Техника определения группы крови. Методы определения группы крови Системы определения группы крови


Материалы публикуются для ознакомления, и не являются предписанием к лечению! Рекомендуем обратиться к врачу-гематологу в вашем лечебном учреждении!

Группа крови и резус-фактор — особые белки, которые определяют ее индивидуальный характер, так же, как цвет глаз или волос у человека. Группа и резус имеют большое значение в медицине при лечении кровопотерь, болезней крови, а также влияют на формирование организма, функционирование органов и даже психологические особенности человека.

Понятие о группе крови

Еще врачи древности пытались восполнять кровопотерю путем переливания крови от человека человеку и даже от животных. Как правило, все эти попытки имели печальный исход. И только в начале ХХ века австрийским ученым Карлом Ландштейнером были обнаружены различия в группах крови у людей, которые представляли собой особые белки в эритроцитах — агглютиногены, то есть вызывающие реакцию агглютинации — склеивание эритроцитов. Она-то и являлась причиной гибели больных после переливания крови.

Установлено 2 основных вида агглютиногенов, которые были условно названы А и В. Склеивание эритроцитов, то есть несовместимость крови, происходит в случае, если агглютиноген соединяется с одноименным белком — агглютинином, содержащимся в плазме крови, соответственно, а и b. Значит, в крови человека не может быть одноименных белков, вызывающих склеивание эритроцитов, то есть если есть агглютиноген А, то в ней не может быть агглютинина а.

Обнаружено также, что в крови могут быть оба агглютиногена — А и В, но тогда она не содержит ни одного вида агглютининов, и наоборот. Все это и есть признаки, определяющие группу крови. Поэтому при соединении одноименных белков эритроцитов и плазмы развивается конфликт по группе крови.

Виды групп крови

На основании этого открытия у людей выделено 4 основных вида группы крови:

  • 1-я, не содержащая агглютиногенов, но содержащая оба агглютинина а и b, это — самая распространенная группа крови, которой обладают 45% населения планеты;
  • 2-я, содержащая агглютиноген А и агглютинин b, определяется у 35% людей;
  • 3-я, в которой есть агглютиноген В и агглютинин а, ее имеют 13% людей;
  • 4-я, содержащая оба агглютиногена А и В, и не содержащая агглютининов, такая группа крови самая редкая, она определяется лишь у 7% населения.

В России принято обозначение групповой принадлежности крови по системе АВ0, то есть по содержанию в ней агглютиногенов. В соответствии с этим таблица групп крови выглядит следующим образом:

Групповая принадлежность крови передается по наследству. Может ли поменяться группа крови — на этот вопрос ответ однозначен: не может. Хотя истории медицины известен единственный случай, связанный с генными мутациями. Ген, определяющий группу крови, находится в 9-й паре хромосомного набора человека.

Важно! Суждение о том, какая группа крови подходит всем, сегодня утратило актуальность, так же, как и понятие универсального донора, то есть обладателя 1-й (нулевой) группы крови. Открыто множество подвидов групп крови, и переливается только одногруппная кровь.

Резус-фактор: отрицательный и положительный

Несмотря на открытие Ландштейнером групп крови, все же продолжали иметь место трансфузионные реакции во время переливания. Ученый продолжал свои исследования, и совместно со своими коллегами Винером и Левайном ему удалось обнаружить еще один специфический белок-антиген эритроцитов — резус-фактор. Вначале он был выявлен у человекообразной обезьяны макаки-резус, откуда и получил свое название. Оказалось, что резус присутствует и в крови большинства людей: у 85% населения этот антиген имеется, а у 15% он отсутствует, то есть у них отрицательный резус-фактор.

Особенность резус-антигена состоит в том, что при попадании в кровь людей, его не имеющих, он способствует выработке антирезус-антител. При повторном контакте с резус-фактором эти антитела дают тяжелую гемолитическую реакцию, которая называется резус-конфликтом.

Важно! Когда резус-фактор отрицательный — это значит не просто отсутствие в эритроцитах резус-антигена. В крови могут присутствовать антирезусные антитела, которые могли образоваться во время контакта с резус-положительной кровью. Поэтому обязателен анализ на наличие резус-антител.

Определение группы крови и резус-фактора

Группа крови и резус-фактор подлежат обязательному определению в следующих случаях:

  • для проведения переливания крови;
  • для пересадки костного мозга;
  • перед любой операцией;
  • при беременности;
  • при заболеваниях крови;
  • у новорожденных при гемолитической желтухе (резус-несовместимости с матерью).

Однако в идеале сведения о групповой и резус-принадлежности должны быть у каждого человека — как у взрослого, так и у ребенка. Никогда нельзя исключить случаи тяжелой травмы или острого заболевания, когда может срочно понадобиться кровь.

Определение группы крови

Определение группы крови проводится специально полученными моноклональными антителами по системе АВ0, то есть агглютининами сыворотки, которые дают склеивание эритроцитов при контакте с одноименными агглютиногенами.

Алгоритм определения группы крови следующий:

  1. Подготавливают цоликлоны (моноклональные антитела) анти-А — ампулы розового цвета, и анти-В — ампулы синего цвета. Подготавливают 2 чистых пипетки, стеклянные палочки для смешивания и предметные стекла, одноразовый шприц на 5 мл для взятия крови, пробирку.
  2. Выполняют забор крови из вены.
  3. На предметное стекло или специальный маркированный планшет наносят по большой капле цоликлонов (0,1 мл), к ним подмешивают отдельными стеклянными палочками маленькие капли исследуемой крови (0,01 мл).
  4. Наблюдают за результатом 3-5 минут. Капля с примешанной кровью может быть гомогенной — реакция минус (-), или выпадают хлопья — реакция плюс или агглютинация (+). Оценка результатов обязательно проводится врачом. Варианты исследования определения группы крови представлены в таблице:

Определение резус-фактора

Определение резус-фактора выполняется аналогично определению группы крови, то есть с помощью моноклонального антитела сыворотки к резус-антигену. На специальную чистую белую керамическую поверхность наносят большую каплю реагента (цоликлона) и малую каплю только что взятой крови, в таких же пропорциях (10:1). Кровь осторожно смешивают стеклянной палочкой с реагентом.

Определение резус фактора цоликлонами занимает меньше времени, потому что реакция наступает уже через 10-15 секунд. Однако необходимо выдержать максимальный срок — 3 минуты. Так же, как и в случае определения группы крови, пробирку с кровью направляют в лабораторию.

В медицинской практике сегодня широко применяют удобный и быстрый экспресс-метод определения групповой принадлежности и резус-фактора с помощью сухих цоликлонов, которые разводятся стерильной водой для инъекций непосредственно перед исследованием. Метод называется «Эритротест-группокарт», он очень удобен как в условиях клиник, так и в экстремальных, и в полевых условиях.

Характер и здоровье человека по группе крови

Кровь человека как его специфический генетический признак еще до конца не изучена. В последние годы учеными открыты варианты подгрупп крови, разрабатываются новые технологии определения совместимости и так далее.

Крови также приписывается свойство влиять на здоровье и характер ее владельца. И хотя этот вопрос остается спорным, все же многолетними наблюдениями подмечены интересные факты. Например, японские исследователи считают, что можно определить характер человека по группе крови:

  • обладатели 1-й группы крови — люди волевые, сильные, общительные и эмоциональные;
  • обладатели 2-й группы отличаются терпеливостью, скрупулезностью, упорством, трудолюбием;
  • представители 3-й группы являются творческими личностями, но в то же время слишком впечатлительны, властны и капризны;
  • люди с 4-й группой крови живут больше чувствами, отличаются нерешительностью, порой неоправданно резки.

Что касается здоровья в зависимости от группы крови, то считается, что оно является наиболее крепким у большинства населения, то есть при 1-й группе. Лица со 2-й группой склонны к болезням сердца и онкологическим заболеваниям, для обладателей 3-й группы характерен слабый иммунитет, низкая устойчивость к инфекциям и стрессам, а представители 4-й группы склонны к сердечно-сосудистой патологии, заболеваниям суставов, раку.

В зависимости от разновидностей антигенов, входящих в состав кровяных телец (эритроцитов) определяется конкретная группа крови. У каждого человека она постоянна и не изменяется с рождения до смерти.

Количество эритроцитов определяет группу крови

Кто открыл группу крови у человека

Идентифицировать класс биологического материала человека получилось у австрийского иммунолога Карла Ландштейнера в 1900 году. В это время было определено только 3 разновидности антиген в мембранах эритроцитов – А, В и С. В 1902 году получилось выявить 4 класс эритроцитов.

Карл Ландштейнер первым открыл группы крови

Карл Ландштейнер смог сделать ещё одно важное достижение в медицине. В 1930 году учёный в тандеме с Александром Винером открыл резус-фактор крови (отрицательный и положительный).

Классификация и характеристика групп крови и резус-фактора

Групповые антигены классифицируются по единой системе АВ0 (а, б, ноль). Установленная концепция разделяет состав кровяных телец на 4 основных вида. Их отличия в альфа и бета агглютининах в плазме, а также присутствие специфических антигенов на оболочке эритроцитов, которые обозначаются буквами А и В.

Таблица «Характеристика классов крови»

На групповую принадлежность национальность или раса людей не влияет.

Резус-фактор

Помимо системы АВ0, биологический материал классифицируют по фенотипу крови – наличию или отсутствию в ней специфического антигена D, который называется резус-фактором (Rh). Кроме белка D, система Rh охватывает ещё 5 основных антиген – C, c, d, E, e. Они содержатся во внешней оболочке эритроцитов.

Резус-фактор и класс кровяных телец закладываются у ребёнка ещё в утробе матери, и передаются ему от родителей на всю жизнь.

Методика определения группы крови и резус-фактора

Методы выявления групповой принадлежности

Для обнаружения в эритроцитах специфических антигенов используется несколько методов:

  • простая реакция – берётся стандартная сыворотка 1, 2 и 3 класса, с которой сравнивается биологический материал пациента;
  • двойная реакция – особенностью методики является использование не только стандартных сывороток (сравниваются с исследуемыми кровяными тельцами), но и стандартных эритроцитов (сопоставляются с сывороткой пациента), которые предварительно готовятся в центрах переливания крови;
  • моноклинальные антитела – используются циклоны анти-А и анти-В (готовятся при помощи генной инженерии из крови стерильных мышей), с которыми сравнивается исследуемый биологический материал.

Метод выявления группы крови по моноклинальным антителам

Сама специфика исследования плазмы на предмет её групповой принадлежности заключается в сравнении образца биологического материала пациента со стандартной сывороткой или стандартными эритроцитами.

Последовательность такого процесса следующая:

  • забор венозной жидкости натощак в количестве 5 мл;
  • распределение стандартных образцов на предметном стекле или специальной тарелке (каждый класс подписывается);
  • параллельно образцам размещается кровь пациента (количество материала должно быть в несколько раз меньше объема капель стандартной сыворотки);
  • смешивается кровяная жидкость с заготовленными образцами (простая или двойная реакция) или с циклонами (моноклинальные антитела);
  • через 2,5 минуты в те капли, где произошла агглютинация (образовались белки группы А, В или АВ) добавляется специальный физраствор.

Наличие агглютинации (склеивание и выпадение в осадок эритроцитов с соответствующими антигенами) в биологическом материале даёт возможность отнести эритроциты к тому или иному классу (2, 3, 4). А вот отсутствие такого процесса свидетельствует о нулевом (1) виде.

Как определить резус-фактор

Существует несколько методов выявления Rh-принадлежности – использование антирезусных сывороток и моноклинального реагента (белков группы D).

В первом случае порядок проведения следующий:

  • забор материала происходит из пальца (допускается использование консервированной крови или самих эритроцитов, которые образовались после отстаивания сыворотки);
  • в пробирку помещается 1 капелька антирезусного образца;
  • в заготовленный материал наливается капля исследуемой плазмы;
  • небольшое взбалтывание позволяет сыворотки равномерно расположиться в стеклянной таре;
  • спустя 3 минуты в тару с сывороткой и исследуемыми кровяными тельцами добавляется раствор натрия хлорида.

После нескольких переворачиваний пробирки, специалист проводит расшифровку. Если агглютинины появились на фоне осветлённой жидкости, речь идёт о Rh+ — положительном резус-факторе. Отсутствие изменений в цвете и консистенции сыворотки свидетельствует об отрицательном Rh.

Определение группы крови по системе резус

Изучение резуса при помощи моноклинального реагента подразумевает использование цоликлон анти-D супер (специальный раствор). Порядок проведения анализа включает несколько этапов.

  1. Реагент (0,1 мл) наносится на подготовленную поверхность (тарелку, стекло).
  2. Рядом с раствором помещается капля крови пациента (не больше 0,01 мл).
  3. Две капли материала смешиваются.
  4. Проведение расшифровки происходит через 3 минуты с начала исследования.

У большинства людей на планете в эритроцитах присутствует агглютиноген системы резус. Если рассматривать в процентах, то у 85% реципиентов есть белок D и они являются резус-положительными, а у 15% он отсутствует – это резус-отрицательный фактор.

Совместимость

Совместимость крови являет собой соответствие по группе и резус-фактору. Такой критерий очень важен при переливании жизненно важной жидкости, а также в период планирования беременности и вынашивании плода.

Какая группа крови будет у ребёнка

Наука генетика предусматривает наследование детьми групповой принадлежности и резуса от родителей. Гены передают информацию о составе кровяных телец (агглютинин альфа и бета, антигенов А, В), а также о Rh.

Таблица «Наследование групп крови»

Родители Ребёнок
1 2 3 4
1+1 100
1+2 50 50
1+3 50 50
1+4 50 50
2+2 25 75
2+3 25 25 25 25
2+4 50 25 25
3+3 25 75
3+4 25 50 25
4+4 25 25 50

Смешение групп эритроцитов с различными Rh ведёт к тому, что у ребёнка резус-фактор может быть как «плюс», так и «минус».

  1. Если Rh одинаковый у супругов (присутствуют антитела группы D) – дети в 75% унаследуют доминирующий белок, а в 25% он будет отсутствовать.
  2. В случае отсутствия специфического белка D в оболочках эритроцитов мамы и папы ребёнок также будет резус-отрицательным.
  3. У женщины Rh-, а у мужчины Rh+ – сочетание предполагает наличие или отсутствие резуса у ребёнка в соотношении 50 на 50, при этом возможен конфликт антиген мамы и малыша.
  4. Если у матери Rh+, а у отца анти-D отсутствует – резус передастся малышу с вероятностью 50 на 50, но риска конфликта антител нет.

Важно понимать, что резус-фактор передаётся на генетическом уровне. Поэтому, если родители резус-положительные, а ребёнок родился с Rh-, мужчинам не стоит спешить ставить под сомнение своё отцовство. У таких людей в роду просто есть человек без доминирующего белка D в эритроцитах, что и унаследовал малыш.

Группа крови для переливания

При осуществлении гемотрансфузии (переливании крови) важно соблюдать совместимость групп антигенов и резуса. Специалисты руководствуются правилом Оттенберга, которое гласит – кровяные тельца донора не должны склеиваться с плазмой реципиента. В малых дозах они растворяются в большом объёме биологического материала пациента и не выпадают в осадок. Такой принцип действует в случае переливания жизненно важной жидкости до 500 мл и не подходит, когда у человека сильная потеря крови.

Универсальными донорами считаются люди с нулевой группой. Их кровь подходит всем.

Представителям редкого 4 класса для гемотрансфузии подойдёт 1, 2 и 3 вид кровяной жидкости. Они считаются универсальными реципиентами (люди, которым вливают кровь).

Пациентам с 1 (0) положительной для переливания подойдёт 1 класс (Rh+/-), в то время, как человеку с отрицательным резусом можно вливать только нулевую с Rh-.

Людям, у которых 2 положительная, подходит 1 (+/-) и 2 (+/-). Пациентам с Rh- можно применять только 1 (-) и 2 (-). Аналогичная ситуация и с 3 классом. Если Rh+ – можно вливать 1 и 3 как положительную, так и отрицательную. В случае Rh-, подойдёт только 1 и 3 без анти-D.

Совместимость при зачатии

При планировании беременности, большое значение имеет сочетание резус-фактора мужчины и женщины. Это делается во избежание резус-конфликта. Такое бывает, когда у матери Rh-, а ребёнок унаследовал Rh+ от отца. При попадании доминирующего белка в кровь человека, где его нет, может возникнуть иммунологическая реакция и выработка агглютининов. Такое состояние провоцирует сцепление полученных эритроцитов и дальнейшее их разрушение.

Таблица совместимости крови для зачатия ребенка

Несовместимость резусов матери и ребёнка при первой беременности не несёт опасности, а вот перед вторым зачатием лучше разорвать выработку антирезусных тел. Женщине вводят специальный глобулин, который разрушает иммунологические цепочки. Если этого не сделать, резус-конфликт способен спровоцировать прерывание беременности.

Может ли меняться группа крови?

В медицинской практике есть случаи изменения групповой принадлежности при беременности или вследствие перенесённых тяжёлых заболеваний. Это объясняется тем, что при подобных состояниях возможно сильное увеличение выработки красных кровяных телец. При этом замедляется склеивание и разрушение эритроцитов. В анализе подобное явление отражается как изменение маркеров в составе плазмы. Со временем всё становится на свои места.

Класс крови, как и резус-фактор, у человека закладывается генетически ещё до рождения и не может меняться в течение всей жизни.

Диета по группе крови

Главный принцип питания по групповой принадлежности заключается в подборе продуктов, которые близки организму генетически и позволяют наладить работу пищеварительной системы, а также похудеть.

Первым, кто предложил учитывать группу крови при выборе пищи, стал американец Питер Д’Адамо. Врач натуропат издал несколько книг, в которых изложил свою идею здорового питания. Если правильно выбирать еду, можно забыть о плохом усвоении полезных веществ и проблемах с желудком, кишечником.

Таблица «Диета по группе крови»

Группа крови Разрешённая еда Пища, которую стоит максимально ограничить
1 (0) Морская рыба

Любое мясо (жареное, тушёное, варёное, маринованное и приготовленное на костре)

Пищевые добавки (имбирь, гвоздика)

Все виды овощей (за исключением картофеля)

Фрукты (кроме цитрусовых, клубники)

Сухофрукты, орехи

Зелёный чай

Молоко и его производные

Мучные продукты

Пшеничная, кукурузная, овсяная каша, хлопья, отруби

2 (А) Мясо индейки, курицы

Куриные яйца

Йогурт, кефир, ряженка

Фрукты (кроме бананов)

Овощи (особенно ценны кабачок, морковь, брокколи, шпинат)

Орехи, семечки

Пшеничная и кукурузная каша

Мучные изделия

Баклажаны, помидоры, капуста, картофель

Молоко, творог

3 (В) Рыба жирных сортов

Молоко и кисломолочные продукты

Специи (перечная мята, имбирь петрушка)

Куриное мясо

Гречневая каша

Чечевица

4 (АВ) Морская и речная рыба

Соевые продукты

Творог, йогурт, кефир

Брокколи, морковь, шпинат

Квашеные огурцы, помидоры

Морская капуста

Курятина, красное мясо

Свежее молоко

Речная белая рыба

Гречневая, кукурузная каша

Диета по групповой принадлежности подразумевает ограничение алкоголя, табакокурения. Немаловажным является активный образ жизни – бег, пешей ходьбой на свежем воздухе, плаваньем.

Особенности характера по группе крови

Группа крови влияет не только на физиологические особенности организма, но и на характер человека.

Нулевая группа

В мире около 37% носителей нулевой группы крови.

Главными особенностями их характера являются:

  • стрессоустойчивость;
  • лидерские задатки;
  • целеустремленность;
  • энергичность;
  • смелость;
  • амбициозность;
  • коммуникабельность.

Обладатели нулевой группы предпочитают заниматься опасными видами спорта, любят путешествовать и не бояться неизвестности (легко берутся за любую работу, быстро обучаются).

К недостаткам можно отнести вспыльчивость и резкость. Такие люди часто бесцеремонно высказывают своё мнение и бывают высокомерными.

2 группа

Наиболее распространённой группой считается 2 (А). Её носители – это сдержанные люди, которые способны найти подход к самым сложным личностям. Они стараются избегать стрессовых ситуаций, всегда дружелюбны и трудолюбивы. Обладатели 2 группы очень хозяйственны, добросовестно выполняют свои обязанности и всегда готовы помочь.

Среди недостатков характера выделяют упрямство и неумение чередовать работу с отдыхом. Таких людей трудно растормошить на какие-то необдуманные поступки или неожиданные мероприятия.

3 группа

Человек, в крови которого преобладают антигены группы В, натура переменчива. Такие люди отличаются повышенной эмоциональностью, креативностью и независимостью от мнения окружающих. Они с лёгкостью пускаются в путешествия, берутся за новые дела. В дружбе – преданы, в любви – чувственны.

Среди негативных качеств часто проявляются:

  • частая переменчивость в настроении;
  • непостоянство в поступках;
  • высокие требования к окружающим.

Обладатели 3 группы крови часто пытаются спрятаться от реалий мира в своих фантазиях, что не всегда является положительной чертой характера.

4 группа

Носители 4 группы обладают хорошими лидерскими качествами, что проявляется в умении вести переговоры и быть собранными в ответственный момент. Такие люди коммуникабельны, легко сходятся с окружающими, в меру эмоциональны, многогранны и умны.

Несмотря на множество достоинств в характере, представители 4 группы часто не могут прийти к единому решению, мучаются от двойственности чувств (внутренний конфликт) и отличаются тугодумством.

Специфический состав крови и наличие в ней или отсутствие доминирующего фактора (антигена D) передаётся человеку с генами. Существует 4 группы крови и резус-фактор. Благодаря классификации по системе АВ0 и Rh специалисты научились безопасно переливать донорскую кровь, определять отцовство и избегать резус-конфликта во время ребёнка. Проверить свою групповую принадлежность каждый человек может в лаборатории, сдав биологический материал из пальца или вены.

Процедура определения групп крови по системе АВО заключается в выявлении антигенов А и В в эритроцитах с помощью стандартных антител и использованием агглютининов в плазме или сыворотке анализируемой крови стандартными эритроцитами. Методика разработана в начале XX века и до сих пор активно применяется в медицине. Определение антигенов А и В осуществляется благодаря цоликлонам анти-А и анти-В.

Основные понятия

У доноров всегда определяются не только антигены в эритроцитах, но и агглютинины в сыворотке (плазме) с применением стандартных эритроцитов. В качестве биоматериала используется венозная кровь. Перед исследованием необходимо отказаться от жирной пищи за сутки до анализа и не курить за полчаса до сдачи теста. Группы крови определяют дважды: сначала в лечебном отделении, где заготавливается материал, а затем подтверждают исследованием в лаборатории.

Определение групп крови по системе АВО является основным тестом, который используется в трансфузиологии. Также подобная система групп крови есть у некоторых животных, например у шимпанзе, горилл и бонобо.

История открытия

В науке существует общепринятое мнение о том, что методика определения групп крови по системе АВО была выявлена впервые Карлом Ландштейнером, австрийским учёным, в 1900 году. Тогда он описал в своём труде три типа антигенов. За это через тридцать лет ему была присуждена Нобелевская премия по медицине и физиологии. Из-за того, что между учёными раньше не было тесных связей, позже установили, что чешский врач-серолог Ян Янский независимо от изысканий К. Ландштейнера впервые описал четыре группы крови человека, но его исследования были не известны широкой аудитории. В настоящее время именно классификация, разработанная Я. Янским, применяется в России и республиках бывшего СССР. В США У. Л. Мосс создал свою похожую работу в 1910 г.

Методика определения групп крови по системе АВО с помощью цоликлонов

Группа крови должна определяться в помещении с хорошим освещением с соблюдением диапазона температуры от 15 до 25 градусов Цельсия, так как отклонения от этой нормы могут повлиять на результаты исследования. На пластинке или тарелке пишутся инициалы и фамилия пациента. Слева направо или по кругу наносят стандартные обозначения групп (О(I), A(II), В(III)). Под ними размещают по капле соответствующие сыворотки отдельными пипетками для каждого вида. Затем к ним добавляется кровь пациента. Материал для исследования берется из мочки уха или пальца. Этого требует техника определения группы крови по системе АВО.

Правомерно также использование эритроцитов, находящихся в пробирке после того, как образовался сгусток. Нужно, чтобы количество сыворотки было больше количества добавленной крови в десять раз. После этого капли перемешиваются стеклянными палочками (отдельно для каждой). В течение пяти минут, аккуратно покачивая пластинку, смотрят за появлением реакции гемагглютинации. Она обнаруживается в том, что появляются маленькие красные комочки, сливающиеся затем в более крупные. Сыворотка в это время практически полностью теряет цвет.

Для того чтобы устранить ложную гемагглютинацию простого склеивания эритроцитов, нужно через три минуты добавить одну каплю физиологического раствора и проверить, сохраняется ли агглютинация. Если да, то она является истинной. Все, определение групп крови по системе АВО на этом завершено.

Толкование результатов

В результате могут наблюдаться четыре реакции:

  • не происходит агглютинация ни с одной из сывороток - первая группа О(I);
  • реакция проявилась с сыворотками I(ab) и III(a) - вторая группа А(II);
  • агглютинация наступает с сыворотками I(ab) и II(b) - третья группа В(III);
  • если реакция происходит с тремя сыворотками, нужно провести дополнительную процедуру с реактивами группы АВ(IV), которые являются стандартными; если агглютинация в такой капле отсутствует, можно считать, что это 4-я группа крови АВ(IV).

Экспресс-метод для резус-фактора

Методика определения групп крови по системе АВО предполагает одновременное выявление резус-фактора (Rh).

Поверхность пластинки предварительно смачивают и пишут на ней «контрольная сыворотка» и «сыворотка антирезус». Затем под надписями располагают одну-две капли нужных реактивов и добавляют к ним анализируемый материал. Для этого также можно использовать кровь из пальца (в таком же количестве, как и объём сыворотки) или эритроциты, оставшиеся на дне пробирки после появления сгустка (половина объёма сыворотки). Выбор материала на конечный результат не влияет. Затем кровь и сыворотка перемешиваются сухой стеклянной палочкой, после чего в течение пяти минут ожидают наступления реакции. Для того чтобы устранить ложные показания, через три-четыре минуты добавляют изотонический раствор натрия хлорида (всего несколько капель). Определение группы крови по системе АВО и Rh проводится очень часто.

Если агглютинация эритроцитов в капле с сывороткой происходит, это указывает на положительный резус крови. По статистике Rh+ встречается у 85 % населения планеты. Отсутствие её позволяет говорить о резус-отрицательной принадлежности. Если агглютинация появилась в контрольной сыворотке, значит она пришла в негодность. К сожалению, алгоритм определения группы крови по системе АВО не всегда срабатывает идеально.

Какие ошибки могут быть допущены при данной методике?

Неточности при определении принадлежности крови той или иной группе зависят от следующих причин:

  • Технических.
  • Биологической специфики исследуемой крови.
  • Неполноценного характера стандартных сывороток и эритроцитов.

Технические ошибки

Возможные погрешности при определении группы крови системы АВО перекрестным способом:


Ошибки биологической специфики

Погрешности, связанные с биологической спецификой анализируемой крови, делятся на два типа.

  • Зависящие от особенностей эритроцитов.
  • Ошибки, обусловленные биологическими особенностями сыворотки.

Рассмотрим каждый вид более подробно.

Зависящие от особенностей эритроцитов

  • Поздняя агглютинация, объясняющаяся «слабыми» формами эритроцитов и антигенов. Для того чтобы избежать ошибок, определять группу крови доноров и реципиентов нужно с использованием стандартных эритроцитов. Индентифицировать агглютиноген А 2 следует повторным исследованием с другими видами реагентов и другой посуды, увеличив время регистрации реакции.
  • «Панагглютинация» («аутоагглютинация») - умение крови проявлять одинаковую реакцию неспецифического характера со всеми сыворотками, в том числе с собственной. Через пять минут острота такой агглютинации слабеет, хотя должна усиливаться. Подобные случаи наблюдаются у онкобольных, обожжённых и др. В качестве контроля необходимо оценить проявление агглютинации анализируемых эритроцитов в стандартной сыворотке четвёртой группы и физрастворе. При «панагглютинации» группу крови определяют в результате тройного отмывания эритроцитов. Если оно не даёт нужного результата, стоит произвести повторный забор образца крови в согретую перед процедурой пробирку и поставить пробу в термоконтейнер, чтобы способствовать поддержанию температуры 37 градусов Цельсия и выше. Затем следует доставить в лабораторию, где сохраняется указанная выше температура и используются подогретые физиологический раствор, пластинка и реактивы.

  • Иногда эритроциты анализируемой крови располагаются как «монетные столбики», и их можно принять за агглютинаты. Если добавить две капли изотонического раствора и мягко покачать планшет, красные кровяные клетки занимают правильную позицию.
  • Неполная или смешанная агглютинация, встречающаяся у пациентов со второй, третьей и четвёртой группами в результате трансплантации костного мозга или в первые три месяца после переливания крови 0(I).

Обусловленные биологическими особенностями сыворотки


Ошибки, связанные с применением неполноценных стандартных эритроцитов и сывороток

Слабые сыворотки с прошедшим сроком годности или имеющие титр меньше 1:32 способны зарождать слабую и позднюю агглютинацию. Применение таких реактивов недопустимо.

Использование негодных стандартных эритроцитов или сывороток, приготовленных в нестерильных условиях и законсервированных в недостаточной степени, приводит к появлению «бактериальной» агглютинации, имеющей неспецифическую природу.

Существует множество популярных предположений о группах крови системы АВО, появившихся непосредственно после её обнаружения в разных мировых культурах. Так, например, в 30-е годы прошлого столетия в Японии и некоторых других странах получила популярность теория, связывающая группу крови с тем или иным типом личности. Подобные теории популярны и на сегодняшний день.

Есть также мнение, что человек, имеющий группу А, подвержен тяжёлому похмелью, О связана с хорошими зубами, а группа А2 - с самым высоким уровнем IQ. Но научно такие утверждения не доказаны.

Мы рассмотрели определение групп крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток.

Группа крови – это оригинальные антигенные характеристики клеток крови (эритроцитов), которые определяются с использованием способов распознания групп белков и углеводов, содержащихся в оболочке эритроцитов. Определить группу крови – обязанность каждого человека, для этого необходимо сдать анализ. На сегодняшний день в любой больнице или поликлинике можно сдавать свою кровь на исследование, поэтому трудностей с проведением данной процедуры не возникает, и каждому важно знать, как определить группу крови и откуда берут материал на исследование.

Группа крови в течение всей жизни у каждого человека остается неизменной. Люди с одним типом могут отличаться от людей с другим по причине того, что у каждого человека разное количество агглютиногенов A и B в кровяных клетках, а также совсем разное количество агглютининов α и β, которые содержатся уже в амбоцептере крови.

В природе существует несколько видов групп крови:

  • 0(I) – эта содержит только агглютинины α и β, агглютиногенов нет.
  • A(II) – содержится только агглютинин β и агглютиноген A.
  • В(III) – агглютинин α и агглютиноген B.
  • AB(IV) группа крови - содержит агглютиногены A и B, агглютинины отсутствуют.

Откуда появилась классификация? Впервые открыл все существующие типы крови у людей врач из Австрии. Это открытие позволило ученому получить премию А.Нобеля по медицине в 1930 году. Также открытие групп помогло остановить смертельные исходы в процессе переливания крови от одного человека другому . Человек, которому необходимо сделать переливание называется реципиентом. Человек же, что сдает свою кровь, называется донором. Наиболее подходящим типом для реципиента будет кровь идентичная его типу.

Помимо существующих антиглютиногенов A и B в кровяных клетках можно наблюдать и другие антигены, например, резус-факторы. В ситуации, если кровь не совместима по резус-фактору, то проводить переливание категорически запрещено. Впоследствии могут возникнуть плачевные случаи, вплоть до летального исхода.

Проведение исследования

Как узнать группу крови, откуда ее берут для исследования? Эти вопросы интересуют всех заинтересованных людей. Для этого можно обратиться в лечебное учреждение, где нужно сдать биологическую жидкость из пальца. Анализ на группу крови можно проводить тремя основными способами:

  • по изогемагглютиновым сывороткам;
  • по изогемагглютиновым сывороткам и стандар­тным клеткам крови (перекрёстный способ);
  • метод с применением МКА (цоликлоны анти-A и анти-B).

Обычно в лабораториях переливания крови проводят исследование по первому способу, т.е. с применением стандартных изогемагглютиновых сывороток. Процесс заключается в том, что тест проводится на обнаружение антиглютиногенов A и B в освещенной лаборатории с температурой воздуха в пределах 15-25 °C. Для этого берут исследуемый материал и на специально подготовленную тарелку или пластину наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворот­ки I, II, III групп в объеме 0,1 мл.


Чтобы избежать возникновения каких-либо неточностей, наносят две серии сывороток каждого из типов. Должно получиться 6 капель. Эти 6 ка­пелек образца анализируемой биожидкости переносят на специальную пластину в другие 6 точек, при этом каждую каплю размещают рядом с капельками сыворотки (крови понадобится в 10 раз меньше, чем используемое количество сыворотки), после этого их аккуратно смешивают уже другими палочками со слегка закругленными краями. Во время смешивания пластину аккуратно покачивают из стороны в сторону. Склеивание клеток происходит в течение 30 секунд. В те капли биологической жидкости, где прошло соединение, добавляется немного изотонного раствора хлорида натрия, и оценивается результат теста.

Вторым тестом на группу является перекрёстный метод. Его чаще применяют в серологических лабораториях. Перекрестный метод заключается в том, что сдавать биологический материал нужно на определение содержания антиглютиногенов A и B с применением стандартных изогемагглютиновых сывороток и антител α и β при помощи эритроцитов. Для этого на специальную тарелку белого цвета наносят маркером 6 клеток, в которые капают пипеткой по 1 капле сыворотки из анализируемой биожидкости, а рядом располагают по маленькой капле эритроцитов определенных групп 0(I), A(II), B(III) – по два раза.

Отличительной и главной особенностью этого метода является то, что эритроциты группы 0(I) главные, т.к. они не содержат антигенов. Эта особенность делает невозможным соединение эритроцитов с любой из сывороток.

В третьем тесте на выявление применяют МКА. Используется гибридомная биотехнология. Гибридома представляет собой гибрид клеток, полученных из миеломы и иммунного лимфоцита, что производит МКА. К моноклональным антителам (МКА) относят: цоликлоны анти-A и цоликлоны анти-B. Их наносят на приготовленную пластину белого цвета по 1 большой капле под специальными надписями анти-A и анти-B. После, рядом с каплями антител размещают по маленькой капле анализируемой биожидкости. Агглютинация происходит в последующие 2–3 минуты.

Погрешности при проведении исследования

Определение группы крови описанными тестами может осложниться появлением некоторых характерных ошибок. Все возможные ошибки можно классифицировать на три группы: технические, биологические и сывороточные.


К техническим ошибкам относятся поспешная оценка результатов, несоблюдение режима нужной температуры, отсутствие маркировки платин, неверное соотношение количества крови и сыворотки. Биологические ошибки появляются в тех случаях, когда красные кровяные тельца соединились со всеми сыворотками, на исследование берут инфицированную биожидкость, происходит полная панагглютинация, неактивные антигены A и B. Сывороточные ошибки могут быть, если берут инфицированную, просроченную или сыворотку с титром ниже 32.

Во избежание указанных погрешностей нужно соблюдать строгие правила при проведении тестов на установление своей группы . Следует использовать разные тарелки (чистые и сухие), категорически нельзя смешивать компоненты одной и той же палочкой, следить за сроками и температурой, ну и конечно, процедура определения группы крови не должна проходить в домашних условиях, а только в медицинском учреждении специалистами.

Таким образом, только исследования в лабораторных условиях помогут ответить на главный вопрос, как узнать группу крови. И никакая иная информация или советы других людей не позволят узнать свою группу, особенно в домашних условиях. Поэтому для тех, кто задается вопросом, какая у меня группа крови, для проведения правильного исследования с точными результатами необходимо специальное оборудованное помещение, где будут соблюдаться все требования, а не домашние условия с использованием подручных предметов.

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность. Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

  • I (0) – ά, β - поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
  • II (А) – β - на поверхности имеется антиген А и антитело β;
  • III (В) – ά - поверхность содержит В с антителом типа ά;
  • IV (АВ) – 00 - поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.

Методы определения

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система - посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.

Разведение производится так:

Непосредственно исследование проводится таким образом:

  1. На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
  2. Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Правила расшифровки результатов

Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

Видео: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

  • Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) - определение первой группы;
  • Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II - определение второй;
  • При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы - определение III;
  • Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной - определение IV.

Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.


На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами Группы крови
0(I) A(II) B(III) AB(IV) 0(I) A(II) B(III)
- + + 0(I)
+ + - + A(II)
+ + - + B(III)
+ + + AB(IV)

Агглютинация;

– агглютинация отсутствует;

— реакцию не проводят.

Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны - синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.


Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.

Вид цоликлонов Группа крови
Результат агглютинации Анти-А Анти-В
- - 0(I)
+ - A(II)
- + B(III)
+ + AB(IV)

IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

  • Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
  • Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
  • Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
  • Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов