एलिसा (एंझाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परख, एलिसा) ने गेल्या शतकाच्या 60 च्या दशकात व्यावहारिक औषधाच्या जीवनात प्रवेश केला. त्याचे प्रारंभिक कार्य वैज्ञानिक हेतूंसाठी हिस्टोलॉजिकल संशोधन होते, जे सजीवांच्या पेशींच्या प्रतिजैविक संरचनेचा शोध आणि ओळख करण्यासाठी उकळले.

एलिसा पद्धत विशिष्ट (एटी) आणि संबंधित प्रतिजन (एजी) च्या परस्परसंवादावर आधारित आहे ज्यात “अँटीजेन-अँटीबॉडी” कॉम्प्लेक्स तयार होते, जे एन्झाइम वापरून शोधले जाते. या वस्तुस्थितीमुळे शास्त्रज्ञांना असा विचार करण्यास प्रवृत्त केले की ही पद्धत एखाद्या विशिष्ट संक्रमणास प्रतिकारशक्तीच्या प्रतिक्रियेमध्ये सामील असलेल्या विविध वर्गांच्या विशिष्ट इम्युनोग्लोब्युलिन ओळखण्यासाठी निदानाच्या उद्देशाने वापरली जाऊ शकते. आणि क्लिनिकल प्रयोगशाळेच्या निदानामध्ये ही एक प्रगती होती!

ही पद्धत केवळ 80 च्या दशकाच्या सुरुवातीस आणि नंतर प्रामुख्याने विशेष संस्थांमध्ये सक्रियपणे वापरली जाऊ लागली. प्रथम इम्युनोएन्झाइम विश्लेषक रक्त संक्रमण केंद्रे आणि स्थानके, संसर्गजन्य रोग आणि वेनेरिओलॉजी रुग्णालये सुसज्ज होते, कारण भयंकर एड्स, आफ्रिकन खंडात जन्माला आला, तो आपल्या क्षितिजावर दिसू लागला आणि "जुन्या" संसर्गामध्ये ताबडतोब सामील झाला, तत्काळ निदान उपाय आणि शोध आवश्यक होता. त्याच्यावर परिणाम करणाऱ्या उपचारात्मक औषधांसाठी.

एलिसा पद्धतीच्या वापराची व्याप्ती

एंजाइम इम्युनोएसेची शक्यता खरोखरच विस्तृत आहे.आता अशा संशोधनाशिवाय कसे करता येईल याची कल्पना करणे कठीण आहे, जे अक्षरशः औषधाच्या सर्व शाखांमध्ये वापरले जाते. असे दिसते की, एलिसा ऑन्कोलॉजीमध्ये काय करू शकते? हे करू शकता बाहेर वळते. आणि भरपूर. विशिष्ट प्रकारच्या घातक निओप्लाझमचे वैशिष्ट्यपूर्ण चिन्हक शोधण्याची विश्लेषणाची क्षमता ट्यूमरची लवकर ओळख पटवते, जेव्हा ते अद्याप लहान आकारामुळे इतर कोणत्याही पद्धतीद्वारे निर्धारित केले जात नाही.

आधुनिक क्लिनिकल लॅबोरेटरी डायग्नोस्टिक्स (CDL), ट्यूमर मार्कर व्यतिरिक्त, एलिसा पॅनेलचे महत्त्वपूर्ण शस्त्रागार आहे आणि विविध पॅथॉलॉजिकल परिस्थिती (संसर्गजन्य प्रक्रिया, हार्मोनल विकार) चे निदान करण्यासाठी आणि रुग्णाच्या शरीरावर त्यांचा प्रभाव ओळखण्यासाठी फार्मास्युटिकल औषधांचे निरीक्षण करण्यासाठी त्यांचा वापर करते. आणि, तसे, केवळ मानवच नाही. सध्या, पशुवैद्यकीय सेवांमध्ये एन्झाईम इम्युनोसेचा मोठ्या प्रमाणावर वापर केला जातो, कारण "आमचे लहान भाऊ" देखील अनेक रोगांसाठी संवेदनाक्षम असतात, ज्यातून त्यांना कधीकधी खूप त्रास होतो.

अशा प्रकारे, एलिसा, त्याच्या संवेदनशीलतेमुळे आणि विशिष्टतेमुळे, रक्तवाहिनीतून घेतलेल्या रक्ताच्या नमुन्यावरून निर्धारित करू शकते:

• हार्मोनल स्थिती (थायरॉईड आणि अधिवृक्क संप्रेरक, लैंगिक संप्रेरक);
• व्हायरल आणि बॅक्टेरियाच्या संसर्गाची उपस्थिती (एचआयव्ही, बी आणि सी, क्लॅमिडीया, सिफिलीस, आणि, तसेच रोगजनक सूक्ष्मजीवांमुळे होणारे इतर अनेक रोग);
• सूक्ष्मजीवांच्या महत्त्वपूर्ण क्रियाकलापांचे ट्रेस ज्याने संसर्गजन्य प्रक्रिया सुरू केली, जी यशस्वीरित्या समाप्त झाली आणि या रोगजनकांना रोगप्रतिकारक प्रतिसाद तयार करण्याच्या टप्प्यावर गेली. अशा ट्रेस, म्हणजे, अँटीबॉडीज, बर्याच प्रकरणांमध्ये रक्तामध्ये आयुष्यभर फिरत राहतात, ज्यामुळे एखाद्या व्यक्तीला पुन्हा संसर्ग होण्यापासून संरक्षण मिळते.

एलिसाचे सार काय आहे?

एंजाइम इम्युनोसे पद्धत केवळ रोगजनकाची उपस्थिती (गुणात्मक विश्लेषण) नाही तर रुग्णाच्या रक्ताच्या सीरममध्ये त्याची परिमाणात्मक सामग्री देखील निर्धारित करू देते.

विषाणूजन्य किंवा बॅक्टेरियाचा डोस संसर्गजन्य प्रक्रियेच्या मार्गावर आणि त्याच्या परिणामांवर लक्षणीय परिणाम करतो, म्हणून परिमाणवाचक विश्लेषण विविध प्रकार आणि टप्प्यात रोगांचे निदान आणि उपचारांमध्ये महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावते.

तथापि, एंजाइम इम्युनोएसे अभ्यास हे ELISA पद्धत म्हणून जाणून घेतल्याने, ते आपल्या ग्रहावर वास्तव्य करणार्‍या सूक्ष्मजीवांच्या इतक्या विस्तृत श्रेणीला कसे कव्हर करते, ज्यापैकी अनेक मानव आणि प्राण्यांच्या आरोग्यास आणि जीवनास थेट धोका निर्माण करतात याचा विचारही करत नाही. परंतु वस्तुस्थिती अशी आहे की ELISA मध्ये अनेक पर्याय आहेत (गैर-स्पर्धात्मक आणि स्पर्धात्मक - प्रत्यक्ष आणि अप्रत्यक्ष), ज्यापैकी प्रत्येक स्वतःच्या समस्येचे निराकरण करते आणि अशा प्रकारे, लक्ष्यित शोधासाठी परवानगी देते.

एका किंवा दुसर्‍या वर्गातील इम्युनोग्लोबुलिन ओळखण्यासाठी, पारंपारिक 96-वेल पॉलिस्टीरिन पॅनेल (प्लेट) वापरला जातो, ज्याच्या विहिरींमध्ये सॉर्ब्ड रीकॉम्बीनंट प्रथिने घन टप्प्यात केंद्रित असतात. रक्ताच्या सीरमसह विहिरीमध्ये प्रवेश करणारे अँटीबॉडीज किंवा प्रतिजन एक "परिचित" वस्तू शोधतात आणि त्याच्यासह एक कॉम्प्लेक्स तयार करतात (एजी - एटी), जे एन्झाइम संयुग्माद्वारे निश्चित केले जाते, जेव्हा विहिरीच्या रंगात बदल घडवून आणतात. परिणाम वाचणे.

विशिष्ट प्रयोगशाळांमध्ये उत्पादित आणि सर्व आवश्यक प्रतिक्रिया घटकांसह सुसज्ज असलेल्या विशिष्ट विशिष्टतेच्या चाचणी प्रणालींचा वापर करून एन्झाईम इम्युनोसे केले जाते. वॉशिंग मशिन (“वॉशर”) आणि वाचन स्पेक्ट्रोफोटोमीटर वापरून संशोधन केले जाऊ शकते, ज्यामध्ये मुख्यतः अंगमेहनतीचा समावेश असतो. पूर्ण स्वयंचलित मशीनवर, जे प्रयोगशाळा सहाय्यकास नीरस इन्स्टिलेशन, वॉशिंग आणि इतर नियमित कामांपासून मुक्त करतात, अर्थातच, ते काम करणे अधिक जलद आणि अधिक सोयीस्कर आहे, परंतु सर्व प्रयोगशाळा अशा लक्झरी घेऊ शकत नाहीत आणि जुन्या पद्धतीनुसार काम करणे सुरू ठेवू शकत नाहीत. अर्ध-स्वयंचलित मशीन.

एलिसा परिणामांचे स्पष्टीकरण प्रयोगशाळेतील निदान चिकित्सकाच्या योग्यतेमध्ये आहे आणि खोटी-सकारात्मक किंवा खोटी-नकारात्मक उत्तरे देण्यासाठी जवळजवळ सर्व इम्युनोकेमिकल प्रतिक्रियांचे मूळ गुणधर्म देखील विचारात घेतले पाहिजेत.

व्हिडिओ: आधुनिक एंजाइम इम्युनोसे

सिफिलीसचे उदाहरण वापरून एलिसा परिणाम

एन्झाइम इम्युनोसे सर्व प्रकार शोधण्यासाठी योग्य आहे, आणि, याव्यतिरिक्त, स्क्रीनिंग अभ्यासात वापरले जाते. विश्लेषण करण्यासाठी, रिक्त पोटावर घेतलेल्या रुग्णाचे शिरासंबंधी रक्त वापरले जाते. कार्य विशिष्ट विशिष्टतेसह गोळ्या वापरते (एबी वर्ग ए, एम, जी) किंवा एकूण अँटीबॉडीज.

सिफिलीसमधील प्रतिपिंड एका विशिष्ट क्रमाने तयार होतात हे लक्षात घेता, संक्रमण कधी झाले आणि प्रक्रिया कोणत्या टप्प्यावर आहे या प्रश्नाचे उत्तर एलिसा सहजपणे देऊ शकते आणि प्राप्त परिणामांचे स्पष्टीकरण खालील स्वरूपात सादर केले जाऊ शकते:

• IgM संसर्गजन्य प्रक्रियेचा कालावधी दर्शवितो (तीव्र दाहक रोगांच्या तीव्रतेदरम्यान दिसू शकतो);
• IgA सांगते की संसर्ग एका महिन्यापेक्षा जास्त पूर्वी झाला होता;
• IgG सूचित करते की संसर्ग जोरात सुरू आहे किंवा उपचार अलीकडेच केले गेले आहेत, जे सहजपणे anamnesis घेऊन निर्धारित केले जाते.

सिफिलीसची चाचणी करताना, नकारात्मक विहिरी (आणि नकारात्मक नियंत्रण) रंगहीन राहतील, तर सकारात्मक विहिरी (आणि सकारात्मक नियंत्रण) चाचणी दरम्यान जोडलेल्या क्रोमोजेनच्या रंग बदलामुळे चमकदार पिवळा रंग दाखवतील. तथापि, रंगाची तीव्रता नेहमी नियंत्रणाशी जुळत नाही, म्हणजेच ती किंचित फिकट किंवा किंचित पिवळसर असू शकते. हे संशयास्पद परिणाम आहेत, जे, एक नियम म्हणून, स्पेक्ट्रोफोटोमीटरवर प्राप्त केलेल्या परिमाणवाचक निर्देशकांच्या अनिवार्य विचारासह पुनर्तपासणीच्या अधीन आहेत, परंतु सर्वसाधारणपणे, रंग रोगप्रतिकारक कॉम्प्लेक्स (संबंधित Ags आणि ATs) च्या संख्येशी थेट प्रमाणात असतो. .

एन्झाइम इम्युनोअसेसपैकी सर्वात रोमांचक एचआयव्ही एलिसा आहे

लोकसंख्येच्या विस्तृत श्रेणीसाठी विश्लेषण कदाचित इतरांपेक्षा अधिक मनोरंजक आहे, कारण अजूनही आत्मविश्वासाने सांगणे अशक्य आहे की अनेक सामाजिक समस्या गायब झाल्या आहेत (वेश्याव्यवसाय, मादक पदार्थांचे व्यसन इ.). दुर्दैवाने, एचआयव्ही केवळ मानवी समाजाच्या या स्तरांवरच परिणाम करत नाही; लैंगिक अनैतिकता किंवा मादक पदार्थांच्या वापराशी संबंधित नसलेल्या विविध परिस्थितींमध्ये तुम्हाला संसर्ग होऊ शकतो. परंतु जर एचआयव्ही चाचणीची आवश्यकता असेल, तर तुम्ही घाबरू नका की तुमच्या आजूबाजूच्या प्रत्येकाला तुमच्या अशा प्रयोगशाळेच्या भेटीबद्दल कळेल. आता एचआयव्ही बाधित लोकांना कायद्याने संरक्षण दिले आहे आणि ज्यांना शंका आहे ते निनावी कार्यालयांकडे वळू शकतात जेथे ते प्रसिद्धी आणि निषेधाच्या भीतीशिवाय समस्या सोडवू शकतात.

एचआयव्ही संसर्गाचे निदान करण्यासाठी वापरली जाणारी एन्झाइम इम्युनोसे पद्धत ही सर्वात महत्त्वाची मानक अभ्यासांपैकी एक आहे, तथापि, विषय अतिशय नाजूक असल्याने विशेष परिस्थिती आवश्यक आहे.

एचआयव्ही एलिसा लैंगिक संपर्कानंतर, रक्त संक्रमण, संसर्ग सूचित करणारी इतर वैद्यकीय प्रक्रिया आणि उष्मायन कालावधीच्या शेवटी ("सेरोनेगेटिव्ह विंडो") पार पाडण्यात अर्थ आहे, परंतु हे लक्षात घेतले पाहिजे की हा कालावधी योग्य नाही. कायम हे 14-30 दिवसांत संपू शकते, किंवा ते सहा महिन्यांपर्यंत टिकू शकते, म्हणून सरासरी मूल्य 45 ते 90 दिवसांचे अंतर मानले जाते. एचआयव्हीसाठी रक्त इतर संक्रमणांप्रमाणेच दान केले जाते - रिकाम्या पोटी रक्तवाहिनीतून. प्रयोगशाळेतील सामग्रीचे संचय आणि त्याच्या कार्यभारावर (2 ते 10 दिवसांपर्यंत) अवलंबून परिणाम तयार होतील, जरी बहुतेकदा प्रयोगशाळा त्याच दिवशी किंवा पुढच्या दिवशी उत्तर देतात.

तुमच्या एचआयव्ही परिणामांकडून तुम्ही काय अपेक्षा करू शकता?

एचआयव्ही संसर्गासाठी एलिसा दोन प्रकारच्या विषाणूंचे प्रतिपिंड शोधते: एचआयव्ही-1 (रशिया आणि युरोप आणि आशियातील इतर देशांमध्ये अधिक सामान्य) आणि एचआयव्ही-2 (पश्चिम आफ्रिकेत अधिक सामान्य).

एचआयव्ही एलिसाचे कार्य वर्ग जी अँटीबॉडीज शोधणे आहे, जे सर्व चाचणी प्रणालींवर आढळतात, परंतु नंतरच्या काळात, आणि नवीन पिढीच्या रीकॉम्बीनंट चाचणी किटवर आढळलेल्या वर्ग ए आणि एम अँटीबॉडीज, ज्यामुळे प्रतिपिंड शोधणे शक्य होते. सुरुवातीच्या टप्प्यावर (उष्मायन कालावधी - "सेरोनेगेटिव्ह विंडो"). तुम्ही एलिसा कडून खालील उत्तरांची अपेक्षा करू शकता:

1. प्राथमिक सकारात्मक परिणाम: एकाच प्रकारच्या चाचणी प्रणालीचा वापर करून रक्ताची पुन्हा तपासणी करणे आवश्यक आहे, परंतु शक्य असल्यास भिन्न मालिका आणि दुसर्या व्यक्तीद्वारे (प्रयोगशाळा सहाय्यक);
2. वारंवार (+) प्राथमिक विश्लेषणाप्रमाणेच तपासणीसह रुग्णाकडून नवीन रक्त काढणे समाविष्ट आहे;
3. आणखी एक सकारात्मक परिणाम संदर्भ विश्लेषणाच्या अधीन आहे, जे अत्यंत विशिष्ट चाचणी किट (2-3 पीसी.) वापरते;
4. दोन्ही (किंवा तीन) प्रणालींमध्ये सकारात्मक परिणाम इम्युनोब्लोटिंगसाठी पाठविला जातो (समान एलिसा, परंतु विशेषतः उच्च विशिष्टतेच्या चाचणी किटचा वापर करून वैयक्तिकरित्या केले जाते).

एचआयव्ही संसर्गाचा निष्कर्ष केवळ इम्युनोब्लॉटिंगच्या आधारावर काढला जातो. संक्रमित व्यक्तीशी संभाषण पूर्ण गोपनीयतेने केले जाते. रशियामध्ये तसेच इतर देशांमध्ये वैद्यकीय गुपिते उघड करणे गुन्हेगारी शिक्षेच्या अधीन आहे.

एन्झाईम इम्युनोसे पद्धतीचा वापर करून क्लॅमिडीया आणि सायटोमेगॅलॉइरसच्या चाचण्यांना देखील विशेष लोकप्रियता मिळाली आहे, कारण ते संक्रमणाची वेळ, रोगाचा टप्पा आणि उपचार उपायांची प्रभावीता निर्धारित करणे शक्य करतात.

अंमलबजावणी दरम्यान, एखादी व्यक्ती विविध वर्गांच्या ऍन्टीबॉडीजचे स्वरूप देखील पाहू शकते.संसर्गजन्य एजंटमुळे पॅथॉलॉजिकल स्थितीच्या वेगवेगळ्या टप्प्यांमध्ये:

• IgM संसर्ग झाल्यानंतर सात दिवसांनी लवकर शोधले जाऊ शकते;
• IgA सूचित करते की संसर्ग एका महिन्यापेक्षा जास्त काळ शरीरात राहतो;
• IgG क्लॅमिडीयाच्या निदानाची पुष्टी करते आणि उपचारांवर लक्ष ठेवण्यास आणि त्याची प्रभावीता निर्धारित करण्यात मदत करते. हे लक्षात घेतले पाहिजे की वर्ग जी अँटीबॉडीज रोगाचा कालावधी विचारात न घेता शरीरात राहतात आणि प्रसारित करतात, म्हणूनच, विश्लेषणाचा योग्य अर्थ लावण्यासाठी, आपल्याला संदर्भ मूल्ये (मानक) विचारात घेणे आवश्यक आहे, जे तसे. , प्रत्येक CDL साठी भिन्न आहेत: चाचणी प्रणालीचा ब्रँड आणि सेटमध्ये समाविष्ट केलेल्या अभिकर्मकांची विशिष्टता लक्षात घेऊन. सामान्य मूल्ये ELISA निकालाच्या पुढील फॉर्ममध्ये प्रविष्ट केली जातात.

म्हणून, येथे थोडे वेगळे आहे:क्लास एम अँटीबॉडीज सुमारे एक महिना ते दीड महिन्यानंतर दिसून येतात, म्हणजेच सकारात्मक परिणाम (IgM+) प्राथमिक संसर्गाच्या टप्प्यात किंवा सुप्त संसर्गाच्या पुन: सक्रियतेदरम्यान होतो आणि तो 4 महिने ते सहा महिन्यांपर्यंत राहतो.

वर्ग जी अँटीबॉडीजची उपस्थिती प्राथमिक तीव्र संसर्ग किंवा रीइन्फेक्शनच्या प्रारंभाचे वैशिष्ट्य आहे. विश्लेषणात असे म्हटले आहे की व्हायरस अस्तित्वात आहे, परंतु संसर्गजन्य प्रक्रिया कोणत्या टप्प्यावर आहे याबद्दल माहिती प्रदान करत नाही. दरम्यान, सामान्य IgG टायटर निश्चित करण्यात देखील अडचणी येतात, कारण ते पूर्णपणे एखाद्या विशिष्ट व्यक्तीच्या रोगप्रतिकारक स्थितीवर अवलंबून असते, जे तथापि, वर्ग G इम्युनोग्लोबुलिन ओळखून स्थापित केले जाते. प्रतिपिंडांचे हे वर्तन लक्षात घेता, CMV चे निदान करताना, आवश्यक आहे. सीएमव्हीशी संवाद साधण्यासाठी वर्ग जी अँटीबॉडीजच्या क्षमतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी, नंतर ते "तटस्थ" करण्यासाठी (एटी ऍव्हिडिटी). रोगाच्या सुरुवातीच्या टप्प्यावर, IgG विषाणूजन्य प्रतिजनांना (कमी उत्सुकता) खूप खराबपणे बांधतो आणि त्यानंतरच क्रियाकलाप दर्शवू लागतो, म्हणून, आम्ही ऍन्टीबॉडीजच्या उत्कंठा वाढण्याबद्दल बोलू शकतो.

एंजाइम इम्युनोसेच्या फायद्यांबद्दल आपण बरेच काही बोलू शकतो, कारण या पद्धतीमुळे केवळ शिरासंबंधी रक्त वापरून अनेक निदान समस्यांचे निराकरण करण्यात यश आले आहे. संशोधनासाठी साहित्य गोळा करताना दीर्घ प्रतीक्षा, काळजी आणि समस्यांची गरज नाही. याव्यतिरिक्त, ELISA साठी चाचणी प्रणालींमध्ये सुधारणा होत आहेत आणि चाचणी 100% विश्वसनीय परिणाम देईल तो दिवस दूर नाही.

व्हिडिओ: मॉस्को स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटीच्या शैक्षणिक चित्रपटाचे नाव. सेचेनोव्ह एलिसाच्या मूलभूत गोष्टींवर

वर्णन

तयारी

संकेत

परिणामांची व्याख्या

वर्णन

निर्धार पद्धत एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परख (ELISA).

अभ्यासाधीन साहित्यरक्त सीरम

गृहभेटी उपलब्ध

एचआयव्ही प्रकार 1 आणि 2 आणि एचआयव्ही p24 प्रतिजन, गुणात्मक चाचणीसाठी अँटीबॉडीजची एकत्रित तपासणी.

लक्ष द्या. सकारात्मक आणि शंकास्पद प्रतिक्रियांच्या बाबतीत, निकाल जारी करण्याचा कालावधी 10 कार्य दिवसांपर्यंत वाढविला जाऊ शकतो. एचआयव्ही (ह्युमन इम्युनोडेफिशियन्सी व्हायरस), ज्यामुळे एड्स होतो (अधिग्रहित इम्युनोडेफिशियन्सी सिंड्रोम), हा रेट्रोव्हायरसच्या कुटुंबाशी संबंधित आहे. हे विषमलैंगिक आणि समलैंगिक अशा दोन्ही लैंगिक संपर्कादरम्यान इंट्राव्हेनस औषध प्रशासन किंवा उपचारात्मक प्रक्रियेसाठी दूषित सुया आणि सिरिंजच्या वापराद्वारे एका व्यक्तीकडून दुसर्‍या व्यक्तीमध्ये प्रसारित केले जाते. विषाणूचा प्रसार संक्रमित रक्त आणि त्याच्या उत्पादनांच्या रक्तसंक्रमणाद्वारे, अवयव किंवा सेमिनल फ्लुइडचे दान आणि वैद्यकीय कर्मचार्‍यांमध्ये - दूषित सुया किंवा उपकरणांच्या इजा याद्वारे होऊ शकतो. एचआयव्ही संसर्ग संक्रमित आईपासून मुलापर्यंत (उभ्या मार्गाने) संक्रमणाद्वारे शक्य आहे, जरी अँटीरेट्रोव्हायरल थेरपी वापरून प्रतिबंध करण्याच्या आधुनिक पद्धती, सर्व शिफारसींचे पालन केल्यास, हा धोका कमीतकमी कमी करू शकतो.

सेलसह व्हायरसच्या परस्परसंवादाच्या प्रक्रियेमध्ये अनेक टप्पे समाविष्ट असतात: व्हायरसला सेलमध्ये बांधणे, लिफाफ्यातून ते सोडणे, साइटोप्लाझममध्ये प्रवेश करणे, व्हायरल आरएनए वापरून डीएनएचे संश्लेषण, विषाणूच्या डीएनएचे जीनोममध्ये एकत्रीकरण. यजमान सेल. यानंतर, संसर्गाचा सुप्त टप्पा सुरू होतो. या अवस्थेत, प्रोव्हायरल डीएनए काही काळ क्रियाकलाप न दाखवता आणि होस्ट सेलच्या जीवनावर परिणाम न करता अस्तित्वात असू शकतो. विषाणूजन्य प्रथिनांची कोणतीही अभिव्यक्ती नसताना, विषाणूला रोगप्रतिकारक प्रतिक्रिया नसते. एचआयव्हीचे प्रतिपिंडे, जे शरीराच्या रोगप्रतिकारक प्रतिक्रियेचे वैशिष्ट्य करतात, व्हायरल डीएनएच्या सक्रियतेनंतर आणि व्हायरसच्या सक्रिय पुनरुत्पादनाच्या सुरुवातीनंतर दिसतात. सुप्त कालावधीचा कालावधी जीवाच्या वैयक्तिक अनुवांशिक वैशिष्ट्यांसह अनेक घटकांवर अवलंबून असतो.

एचआयव्हीचे प्रतिपिंडे संसर्गानंतर दुसऱ्या आठवड्यापासून दिसू शकतात; त्यांची सामग्री 2-4 आठवड्यांत वाढते आणि अनेक वर्षे टिकते. 90-95% संक्रमित लोकांमध्ये ते संक्रमणानंतर पहिल्या तीन महिन्यांत दिसतात, 5-9% मध्ये - तीन ते सहा महिन्यांच्या कालावधीत, 0.5-1% मध्ये - नंतरच्या तारखेला.

संसर्गाच्या पहिल्या आठवड्यात, विषाणूचे प्रतिपिंडे दिसण्यापूर्वी (म्हणजे, सेरोकन्व्हर्जनपूर्वी), एचआयव्ही प्रतिजनांची उपस्थिती, त्याच्या p24 कॅप्सिड प्रोटीनसह, सीरम किंवा प्लाझ्मा नमुन्यांमध्ये शोधली जाऊ शकते. नंतर, seroconversion नंतर, ते सहसा सापडत नाही.

चौथ्या पिढीच्या एकत्रित चाचणी प्रणाली, ज्यामध्ये HIV Ag/Ab कॉम्बो चाचणी (आर्किटेक्ट, अॅबॉट) समाविष्ट आहे, HIV प्रकार 1 आणि 2 आणि HIV p24 प्रतिजन दोन्ही अँटीबॉडीज शोधतात, ज्यामुळे संसर्ग लवकर ओळखता येतो. एचआयव्ही संसर्ग शोधण्यासाठी INVITRO प्रयोगशाळेत वापरल्या जाणार्‍या स्क्रीनिंग चाचणीच्या विशेष वैशिष्ट्यांमध्ये अभ्यासाची उच्च विशिष्टता समाविष्ट आहे (> 99.5%); सेरोकन्व्हर्जनच्या कालावधीच्या वैशिष्ट्यपूर्ण प्रतिपिंडांसाठी परख 100% संवेदनशील आहे आणि p24 प्रतिजनासाठी चाचणीची संवेदनशीलता सुमारे 18 pg/ml आहे.

एचआयव्हीसाठी प्रयोगशाळा तपासणी करण्याची प्रक्रिया रशियन फेडरेशनच्या आरोग्य मंत्रालयाच्या आदेशांद्वारे काटेकोरपणे नियंत्रित केली जाते आणि त्यात एन्झाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परख (ELISA) वापरून एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांच्या उपस्थितीच्या तपासणी (निवड) अभ्यासाचा टप्पा समाविष्ट आहे. वापरासाठी मंजूर केलेल्या पद्धती आणि शहर एड्स केंद्राच्या प्रयोगशाळेत सत्यापन (पुष्टीकरण) अधिक तपशीलवार अभ्यासाचा टप्पा. हे लक्षात घ्यावे की सर्वोत्तम स्क्रीनिंग ELISA प्रणाली देखील 100% विशिष्टतेची हमी देत ​​​​नाही, म्हणजेच रुग्णाच्या रक्ताच्या सीरमच्या वैशिष्ट्यांशी संबंधित गैर-विशिष्ट, चुकीचे-सकारात्मक परिणाम मिळण्याची काही शक्यता असते. त्यामुळे, ELISA तपासणीच्या सकारात्मक परिणामाची पुष्टी करणाऱ्या चाचण्यांमध्ये पुष्टी केली जाऊ शकत नाही, ज्यानंतर रुग्णाला नकारात्मक किंवा अनिश्चित निकाल दिला जाईल. पुष्टीकरण अभ्यासाचा निकाल अनिश्चित असल्यास, चाचणी 2-3 आठवड्यांनंतर कालांतराने पुनरावृत्ती करावी.

एचआयव्ही-संक्रमित मातांना जन्मलेल्या मुलांमध्ये एचआयव्ही संसर्गाच्या प्रयोगशाळेतील निदानाची स्वतःची वैशिष्ट्ये आहेत. एचआयव्ही (आयजीजी वर्ग) साठी मातृ प्रतिपिंडे जन्माच्या क्षणापासून 18 महिन्यांपर्यंत त्यांच्या रक्तात फिरू शकतात. नवजात मुलांमध्ये एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांच्या अनुपस्थितीचा अर्थ असा नाही की व्हायरस प्लेसेंटल अडथळामध्ये प्रवेश केला नाही. एचआयव्ही-संक्रमित मातांच्या मुलांना जन्मानंतर 36 महिन्यांच्या आत प्रयोगशाळा निदान तपासणी केली जाते.

तयारी

विशेष तयारीची आवश्यकता नाही. शेवटच्या जेवणानंतर 4 तासांपूर्वी रक्त घेण्याची शिफारस केली जाते. संशोधनाच्या तयारीसाठी सामान्य शिफारसी आढळू शकतात. संभाव्य संसर्गानंतर दोन आठवड्यांपूर्वी एचआयव्हीचे प्रतिजन आणि प्रतिपिंडे शोधण्यासाठी चाचणी घेणे उचित आहे, नकारात्मक परिणामाच्या बाबतीत तीन आणि सहा आठवड्यांनंतर पुनरावृत्ती चाचणीसह. INVITRO LLC मधील संशोधनासाठी अर्ज पासपोर्ट किंवा त्याऐवजी कागदपत्रे वापरून भरले जातात (स्थलांतर कार्ड, राहण्याच्या ठिकाणी तात्पुरती नोंदणी, लष्करी कर्मचारी आयडी, पासपोर्ट गमावल्यास पासपोर्ट कार्यालयाकडून प्रमाणपत्र, नोंदणी कार्ड हॉटेल). सादर केलेल्या दस्तऐवजात रशियन फेडरेशनमध्ये तात्पुरती किंवा कायमस्वरूपी नोंदणी आणि छायाचित्र असणे आवश्यक आहे. पासपोर्टच्या अनुपस्थितीत (त्याच्या जागी एक दस्तऐवज), बायोमटेरियल देणगीसाठी निनावी अर्ज भरण्याचा रुग्णाला अधिकार आहे. निनावी तपासणी दरम्यान, क्लायंटकडून प्राप्त केलेला अर्ज आणि बायोमटेरिअलचा नमुना, एक नंबर नियुक्त केला जातो जो केवळ रुग्ण आणि ऑर्डर देणार्‍या वैद्यकीय कर्मचार्‍यांना ज्ञात असतो. ! निनावीपणे केलेल्या अभ्यासाचे निकाल हॉस्पिटलायझेशन, व्यावसायिक परीक्षांसाठी सबमिट केले जाऊ शकत नाहीत आणि ते ORUIB मध्ये नोंदणीच्या अधीन नाहीत.

वापरासाठी संकेत

• दोन पेक्षा जास्त भागात वाढलेले लिम्फ नोड्स.
• लिम्फोपेनियासह ल्युकोपेनिया.
• रात्री घाम येतो.
• अज्ञात कारणामुळे अचानक वजन कमी होणे.
• अज्ञात कारणास्तव तीन आठवड्यांपेक्षा जास्त काळ अतिसार.
• अज्ञात कारणाचा ताप.
• गर्भधारणा नियोजन.
• शस्त्रक्रियापूर्व तयारी, हॉस्पिटलायझेशन.
• खालील संक्रमण किंवा त्याचे संयोजन शोधणे: क्षयरोग, प्रकट टॉक्सोप्लाज्मोसिस, वारंवार नागीण विषाणू संसर्ग, अंतर्गत अवयवांचे कॅन्डिडिआसिस, वारंवार हर्पस झोस्टर न्यूरलजिया, मायकोप्लाझमामुळे होणारा न्यूमोनिया, न्यूमोसिस्टिस किंवा लिजिओनेला.
• लहान वयात कपोसीचा सारकोमा.
• प्रासंगिक लैंगिक संपर्क.

परिणामांची व्याख्या

संशोधन परिणामांच्या स्पष्टीकरणामध्ये उपस्थित डॉक्टरांसाठी माहिती असते आणि ती निदान नसते. या विभागातील माहिती स्व-निदान किंवा स्व-उपचारांसाठी वापरली जाऊ नये. डॉक्टर या परीक्षेचे निकाल आणि इतर स्त्रोतांकडून आवश्यक माहिती दोन्ही वापरून अचूक निदान करतात: वैद्यकीय इतिहास, इतर परीक्षांचे निकाल इ.

स्वतंत्र प्रयोगशाळा INVITRO मध्ये मोजमापाची एकके: गुणात्मक चाचणी. परिणामांच्या सादरीकरणाचे स्वरूप: HIV 1 आणि 2 आणि p24 प्रतिजनासाठी प्रतिपिंडांच्या अनुपस्थितीत, उत्तर "नकारात्मक" आहे. स्क्रिनिंग एन्झाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट चाचणीमध्ये एचआयव्ही किंवा प्रतिजन प्रतिपिंडे आढळल्यास, सीरम नमुना शहरातील एड्स केंद्राकडे इम्युनोब्लोटिंगद्वारे पुष्टीकरणासाठी पाठविला जातो, जो सकारात्मक आणि अनिश्चित परिणामांची पडताळणी करतो.

सकारात्मक परिणाम:

1. एचआयव्ही संसर्ग;
2. वारंवार किंवा अतिरिक्त अभ्यास आवश्यक असत्य सकारात्मक परिणाम *);
3. एचआयव्ही-संक्रमित मातांपासून जन्मलेल्या 18 महिन्यांपेक्षा कमी वयाच्या मुलांमध्ये हा अभ्यास माहितीपूर्ण नाही.

*अभिकर्मक निर्मात्याने प्रदान केलेल्या अंदाजानुसार, एचआयव्ही 1 आणि 2 आणि एचआयव्ही प्रतिजन 1 आणि 2 (एचआयव्ही एजी/एबी कॉम्बो, अॅबॉट) साठी स्क्रीनिंग चाचणी प्रणाली अँटीबॉडीजची विशिष्टता, सामान्य लोकसंख्या आणि दोन्हीमध्ये सुमारे 99.6% आहे. संभाव्य हस्तक्षेप असलेले गट रुग्ण (संक्रमण HBV, HCV, रुबेला, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E. coli, Chl. trach. इ., ऑटोइम्यून पॅथॉलॉजीज (संधिवात, अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजसह) , गर्भधारणा, IgG, IgM, मोनोक्लोनल गॅमोपॅथी, हेमोडायलिसिस, एकाधिक रक्त संक्रमण) ची उच्च पातळी.

अभ्यासाबद्दल सामान्य माहिती

एचआयव्ही (ह्युमन इम्युनोडेफिशियन्सी व्हायरस) हा रेट्रोव्हायरस कुटुंबातील एक विषाणू आहे जो मानवी रोगप्रतिकारक प्रणाली (CD4, T हेल्पर पेशी) च्या पेशींना संक्रमित करतो. एड्सला कारणीभूत ठरते.

एचआयव्ही-१ हा विषाणूचा सर्वात सामान्य प्रकार आहे, बहुतेकदा रशिया, यूएसए, युरोप, जपान आणि ऑस्ट्रेलियामध्ये आढळतो (सामान्यतः उपप्रकार बी).

HIV-2 हा एक दुर्मिळ प्रकार आहे, जो पश्चिम आफ्रिकेत सामान्य आहे.

मानवी इम्युनोडेफिशियन्सी विषाणूचे निदान करण्यासाठी, चौथ्या पिढीची एकत्रित चाचणी प्रणाली वापरली जाते, जी व्हायरस रक्तात प्रवेश केल्यानंतर 2 आठवड्यांच्या आत एचआयव्ही संसर्ग शोधण्यात सक्षम आहे, तर पहिल्या पिढीच्या चाचणी प्रणाली संसर्ग झाल्यानंतर केवळ 6-12 आठवड्यांत हे करतात.

या एकत्रित एचआयव्ही चाचणीचा फायदा म्हणजे विशिष्ट p24 प्रतिजन (व्हायरल कॅप्सिड प्रोटीन) च्या अभिकर्मक म्हणून HIV-1 p24 ला प्रतिपिंडांचा वापर केल्याबद्दल धन्यवाद, जे या चाचणीद्वारे 1-4 आठवड्यांच्या आत शोधले जाऊ शकते. संसर्गाचा क्षण, म्हणजे सेरोकन्व्हर्जनच्या आधी, जो "विंडो पीरियड" लक्षणीयरीत्या कमी करतो.

याव्यतिरिक्त, ही एचआयव्ही चाचणी रक्तातील एचआयव्ही-1 आणि एचआयव्ही-2 चे प्रतिपिंडे शोधते (अँटीजेन-अँटीबॉडी प्रतिक्रिया वापरून), जे संक्रमणानंतर 2-8 आठवड्यांनंतर चाचणी प्रणालीद्वारे शोधण्यासाठी पुरेशा प्रमाणात तयार केले जातात.

सेरोकन्व्हर्जननंतर, ऍन्टीबॉडीज p24 ऍन्टीजनला बांधायला लागतात, परिणामी HIV ऍन्टीबॉडी चाचणी सकारात्मक आणि नकारात्मक p24 चाचणी होते. तथापि, काही काळानंतर, दोन्ही अँटीबॉडीज आणि प्रतिजन एकाच वेळी रक्तामध्ये आढळून येतील. अंतिम टप्प्यावर, एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांसाठी एड्स चाचणी नकारात्मक परिणाम देऊ शकते, कारण प्रतिपिंड निर्मितीची यंत्रणा विस्कळीत आहे.

एचआयव्ही संसर्गाचे टप्पे

1. उष्मायन कालावधी, किंवा "सेरोनेगेटिव्ह विंडो पिरियड" हा संसर्गाच्या क्षणापासून रक्तातील विषाणूच्या संरक्षणात्मक प्रतिपिंडांच्या विकासापर्यंतचा काळ असतो, जेव्हा एचआयव्हीच्या प्रतिपिंडांच्या चाचण्या नकारात्मक असतात, परंतु व्यक्ती आधीच व्हायरस प्रसारित करू शकते. इतर लोकांना. या कालावधीचा कालावधी 2 आठवडे ते 6 महिने असतो.
2. तीव्र एचआयव्ही संसर्गाचा कालावधी संसर्गाच्या क्षणापासून सरासरी 2-4 आठवड्यांनी सुरू होतो आणि अंदाजे 2-3 आठवडे टिकतो. या टप्प्यावर, काही लोकांमध्ये विषाणूच्या सक्रिय प्रतिकृतीमुळे फ्लू सारखी विशिष्ट लक्षणे विकसित होऊ शकतात.
3. सुप्त अवस्था लक्षणे नसलेली असते, परंतु त्या दरम्यान हळूहळू प्रतिकारशक्ती कमी होते आणि रक्तातील विषाणूचे प्रमाण वाढते.
4. एड्स (अधिग्रहित इम्युनोडेफिशियन्सी सिंड्रोम) हा एचआयव्ही संसर्गाच्या विकासाचा अंतिम टप्पा आहे, जो रोगप्रतिकारक शक्तीच्या तीव्र दडपशाही, तसेच सहवर्ती रोग, एन्सेफॅलोपॅथी किंवा कर्करोग द्वारे दर्शविले जाते.

एचआयव्ही संसर्ग असाध्य आहे हे असूनही, आज अत्यंत सक्रिय अँटीरेट्रोव्हायरल थेरपी (एआरटी) आहे, जी एचआयव्ही-संक्रमित व्यक्तीचे आयुष्य लक्षणीय वाढवू शकते आणि त्याची गुणवत्ता सुधारू शकते.

जर एचआयव्ही संसर्ग चाचणीच्या वेळेपूर्वी (2-4 आठवडे) झाला असेल तर या चाचणीचे विशेषतः उच्च निदान मूल्य आहे.

संशोधन कशासाठी वापरले जाते?

विश्लेषणाचा वापर एचआयव्हीच्या लवकर निदानासाठी केला जातो, ज्यामुळे इतर लोकांमध्ये विषाणूचा पुढील प्रसार रोखता येतो, तसेच अँटीरेट्रोव्हायरल थेरपी आणि एचआयव्ही संसर्गाच्या प्रगतीस कारणीभूत असलेल्या रोगांवर उपचार वेळेवर सुरू करणे शक्य होते.

अभ्यास कधी नियोजित आहे?

• अज्ञात एटिओलॉजीच्या सतत लक्षणांसह (2-3 आठवड्यांपर्यंत): कमी दर्जाचा ताप, अतिसार, रात्री घाम येणे, अचानक वजन कमी होणे, लिम्फ नोड्स वाढणे.
• वारंवार नागीण संसर्ग, व्हायरल हिपॅटायटीस, न्यूमोनिया, क्षयरोग, टोक्सोप्लाझोसिस.
• जर रुग्णाला लैंगिक संक्रमित रोग (सिफिलीस, क्लॅमिडीया, गोनोरिया, जननेंद्रियाच्या नागीण, बॅक्टेरियल योनिओसिस) ग्रस्त असल्यास.
• जर रुग्णाने असुरक्षित योनिमार्ग, गुदद्वारासंबंधी किंवा तोंडी संभोग अनेक लैंगिक भागीदारांसह केला असेल, नवीन जोडीदार किंवा भागीदार ज्याची एचआयव्ही स्थिती रुग्णाला खात्री नाही.
• जेव्हा रुग्णाला रक्तदात्याचे रक्त संक्रमण होते (जरी अशा प्रकारे संसर्गाची प्रकरणे व्यावहारिकरित्या वगळली जातात, कारण विषाणूजन्य कणांच्या उपस्थितीसाठी रक्त काळजीपूर्वक तपासले जाते आणि विशेष उष्णता उपचार केले जाते).
• जर रुग्णाने निर्जंतुकीकरण यंत्रे वापरून औषधे इंजेक्शन दिली.
• गर्भधारणेदरम्यान/नियोजन करताना (गर्भधारणेदरम्यान अॅझिडोथायमिडीन घेणे, जन्म कालव्यातून जाताना बाळामध्ये विषाणूचा संसर्ग टाळण्यासाठी सिझेरियन सेक्शन, आणि स्तनपान टाळल्याने आईपासून बाळामध्ये एचआयव्हीचा संसर्ग होण्याचा धोका ३०% वरून १% कमी होतो. ).
• सिरिंज किंवा इतर वस्तू (उदाहरणार्थ, वैद्यकीय साधन) सह अपघाती इंजेक्शन ज्यामध्ये संक्रमित रक्त असते (अशा प्रकरणांमध्ये संसर्गाची शक्यता अत्यंत कमी असते).