Що таке вірус ачс. Африканська чума свиней - опис захворювання


Що таке африканська чума свиней (АЧС)?

Це контагіозна септична хвороба домашніх свиней, у тому числі декоративних та диких кабанів. Хвороба може проявлятися гостро, підгостро, хронічно та безсимптомно, характеризується лихоманкою, геморагічним діатезом, запальними та некродистрофічними змінами паренхіматозних органів. Інкубаційний період становить від 3 до 15 діб, а летальність може досягати 100%. У Росії її АЧС реєструється з 2007 року.

Чи є вакцина від АЧС?

Специфічних засобів профілактики АЧС не розроблено.

Чи небезпечна АЧС для людей?

Які симптоми АЧС?

При гострій формі характерні: лихоманка до 41-42 ° С протягом 3-7 днів, пригнічення, порушення гемодинаміки - ціаноз (посинення) або гіперемія (почервоніння) шкіри вух, живота, промежини та хвоста. АЧС супроводжується діареєю, іноді з домішкою крові, кров'яними витіканнями з носової порожнини, клонічними судомами, у поросних свиноматок – абортами. Як правило, загибель тварин настає на 5-10 добу від початку захворювання. Ті, що вижили, довічно залишаються вірусоносіями.

Що викликає АЧС?

Збудником АЧС є ДНК-вірус роду Asfivirus, сімейства Asfarviridae, розмір його віріона ~200 нм. Для вірусу АЧС встановлено кілька сероімунотипів та генотипів. Його виявляють у крові, лімфі, у внутрішніх органах, секретах та екскретах хворих тварин. Вірус стійкий до висушування та гниття, руйнується при тепловій обробці при температурі 70°С протягом щонайменше 0,5 години; має цитопатичну дію і гемадсорбуючі властивості.

Як передається АЧС?

Основним джерелом збудника АЧС є хворі, перехворіли та/або загиблі від АЧС домашні свині та дикі кабани, а також їх органи, кров, тканини, секрети, екскрети.

Передача збудника АЧС здійснюється шляхом безпосереднього контакту домашньої, у тому числі декоративної свині, дикого кабана з хворою або полеглий твариною, харчовими продуктами та сировиною, отриманими від них, при контакті з контамінованими збудником АЧС кормами, одягом, об'єктами довкілля, включаючи ґрунт, воду , поверхні приміщень, обладнання, транспортні та технічні засоби.

Які існують заходи для боротьби з АЧС?

В епізоотичному осередку проводиться вилучення всіх свиней та отриманої від них продукції тваринництва.

У першій загрозливій зоні (у радіусі не менше 5 км від епізоотичного вогнища) у господарствах, не віднесених до IV компартменту, проводиться вилучення всіх свиней та отриманої від них продукції тваринництва або направлення на забій та переробку на підприємства, розташовані в першій загрозливій зоні.

У другій загрозливій зоні (прилегла до першої загрозливої ​​зони територія, радіусом до 100 км від меж епізоотичного вогнища) з метою виявлення циркуляції вірусу АЧС проводяться спостереження за клінічним станом свиней з відбором проб від усіх підозрюваних у захворюванні на свиней та їх лабораторію.

Через який термін можна знову розводити свиней у колишньому осередку АЧС?

У колишньому епізоотичному осередку та першій загрозливій зоні – через 1 рік після відміни карантину. У вільних приміщеннях, не зайнятих після знищення свиней, до закінчення зазначеного терміну дозволяється розміщення та утримання тварин інших видів (включаючи птахів).

Для свинарських господарств, які працюють у режимі закритого типу – з дозволу спеціальної комісії через 8 місяців після скасування карантину за умови отримання негативного результату на АЧС під час проведення ветеринарного обстеження та постановки біологічного контролю групи тварин терміном не менше ніж 60 днів.

Як захиститись від АЧС?

  • забезпечити безвигульне утримання свиней;
  • дотримуватись ветеринарних правил утримання свиней;
  • не допускати забруднення довкілля відходами тваринництва;
  • надавати поголів'я свиней для вакцинацій, що проводяться ветслужбою (проти класичної чуми свиней, пики);
  • щодекадно обробляти свиней та приміщення для їх утримання від комах (кліщів, вошей, бліх), постійно вести боротьбу з гризунами;
  • не завозити свиней без погодження із Держветслужбою;
  • не використовувати не знешкоджені корми тваринного походження, особливо боєнські відходи;
  • обмежити зв'язки України із неблагополучними територіями;
  • негайно повідомляти про всі випадки захворювання на свиней у державні ветеринарні установи по зонах обслуговування.

Як матеріали використано додаток до наказу Мінсільгоспу Росії від 31 травня 2016 р. № 213

Джерело: Посібник для ветеринарів підготовлений ФАО ООН

У рамках глобального тваринництва свинарський сектор відіграє ключову роль джерела тваринного білка. Збільшення світового попиту на м'ясо призвело до того, що свинина стала найважливішим харчовим продуктом завдяки швидкому зростанню свиней, ефективної конверсії корму, швидкому обігу та плодючості. Свинина є найбільш споживаним видом м'яса наземних тварин, на неї припадає понад 37% споживання м'яса у світі, потім слідує курка (35,2%) та яловичина (21,6%) (ФАО, 2013).

Протягом останніх десятиліть спостерігається стабільне зростання сектору свинарства (рис. 1), але в різних країнах світу зростання не є рівномірним. Великі популяції є в Китаї та деяких частинах Південно-Східної Азії, таких як В'єтнам, у Західній Європі, центральній та восковій частині Сполучених Штатів Америки, у Центральній Америці та південній Бразилії. В Африці, де АЧС є ендемічним захворюванням, кількість свиней постійно збільшується, що свідчить про поширення свинарської практики на континенті, де на сьогоднішній день жуйні є домінуючим видом домашніх тварин. Релігійні та культурні чинники у значній сгепени впливають поширення свиней, наприклад, у мусульманських сгранах їх мало чи взагалі немає (рис. 2).

Для цього сектора характерний глибокий розрив між традиційним, дрібним натуральним виробництвом, з одного боку, та промисловим свинарством зі збільшенням вертикальної інтеграції, з іншого. Звичайно, між ними існує ціла низка проміжних видів господарств.

В останні десятиліття комерційне свинарство зазнало значної інтенсифікації. Багато кількох найбільш продуктивних порід свиней розводять на обмеженій кількості великих ферм, що супроводжується відповідним зростанням виходу продукції тваринництва. Великомасштабні виробничі системи досягли високого рівня однаковості, ґрунтуючись на тому ж генетичному матеріалі і, таким чином, маючи можливість використовувати аналогічні корми та інфраструктуру. Незважаючи на те, що великомасштабне виробництво дозволяє задовольняти дедалі більшу частку глобального попиту на свинину, близько 43 відсотків свиней все ще міститься в дрібних подвірних господарствах, особливо в країнах, що розвиваються (Робінсон та ін., 2011 р.).

У країнах, що розвиваються, більшість свиней досі розводять у традиційних, дрібних, натуральних господарствах, де вони служать не тільки як джерело м'яса. У таких низьковитратних системах свинарство виробляє додану вартість за рахунок перетворення побутових відходів у білок, забезпечуючи при цьому гній для добрива полів та рибних ставків. Отже, свинина сприяє забезпеченню харчування та продовольчої безпеки, у той час як живі тварини є фінансовою підстрахуванням, відіграючи істотну роль у культурних традиціях та надаючи додаткові кошти для оплати шкільного навчання, медичної допомоги та невеликих інвестицій.

Ці дві дуже різні виробничі групи мають різні пріоритети у виробничих практиках або інвестуванні в біологічну безпеку для запобігання та контролю захворювання свиней. Дійсно, приватні подвір'я характеризуються низькою біологічною безпекою, застарілою практикою та технологією землеробства, а також поганою поінформованістю про дотримання правил охорони здоров'я тварин (звітність про спалахи захворювання, управління пересуванням та перевезеннями, сертифікація, вакцинація тощо), що відіграє у заносі, поширенні та контролі АЧС та низки інших захворювань свиней.

Вірус АЧС

Збудник АЧС - це унікальний оболонковий цитоплазматичний ДНК-арбовірус, який є єдиним членом сім'ї Asfarviridae (рисунок 3). Хоча раніше вважалося, що існує лише один серотип вірусу АЧС, у недавніх дослідженнях провели класифікацію 32 ізолятів ВАЧС на вісім різних серогруп на підставі реакції затримки гемадсорбції (РЗГАд) (Малоголовкін та ін., 2015). Однак генетична характеристика всіх ізолятів вірусу АЧС, відомих дотепер, продемонструвала 23 генотипи, пов'язані з географічними локаціями, з численними підгрупами, що ілюструють складність епізоотології АЧС (рисунок 4). Генотип є відображенням варіабельності сегмента водному гені та білку (\/Р772) і використовується в основному в філогенетичних та молекулярних епізоотологічних цілях (наприклад, для визначення джерела спалахів). Наскільки відомо, він не визначає вірулентності чи інших параметрів хвороби.

Тварини, що зазнали зараження

У природному лісовому циклі безокі м'які кліщі Ornithodoros (також відомі як південноафриканські отруйні кліщі), а також африканські дикі свині є резервуаром та природним господарем вірусу АЧС. Кліщі передають вірус через укуси.

Всі представники сімейства свиней (Suidae) є сприйнятливими до інфекції, але клінічне захворювання спостерігаються тільки у домашніх та диких свиней, а також у їхнього близького родича дикого європейського кабана. Дикі африканські свині є безсимптомними носіями ВАЧС і є резервуаром вірусу деяких частинах Африки (рисунок 5). До них відносяться африканські кабани (Phacochoerus africanus і P. aethiopicus), кистеухі (Potamochoerus porcus і Potamochoerus larvatus) та великі лісові свині (Hylochoerus meinertzhageni).

Географічне поширення АЧС

В даний час АЧС поширена в Африці на південь від Сахари, Східної Європи, на Кавказі та на італійському острові Сардинія. У зв'язку з циркуляцією ВАЧС, що зросла, зростає занепокоєння, що вірус пошириться і в інші регіони планети. Будь-яка країна, що має сектор свинарства, ризикує. Досвід показує, що хвороба може потрапити в будь-яку країну, незачеплену вірусом, і розташовану за тисячі кілометрів, головним чином через повітря, що прибуває на борту повітряних і морських суден і потім неправильно утилізоване м'ясо або м'ясо, що перевозиться індивідуальними пасажирами. Особливе занепокоєння викликає можливість поширення вірусу Східної Азії. У Китаї, який сильно залежить від виробництва свинини та має майже половину поголів'я домашніх свиней на планеті, епідемія АЧС означатиме катастрофічні наслідки для виробництва та торгівлі продуктами свинарства із серйозними наслідками для глобальної продовольчої безпеки.

Офіційну інформацію про статус та дати спалахів АЧС можна отримати з Глобальної системи інформації щодо здоров'я тварин WAHIS, що знаходиться у Всесвітній організації з охорони здоров'я тварин (МЕБ).

Африка

АЧС вважається ендемічним захворюванням у більшості країн Африки на південь від Сахари (рисунок 6), а також дуже динамічним, оскільки воно часто виникає в нових районах. Ця динаміка в основному пояснюється величезним зростанням сектору свинарства в Африці, так як у деяких країнах (наприклад, Мадагаскар, Намібія, Уганда) менш ніж за десятиліття, популяція свиней зросла вдвічі (ФАОСТАТ - http://www.fao.org/faostat/ ). Іншою важливою причиною є збільшення руху людей та товарів. Зростання сектору свинарства продовжується, незважаючи на дезорганізовані та небезпечні системи збуту, які не сприяють інвестиціям у покращення виробництва свинини з боку виробників.

Здебільшого зростання спостерігається у приватних подвір'ях із низьким рівнем біобезпеки, що створює проблеми з погляду поширення захворювання. Крім того, з наявними в даний час інструментами викорінення АЧС в Африці є дуже важким завданням, оскільки вакцини не існує і не існує будь-яких механізмів компенсації. Тому зусилля щодо профілактики та контролю слід зосередити на методах покращення тваринництва, біобезпеки та захисту районів, не охоплених хворобою (через регулювання торгівлі та програми розвитку сектору свинарства, які націлені на просвітницькі та профілактичні заходи). У той же час слід нагадати, що динаміка АЧС відрізняється від субрегіону до субрегіону.

Східна Африка

Африканська чума свиней була вперше виявлена ​​в Кенії в 1909 після ввезення в країну європейських домашніх свиней (Монтгомері, 1921). У Східній Африці вірус зберігається в лісовому циклі між африканськими кабанами і кліщами Ornithodoros, що живуть у норах. Перші спалахи сталися у свиней, що належать європейським поселенцям, і було встановлено, що зведення огорож навколо ферми може виключити африканських кабанів та кліщів, і таким чином можна захистити свиней від зараження. Проте свинарство з того часу набуло великої популярності в регіоні, і велика кількість тварин перебуває у небезпечних умовах або на вільному вигулі. Це призвело до неодноразових спалахів АЧС, головним чином, внаслідок пересування та перевезення свиней та свинини, а не з вини дикої природи. Збільшення заміського свинарства призвело до спалахів навколо великих міст, таких як Кампала, Найробі, Момбаса та Дар-ес-Салам. Також у Кенії було виявлено існування циклу між домашніми свинями та кліщами Ornithodoros (Гальярдо та ін., 2011).

Південна Африка

Лісовий цикл за участю африканських кабанів присутній у північних частинах субрегіону (Ботсвані, Малаві, Мозамбіку, Намібії, Замбії, Зімбабве та північно-східній частині Південної Африки). У Малаві та Мозамбіку цикл за участю домашніх свиней та кліщів визначається як «дуже ймовірний». Ангола та Мозамбік регулярно повідомляють про спалахи, тоді як інші країни спорадично спостерігають спалахи АЧС, пов'язані з африканським кабаном. Зімбабве у 2015 році, після більш ніж 2Онлітньої перерви, повідомила про перший спалах серед свиней на вільному вигулі. У північно-східній частині Південної Африки, де значну частину африканських кабанів інфіковано вірусом АЧС, виділено зону контролю, у якій свинарство допускається лише за умов суворої біологічної безпеки. Проте спорадичні спалахи виникають, проте, внаслідок незаконної діяльності. Решта Південної Африки, Лесото та Свазіленд історично залишалися вільними від вірусу АЧС, хоча у 2012 році в Південній Африці стався перший за п'ятдесят років спалах поза зоною контролю внаслідок незаконного переміщення свиней до цієї області. Острови Індійського океану залишалися вільними від АЧС до 1997 року, коли вірус був завезений на Мадагаскар, де він відтоді носить ендемічний характер.

У 2007 році Маврикій пережив вторгнення вірусу, який у наступному році було ліквідовано. Субрегіон демонструє високий рівень генетичної мінливості (рисунок 2), пов'язані з наявністю лісового циклу.

Центральна Африка

Демократична Республіка Конго та Республіка Конго належать до історично ендемічних. Цілком ймовірно, що виною тому лісовий цикл, принаймні, в деяких частинах цих країн, так як в Республіці Конго були зареєстровані африканські кабани (Плоурайт та ін, 1994; Саліки та ін, 1985).

Інші країни в регіоні також повідомляли про спалахи, особливо Камерун, який випробував перше вторгнення в 1982 році, незабаром після того, як популяція свиней подвоїлася. У 1973 році острівна країна Сан-Томе та Прінсіпі пережила спалахи, які були швидко ліквідовані. У 2010 році Чад повідомив про перший спалах на півдні країни, хоча в 80-х роках були поодинокі повідомлення про АЧС в Чаді (Плоурайт та ін, 1994). Цікаво, що нещодавно в цьому регіоні було зареєстровано генотип IX АЧС, що традиційно зустрічається у Східній Африці, а також генотип I (рисунок 2).

Західна Африка

Перша офіційна доповідь МЕБ про АЧС в Західній Африці була отримана з Сенегалу в 1978 році, але ізольят вірусу 1959 з Дакара підтверджує те, що вірус потрапив туди, принаймні, на два десятиліття раніше. У Західній Африці, як видається, до 1996 року захворювання зачіпало Південний Сенегал і його сусідів (Гвінея-Бісау, Гамбію і Кабо-Верде), коли Кот-д'Івуар пережив перший спалах, за яким пішла епізоотія, що охопила більшість країн регіону зі значним свинарством (Бенін, Нігерія, Того, Гана та Буркіна Фасо). Захворювання відтоді має ендемічний характер у більшості цих країн, за винятком Кот-д’Івуару, де протягом року його викорінили, до нового вторгнення у 2014 році. Нігер та Малі повідомили про перші спалахи у 2009 та 2016 роках. Було доведено, що у підтримці вірусу не бере участь лісовий цикл з участю диких свиней чи кліщів роду Ornithodoros. Циркулює лише генотип I|, що передбачає занесення, а не еволюцію вірусу в регіоні (рисунок 2).

Східна Європа та Кавказ

2007 року АЧС з'явилася в Грузії. Генотип II ВАЧС виник у Південно-Східній Африці і швидше за все, він був завезений на кораблі у вигляді відходів або перетворених на корм для свиней, або викинутих у такому місці, яке було доступне для свиней на підніжному кормі. Хвороба швидко поширилася на Кавказі (у Вірменії у 2007 році та Азербайджані у 2008 році) та у Російській Федерації (2007). В останні кілька років хвороба поступово поширилася на захід, спочатку в Україну (2012) та Білорусь (2013), потім до Європейського союзу (Литву, Польщу, Латвію та Естонію, 2014) та Молдову (2016) (рис. 6).

Один із основних маршрутів інфекції у Східній Європі – через збутовий ланцюг свинини, коли ввозиться дешева контамінована свинина та свинячі продукти із заражених регіонів. Годування свиней харчовими відходами та неправильна утилізація туш є причиною зараження сприйнятливих свинячих популяцій. Той факт, що ВАНС залишається заразним тижнями і навіть місяцями в тканинах та свинячих продуктах, дозволяє йому зберігатися у навколишньому середовищі (наприклад, у тушах тварин), а також у охолодженому та замороженому м'ясі та м'ясних продуктах.

У неблагополучних по АЧС державах-членах ЄС кабани відіграють головну роль в інфікуванні, розповсюдженні та підтримці АЧС. Як це відбувається, не зовсім ясно, але за припущеннями, значною мірою це залежить від густини популяції дикого кабана та їх взаємодії зі свинями в свинарських господарствах з низькою біобезпекою (свинями на вільному вигулі та підніжному кормі). Як припускають, туші інфікованих тварин та продовольчі відходи, що містять заражену свинину, також відіграють роль у цьому процесі.

Підсумовуючи, АЧС тепер міцно вкоренилася, тобто є ендемічним захворюванням у деяких регіонах Кавказу та Східної Європи, де це не лише викликає серйозні проблеми у торгівлі, а й завдає значної шкоди дрібним свинарським господарствам.

Попередні інкурсії АЧС за межами Африки

У Європі АЧС вперше потрапила до Португалії із Західної Африки у 1957 році. Після знищення захворювання генотип I ВАЧС знову з'явився в країні в 1960 році, а потім поширився по всій Європі (в Італії - в 1967; в Іспанії - в 1969; у Франції - в 1977; на Мальті - в 1978; у Бельгії - в 1985 і в Нідерландах - в 1986). Він також вразив країни Карибського басейну (Кубу – 197171980; Домініканську Республіку – 1978; Гаїті – 1979) та Бразилію (1978). Всім країнам вдалося взяти ситуацію під контроль, за винятком Іспанії та Португалії, де боротьба із захворюванням тривала кілька десятиліть до 90-х років минулого століття, а також італійського середземноморського острова Сардинії, де АЧС стала ендемічним захворюванням з моменту вторгнення вірусу в 1978 році. головним чином серед свиней на вільному вигулі і диких кабанів.

Передача інфекції

Вірус АЧС має різні цикли - традиційно виділяють лісовий цикл, цикл кліщ-свиня та внутрішній цикл (свиня-свиня). Нещодавно був описаний цикл дикого кабана, який іноді може мати місце поряд з перерахованими циклами. Лісовий цикл має місце тільки в деяких частинах Африки і включає африканських кабанів і кліщів Ornithodoros moubata complex. Цикл кліщ-свиня включає свиней та кліщів роду Ornithodoros spp., якими, за описами, заражені деякі частини Африки та Піренейського півострова.

Передача інфекції з лісового циклу (дика африканська свиня) у внутрішній цикл (свиноферми) відбувається через непряму передачу кліщами. Це може статися, коли свині та африканські кабани вступають у контакт, особливо коли африканські кабани риють нори на фермах, або коли кліщі потрапляють у села через туші африканських кабанів, убитих з метою споживання.

Лісовий інфекційний цикл

Цей цикл включає у собі природних господарів ВАЧС, тобто. африканських кабанів і м'яких кліщів Ornithodoros moubata complex, які виступають як біологічні вектори в Південній та Східній Африці. Однак, є мало інформації у зв'язку з іншими африканськими регіонами. Крім того, конкретну роль інших диких африканських свиней, наприклад, кистевуха свині, ще необхідно уточнити.

Трансмісія ВАЧС підтримується завдяки передачі вірусу від кліща африканському кабану (рис. 7). Африканські кабани заражаються від укусів кліща Ornithodoros у перші 68 тижнів життя, тоді як вони перебувають у норі (рис. 8). Згодом у них розвивається вірусемія, і вони заражають інших кліщів. Після короткого періоду присутності вірусу у них у крові (23 тижні) молоді африканські кабани одужують і не мають клінічних ознак.

В ендемічних районах до 100 відсотків африканських кабанів можуть мати антитіла до ВАНС. Вірус зазвичай можна виділити з лімфатичних вузлів африканських кабанів будь-якого віку, хоча вірусемія, достатня для зараження кліщів, була виявлена ​​тільки у новонароджених, що перебувають у норі. Цілком ймовірно, що африканські кабани переживають реінфекції, що повторюються, коли кліщі нападають на них, при цьому невелика кількість вірусу залишається в латентному стані в лімфатичних вузлах.

Популяції кліща можуть залишатися інфікованими та заразними тривалий час завдяки трансстадійній, статевій та трансоваріальній передачі вірусу в популяції, дозволяючи вірусу зберегтися навіть за відсутності віремічних господарів. Інфіковані кліщі відіграють важливу роль у довгостроковій підтримці хвороби, виживаючи місяцями в норах і кілька років після того, як вони заразилися від інфікованого господаря.

Інфекційний цикл між свинею та кліщем

На Піренейському півострові ВАЧС легко знайшов відповідного господаря - Ornithodoros erraticus, місцевих кліщів, які жили в укриттях для свиней. Кліщі потім почали брати участь у підтримці ВАЧС та передачі його свиням, незважаючи на відсутність диких африканських свиней. Цикл був також описаний у деяких частинах Африки, це було добре документовано на Мадагаскарі, Малаві та в Мозамбіку, хоча кліщі, ймовірно, не відіграють великої ролі у передачі вірусу в межах популяцій свиней (Хареснейп та Маму, 1986; Квембо та ін.). , 2015 р.; Равайоманана та ін., 2010 р.).

Декілька видів кліщів Ornithodoros, як було показано, виявилися компетентними векторами ВАЧС як у польових, так і в експериментальних умовах (таблиця 1). Однак те, що відбувається у лабораторії, не обов'язково відображає те, що відбувається у польових умовах. Для кліщів Ornithodoros, щоб стати компетентними векторами в польових умовах, потрібно мати свиней як кращі господарі, і якщо такі відсутні, природна передача вірусу, швидше за все, залишиться обмеженою. Векторна компетенція також може значно змінюватись усередині виду або груп близькоспоріднених видів залежно від властивостей окремої популяції. І хоча про кліщі Ornithodoros повідомляли з неблагополучних на даний момент районів Кавказу та Південної частини Східної Європи, немає жодних ознак того, що вони беруть участь в епізоотичному циклі АЧС або того, що вони насправді можуть передавати захворювання.

Інфекційний цикл домашніх свиней

У цьому циклі, що найчастіше зустрічається у домашніх свиней, вірус зберігається у свиней без диких кабанів і кліщів (рисунок 9). Вірус може поширитися через безпосередній контакт ороназальним шляхом у результаті контакту з виділеннями інфікованих свиней, через свинину, що вживається в їжу, або інші контаміновані продукти, або побічно через контаміновані предмети.

Вірус передається від однієї ферми до іншої майже виключно через втручання людини, наприклад, перевезення тварин або обладнання, годування зараженим продуктами та ін. Цей шлях передачі вимагає наявності великих популяцій свиней, що постійно поповнюються, для підтримки циркуляції вірусу. Однак навіть за відсутності інфікованих свиней вірус іноді зберігається в охолодженому або замороженому м'ясі, що дозволяє йому персистувати протягом тривалого часу, і знову з'являтися, коли ці м'ясні продукти згодовуються свиням.

Інфекційний цикл дикого кабана

У Східній Європі, на Кавказі та Сардинії популяції дикого кабана відіграють важливу роль у підтримці циркуляції вірусу та інфікування, особливо там, де є вільний вигул чи свині риються у покидьках. Це можливо і через інші порушення біобезпеки, такі як викидання на звалище заражених кормів або залишків їжі, парканів, які дозволяють контакт нос-до-носу між тваринами і т.д. Певну роль можуть грати також перевезення диких кабанів на мисливські угіддя та/або з метою контролю, а також мисливці (рис. 7).

Роль дикого кабана у цьому процесі, проте, досі вивчена в повному обсязі. На Кавказі та Російській Федерації, де щільність кабана є відносно низькою, їхня інфікованість не тривала довго, і головним чином підтримувалася «перетіканням» вірусу від домашніх свиней. Однак у міру просування АЧС на захід у щільні популяції дикого кабана Польщі та країн Балтії (рис. 98), постійна трансмісія та безперервні спалахи спостерігалися протягом усього року. У цих регіонах кабан вважається справжнім епізоотологічним резервуаром цього вірусу, причому більшість випадків спостерігається в літні місяці.

У тих частинах Східної Європи, де температура залишається нижчою за 0 °С протягом більшої частини зими, розгортається новий, раніше небачений епізоотологічний сценарій. Вірус, присутній у заражених тушах на полях та лісах, залишається інфекційним до весни, коли дикі кабани (і, можливо, свині на вільному вигулі, хоча це трапляється рідко) можуть натрапити на такі останки, з'їсти їх і заразитися (рис. 9А) .

Втручання людини, таке, наприклад, як полювання, підживлення, споруда огорожі, і т.д., мають серйозні наслідки для розвитку епізоотії у популяціях диких кабанів. Полювання може призвести до того, що дикий кабан, рятуючись від мисливців, потрапить в інші райони, розповсюджуючи АЧС, але воно також може бути дуже корисним у справі регулювання густини тварин (і, таким чином, передачі вірусу). Різні види полювання також можуть робити різний ефект, наприклад, кероване полювання або полювання на самок і т.д. Аналогічним чином підживлення може збільшити трансмісію вірусу через те, що велика кількість диких кабанів збиратиметься в місцях підживлення, але водночас це дозволить більшій кількості кабанів вижити в суворих зимових умовах.

Трансмісія АЧС та стійкість ВАЧС

Інкубаційний період – це період з моменту інфекції (тобто коли вірус проникає у тварину) до початку захворювання (тобто коли у тварини з'являються клінічні ознаки). У разі АЧС цей період становить від 4 до 19 днів, залежно від вірусу, сприйнятливого господаря та шляхи зараження. Виділення вірусу може розпочатись за два дні до появи клінічних ознак. Період, коли свиня поширює вірус, може змінюватись в залежності від вірулентності конкретного штаму ВАЧС: свині, заражені менш вірулентним штамом ВАЧС, можуть бути персистентно заразними більше 70 днів після інфікування.

Вірус виділяється зі слиною, сльозами, носовими виділеннями, сечею, фекаліями та виділеннями зі статевих шляхів. Кров, зокрема, містить велику кількість вірусу. Отже, свині можуть заразитися при контакті з багатьма інфікованими джерелами, головним чином, інфікованими свинями, зараженою свининою та іншими свинячими продуктами (наприклад, харчовими відходами) і предметами (наприклад, підстилкою). Ці інфіковані тварини та контаміновані матеріали можуть перевозитись транспортними засобами та людьми на великі відстані.

Хоча АЧС асоціюється з високою летальністю (більшість інфікованих тварин вмирає), це не така заразна хвороба, як деякі інші транскордонні захворювання тварин, як, наприклад, ящур. Це означає, що АЧС зазвичай поширюється повільно, і деякі тварини можуть бути не інфіковані вірусом.

У відповідному середовищі, багатому на білок, ВАЧС залишається стабільним у широкому діапазоні температур і рівнів рН протягом тривалих періодів часу, він також стійкий до аутолізу та різних дезінфікуючих засобів. Таким чином, ні гниття, ні процес дозрівання, ні заморожування м'яса не здатні інактивувати його. Отже, вірус виживає у виділеннях, у тушах, свіжому м'ясі та деяких м'ясних продуктах протягом різних періодів часу. Він може залишатися інфекційним, щонайменше, 11 днів у фекаліях, 15 тижнів у охолодженому м'ясі (і ймовірно, довше у замороженому м'ясі) та місяцями у кістковому мозку або копченому окістку та ковбасі, за винятком випадків, коли їх готували або коптили за високої температурі (таблиця 2). Спосіб приготування має дуже важливе значення для розповсюдження АЧС. Недоварне, недостатньо копчене, в'ялене або солоне м'ясо, а також кров, туші або приготовлені з них корми можуть бути джерелом інфекції, якщо ними годувати свиней або викинути їх разом із комунальними відходами в місцях, де їх можуть з'їсти свині чи дикі кабани. Приготування м'яса при температурі 70 С протягом 30 хвилин інактивує вірус (рисунок 10).

Введення нових свиней у стадо чи свинарник часто призводить до того, що особини нападають і кусають один одного. У разі свиней на вільному вигулі або підніжному кормі зараження може статися в результаті контакту з інфікованими бродячими тваринами, дикими кабанами, їх тушами або залишками їжі. Крім того, вірус можна передати, використовуючи ту саму голку для вакцинації або лікування кількох свиней. Передача вірусу шляхом штучного запліднення не доведено, але така можливість не виключена.

Векторна передача можлива також через укуси заражених кліщів Ornithodoros. Деякі кровососні комахи, а саме Stomoxys calcitrans, як було показано, мають можливість зберігати та передавати ВАЧС принаймні через 24 години після контакту з хворою особиною (Меллор та ін., 1987), що особливо важливо при передачі інфекції в межах стада .

Інфікування через великі водоймища, такі, як річки та озера, видається малоймовірним, так як концентрація вірусу, будучи відразу ж розведеним водою, стає меншою за інфікуючі рівні.

Клінічна картина та дані розтину

Як правило, хвороба характеризується раптовою смертю свиней, незалежно від віку чи статі. Тварини, ізольовані від решти стада, наприклад свиноматки з молодими підсмоктуючими поросятами, можуть уникнути інфікування через досить низьку контагіозність АЧС. Швидкість поширення захворювання всередині стада (і кількість постраждалих) може змінюватись від кількох днів до кількох тижнів, залежно від типу свинарського господарства, управління та заходів щодо забезпечення біобезпеки. Насправді АЧС, хоч і характеризується високою летальністю, менше 3ара3на, ніж деякі інші транскордонні захворювання тварин, такі, наприклад, як ящур. Крім того, у деяких корінних порід свиней в Африці виробився певний ступінь толерантності до АЧС. Дикі кабани, з приналежності до того ж виду, що й домашні свині, демонструють таку ж клінічну картину.

Клінічні ознаки, пов'язані з інфекцією ВАЧС, вкрай непостійні (див. таблицю 3) і залежить від різних чинників: вірулентності вірусу, породи свиней, шляхи передачі, від інфікуючої дози та ендемічності даного району.

Відповідно до своєї вірулентності, ВАЧС поділяються на три основні групи: ізоляти високовірулентні, помірної вірулентності та низьковірулентні (рисунок 11). Клінічні форми АЧС варіюються від надгострої (дуже гострої) до безсимптомної (нерозрізненої). Як показано на малюнку 11, високовірулентні ізоляти ВАЧС викликають надгостру і гостру форму захворювання, помірно вірулентні ізоляти викликають гостру і підгостру форми. Ізоляти низьковірулентні були описані в ендемічних районах (на додаток до циркулюючих вірулентних вірусів), вони характеризуються більш м'якими симптомами і іноді пов'язані з субклінічною або хронічною АЧС. Захворюваність (тобто частка постраждалих тварин) залежатиме від ізоляту вірусу та шляхи передачі.

Хоча достеменно невідомо, інкубаційний період при природному зараженні, за повідомленнями, варіюється від 4 до 19 днів. Клінічний перебіг захворювання може бути менше семи днів після зараження при гострій формі, до кількох тижнів, або навіть місяців при хронічній формі. Рівень смертності залежить від вірулентності ізоляту, він може бути 1007% у високовірулентних штамів, що вражають свиней різного віку, але може бути менш ніж 20 відсотків при хронічній формі. В останньому випадку захворювання часто є смертельним для поросних та молодих свиней, хворих на інші захворювання або ослаблених з іншої причини. Рівень виживання по відношенню до високовірулентних штамів, що спостерігається в деяких ендемічних районах, може бути вищим, можливо, внаслідок адаптації свиней до вірусу.

Надгостра форма

Характеризується високою температурою (41-42 ° С), втратою апетиту та млявістю. Раптова смерть може відбутися протягом 1-3 днів до розвитку будь-яких клінічних ознак. Часто у своїй немає ні клінічних ознак, ні поразок органів.

Гостра форма

Після інкубаційного періоду в 4-7 днів (рідко - до 14 днів) у тварин з гострою формою АЧС температура піднімається до 40-42 ° С і пропадає апетит; тварини виглядають сонними та слабкими, збиваються до купи і лягають на підлогу (рис. 12), у них збільшується частота дихання.

Смерть часто відбувається протягом 6-9 днів у разі високовірулентних штамів або протягом 11-15 днів при помірно вірулентних ізолятах. У домашніх свиней летальність часто сягає 90-100 відсотків. Такі самі ознаки спостерігаються у диких кабанів та диких свиней. Гострі форми легко сплутати з іншими захворюваннями, головним чином, з класичною чумою свиней, бешихою свиней, отруєнням, сальмонельозом та іншими септицемічними станами (див. наступну главу про диференціальну діагностику). У інфікованих свиней може спостерігатися одна або кілька таких клінічних ознак:

  • синенфіолетові ділянки та крововиливи (точкові або розширені) на вухах, животі та/або на задніх ногах (рис. 12);
  • виділення з очей та носа;
  • почервоніння шкіри грудей, живота, промежини, хвоста та ніг (рис. 12);
  • запор або діарея, яка може з борошна перейти в криваву (мелена);
  • блювання;
  • аборт у поросних свиноматок на всіх етапах вагітності;
  • кривава піна з рота/носа та виділення з очей (рис. 15);
  • область навколо хвоста може бути забруднена кривавими фекаліями (рис. 12).

У диких кабанів важко помітити зміни кольору та крововиливу на шкірі із-за більш темного кольору шкіри та густої вовни. Те саме стосується і темношкірих пород свиней.

Туші свиней, які померли на гострій стадії захворювання, можуть залишатися в хорошому стані, хоча при цьому можуть спостерігатися зовнішні клінічні ознаки. Найбільш відомі результати розтину (рисунок 13): збільшені, набряклі і повністю геморагічні лімфатичні вузли, схожі на згустки крові (особливо шлунково-печінкові та ниркові); збільшена, пухка селезінка від темно-червоного до чорного кольору із закругленими краями; і петехіальні (точкові) крововиливи в нирковій капсулі

При розтині зазвичай виявляються такі явища:

  1. Крововиливи під шкіру;
  2. Надлишок рідини в серці (гідроперікард - скупчення жовтуватої рідини) та порожнинах тіла (гідроторакс, асцит) (рис. 15);
  3. Петехії на поверхні серця (епікарді), сечового міхура та нирок (у кортикальному шарі нирки та нирковій балії) (рис. 14);
  4. У легенях можлива гіперемія та петехії, піна в трахеї та бронхах та важкий альвеолярний та інтерстиціальний набряк легень (рис. 15);
  5. Петехії, екхімози (великі крововиливи) і надлишок крові, що згорнулася в шлунку і тонкому і товстому кишечнику (рис. 14);
  6. Печінкова гіперемія та крововилив у жовчному міхурі.

У інфікованих диких кабанів у Східній Європі виявляються ті ж ознаки при розтині і є такі ж клінічні ознаки, але
через їхню густу, темну вовну зовнішні клінічні ознаки є менш очевидними (рисунок 16).

Підгостра форма

Підгостра форма захворювання спричинена помірно вірулентними ізолятами і може зустрічатися в ендемічних регіонах. Свині зазвичай помирають протягом 7-20 днів, у своїй смертність сягає 30-70 відсотків. Свині, що вижили, одужують через місяць. Клінічні ознаки нагадують (хоча вони зазвичай менш інтенсивні) ознаки при гострій формі захворювання, за винятком того, що при крововиливах та набряках судинні зміни менш виражені.

Частою ознакою є лихоманка, що перемежується, яка супроводжується депресією і втратою апетиту. Пересування тварин може бути болючим, а суглоби часто опухлі з рідиною, що накопичилася, і фібрином. Можуть бути ознаки утрудненого дихання та пневмонії. У поросних свиноматок може статися аборт. Серозний перикардит (рідина навколо серця) часто розвивається у більш просунуті форми фібринозного перикардиту.

Хронічна форма

При хронічній формі часто рівень смертності становить менше 30%. Ця форма була описана в країнах, де ВАЧС вже давно є, наприклад, в Іспанії, Португалії та Анголі. Хронічна форма бере початок від природно атенуйованих вірусів або від вакцинного вірусу, випущеного в ході польових досліджень вакцини, що сталося, як підозрюють, на Піренейському півострові в 1960-х роках. Клінічні ознаки починаються через 14-21 день після інфікування з невеликого підвищення температури, подальшого м'якого респіраторного дистресу, набряку суглобів (від помірного до тяжкого). Це часто супроводжується почервонінням ділянок шкіри, які набрякають і стають некротичними (рисунок 17). Подальші результати розтину включають пневмонію з казеозним некрозом (іноді з осередковою мінералізацією) у легенях, фібринозні перикардити та набряклі лімфатичні вузли, які можуть бути частково геморагічні (в основному це стосується медіастинальних лімфатичних вузлів) (рис. 1).

Диференційна діагностика

При африканській чумі свиней який завжди проявляється весь набір клінічних ознак, описаних у попередньому розділі. На ранніх стадіях захворювання або коли йдеться про невелику кількість тварин, важко поставити клінічний діагноз. Діагностика АЧС часто носить гіпотетичний характер, симптоми можна переплутати з іншими захворюваннями та/або станами. Крім того, низка захворювань свиней (і кабанів) може характеризуватись такими ж рівнями смертності, як і при гострих спалахах АЧС. діагноз доти не є остаточним, доки він не буде підтверджений лабораторією.

На додаток до найважливіших диференціальних діагнозів, перелічених у цьому розділі (таблиця 4), можна також розглядати й інші генералізовані септицемії та геморагічні стани.

Класична чума свиней

Найбільш важливим диференціальним діагнозом АЧС є класична чума свиней, також відома як "холера свиней", яку викликає Pestivirus сімейства Flaviviridae. Як і у випадку з АЧС, у неї бувають різні клінічні прояви чи форми. Гостра форма КНС має майже такі ж клінічні ознаки та результати при розтині, як і гостра форма АЧС, і для неї також характерна висока смертність. Клінічні ознаки можуть включати високу температуру, відсутність апетиту, депресію, крововиливи (у шкіру, нирки, мигдалики та жовчний міхур), кон'юнктивіт, респіраторні ознаки, слабкість, скупченість тварин, посиніння шкіри та смерть протягом 2-10 днів. Єдиний спосіб провести різницю між ними - це лабораторне підтвердження. Було б нерозумно намагатися вакцинувати тварин проти КНС до підтвердження діагнозу, оскільки АЧС може бути поширена непідготовленим персоналом під час вакцинації.

Репродуктивно-респіраторний синдром свиней (РРСС)

Для РРСС, який іноді називають "захворюванням синіх вух", характерна пневмонія у підростаючих свиней та свиней у заключній стадії відгодівлі, а також аборти у поросних свиноматок. Це часто супроводжується підвищенням температури, гіперемією та, зокрема, синюватим відтінком шкіри вух. Також характерна діарея. Хоча смертність від РРСС взагалі не висока, за останні кілька років високопатогенні віруси РРСС винищили цілі стада свиней у Китаї, В'єтнамі та Східній Європі, що характеризувалося високою смертністю, високою температурою, летаргією, анорексією, кашлем, задишкою, кульгавістю та ціанозом/посин вух, кінцівок та промежини).

Результати розтину включають ураження легень (інтерстиціальну пневмонію) та лімфоїдних органів (атрофію тимусу та набряки та крововиливу в лімфатичних вузлах) та точкові крововиливи у нирках.

Синдром дерматиту та нефропатії поросят (СДНЗ)

Це одне із захворювань свиней, пов'язаних із цирковірусом-2. СДНП зазвичай вражає підростаючих свиней та свиней у заключній стадії відгодівлі. Хоча клінічні ознаки говорять самі за себе, немає конкретних діагностичних тестів.

Синдром характеризується наявністю шкірних уражень від темно-червоного до фіолетового кольору, які зазвичай найбільш виражені в області задньої частини тулуба і промежини, хоча у важких випадках також можуть бути порушені бічна та клубова частина живота. Поразки у стінках кровоносних судин, викликані некротичним васкулітом (запаленням кровоносних судин), мікроскопічно легко відрізняються від уражень при АЧС. Захворювання також супроводжується анорексією, депресією та важким нефрозом (запаленням нирки), який зазвичай є причиною смерті. Лімфатичні вузли можуть бути збільшені. Захворюваність загалом низька, але уражені цим захворюванням свині вмирають дуже часто.

Народження свиней

Цьому бактеріальному захворюванню, викликаному Erysipelothrix rhusiopathiae, схильні до свиней різного віку, воно може вражати свиней як у дрібних і екстенсивних свинарських господарствах, так і в комерційних інтенсивних системах. Захворювання може виявлятися у гострій чи підгострій формах. Для гострої форми, яка зазвичай зустрічається у молодих свиней, характерна раптова смерть, хоча смертність зазвичай набагато нижча, ніж при АЧС.

Через два чи три дні після зараження у хворих свиней можуть з'явитися дуже характерні ромбоподібні поразки внаслідок некротичного васкуліту (запалення кровоносних судин). У дорослих свиней це є єдиним клінічним проявом захворювання. Як і у випадку з гострою формою АЧС, селезінка може бути гіперемована і помітно ущільнена. результати розтину також включають гіперемію легенів і периферичних лімфатичних вузлів, також крововиливу в кору нирки, серце і серозну оболонку шлунка. Ізоляція бактерії може підтвердити діагноз і свині добре реагують на лікування пеніциліном. Мікроскопічні зміни мають інший характер, ніж при АЧС.

Хвороба Ауески

Хвороба Ауески, також відома як псевдобешенство, викликає серйозні проблеми неврологічного та репродуктивного характеру і часто призводить до смерті. Хоча можуть бути інфіковані майже всі ссавці, найчастіше уражаються свині, вони є резервуаром. Молоді тварини найбільше уражаються, смертність протягом перших двох тижнів життя досягає 100%. У поросят зазвичай піднімається температура, вони перестають їсти, вони з'являються неврологічні ознаки (тремор, судоми, параліч), смерть часто настає протягом 24-36 годин.

У старших свиней (старше двох місяців) можуть з'явитися подібні симптоми, але у них зазвичай присутні респіраторні ознаки і блювання, і смертельність не така висока. У свиноматок і кнурів в основному з'являються респіраторні ознаки, але у поросних свиноматок може статися аборт або можуть народитися слабкі поросята з тремором. Вогнищеві некротичні та енцефаломієлітичні ураження можуть бути в головному мозку, мозочку, надниркових залозах та інших внутрішніх органах, наприклад, легенях, печінці або селезінці. Білі плями в печінці у плодів або молодих поросят дуже характерні для цієї інфекції.

Сальмонельоз (та інші бактеріальні септицемії)

Сальмонельоз зазвичай вражає молодих свиней. Якщо розпочати лікування вчасно, тварини добре реагують на антибактеріальну терапію. Доказом діагнозу є бактеріологічна культура. Схожі з АЧС ознаки включають підвищення температури, втрату апетиту, респіраторні або шлункові кишкові розлади, та гіперемовану, запалену тушу під час забою.

Тварини можуть померти через 3-4 дні після зараження. У свиней, що померли від септичного сальмонельозу, спостерігається ціаноз вух, ніг, хвоста та живота. Результати розтину можуть включати точкові крововиливи в нирки і на поверхні серця, збільшення селезінки (але з нормальним забарвленням), набряк брижових лімфатичних вузлів, збільшення печінки і гіперемію легень.

Отруєння

Коли раптово вмирає велика кількість свиней, слід розглянути можливість отруєння. Деякі токсичні речовини можуть спричинити таку ж кровотечу, як при АЧС. І хоча щуряна отрута на основі кумарину, така, наприклад, як варфарин, може викликати велику кровотечу, це швидше вразить кількох свиней, а не все стадо.

Деякі грибкові токсини в запліснявілих кормах, наприклад, афлатоксин та стахіботріотоксин, можуть викликати кровотечу та серйозну смертність. Випадкове або зловмисне отруєння пестицидами може призвести до смерті свиней різного віку, але смерть усіх свиней протягом 24-48 годин, з небагатьма або взагалі без клінічних ознак, без знайдених при розтині уражень, допоможе відрізнити такий результат від АЧС. Отруєння навряд чи супроводжуватиметься підвищенням температури.

Розділи цього розділу були взяті з керівництва ФАО «Належна практика управління надзвичайними ситуаціями» (GEMP): «Основи» (The Essentials), (ФАО, 2011 р.), з яким можна ознайомитися для отримання більш детальної інформації.

Доцільно завжди тримати напоготові у місцевому ветеринарному офісі комплект для розслідування, щоб ветеринар міг розпочати роботу якнайшвидше, з мінімальною затримкою. Обладнання в ідеалі має включати цифрову камеру, ГРЗ та засоби швидкого зв'язку (мобільний телефон, але може бути і радіо), а також все необхідне обладнання для відбору, належного пакування та транспортування проб (GEMP, 2011).

Про підозру на АЧС зазвичай повідомляють самі фермери чи приватний ветеринар. При зустрічі з підозрою на спалах АЧС на фермі/у господарстві слід негайно, ще до лабораторного підтвердження, зробити наступні кроки на підставі припущення про польовий діагноз АЧС:

  • Зібрати дані про ферму та уражених тварин (див. вставку 1).
  • На заражених і підозрюваних у зараженні ферм може бути введений негайний карантин, тобто. ні люди, ні транспортні засоби, ні тварини, ні продукти свинарства не повинні залишати ферму або ввозитись туди до підтвердження діагнозу.
  • Встановити пункти дезінфекції для людей та транспортних засобів на входах та виходах із будівлі, в якій знаходяться свині. Співробітники та відвідувачі при виході з ферми повинні забезпечити дезінфекцію взуття, одягу та обладнання. Якщо ветеринарний лікар або інші співробітники повинні вступити в контакт із хворими тваринами або потенційно зараженими матеріалами, їм необхідно скористатися засобами індивідуального захисту.
  • Провести інспектування у кожному приміщенні ферми, клінічне обстеження окремих тварин та патологоанатомічне дослідження загиблих (або забитих) тварин. Під час проведення клінічного обстеження підозрілих тварин необхідний системний підхід.
  • Важливо також записувати ваші висновки під час виконання обстеження. Готовий бланк допоможе вам у ефективному виконанні цього завдання. За наявності великої кількості тварин необхідно розставити пріоритети, яких тварин обстежити. Насамперед необхідно проводити обстеження тварин із очевидними клінічними ознаками.

  • Відбір відповідних проб слід провести якнайшвидше і негайно відправити їх до лабораторії для діагностики (див. розділ «Відбір проб»). У тому випадку, якщо клінічні ознаки є у багатьох тварин, для встановлення діагнозу має бути достатньо зразків від п'яти з них.
  • Провести розслідування спалаху захворювання (відоме також епізоотологічне розслідування).
  • Сусідних фермерів чи тих, хто недавно купував чи продавав тварин із цієї ферми, тобто. контактних осіб під побоюванням, необхідно повідомити, щоб вони могли перевірити своїх тварин (і доповісти ветеринарним органам про будь-які виявлені симптоми) і зупинити переміщення свиней та продукції з та в ці свинарники. Постачальники послуг, які нещодавно відвідували ці ферми, також мають бути повідомлені.

  • Навіть при належному очищенні та дезінфекції співробітникам, які беруть участь у розслідуванні спалаху на потенційно зараженій фермі, не слід відвідувати інші ферми принаймні протягом 24 годин для запобігання можливості випадкового поширення цього захворювання.
  • Якщо йдеться про спалах у господарстві зі свинями на вільному вигулі або на підніжному кормі, першим кроком слід повернути всіх незакритих тварин і тримати їх у закритому приміщенні, або принаймні на прив'язі.

Як проводити розслідування спалаху

Цей розділ запозичений із онлайнового навчального курсу EuFMD.

При розслідуванні спалаху захворювання, також відомого як «епізоотологічне розслідування», слід визначити:

а) як довго триває це захворювання;

б) можливі джерела появи захворювання;

в) які переміщення тварин, людей, транспортних засобів чи інших предметів могли призвести до поширення захворювання;

г) масштаби проблеми шляхом підрахунку числа випадків, визначення епізоотологічних юнітів та оцінки популяції під загрозою ризику. Ця інформація має вирішальне значення при прийнятті рішень щодо стратегії ефективного контролю та моніторингу виконання стратегії контролю, коли ці заходи вже були вжиті.

Насамперед слід визначити епізоотологічну одиницю (юніт), яка повинна включати всіх свиней з аналогічним рівнем ризику зараження. Це будуть всі сприйнятливі тварини під системою управління чи біобезпеки, тобто. зазвичай ферми. Проте ця одиниця може розширитися рівня села, якщо між фермами немає реальних кордонів. Важливо пам'ятати, що географічно віддалені один від одного відділення ферми можуть бути в одній системі управління і є частиною тієї самої епізоотологічної одиниці.

Побудова хронологічних рамок/графіка допомагає визначити, коли імовірно відбулося інфікування та передача захворювання, дає можливість спрямовувати розслідування спалаху. Цей графік використовується для визначення вікон часу, коли могло статися занесення вірусу (на підставі інкубаційного періоду) і поширення його в інші місця (враховуючи період виділення вірусу).

Після створення графіка наступним кроком є ​​його застосування для відстеження джерела вірусу та його подальшого поширення з метою встановлення контактів, які можуть призвести до передачі вірусу протягом розрахованого часу. Фактори ризику для поширення хвороби включають:

  • переміщення тварин чи продуктів тваринного походження (наприклад, свинини);
  • співробітники, які відвідують приміщення та перебувають у безпосередньому контакті з тваринами на інших фермах, наприклад, ветеринарний лікар чи інші фермери;
  • працівники ферми, які відвідують інші тваринницькі господарства;
  • рух транспортних засобів чи обладнання між тваринницькими господарствами;
  • прямий контакт тварин на межах ферм;
  • дикі свині чи їх продукція.

Після того, як було визначено можливі джерела інфекції, важливо розставити пріоритети щодо подальших епізоотологічних розслідувань. Це дозволяє провести швидке розслідування та визначити всі контакти, які можуть сприяти подальшому поширенню хвороби. Слід приділити першочергову увагу тим контактам, які мали місце протягом періоду, коли можливе інфікування.

Така черговість особливо важлива, коли персонал та ресурси обмежені, як це часто буває. Типи контактів також є важливими. Пріоритет слід віддати:

  • великим господарствам, де є більше тварин;
  • «місцях перетину», де зустрічаються тварини з кількох приміщень, у тому числі тваринницькі ринки та скотобійні;
  • господарствам, де відбувається регулярне переміщення тварин, наприклад, у торговців худобою;
  • прямим контактам із тваринами, наприклад, при купівлі тварин;
  • сусіднім приміщенням, де знаходяться свині.

Існують різні способи розслідування можливих контактів:

Інтерв'ю

Ефективне проведення інтерв'ю потребує певних навичок, особливо у ситуації, коли фермер, ймовірно, перебуває у стані серйозного стресу. Фермери часто побоюються сторонніх людей і особливо державних посадових осіб. Надзвичайно важливо знайти час і побудувати довірчі відносини з особою, що інтерв'ює. Крім того, не плануйте відвідувати більш ніж одну ферму на день. Пропонуємо вам деякі ідеї, які ви зможете знайти у вставці 2.

Інші джерела інформації

Перегляньте записи переміщення худоби та персоналу. Ветеринарні записи, щоденники, накладні та рахунки-фактури або квитанції від постачання також можуть дати цінну інформацію. Пам'ятайте, що фермер у такі моменти дуже засмучений, йому важко згадати і передати всі подробиці, і тому записи стають ще більш цінним джерелом інформації.

Крім інтерв'ю фермера, ви повинні ретельно оглянути приміщення. Потрібно обійти приміщення по зовнішньому периметру, щоб визначити, чи немає контактів із сусідніми свинями або дикими свинями. Корисно іноді зробити ескіз району, із зазначенням місця утримання тварин, груп тварин, в'їзду та виїзду та його кордонів.

З метою епізоотологічного розслідування та відстеження може виявитися доцільним зв'язатися з іншими відвідувачами приміщенні, наприклад, ветеринарами, збирачами молока або техніками штучного запліднення.

Забезпечення біобезпеки під час відвідування ферми

У цьому розділі використовувався матеріал із онлайнового навчального курсу EuFMD. З докладним відео, в якому продемонстровані наведені нижче заходи, ви зможете ознайомитись за адресою: https://www.youtube.com/watch?v=ljS-53r0FJk&feature=youtu.be

Перед від'їздом:

  • Не забудьте видалити непотрібне обладнання з автомобіля.
  • Влаштуйте на задньому сидінні та в багажнику автомобіля «чисті» і «брудні» області, вистелені пластиковою плівкою.
  • Переконайтеся, що ви взяли з собою все потрібне обладнання. Для цього є сенс скласти контрольний список (див. вставку 3). Корисно мати стандартний перелік обладнання, необхідного для створення дезінфекційного пункту. Такий список може бути в плані дій у надзвичайних ситуаціях або серед ваших посібників.

Після прибуття

  • Автомобіль не повинен заїжджати на територію (залишіть його біля входу на ферму).
  • Виберіть відповідне місце на чистій та сухій поверхні (бажано, бетоні) для вашого пункту дезінфекції, чітко розмежувавши чисту та брудну сторони (ворота).
  • Зніміть весь непотрібний одяг і предмети (наприклад, піджак, краватка, годинник) і вийміть усі кишені.
  • Електронне обладнання (наприклад, мобільний телефон), необхідне на фермі, має бути поміщене у запечатаний пластиковий пакет для полегшення подальшого очищення та дезінфекції. Телефон на фермі ніколи не виймайте з сумки, ним можна користуватися тільки якщо він знаходиться при цьому в пластиковому пакеті.
  • Візьміть з автомобіля всі елементи, які необхідні для дезінфекції, які потрібно взяти на ферму.
  • Вам може знадобитися привезти власну воду для приготування миючих та дезінфікуючих засобів.

Підготовка

  • Постеліть пластиковий лист на чистій стороні дезінфекційного пункту.
  • Покладіть речі, які ви візьмете з собою на ферму, на брудній стороні пункту дезінфекції (наприклад, чорні пластикові мішки та контейнери для зразків).
  • Розведіть водою, яку ви привезли з собою, миючий засіб в одному відрі та дезінфікуючий засіб – у двох відрах. Два відра - одне з миючим засобом і одне з дезінфікуючим - залишаться на брудній стороні, ви їх використовуватимете для видалення бруду, який ви «зібрали» на фермі. Інше дезинфікуюче відро зі своєю власною щіткою стоятиме на чистому боці.
  • Часто дезінфікуючий засіб є специфічним, призначеним для використання у разі якогось конкретного захворювання. Слід ретельно стежити за концентрацією та часом впливу.

Одягання (на чистому боці)

  • Зніміть взуття та залиште його на пластиковому аркуші.
  • Першим одягають одноразовий захисний костюм, а потім вправляють його в чоботи. Рукавички мають бути прикріплені клейкою стрічкою.
  • Водонепроникний комбінезон (якщо вимагають погодні умови) повинен закривати чоботи. У нього є свої власні шари одноразових рукавичок, які можна замінити, коли забруднюються.
  • Бахіли повинні покривати, як мінімум, підошву та нижню частину гумових чобіт.
  • Надягніть захисний капюшон і перевірте ще раз список перед тим, як зійдете з пластикового листа і вирушите на ферму.

Роздягання (на брудному боці)

  • Перед виходом з приміщення використовуйте наявні на фермі засоби для очищення дуже брудних областей.
  • Помийте контейнер із зразками миючим засобом та щіткою, перш ніж опускати його в дезінфікуючий засіб на необхідний період часу, а потім помістіть у мішок для зразків на чистій стороні.
  • Вимийте та продезінфікуйте пакет, що містить телефон та інші аналогічні предмети, які ви брали на ферму.
  • Зніміть бахіли та помістіть їх на брудній стороні у пластикові мішки. Закатайте водонепроникний комбінезон (якщо ви його одягли) до верхньої частини чобіт до очищення чобіт миючим засобом і щіткою, особливо нижню частину (можливо за допомогою викрутки для очищення підошви). Потім використовуйте миючий засіб для миття всього костюма, включаючи каптур.
  • Зніміть другу пару рукавичок (зовнішню) і покладіть їх у мішок на брудній стороні, перш ніж невимитий водонепроникний комбінезон буде знятий і поміщений у розчин, що дезінфікує. Після перебування у розчині протягом необхідного часу його потрібно помістити в мішок на чистій стороні.
  • Чоботи у разі потреби можна ще раз швидко вимити та належним чином продезінфікувати.
  • Першу пару рукавичок (внутрішню) потрібно зняти і помістити в мішок на брудній стороні, перш ніж знімати внутрішній костюм (ноги потрібно витягнути з чобіт, коли знімаєте костюм, а потім знову можна влізти в чоботи). Костюм потрібно помістити у мішок брудної сторони.

На чистому боці

  • Вийміть ноги з чобіт і ступіть на чистий бік листа, перш ніж взяти чоботи і продезінфікувати їх на чистому боці (для дезінфекції потрібно інше відро). І, нарешті, помістіть їх у мішок на чистій стороні. Тут також необхідно продезінфікувати руки та окуляри, а також обличчя (серветками, що дезінфікують).
  • Обладнання багаторазового користування та зразки повинні знаходитися у подвійних мішках та залишатися закритими.

Можна знову одягнути ваше звичайне взуття.

  • Якщо цебра на брудній стороні є вашими особистими, їх потрібно продезінфікувати, помістити в два мішки, і тільки потім їх можна виносити. Будь-які відра з ферми повинні залишитися на брудному боці.
  • Мішки потрібно розмістити на брудній ділянці в автомобілі.
  • Попросіть фермера віднести сміття на обробку, якщо це потрібно.
  • Після виходу з ферми необхідно негайно надіслати зразки/обладнання на діагностику.
  • Якщо у вас немає свиней, ви можете повернутися додому, потім прийміть душ і ретельно вимийте голову. Весь одяг, який був на вас цього дня, потрібно покласти в дезінфікуючий засіб на 30 хвилин і випрати при температурі понад 60 °С. Якщо там, де ви живете, є свині, виконайте це в іншому місці.
  • Не відвідуйте місця, де утримуються свині протягом принаймні трьох днів.

Поряд із процедурами дезінфекції самого себе, необхідно також помити та продезінфікувати автомобіль. До початку візиту переконайтеся, що машина не має непотрібних елементів і що вона чиста. Постеліть у тих місцях автомобіля, де зберігається обладнання, пластиковий лист та розділіть його на дві частини: чисту та брудну. Не забувайте, що потрібно дотримуватись місцевих правил дезінфекції транспортних засобів.

Ви повинні, якщо це можливо, помити та продезінфікувати автомобіль зовні ще до того, як залишите заражений район, а потім повторити цю процедуру всередині та зовні автомобіля після того, як ви повернетеся на свою базу.

  • Видаліть всі пластикові листи, якими був вистелений автомобіль, і позбавтеся їх належним чином.
  • Помийте машину зовні, використовуючи мийну машину або шланг і одноразову губку, видаліть весь видимий бруд. Не забудьте очистити приховані місця, наприклад, арки коліс, протектор шин та низ автомобіля.
  • Після того, як був видалений весь бруд, розпорошіть дезінфікуючий засіб зовні машини.
  • Позбавтеся від сміття всередині машини, видаліть весь бруд (подбайте про належну ліквідацію відходів).
  • Протріть кермо, педалі, важіль перемикання передач, ручне гальмо, і т.д. тканиною, змоченою в дезінфекційному засобі.

За підозри АЧС у дикого кабана

По-перше, дуже важливо мати чітке визначення підозрюваного випадку АЧС у дикого кабана. Такі визначення, швидше за все, можуть відрізнятися залежно від епізоотологічної ситуації в регіоні/країні, і можуть бути більш жорсткими у міру зростання ризику. Визначення зазвичай поширюється на будь-якого дикого кабана з клінічними ознаками або ненормальною поведінкою або на будь-яку здобуту тварину з ураженнями (знайденими після розтину), або на будь-якого кабана, знайденого мертвим або вбитим у дорожніх інцидентах (особливо в районах з підвищеним ризиком).

Про підозру, що кабани може бути заражені, зазвичай повідомляють мисливці, хоча лісничі, туристи, грибники тощо. також можуть повідомити про це. Це залежить від країни, але мисливці можуть відігравати досить помітну роль у виявленні захворювання. Щоб заручитися їхньою співпрацею, буде потрібна певна мотивація, наприклад, гроші. Важливо, щоб кожен мисливець у районі ризику був навчений розпізнавати клінічні ознаки АЧС, щоб знати, який тип зразків взяти і як, своєчасно повідомити владу та знати, як позбутися туші. Мисливці повинні також забезпечити, щоб обробка будь-якого вбитого на полюванні кабана проходила у встановленому місці, а відходи або побічні продукти належним чином утилізувалися, наприклад, поміщалися в спеціальні контейнери або ями.

У разі виникнення підозри у зв'язку зі здоров'ям тварини мисливцям, можливо, доведеться покласти всю тушу на зберігання до холодильника (зазвичай у мисливській сморожці) до отримання лабораторних результатів.

Підозрілі туші, знайдені в лісі, слід, якщо це можливо, підібрати та перевезти (на автомобілі, санчатах тощо) у безпечне місце для спалювання чи утилізації. Крім того, вони можуть знищуватись на місці шляхом спалювання або поховання.

При клінічній підозрі слід негайно вжити таких заходів:

  • Зібрати дані про уражених тварин (кількість, вік, стать, патологоанатомічні ураження, місцезнаходження, тощо).
  • Забезпечити, щоб усі, хто був у контакті з тушею тварини, їхнє взуття, одяг та обладнання були продезінфіковані. Якщо ветеринарний лікар та інші співробітники вступають у контакт із хворими/мертвими тваринами або потенційно зараженими матеріалами, вони повинні використовувати засоби індивідуального захисту.
  • Провести клінічне обстеження та післязабійну експертизу тварин.
  • Взяти відповідні зразки і якнайшвидше доставити їх до лабораторії для діагностики (див. розділ «Лабораторна діагностика АЧС», стор. 39). У деяких випадках, особливо, якщо туші знаходяться у віддалених місцях, мисливці повинні самі взяти зразки.
  • Провести розслідування спалаху захворювання (епізоотологічне розслідування).
  • Повідомити сусідів про подію, щоб вони могли перевірити клінічні ознаки у своїх тварин і закрити їх.
  • Навіть після належного очищення та дезінфекції співробітники, які беруть участь у розслідуванні потенційно зараженого кабана через спалах захворювання, не повинні відвідувати ферми протягом принаймні 48 годин, щоб уникнути ненавмисного поширення хвороби.

При проведенні епізоотологічного розслідування за участю диких тварин протоколи відрізнятимуться від тих, які використовувалися на фермах з огляду на різні характеристики популяції. Опитаними будуть не власники тварин, а особи, які регулярно відвідують ліс, як, наприклад, керівник або члени місцевого мисливського клубу, місцеві лісничі тощо. Запитання можуть включати такі:

  • Хто полював у районі – і місцеві, і приїжджі мисливці?
  • За останній місяць чи два проводилися загонні полювання (із загонщиками)?
  • Якими є географічні межі заповідника?
  • Яка практика управління у заповіднику?
  • Якими є заходи біобезпеки?
  • Яка гігієна полювання?
  • Чи є якісь популяції свійських свиней у цьому районі?
  • Негайні дії на рівні ферми у разі підозрюваного спалаху

Стандартні операційні процедури (СОП) (GEMP, 2011)

СВП мають вирішальне значення для забезпечення належного розслідування підозрілих випадків. Вони повинні включати:

  • примітки щодо безпеки тих, хто веде розслідування, та власників тварин;
  • список обладнання, яке потрібно взяти, включаючи обладнання для відбору проб;
  • критерії для встановлення ступеня зараження зони та, виходячи з цього, біологічно безпечної точки входу;
  • вжиття запобіжних заходів біологічної безпеки при в'їзді та виїзді з цього місця;
  • обмеження після прибуття на переміщення худоби, продуктів, персоналу, транспортних засобів та обладнання;
  • необхідні обстеження (число та вид тварин); взяття зразків у тварин з аналогічними ознаками;
  • поводження із зразками;
  • порядок пересилання зразків для тестування; та - процедура для повідомлення проміжних висновків відповідній владі.

Спеціалізована діагностична команда (GEMP, 2011 р.)

Рекомендується, щоб було призначено спеціалізовану діагностичну команду (або команди), яка може бути негайно мобілізована. Члени команди повинні бути оснащені та готові для поїздки у короткий термін. На це завдання команді потрібно брати з собою все обладнання, необхідне для розслідування спалаху захворювання, збору та транспортування діагностичних зразків та швидкого зв'язку. Команда має виїхати на місце спалаху у супроводі місцевих ветеринарних співробітників, включаючи місцевого ветеринарного лікаря. Команда повинна провести клінічне обстеження, зібрати історію, зробити попереднє епізоотологічне розслідування, відстежити рух підозрілих тварин та зібрати широкий спектр діагностичних зразків, як за підозрюваним захворюванням, так і за будь-якими іншими ендемічними або екзотичними захворюваннями, які можуть бути включені в диференціальну діагностику. Команда має перевезти ці зразки до лабораторії. Вона повинна також вжити необхідних негайних заходів щодо контролю захворювання на місці спалаху і повинна мати юридичні повноваження на це. Крім того, вона повинна мати повноваження надавати негайні інструкції посадовим особам місцевого рівня з охорони здоров'я тварин. Команда повинна негайно повідомити обласному/регіональному ветеринарному лікарю та головному ветеринарному лікарю оцінку ситуації, включаючи кроки, здійснені для підтвердження діагнозу та рекомендації щодо стратегії подальшого контролю захворювання, включаючи встановлення інфікованих зон та зон спостереження. Склад діагностичної групи може змінюватись в залежності від обставин, але може включати:

  • ветеринарного патологоанатома із центральної чи регіональної ветеринарної діагностичної лабораторії;
  • спеціаліста епізоотолога, бажано з досвідом або професійною підготовкою в галузі транскордонних та емерджентних захворювань, і особливо в галузі підозрюваної хвороби;
  • ветеринара з великим досвідом з ендемічних захворювань;
  • будь-якого спеціаліста, необхідного для конкретних обстежень.

Відбір проб, упаковка та транспортування зразків

Цей практичний посібник призначений для польових та лабораторних команд

Відбір проб

Відправною точкою для будь-якого лабораторного дослідження АЧС є взяття проб. Важливим міркуванням є мета розслідування, наприклад, діагностика захворювання, спостереження за захворюванням або санітарна сертифікація. Те, у яких саме тварин потрібно брати проби, залежатиме від мети взяття даних зразків.

Наприклад, при розслідуванні спалаху (пасивне спостереження), цільова група - хворі та загиблі тварини, але якщо потрібно з'ясувати, чи схильні тварини хвороби (активний епінагляд), тоді брати проби потрібно у найстаріших тварин.

Ті співробітники, які беруть проби (і проводять клінічні огляди) повинні бути навчені тому, як знерухомити свиней (при клінічному огляді та відборі проб).

Група з відбору проб повинна привезти достатню кількість матеріалів та обладнання для відбору проб (див. вставку 4) у певної кількості тварин, причому необхідно мати резерв на той випадок, якщо матеріали/устаткування прийдуть у непридатність (наприклад, вакутейнери, що втратили герметичність тощо). .). Крім того, не забудьте взяти з собою все необхідне для збору даних, особистої охорони/біобезпеки та перевезення проб (див. розділ “Матеріали для транспортування зразків” у вставці 4).

Рекомендується використовувати польову форму відбору проб, щоб на місці зібрати всі необхідні зразки та інформацію. Якщо передбачається відправка зразків до регіональної/міжнародної референтної лабораторії, рекомендується взяти зразки у двох примірниках, щоб можна було відправити один комплект, та зберегти інший, тим самим уникаючи необхідності розморожувати та аліквотувати/розділяти зразки для їх відправлення.

Зразки слід брати з огородженням, застосовуючи правильні методи, щоб уникнути надмірного стресу і не травмувати тварину, і не нашкодити самому собі. Проби потрібно відбирати у стерильних умовах, щоб уникнути перехресної контамінації, при цьому для кожної окремої тварини завжди необхідно використовувати нові голки, щоб уникнути передачі захворювання. Усі зразки, які чекають на тестування, слід вважати інфікованими, і обходитися з ними відповідним чином. Усі матеріали, які використовувалися для взяття проб на фермі, необхідно утилізувати відповідно до національних правил, наприклад, завантажити в мішки та перевезти назад до лабораторії автоклавування/належної утилізації.

Діагностичні лабораторії вимагають, щоб зразки доставлялися в лабораторію в хорошому стані та мали чітке та перманентне маркування.

Типи зразків

а. Цілісна кров

Зробіть забір цільної крові з яремної вени, нижньої порожнистої вени або вушної вени, використовуючи стерильні пробірки (вакутайнери) з антикоагулянтом (ЕДТА – фіолетова пробка). Якщо тварина вже впала, кров можна взяти із серця, але це має бути зроблено негайно. Уникайте використання гепарину (зелена пробка), тому що це може інгібувати ПЛР та/або дати хибнопозитивний результат при ідентифікації реакції гемадсорбції (РГАд). Кров є цільовою пробою для виявлення вірусів за допомогою ПЛР та ізоляції вірусу. Плазма, відокремлена в процесі центрифугування, може використовуватися для виявлення антитіл за допомогою непрямого імунопероксидазного тесту (ІПТ) або непрямого методу антитіл флюоресціюючих (нМФА).

Мікрооб'ємна проба плям сухої крові (DBS) на картці з фільтрувального паперу є зручним способом для забору та зберігання крові для подальшого виявлення ДНК та/або антитіл. Ці картки є дуже корисними у віддалених районах або коли холодовий ланцюг не доступний, наприклад, в умовах полювання чи сільських районах у тропіках. Проте тести виявлення геному ВАЧС чи антитіл менш чутливі під час використання DBS, ніж під час використання цільної крові чи сироватки. Проби DBS - це забір кількох крапель крові за допомогою ланцету або стерильної голки від шприца з вени або шкіри на спеціально виготовлений абсорбуючий фільтрувальний папір (картку). Кров ретельно просочує папір і підсихає протягом кількох годин. Зразки зберігаються у пластикових мішках низької газопроникності з осушувачем, який додається зменшення вологості. Вони можуть зберігатися за кімнатної температури навіть у тропічному кліматі.

б. Сироватка

Зробіть забір цільної крові з яремної вени, нижньої порожнистої вени або вушної вени, або під час розтину з використанням стерильних вакутайнерів без антикоагулянту (червона пробка). При пересиланні в лабораторію для одержання сироватки кров потрібно інкубувати протягом 14-18 годин при 4±3 °С для відокремлення згустку. Згусток відкидається і після центрифугування протягом 10-15 хвилин виходить супернатант (сироватка). Якщо сироватка червоного кольору, це означає, що зразок гемолізований, а це може призвести до хибно-позитивної реакції в тесті ELISA. Гемоліз зазвичай виникає, коли тварина, наприклад дикий кабан, вже мертвий. Сироватка може бути негайно перевірена за допомогою методів виявлення антитіл та вірусу або зберігається при температурі<-70 °С до дальнейшего использования. Для обнаружения антител температура хранения может быть -20 °С, но для обнаружения вируса это не оптимально.

в. Зразки тканин та органів

Хоча всі органи та тканини свині можуть використовуватися для перевірки на наявність ВАЧС (головним чином у гострій та підгострій формах хвороби), переважними органами є селезінка, лімфатичні вузли, печінка, мигдалики, серце, легені та нирки. З них селезінка та лімфатичні вузли вважаються найважливішими, оскільки вони зазвичай містять велику кількість вірусу. Кістковий мозок також корисний у разі полеглих диких тварин, тому що він може бути єдиною тканиною, яка порівняно добре збереглася, якщо тварина була мертвою протягом деякого часу. Внутрішньосуглобові тканини суглобів можна досліджувати для перевірки наявності ізолятів низької вірулентності. Рекомендується зберігати зразки при 4 °С і доставити їх до лабораторії якнайшвидше (протягом 48 годин). Якщо це неможливо з технічних причин, зразки можуть зберігатися або в морозильній камері або рідкому азоті. Для гістопатологічного дослідження можна паралельно використовувати зразки в 10% буферному формаліні. І хоча вони не можуть використовуватися для подальшого дослідження ізоляції вірусу, їх можна застосовувати для ПЛР та імуногістохімічного дослідження.

Для виявлення вірусу за допомогою ПЛР, ізолювання вірусу та/або антигену за допомогою ЕЦБА, потрібно приготувати 10%(w/v) гомогенізовану суспензію тканини у фосфатно-сольовому буферному розчині. Після центрифугування рекомендується відфільтрувати супернатант і обробити його 0.1% антибіотиком протягом 1 години при температурі 4±3°С. Гомогенізовану суспензію тканини можна відразу використовувати для виявлення ВАЧС і геному, або зберігати при температурі< -70 °С для дальнейшего использования. Для ПЦР рекомендуется обработать разведенный 1/10 супернатант параллельно с неразведенным материалом. Экссудаты тканей, полученных, главным образом, из селезенки, печени и легких, очень полезны для проверки на наличие антител с использованием ИПТ и нМФА (Гайардо, 2015 г.).

м. Зразки м'якого кліща

М'яких кліщів Ornithodoros можна перевірити на наявність ВАЧС та геному. Кліщів можна знайти в норі африканського кабана, щілинах/отворах у свинарниках, а іноді й у норі гризунів усередині свинарників. Різні види кліщів мають різні місця і місце існування. Існує три методи для збору кліщів: ручний збір, уловлювання за допомогою вуглекислого газу та вакуум аспірація. Після збирання кліщі повинні залишатися живими або зберігатися в рідкому азоті для забезпечення оптимального збереження вірусу всередині кліщів та уникнення деградації ДНК.

Упаковка та транспортування зразків

Щоб отримати правильний діагноз, важливо відібрати потрібні зразки, ретельно їх упакувати, промаркувати та, контролюючи відповідну температуру, швидко переслати до лабораторії. Діагноз на АЧС є терміновим, і зразки мають бути відправлені до найближчої відповідної лабораторії найкоротшим маршрутом. Проби повинні супроводжуватися супровідним документом із зазначенням числа та типу зразків, виду тварин, місця відбору проб (адреса, округ, область, район, країна походження). Також слід перерахувати необхідні тести, ім'я особи, яка відсилає зразки, клінічні ознаки, що спостерігаються, значні ураження, захворюваність, смертність, кількість уражених тварин, історію і які типи тварин уражені. У разі домашніх тварин слід зазначити власника, назву ферми та тип господарства, а також надати список диференційних діагнозів. Необхідно подбати про те, щоб кожен зразок можна було пов'язати з тією твариною, від якої він був відібраний.

Однак, мінімальна необхідна інформація в різних лабораторіях може відрізнятися. Доцільно зателефонувати до лабораторії до відбору проб, щоб дотриматися правильної процедури відправки зразків, і щоб переконатися, що передбачена кількість зразків може бути проаналізована, або зразки повинні зберігатися протягом необхідного часу.

Зразки повинні прибути в лабораторію якнайшвидше, щоб уникнути погіршення їх якості та забезпечити найкращі результати. Вони повинні бути відправлені в умовах, що забезпечують безпеку, щоб уникнути зараження інших тварин або людей під час транспортування, а також щоб уникнути контамінації самих зразків. Надіслані зразки повинні бути доставлені з достатньою кількістю охолоджуючих матеріалів, наприклад, пакетів з льодом, щоб не допустити погіршення їх якості. Не забувайте, що точний діагноз можна встановити тільки тоді, коли зразки знаходяться в хорошому стані.

Наземний транспорт

При перевезенні зразків до найближчої лабораторії потрібно дотримуватись національних правил і норм, навіть якщо зразки перевозяться ветеринарними фахівцями. Для Європи основним документом є Європейська угода про міжнародне перевезення небезпечних вантажів дорогою (ADR). В інших регіонах повинні дотримуватися національних норм і правил.

Якщо таких немає, слід дотримуватись типових правил ООН, викладених у Посібнику МЕБ з діагностичних тестів та вакцин для наземних тварин (2016 р.; глави 1.1.2 та 1.1.3).

Потрійна упаковка має використовуватися навіть у разі автомобільного транспорту. Докладний приклад характеристик потрійного пакування наводиться на малюнку 27.

Повітряні перевезення

Зразки повинні перевозитися відповідно до правил3, з використанням системи «потрійної упаковки». Зокрема, якщо зразки перевозяться повітрям, відправник повинен керуватися Правилами міжнародного перевезення небезпечних вантажів (DGR) Міжнародної асоціації повітряного транспорту (IATA), і упаковка повинна відповідати Пакувальній інструкції 650 у DGR.

Діагностичні зразки африканської чуми свиней вважаються небезпечними - вони повинні бути правильно упаковані та марковані для запобігання розповсюдженню вірусу. Отже, необхідно використовувати матеріали, що відповідають технічним вимогам (тобто відповідним вимогам IATA щодо перевезення діагностичних зразків, таких, як тест під тиском 95 кПа, тест на падіння). Щоб знайти постачальників для таких ємностей та упаковок, напишете в пошуковій системі в Інтернеті такі ключові слова, як «95 кПа» та «UN3373» та «флакон», «пробірка» або «мішок», і в такий спосіб ви зможете отримати потрібну інформацію.

  • Первинні ємності. Зразки повинні зберігатися у герметичному, водонепроникному, стерильному контейнері (в так званій «первинній ємності»), як показано на малюнку 27. Кожна первинна ємність не повинна містити більше 1 літра. Кришка кожного контейнера має бути запечатана клейкою стрічкою або парафільмом. Ці первинні герметичні контейнери повинні бути окремо упаковані в амортизуючий і абсорбуючий матеріал, який, при можливому витоку з контейнерів або пробірок, може вбрати рідину і захистити від ударів. Важливо помітити кожен контейнер водостійким чорнилом, щоб можна було визначити ту тварину, у якої було взято зразок.
  • Вторинна упаковка. Всі ці первинні ємності повинні бути поміщені у вторинні, що не протікають, герметично закриті, водонепроникні контейнери, зроблені з пластику або металу. Вторинна упаковка повинна, не даючи витоку, витримувати внутрішній тиск 95 кПа (0,95 бар) в діапазоні температур від -40 до 55 °С. Абсорбуючий матеріал повинен поміщатися всередину другого контейнера. Якщо кілька крихких первинних судин поміщають в один вторинний контейнер, кожен з них повинен бути обернутий або відокремлений від інших, щоб уникнути зіткнення.

ПОПЕРЕДЖЕННЯ 1) сухий лід не можна поміщати всередину первинного або вторинного судин через небезпеку вибуху. 2) первинна ємність повинна бути здатна витримати, не даючи витоку, внутрішній тиск 95 кПа (0,95 бар) в діапазоні температур від 740 до 55 °С.

  • Тверда зовнішня упаковка. Вторинний контейнер повинен бути упакований у зовнішню тару з використанням відповідного матеріалу прокладки. Вона має успішно пройти випробування на падіння з висоти 1,2 м та мати спеціальне маркування UN3373. Зовнішня тара не повинна містити понад 4 літри рідини або більше 4 кг твердих речовин. Вказані кількості не включають лід, сухий лід або рідкий азот, які використовуються для підтримки зразків у холодному стані.

Зразки, що надсилаються при 4 °С, зазвичай при коротких перевезеннях (1 -2 дні)
Такі зразки, упаковані, як зазначено вище, повинні відправлятися з холодоагентами (у кількості, достатньому для підтримки потрібної температури) у теплоізольованій та надійній упаковці, відповідно до Пакувальної інструкції МАГАТЕ (IAEA) №650, якщо вони перевозяться повітрям.

Зразки, що надсилаються замороженими (-20 °С або -70 °С)
Для транспортування протягом більше трьох днів зразки повинні бути упаковані, як зазначено, з додаванням достатньої кількості сухого льоду в теплоізольовану упаковку для підтримки температури. Важливо забезпечити, щоб вторинна упаковка знаходилася в центрі коробки, тому що в міру «танення» сухого льоду вторинний контейнер може схуднути. Вуглекислий газ (СО2), що вивільняється в результаті «танення» сухого льоду, знижує рН і деактивує вірус; тому всі первинні та вторинні контейнери мають бути герметично запечатаними. При використанні сухого льоду для підтримки низької температури зразків під час транспортування зовнішня тара повинна передбачати випуск газу (тобто не повинна бути герметично запечатана), щоб запобігти підвищенню тиску, що може призвести до розриву тари. Ніколи не можна заморожувати цільну кров чи сироватку, що містить коагулянт.

1. Нанесення знаків небезпеки та маркування

Зовнішня частина коробки (жорсткої зовнішньої тари) повинна містити таке маркування:

  1. знак «Біологічна речовина Категорії Б» (рисунок 28) та належне транспортне найменування поруч: «Біологічна речовина, Категорія Б» (“Biological substance, Category B”);
  2. повне ім'я, адресу та номер телефону відправника;
  3. повне ім'я, адресу та номер телефону адресата;
  4. повне ім'я та номер телефону відповідальної особи, яка знає про перевезення, наприклад: відповідальна особа: ім'я, прізвище + 123 4567 890;
  5. наклейка з написом: "зберігати при температурі 4 градуси за Цельсієм" або "зберігати при температурі -70 градусів за Цельсієм".
    При використанні сухого льоду:
  6. знак «сухий лід» (рис. 29);
  7. Номер UN та належне транспортне найменування сухого льоду зі словами «ЯК ОХОДИТЬ». Вага нетто сухого льоду в кілограмах має бути чітко написана поруч (рисунок 29), наприклад: UN 1845, СУХИЙ ЛІД, ЯК ОХОЛОДЖИТЬ, ЧИСТА ВАГА ## КГ (UN 1845, DRY ICE, AS COOLANT, NET. ## KG).

2. документація

Проби, що відправляються в лабораторію, повинні супроводжуватися супровідним документом, форма якого була передана раніше цією лабораторією або, якщо такої немає, супровідним листом. Цей лист повинен включати інформацію про власника тварини, назву ферми та район, тип системи тваринництва, дані про уражену тварину/тварину, історію, клінічні ознаки та дані підкриття. Також необхідно вказати необхідні тести. Документація на перевезення: якщо вантаж перетинає національні кордони, іноді потрібний дозвіл на імпорт або дозвіл на експорт, а також копія дозволу лабораторією-отримувача, що вони можуть прийняти інфекційну речовину з метою діагностики тощо. Такі вимоги варіюються від держави до країни. Доцільно дізнатися заздалегідь у лабораторії одержувача, які документи необхідні імпорту діагностичних зразків.

3. Транспортування

Перед відправкою зразків якомога раніше зв'яжіться з лабораторією-одержувачем та поінформуйте їх про плановане відправлення, повідомте докладну інформацію, приблизну дату та час прибуття. Краще звернутися до кур'єрської служби, що надає послугу від -дверей до дверей, яка забезпечить доставку прямо в лабораторію. Як тільки зразки будуть відправлені, кур'єрська служба повинна надати лабораторії-отримувачу назву своєї компанії та поштовий ідентифікатор, номер накладної та/або авіанакладної, якщо такі є. Якщо зразки перевозяться повітрям, потрібно попередньо домовитися з лабораторією-отримувачем, щоб вони забрали вантаж після прибуття в аеропорт (деякі міжнародні лабораторії мають таку систему, але не всі). Лабораторії-отримувачу потрібно якнайшвидше повідомити назву авіакомпанії, номер рейсу та номер авіанакладної. Людям заборонено перевозити інфекційні речовини із собою у вигляді зареєстрованого багажу чи ручної поклажі, чи на собі.

Транспортування ізольованого/культивованого вірусу АЧС

Ізольований/культивований вірус АЧС повинен перевозитися як інфекційна речовина категорії А. Номер ООН – UN2900, належне транспортне найменування – «Інфекційні речовини, небезпечні для тварин (Infectious substances affecting animals) (African swin) . Повинна використовуватись упаковка відповідно до пакувальної інструкції 620. Відрізняються також знаки небезпеки та маркування на зовнішній стороні коробки.

Правила перевезення небезпечних вантажів вимагають, щоб усі співробітники, які беруть участь у перевезенні, проходили відповідну підготовку. Це особливо важливо при транспортуванні інфекційних речовин Категорії А, коли персонал повинен проходити підготовку відповідно до вимог, включаючи відвідування спеціальних курсів, складання іспитів та отримання сертифікату (терміном на два роки). Для отримання додаткової інформації зверніться до «Керівництва ВООЗ щодо перевезення інфекційних речовин».

Лабораторна діагностика АЧС

Оскільки вакцини немає, швидке і раніше виявлення захворювання має значення для здійснення суворих санітарних заходів і заходів біобезпеки метою запобігання поширення захворювання. Діагностика АЧС означає ідентифікацію тварин, які або раніше були інфікованими ВАЧС. Щоб отримати відповідну інформацію для здійснення програм контролю та ерадикації, необхідно поставити діагноз, що включає виявлення та ідентифікацію ВАЧС-специфічних антигенів або ДНК і антитіл. При виборі діагностичного тесту (Малюнок30) важливо враховувати перебіг захворювання. Оскільки тварини можуть бути на різній стадії захворювання, необхідно проводити тести, як щодо виявлення вірусу, так і виявлення антитіл під час спалахів і в програмах з контролю/ерадикації захворювання.

Інкубаційний період при природній інфекції варіює від 4 до 19 днів. Протягом двох днів до появи клінічних ознак АЧС-інфіковані тварини починають виділяти велику кількість вірусу. Вірусивиділення може змінюватись в залежності від вірулентності конкретного штаму ВАЧС. Серологічна конверсія відбувається на приблизно сьомий-дев'ятий день після інфікування, а антитіла можуть бути виявлені протягом всього життя тварини (мал. 30).

Позитивний тест на наявність вірусу (тобто антигену) вказує на те, що протестовані тварини під час взяття проб вже були інфіковані. З іншого боку, позитивний тест на антитіла ВАЧС вказує на поточну або минулу інфекцію, коли тварина одужала (і може залишатися серопозитивним все життя).

Починаючи з кінця 2015 року епізоотологічні серологічні дані у Східній Європі показали значне збільшення інцидентності серопозитивних тварин, що особливо помітно в популяції кабана в неблагополучних країнах ЄС. Ці результати показують, що деякі тварини виживають більше місяця і можуть одужувати від АЧС, а в деяких випадках навіть залишаючись інфікованими субклінічно, як раніше спостерігалося на Піренейському півострові, Північній і Південній Америці та в Африці. Тому методи виявлення антитіл необхідні отримання повної інформації для здійснення програм контролю та викорінення захворювання.

Виявлення вірусу АЧС

Виявлення геному ВАЧС за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР)
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) використовується для виявлення геному ВАЧС у зразках, взятих у свиней, (кров, органи і т.д.) та кліщів. Невеликі фрагменти вірусної ДНК ампліфікуються в ПЛР до виявлених кількостей. Усі валідовані тести ПЛР дозволяють виявити вірусну ДНК ще до появи клінічних ознак. ПЛР дозволяє діагностувати АЧС протягом кількох годин після прибуття зразків до лабораторії. У виявленні ВАЧС ПЛР є чутливою, специфічною та швидкою альтернативою ізоляції вірусу. ПЛР має більш високу чутливість і специфічність, ніж альтернативні методи виявлення антигену, такі, наприклад, як ензим-зв'язаний імуносорбентний метод (ELISA) або прямий метод флюоресціюючих антитіл (МФА). Однак надто висока чутливість ПЛР становить небезпеку перехресної контамінації, тому необхідно вжити належних запобіжних заходів і звести до мінімуму цей ризик.

Конвенційні ПЛР та ПЛР у режимі реального часу, що рекомендуються в Посібнику МЕБ з діагностичних тестів та вакцин для наземних тварин (2016 р.), повністю валідовані і є хорошими інструментами для рутинної діагностики цього захворювання. Інші тести ПЛР в реальному часі мають більшу чутливість, ніж рекомендовані Керівництвом МЕБ, і можуть бути використані для виявлення геному ВАЧС у тварин, що одужали. Різні набори праймерів і зондів, що використовуються в цих молекулярних методах, створені для ампліфікації локусу в районі кодування VP72, добре вивченому і високо консервативному ділянці геному ВАЧС. Широкий спектр ізолятів, що належать до всіх 22 відомих вірусних генотипів р72, може бути виявлений за допомогою цих ПЛР методів навіть в зразках, що інактивували або деградували.

ПЛР слід вибрати у разі надгострої, гострої або підгострої інфекції АЧС. Крім того, оскільки ПЛР виявляє вірусний геном, реакція може бути позитивною, навіть коли при ізолюванні вірусу ніякого вірусу не виявлено, що робить ПЛР дуже корисним інструментом для виявлення ДНК ВАЧС у свиней, інфікованих низько або помірно вірулентними штамами. Хоча за допомогою ПЛР неможливо визначити інфекційність вірусу, цей метод дозволяє отримати інформацію про його кількість.

Ізолювання вірусу АЧС
Ізолювання вірусу засноване на інокулюванні зразка у сприйнятливі первинні клітинні культури свинячого походження, моноцити та макрофаги. Якщо у зразку присутній ВАЧС, він буде реплікуватися у сприйнятливих клітинах, індукуючи цитопатичний ефект (ЦПЕ) в інфікованих клітинах. Пізи клітин і ЦПЕ зазвичай відбуваються після 4872 годин гемадсорбції. Важливість цього висновку полягає в його специфічності, тому що жоден з інших вірусів свиней не здатний до гемадсорбції в культурах лейкоцитів. Коли вірус реплікується у цих культурах, більшість штамів ВАНС викликають реакцію гемадсорбції (РГАд) внаслідок адсорбції червоних клітин крові свиней на лейкоцитах, інфікованих ВАНС, з утворенням так званих «розеток» (рис. 31).

Однак важливо відзначити, що ЦПЕ, за відсутності гемадсорбції, може бути викликаний цитотоксичністю інокуляту, наявністю інших вірусів, таких, як вірус хвороби Ауески, або негемадсорбуючим ізолятом ВАЧС. У цих випадках присутність ВАЧС у клітинному седименті має бути підтверджена іншими вірусологічними тестами, такими як МФА, або використовуючи ПЛР. Якщо жодних змін не спостерігається або якщо результати МФА та ПЛР негативні, супернатант має бути субинокульований у свіжі культури з проведенням до 375 пасажів, і тільки тоді можна виключити ВАНС.

Ізолювання вірусу та ідентифікація за допомогою РДАд рекомендуються як референтні тести для підтвердження позитивних результатів попереднього позитивного тесту на антигени (ELISA, ПЛР або МФА). Ці тести також рекомендують, коли АЧС вже була підтверджена іншими методами, особливо у разі першого спалаху АЧС у цьому районі. Крім того, ізолювання вірусу є обов'язковим, якщо ви маєте на меті отримання вірусного матеріалу для подальшої характеризації молекулярними та біологічними методами дослідження.

Виявлення антигену АЧС за допомогою прямого методу флуоресціюючих антитіл (МФА)
МФА може використовуватися виявлення антигену ВАЧС в тканинах свиней. Тест полягає у мікроскопічному виявленні вірусних антигенів на мазках-відбитках або тонких кріосрізах тканини органа. Внутрішньоклітинні антигени виявляються за допомогою специфічних антитіл, кон'югованих флуоресцеїн-ізотіаціанатом (FITC). МФА також може використовуватися для виявлення антигену ВАЧС у лейкоцитарних культурах, в яких не спостерігається РГАД, і таким чином можна визначити негемадсорбіруючі штами ВАЧС. За допомогою МФА можна також розрізнити ЦПЕ, викликане ВАЧС, і ЦПЕ, індуковане іншими вірусами або цитотоксичності посівного матеріалу. Позитивний та негативний контроль використовуються для забезпечення правильної інтерпретації мікроскопічних препаратів. Це високочутливий тест для випадків надгострої та гострої АЧС, і може проводитися досить швидко. Це надійний тест, але здебільшого його замінюють ПЛР, і реагенти не завжди доступні. Однак важливо відзначити, що при підгострій та хронічній формі захворювання чутливість МФА значно менша (40%).

Виявлення антигену АЧС за допомогою антиген-ELISA
Вірусні антигени також можуть бути виявлені за допомогою імуноферментного аналізу (ELISA), який дешевший, ніж ПЛР, він дозволяє великомасштабне тестування зразків протягом короткого часу без спеціального лабораторного обладнання.

Однак, як і у випадку з МФА, у підгострій та хронічній формі захворювання чутливість антиген-ELISA значно знижена. Крім того, польові зразки часто перебувають у поганому стані, і це також може зменшити чутливість тесту. Тому рекомендується використовувати антиген-ELISA (або будь-який інший тест ELISA) лише як «груповий» тест разом з іншими вірусологічними та серологічними тестами.

Виявлення антитіл АЧС

Серологічні аналізи є найчастіше використовуваними діагностичними тестами завдяки їх простоті, порівняно низькій вартості і тому, що вони вимагають великої кількості спеціалізованої апаратури чи лабораторії. Оскільки вакцини проти АЧС немає, наявність антитіл до ВАЧС завжди вказує на поточну чи минулу інфекції. Крім того, антитіла ВАЧС з'являються незабаром після інфекції та зберігаються протягом кількох років. Однак при надгострих та гострих інфекціях свині часто вмирають ще до того, як рівень антитіл досягне детектованого. Тому рекомендується відбирати зразки для виявлення вірусної ДНК вже на ранніх стадіях спалаху.

Для виявлення антитіл на АЧС рекомендуються такі тести: ELISA для скринінгу антитіл і, як підтверджують, імуноблотгінг (ІБ) або непрямий метод антитіл флуоресціюючих (нМФА). Непрямий імунопероксидазний тест (ІПТ) може використовуватися як альтернативний підтверджуючий тест для виявлення антитіл АЧС у сироватці та тканинному ексудаті. Він може застосовуватися при великій кількості зразків, що не вимагає дорогого флуоресцентного мікроскопічного обладнання, і забезпечує достатню чутливість.

Виявлення антитіл АЧС за допомогою тесту ELISA
ELISA - дуже корисний метод, що широко використовується у великомасштабних серологічних дослідженнях багатьох захворювань тварин. Деякі з найбільш видатних характеристик цього методу - висока чутливість і специфічність, швидкість виконання, низька вартість і легка інтерпретація результатів. Можна швидко проводити скринінг великих популяцій за допомогою автоматичного обладнання.

З метою виявлення антитіл до АЧС у зразках сироватки ELISA використовують мічення антитіл певними ферментами. Коли антиген і антитіло зв'язуються один з одним, фермент викликає реакцію, яка викликає зміну кольору, визначаючи тим самим наявність АЧС. В даний час для виявлення антитіл АЧС використовують цілу низку комерційних і всередині лабораторних методів, таких, як непрямий або блокуючий метод ELISA.

Неправильно оброблена або погано збережена сироватка (через неадекватне зберігання або транспортування) та гемолізовані зразки можуть дати до 20% хибно-позитивних результатів. Таким чином, всі позитивні та сумнівні зразки після тесту ELISA повинні бути тестовані альтернативними методами, що підтверджують серологічні.

Метод імунноблотингу (ІБ) є швидким та чутливим аналізом для виявлення та характеризації білків. У ньому використовується специфічне детермінуюче розпізнавання антиген-антитіло. У цьому тесті використовуються антигенні смужки, які несуть вірусні антигени. Тест включає солюбілізацію, електрофоретичний поділ і перенесення білків на мембрани (зазвичай використовується нітроцелюлоза). На мембрану нашаровуються первинні антитіла до специфічної мішені і потім мічені вторинні антитіла для візуалізації позитивної реакції.

Перші вірусні білки, що індукують АЧС-специфічні антитіла у свиней, незмінно реагують на ІХ у всіх інфікованих тварин. У тварин реакції стають позитивними з сироватками, отриманими від тварин через 7-9 днів після інфікування і аж до декількох місяців після інфікування. Сироватки тварин, вакцинованих проти інших вірусів, можуть давати хибно-позитивні реакції. У таких випадках слід використовувати альтернативні підтверджуючі методи, такі як ІПТ або МФА.

Виявлення антитіл АЧС за допомогою методу непрямих флуоресціюючих антитіл (нМФА)
Тест заснований на виявленні антитіл АЧС, пов'язаних з моношаром клітин з нирки зеленої африканської мавпи, інфікованих адаптованим ВАЧС. Реакцію антиген-антитіло детектують за допомогою кон'югату, міченого флуоресцеїном. Позитивні зразки демонструють специфічну флуоресценцію у цитоплазмі інфікованих клітин. нМФА є швидким методом виявлення антитіл АЧС у сироватці, плазмі або тканинному ексудаті, має високу чутливість та специфічність.

Виявлення антитіл АЧС за допомогою непрямого імунопероксидазного тесгу (ІПТ)
ІПТ є імуноьцитохімічним методом на фіксованих клітинах для визначення формування комплексу антиген-антитіло під впливом пероксидази. У цьому методі клітини нирки зеленої мавпи інфікуються ізолятом ВАЧС, адаптованим до цих культур клітин. Заражені клітини фіксуються та використовуються як антигени для визначення наявності специфічних антитіл проти АЧС у зразках. Як і МФА, ІПТ є швидким, високочутливим та високоспецифічним методом виявлення антитіл АЧС у сироватці, плазмі або тканинному ексудаті. Інтерпретація результатів легша, ніж у МФА, завдяки системі ферментативної візуалізації, що застосовується.

Підсумовуючи, можна сказати, що сучасні діагностичні тести дають змогу впевнено діагностувати АЧС, комбінуючи методи виявлення як вірусу, так і антитіл. ПЛР в режимі реального часу є широко використовуваним методом вірусологічної діагностики для чутливого, специфічного і швидкого виявлення ДНК ВАЧС. Через можливість перехресної контамінації один позитивний результат ПЛР від однієї тварини з природного довкілля (наприклад, дикого кабана) або один позитивний результат ПЛР від однієї групи тварин повинні бути підтверджені додатковими вірусологічними тестами в комбінації з серологічними, патологоанатомічними та епізоотологічними результатами. Оскільки ПЛР виявляє присутність вірусної ДНК, а не живого вірусу, рекомендується здійснити ізолювання вірусу з інфікованих зразків до підтвердження спалаху захворювання, якщо вражений новий регіон.

З огляду на обмеження різних методів валідовані тести ЄЦБА є оптимальним методом виявлення антитіл АЧС, особливо для скринінгу зразків сироватки. Такі підтверджуючі тести, як ІБ, нМФА або ІПТ, є ключовими для визначення хибно-позитивних результатів ЄЦБА. Крім того, нМФА та ІПТ є рекомендованими методами аналізу тканинних ексудатів та зразків плазми, забезпечуючи повну епізоотологічну картину та дозволяючи визначити час інфекції.

Точний діагноз АЧС повинен бути заснований на вірусологічних та серологічних результатах, а також клінічних, патологоанатомічних та епізоотологічних даних. У таблиці 5 наведено характеристики основних лабораторних методів діагностики АЧС.

Запобігання та контроль

Африканська чума свиней відрізняється від більшості інших транскордонних захворювань тварин тим, що для запобігання або лікування цього захворювання не існує вакцини або ліків. Тому особливо важливо, щоб регіони, вільні від цього захворювання, залишалися такими й у майбутньому. Запобігання занесення ВАЧС у популяції домашніх і диких свиней, контроль і викорінення цього захворювання відразу ж після виявлення є найкращими способами мінімізації після цієї хвороби. Існують, однак, також успішні приклади викорінення АЧС, наприклад, у Бразилії, Португалії, Іспанії чи Кот-д'Івуарі.

Профілактика починається із запровадження жорстких заходів на кордоні та підвищення обізнаності всіх зацікавлених сторін. Раннє виявлення, рання діагностика, раннє реагування та хороша комунікація надзвичайно важливі для мінімізації поширення захворювання після замету. Щоб зрозуміти, які заходи будуть найефективнішими, важливо пам'ятати, як передається АЧС: тобто. в першу чергу, при переміщенні зараженої свинини та продуктів із неї (інфікування відбувається після поїдання); при прямому контакті живих тварин, включаючи диких свиней; і через укуси кліщів Ornithodoros.

Заходи можуть бути вжиті на інституційному чи індивідуальному (наприклад, фермер) рівні, більшість цих заходів передбачає поліпшення біологічної безпеки. Дії щодо запобігання та контролю можуть бути здійснені за допомогою приватних чи громадських ініціатив, але досягнення оптимального рівня зазвичай потребує поєднання обох. Фермери відіграють ключову роль, але вони можуть потребувати технічної та фінансової підтримки.

Для отримання більш детальної інформації ви можете ознайомитися з двома посібниками ФАО: Належна практика управління в умовах надзвичайних ситуацій (GEMP): Основи (ФАО, 2011 р.), та Належна практика забезпечення біологічної безпеки в секторі свинарства (ФАО, 2010 р.).

Поінформованість
Підвищення рівня обізнаності, а також надання інформації/технічної допомоги та навчання всіх зацікавлених сторін безпосередньо впливають на здійснення всіх заходів щодо профілактики захворювання, контролю та спостереження. Тому підвищення поінформованості вважається найбільш доцільним заходом з погляду витрат. Інформованість допомагає виробникам свиней приймати оперативні, ефективні рішення під час здійснення заходів профілактики та контролю.

Особи, які перебувають у контакті зі свинями, повинні бути поінформовані про те, як профілактувати та реагувати на АЧС. До них належать ветеринари і селяни, і навіть всі, хто бере участь у ринковій ланцюжку, тобто. особи, які беруть участь у перевезенні, продажу, вибої та обробці свиней; постачальники послуг (наприклад, приватні ветеринари, дистриб'ютори кормів тощо); і в деяких випадках – широка громадськість. У разі диких кабанів мисливці, лісники та працівники служби лісозаготівель також є цільовою аудиторією.

Дуже важливо встановити регулярні контакти між ветеринарною службою (професійними співробітниками або пара-професіоналами) та тваринниками/учасниками торгового ланцюжка. Це мають бути не лише звичайні візити, а й «виїзди додому» для розслідування та надання допомоги у зв'язку із захворюванням. Таким чином, фермери набудуть впевненості, і будуть звертатися за офіційною ветеринарною допомогою, коли зіткнуться з незвичайними та потенційно руйнівними захворюваннями, як АЧС. Цей підхід знизу вгору також дозволить врахувати думку фермерів при розробці інструментів запобігання, управління та стратегії. Для тих країн, в яких приватний сектор є постачальником офіційних ветеринарних послуг, необхідна додаткова взаємодія між ними та ветеринарною владою (GEMP, 2011).

Усі зацікавлені сторони повинні бути обізнані про потенційну серйозність АЧС, про те, як виявити та запобігти її (тобто клінічна картина), та про необхідність негайно повідомляти про будь-які підозри АЧС у ветеринарну службу (тобто пасивне спостереження). Останнє має особливо велике значення, оскільки фермери можуть сприймати загибель велику кількість свиней як «нормальне» явище. Слід також інформувати про заходи щодо скорочення ймовірності зараження. Необхідно підкреслювати, насамперед для дрібних господарств та приватного сектора, небезпеку годування харчовими відходами та про інші порушення біобезпеки. У разі занесення АЧС до країни це питання має бути добре висвітлене у пресі, при цьому необхідно підкреслити, як важливо зміцнити біобезпеку на всіх рівнях, регулярно перевіряти свиней, а також оперативно доповідати владі про підозрілі поразки та загибель свиней. Навіть інформація про політику контролю, наприклад, про забій тварин, компенсацію та поповнення поголів'я, допоможе фермерам зрозуміти їх роль у цьому процесі та зміцнить їхню готовність до співпраці.

Часто нехтують ті, хто торгує худобою, трейдери та дилери, незважаючи на те, що це важлива цільова група, яку необхідно інформувати. Рух тварин, який здійснюється трейдерами, часто є ключовим фактором поширення таких епізоотичних захворювань, як АЧС. Створити атмосферу довіри між ветеринарною владою та тими, хто бере участь у торгівлі тваринами, так само важливо, як і з фермерами. Основні теми повинні бути спільні, хоча тут слід наголошувати на важливості придбання тварин з регіонів, вільних від захворювання, щоб вони не купували і не продавали хворих свиней або свиней з таких груп, де були випадки захворювання, і щоб вони дотримувалися правил карантину, вакцинації , тестування, ідентифікації тварин та їх обліку При цьому слід наголошувати на потенційних наслідках АЧС для внутрішньої та міжнародної торгівлі (GEMP, 2011 р.).

Розробка та розповсюдження інформації, а також навчання здійснюються, головним чином, державними органами (а іноді й НУО) через службу розповсюдження сільськогосподарських знань та інформаційно-агітаційних послуг, а не приватним сектором. Існує безліч методів повідомлення інформації, наприклад, листівки, буклети, плакати, ТБ і радіоповідомлення, зустрічі, організовані релігійними лідерами або сільськими старостами і т.д. Формат залежить від цільової групи. У деяких випадках, однак, потрібна ретельніша підготовка. Щодо матеріалів поінформованості, існує кілька форматів: від онлайнових курсів до традиційних очних тренінгів. Коли виникає необхідність надати інформацію великому числу людей, модель підготовки інструкторів може бути найкращим підходом. Цей підхід також має назву «каскадних тренінгів», оскільки ці програми призначені для навчання людей, які, у свою чергу, навчатимуть інших.

Запобігання
Ризик занесення ВАЧС (або будь-якого іншого патогену) зменшується, якщо належна практика біологічної безпеки застосовується не тільки на фермі, але на кожному етапі ланцюжка поставок, наприклад, на ринках, де торгують живими тваринами, скотобійнями, транспортуванні тварин і т.д. Особлива увага має приділятися малим комерційним операціям, наприклад, на приватному обійсті, які характеризуються низькими стандартами біобезпеки, ринкам, куди стікаються тварини з багатьох джерел. Вони є ключовими поглядами поширення АЧС, і, хоча до них застосовуються такі ж концепції біобезпеки, спеціально для них були розроблені конкретні заходи та інструкції.

Заходи біологічної безпеки повинні використовуватися для того, щоб уникнути проникнення патогенів у стадо або на ферму (зовнішня біобезпека), а також, щоб запобігти або уповільнити поширення хвороби у неінфікованих тварин у стаді або на фермі вже після потрапляння інфекції (внутрішня біобезпека) та припинити зараження інших приміщень або диких свиней. З встановленими урядом правилами з біобезпеки на фермах потреби та очікування варіюються залежно від системи господарювання та місцевих географічних та соціально-економічних умов (від великомасштабних, закритих ферм до маленьких сільських свинячих господарств з тваринами на підніжному кормі). Питання глобальної біобезпеки актуальні для всіх виробничих систем, але особливо велику проблему вони становлять для дрібних домашніх господарств у країнах і країнах з перехідною економікою. Однак широкий спектр варіантів для покращення біологічної безпеки, наприклад, іноді таких простих, як покращення обліку, означає, що всі ферми можуть покращити практику профілактики та контролю за захворюванням.

Можливість фермерів щодо забезпечення заходів біобезпеки на фермі залежить від характеристик їхньої виробничої системи, їх технічних знань та фінансових ресурсів. Ті, хто відповідає за покращення програм біобезпеки, повинні мати досконалі знання про різні системи та розуміти людей, які займаються свинарством, наприклад, чому вони тримають тварин і які ресурси вони мають. Зважаючи на ці фактори, вони зможуть розробити стратегії зі стійкого забезпечення біобезпеки на фермах та в рамках виробничих та збутових ланцюжків.

Існують відмінності між заходами біобезпеки на фермі до спалаху (біологічне недопущення) та після того, як спалах стався (біологічне стримування), хоча ці заходи належної профілактики та управління тісно пов'язані. Щоб відрізнити методи профілактики АЧС від загальної профілактики захворювань необхідно враховувати шляхи передачі АЧС. Нижче наведено деякі з найважливіших заходів для забезпечення біобезпеки. Докладнішу інформацію про біобезпеку можна отримати з Посібника ФАТ «Належна практика забезпечення біологічної безпеки в секторі свинарства».

Годування харчовими покидьками
Корм є важливою контрольною точкою для поширення як АЧС, так і інших захворювань. За своєю природою харчові відходи є зручним, доступним, але дуже небезпечним способом годівлі. Годування харчовими покидьками є дуже високий ризик потенційного зараження здорової популяції свиней цілим рядом захворювання. Ефективний заборона годування харчовими покидьками був ідеальним рішенням, та його дотримання лише на рівні домашніх господарств малоймовірно, оскільки це суперечить головному мотиву утримання свиней, тобто. мінімум витрат на годівлю завдяки харчовим відходам чи підніжному корму. У будь-якому випадку свиням не можна давати харчові відходи, що містять свинину, їх потрібно кип'ятити протягом 30 хвилин, періодично помішуючи, і давати свиням охолодженими.

Обмеження переміщення свиней
Слід заохочувати будівництво таких свинарників, які дають змогу підтримувати гігієнічні умови. Також, огороджений периметр перешкоджатиме прямому контакту та поширенню потенційного захворювання від домашніх свиней до кабанів (і диких свиней) і, навпаки, від диких африканських свиней до домашніх свиней. Захищений периметр також може обмежити доступ диких і домашніх свиней до сміття, покидьків або туш тварин, які можуть бути заражені. Огорожа не тільки утримує домашніх свиней усередині будівлі, а диких - поза нею, але вона також повинна йти під землю на глибину, принаймні півметра, оскільки свині можуть прорити землю під огорожею. Загалом влада повинна перешкоджати створенню свинарських господарств із утриманням свиней на підніжному кормі, оскільки саме вони забезпечують свиням доступ до потенційно заражених покидьків або останків тварин, дозволяють контактувати з інфікованими дикими кабанами, іншими свинями на вільному вигулі або дикими свинями.

Однак, як і годування харчовими відходами, традиційні способи утримання свиней змінити нелегко, оскільки багато господарств можуть вирішити, що за таких умов немає сенсу тримати (і годувати) свиней. Значна частина сектору свинарства функціонує за рахунок того, що свині можуть знаходитись на вільному випасі. Таким чином, будь-який крок на шляху створення більш закритої системи, з подальшим збільшенням витрат на корми, швидше за все, спричинить опір багатьох дрібних фермерів.

Важко впровадити систему ефективної біобезпеки, якщо свині більшу частину дня вільно риються у покидьках. Однак деякі прості запобіжні заходи при мінімальних витратах грошей і часу все ж таки можна рекомендувати. Можна застосовувати огорожі по периметру навколо всього села, тому що свині водному і тому ж селі, як передбачається, мають однаковий статус здоров'я. Хоча, і це рішення не завжди практичне. Корисно відзначити переваги ізоляції для запобігання крадіжкам, дорожньо-транспортним пригодам та хижакам. Загалом, при дотриманні біобезпеки в господарствах просто неба необхідно приділяти більше уваги контролю кормів, води та пасовищ, а також дикої природи та людей відвідувачів.

Очищення та дезінфекція
На фермі необхідно часто прибирати та дезінфікувати обладнання та приміщення. Свинарники, обладнання, транспортні засоби та ін. Перед дезінфекцією слід очистити від органічного забруднення. Співробітники та транспортні засоби (взуття, обладнання тощо) повинні бути продезінфіковані на вході/в'їзді на ферму та виході/виїзді з ферми. Дезинфікуючі засоби, ефективність яких була доведена, включають миючі засоби, гіпохлорити та глютаровий альдегід. ВАЧС чутливий до ефіру та хлороформу. Вірус інактивується за допомогою 8/1000 їдкого натру (30 хвилин), гіпохлоритами - 2,3% хлору (30 хвилин), 3/1000 формаліну (30 хвилин), 3% ортофенілфенолу (30 хвилин) та сполук Йоду (МЕБ, 2013 р.). .). Ефективні комерційних продуктів також доступні. Слід враховувати вплив цих агентів на довкілля. Устаткування, яке нелегко дезінфікувати, слід впливати на сонячне світло.

Інші заходи біологічної безпеки

  • Кількість відвідувачів повинна бути зведена до мінімуму, вони можуть допускатися тільки після очищення та дезінфекції взуття або зміни одягу та взуття, особливо у випадку відвідувачів з високим ризиком, таких, як власники худоби та співробітники ветеринарної служби. Люди, які працюють зі свинями, повинні уникати контактів з іншими популяціями свиней.
  • Транспортні засоби не повинні в'їжджати на ферму, і навантаження та розвантаження свиней, зокрема, повинні здійснюватись поза периметром огородження. Вантажівки, що перевозили свиней, мають бути очищені та продезінфіковані після розвантаження.
  • Не слід обмінюватися обладнанням між фермами/селами без попереднього належного очищення та дезінфекції.
  • Робочим потрібно надавати виділений тільки для цієї мети робочий одяг та взуття.
  • Якщо це можливо на практиці, ферми повинні функціонувати як закриті стада, з обмеженим надходженням нових тварин.
  • Нещодавно придбані тварини повинні надходити з надійних джерел та проходити карантин (тобто утримуватися в ізоляції з метою спостереження) принаймні протягом 14 днів.
  • Ферми повинні бути один від одного на відповідній відстані.
  • У вирощуванні свиней слід дотримуватись вікової сегрегації (за системою “пусго-зайнято”).
  • Мертві свині, стічні води та частини туші, що залишилися після забою, повинні утилізуватися належним чином, у місці, недоступному для диких свиней і домашніх свиней на вигулі.
  • Не слід повертати на ферму свиней, які побували на ринку живих тварин. Однак, якщо їх привезли назад, поки вона, їх потрібно витримати у карантині протягом 14 днів перед введенням у стадо.
  • Персонал повинен бути навчений правил належної санітарної та гігієнічної практики та розпізнавання захворювання.
  • Не можна допускати знаходження диких птахів, сільськогосподарських шкідників та інших тварин поблизу свинарників, кормів для тварин та систем водопостачання.

Аналіз ризиків та імпортно-експортні процедури
Концепція біобезпеки також може застосовуватися на національному рівні. Як і на фермі, перешкодити проникненню АЧС у вільні від цієї інфекції країни можна тільки на основі строгої політики безпечного ввезення свиней та продукції підвищеного ризику, тобто. свинини та свинячих продуктів, свинячий сперми, шкір і т.д. Такі превентивні заходи сприяють зменшенню частоти виникнення захворювання та його наслідку. Детальні керівні принципи можна знайти в Міжнародному ветеринарному кодексі наземних тварин МЕБ (2016 р.). GEMP (2011 р.) передбачає наступне:

  • Слід підтримувати належний рівень інформованості для раннього сповіщення про зміни у поширенні та епізоотології у неблагополучних країнах та у торгових партнерів. Слід збирати інформацію про точки ввезення в країну свиней і ланцюжків поставок свинини, розподіл господарств згідно з їх виробничим циклом, диких свиней, купівлю-продаж тварин, скотобійни тощо. Ці дані допоможуть провести аналіз ризиків усіх потенційних маршрутів ввезення та розповсюдження. Це має проводитися на регулярній основі та залежно від оцінки ризиків. Заходи, що вживаються, повинні бути динамічними і відповідати ступеню ризику.
  • Запобігти занесення збудника захворювання в рамках законного імпорту за допомогою додаткових цілеспрямованих обмежень відповідно до визнаних міжнародних стандартів. Обмеження в імпорті дозволять знизити ризики, що існують у торгівлі, і забезпечити максимальну ефективність «карантинного бар'єру».
  • Митниця, регуляторні органи та служба карантину мають ефективно «перехоплювати» незаконні/нерегульовані харчові продукти та інші небезпечні матеріали у міжнародних аеропортах, морських портах та пунктах перетину кордону. Конфісковані матеріали слід знищувати або безпечно утилізувати, а не кидати в межах досяжності людей та тварин. Нещодавні події показують, що особливу увагу слід приділяти належному знищенню харчових відходів з літаків, суден або транспортних засобів, які прибули з неблагополучних країн, переважно шляхом спалювання або, якщо це можливо, шляхом переробки нехарчової тваринної сировини.
  • Розглянути можливість тестування продукції на певні хвороби, що викликають побоювання, до та після її ввезення залежно від рівня ризику.
  • Створити та розширити транскордонний обмін інформацією із сусідніми урядами.

Контроль
При виникненні підозри про спалах захворювання, важливо вжити відповідних негайних заходів. Ветеринари, а також власники ферми, робітники та інші зацікавлені особи повинні зробити все можливе для стримування та запобігання подальшому розповсюдженню цього захворювання. Через те, що інфіковані АЧС тварини починають поширювати вірус за 48 годин до появи клінічних ознак, ліквідація корму, підстилок та тварин (як живих, так і забитих) із заражених приміщень має вирішальне значення.

Після того, як хвороба була виявлена ​​та підтверджена, необхідно:

  1. вдатися до плану дій у надзвичайних ситуаціях;
  2. оцінити початковий спалах (наприклад, розмір, географічне поширення, епізоотологію) та визначити, які заходи контролю можуть знадобитися;
  3. здійснювати заходи контролю оперативно та повною мірою;
  4. стежити за прогресом та коригувати політику;
  5. продовжувати обмін інформацією та даними із сусідніми адміністраціями;
  6. підтримувати зв'язок із громадськістю та всіма зацікавленими сторонами, включаючи МЕБ (GEMP, 2011 р.).

Застосовувані заходи щодо контролю та викорінення захворювання значно залежатимуть, принаймні спочатку, від того, як широко поширилося захворювання і наскільки серйозною виявилася інкурсія до того моменту, поки воно не було виявлено. Чим ширше поширення захворювання і чим більше ферм воно вразило, тим менша ймовірність того, що забої виявиться ефективним як засіб викорінення. Забої є найбільш ефективним заходом, коли його можна здійснити протягом перших кількох днів. Для цього потрібно швидко виявити захворювання, і здійснити забої постраждалих тварин відразу після виявлення, за що виплачується компенсація. Якщо це неможливо здійснити, то, ймовірно, потрібно буде ввести контроль переміщення тварин та інші дії. Тому надзвичайно важливо встановити географічне поширення та кількість постраждалих ферм на початку спалаху (тобто епінагляд). Зазвичай так званий «індекс-кейс» (перший виявлений випадки) насправді не є першим (GEMP, 2011).

Не менш важливими є дії і на заключному етапі, коли клінічні прояви захворювання припинилися. Якщо вогнища інфекції залишилися непоміченими, можна звести нанівець результати кампанії з викорінення захворювання. Не можна втрачати пильність або припиняти зусилля зі спостереження та контролю, коли клінічні прояви захворювання, начебто, зникли, і соціально-економічних втрат уже немає. Якщо передчасно припинити нагляд, АЧС може спалахнути знову.

Планування дій у надзвичайній обстановці (GEMP, 2011 р.)

Підготовка до надзвичайної ситуації є ключем ефективного вирішення надзвичайних ситуацій. Однак підготовка має проводитися на етапі попередження, тобто у «мирний час». Важливо домовитися заздалегідь і чітке розуміння того, хто за що відповідає, і створити єдиний порядок підпорядкування та лінії зв'язку. У час розподіл відповідальності часто відбувається інакше. Ключовою перевагою планування є те, що воно заздалегідь визначає тих людей, які братимуть участь у процесі та змушують їх ретельно продумувати ті проблеми, які можуть виникнути. Це дозволяє запобігти можливим помилкам або недоопрацюванням ще до спалаху.

Участь фермерів може зробити значний внесок у надзвичайне планування. Сільські громади більш схильні співпрацювати в надзвичайних обставинах, якщо вони бачать, що вживаються швидкі та рішучі заходи, і що вони, зрештою, принесуть їм лише користь. Вони також повинні усвідомлювати, що вони зробили свій внесок у планування, і що їхня думка була врахована.

Ці плани та інструкції є «живими» документами, які повинні регулярно (принаймні кожні п'ять років) переглядатися та оновлюватися, щоб відобразити будь-які зміни, що відбулися за цей час.

Учасники повинні регулярно проходити навчання у зв'язку з питаннями виявлення захворювання, звітності та процедур реагування, розслідування спалахів та аналізу тощо. Регулярні симуляційні та польові тренінги за участю всіх зацікавлених сторін допомагають здійсненню на практиці надзвичайних планів та оперативних інструкцій. Регулярне навчання та практика є ключовим аспектом у справі підтримки реальної здатності щодо здійснення контролю, а також усунення прогалин у існуючій системі.

Правові рамки (GEMP 2011 р.)

Для вжиття швидких заходів щодо контролю захворювання потрібні відповідні правові повноваження. Вони включають право увійти на ферму (з метою спостереження, профілактики та контролю), забити і знищити інфікованих і контактували тварин, встановити карантин і контроль за переміщенням, визначити інфіковані зони і зони карантинних обмеження, надати компенсацію і т.д.

Наділення правовими повноваженнями потребує часу, тому вони мають бути встановлені у «мирний час». Оскільки неможливо розробити набір правил для кожного захворювання, повинен існувати загальний набір правових повноважень та положень, що належать до перелічених у списку захворювань, що підлягають повідомленню та контролю.

Іноді виникає необхідність заручитися підтримкою поліції та правоохоронних органів, наприклад, при обмеженні переміщення худоби, встановлення карантину та захисту персоналу.

У країнах із федеральною системою по всій території країни має діяти єдине та узгоджене законодавство. Те саме повинно дотримуватися між країнами в регіонах безмитної торгівлі (тобто необмеженої зовнішньої торгівлі) тваринами та продуктами тваринного походження, наприклад, в Економічному співтоваристві західноафриканських держав (ЄСОУУАБ), Спільноті розвитку країн Південної Африки (БАВС), Спільному ринку східної та південноафриканських держав (СОМЕБА), Східноафриканському співтоваристві (ЄАС), Євразійському економічному союзі (ЄЕС) або Європейському союзі (ЄС).

Фінансування (GEMP, 2011 р.)

Досвід показав, що затримка в отриманні фінансування є однією з основних перешкод швидкого реагування при несподіваних спалахах захворювання. Негайне застосування навіть скромних сум допоможе уникнути значних витрат надалі. Тому перспективне фінансове планування є важливим компонентом забезпечення готовності. Фінансовий план повинен охоплювати як поточні витрати (наприклад, нагляд, аналіз ризиків), так і витрати, які можуть виникнути під час надзвичайної ситуації (наприклад, контроль). Такі витрати мають бути включені до Плану дій при надзвичайній ситуації.

Фінансові кошти можуть охоплювати вартість всієї кампанії. Зазвичай, вони охоплюють лише початкові етапи, витрачання подальших коштів відбувається після перегляду кампанії та коштів, необхідні завершення ліквідації захворювання. У деяких країнах було б доцільніше, якби кошти на здійснення надзвичайних програм проти деяких захворювань надавалися не лише урядом, а й приватним сектором (спільне покриття витрат).

Комунікація
Важливим аспектом контролю захворювання є зв'язок із зацікавленими сторонами на всіх рівнях, від фермерів до широкого загалу. Найкраще домовитися, хто даватиме інтерв'ю, та обмежуватиме спілкування, надаючи інформацію лише присвяченим та підготовленим особам.

Управління переміщенням
Поширення АЧС в основному відбувається внаслідок людської діяльності, а не через переміщення диких кабанів чи інших переносників інфекції. Поширення захворювання через переміщення живих тварин та продуктів тваринного походження можна контролювати, обмеживши їх пересування, що має підтримуватись законодавством. Найкраще, якщо самі власники тварин або продуктів тваринного походження зрозуміють, що дотримання вимог служить їх інтересам.

На жаль, досить часто при виникненні підозри про спалах захворювання свинарі поспішають продати тварин на забій. Продаж зараженого м'яса хворих тварин є серйозним ризиком. Хворі свині, що знаходяться навіть в інкубаційному періоді захворювання, можуть поширювати АЧС, особливо якщо тварину продають живою.

Після спалаху чи підозрюваного випадку на фермі необхідно якнайшвидше запровадити строгий карантин, тобто. ні свині, ні свиняче м'ясо, ні потенційно заражені матеріали не повинні залишати ферму. Ніхто не повинен залишати ферму, не переодягнувшись або не продезінфікувавши одяг та взуття. Свиней на вільному випасі слід загнати до приміщення та закрити.

У районі спалаху (зони обмеження) влада повинна запобігти будь-якій незаконній торгівлі мертвими або хворими тваринами та продуктами їх переробки. Точні межі цих зон обмежень не обов'язково повинні мати форму кола, але їх слід брати до уваги та використовувати природні бар'єри та адміністративні кордони, а також будь-яку відповідну інформацію. Межі цих зон мають бути чітко позначені дорожніми знаками.

Різні зони та періоди обмеження руху тварин можуть створюватися для запобігання поширенню захворювання. Такі обмеження будуть найефективнішими, якщо вони мають мінімальний вплив на власників тварин. Рекомендується, щоб:

  1. всі свинарські господарства були зареєстровані, і було проведено реєстрацію всіх тварин;
  2. всі сприйнятливі тварини у цих господарствах регулярно проходили ветеринарний огляд;
  3. сприйнятливих тварин (або продукти їхньої переробки) не вивозили за межі господарства;
  4. винятком є ​​вимушений забої під офіційним наглядом.

Огляд тварин та створення контрольно-пропускних пунктів є важливою частиною процесу здійснення контролю за рухом. Проте контрольно-пропускні пункти на основних дорогах можуть спричинити неприйнятні порушення руху транспорту або бути надто дорогими. Крім того, свиней можуть вивезти із зони обмеження контрабандним шляхом, сховавши їх у транспортні засоби, або по другорядних дорогах, що не охороняються (GEMP, 2011 р.).

Санітарний забій та утилізація
Інфіковані і тварини, що активно поширюють вірус, є найбільшим джерелом ВАЧС. Такі тварини можуть призвести до непрямого зараження, контамінуючи предмети (фоміти), включаючи транспортні засоби, одяг і, зокрема, взуття. Реплікація ВАНС припиняється, коли тварина гине. Тим не менш, туші тварин можуть залишатися контамінованими протягом тривалого періоду після смерті, звідси виникає необхідність їх оперативного та ефективного знищення (GEMP, 2011).

Санітарний забої (стемпінг-аут) включає в себе забої заражених тварин, плюс, як правило, всіх інших сприйнятливих тварин на фермі і іноді в сусідніх господарствах або контактах, тобто. тих, хто опинився в контакті через переміщення тварин, людей чи транспортних засобів. Дуже рідко виробляють вибої широких масштабів, зокрема кільцевої, виключно на основі географічного розташування. Забою тварин повинен проводитися на місцях та гуманно, використовуючи щадні методи. Виробничі потужності при такому масовому вибої можуть бути перевантажені, тому необхідно ретельне планування ресурсів, обладнання та персоналу. Це особливо вірно, коли йдеться про санітарний забій великих комерційних стад свиней.

Після завершення санітарного забою туші повинні утилізуватися дома, якщо це можливо, безпечним способом, тобто. вони повинні бути спалені, компостовані, перероблені або поховані, щоб запобігти доступу до них диких свиней, диких кабанів та інших падальників (включаючи людей). Утилізація великої кількості свиней у короткий час становить велику проблему і з погляду логістики, і з погляду екології.

Єдиною серйозною проблемою у зв'язку із санітарним убоєм є те, що власники свиней заперечують проти вибою тварин за відсутності своєчасної та адекватної компенсації. Без відповідних механізмів компенсації цілком імовірно, що фермери не завжди сповіщатимуть про спалахи захворювання, і хвороба поширюватиметься через незаконне переміщення заражених тварин та продуктів. Тому жодні кампанії з санітарного забою не можуть застосовуватися за відсутності належної програми компенсації.

Очищення та дезінфекція
Знищення туш повинно супроводжуватися ретельним очищенням та дезінфекцією всіх приміщень, транспортних засобів та обладнання. Хоча дезінфекція відповідними речовинами допомагає усунути вірус, АЧС може виживати в багатому білком середовищі протягом тривалих періодів часу та в різних умовах.

Органічні речовини повинні бути видалені зі свинарників, з обладнання, транспортних засобів та з усіх поверхонь, що були в контакті із зараженим матеріалом. Автомобілі (особливо днище кузова, підстилка, якщо перевозили живих свиней, кузов) та співробітники (взуття, обладнання тощо) повинні бути очищені і потім продезінфіковані на вході/в'їзді та виході/виїзді з ферм.

Перевірені ефективні дезінфікуючі засоби включають детергенти, гіпохлорити та глутаральдегіди. ВАЧС чутливий до ефіру та хлороформу. Вірус інактивується розчином 8/1000 їдкого натру (30 хвилин), гіпохлоритами – 2,3% хлору (30 хвилин), 3/1000 формаліну (30 хвилин), 3% ортофенілфенолу (30 хвилин) та сполуками Йоду (МЕБ, 2013). ). Ефективні комерційних продуктів також доступні. Слід враховувати вплив цих агентів на довкілля. Устаткування, яке складно дезінфікувати, слід впливати на сонячне світло.

Компенсація (GEMP, 2011 р.)

Політика компенсації є наріжним каменем будь-якої політики в галузі контролю за захворюванням, яка вимагає забою тварин або знищення майна. Компенсація є ключовим аспектом у тому, щоб фермери своєчасно повідомляли владу про спалах. У той час як компенсацію деякі можуть вважати дорогим заходом, стимули, які вона створює для раннього та швидкого оповіщення, дозволять знизити загальний розмір витрат на ліквідацію спалаху. Загалом це ймовірна можливість заощадити гроші.

Компенсація може набувати різних форм, які широко обговорювалися та обговорюються. Для реалізації точної стратегії компенсації необхідно ретельно проаналізувати всі аспекти з урахуванням місцевого контексту та за участю всіх зацікавлених осіб. Компенсація може бути готівкою або товарами, наприклад, заміна тварин. Але незалежно від виду компенсації - готівкою або твариною, з фермерами треба попередньо проконсультуватися, якщо це можливо, до спалаху. Перевагою коштів є те, що це дозволяє тваринникам вибрати тип та кількість тварин, яких вони хочуть купити, і, що не менш важливо, час. Однак виплата готівки може призвести до корупції та крадіжки.

Компенсація повинна виплачуватись за будь-яких тварин, убитих у рамках обов'язкового забою, незалежно від того, чи були вони інфіковані чи вбиті через можливий контакт з інфекцією, чи заради благополуччя тварин, як іноді трапляється. Насправді уряд купує тварин і потім вбиває їх. Компенсація також має виплачуватись за товари та майно, знищені під час обов'язкової кампанії санітарного забою. Враховуючи те, що компенсація в першу чергу повинна сприяти тому, щоб фермери своєчасно сповіщали про спалах захворювання, вона не повинна виплачуватись за тварин, які померли або були вбиті виробником до того, як спалах захворювання був підтверджений.

Компенсація ефективна лише тоді, коли вона виплачується невдовзі після понесених втрат. Тому необхідно заздалегідь планувати, як виплачуватиметься компенсація тим, хто має на це право.

Суми компенсації повинні ґрунтуватися на справедливій ринковій ціні тварин на період вибою, і там, де це можливо, їхній повній ринковій вартості. Однак деякі фахівці рекомендують, щоб компенсація була трохи нижче ринкової вартості, стверджуючи, що фермери також повинні вносити свій внесок у розмірі, наприклад, 10%. Неадекватні або надто щедрі механізми компенсації можуть заохочувати такі форми поведінки, які завдають шкоди системі контролю.

Відсутність адекватної та своєчасної компенсації за забої тварин може призвести до:

  1. тому, що про спалах не повідомлять;
  2. забою тварин фермерами для власного споживання чи продажу;
  3. приховування тварин або їх переміщення до інших приміщень;
  4. неправильної утилізації туші тварини у місцях, доступних для домашніх чи диких свиней.

Надто щедра компенсація може заохочувати нечесних фермерів, які розраховують на те, що якщо тварини заразяться, вони отримають компенсацію.

Найбільш серйозні втрати виробники зазнають через виробничі втрати під час спалаху, а не через загиблих тварин, або обмеження на переміщення (наприклад, через те, що вони не в змозі продати тварин). Однак ці втрати не передбачувані, тому що вони залежать від загальної тривалості та тяжкості спалаху. Таким чином, необхідні інші механізми підтримки (наприклад, фінансові та соціальні, крім компенсації), які слід внести до плану надання допомоги постраждалим фермерам.

Поповнення поголів'я

Після того, як хвороба була ліквідована, наступним кроком у системі управління АЧС є відновлення виробництва на фермі чи регіоні. Після потужного спалаху деякі власники не бажають заповнювати поголів'я або продовжувати розведення сільськогосподарських тварин. Але більшість селян все ж таки хочуть повернутися до традиційного способу життя і поповнити поголів'я свиней.

Перш ніж розпочинати цей процес, слід переконатися, що патоген на фермі знищений. Цього можна досягти шляхом очищення та дезінфекції, які слід провести двічі. Крім того, бажано покращити систему біобезпеки на фермі до поповнення поголів'я. Після очищення та дезінфекції порожніх приміщень повинно пройти не менше 40 днів, але цей період завжди залежить від ситуації, що склалася, і його можна встановити тільки після аналізу ризиків. Якщо вводять індикаторних свиней (сентинелів), що рекомендується, то за станом тварин необхідно спостерігати (клінічно та серологічно) з метою виявлення можливих реінфекцій. Якщо після закінчення 40 днів ознак інфекції немає, то цих свиней-сентинелів можна використовувати як частину програми поповнення поголів'я.

Свиней для поповнення поголів'я, якщо це можливо, слід купувати в тому самому районі або по сусідству. Такі тварини пристосовані до місцевих умов, і фермери зазвичай добре знайомі з їхніми потребами. Купівля з декількох джерел означає покупку тварин, які мають різний стан здоров'я та імунний статус. Змішування різних тварин створює стресову ситуацію і може призвести до перехресної інфекції.

Контроль кліщів

Ліквідація кліщів Ornithodoros у заражених свинарниках є важким завданням, особливо коли йдеться про старі приміщення, через довголіття кліщів, їхню витривалість і здатність ховатися в таких тріщинах, в які акарициди не можуть проникнути. Руйнування довкілля (наприклад, обробка тріщин, де ховаються кліщі або будівництво нових об'єктів з матеріалів, що не мають тріщин) допомагає знизити їх чисельність і можливість передачі інфекції. Заражені приміщення не повинні використовуватися як свинарники. Вони повинні бути ізольовані таким чином, щоб свині не могли в них увійти, або зруйновані та перебудовані в будь-якому іншому місці. Якщо фермери здатні перебудувати раніше контаміновані приміщення, це слід зробити. Це також слушний момент, щоб розглянути можливість підвищення рівня біологічної безпеки.

Акарициди та інші пестициди можуть застосовуватися для дезінфекції підстилки або, залежно від продукту безпосередньо на шкіру свиней.

Оскільки комахи, що кровоссуть, можуть механічно поширювати вірус АЧС в стаді, рекомендується проводити програми контролю комах у заражених приміщеннях.

Управління дикою природою

Немає жодних реальних заходів, які можна було б вжити для запобігання передачі АЧС у популяціях диких свиней та кліщів Ornithodoros. Єдиним варіантом є здійснення превентивних заходів захисту домашніх свиней від зараження. У деяких районах південної та східної Африки, де має місце лісовий цикл інфікування, спорудження відповідних огорож або постійних приміщень для домашніх свиней успішно продемонструвало повний захист - протягом століття. Огородження і стіни повинні йти глибоко в землю, принаймні, на 0,5 м для запобігання доступу африканським кабанам, що риють землю. Рекомендована висота огорожі становить 1,8 метра. Крім того, в Південній Африці в тих районах, де має місце лісовий цикл зараження, контроль за кліщами Ornithodoros у африканських кабанів і в норах здійснюється по периметру ферм.

Якщо АЧС вражає популяцію диких кабанів чи свиней, здійснення ефективного контролю стає набагато складнішим. Стратегія полягає в тому, щоб звести до мінімуму контакт між дикими кабанами та домашніми свинями за допомогою огородження свинарників, обмежуючи кількість свиней на вільному випасі чи диких свиней та забезпечуючи належну утилізацію кухонних відходів та останків забитих тварин. Існують різні точки зору у зв'язку з тим, як краще налагодити контроль АЧС у популяціях дикого кабана. Видалення туш кабанів під час епідемії, подальше знезараження цих районів, хоч і є дорогими методами, широко та успішно застосовуються у Східній Європі. Інтенсивне полювання може бути контрпродуктивним, оскільки це може підштовхнути кабанів до переміщення до інших районів. Підживлення може утримати дикого кабана в межах відомої, чітко визначеної області, обмежуючи таким чином розосередження диких кабанів та розсіювання вірусу. Однак, підживлення також сприятиме тісному контакту між тваринами, сприяючи цим передачі захворювання. Огородження відкритих територій, щоб уникнути руху диких тварин, є важкою і дорогою справою не лише з погляду споруди, а й підтримки. Це заважає руху та міграції в дикій природі, і його ефективність є сумнівною, оскільки дикі свині зможуть знайти свій шлях під огорожею або над парканом. Використання засобів відлякування також проблематичне. Мисливці та мисливські клуби, а також служби лісового господарства є важливими партнерами у нагляді та контролі АЧС у популяціях дикого кабана.

Зонування та компартменталізація

Коли захворювання є тільки в одній частині країни, зонування стає важливою стратегією поступової ліквідації та викорінення вірусу, що не заважає торгівлі з вільних від захворювання зон. Для застосування зонування національній владі необхідно визначити інфіковані зони та вільні від захворювання зони та забезпечити жорсткий контроль за переміщенням свиней та продукції між ними. Компартменталізація є іншим підходом, заснованим на створенні суб-популяції зі своїм власним ланцюжком поставок за загальної системи управління біобезпекою. Ці суб-популяції чітко визначені та відокремлені від інших суб-популяцій, з іншим чи потенційно іншим статусом. Компартменталізація дуже підходить для комерційних свиноферм та дозволяє продовжувати ділову активність навіть у зоні зараження. Витрати та відповідальність за компартменти лягають на плечі виробника та його постачальників, але моніторинг та дозволи залишаються відповідальністю компетентних ветеринарних органів.

Кіра Столетова

Африканська чума свиней - це вірусне захворювання з дуже високим рівнем смертності, безпечне для людей. Синоніми – хвороба Монтгомері, лихоманка африканська, південноафриканська свиняча чума, АЧС. Патологія дуже небезпечна, швидко поширюється та призводить до великих економічних втрат. Клінічні симптоми бувають слабо вираженими, підтвердити остаточний діагноз може лабораторна діагностика. Лікування хворі тварини сьогодні не підлягають, для попередження проводять профілактичні заходи.

Етіологія хвороби

Що таке африканська чума та яким збудником вона викликається. Причиною патології є вірус, генетичний матеріал якого міститься в ДНК із сімейства Асфавірида, роду Асфівірус. Даний вірус має приголомшливу стійкість до різних несприятливих впливів довкілля:

  • виживає при рН від 2 до 13 одиниць (як у кислому, так і в лужному середовищі);
  • у соліннях і копченостях залишаються активними тижні, а то й місяці;
  • при температурі 5 ° С виживає протягом 7 років;
  • при температурі 18-20 ° С - 18 місяців;
  • при температурі 37 ° С - 30 днів;
  • під час пастеризації при температурі 60°З виживає 10 хвилин;
  • у свинячих трупах живе від 17 днів до 10 тижнів;
  • у калі – 160 діб, у сечі – до 60 днів;
  • у ґрунті протягом літньо-осіннього періоду може зберігатися до 112 днів, взимку та навесні - до 200 днів.

У зв'язку з такою високою стійкістю вірусу африканська чума свиней та збудник хвороби можуть перевозитись на дуже великі відстані. Знищити його можна лише спалюючи трупи свиней, використовуючи високі дози дезінфікуючих засобів (гашене вапно, формальдегід тощо). Крім того, вірус надзвичайно вірулентний, навіть невеликі дози можуть спричиняти гостре захворювання.

Епідеміологія

Перші випадки захворювання було зафіксовано на початку ХХ століття у Південній Африці, звідти воно поширилося на Португалію, Іспанію та інші країни південної Європи. У 70-80 рр. патологія була зареєстрована в Південній та Північній Америці, СРСР. Нині хвороба є серйозною загрозою, через неї свиней майже не вирощують в Африці, їхнє поголів'я скорочується в Європі та Америці. 2007 року спалах був зафіксований у Грузії, 2015 року - в Україні, з 2008 року африканська чума, як повідомляють ветеринарні служби, регулярно реєструється в європейській частині Росії.

Джерелом патології є хворі свині та вірусоносії. Навіть якщо тварина одужує, вона продовжує виділяти збудника до кінця життя, тому в осередку епізоотії знищують усі поголів'я. Природним осередком є ​​африканські види свиней, насамперед диких. У них інфекція протікає у прихованій та хронічній формі, дуже рідко – у гострій. Домашні свині сприйнятливіші до вірусу, особливо європейські породи. Навіть серед диких кабанів у Європі смертність перебуває на тому ж рівні, що й серед одомашнених.

Передається вірус африканської чуми свиней повітряно-краплинним, аліментарним шляхом. Основні предмети та речі, через які заражаються свині, - вода та їжа (особливо корми, в яких використовують м'ясо тварин), предмети догляду, заражена підстилка. Вірус може переноситися з одягом та взуттям людей, які доглядають хворих свинками. Нерідко вірус потрапляє у кров через кліщів, що є його природним резервуаром. Переносити заразу можуть мухи та інші комахи, які смокчуть кров. Нерідко механічним шляхом збудника розносять домашні пернаті та гризуни.

Патогенез хвороби

Сприйнятливість домашніх свиней до вірусу дуже висока, тому хвороба така небезпечна. Збудник потрапляє в організм через слизові та шкіру навіть з мікроскопічними ушкодженнями, іноді проникає в кров при укусах комах. З місця проникнення вірус потрапляє до клітин імунної системи (макрофаги, нейтрофіли, моноцити), а також до ендотеліальних клітин кровоносних судин. У цих структурах відбувається розмноження збудника.

Після реплікації вірус виходить із клітин, руйнуючи їх. У судинах та лімфатичних вузлах виникають осередки некрозу. Проникність судин різко підвищується, у тому просвіті утворюються тромби, навколо пошкоджених структур розвивається запалення. У різних органах виявляються наркотизовані лімфатичні вузлики. Внаслідок ураження імунної системи різко знижується здатність організму свині до захисту та опірності іншим захворюванням. Маніфестують симптоми африканської чуми, що швидко призводять до смерті тварини.

Клініка африканської чуми

Інкубаційний період триває 5-10 діб. Хвороба свиней вірусна африканська чума може протікати у трьох формах: блискавичної, гострої та хронічної. У першому випадку вона триває 2-3 дні та у 100% закінчується смертю. Перші симптоми та ознаки африканської чуми у свиней у таких випадках не встигають розвиватися. Цілком здорове ввечері стадо фермер може вранці виявити мертвим.

У другому випадку клінічні прояви більш виражені.

Вирізняють такі ознаки африканської чуми свиней:

  • лихоманка до 40-42 ° С;
  • кашель, свинка починає задихатися;
  • блювота із вкрапленнями крові;
  • задні ноги паралізує;
  • запор, рідше – кров'яна діарея;
  • з носових ходів та вічко тече прозора, гнійна чи кров'яниста рідина;
  • на стегнах з внутрішньої сторони, біля вух, на животі видно фіолетові плями, що не світлішають при натисканні;
  • синці видно на кон'юнктиві, небі, мові;
  • у деяких місцях можуть з'явитися гнійні пустули та виразки.

Хвора свинка намагається забитися в дальній кут сараю, вона лежить на боці, не піднімається на ноги, хвостик у неї розкручується. Вагітні свиноматки при зараженні втрачають поросят. За 1-3 доби до смерті температура тварин знижується.

Африканська чума у ​​свиней у хронічній та безсимптомній формі протікає вкрай рідко та слабо проявляється. Такі варіанти найбільш типові для диких видів у природних осередках захворювання. Клінічна картина не виражена, тварини за такого перебігу патології поступово слабшають, страждають запорами, вони мають незначні симптоми бронхіту. Іноді на шкірі та слизових виявляються точкові крововиливи або плями. Хронічна хвороба може закінчитись одужанням, але вірус у крові зберігається, свині назавжди залишаються його носіями. Коли виявлено ознаки затяжної патології у свинок, обов'язково проводиться лабораторна діагностика.

Патологоанатомічні зміни та діагностика

За підозри на АЧС обов'язково проводять вибірковий огляд трупів. Патологоанатомічні зміни та ознаки гістологічної африканської чуми наступні:

  • Шкіра на животі, під грудьми, за вухами, з внутрішніх боків стегон червона або фіолетова.
  • Рот, ніс, трахеї заповнені піною рожевого кольору.
  • Лімфатичні вузли сильно збільшені, малюнок на мармуровому зрізі, видно множинні крововиливи, іноді вузол нагадує суцільну гематому з чорними згустками.
  • Селезінка велика, з множинними крововиливами, ділянками некрозу.
  • Нирки також збільшеними з геморагіями в паренхімі та на стінках розширених ниркових балій.
  • Легкі переповнені кров'ю, відтінок сірий із червоним, у паренхімі множинні синці, є симптоми пневмонії, між альвеолами виявляються фіброзні тяжі (ознаки фіброзного запалення).
  • Печінка переповнена кров'ю, значно збільшена, колір сірий із глинистим відтінком, нерівномірний.
  • Слизова кишок та шлунка набрякає, на них виявляють геморагії.
  • При хронічній патології виявляється бронхіт з обох боків, збільшення лімфатичних вузликів у легенях.
  • При безсимптомній формі видно лише зміни у лімфовузлах: вони мають мармуровий малюнок.

Африканська чума свиней має симптоми, схожі на звичайну чуму цього виду тварин. Щоб розрізнити два захворювання, обов'язково проводиться лабораторна діагностика. Використовується метод ПЛР, флуоресцентних антитіл, гемадсорбції. Також проводять біологічні проби, матеріал хворих тварин вводять свиням, вакцинованим від звичайної чуми. Якщо вони проявляється патологія, діагноз підтверджують.

Лікування та профілактика

Специфічне лікування, як і вакцина, на сьогодні не придумані. Не дозволяється навіть намагатися лікувати свинок за допомогою симптоматичних препаратів, оскільки вони продовжуватимуть виділяти збудників. Профілактика африканської чуми у свиней складається із заходів в осередку та попередження занесення вірусів з інших місць.

Заходи в осередку

Якщо у свиней виявляються хоч найменші ознаки можливої ​​АЧС, вся череда підлягає знищенню. Попередньо проводиться лабораторна діагностика для підтвердження діагнозу. Особливо у тих випадках, коли клінічна картина не до кінця зрозуміла. Заходи, що проводяться в осередку підтвердженої інфекції, складаються з наступних пунктів:

  • На двори та ферми, в яких виявлено африканську чуму свиней, накладається суворий карантин.
  • Усіх тварин убивають будь-яким безкровним методом.
  • Усі туші спалюють, при цьому не можна їх вивозити з місця, на яке накладено карантин.
  • Бажано спалювати трупи разом зі свинарником та підсобними приміщеннями.
  • Знищенню підлягає також інвентар, залишки кормів, підстилки, одяг людей, які доглядають свиней.
  • Золу змішують із гашеним вапном і закопують на глибину не менше метра.
  • Приміщення, які неможливо спалити, ретельно дезінфікують. Використовують їдкий натр 3% або формальдегід 2%.
  • Такі самі заходи проводяться на всіх свинофермах, які знаходяться в радіусі 25 км від зараженої зони, вбивають навіть цілком здорових свиней.
  • На всій території проводять знищення кліщів та інших комах, гризунів, бродячих звірів.
  • Поки триває карантин (загалом 40 діб) межі зони не можна вивозити і продавати будь-які продукти, отримані від тварин (не обов'язково м'ясо свиней).
  • Протягом 6 місяців після моменту, коли стався спалах, заборонено вивозити та продавати будь-яку рослинну сільськогосподарську продукцію.
  • Свиней не можна розводити протягом року по всій території карантину, весь цей час існує небезпека виникнення повторного спалаху.

Забезпечити проведення заходів мають ветеринарні служби, для цього існують певні статті закону у Росії та інших країнах. Такі суворі правила та заходи боротьби дозволяють хоча б частково призупинити поширення захворювання на інші регіони. На жаль, вони завдають господарствам величезної економічної шкоди. У багатьох країнах розроблено систему матеріальної компенсації, але вона не покриває всіх втрат. Як проводяться заходи у вогнищі інфекції, можна подивитися на відео.

  • Необхідно виключити перебування у свинарниках сторонніх людей.
  • Свиней найкраще тримати без вигулу.
  • У приміщеннях регулярно проводиться дератизація та дезінсекція.
  • Годують тварин виключно промисловими кормами, які проходять обробку не нижче, ніж за 80°С.
  • Господарства захищають від проникнення диких птахів та тварин, бродячих собак та котів.
  • Не можна використовувати у хліві інвентар, який не пройшов спеціальної обробки.
  • Весь транспорт, який потрапляє на територію ферми, має ретельно оброблятись.
  • Забій свиней проводиться на спеціальних пунктах, де тварин та туші оглядають ветеринарні лікарі.
  • Купувати тварин можна лише в тих випадках, коли вони мають усі ветеринарні сертифікати.
  • Перед покупкою необхідно дізнатися, чи немає АЧС у районі.
  • Від інших захворювань тварин прищеплюють.
  • Якщо у тварини виникли ті чи інші симптоми, обов'язково повідомити ветеринарну службу.

Деякі запитують, чи африканська чума свиней небезпечна для людини чи ні? Для людей захворювання небезпеки не становить. Але разом із продуктами воно може передаватися іншим свиням у регіоні. Особливо у випадках, коли тварин годують відходами харчової промисловості. Тому з неблагополучних територій заборонено вивозити будь-які продукти, навіть якщо їх ніхто не збирається продавати.

Африканська чума свиней (АЧС)

(коротка довідкова інформація для керівників та працівників свинарських підприємств, а також громадян, які містять свиней на особистих подвір'ях)

АФРИКАНСЬКА чума свиней (африканська лихоманка , східноафриканська чума , хвороба Монтгомері) - особливо небезпечна висококонтагіознавірусна хвороба домашніх і диких свиней, що характеризується швидким поширенням, високим ступенем летальності уражених тварин та високою економічною шкодою.

Африканська чума свиней небезпеки для життя та здоров'я людей не становить!

Епізоотологічна обстановка у Росії

З 2007 року на даний час АЧС зареєстрована на території 21 суб'єкта Російської Федерації. З того часу досі виявлено 235 неблагополучних пунктів та 25 інфікованих вірусом об'єктів. У 2011 році АЧС вперше виявлена ​​в Ленінградській, Мурманській, Архангельській, Тверській, Курській, Нижегородській, Костромській, Саратовській, Оребурзькій областях, в Республіці Калмикія. Особливо гостра ситуація щодо АЧСяк і раніше зберігається в Краснодарському краї та Ростовській області. У 2011 році на Кубані через АЧС знищено близько 67 тис. свиней, збитки оцінюються в 1 млрд. рублів.

Джерела збудника хвороби

Джерелами збудника хвороби є хворі та перехворілі на свині. Вірусоносійство в окремих тварин триває до 2 років і більше. З організму заражених тварин вірус виділяється з кров'ю при носовій та інших видах кровотеч, фекаліями, сечею, секретами слизових оболонок носової порожнини, слиною. Тварини заражаються переважно при поїданні кормів, уражених вірусом. Інфікування можливе також респіраторним шляхом, через пошкоджену шкіру та через укуси заражених кліщів – переносників та резервуарів вірусу АЧС, в організмі яких цей вірус зберігається багато років.

Вірус поширюється зараженими тваринами-вірусоносіями, у тому числі такими, що знаходяться в інкубаційному періоді, а також через різні інфіковані об'єкти. Особливу небезпеку становлять продукти забою заражених свиней (м'ясо, м'ясопродукти, сало, кров, кістки, шкіри та ін.)

Інфіковані вірусом харчові та боєнські відходи, що використовуються для годування свиней без ретельного проварювання – основна причина зараження свиней африканською чумою. Здорові тварини заражаються при сумісному утриманні з хворими та вірусоносіями, а також при знаходженні в інфікованих приміщеннях та транспортних засобах. Вірус можуть розповсюджувати люди, різні види свійських та диких тварин, комахи, гризуни, які перебували на інфікованих територіях.

Стійкість вірусу АЧС

Вірус стійкий до фізичних та хімічних факторів. При температурі 5°Сзберігається до 7 років, 18 ° С - до 18 міс., 37 ° С - 30 днів, 50 ° С - 60 хв., 60 ° С - 10 хв., При мінусових температурах - кілька років. Ефір руйнує вірус протягом 15 хв. Формалін, фенольні та хлорвмісні препарати швидко руйнують вірус. Збудник зберігається у трупах свиней до 10 тижнів, у м'ясі від хворих тварин – до 155 днів, у копченій шинці – до 5 міс., у гною – до 3 міс.

Африканська чума свиней (АЧС, хвороба Монтгомері) - контагіозна хвороба, що протікає гостро, підгостро, хронічно, безсимптомно і характеризується лихоманкою, геморагічним діатезом, запальними та некродистрофічними змінами паренхіматозних органів. Хвороба зареєстрована в Африці, Іспанії, Португалії, Франції, Бразилії та на Кубі. Хворіють свині різного віку та порід у будь-яку пору року. Вірус описаний Монтгомері у 1921 р., виділений в окрему родину.

Клінічні ознаки та патологоанатомічні зміни.Вони подібні до таких при КЧС. АЧС виявлялася у вигляді інтенсивної геморагічної септицемії - дуже контагіозної, швидко протікає хвороби, що викликає загибель всіх контамінованих тварин. У природних умовах інкубаційний період триває 5-7 днів, в експерименті термін його варіював залежно від штаму та дози вірусу. Розрізняють надгострий, гострий, підгострий, хронічний і латентний перебіг хвороби. Частіше спостерігають надгострий і гострий перебіг.

При НадгострийПротягом температура тіла у хворої тварини підвищується до 405-42 ° С, сильно виражені пригнічення і задишка. Тварина більше лежить, а через 24-72 години гине. При Гостром(Найхарактернішому) перебігу хвороби температура підвищується до 40,5-42 ° С і знижується за один день до загибелі тварини. Поруч із підвищенням температури з'являються перші симптоми хвороби: пригнічений стан, парез задніх кінцівок. З'являються червоно-фіолетові плями на шкірі вух, рила, черева, промежини та нижній частині шиї. Паралельно виявляються ознаки запалення легень: дихання стає коротким, частим, уривчастим, іноді супроводжується кашлем. Симптоми розладу травлення виражені слабо: зазвичай спостерігається тривала запор, кал буває твердим, покритий слизом. У деяких випадках спостерігається пронос із кров'ю. В атональній стадії хвороби тварини знаходяться в коматозному стані, який триває 24-48 год, температура тіла знижується нижче за норму і через 4-10 днів з моменту підвищення температури тварина гине.

ПідгостреТечія по симптоматології подібна до гострим, але ознаки хвороби розвиваються менш інтенсивно. Хвороба триває 15-20 днів, свині зазвичай гинуть. У одиничних особин, що вижили, розвивається хронічний перебіг хвороби, який характеризується переміжною лихоманкою, виснаженням, зупинкою росту, м'якими безболісними набряками в суглобах зап'ястя, плюсни, фаланг, підшкірних тканин морди і нижньої щелепи, некрозами шкіри, кератитами. Тварини хворіють 2-15 місяців, загибель, як правило, настає після залучення до інфекційного процесу легень. Клінічно більшість виздоровілих тварин перетворюються на здорових носіїв збудника, т. е. вони розвивається латентне протягом АЧС. Патогенез хронічної течії АЧС має деяку подібність з такими хворобами як ІНАН, алеутська хвороба норок та ін. Остання, мабуть, обумовлена ​​постійною антигенною стимуляцією персистуючим вірусом, оскільки він виділяється з органів більшості хронічно інфікованих тварин і його титр корелює з підвищенням рівня гаммаглобулінів та AT.

В останні 20 років у Португалії, Іспанії, Анголі та інших країнах відбулася зміна форми прояву АЧС – летальність значно знизилася, зросла кількість випадків інаппарантної інфекції, латентного носійства.

Латентна течіяХарактерно для природних носіїв вірусу – бородавників, лісових та чагарникових свиней в Африці та домашніх в Іспанії та Португалії. Клінічно ця форма не виражена і проявляється лише перемежується віремією. При стресах вони виділяють вірус та заражають здорових свиней. Принаймні три види диких свиней, що мешкають в Африці, можуть бути носіями вірусу АЧС без видимих ​​клінічних ознак хвороби. Однак якщо цей вірус ввести домашнім свиням, він викличе висококонтагіозну надгостру гарячкову хворобу з летальним кінцем. Окремі особини, що вижили за такої форми хвороби, зазвичай стійкі до масивної дози високопатогенного гомологічного штаму. Хоча в сироватках таких свиней-реконвалесцентів можна виявити високі специфічні титри (КС, ПА) AT, їх імунологічне значення залишається незрозумілим. Такі тварини майже завжди є хронічно інфікованими, що носять у крові одночасно AT та вірус.

У свиней, що загинули від гострої або підгострої форми хвороби, вгодованість зберігається, трупне задублення виражене, шкіра підгрудка, вентральної частини черевних стінок, внутрішньої поверхні стегон, мошонки почервоніла або багряно-фіолетового кольору. Носова порожнина та трахея заповнені рожевою пінистою рідиною. Лімфовузли туші та внутрішніх органів збільшені, поверхні розрізу мармурові. Нерідко вони темно-червоного, майже чорного кольору і нагадують потік крові. Селезінка збільшена, вишневого або темно-червоного кольору, м'якої консистенції, краї її закруглені, пульпа соковита, легко зіскаблюється з поверхні розрізу. Легкі повнокровні, збільшені в об'ємі, сірувато-червоного кольору. Міждолькова сполучна тканина сильно просочена серозно-фібринозним ексудатом і виступає у вигляді широких тяжів, що чітко обмежують легеневі часточки і частки. Нерідко виявляють дрібнофокусні крововиливи під плеврою та вогнища катаральної пневмонії. Нирки часто збільшені, темно-червоного кольору, з плямисто-точковими крововиливами. Ниркова балія набрякла, усіяна плямистими геморагіями. Іноді крововилив знаходять і натомість анемії нирок. Печінка збільшена, повнокровна, нерівномірно забарвлена ​​у сірувато-глинистий колір. Слизова оболонка жовчного міхура набрякла, пронизана точковими крововиливами, останні локалізуються і в серозній оболонці. Слизова оболонка ШКТ почервоніла, набрякла, місцями (особливо за складками) з крововиливами. У деяких випадках геморагії локалізуються у серозній оболонці товстого кишківника. Судини головного мозку кровонаповнені, мозкова речовина набрякла, з крововиливами.

При хронічному перебігу хвороби патоморфологічні зміни проявляються різким збільшенням бронхіальних лімфовузлів та двостороннім ураженням легень. Безсимптомний перебіг характеризується мармуровим забарвленням портальних або бронхіальних лімфовузлів та осередковим ураженням легень. Гістологічні зміниПри гострому та підгострому перебігу хвороби різко засмучується гемодинаміка в лімфовузлах і селезінці в результаті борошна набухання і фібриноїдного некрозу стінок кровоносних судин; спустошення лімфоїдної тканини та розпад клітин за типом каріорексису. У ЦНС та паренхіматозних органах відзначають запально-дистрофические зміни різного ступеня вираженості. ІФ вірус та його АГ виявляють у макрофагах, ретикулярних клітинах, лімфоцитах та у купферівських клітинах, у мегакаріоцитах та гемоцитобластах мазків-відбитків селезінки, лімфовузлів, кісткового мозку, печінки та легких хворих тварин. Видно перинуклеарні включення.

При хронічному перебігу патологічний процес локалізується переважно у бронхіальних лімфовузлах та легенях. При цьому реєструють зміни, властиві серозно-геморагічному лімфаденіту та крупозно-некротичній пневмонії. Можливий перехід запалення на серцеву сорочку та міокард. Безсимптомний перебіг хвороби обмеженого характеру проявляється нерівномірною гіперемією бронхіальних або портальних лімфовузлів, осередковою серозно-катаральною або серозно-фібринозною пневмонією. В організмі хворих на свиней вірус спочатку обумовлює гіперплазію лімфоїдних клітин. У процесі його репродукції та накопичення основна маса їх (70-80 %) гине за типом каріо-пікнозу та каріорексису. У культурі клітин кісткового мозку та лейкоцитів крові свині відбувається адсорбція еритроцитів на поверхні інфікованих клітин вірусом АЧС при досягненні титру вірусу 103.5-4,0 ГАЕзо/мл. У перинуклеарной зоні інфікованих клітин з'являються включення, які у місцях синтезу вірусу. Пізніше заражені клітини округляються, втрачають зв'язок один з одним і відшаровуються від стінки.

Патогенез. УПриродних умовах вірус проникає в організм свиней через органи дихання, травлення, пошкоджену шкіру та слизові оболонки. Нуклеїнова кислота вірусу індукує перебудову клітинного метаболізму та активізує гідролітичні ферменти, внаслідок чого посилюється проліферація клітин лімфоїдної тканини. Проліферуючі клітини є сприятливим середовищем для репродукції вірусу. В організмі вірус швидко поширюється по кровоносних та лімфатичних судинах, впливає на лімфоїдну тканину, кістковий мозок і на стінки кровоносних судин. Дія його посилюється розвитком алергічних реакцій, що проявляються збільшенням кількості опасистих клітин, еозинофілів, а також розвитком мукоидного набухання та фібриноїдного некрозу судинних стінок.

Вірус АЧС розмножується в клітинах лімфоїдної та ретикулоендотеліальної тканин. При гострому перебігу хвороби він пригнічує імунну систему, руйнуючи чи змінюючи функції лімфоїдних клітин, при хронічному чи латентному – порушує співвідношення субпопуляцій лейкоцитів, функцію макрофагів, синтез та активність медіаторів клітинного імунітету. Патологічні процеси, що розвиваються в пізній стадії гострої течії АЧС (різке погіршення загального стану, збільшення проникності судин, множинні геморагії), а також при тривалому перебігу хвороби (крупозно некротична пневмонія, інфільтрація тканин лімфоїдними клітинами, некрози, некрози гіпер-ергічним, алергічним та аутоімунним процесами. У патогенезі АЧС алергічні та аутоалергічні процеси відіграють істотну роль. При гострому перебігу хвороби різко змінюються властивості крові (лейкопенія, підвищення склеюваності лейкоцитів, активація ферментів у крові та органах), тяжкі дегенеративні зміни клітин РЕМ, множинні крововиливи внаслідок порушення проникності стінок судин, активації фосфотаз та зникнення глікогену в олії.

При хронічному перебігу АЧС виявляють системний прояв алергічної реакції, яка переходить в аутоімунну хворобу з ураженням органів-мішеней. У вогнищах ураження встановлено відкладення комплексів антиген-антитіло з фіксацією комплементу. У період рецидивів хвороби виявляють циклічні зміни у картині білої крові, аутоімунне пошкодження нейтрофілів та пригнічення фагоцитарної активності. При підгострому та хронічному перебігах АЧС на місці повторного введення вірусу часто розвиваються великі місцеві запальні процеси, названі пухлиноподібними утвореннями. Вони являють собою великі припухлості в області підщелепного простору та шиї діаметром до 30-40 см. При цьому болючість і підвищення місцевої температури не виражені. Однак протягом 12-14 діб ці утворення збільшуються, що супроводжується підвищенням температури та погіршенням загального стану тварин. При забою та розтині таких свиней встановлюють нечітко обмежені від нормальних тканин утворення з вираженим набряком по периферії та некрозом у центральній частині. У тканинах встановлено накопичення вірусу в негемадсорбуючій формі до 107,5 ТЦЦ5о/мл та специфічного АГ, виявленого в РЗК та ІФ. При гістодослідженні встановлено зміни, характерні для гіперергічного запалення: інфільтрація тканин лімфоїдно-гістіоцитарними елементами з домішкою еозинофілів, нейтрофілів та плазмоцитів.

Запально-алергічні реакції дома повторного запровадження вірусу чи його АГ сприяють локалізації патологічного процесу. Алергічну сенсибілізацію при АЧС вдається виявити методом внутрішньошкірної алергічної проби. Алергеном служать концентровані вірусовмісні матеріали, інактивовані У-Променями, які вводять внутрішньошкірно. На місці введення алергену у інфікованих вірусом АЧС тварин через 24-48 год розвивається запальна реакція, що супроводжується інфільтрацією сполучнотканинного шару шкіри мононуклеарними клітинами, що проявляється гіперемією та припухлістю від 10 до 40 мм у діаметрі. Алергічну реакцію виявляють з 3 по 150 діб після інфікування у 68,7 % тварин. Наведені відомості дозволяють вважати, що алергічні або аутоалергічні реакції відіграють істотну роль у патогенезі та імуногенезі АЧС.

Морфологія та хімічний склад.Віріони є округлими частинками діаметром 175-215 нм, що складаються з щільного нуклеоїду, двошарового ікосаедричного капсиду і зовнішньої оболонки. Нуклеоїд містить ДНК та білок і оточений електронно-прозорим шаром. Двошаровий капсид складається з 1892-2172 капсомерів. Зовнішня ліпопротеїдна оболонка віріонів має типову будову і не потрібна для прояву інфекційних властивостей вірусу. Між зовнішньою оболонкою та капсидом є електронно-прозорий шар. Плавуча щільність CsCl становить 1,19-1,24 г/см3, коефіцієнт седиментації 1800-8000S. Інфекційність вірусу зберігається при 5 ° С протягом 5-7 років, при кімнатній температурі – 18 місяців, при 37 °С - 10-30 днів. Вірус стабільний при рН 3-10, чутливий до жиророзчинників та інактивується при 56 ° С протягом 30 хв.

Кінці ДНК ковалентно пов'язані і містять інвертовані повтори, подібними до таких у ДНК поксвірусів. ДНК не має інфекційності. У віріонах вірусу АЧС виявлено 54 поліпептиди. З "Віріонами асоційовано кілька ферментів, необхідних для синтезу ранніх іРНК

Вірус АЧС розмножується у цитоплазмі клітин, проте функція ядра також необхідна для його репродукції. В інфікованих клітинах виявлено 106 вірусспецифічних білків, з яких 35 синтезуються до початку реплікації вірусної ДНК (ранні білки) та 71 після реплікації ДНК (пізні білки). Віріони дозрівають у цитоплазмі та набувають зовнішньої оболонки при бруньуванні через цитоплазматичну мембрану. Вірус розмножується в організмі свиней та кліщах роду Ornithodoros. В організмі свиней вірус реплікується в моноцитах, макрофагах та ретикулоендотеліальних клітинах. У самок кліщів вірус зберігається понад 100 днів, передається трансоваріально та трансфазно.

Відомо, що проникнення вірусів в організм супроводжується утворенням ЗНА. Винятком є ​​передусім вірус АЧС. Інфікування цим вірусом не індукує у тварин синтез ВНА, хоча в сироватці крові виявляють КСА, ПА та типоспецифічні затримуючі ГА AT. Відсутність ВНА обумовлює нездатність організму пов'язувати та елімінувати вірус, що, у свою чергу, призводить до винятково високої летальності інфікованих тварин. З іншого боку, зазначений парадоксальний феномен зводить нанівець спроби створення ефективної вакцини, оскільки атенуйовані штами вірусу викликають у свиней хронічний перебіг хвороби та тривалий вірусоносій, що дуже небезпечно в епізоотологічному відношенні.

Вірус АЧС має окремі характеристики іридо- та поксвірусів. Є єдиним представником унікальної родини. ДНК кодує понад 100 поліпептидів, з яких понад 30 виявлено у препаратах очищеного вірусу. З віріонами асоційовано ряд ферментативних активностей, у тому числі Д Н К-за-висима РНК-полімераза, фосфатогідролазна активність, а також протеїнкіназа та кисла фосфотаза. ДНК-залежна РНК-полімераза розташована на периферії капсиду, а АТФ-гідролаза - між капсидом та нуклеоїдом. Капсид утворюють, в основному, поліпептиди з мол. м. 73 та 37 кД. З капсидом асоційована і ДНК-залежна РНК-полімераза, що бере участь у початкових стадіях репродукції вірусу. ДНК представляє двонитчасту структуру мол. м. 100-106 Д, що складається зі 170 тис. п. о. довжиною 58 нм з ковалентними кінцевими зшивками у вигляді інвертованих повторів завбільшки 2,7 тис. п. о.

Вірус АЧС має 20-гранну форму, величина його 175-215 нм, покритий двошаровою ліпопротеїновою оболонкою, що має антигенну спорідненість із тканинами господаря. Далі розташовується тришаровий капсид з періодично розміщених капсомерів, усередині знаходиться нуклеопротеїд із щільних фібрил, що містять ДНК. Поверхнева оболонка та капсид містять велику кількість ліпідів. ДНК вірусу АЧС шт. BA71V має довжину 170101 п. о. та 151 відкриту рамку зчитування. Секвенування ДНК показало, що вірус АЧС займає проміжне положення між поксвірусами та іридовірусами і належать до незалежного сімейства вірусів. Під дією рестриктази ЕСо-R-l виявлено 28 фрагментів ДНК (величина 0,3-21,9 кД), що становить 96 % усієї молекули, а іншими рестриктазами -11-50 фрагментів (0,3-76,6 кД). Отримано експресію 16 фрагментів ДНК в E. coli, методом молекулярної гібридизації визначено місцезнаходження 80 сайтів та складено карту розташування фрагментів. Виявлено відмінності між окремими ізолятами та варіантами вірусу, а також механізм і послідовність синтезу вірусспеці-фічних білків, їх роль у патогенезі хвороби.

У складі віріонів та інфікованих клітин встановлено 28-37 вірусспецифічних білків за іншими даними, зареєстровано 100 структурних та 162 неструктурних вірусспецифічних білків м. м. 11,5-245 кД. Виявлено мажорні поліпептиди (172, 73, 46, 36, 15, 12 кД), ранні та пізні білки, глікопротеїди (54, 34, 24, 5, 15 кД), встановлений зв'язок з AT 25 білків. Вважають, що ранні білки синтезуються з кінцевих ділянок ДНК, а пізні - з її центральної частини. Вірус специфічні білки в інфікованих клітинах розташовані наступним чином: у мембранних білках - 220, 150, 24, 14, 2 кД, у віропластах - 220, 150, 87, 80, 72, 60 кД, в ядрі клітини 2 - 2 кД. Встановлено певний порядок місцезнаходження окремих білків у віріоні (починаючи з поверхні) – 24, 14, 12, 72, 17, 37 та 150 кД. Побудовано фізичні карти ДНК вірулентного штаму вірусу АЧС К-73 (2-й серотип) та виділеного з нього авірулентного варіанту КК-262, адаптованого до культури клітин нирки поросяти (ППК-666). Кожен штам має свою, відмінну від інших фізичну карту ДНК за наявності певної подібності. Білки 32 і 35 кД мають штаммоспецифічність. У складі віріону виявили ДНК-полімеразу, протеїнкіназу та інші ферменти, які необхідні для раннього синтезу вірусспецифічних структур.

Вірус АЧС неоднорідний. Він є гетерогенною популяцією, що складається з клонів, що відрізняються за ознаками гемадсорбції, вірулентності, інфекційне™, бляшкоутворення та антигенних властивостей. За біологічними властивостями вірус, що використовується для експериментального зараження свиней, відрізняється від ізолятів вірусу, виділених пізніше від цих свиней. У 1991 р. опубліковано повідомлення про сучасні дані з архітектури морфогенезу та розподілу структурних поліпептидів у віріоні АЧС. На підставі загального плану будови вірусу АЧС, локалізації віропластів в інфікованих клітинах вірус був віднесений до групи іридовірусів. P. M. Чумак висловив гіпотезу про гібридне походження вірусу АЧС, предками якого з'явилися віруси групи віспи та один з іридовірусів комах. На думку автора, цей вірус має бути виділений в окреме сімейство, куди пізніше будуть віднесені й інші віруси.

А. Д. Середа та В. В. Макаров ідентифікували ізолят-специфічний глікопеп-тид вірусу АЧС. У складі оболонок очищених віріонів вірусу АЧС виявлено три глікозильовані поліпептиди з мол. м. 51, 56, 89 кД і три радіомаркованих монохромних оболонкових компонента з мол. м. 9, 95, 230 кД, біохімічна природа яких не з'ясована. П'ять вірусиндукованих глікозильованих поліпептидів з мол. м. 13, 33, 34, 38, 220 кД ідентифіковано в інфікованих вірусом АЧС клітинах Vera. Поліпептид (110-140 кД), мабуть, має пряме відношення до ДАД АГ, про існування якого раніше судили лише за феноменом ДАД. Автори показали, що олігосахаридні білки становлять близько 50 % маси глікозильованого поліпептиду (110-140 кД). Ліпідний склад вірусу АЧС залежить від клітинної системи культивування.

Рестрикційним аналізом та перехресною гібридизацією фрагментів рестрикції показано, що геном ізоляту САМ/82 вірусу АЧС не змінюється при пасируванні на свинях (протягом 20 пасажів) та у культурі клітин кісткового мозку свині (протягом 17 пасажів). Геном вірусу АЧС досить стабільний при передачі вірусу в природних та експериментальних умовах. Зіставлення даних фізичного картування та біологічних властивостей штамів вірусу АЧС дозволило припустити, що у лівому кінцевому регіоні локалізуються ділянки ДНК, що мають безпосереднє відношення до таких проявів фенотипу вірусу як вірулентність та іммуногенність. Таке припущення ґрунтується на тому, що у авірулентних штамів спостерігається втрата великої ділянки ДНК саме в цьому регіоні, тоді як у природних ізолятів довжина лівої кінцевої області є значно значнішою. На підставі отриманих результатів побудовано фізичні карти геномів референс-штамів ВАЧС всіх 4 серотипів та проведено паспортизацію вакцинних штамів, що дозволяє надалі контролювати можливі зміни геному. З використанням праймерів, комплементарних нуклеотидним послідовностям структурного гена білка VP2 ВАЧС розроблено тест-систему для ідентифікації ВАЧС методом ПЛР. Відкрита рамка зчитування B438L, розташована на фрагменті EcoRI-L геному вірусу африканської лихоманки свиней (ВАЛЗ), кодує білок завдовжки 438 залишків з мол. м. 49,3 кД, що має мотив RGD прикріплення до клітин та не гомологічний білків з баз даних. Ген B438L транскрибується лише на пізній стадії зараження ВАЛЗ. Білок експресували в Escherichia coli, очистили та використовували для отримання кролячої антисироватки, яка впізнає білок з мол. м. 49 кД у заражених ВАЛЗ клітинах. Цей білок синтезується на пізній стадії зараження всіма вивченими штамами ВАЛЗ, розташований у цитоплазматичних вірусних фабриках та є структурним компонентом очищених віріонів ВАЛЗ.

Геноми ізолятів вірусу африканської чуми свиней, виділені у Камеруні в 1982-1985 рр., невиразні поданим рестрикційного аналізу. ІзолятСАМ/87 незначно відрізняється від ізолятів 1982-1985 років. Однак, у ДНК ізоляту САМ/86 за допомогою 4-рестриктаз у 2-фрагментах (всередині правого кінцевого регіону та в центральному районі) виявлено значні відмінності.

Стійкість.Вірус АЧС виключно стійкий у широкому діапазоні температур та рН середовища, включаючи висушування, заморожування та гниття. Він може залишатися життєздатним протягом тривалого часу у фекаліях, крові, грунті та на різних поверхнях - дерев'яних, металевих, цегляних. У трупах свиней інактивується не раніше ніж через 2 місяці, у калі - протягом 16 днів, у ґрунті - за 190 днів, а в холодильнику при -30-60 ° С - від 6 до 10 років. Сонячні промені незалежно від інфікованих об'єктів (бетон, залізо, дерево) повністю інактивують вірус АЧС (шт. Доліз-74) через 12 год, а шт. Мфуті-84 – через 40-45 хв. У разі свинарника при 24 °З природна інактивація вірусу (шт. Долізи-74) відбувалася за 120 днів, а прим. Мфуті-84 – за 4 дні. Оптимальним для дезінфекції інфікованих приміщень виявився 0,5% розчин формаліну. Заморожування не впливає на біологічну активність вірусу, але є початковою стадією ушкодження геному. Вірус з перколом стійкий до дії ДНК-ази після заморожування при -20 °С і -70 °С і ушкоджується при (50 °С. Висушування вірусу без стабілізатора викликає втрату його інфекційності. У м'ясі інфікованих свиней і копчених стегенцях він зберігається 5-6 місяців.

Тривалу стійкість збудника у крові, екскретах та трупах враховують під час планування ветеринарно-санітарних заходів. Оскільки вірус зберігає життєздатність в інфікованих свинарниках протягом трьох місяців, саме цьому терміну відповідає експозиція, після якої дозволяється завезення нової партії свиней. На стійкість вірусу впливають склад і рН середовища, в якому він суспендований, вміст білка та мінеральних солей, ступінь гідратації, природа досліджуваного матеріалу, що містить вірус. За 5 °С він зберігає активність протягом 5-7 років, при зберіганні в умовах кімнатної температури - до 18 місяців, при 37 °С -10-30 днів. При 37 °С інфекційність його знижувалася на 50 % протягом 24 ЧУ середовищі з 25% сироватки та протягом 8 годин у середовищі без сироватки. При 56°С невелика кількість вірусу зберігала інфекційність більше 1 години, тому 30-хвилинної інактивації сироватки, що застосовується на практиці, при 56°С недостатньо для руйнування збудника. При 60°С він інактивувався протягом 20 хв. Вірус виключно стійкий як у кислій, так і і в лужному середовищі Більшість дезінфікуючих речовин (креолін, лізол, 1,5%-ний розчин NaOH) не інактивує його. % активного хлору, хлорне вапно) при 4-годинній експозиції.Гідроксид натрію у вигляді 3%-ного розчину рекомендується при дезінфекції тільки в гарячому вигляді (при температурі 80-85 ° С). гарячою водою, оскільки органічні речовини гною можуть знижувати ефективність дезінфекції.

АГ структура. Вона у вірусу складна. Збудник містить групові КС-, преципітуючий і типовий ГАд антигени. Виявлено ДНК-зв'язуючі білки, серед яких є мажорні та мінорні з мол. м. від 12 до 130кД. Загальна кількість їх сягає 15, їх 7 є структурними. Протеїни Р14 та Р24 розташовані по периферії віріону, а Р12, Р17, Р37 та Р73 - у проміжному шарі; виявлено протеїн Р150 - мажорний вірусний протеїн, який розташований у нуклеоїді або в одній із вершин (кутів) віріону. У всіх еукаріотичних клітинах є особливий білок, що складається з речовин амінокислотних залишків та ковалентно-пов'язаний з різними клітинними білками (наприклад, гістоном). Такий зв'язок забезпечений убіквітін-конфігуруючим ферментом УБС. Один з білків, що кодуються вірусом АЧС, здатний активувати убіквітін.

Питання про сутність інфекційного АГ, що індукує освіту ВНА, залишається досі відкритим. Інакше питання з АГ, що індукують утворення AT, що затримують гемадсорбцію. Сироватки з анти-гад властивостями широко використовуються всіма дослідниками, що вивчають проблему АЧС. Поліпептиди з мол. м. 120, 78, 69, 56, 45, 39, 28, 26, 24, 16 та 14 кД найбільш інтенсивно виявляються на електрофореграмах та імуноблотограмах препаратів очищеного вірусу АЧС. Суміш протеаз та панкреатичної ліпази у низьких концентраціях видаляє з цих препаратів поліпептиди з мол. м. 120 та 78 кД, у середніх концентраціях - поліпептиди з мол. м. 69, 56, 45, 39, 28 і 14 кД, у високих концентраціях - поліпептид з мол. м. 26 кД. Поліпептид з мол. м. 21 кД, що не реагував в імуноблоті зі специфічною антивірусною сироваткою, був стійкий до спільної дії протеаз та ліпази. Обробка вірусу тритоном Х-100 та ефіром призводила до підвищення активності вірусасоційованої ДНК-залежної РНК-полімерази, а обробка ефіром та подальше переосадження - до значного зниження активності в осадженому препараті. Обробка вірусу ефіром не впливала на його активність. На підставі отриманих результатів та даних літератури запропоновано схему розташування вірусних поліпептидів та ферментів у структурі віріону.

АГ варіабельність та спорідненість. На підставі затримки гемадсорбції виділено дві АГ А - та В-групи (типи) та одна підгрупа С вірусу АЧС. У межах А-, В-груп та С-підгрупи виявлено багато серотипів цього збудника. Дві генетичні групи (САМ/88 та САМ/86) вірусу африканської чуми свиней, виділені в Камеруні, викликають подібні клінічні ознаки та пошкодження у домашніх свиней. Через 3-6 днів після зараження розвивається лихоманка, втрата апетиту, млявість, втрата координації, тремтіння, діарея та задишка. Спостерігається гіперемія легень та поява геморагії у нирках та вісцеральних лімфатичних вузлах. Титри вірусу свиней, заражених ізолятами різних груп, статистично не розрізнялися.

За допомогою імунопроби та РЗГА встановлено по 7 референс-штамів кожної групи: Л-57; Л-60; Хінді-2; Родезія; Дакар; 2743; Мозамбік. До референс – штамів віднесено – шт. Хінді; N 2447; 262; Магаді; Спенсер; Л-60 та Родезія. Методом імуноблотінгу з монАТ виявлено 6 груп, а рестрикційним аналізом – 4 групи та 3 підгрупи. Це референс-шт. Уганда, Спенсер, Тенгані, Ангола, Л-60, Е-75. Є повідомлення про високу мінливість вірусу АЧС з антигенності, вірулентності та інші властивості, а також про існування змішаних популяцій його, які важко піддаються атенуації. На прикладі прим. Керовара-12, виділеного від бородавочника в Танзанії, показано типову гетерогенність популяції АЧС. Особливості вірусу взаємопов'язані з патологічним та імунологічним процесами в організмі заражених свиней. Більшість ізолятів, які виділяються під час епізоотії від домашніх свиней в Африці, мали різні ГА АГ. Ізоляти, що пасеруються in vivo в макрофагах свиней, змінюються швидше і глибше, ніж при пасеруванні в клітинах Vero. В африканських ізолятах найбільш варіабельними протеїнами виявилися Р150, Р27, Р14і Р12, в неафриканських ізолятах - Р150і Р14, протеїн Р12 не змінюється, а Р72 - головний АГ - при діагностиці за допомогою EL1SA виявився стабільним. АГ відмінності між штамами вірусу АЧС неможливо визначити за допомогою твердофазного ІФА,РДП та ИЭОФ, оскільки цими методами виявляються лише загальні всім штамів вірусу АЧС АГ. Це вдається зробити лише шляхом виснаження культурального АГ вірусу АЧС гетеротипової сироваткою. Як видно з наведених вище фактів, серологічний та імунологічний плюралітет вірусу АЧС – одна з основних його властивостей.

Локалізація вірусу.Вірус виявляють у всіх органах та тканинах хворих тварин. У крові він з'являється під час первісного підвищення температури і виявляється там до загибелі тварини в титрах від 103 до 108 ГАд5о/мл - При хронічному перебігу хвороби титр вірусу в крові швидко знижується, віремія носить характер, що переривається. За відсутності віремії він може довго (до 480 днів) зберігатися у селезінці та лімфовузлах. Точної локалізації вірусу при латентному перебігу хвороби не встановлено. У спочатку інфікованих органах (лімфоїдна тканина в області глотки) вірус зберігався в титрі близько 107 ГАД50Л до загибелі тварини. Найвищі титри його (10s) спостерігали у тканинах, що містять велику кількість ретикулоендотеліальних елементів: селезінці, кістковому мозку, печінці, що узгоджується з виявленням у цих тканинах значних уражень. Первинним місцем локалізації вірусу є мигдалики. Присутність його в лейкоцитах з 1-го дня інфекції свідчить про те, що збудник заноситься до інших тканин лейкоцитами. Поява вірусу в селезінці та кістковому мозку через 2 дні та швидке підвищення титру вірусу в цих тканинах дає підстави вважати, що вони є місцем вторинного розмноження збудника.

З організму заражених тварин вірус виділяється з кров'ю, носовими екскретами, фекаліями, сечею, слиною і, ймовірно, через легені з повітрям, що видихається. У більшості тварин, що виживають, вірусоносійство практично довічне. Періодично вірус може бути виділений із крові, лімфовузлів, легень, селезінки. З інших тканин виділення його важко. Вірусивиділення настає на 2-4-й день після появи лихоманки. Стрес-фактори сприяють загостренню інфекції та виділенню вірусу у зовнішнє середовище. При цьому сезонність вірусовиділення пов'язана з опоросами. У кліщах Ornithodoas вірус АЧС розмножується в кишечнику і потім поширюється на слинні залози та репродуктивні органи. Кліщі можуть залишатися персистентно інфікованими та передавати вірус протягом 3 років; поряд із бородавочниками вони створюють перманентний резервуар вірусу для домашніх свиней. Кліщі здатні передавати його трансоваріально та трансфа-зово. Концентрація вірусу в кліщах вища, ніж у свиней-вірусоносіїв.

АГ активність.У сироватках реконвалесцентів з'являються преципітуючі КС та затримують ГАд AT, що не впливають на ЦПД вірусу. ПА і КСА є типоспецифічними, вони загальні всім шт., тоді як AT, які затримують РГАд, суворо типоспецифічні і застосовуються для типування вірусу АЧС. КСА та ПА не пов'язані з утворенням імунітету. ВНА не утворюються, але в захисті діє опосередкований механізм AT. Ці антитіла активні у двох системах: A) In Vitroантитіло залежної клітинної цитотоксичності; б) комплементзалежний лізис.Сироватки тварин-реконвалесцентів специфічно затримують ГАД у культурах, інфікованих гомологічним вірусом АЧС. Титр таких AT досягає максимуму через 35-42 дні після клінічного одужання тварин. Вірус АЧС не викликає формування ВНА та гуморальні компоненти імунної реакції не мають великого значення. Нездатність виробляти ВНА проти вірусу АЧС, ймовірно, обумовлена ​​властивостями самого збудника.

Взаємодія вірусу з AT. Одна з причин недостатньої вивченості імунології АЧС – відсутність нейтралізації вірусу AT – головної властивості інших вірусів, що становлять традиційну основу вивчення їх імуногенності з часу відкриття серологічних реакцій. У цьому відношенні існує тільки один зоопатогенний аналог - парвовірус алеутської хвороби норок, але відома також низька здатність до нейтралізації типових представників іридовірусів. Було багато спроб вивчення цього унікального феномену, але задовільного пояснення досі не запропоновано; версій багато - від відсутності віріон-них глікопротеїнів до антигенної мімікрії та гетерогенності. У прагненні з'ясувати це питання автори поетапно досліджували результати взаємодії вірусу з AT, вірусу з чутливими клітинами у культурі та комплексу вірус+АТ з чутливими клітинами. Показано, що імунний комплекс (АГ+АТ) безперешкодно проникає у чутливі клітини, і вірус зберігає вихідну репродуктивну активність. При АЧС нейтралізація вірусу in vitro супроводжується протилежним ефектом – посиленням вірусного розмноження та екстенсивною патологією за рахунок поширення інфікованих моноцитів-макрофагів.

Питання взаємодії вірусу АЧС з AT потребує подальшого експериментального вивчення. У серопозитивних аборигенних тварин у крові виявляються специфічні КСА та ПА у титрах до 1:128 та 1:64 відповідно. Специфічні AT у крові поросят з'являються лише після прийому молозива від серопозитивних свиноматок. Рівень AT у молозиві дорівнював або перевищував концентрацію їх у крові.

Експериментальна інфекція. До експериментального зараження несприйнятливі кішки, собаки, миші, щури, кролики, кури, голуби, вівці, кози, ВРХ та коні. У експериментально заражених аргасових кліщів Ornithodoros turicata вірус виявляли методом біопроби протягом року. У кишечнику кліща встановлено найбільш ранню та тривалу присутність вірусу. Швидке поширення його та реплікація в інших тканинах відбувається за допомогою гемолімфи. Вже через 24 години після зараження. за допомогою МФА виявляли артеріальну гіпертензію. Через 2-3 тижні вірус виявляли в гемоцитах, а до 6-7-го тижня - в більшості тканин.

Культивування. Для культивування вірусу АЧС можуть бути використані підсвинки 3-4-місячного віку, яких заражають будь-яким способом. Частіше заражають внутрішньом'язово в дозі 104-106 ГАд50- При розвитку клінічних симптомів хвороби на 4-6-ту добу після зараження тварин вбивають і як вірус містить матеріалу використовують кров і селезінку, в яких вірус накопичується в титрі 106"8 ГАд50. АЧС в організмі інших видів тварин успіху не мали.

До вірусу чутливими виявилися культури лейкоцитів крові та макрофагів кісткового мозку свиней. Зазвичай клітини заражають на 3-4-й день зростання в дозі 103 ГАД вірусу на 1 мл живильного середовища. Через 48-72 години він накопичується в культурах клітин у титрі JO6-7 5 ГАД 50/мл - Вірус АЧС інфікував більшість макрофагів (моноцитів), якщо не всі, то тільки близько 4 % Поліморфноядерні лейкоцити периферичної крові. В- і Т-лімфоцити, що знаходяться в стадії спокою або стимульовані ФГА, ліпосахаридом або мітогеном з фітолакки американської, не мають чутливості до вірусу. Останній реплікується виключно в макрофагах, і найвищих титрах міститься в еритроцитах свиней. Він проникає в клітину головним чином рецепторнезалежним шляхом, його реплікація відбувається в цитоплазмі, але для синтетичних процесів необхідна участь ядра. Можливе зараження більш ніж однією часткою вірусу, що передбачає наявність кількох його субпопуляцій в одній клітині та їхню взаємодію. Число клітин, що містять АГ на поверхні, через 13-14 год досягає максимального рівня. Велика кількість невикористаного вірусспецифічного матеріалу, що має мембранну, циліндричну або ексцентричну структуру, залишається у заражених клітинах. Передбачається, що у їх оболонках міститься ГАд АГ.

Вірус розмножується в культурах лейкоцитів та кісткового мозку свиней з розвитком ГАд та ЦПД без адаптації. При оптимальній дозі зараження ГАд проявляється через 18-24 год, ЦПД - через 48-72 год і характеризується утворенням цитоплазматичних включень з наступним витіканням цитоплазми та появою багатоядерних гігантських клітин (клітин-тіней). Він проникає до клітин CV-1 або Vero адсорбційним ендоцитозом або ендоцитозом, опосередкованим рецептором. Роздягання віріонів відбувається в ендосомах або в інших кислих внутрішньоклітинних везикулярних органелах. При інкубуванні вірусу АЧС з мононуклеарними клітинами периферичної крові свиней він інгібує проліферативну реакцію лімфоцитів до фітогемаглютиніну та інших лектинів. Вважають, що таке пригнічення індукується розчинними фракціями, які звільняються периферичними мононуклеарними клітинами після спільного інкубування з вірусом. ГАд вірусу в заражених культурах настільки специфічна, що використовується як основний тест у діагностиці хвороби. В інших видах культур клітин вірус без попередньої адаптації не розмножується. Він адаптований до ряду гомо - і гетерологічних культур: лініях клітин, що перевиваються, нирки порося (ПП і РК), нирки зеленої мавпи (MS, CV), Vero-клітин нирки макаки та ін. У літературі мало приділяється уваги впливу вуглеводних компонентів, які можуть становити від 50 до 90 % маси глікопротеїдів, на імуногенність вірусу: однією з причин слабкої імуногенності оболонкового глікопротеїду (gp 120) вірусу імунодефіциту (ВІЛ) є те, що 50 % Його маси обумовлено «атмосферою» Сахаров, яка може відігравати негативну роль, перешкоджаючи, наприклад, доступу AT до сайту фіксації на оболонці ВІЛ, тобто життєво важливі ділянки ВІЛ «хімічно» захищені від дії імунної системи. Не виключено, що причиною вірусу АЧС, що не нейтралізується, може бути наявність високоглікозильованих білків на поверхні віріонів. Про співіснування глікозильованих компонентів невідомої природи в оболонці віріонів АЧС повідомлялося Мюдель Вал та ін. 1986 р.

Наявність таких компонентів на мембранах клітин може сприяти «вислизання» від інших ефекторних механізмів імунної системи господарів і підвищувати його патогенність. Вивчення субклітинної локалізації та активності транспре-нілтрансферази вірусу АЧС в інфікованих клітинах показало, що фермент є інтегральним мембранним білком і виявляє геранілгеранілдифосфатсинтаз-ну фенілтрансферазну активність у мембранних фракціях, у 25 разів збільшує утворення геній. Таким чином, пов'язаний з мембраною білок синтезує переважно транс-ГГДФ-синтетазу. Особливості репродукції.Методами гібридизації in situ, авторадіографії та електронної мікроскопії вивчено ультраструктурну організацію реплікації ДНКВірусу АЧС у заражених клітинах Vera. На ранній стадії синтезу вірусної ДНК вона утворює щільні осередки в ядрі поряд з ядерною мембраною, а на пізнішій стадії знаходиться виключно в цитоплазмі. Методом седиментації в лужному градієнті концентрації сахарози показано, що на ранній стадії в ядрі знаходяться дрібні фрагменти ДНК (=6-12 S), а на пізнішій стадії в цитоплазмі мітяться довші фрагменти (=37-46 S). Імпульсне позначення показало, що ці фрагменти є попередниками зрілої зшитої вірусної ДНК.

На проміжній та пізній стадіях виявлено форми «голова-до-голови». Ці дані дозволяють припустити, що реплікація ДНК вірусу АЧС йде за механізмом старту de novo із синтезом коротких фрагментів ДНК, які потім перетворюються на довгі фрагменти. Лігування або елонгація цих молекул дають двоодиничні структури з димерними кінцями, які можуть породжувати геномну ДНКВ результаті утворення сайт-специфічного однониткового розриву, перебудов та лігування. Біохімічні методи аналізу складання капсиду вірусу АЧС, складання та утворення оболонки використані для вивчення клітинних процесів, важливих для огортання вірусу мембранними цистернами. Складання капсиду ВАЧС на мембранах ендоплазматичного ретикулуму (ЕР) та огортання цистернами ЕР інгібіруються при вичерпанні АТФ або кальцію в результаті інкубації з А23187 і ЕДТА або з таксигарпіном - інгібітором кальцієвої АТФази. Методом ЕМ показано, що клітини, виснажені Са, не можуть збирати ікосаедричні частинки ВАЧС. Натомість місця збирання містять гребенеподібні або цибулицеподібні структури, в окремих випадках - порожні замкнуті 5-вугільні структури. Вербування капсидного білка ВАЛЗ із цитозолю на мембрани ЕР не вимагає АТФ або резервного фонду Са2+. Однак наступні стадії складання капсиду та утворення оболонки залежать від АТФ та регулюються градієнтом Са2+ у мембранних цистернах ЕР.

ГА та ГАд властивості.ГА властивостями вірус не має. При розмноженні його in Vitroу культурах лейкоцитів чи клітинах кісткового мозку свиней спостерігають явище адсорбції еритроцитів лежить на поверхні уражених клітин. Еритроцити прикріплюються до стінки лейкоциту, утворюючи навколо нього характерний віночок і іноді закриваючи клітину з усіх боків, унаслідок чого уражені лейкоцити зовні нагадують ягід тутову. Час появи ГАд залежить від інокульованої дози вірусу і може проявитися вже через 4 год, але в більшості випадків – через 18-48 год, а при низьких титрах вірусу – через 72 год. Зі збільшенням часу інкубації кількість уражених клітин зростає, потім вони починають просвітлюватися , і проявляється ЦПД вірусу. Чутливість РГАд залежить від властивостей вірусу та ступеня його накопичення в інфікованій культурі клітин. Вона виявляється під світловим мікроскопом при досягненні титру інфекційності в культурі не нижче 104 ЛД5о/мл. - На думку окремих авторів, час настання ДАД залежить від титру вірусу в досліджуваній пробі матеріалу. Зниження титру вірусу АЧС тягне зниження чутливості РГАд. У зв'язку з цим, у ряді випадків виникає необхідність проведення до трьох послідовних серійних сліпих пасажів вірусу в культурі лейкоцитів або кісткового мозку, щоб підтвердити наявність його в досліджуваному матеріалі у разі ГАд варіанта.

Іноді виділяються негемадсорбіруючі штами вірусу, що мають лише виражені цитопатогенні властивості. При пасируванні їх у культурі клітин щонайменше 50 разів і зараженні свиней гемадсорбція не відновлювалася. У ПАР виділили негемадсорбіруючий штам від домашніх свиней при природній епізоотії. Пізніше там було виділено негемадсорбуючий варіант із суспензій кліщів О. moubata, зібраних в осередках інфекції.

Оскільки специфічна ГАд характеризує вірулентність штамів АЧС, виділення менш вірулентних негемадсорбуючих вірусів від свиней із хронічною пневмонією становить великий інтерес. Однак окремі негемадсорбуючі ізоляти або клони можуть бути високовірулентними. Механізм реакції ДАД, а також локалізація відповідальних за ДАД АГ не встановлені. Важлива роль зовнішніх мембран віріонів у зв'язуванні їх з еритроцитами, оскільки віріони, які не мають оболонок, на еритроцитах не адсорбуються. Антигени, що беруть участь у ДАД, локалізовані в оболонках віріонів, що походять з цитоплазматичних мембран клітин господаря.

АЧС при первинному прояві зазвичай протікає гостро та підгостро із загибеллю до 97 % свинопоголів'я. В ізольованих господарствах у тропічних умовах причиною виникнення вторинних вогнищ є свині, що перехворіли, - приховані носії збудника. Так, вірус АЧС в Конго циркулює серед місцевих тварин у вигляді негемадсорбуючої популяції, що важко виявляється, не викликаючи будь-яких видимих ​​симптомів хвороби і створюючи позитивний імунний фон у місцевих свиней. Епізоотологічне обстеження місцевого свинопоголів'я свідчить про те, що в певних умовах аборигенні домашні свині як резервуар вірусу в природі відіграють істотну роль в епізоотології АЧС. У серопозитивних аборигенних тварин у крові виявляються специфічні КСА і ПА в титрах до 1:128 і 1:64 відповідно.

З метою вивчення формування пасивного імунітету проведено досліди з поросятами різного віку, отриманими від серопозитивних тварин. У крові плодів, що не народилися, а також безмолозивних поросят, специфічні AT були відсутні. Також не було виділено вірус від вказаних тварин. Специфічні AT у крові поросят з'явилися лише після прийому молозива від серопозитивних свиноматок. Простежено динаміку специфічних AT у крові 82 поросят від серопозитивних свиноматок протягом 5-місячного періоду. При контрольному зараженні 2-5 місячних поросят, у крові яких виявлялися КСА та ПА у титрі 1:16-1:32 та 1:2-1:4 відповідно, всі тварини впали з клінічними ознаками АЧС. Серопозитивні поросята того ж віку, що знаходяться з ними в контакті, виявилися стійкими до зараження.

Вірус АЧС може персистувати як в організмі сприйнятливих свиней, так і in vitro у культурі клітин. В умовах Африки домашні свині можуть інфікуватися за допомогою контакту з дикими бородавниками (Phaco choerus) та чагарниковими свинями (Patomochoerus), у яких він спричиняє латентну інфекцію. Аргасові кліщі О. moubata porcinus - природний резервуар та переносник вірусу АЧС. Кліщі орнітодорини (переносники вірусу АЧС) можуть жити 9 років, вірус АЧС довго зберігається в їх популяції. O. turicata виявлені в Північній Америці у штатах Ута, Колорадо, Канзас, Оклахома, Техас, Нью-Мехіко, Арізона, Каліфорнія та Флорида. Кліщі можуть мігрувати на 8 км від місця проживання. Крім O. turicata, вірус АЧС може переноситися ще через види кліщів: О. puertoriceusis, О. tolaje, О. dugersi.

Встановлено стійкість вірусу в мертвих кліщах, а також розмноження та персистування його у 70-75 % кліщів протягом 13-15 місяців. Членистоногі отримують вірус при кровососанні хворих тварин у період віремії. Вірус розмножується у членистоногих, у яких тривалий період персистенції, і, нарешті, кліщі його передають здоровим свиням у процесі годування. Вірус АЧС був виділений з коксальної рідини, слини, екскретів, мальпігієвих судин та ексудату статевих органів у природно та експериментально інфікованих кліщів, а також з яєць та німф першої стадії інфікованих самок. Таким чином, у цього виду кліщів можлива трансваріальна та трансспермальна передача вірусу. Це сприяє підтримці та циркуляції вірусу у популяції навіть за відсутності регулярних контактів переносників з інфікованими тваринами. Достатньо агента одного разу занести до популяції кліщів, і виникає його циркуляція незалежно від контакту цієї популяції з чутливими тваринами надалі. У зв'язку з великою тривалістю життя кліщів (10-12 років) вогнище хвороби у разі виникнення може існувати невизначено довгий час. У місцевостях, де це сталося, можливість викорінення АЧС є сумнівною.

Таким чином, основний шлях швидкого поширення збудника та виникнення нових спалахів хвороби, ймовірно, аліментарний. Респіраторний шлях сприяє поширенню його в межах епізоотичного вогнища, а трансмісивний – створенню стійких природних вогнищ. У зв'язку з тісними біологічними взаємовідносинами вірусу та аргасових кліщів природне вогнище може існувати без повторних заметів вірусу невизначений час. Хоча штам Malawi Lil20P (MAL) вірусу АЧЛ був виділений із кліщів Ornithodorus sp., спроби експериментально заразити цих кліщів згодовуванням штаму MAL виявилися невдалими. 10 популяціям кліщів О. porcinus porcinus та однієї популяції кліщів О. porcinus domesticus давали з їжею ВАЛС MAL. Через 10 днів після зараження менше 25% кліщів містили ВАНС. Більш ніж 90 % кліщів ВАЛС не виявлявся через 5 тижнів після інокуляції. При оральній інокуляції ВАЧС MAL кліщам О. porcinus porcinus титр ВАЛЗ знижувався в 1000 разів через 4-6 тижнів і ставав нижче за межу виявлення. Однак після інокуляції ізоляту ВАЛЗ Pretoriuskop/90/4/l (Рг4) титр ВАЛЗ збільшувався в 10 разів через 10 днів і в 50 разів через 14 днів. У середній кишці кліщів, інокульованих ВАЧС, виявлено експресію ранніх, але не пізніх вірусних генів і не спостерігається синтез ДНК ВАЧС.

Віріони потомства рідко присутні у кліщів після оральної інокуляції ВАЛЗ. Якщо вони присутні, всі вони асоційовані з сильною цитопатологією фагоцитарних епітеліальних клітин середньої кишки (ЕКСК). При парентеральному введенні ВАЛЗ MAL у гемоцелі встановлюється персистентна інфекція, але спостерігається затримана генералізація MAL, та його титр у більшості тканин у 10-1000 разів нижчий, ніж при зараженні ВАЛЗ Рг4. Ультраструктурний аналіз показав, що ВАЛЗ MAL реплікується в багатьох типах клітин, але не в ЕКСК, а ВАЛС Рг4 може реплікуватися в ЕКСК. Таким чином, реплікація ВАЛС MAL обмежена в ЕКСК кліщів.

АЧС на Мадагаскарі підтверджено за допомогою ПЛР та нуклеотидного секвенування після ізоляції вірусу. Після інокуляції лейкоцитів не спостерігалося гемадсорбція або ЦПД, але розмноження вірусу в клітинах підтверджувалося за допомогою ПЛР. Визначення вірусного геному АЧС проводилося ампліфікацією висококонвертованого ділянки, що кодує білок р72. Виявлено 99,2% ідентичності між штамами Maladasi та вірусом, виділеним у 1994 р. при спалаху в Мазамбі-ці. Серологічні дослідження проводилися на 449 зразках сироваток, в результаті знайдено, що лише 3-5% сироваток, виділених від свиней між 1996 та 1999 роками. були позитивними.

У природних умовах на африканську чуму хворіють домашні та дикі свині. У деяких диких африканських свиней хвороба протікає субклінічно. Такі тварини становлять велику небезпеку для свиней культурних порід. У природі існує замкнене коло циркуляції цього вірусу між дикими свинями-ві-русоносіями та кліщами (рід Ornithodorus). Вірус АЧС представляє гетерогенну популяцію, що складається з клонів, що мають різні біологічні характеристики щодо ГАд, вірулентності, інфекційності, розмірів бляшок, АГ властивостей. Вірулентність ізоляту визначається вірулентністю домінуючого у популяції клону, а не кількістю введеного вірусу. Пасування ізолятів вірусу АЧС на свинях та в культурі клітин Vero може призвести до зміни співвідношення різних клонів у вірусній популяції та зміни всіх її характеристик. Культуральні та вірулентні властивості збудника АЧС піддаються модифікації в процесі природного перебігу епізоотії та при експериментальній селекції. Культуральні та вірулентні властивості вірусу АЧС надзвичайно лабільні: він може втрачати ГА здатність, знижувати вірулентність, аж до повної її втрати, у процесі природної еволюції епізоотії та в експерименті при пасируванні у тканинних культурах.

Імунітет та специфічна профілактика.У патогенезі та імуногенезі АЧС алергічні або аутоалергічні реакції відіграють істотну роль. При дії атенуйованих штамів вірусу на лімфоїдні клітини відбувається синтез неповноцінних AT, нездатних нейтралізувати вірус. Утворюються комплекси антиген-антитіло, які концентруються в тканинах органів-мішеней, призводячи до порушення їх функцій та розвитку алергічних та аутоімунних процесів; спостерігають стимуляцію клітинного імунітету - лізис інфікованих клітин сенсибілізованими лімфоцитами, виділення медіаторів клітинного імунітету: лімфо-токсину, фактора пригнічення міграції бласттрансформації та ін.

Певну роль у патогенезі хвороби відіграють взаємодія вірусу з еритроцитами та порушення механізму зсідання крові. Вплив вірусу на клітини лімфоїдної системи та еритроцити характеризується їх руйнуванням або зміною функції, а також розвитком алергічного та аутоімунного процесів.

Перехворілі або щеплені (інактивованим матеріалом або аттенуйованим вірусом) тварини мають певний ступінь стійкості до гомологічного ізоляту вірусу (затримка загибелі свиней), зміна вираженості клінічних ознак хвороби, одужання та повна відсутність реакції на контрольне зараження). Відсутність специфічного захисту проти ізолятів, виділених в інших зонах, свідчить про їх АГ та імунологічні відмінності.

С. Anderson спостерігав тривале носійство вірусу та його приживлення при повторному зараженні у перехворілих та щеплених тварин. Пасивний та колостральний імунітет виражений слабо. AT недостатньо нейтралізують вірус. Причини слабкої напруженості імунітету, а також нейтралізуючої активності AT пов'язують з особливостями АГ структури вірусу (блокування АГ ліпідами, конкуренція або маскування протективних АГ видовими АГ вірусу або господаря), а також зі зміною функції лімфоїдних клітин - порушення взаємодії вірусу та АГ з Т- та В-ліфоцитами. На користь першого припущення свідчить слабка або змінена відповідь на інактивовані артеріальні препарати як у чутливих, так і в інших видів тварин. В умовах низької активності AT посилюються реакції клітинного імунітету, які мають суттєве значення у блокуванні інфекції, а також є причиною розвитку гіперчутливості уповільненого типу, алергічних та аутоімунних ускладнень.

Процес захисту при АЧС представляється у вигляді динамічної рівноваги між етіологічними факторами (вірусом) та механізмами імунного захисту. Він може бути переважним як у тому, так і в іншому напрямку, це залежить від властивостей штамів, що застосовуються, і стану імунної системи тварини. Надійних профілактичних препаратів проти АЧС – немає. Отримати інактивовані вакцини проти АЧС класичними методами, використовуючи сучасні методики, нікому не вдалося. Більшість щеплених тварин при контрольному зараженні гинули і лише незначна частина їх виживала після тривалого перехворювання. Результати випробування інактивованої вакцини наводять на думку, що основне значення в аномалії імунітету при АЧС має структура АГ та їх взаємодія між собою, а не стан імунної системи макроорганізму.

Препарати з живого атенуйованого вірусу були ефективнішими, викликаючи слабку поствакцинальну реакцію, вони захищали від зараження гомологічним вірусом 50-90% вакцинованих тварин. Однак найістотніші недоліки живих вакцин – тривале вірусоносійство після щеплення, розвиток ускладнень частини імунних тварин, приживлення у вакцинованих тварин вірулентного вірусу без прояву клінічних ознак хвороби, що також небезпечно в практичних умовах. Враховуючи ці недоліки, поставлено під сумнів питання застосування живих атенуйованих вакцин для ліквідації вогнищ хвороби у поєднанні з іншими ветеринарно-санітарними заходами.

Множинність імунологічних типів збудника та існування змішаних чи змінених популяцій вірусу значно обмежують можливості використання таких препаратів. Однак є відомості про підбір ефективних засобів для лікування хворих на свиней та зняття вірусоносійства, які можна застосовувати у поєднанні з атенуйованими штамами вірусу. У матеріалах наради експертів з АЧС Європейського економічного співтовариства (1978-1987 рр.) та інших повідомленнях намічено розвиток наукових досліджень, спрямованих на створення компонентних, хімічних та генноінженерних вакцин. З цією метою вивчають тонку АГ структуру збудника АЧС та інфікованих клітин, структуру та функції генетичного матеріалу, проводять пошук протективних АГ з використанням сучасних методів молекулярної біології, генетики, монАТ. Ці напрями можуть призвести до вироблення нових підходів до створення ефективних та нешкідливих вакцин проти АЧС. Ген 9GL вірусу АЧС гомологічний гену ERV1 дріжджів, що бере участь в окисному фосфорилюванні та клітинному зростанні, і гену ALVc гепатотрофної фракцією.

Ген 9GL кодує білок довжиною 119 залишків (I) і є висококонсервативним у всіх вивчених польових ізолятів АЧС. Показано, що є пізнім білком ВАЧС. Мутант штаму MAL з делецією гена 9GL (A9GL) у 100 разів гірше розмножується в макрофагах та утворює дрібні бляшки порівняно з батьком MAL. I впливає нормальне дозрівання віріонів: 90-99 % віріонів у макрофагах, заражених мутантом A9GL, має ацентричні нуклеоїдні структури. Смертність свиней дорівнює 100% при зараженні штамом MAL, а при зараженні мутантом A9GL виживають усі свині, причому у них спостерігається тимчасова лихоманка. Усі свині, заражені мутантом A9GL, залишаються клінічно нормальними, і титр віремії вони знижений в 100-10 000 раз. Усі свині, попередньо заражені мутантом A9GL, виживають при подальшому зараженні летальною дозою ВАЧС MAL. Таким чином, мутант A9GL може бути використаний як жива атенуйована вакцини ВАЛС.