Вона характеризується широким спектром дії, швидкістю та зручністю проведення, високою точністю результатів, прийнятною вартістю. Вона затребувана, тому доступна у різних клініках та лабораторіях міста.

Метод діагностики (ІФА) є інформативним і не надто затратним, тому багато лабораторій пропонують своїм клієнтам цей метод (імуноферментний аналіз крові). Дослідження проводиться натще, кров для аналізу беруть із ліктьової вени пацієнта. Перед ІФА бажано не курити та не вживати алкоголь.

Що таке аналіз крові, проведений методом ІФА

Серед методів аналізу крові, що дозволяють оцінити здатність організму протистояти інфекційним хворобам і що показують фазу хвороби, важливе місце займає імуноферментний аналіз (ІФА). Проведення цього дослідження дозволяє всебічно оцінити діяльність захисної функції крові та виявити стан імунодефіциту при інфекційних патологіях, а також захворюваннях крові, аутоімунних процесах, гормональних проблемах.

Це лабораторне дослідження, яке дає змогу визначати наявність специфічних антитіл (захисних факторів крові білкової природи) до певних антигенів (хвороботворних агентів). Серед антитіл першорядне значення мають імуноглобуліни, які можуть існувати як імунокомплекси.

Імуноглобуліни виробляються внаслідок складних нейрогуморальних реакцій імунітету людини, що виникають як реакція у відповідь на впровадження чужорідних антигенів. На кожен вид хвороботворного агента виробляють свої специфічні антитіла. Діють вони шляхом «зв'язування» антигену або патологічного мікроорганізму, утворюючи комплексну сполуку «антиген-антитіло» з подальшою нейтралізацією, ферментативним лізисом, реакціями фагоцитозу і виведенням з організму. Саме за наявністю певних комплексів методом ІФА визначається вид збудника або наявного у збудника.

Варто пам'ятати, що після курсу лікування антитіла можуть залишатися в нашому організмі дуже довго, навіть після того, як інфекція покинула наше тіло, тобто. залишається так званий «серологічний шрам». Наведемо приклад: у нічному небі тисячі зірок. Багато хто з цих зірок вже давно загинув, але до нас досі, століттями, йде їхнє світло. По суті ми бачимо тільки слід зірки. Світло є, а зірки вже давно нема.

Але якщо світла немає, це не говорить про те, що зірки там не було. Те саме і з антитілами. Їхня наявність не гарантує присутності в організмі шуканого інфекційного агента. Відсутність антитіл не свідчить, що інфекції немає. Якщо результат аналізу методом ІФА позитивний, це означає, що потрібно шукати інфекцію більш специфічними і дорогими методами - ПЛР, бактеріологічні посіви. Можливий хибнопозитивний результат у разі, якщо кілька мікробів мають схожу антигенну структуру, тоді до різних мікробів будуть вироблятися «схожі» антитіла.

Які бувають імуноглобуліни

Відкрито та вивчено 5 основних класів імуноглобулінів – IgА, IgM, IgG, IgD, IgE. роль інших ще остаточно не з'ясована і перебувають у стадії наукового дослідження.

Основне завдання імуноглобуліну А (IgA) полягає у захисних функціях слизових оболонок дихальних шляхів, шлунково-кишкового тракту та сечовидільної системи. При гострому початку захворювання виявити їх неможливо. З'являються ці захисні комплекси лише з 2 тижня початку захворювання, іноді пізніше. Основна маса імуноглобуліну А зосереджена у слизових тканинах. Орієнтовно близько 80%. Інші антитіла циркулюють у крові.

Основна функція – знешкодження та знищення мікроорганізмів. Після стихання гострих проявів захворювання кількість цих імуноглобулінів починає зменшуватися і повністю йде на термін до 8 тижнів після початку хвороби. Якщо IgA виявляються більш пізні терміни, це свідчить про хронізації процесу.

Головними і першими маркерами гострої фази патології, що розвивається, є імуноглобуліни класу М (IgM). Виявляються вони до 5 діб початку нездужання. Визначити їх наявність у крові можна близько 6 тижнів. Потім вони починають швидко зникати.

Залишкова імунна відповідь характеризує наявність у крові імуноглобулінів класу G (IgG). Поява цих факторів у крові виявляється приблизно через місяць після початку хвороби. Надалі вони можуть визначатися протягом багатьох місяців, років і навіть все життя, виконуючи захисну функцію від повернення (рецидиву) хвороби, а в деяких випадках унеможливлюючи вторинне розвиток патології.

Якщо кількість імуноглобуліну G почало знову зростати, можна підозрювати повторне зараження. Подібний висновок можна зробити шляхом проведення двох-трьох проб, зроблених із проміжком у 2 тижні.

Як проводиться ІФА крові

Для імуноферментного аналізу в більшості випадків використовується кров пацієнтів, що іноді виробляють забір тканини склоподібного тіла, рідини спинномозкового каналу, навколоплідних вод.

Кров набирають через ін'єкційну голку в шприц із ліктьової вени. Дослідження проводять натще. Слід пам'ятати, що прийом деяких препаратів може впливати на результат аналізу. Перед здаванням крові необхідно утриматися від куріння, алкоголю. Спотворити результати може прийом наркотичних речовин.

У разі негативних значень імуноглобулінів IgM, IgG, IgA можна говорити про відсутність захворювання або його початкову фазу, також результат з мінусами можливий при повному одужанні після значної кількості часу.

Якщо IgA і IgM не виявлені, а IgG проявляється позитивно, то ймовірно йдеться про сформований імунітет після інфекційного захворювання, або після щеплення.

Якщо IgA і IgM не виявлені, а IgG проявляється позитивно, то ймовірно йдеться про сформований імунітет після інфекційного захворювання, або після щеплення

У разі високого титру IgM при негативних значеннях IgG, IgA можна робити висновок про наявність інфекційного захворювання, що гостро протікає.

Одночасні позитивні значення результатів імуноглобулінів – IgA, IgM, IgG характерні для гострої фази рецидиву хронічного захворювання.

Що дає представлена ​​технологія: визначення наявності гельмінтів у крові; пошук інших хвороботворних мікроорганізмів у тілі; можна дізнатися про причини погіршення вашого здоров'я; лікування будується також на аналізах, отриманих у такий спосіб; Ви можете стежити за станом імунної системи.

Ще одна гарна риса – можливість відстежувати онкологічні маркери незалежно від їхнього походження, але за умови їхньої присутності в організмі, зрозуміло. Цей тест придатний і для опису стану репродуктивної системи людини. Наявність певних білків, гормонів і пептидів дозволяють судити про потенціал партнера в плані зачаття дитини, а також ймовірну якість майбутнього плоду.

Аналіз крові на лямблії досить популярна практика у сучасних медиків. До того ж, даний метод дослідження є чудовим інструментом для біомедичної аналітики та кількісної статистики щодо специфічних антигенів.

Яким чином використовується імуноферментний аналіз методом ІФА

Щоправда, це складніші випадки, тому якість подібного аналізу сильно залежатиме від працівників лабораторії, яка виконує тестування. Особливості технології та відмінність її від старих лабораторних досліджень:

• тепер замість проби калу використовується кров для визначення наявності гельмінтів;
• вивчення проби проводиться у лабораторії дуже швидко, вже наступного дня можна отримати повну інформацію;
• вартість лабораторного дослідження недороге, оскільки теологія дуже проста;
• аналіз крові на гельмінти дає високі показники точності.

Аналізи при імунологічному аналізі крові методом ІФА

Про те, які бувають аналізи крові з погляду імунологічної системи людини, мало хто знає, то ці аналізи не такі поширені. Як правило, таке дослідження крові дає інформацію про вірус імунодефіциту в організмі людини та є анонімною, оскільки проводиться за бажанням пацієнта.

Для забору використовують взяту натщесерце з вени кров, з якої для дослідження методом центрифугування отримують сироватку. Крім цього, вивчення сироватки крові здатне виявити ряд венеричних захворювань (сифіліс, герпес, хламідіоз), а також усі види гепатиту, кір, краснуху, паротит та токсоплазмоз.

В основному, для проведення ІФА аналізу, досліджуваним біологічним матеріалом є кров, проте дослідженню може піддаватися спинномозкова рідина, вміст склоподібного тіла, навколоплідні води та ін.

Імуноглобуліни - це імунні молекули, здатні зв'язуватися та нейтралізувати більшість інфекційних збудників та токсинів в організмі. При цьому найважливішою характеристикою імуноглобулінів є їхня специфічність, тобто здатність зв'язуватися з певним антигеном. Саме ця властивість використовується для аналізу крові на імуноглобулін.

Існує п'ять типів імуноглобулінів, проте найбільш вивченими є імуноглобуліни А, М та G. Імуноглобуліни М та G виявляють свою активність у крові. Імуноглобуліни А є, свого роду, бар'єром на поверхні слизових оболонок, оскільки є там у великій кількості.

Імунологічний аналіз крові дозволяє визначати тип імуноглобулінів, завдяки цьому ІФА дозволяє не тільки діагностувати захворювання, але й визначити стадію даного та відстежувати динаміку захворювання:

• у перші 2 тижні захворювання виявляються лише імуноглобуліни А;
• з 2-го по 3-й тиждень захворювання в крові виявляються імуноглобуліни А і М.;
• Сс3 по 4 тиждень аналіз крові на імуноглобулін визначаються усі три типи;
• при одужанні в крові пропадають імуноглобуліни М, а кількість А та G знижується у 2 – 4 рази;
• за наявності хронічного процесу в крові обов'язково присутні імуноглобуліни G, імуноглобуліни М відсутні, імуноглобуліни А можуть бути як присутніми, так і відсутніми.

Область застосування імунологічного аналізу крові методом ІФА

• Діагностика вірусних захворювань: гепатити, герпес, Епштейн-Барр; вірус, цитомегаловірус та ін;
• інфекції, що передаються статевим шляхом: хламідіоз, гонорея, трихомонада, мікоплазма, уреаплазма;
• сифіліс; ендокринологія (визначення рівня гормонів);
• онкомаркери (діагностика онкологічних захворювань); імунологія (діагностика імунодефіциту);
• алергологія (діагностика та лікування алергій).

Серологічний аналіз крові – лабораторний метод дослідження крові, який застосовується з метою діагностики інфекційних захворювань та визначення стадії інфекційного процесу. Серологічна реакція заснована на взаємодії антитіл та антигенів.

Визначення антигенів використовують для визначення родової та видової приналежності мікроорганізмів. Даний метод дослідження застосовується в урології та венерології. Кров для серологічного аналізу крові береться вранці натщесерце з вени.

Показання до призначення та захворювання, що виявляються методом ІФА

Основний біоматеріал для проведення ІФА - це сироватка крові: у лабораторії у пацієнта беруть зразок крові з вени, з якого надалі видаляють формені елементи, що ускладнюють проведення аналізу. У деяких інших випадках для аналізу використовують спинномозкову рідину, навколоплідні води, мазки слизових оболонок і т.д.

Для того щоб уникнути спотворень у результатах, рекомендується здавати кров натщесерце, а за два тижні до дослідження (якщо метою є діагностика хронічних інфекційних захворювань, що приховано протікають) необхідно відмовитися від прийому антибіотиків і противірусних препаратів. Неможливо охопити повний список показань до проведення ІФА.

Безперечні переваги ІФА - висока чутливість та специфічність методу. Чутливість - це можливість розпізнати потрібну речовину, навіть якщо її концентрація у зразку невисока. Специфічність передбачає безпомилковість діагностики: якщо результат позитивний, значить, знайдені саме ті антитіло або антиген, які передбачалися, а не якісь інші.

ІФА багато в чому замінив «золотий стандарт» мікробіології - бактеріологічний метод діагностики, під час якого для ідентифікації збудника потрібно було виділити його з організму, а потім протягом кількох днів вирощувати культуру на живильному середовищі у пробірці.

Весь той час, поки проводився аналіз, лікарі були змушені лікувати пацієнта «наосліп», здогадуючись про походження мікроорганізму за симптомами хвороби. Визначення IgM за допомогою ІФА дозволяє встановити точний діагноз вже в перші дні хвороби.

Високий рівень технологічності проведення імуноферментного аналізу мінімізує вплив людського чинника, що знижує ймовірність помилки. Більшість тест-систем і реактивів для ІФА, що використовуються в сучасних лабораторіях, випускаються в промислових умовах, що гарантує точний результат.

Недоліки методу ІФА

На жаль, для проведення ІФА потрібно знати, що саме шукати: методика аналізу має на увазі, що лікар має наперед припущення про природу захворювання. Тому немає сенсу призначати такий тест, сподіваючись випадково «відгадати» діагноз.

У разі діагностики інфекційних захворювань імуноферментний аналіз не може знайти збудника та визначити його специфічні властивості: він лише вказує на наявність антитіл у крові у хворого, що побічно свідчить про присутність чужорідного мікроорганізму в тілі людини. ІФА – вкрай точний, але не дешевий метод, тому звертатися до нього потрібно з розумом, а інтерпретацією результатів має займатися кваліфікований лікар.

Можливі результати ІФА

Залежно від змісту аналізу в бланку можуть бути представлені дані у вигляді таблиці з перерахуванням всіх антитіл або антигенів з позначками про негативну або позитивну реакцію, або буде вказано кількісне значення результату (негативний, слабопозитивний, позитивний або різко позитивний).

Останній варіант визначає, скільки антитіл міститься в аналізованому зразку. Ще один кількісний показник – індекс авидності антитіл, виражений у відсотках. Він показує, скільки часу минуло від початку інфекційного процесу (що вищий індекс – тим більше).

Сьогодні випускаються тисячі видів тест-систем ІФА, що дозволяють виявляти специфічні антитіла та антигени при різних патологіях. Тому цей аналіз використовується практично у всіх медичних галузях. Діагноз, поставлений за допомогою ІФА, – це гарантія призначення адекватної терапії та ефективного лікування захворювання.

За наявності необхідних реактивів та хорошої організації роботи лабораторії результат аналізу ви отримаєте протягом 1–2 діб після забору крові. У деяких випадках, якщо необхідно отримати екстрену відповідь, цей термін може бути скорочений до 2–3 годин.

До переліку стандартних діагностичних заходів, які застосовуються для інфекційних захворювань, входить імуноферментний аналіз. Якщо ІФА на сифіліс позитивний, не варто одразу впадати в паніку.

Розглянемо докладніше особливості цієї методики дослідження та принципи розшифрування отриманих результатів у різних категорій пацієнтів.

Імуноферментний аналіз є одним із найпоширеніших методів діагностики інфекційних захворювань. Він відноситься до категорії трепонемних тестів, тобто за його допомогою можна встановити наявність в організмі пацієнта збудника сифілісу – блідої трепонеми.

Методом ІФА сифіліс виявляється завдяки виявленню антитіл до трепонеми. Вони містяться в крові хворого, причому їх тип та кількість залежать від стадії та форми захворювання, що дозволяє отримати важливу інформацію про поточний стан здоров'я людини.

Переваги і недоліки

ІФА часто призначається при підозрі на сифіліс або інші інфекційні захворювання. Це пов'язано з тим, що аналіз дозволяє виявити точний тип і стадію захворювання, причому його достовірність зберігається високому рівні – ймовірність помилки за підсумками багаторазового дослідження становить лише 1%, первинний ІФА має точність близько 90%.

Використання якісних реактивів та сучасного обладнання дозволяє максимізувати точність показників.

Загалом перевагами методу є:

1. Висока точність результату. Імовірність отримання неправдивих даних дуже мала.
2. Мінімізація людського чинника впливу.Сучасне устаткування щодо ІФА виключає вплив людини на результати дослідження з допомогою автоматизації процесу.
3. Виявлення конкретних антитіл. Сплутати антигени одного виду з іншими неможливо, тому аналіз показує точний результат конкретного діагнозу.
4. Фіксація найменших відхилень від норми. Навіть найменша концентрація патологічних агентів не залишиться поза увагою.

Не варто забувати і про слабкі сторони цього методу. ІФА має такі недоліки:

1. Висока ціна. Висока вартість обумовлена ​​багатьма факторами, зокрема необхідністю хорошого обладнання, якісних реагентів та фахівців з достатнім рівнем підготовки.
2. Необхідність постановки попереднього діагнозу. Потрібно знати, які саме антигени шукати, оскільки без додаткових даних поставити точний діагноз буде неможливо.
3. Імовірність хибнопозитивного результату. Деякі стани організму та інші фактори можуть спотворити підсумкові дані.

Показання до проведення

Лікар може призначити проведення імуноферментного аналізу для діагностики не тільки сифілісу, а й інших інфекційних захворювань.

Якщо розглядати ситуацію безпосередньо із зараженням трепонемою, приводом для обстеження можуть стати:

• поява зовнішніх симптомів захворювання (шанкри, сифілітичний висип, гуми тощо);
• значне зниження імунітету;
• виявлення або підозра на сифіліс у статевого партнера, близьких та членів сім'ї;
• позитивна реакція під час проведення інших тестів;
• виявлення інших захворювань, які можуть бути пов'язані із сифілісом;
• особисте побажання людини пройти обстеження.

Способи проведення

ІФА може проводитись різними способами. У кожному даному випадку підбирається найбільш підходящий варіант.

Насамперед, існує поділ методів на:

1. Якісний. Виявляється наявність інфекції чи вірусу в організмі пацієнта.
2. Кількісний. Визначає концентрацію антитіл до патогенного агента в організмі людини, що вказує на стадію та інтенсивність розвитку захворювання.

Існує також класифікація способів проведення ІФА за принципом відтворення необхідної реакції.

Розрізняють 3 варіанти:

1. Прямий. Мічені антитіла вводяться у надані зразки крові.
2. Непрямий із антигенами.Попередньо проводиться розміщення сорбованих антигенів у комірки полістирольного планшета, призначеного для проведення ІФА. Потім до них додаються антитіла вірусів, що провокує утворення імунних комплексів, необхідні подальшої оцінки результатів.
3. Непрямий із антитілами.Для венеричних захворювань найчастіше використовується саме цей спосіб. Він передбачає попереднє сорбування антитіл, лише потім планшет додають антигени.

Правила забору матеріалу

Щоб скоротити ризики отримання недостовірних результатів, необхідно правильно здати кров для аналізу.

Перед проходженням ІФА потрібно дотримуватися деяких обмежень:

• уникати інтенсивних фізичних та емоційних навантажень;
• відмовитися від куріння та прийому алкоголю мінімум за 1 - 3 дні;
• кілька днів треба перейти на правильне харчування;
• жінкам бажано контролювати фазу менструального циклу, оскільки гормони здатні спотворити результати;
• останній прийом їжі має бути за 8 - 10 годин до здачі крові;
• за 10 днів виключається приймання ліків, які можуть вплинути на результати дослідження.

Для ІФА береться венозна кров із ліктьової вени, здавати її потрібно вранці натще. Загалом застосовуються стандартні правила підготовки до забору венозної крові. Залежно від того, наявність якого захворювання тестується, можуть вноситися додаткові вимоги до попередньої підготовки пацієнта.

Методика проведення

Інструкція з проведення ІФА досить проста:

1. У пацієнта береться кров із вени.
2. Взятий матеріал проходить підготовку і поділяється на проби на спеціальній палетці.
3. Проводиться змішування антигенів з антитілами за обраною методикою.
4. Оцінюється реакція. Проби порівнюються з контрольними зразками, проводиться якісна та кількісна оцінка результатів.
5. Дані заносяться до спеціальної таблиці з додатком кількісних показників (сумарні антитіла).
6. Лікарем проводиться розшифровка результатів. За потреби призначається відповідне лікування.

Після проведення досліджень пацієнту видається документ із результатами. Він має вигляд таблиці з відповідними позначеннями напроти кожного типу імуноглобуліну на перетині з найменуваннями інфекційних захворювань.

Розшифровка

Лише спеціаліст зможе грамотно розшифрувати результати аналізів. Самостійно важко розібратися, наприклад, що означає результат ІФА к=1 4. Сифіліс ще й може протікати в різних формах, що також відбивається на підсумкових даних.

У результатах вказуються 3 види імуноглобулінів:

1. IgM. Дозволяють визначити термін зараження сифілісом. Позитивний результат свідчить про загострення захворювання. Їхня відсутність може вказувати на ремісію хронічних патологій або приховану форму хвороби.
2. IgA.Вказує на захворювання, з моменту зараження яким пройшло більше місяця. Також є ознакою гострої фази хвороби, причому як із звичайних патологіях, і запущених хронічних.
3. IgG. Є ознакою пікового періоду захворювання, тобто його загострення. При сифілісі позитивна реакція проявляється деякий час після лікування. За деяких видів захворювань може бути ознакою виробленого імунітету.

Ці речовини виробляються організмом у певній послідовності, що є додатковою ознакою хвороби. При якісних тестах встановлюється лише наявність імуноглобулінів у крові кожного типу.

Це виявляється у зміні кольору матеріалів, що беруть участь у аналізі. Кількісні показники є допоміжними, вони точніше описують ситуацію. Співвідношення антигенів і антитіл вказує на ступінь тяжкості захворювання та інтенсивність дій у відповідь організму.

Що робити

Якщо пацієнт дійсно має сифіліс, позитивний ІФА виявляється абсолютно завжди, не помітити присутності трепонем при такому дослідженні неможливо. Не варто впадати у відчай, захворювання добре піддається лікуванню, особливо на початкових стадіях.

Що необхідно робити за позитивних результатів тесту:

• за показаннями лікаря пройдіть додаткові обстеження;
• пройдіть курс антибіотикотерапії за обраною схемою;
• спрямуйте зусилля на зміцнення імунітету;
• повідомте про захворювання свого статевого партнера;
• надалі регулярно проходьте профілактичну діагностику до моменту зняття з обліку в диспансері (через 5 років за відсутності позитивних результатів аналізів).

Не потрібно відкладати догляд на лікарняний та боятися розголосу результатів. Діагноз шифрується і залишається в секреті, лише при загрозі інфікування інших людей необхідно повідомити проблему родичам та статевому партнеру, щоб вони пройшли необхідні обстеження.

Хибнопозитивний результат та його причини

Іноді фіксується результат інших тестів та ІФА хибнопозитивний на сифіліс. Саме тому рекомендується проводити 2 - 3 допоміжні методи і через деякий час повторювати імуноферментний аналіз.

Подібні неточності трапляються рідко, вони зумовлені переважно такими факторами:

• вагітність;
• хронічне захворювання;
• нещодавня вакцинація;
• травми.

Хибнопозитивні результати поділяють на гострі і хронічні, залежно від характеру фактора, що спровокував їх.

Основні з них представлені у таблиці:

За наявності подібних проблем зі здоров'ям тест на сифіліс може показати позитивний результат, але це є лише наслідком вироблення організмом білків для боротьби із захворюванням. Однак ІФА розпізнає їх як антигени.

У здорової дитини до півторарічного віку можуть спостерігатися хибнопозитивні результати ІФА, якщо жінка під час вагітності була інфікована сифілісом. До цього віку кров ще не встигає повністю оновитися, тому в ній можуть бути антитіла матері. Винятком є ​​ситуація з виявленням імуноглобулінів IgM.

Більше інформації про особливості імуноферментного аналізу та методику його проведення ви можете дізнатися, подивившись відео у цій статті.