко маркирани клетки бяха открити в кистите на мишки, третирани с NAC (стрелки в панели D-F на фигура 5). Статистическата оценка, извършена върху 8 животни във всяка група (10 изображения/200 миши клетки), осигурява 54% намаление на пролифериращите клетки (Таблица II).

Дискусия

Животински модел на ендометриоза е ефективен при предизвикване на ектопични ендометриални импланти. Само едно животно в контролата и две в групата, лекувана с NAC, не са имали ендометриоми.

Както се очаква, масата - пропорционално на размера - на кистите е по-ниска при мишки, третирани с NAC. Това може да се обясни с антипролиферативния ефект на NAC (Parasassi et al, Cell Death Differ. 2005, 12: 1285-1296), който е широко илюстриран тук чрез анализ на генна експресия и имунохистохимия. В действителност, P21, ген, експресиран само в диференциращи, непролифериращи клетки, се наблюдава при 60% от животните, третирани с NAC, докато не се експресира в контролите. Обратно, протеинът Ki-67, който се експресира само в пролифериращи клетки, показва 54% намаление при третираните с NAC мишки в сравнение с контролните мишки.

Съответните протеини в ендометриозата като MMP-9 (Collette et al., Hum Reprod 2006; 21:3059-3067) и Cox-2 (Carli et al, Endocrinology 2009; 150: 3128-3137) показват намаление след лечение с NAC. MMP-9 се счита за основен за движението на клетките и инвазивното поведение, докато Cox-2 е учебникарски ензим, свързан с възпаление. И двата свързани гена показват намаление от около 30% след лечение с NAC. В допълнение, количеството на Cox-2 също беше изследвано чрез хистохимично оцветяване в кистите и резултатите показаха съответно отслабване на оцветяването.

Въз основа на широко приетата концепция, която разглежда цитоплазмения Е-кадхерин като маркер за клетъчно пролиферативно поведение, докато неговото присъствие в междуклетъчния адхезивен комплекс, напротив, се счита както за маркер, така и за индуктор на диференциация, изобретателите също изследват локализирането на Е-кадхерин в кисти на контролни и третирани с NAC мишки. Резултатите са в пълно съгласие с предишни данни, получени от изобретателите за аденокарциномни клетки (Parasassi et al., Cell Death Differ. 2005,12: 1285-1296), показващи движението на Е-кадхерин от клетъчната цитоплазма към клетъчните граници след лечение с NAC. Тази връзка на Е-кадхерин с адхезионния комплекс също е в съответствие с по-малко мобилно, по-малко инвазивно клетъчно поведение.

В заключение, във всички взети предвид аспекти NAC може да представлява оптимално лечение за ендометриоза. Когато се прехвърля към лечението на жени, това лекарство има значително предимство, тъй като практически няма странични ефекти в сравнение с големината на неблагоприятните ефекти при хормонално лечение. Следователно NAC може да се използва за намаляване на размера на кистите, за намаляване на локалното възпаление и свързаната с него хронична болка и за намаляване на рецидивите след операция. Тази последна точка се дължи на намалената пролиферация и намалената клетъчна подвижност.

Пример 2 Предварително клинично изследване на ефекта на NAC при лечението на ендометриоза.

Цел на изследването. Това пилотно клинично изпитване е предназначено за лечение на жени с ендометриоза, използвайки NAC вместо други лечения. Единственото възможно допълнително лечение бяха аналгетиците за облекчаване на болката, когато е необходимо.

Критерии за включване на пациента. В това проучване са включени жени с първоначална диагноза ендометриоза въз основа на болка и потвърждение на заболяването чрез ултрасонография на яйчниците и пациенти с рецидив на болка и/или ендометриома на яйчниците след лапароскопско лечение.

Преди лечението интензитетът на болковите симптоми се измерва с помощта на 10-точкова визуална аналогова скала (VAS) и характеристиките на овариалните ендометриоми чрез трансвагинален ултразвук. По време на лечението с NAC други лечения бяха изключени, с изключение на аналгетик за овладяване на болката, когато е необходимо.

пациенти. От февруари 2008 г. до юли 2010 г. в проучването са включени 64 жени на средна възраст 35±7 години (±SD) с диагностицирана овариална ендометриоза, на 33 от които е предписано лечение с NAC (средна възраст: 37±6 години), докато и двамата 31 не са следвали NAC- или друго лечение и се считат за контроли (средна възраст: 33±8 години). Всички те са имали една или повече кисти в единия или двата яйчника.

Лечение. Предписаната доза NAC е близка до тази, използвана в изследването с животни, 30 mg/kg/ден. На практика при средно телесно тегло от 60 kg на всички регистрирани пациенти са предписани три перорални дози от 600 mg NAC три пъти дневно в продължение на три последователни дни всяка седмица с четири дни почивка. Резултатът беше 1,8 g NAC на ден, 5,4 g на седмица, 21,6 g на месец. Тези прецизни лечения се основават на следните съображения: 1) доза от 1,8 g NAC на ден е в съгласие с други текущи клинични лечения и се счита, че няма нежелани странични ефекти; 2) установени фармакокинетични параметри на NAC, три дневни дози от 0,6 mg се доближават до почти постоянни плазмени нива без дискомфорт за пациентите по време на комплексното лечение; 3) установено докладвано понижение на плазмените нива на NAC след продължително лечение (Pendyala L, Creaven PJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 1995; 4:245-51), спирането на лечението за около половината от всяка седмица осигурява оптимален биологичен отговор в дългосрочен план лечение, например два до шест месеца или повече.

контрол. Интензитетът на болковите симптоми (VAS скала за болка) и размерът на ендометриомите на яйчниците (клиничен и УЗ преглед) бяха оценени след първите три месеца от лечението. При необходимост се извършва лапароскопско лечение след 3 месеца.

резултати

Данните след първия тримесечен период на проследяване са описани по-долу.

Промяната в размера на кистата (непроменена, уголемена или намалена) след три месеца лечение с NAC, измерена с ултразвук като максимален диаметър, е показана на Фигура 7A (абсолютен брой кисти) и Фигура 7B (процент на кисти). Цифрите показват сравнение на кисти при пациенти, лекувани с NAC, и кисти при нелекувани контроли. В проценти (Фигура 7B), намаляването на размера на кистата се наблюдава в 38% от случаите, докато при контролите само по-малко от 10% от случаите показват спонтанно намаление. Като се има предвид намаляването на размера на ендометриомите, няколко (21 от 33) пациентки решиха да отменят или отложат планираната си лапароскопия.

Болката след лечение с NAC също се промени. Болката се оценява преди и след тримесечно лечение по 10-точкова визуална аналогова скала (VAS), където нула представлява липса на болка, а 10 представлява най-лошата болка, която можете да си представите. Интензитетът на симптомите е класифициран като липсващ (0), лек (1-4), умерен (5-7) или тежък (8-10). Пациентите, лекувани с NAC, съобщават за средно намаляване на болката от 7,6±0,3 до 5,1±0,8 (p<0,01) после трех месяцев лечения.

Не са докладвани вредни странични ефекти.

Въпреки че изобретателите не са оценили дали пациентите желаят бременност и следователно не могат да характеризират статистическата значимост на констатациите, изобретателите също съобщават за три бременности, очевидно невъзможни с използваните в момента терапии за ендометриоза, насочени към потискане на функцията на яйчниците.

Забележително е наблюдението, описано от опитен хирург, че при лапароскопия след лечение с NAC, ендометриомът е по-правилен и компактен и по-лесно отстранен, следователно свързан със значително намаляване на кървенето по време на лапароскопия.

В още един случай възелът на ректовагиналния септум изчезна, което предполага ефективността на NAC извън овариалните ендометриоми.

Пример 3 Ефекти от импулсно, интермитентно и ежедневно лечение с NAC върху експериментално индуцирана ендометриоза: вагинална свръхчувствителност при плъхове като сигнал за болка - пилотно проучване

Материали и методи

Животни. Използвани са 16 възрастни неоплодени женски плъха Sprague-Dawley. Те тежаха 200-230 g в началото на изследването и бяха държани поотделно в стая с контролирана температура в пластмасови клетки, постлани с постелки. Плъховете имаха свободен достъп до вода и храна за плъхове и бяха държани на 12-часов цикъл светло/тъмно с включени светлини в 07:00 часа. Репродуктивният статус (преди еструс, еструс, след еструс и диеструс) се определя чрез ежедневен вагинален лаваж.

Експериментален модел и предхирургично обучение. Преди индуцирането на ендометриоза, плъховете са обучени да изпълняват реакция на избягване, за да спрат разширяването на вагината, произведено от надуваем латексов балон. Малък, ненадут латексов балон беше свързан с тънък катетър, смазан преди вкарване в средата на вагиналния канал. Надуването на балона с различни обеми въздух разтяга вагиналния канал. Налягането, произведено от всеки разширяващ се обем, се измерва за контрол с помощта на датчик за налягане с малък обем. Апаратът за тестване беше малка, цилиндрична камера от плексиглас, проектирана да държи плъха по такъв начин, че да не му позволява да се обръща. Отварянето на задната част на камерата позволява катетър, прикрепен към вагинален стимулатор, да бъде свързан към стимулиращ апарат. Фоточувствителният елемент определя позицията на плъха в камерата. Ако плъхът се разтегне като част от отговор на избягване, светлинният лъч се прекъсва и експозицията се спира. Плъховете бяха оставени да се установят в камерата за изпитване, като ги поставиха в камерата за 15 минути всеки ден в продължение на 5 дни. След това плъховете бяха обучени по време на тренировъчни сесии да претърпят реакция на механично избягване, за да се намали вагиналното раздуване, което включва издърпване на главата на плъха навън, за да се прекъсне светлинният лъч. Всички плъхове бяха обучени на реакции на избягване в 4 сесии. След тренировката започна тестовата сесия.

Тестовите сесии се провеждат 3 пъти седмично в непоследователни дни. Всяка тестова сесия включваше серия от контролирани опити за избягване. Всеки опит се състоеше от бързо надуване на балона (1 ml/s) до фиксиран обем, който се поддържаше или докато плъхът извърши реакция на избягване, или за 15 секунди, и балонът бързо се издуха. Различни обеми за разширяване, включително контролен обем (0.01 ml), се инжектират всеки три пъти на случаен принцип. Максимален период на изчакване от 15 секунди се счита за липса на отговор.

Времето за отговор и реакциите на избягване бяха измерени като функция на обема на разширяване за всяка сесия, както е описано в Cason AM et al (Horm Behav. (2003), том 44, страници 123-31). Колкото по-кратко е времето за отговор и колкото по-малък е обемът на отговора, толкова по-силна е реакцията на избягване при плъха. За всеки плъх реакциите на избягване и налягането/обемите за всички сесии при даден плъх (поне 12 сесии) бяха събрани и средните стойности бяха изчислени. И четирите експериментални групи (вижте по-долу) установиха, че изходните реакции на избягване на вагиналното раздуване преди операция за ендометриоза са много сходни.

предизвикване на ендометриоза. Ендометриозата при плъхове може да бъде експериментално предизвикана чрез автотрансплантация на части от матката. Хирургията за ендометриоза е извършена следвайки протокола, първоначално разработен от Vernon и Wilson 1985 (Fertility and Sterility, 1985, том 44, страници 684-694). Плъхове в диеструс бяха анестезирани, поставени върху нагревателна подложка за поддържане на телесната температура и беше извършена операция. Направен е разрез в средната линия на коремната кухина за отваряне на матката. Четири парчета маточен рог бяха зашити около алтернативна каскада от мезентериални артерии, които захранват каудалното тънко черво. Постоперативното възстановяване е гладко и редовните цикли на еструса се възобновяват при всички плъхове в рамките на една седмица.

NAC лечение.

Всички плъхове са третирани с NAC при 60 mg/kg/ден (когато е приложимо, в деня на прилагане) или плацебо в продължение на 8 седмици след операцията. Плъховете бяха разделени на четири експериментални групи:

Първата група получи импулсно лечение с NAC, т.е. лечение през ден.

Втората група получава интермитентно лечение с NAC, т.е. ежедневно лечение за 5 дни и 2 дни почивка (т.е. 2 дни без лечение).

Третата група получава ежедневно лечение с NAC.

Четвъртата група е получила фиктивно лечение, т.е. плацебо лечение.

Отговорът на избягване на прекратяване на вагиналното раздуване, както е описано по-горе, беше оценен след 8 седмици.

резултати

Резултатите показват, че вагинална хипералгезия (повишена чувствителност към болка) е предизвикана при плъхове след операция на матката.

Отговорът на избягване (т.е. времето за отговор и броят на отговорите в рамките на 15 секунди за дадено количество разтягане в сравнение с контролната група) и вагиналното налягане бяха определени за различни обеми на разтягане на вагиналния канал. Показани са резултатите за четири различни експериментални групи (стойностите за групата с фиктивно лечение са използвани като базови стойности).

Относителното намаление на реакцията на избягване при 0,5 ml обем на разтягане спрямо групата на фиктивно лечение беше:

1. За групата на импулсно лечение с NAC: 32% намаление на реакцията на избягване;

2. За групата с интермитентно лечение с NAC: 28% намаление на реакцията на избягване;

3. За групата на ежедневно лечение с NAC: 18% намаление на реакцията на избягване.

По-специално, резултатите показват, че ефектът на намаляване на болката, предизвикан от лечението с NAC, е по-изразен в групата на импулсно лечение и в групата на интермитентно лечение в сравнение с групата на ежедневно лечение.

1. Метод за лечение на бозайник с ендометриоза, включващ импулсно или интермитентно перорално приложение за 3-5 последователни дни, последвано от 2-4 дни пауза, или за 1-3 последователни дни, последвано от 1-2 дни пауза на фармацевтично средство състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, за период от време от поне два месеца, където N-ацетил-L-цистеин се прилага в доза от 20 до 90 mg/kg/ден на ден на приложение.

2. Метод съгласно претенция 1, където N-ацетил-L-цистеин се прилага в доза от 30 до 60 mg/kg/ден в деня на прилагане.

3. Метод съгласно претенция 2, където N-ацетил-L-цистеин се прилага в доза от 30 до 45 mg/kg/ден в деня на прилагане.

4. Метод съгласно претенция 1, където фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин е защитен от светлина.

5. Метод съгласно претенция 1, където фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин е водоразтворима таблетка.

6. Методът съгласно претенция 1, където фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, съдържа натриев бикарбонат.

7. Метод съгласно претенция 1, където фармацевтичният състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, включва полимерно покритие на таблетка на базата на целулозни производни или съполимери на метакрилатни амино естери, което осигурява чревно освобождаване на лекарството.

8. Метод съгласно претенция 1, който се използва при лечението на болка, причинена от ендометриоза.

Същност: Група изобретения се отнася до медицината и се отнася до стабилен състав на наноструктуриран силденафил, който инхибира cGMP-специфична фосфодиестераза тип 5 (PDEV), съдържащ наноструктурирана основа на силденафил или негови фармацевтично приемливи соли, със среден размер на частиците по-малък от около 500 nm, стабилизатор, където съставът се получава в поток от непрекъснат реактор, базиран на микрофлуидна технология и където съставът има полуаморфна структура.(57) Изобретението се отнася до областта на медицината и има за цел да повлияе на микроциркулацията в костната тъкан при експериментална остеопороза и свързаните с нея фрактури. // 2540481

Изобретението се отнася до фармацевтичната индустрия и представлява офталмологичен разтвор, съдържащ рибофлавин и витамин Е за защита на вътрешните структури на очната ябълка от UV-A лъчи или за лечение на кератоконус чрез трансепително кръстосано свързване.

Изобретението се отнася до фармацевтичната индустрия и представлява балансиран инфузионен разтвор, съдържащ натриев, калиев и магнезиев хлориди, разтворител и натриев L-аргинин сукцинат с формула: , като компонентите в разтвора са в определено съотношение в тегл.%. ИЗОБРЕТЕНИЕ: Изобретението осигурява повишена детоксикираща активност, ниска токсичност и широка област на клинично приложение. 11 табл., 6 пр.

Изобретението се отнася до метод за лечение на бозайник с ендометриоза. Този метод включва импулсно или интермитентно перорално приложение за 3-5 последователни дни, последвано от 2-4 дни почивка или за 1-3 последователни дни, последвано от 1-2 дни почивка на фармацевтичен състав, съдържащ N-ацетил-L-цистеин, за период от поне два месеца. N-ацетил-L-цистеин при този метод се прилага в доза от 20 до 90 mg/ден. Заявеният метод осигурява по-значим ефект върху симптомите на ендометриоза в сравнение с традиционното ежедневно приложение на N-ацетил-L-цистеин. 10 з.п. f-ly, 7 ил., 2 таблици, 3 pr.