Лабораторная диагностика. Половые гормоны (исследования репродуктивной функции) Как подготовить животное к исследованию


17 ОН прогестерон (17 гидроксипрогестерон, 17-ОПГ) – это стероид, продукт метаболизма гормона «беременности» прогестерона и 17 гидроксипрегненолона. В человеческом организме данное вещество продуцируется корой надпочечников, яичками у мужчин, яичниками и плацентой у женщин.

Основной функцией гидроксипрогестерона является участие в процессах синтеза гормонов: кортизола, тестостерона и эстрадиола. Кортизол – это один из важнейших гормонов человеческого организма, участвующий в расщеплении белков, жиров и углеводов, в регулировании кровяного давления и контроле над работой иммунной системы. В клинической практике анализ на 17 ОН прогестерон используется для оценки функционирования надпочечников, диагностики заболеваний надпочечников и контроле над рисками патологического протекания беременности у женщин.

Исследование на 17 ОН прогестерон выполняется с помощью иммуноферментного анализа. Для осуществления теста пациенту необходимо сдать несколько миллилитров венозной крови. Для минимизации рисков ложных результатов теста, к исследованию необходимо подготовиться:

  • сдавать анализ важно натощак (через 6–8 часов после принятия пищи);
  • стоит воздержаться от курения за полчаса до теста;
  • если вы принимаете гормональные препараты, то рекомендуется информировать об этом врача (при необходимости приостановить прием лекарств).

Когда сдавать анализ на 17 ОН прогестерон? Уровень данного гормона подвержен суточным колебаниям. Наименьшая концентрация 17-ОН наблюдается ночью, наивысшая – утром. Поэтому всем группам лиц, которым назначен данный тест, важно сдавать его в первой половине дня. Также содержание рассматриваемого стероида зависит от фазы менструального цикла у женщин. Врачи рекомендуют проводить исследование на гидроксипрогестерон на третий – пятый день цикла (в фолликулярной фазе).

Когда назначается данное исследование? Анализ на 17 ОН прогестерон назначается, когда у больного присутствуют симптомы или подозрения на патологии надпочечников. В этот список входит ряд заболеваний, о которых речь пойдет ниже. Также стоит отметить, что одним из признаков патологического содержания 17-ОН у женщин является нарушение менструального цикла. В таком случае исследование на данный стероид необходимо обязательно сдавать.

Важно заметить, что исследование на 17-ОН назначается, когда имеет место планирование беременности. В данном случае исследование необходимо для оценки развития патологии надпочечников у будущего ребенка, а также для контроля над синтезом половых гормонов, баланс которых особо важен при планировании беременности.
Норма 17 OH прогестерона

Норма исследования на 17 oh прогестерон колеблется в зависимости от пола и возраста пациента, а также от срока беременности у женщин. В таблице 1 приведены референсные значения 17-OH.

Таблица 1. 17 ОН прогестрон, норма у мужчин и женщин в зависимости от возраста

У мужчин старше восемнадцати лет норма колеблется от 1,52 до 6,36 нмоль/л.

У женщин наблюдается корреляция от фазы менстрального цикла:

  • фолликулярная 1,24–8,24 нмоль/л;
  • лютеиновая 0,99–11,51 нмоль/л.

В таблице 2 представлены референсные значение содержания стероида в зависимости от срока беременности.

Таблица 2. 17 ОН прогестерон норма

Расшифровка результатов исследования

Когда у вас появились симптомы патологии надпочечников, необходимо сдавать анализ крови. Что он может выявить?

  • Нормальное содержание гормона . Если отсутствуют отклонения от референсных значений, то бояться нечего, патологий нет.
  • Небольшое повышение концентрации 17-OH . Данный показатель характеризуется умеренно тяжелым протеканием гиперплазии надпочечников. Это заболевание обуславливается патологическим ростом тканей. Увеличение надпочечников грозит нарушением гормонального баланса, что, в свою очередь, влечет за собой широкий спектр патологических отклонений. Крайне важно обратить внимание на данную патологию при планировании беременности. В эту же категорию стоит отнести врожденную гиперплазию надпочечников у детей. Для детей с обнаруженной патологией важно сдавать анализ на 17-ОН периодически.
  • Значительное повышение концентрации 17-OH . Проявляется в основном у новорожденных детей при недоношенности или серьезной врожденной гиперплазии надпочечников. В этом случае требуется приложить все силы, чтобы снизить уровень 17-OH.
  • Повышенное содержание гормона может наблюдаться у женщин при опухолях доброкачественного и злокачественного характера. Локализованы такие образования, как правило, в яичниках или надпочечниках. Важно обратить внимание на данную группу патологий, при которых обнаруживаются следующие симптомы: излишнее оволосение, образование прыщей, нарушение менструального цикла. При появлении таких признаков рекомендуется сдавать анализ несколько раз для контроля над ростом опухоли и при планировании беременности.
  • Когда 17 ОН прогестерон повышен, то в большинстве случаев необходимо сдать дополнительные гормональные анализы и назначить лечение. Терапия данного патологического состояния заключается в приеме гормональных препаратов (дексаметазон, метилпреднизолон). При потреблении данных лекарственных средств возможен небольшой набор веса по причине задержки воды в организме.

    Когда назначается курс лечения гормональными препаратами, исследования крови на 17 ОН прогестерон при беременности важно сдавать повторно. Это поможет контролировать уровень стероида в организме и своевременно прекратить лечение при достижении нормы. При гормональной терапии беременных важно не нанести ущерба будущим детям.

    Важно отметить, что при повышенном уровне гормона осуществлять расшифровку результатов и назначать терапию должен врач соответствующего профиля. Самостоятельный прием гормональных лекарственных препаратов способен не только понизить уровень стероида, но и нанести значительный вред организму и привести к необратимым повреждениям.

    Когда результат исследования понижен?

    • сниженный 17-ОН отвечает положительной динамике лечения;
    • болезнь Аддисона (хроническая недостаточность надпочечников, часто проявляется у детей), при данном заболевании надпочечники теряют возможность производить гормоны в необходимом организму объеме;
    • псевдогермафродитизм у мужчин (редкое гормональное отклонение).

    Когда результат исследования понижен, то главной целью терапии является устранение источника патологического снижения уровня стероида в крови. Положительная динамика заболевания позволит привести показатель в норму. Гормональная терапия в этом случае может служить только поддержкой.

    Прогестерон – это женский половой гормон. Его главная задача – поддержание беременности у собак.

    В каких случаях назначают исследования уровня прогестерона?
    • оценка аспектов функционирования яичника у сук и кошек;
    • определение времени овуляции для определения времени вязки (у сук);
    • предсказания даты родов;
    • подтверждение наличия остатка ткани яичника;
    • оценка функции желтого тела в случаи аборта;
    • выявление бессимптомной течки;
    • выявление наличия лютеиновых кист и др.

    В ветеринарной практике чаще всего исследуются уровни прогестерона для определения оптимального времени вязки. Это крайне важно при искусственном осеменении замороженной или охлажденной спермой, или когда кобель находится на большом расстоянии и нужно точно знать дату вязки, чтобы привезти суку или кобеля.

    Как подготовить животное к исследованию?

    В особой подготовке необходимости нет. Забор крови производят обычно утром натощак. Основное условие — животное не должно принимать препараты, влияющие на уровень прогестерона.

    В какое время необходимо проводят исследование?

    Исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки. Обычно, анализ готов в течение 24-х часов. Среднее время выполнения анализа – до 4 часов.

    Каким методом проводится исследование?

    Исследование проводят методом иммуноферментного анализа (ИФА).

    Это количественный метод определения уровня прогестерона в сыворотке крови. Исследование выполняется в лабораторных условиях с использованием соответствующего прибора иммуноферментного анализатора с применением специальных реагентов.

    Принцип определения прогестерона основан на использовании конкурентного метода ИФА. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к прогестерону. Прогестерон исследуемого образца конкурирует с конъюгированным прогестероном за связывание с антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски, которую определяют на анализаторе, обратно пропорциональна концентрации прогестерона в исследуемом образце.

    Как интерпретировать результаты анализа?

    Количественное значение прогестерона в крови определяют в до- и постовуляторный периоды. Уровень прогестерона в сыворотке крови, как у разных собак, так и у одной и той же особи (от цикла к циклу) может меняться достаточно быстро.

    Средние показатели представлены в таблице .

    Результаты в разных лабораториях могут отличаться. Это зависит от настроек аппарата и реагентов. Точную интерпретацию результатов должен проводить ветеринарный врач, имеющий соответствующую квалификацию и опыт работы.

    Оптимальные сроки вязки:

    При достижении уровня прогестерона 15,9 нмоль /л (5 нг/мл), вязка осуществляется через 24-48 часов.

    Искусственное осеменение с помощью охлажденной спермы проводится через 4 дня после достижения уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 48 часов после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).

    Искусственное осеменение с помощью замороженной спермы выполняется через 5 дней после отметки 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 72 часа после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл)

    Какая польза данного исследования?

    Определения сроков овуляции позволяет увеличить не только процент удачных вязок или искусственного осеменения, но также и плодовитость. А дополнительные методы исследования, основанные на использовании влагалищных мазков и

    Цены на Половые гормоны (исследования репродуктивной функции)

    Гормонам отводится важнейшая роль в регуляции репродуктивной системы. Определение содержания гормонов используется для установки причин как женского, так и мужского бесплодия, при которых во многих случаях на первом месте стоит нарушение гормональной регуляции.

    Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) и лютеинизирующий гормон (ЛГ) синтезируются в гипоталамусе с определенной частотой и интенсивностью в зависимости от менструального цикла. ЛГ и ФСГ являются определяющими факторами в регуляции женских половых гормонов яичников – эстрогенов: эстрадиола (Е2), эстрона, эстриола и прогестерона .

    Основным из эстрогенов для оценки эндокринной активности фолликулов является эстрадиол . У женщин детородного возраста он образуется в фолликуле яичника и эндометрии. Приём оральных контрацептивов повышает концентрацию эстрадиола в сыворотке крови.

    Прогестерон – гормон, вырабатываемый жёлтым телом, его основным органом-«мишенью» является матка.

    Пролактин у женщин необходим для развития молочных желез и лактации. Концентрация пролактина в крови увеличивается при физических нагрузках, гипогликемии, беременности, лактации, стрессе. После наступления менопаузы концентрация пролактина снижается.

    Тестостерон – андрогенный гормон, ответственный за вторичные половые признаки у мужчин. Основным источником тестостерона являются клетки семенников. Тестостерон поддерживает сперматогенез, стимулирует эритропоэз, а также необходим для поддержания либидо и потенции.

    Хорионический гонадотропин (бета ХГ) – его физиологической ролью является стимуляция прогестерона жёлтым телом на ранних стадиях беременности.

    17-альфа-гидроксипрогестерон (17 ОН - прогестерон) является предшественником кортизола. Гормон вырабатывается в надпочечниках, яичниках, яичках и плаценте.

    Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДГЭА-С) синтезируется в надпочечниках и яичниках.

    Показания

    Определение фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и лютеинизирующего гормона (ЛГ) рекомендовано при: нарушении менструального цикла, бесплодии, обильных менструальных кровотечениях, невынашивании беременности, преждевременном половом развитии и задержке полового развития, задержке роста, синдроме поликистозных яичников, эндометриозе, контроле эффективности гормональной терапии.

    Пролактин - его определение рекомендовано при бесплодии, аменорее, нарушении функции яичников. Необходимо назначение пролактина в комплексе с определением ТТГ (т. к. чрезмерное образование ТТГ может привести к гиперпролактинемии). При герпетической инфекции и оперативных вмешательствах на молочной железе отмечаются повышенные значения пролактина.

    Тестостерон – его повышение наблюдается при идеопатическом преждевременном половом созревании и гиперплазии коры надпочечников у мальчиков, экстрагонадных опухолях у мужчин, арренобластомах, синдроме феминизирующих яичек.

    Снижение концентрации тестостерона наблюдается при уремии, печеночной недостаточности, крипторхизме.

    Хорионический гонадотропин (бета ХГ) – его повышенная концентрация в крови наблюдается при отсутствии ультразвуковых признаков беременности (как в матке, так и вне её). При оценке результатов бета ХГ в пренатальной диагностике следует учитывать, что ряд препаратов (синтетические гестагены: дюфастон, дидрогестерон, прожестожель (местно), норэтистерон ацетат), широко применяемых для лечения невынашивания беременности, активируют синтез бетаХГ. При многоплодной беременности бета ХГ повышается пропорционально числу плодов.

    Определение 17-альфа-гидроксипрогестерона (17 ОН прогестерона) играет ведущую роль в диагностике андреногенитального синдрома, который сопровождается повышенной продукцией кортизола, регулирующего секрецию АКТГ. Повышенные значения 17 ОН- прогестерона отмечаются при опухолях коры надпочечников.

    Определение дегидроэпиандростерона-сульфата (ДГЭА-С ) используется для дифференцировки происхождения андрогенов: повышенное содержание ДГЭА-С при надпочечниковом происхождениии, сниженное - при происхождении из семенников.

    Методика

    Определение половых гормонов фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и лютеинизирующего гормона (ЛГ), эстрадиола - Е2, прогестерона, пролактина, тестостерона, бета ХГ, дегидроэпиандростерона-сульфата (ДГЭА-С) осуществляется иммунохимическим методом на анализаторе «Архитект 2000».

    Определение 17-альфа-гидроксипрогестерона (17 ОН прогестерона) осуществляется с помощью иммуноферментного анализа.

    Подготовка

    Необходимо воздержаться от физических нагрузок, приёма алкоголя и лекарств, изменений в питании в течение 24 часов до взятия крови. В это время необходимо воздержаться от курения.

    ФСГ, ЛГ, эстрадиол, тестостерон, ДГЭА-С, 17ОН-прогестерон - со 2-5 дня цикла;

    пролактин, прогестерон - с 22-24 дня цикла.

    Желательно утренний приём лекарственных средств провести после взятия крови (если это возможно). Исключить приём следующих лекарственных препаратов: андрогенов, дексаметазона, метирапона, фенотиазинов, пероральных контрацептивов, стильбена, гонадотропинов, кломифена, тамоксифена.

    Не следует перед сдачей крови осуществлять следующие процедуры: инъекции, пункции, общий массаж тела, эндоскопию, биопсию, ЭКГ, рентгеновское обследование, особенно с введением контрастного вещества, диализ.

    Если всё же была незначительная физическая нагрузка, нужно отдохнуть не менее 15 минут перед сдачей крови.

    Очень важно, чтобы точно соблюдались указанные рекомендации, так как только в этом случае будут получены достоверные результаты исследования крови.


    ИФА-исследования:

    Лабораторная диагностика нарушений репродуктивной системы (часть 2)

    Нечаев В.Н., к.б.н.

    Определение уровня пролактина

    Первым этапом лабораторного обследования лиц обоего пола, страдающих нарушениями репродуктивной функции, по рекомендации ВОЗ является измерение концентрации пролактина (молочного гормона) в сыворотке (плазме) крови. Пролактин не оказывает непосредственного влияния на функциональную активность половых желез, в то же время уровень пролактина в крови четко коррелирует с состоянием гипоталамуса и аденогипофиза . Пролактин регулирует секрецию молока во время лактации. Пролактин является гормоном-антагонистом ФСГ и ЛГ , и при повышении выработки пролактина нарушается гормональная функция яичников и возникает гиперпролактинемическая форма бесплодия. Физиологическая гиперпролактинемия наблюдается у женщин, кормящих грудью. У некормящих женщин повышенный уровень пролактина может быть связан с приемом некоторых лекарственных препаратов, опухолью гипофиза или нарушением его работы. Одним из проявлений гиперпролактинемии является выделение молозива или молока из молочных желез, особенно у нерожавших женщин. Патологические изменения в организме, при повышенных или пониженных уровнях пролактина представлены в таблице 1.

    Таблица 1. Патологические изменения в организме при повышенных или пониженных уровнях пролактина

    Пролактин находится в сыворотке крови в трех различных формах. Преобладает биологически и иммунологически активная мономерная форма (приблизительно 80%), 5-20% присутствует в виде димерной неактивной форме и 0,5-5% в виде тетрамерной, также неактивной форме. В таблице 2 представлены референтные величины концентраций мономерной формы (биологически активной) пролактина.

    Таблица 2. Референтные значения концентрации пролактина в сыворотке крови

    Показания к определению:

    Женщины детородного периода:

    • Нарушения менструального цикла и аменорея
    • Бесплодие
    • Нарушения лактации
    • Галакторрея
    • Синдром гиперфункции гипофиза
    • Недостаточность гипофиза
    • Тестикулярная недостаточность
    • Азооспермия, олигоспермия
    • Галакторрея
    • Синдром гиперфункции гипофиза
    • Недостаточность гипофиза
    • Заместительная терапия после удаления опухоли гипофиза

    Подготовка проб для анализа

    Пролактин имеет довольно выраженный циркадный ритмс максимальным выбросом гормона во время ночного сна. Забор крови рекомендуется проводить утром (8-10 ч), в раннюю фолликулиновую фазу цикла (у женщин с регулярным циклом) и в спокойной обстановке. Для исключения случайного повышения уровня пролактина в ответ на стресс (взятие крови) желательно 2-3-кратное исследование.

    Материал для исследования:

    • сыворотка крови
    ФСГ и ЛГ - «основные» гормоны репродукции

    Если определение уровня пролактина в крови дает информацию о функциональном состоянии гипоталамо-гипофизарного комплекса в целом, то для оценки активности репродуктивной системы применяют измерение содержания в крови гонадотропных гормонов - ФСГ и ЛГ.

    Именно эти гормоны обеспечивают рост и развитие фолликулов (ФСГ) и стимулирует синтез половых гормонов в гонадах (ЛГ). Секреция ЛГ и ФСГ находится, в свою очередь, под контролем половых гормонов гонад (механизм отрицательной обратной связи). Повышение уровня половых гормонов, прежде всего эстрадиола, в крови сопровождается угнетением секреции гонадотропинов (и наоборот). Секреция ФСГ дополнительно регулируется ингибином - полипептидом, синтезируемым гонадами. В предовуляторный период созревший доминантный фолликул секретирует в кровь большие количества эстрадиола, под влиянием которого происходит овуляторный выброс ЛГ и ФСГ (феномен положительной обратной связи). Этот подъем (овуляторный пик) продолжается очень недолго, 1-2 дня. Интенсивность секреции гонадотропинов в периовуляторный период определяет будущую функциональную активность желтого тела. Суточный (циркадный) ритм секреции ЛГ и ФСГ у взрослых людей не выражен, в отличие от подростков, в то же время цирхоральный (почасовой) ритм секреции очень характерен именно для гонадотропинов.

    Современные ИФА тест-системы на определение ФСГ и ЛГ основаны на использовании монклональных антител, которые не имеют перекрестной реакции с близкородственными гормонами ТТГ и ХГЧ.

    Таблица 3. Референтные величины концентрации ФСГ и ЛГ в сыворотке крови.

    Подготовка проб для анализа

    Уровни гонадотропинов не имеют циркадного ритма, нет необходимости брать кровь натощак. Следует учитывать, что при сохраненном менструальном цикле однократное определение гонадотропинов может производиться только в раннюю фолликулиновую фазу (6-8-й дни цикла). Более четкие результаты получают при заборе 2-3 проб крови с интервалом 30-40 мин и последующем объединении полученных сывороток. Нельзя однократно определять ЛГ и ФСГ в пробе крови, взятой в середине цикла, для детекции овуляции. Сроки овуляции для циклов разной продолжительности различны (примерно за 14 дней до начала ожидаемой менструации) и могут сдвигаться на 1-2 дня от предполагаемых. В связи с этим результаты однократного определения гонадотропинов на 13-14-й дни цикла в большинстве случаев дают ложную информацию о характере цикла. Пульсирующий характер секреции с интервалами в 1-2 часа особенно характерен для ЛГ, поэтому результаты единичных анализов следует считать приблизительными. Образцы сыворотки или плазмы крови после образования сгустков и/или отделения эритроцитов стабильны в течение времени, достаточного для пересылки образцов по почте. Замороженные образцы можно хранить в течение длительного периода времени.

    Кровь необходимо отбирать иглой с широким просветом, самотеком либо при незначительном отрицательном давлении поршня шприца.

    Материал для исследования:

    • сыворотка крови
    • гепаринизированная плазма крови
    Определение половых гормонов

    Несомненно, что для полного обследования состояния репродуктивной системы необходимо наличие ИФА тест-систем для определения половых гормонов (эстрадиола, тестостерона, прогестерона) в сыворотке крови. Если синтез половых гормонов в гонадах резко снижен, то по механизму отрицательной обратной связи секреция гонадотропинов резко увеличивается так, что диагноз отсутствия функции яичников не вызывает затруднений.

    В диагностическом алгоритме обследования при подозрении на эндокринное бесплодие ключевым является определение концентраций ЛГ, ФСГ, эстрадиола и тестостерона.

    Методы определения этих гормонов на сегодняшний день преимущественно базируются на иммунноферментной или иммунофлуоресцентной технологии, что обеспечивает их широкое применение.

    Эстрадиол

    Эстрадиол - основной эстрогенный стероидный гормон. Катаболизм в печени приводит к трансформации эстрадиола в эстриол или же в глюкурониды и сульфаты, выделяемые в мочу.

    У женщин эстрадиол синтезируется и секретируется в яичниках , в оболочке и гранулезных клетках фолликулов. Он стимулирует развитие первой фазы овариального цикла, вызывая увеличение мышечного белка матки и гиперплазию эндометрия. На гипофизарном уровне он также действует на секрецию ЛГ, ФСГ . В течение первой фазы цикла нарастающее увеличение концентрации эстрадиола приводит к массивной секреции ЛГ , который “запускает овуляцию”. При беременности концентрация эстрадиола увеличивается. Анализ эстрадиола в плазме крови является основным параметром в слежении за индукцией овуляции и стимуляцией яичников . Увеличение скорости синтеза эстрадиола и его концентрация в конце стимуляции отражает число и качество созревающих фолликулов.

    Таблица 4. Референтные величины концентрации эстрадиола в сыворотке крови.

    Показания к определению:

    • контроль за стимулированной овуляцией,
    • оценка функции яичников,
    • нарушения менструального цикла,
    • аменорея гипоталамического происхождения,
    • опухоли, вырабатывающие эстрогены,
    • контроль за лечением бесплодия,
    • остеопороз;

    мужчины:

    • гинекомастия,

    дети:

    • наблюдение за ходом полового созревания.

    Таблица 5. Заболевания и состояния, при которых может изменяться концентрация эстрадиола в сыворотке крови

    Прогестерон

    Прогестерон - один из основных стероидных гормонов. Он секретируется в небольшом количестве клетками желтого тела яичников в лютеиновой фазе менструального цикла. Он действует на эндометрий вместе с эстрадиолом , вследствие чего менструальный цикл переходит из пролиферативной фазы в секреторную. Уровень прогестрерона достигает своего максимума на 5 - 7-й день после овуляции . Если не происходит оплодотворения, уровень прогестерона уменьшается, и наоборот, если оплодотворение произошло, желтое тело продолжает секретировать большое количество прогестерона до 12 недель беременности . Затем включается в действие плацента , которая становится основным участком выработки гормона. Прогестерон также секретируется в небольших количествах корой надпочечников и семенниками и является промежуточным звеном в синтезе андрогенов.

    В крови прогестерон находится как в свободном , так и в связанном с белками переносчиками (альбумин и транскортин) состояниях. Период полураспада гормона составляет несколько минут, две трети прогестерона метаболизируется в печени и секретируется в мочу в виде свободного прегнандиола, глюкуронида прегнандиола и сульфата прегнандиола.

    Таблица 6. Референтные величины концентрации прогестерона в сыворотке крови

    Показания к определению:

    женщины :

    • нарушения овуляции,
    • отсутствие овуляции с олигоменореей или без нее,
    • недостаточность функции желтого тела;
    • точное определение овуляции
    • индукция овуляции человеческим гонадотропином менопаузы или кломифеном (как в присутствии ХГЧ, так и без него);
    • подтверждение овуляции (определение во второй половине цикла);
    • наблюдение за ходом овуляции у женщин, перенесших самопроизвольный аборт;

    мужчины и дети:

    • дефект биосинтеза стероидов.

    Прогестерон вызывает увеличение базальной температуры тела. В случае диагностики недостаточности функции желтого тела, пробы берутся 3 раза (каждая после 3-4 дней предыдущего взятия). По крайней мере, в 2 случаях концентрация прогестерона должна превышать 10 мкг/мл.

    Тестостерон

    У женщин тестостерон образуется в коре надпочечников и яичниках в соотношении 1:1 и служат субстратом для образования эстрогенов, а также стимулирует предовуляторый выброс ЛГ. Уровни тестостерона у женщин с возрастом не изменяются. Уровни тестостерона в норме у женщин - 0 - 0,9 нг/мл.

    Показания к определению:

    • синдром Клайнфельтера и другие хромосомные заболевания;
    • гипопитуитаризм;
    • ферментативные нарушения синтеза андрогенов;
    • гирсутизм и вирилизация женщин;
    • большинство андрогенвырабатывающих опухолей яичников и почек.

    У женщин необходимо также определять уровень ДГЭА - сульфата, который обладает сходным с тестостероном действием (у мужчин является вспомогательным средством при исследовании тестостерона).

    Материал для исследования:

    • сыворотка крови женщин на 3 -7 день менструального цикла, лучше между 8 и 10 часами утра.
    Стероидсвязывающий глобулин (ССГ) в сыворотке крови

    ССГ - белок, связывающий и транспортирующий тестостерон и эстрадиол. Помимо своей транспортной функции, ССГ защищает тестостерон и эстрадиол от метаболической активности по пути от секретирующей их железы к органу-мишени, и образует своего рода депо гормонов в организме. ССГ - кислый гликопротеид с молекулярной массой 45 000 дальтон. Нарушение синтеза ССГ приводит к нарушению доставки гормонов к органам-мишеням и выполнению их функциональной активности. Концентрацию ССГ в сыворотке крови повышают эстрогены, пероральные контрацептивы, снижают - андрогены, Т4, ТТГ.

    Таблица 7. Референтные величины концентрации ССГ в сыворотке крови

    Предшественники биосинтеза андрогенов и эстрогенов

    17α-Гидроксипрогестерон

    17а-Гидроксипрогестерон (17ОН-П) - промежуточный стероид в биосинтезе глюкокортикоидов, андрогенов и эстрогенов, который синтезируется из прогестерона и 17а-гидроксипрегненолона. Секретируемый корой надпочечников, яичниками и семенниками, он циркулирует в крови, как в свободном, так и связанном, подобно прогестерону, с двумя белками - альбумином и транскортином, состоянии. Период полужизни 17ОН-П составляет несколько минут. Он метаболизируется печенью и выделяется в мочу в виде прегнантриола.

    17ОН-П вырабатывается в небольших количествах яичниками во время фолликулярной фазы, затем его концентрация возрастает и остается постоянной в течение лютеиновой фазы. Если оплодотворения не происходит, уровень 17ОН-П уменьшается. При имплантации оплодотворенной яйцеклетки желтое тело продолжает секретировать 17ОН-П.

    Анализ 17ОН-П очень важен для диагностики врожденной гиперплазии надпочечников и обнаружения дефицита фермента, ответственного за возникновение данного заболевания.

    Уровень 17ОН-П в крови особенно показателен и имеет решающее значение в диагностике дефицита 21-гидроксилазы у новорожденных.

    В зрелом возрасте при частичном или поздно проявившемся дефиците фермента основной уровень активности 17ОН-П может быть в норме или повышен

    Таблица 8. Референтные величины концентрации 17ОН-Р в сыворотке крови

    Показания к определению:

    • врожденный дефицит фермента, ответственный за возникновение гиперплазии надпочечников;
    • заболевания, связанные с дефицитом 21-гидроксилазы у новорожденных (высокий уровень 17ОН-Р);
    • частично или поздно проявившаяся нехватка 21-гидроксилазы (нормальный или высокий уровень 17ОН-Р);
    • дифференциальная диагностика бесплодия.

    Материал для исследования:

    • сыворотка крови;

    Дегидроэпиандростерон

    Дегидроэпиандростерон (ДГЭА) - один из наиболее важных андрогенов (точнее их предшественник), синтезируемый корой надпочечников и половыми железами из 17ОН-Р. Он катаболизируется в вирилизирующие андрогены: андростендиол, тестостерон и дигидротестостерон.

    Большая часть ДГЭА модифицируется путем присоединения сульфата в (ДГЭА-С), который биологически неактивен, но удаление сульфатной группы, восстанавливает активность ДГЭА. ДГЭА фактически является прогормоном, обладает более коротким периодом полужизни и более высокой скоростью метаболического обмена, в связи, с чем его концентрация в крови в 300 раз ниже уровня ДГЭА-С.

    ДГЭА характеризуется циркадным уровнем секреции с максимальным выбросом гормона в утренние часы. В менструальном цикле значительных изменений его концентрации не наблюдается. В отличие от тестостерона, ДГЭА в циркулирующей крови не связан с ССГ, поэтому изменение концентрации связывающих белков не влияет на его уровень.

    Таблица 9. Референтные величины концентрации ДГЭА в сыворотке крови

    Показания к определению:

    • гирсутизм;
    • вирилизация;
    • задержка полового созревания

    Материал для исследования:

    • сыворотка крови;
    • плазма крови с добавлением гепарина.

    Дегидроэпиандростерон-сульфат

    ДГЭА-С синтезируется в надпочечниках (95%) и в яичниках (5%), выделяется с мочой и составляет основную фракцию 17a-кетостероидов. Определение ДГЭА-С концентрации в сыворотке крови заменяет исследование 17a-кетостероидов мочи.

    ДГЭА-С секретируется со скоростью 10-20 мг/24 часа (35-70 мкмоль/24 часа) у мужчин и 3,5-10 мг/24 часа (12-35 мкмоль/24 часа) у женщин, причем, без циркадного ритма. Он не связывается со специфическими белками плазмы крови и, следовательно, их концентрация не влияет на уровень ДГЭА-С. Однако ДГЭА-С связывается с альбумином сыворотки крови.

    Кроме ДГЭА-С в циркулирующей крови присутствует ДГЭА, составляющей ¼ и ½ от скорости секреции ДГЭА-С у мужчин и у женщин, соответственно. Благодаря высокой концентрации ДГЭА-С в крови, длительного периода полужизни и высокой стабильности, а также потому, что его источником, в основном, являются надпочечники, ДГЭА-С является отличным индикатором андрогенной секреции.

    Если у женщин наблюдается повышенный уровень тестостерона, то с помощью определения концентрации ДГЭА-С можно установить связано ли это с нарушением функции надпочечников, или с заболеванием яичников.

    Таблица 10. Референтные величины концентрации ДГЭА-С в сыворотке крови

    Возраст

    Концентрация

    (мкг/мл)

    Концентрация

    (мкмоль/л)

    Новорожденные.

    Взрослые:

    Период беременности

    Предклимактерический период

    Постклимактерический период

    Коэффициенты пересчета:

    • 1 нг/100мл = 28,8 нмоль/л;
    • 1 нмоль/л = 2,6 нг/мл
    • 1 нг/мл = 368,46 мкмоль/л

    Показания к определению:

    • опухоли надпочечников;
    • дифференциальная диагностика заболеваний яичников;
    • остеопороз;
    • задержка полового созревания.

    Материал для исследования:

    • сыворотка крови;
    • плазма крови с добавлением гепарина.
    Аутоиммунные заболевания репродуктивной системы

    Физиологическое истощение фолликулов яичников у женщин происходит в возрасте 45-55 лет. При прекращении функции яичников до 40 лет свидетельствует о заболевании, известным как, преждевременная недостаточность яичников. Следствием этого заболевания является бесплодие. В ряде случаев, причиной этому может быть аутоиммунный процесс, связанный с образованием антител к половым гормонам яичников.

    В некоторых случаях развитие бесплодия у мужчин обусловлено наличием в сыворотке кроки или семенной плазме специфических антител.

    Овариальные антитела в сыворотке крови

    В норме в сыворотке крови женщины овариальные антитела отсутствуют. Овариальные антитела (к антигенам яичников) были обнаружены у женщин при преждевременной менопаузе, бесплодии и при оплодотворении invitro. Эти антитела могут вырабатываться клетками Лейдига, грануцилезными клетками яичников и клетками плаценты. Для определения антител к половым гормонам используют метод непрямой иммунофлюресценции и ИФА. ИФА метод позволяет определять, как суммарные, так и антитела к различным классам иммуноглобулинов (IgG, IgM, IgA). Аутоиммунные антитела можно обнаружить в крови женщин за много лет до развития клинических проявлений преждевременной недостаточности яичников.

    Помимо овариальных антител метод ИФА позволяет выявлять антитела к прозрачной оболочке ооцита - суммарные и антитела к классам (IgG, IgM, IgA), которые имеют такое же диагностическое значение, как и овариальные антитела.

    У женщин выявить четкую корреляцию между концентрацией антител в сыворотке крови и прогнозом в отношении фертильности обычно не удается.

    Антиспермальные антитела в сыворотке крови

    В норме в сыворотке крови женщины антиспермальные антитела отсутствуют. У мужчин антиспермальные антитела образуются в результате аутоиммунной реакции на спермальный эпителий. Причиной развития такой реакции может быть травма яичка, бактериальные и вирусные инфекции, хирургические операции на яичке. Для определения антиспермальных антител в настоящее время применяют метод ИФА, который отличается большой чувствительностью и специфичностью, а также позволяет количественно определять антитела различных классов иммуноглобулинов (IgG, IgM, IgA), что позволяет оценить остроту и выраженность аутоиммунного процесса. Кроме того, у мужчин концентрация антиспермальных антител коррелирует в отношении восстановления способности к оплодотворению.

    У женщин в норме антитела против антитегов сперматозоидов не вырабатываются, однако различные этиологические факторы (инфекции, аутоиммунные заболевания) могут приводить к потере иммунологической толерантности. Если в крови женщины присутствуют антиспермальные антитела, тогда нарушаются процессы формирования трофобласта, рост и формирование плаценты, имплантации. А это приводит к прерыванию беременности, гестозу, задержке развития плода, фетоплацентарной недостаточности.

    Исследование на антиспермальные антитела рекомендуют проводить у всех пар с необъяснимым бесплодием.

    Хорионический гонадотропин (ХГч) в сыворотке крови

    ХГч - гликопротеин с молекулярной массой приблизительно 46000, состоящий из двух субъединиц- альфа и бета. Повышенный уровень ХГч в сыворотке крови обнаруживают уже на 8-12-й день после зачатия. В течение I триместра беременности концентрация ХГч быстро нарастает, удваиваясь, каждые 2-3 дня. Максимум концентрации приходится на 7-10-е недели беременности, после чего концентрация ХГч начинает снижаться, и в течение второй половины беременности остается более или менее стабильной.

    Таблица 12. Значения медиан концентрации ХГч для скрининга врожденных пороков развития плода во II и III триместре

    Альфа-Фетопротеин (АФП) в сыворотке крови

    АФП - гликопротеин с молекулярной массой приблизительно 65000 кДа, секретирующийся плодной печенью и желточным мешком. АФП у плода является основным белком сыворотки, у взрослых содержание АФП в сыворотке крови незначительно. Во II триместре беременности, при наличии у плода синдрома Дауна, концентрация АФП понижена, а концентрация ХГч в крови повышена. С учетом этого, ИФА исследование на АФП и ХГч используют в качестве метода массового пренатального обследования беременных, с помощью которого можно выделить группу высокого риска по наличию у плода пороков развития или синдрома Дауна. Значения медиан концентрации АФП в сыворотке крови для скрининга врожденных пороков развития плода во II триместре приведены в таблице 13.

    Таблица 13. Значения медиан концентрации АФП для скрининга врожденных пороков развития плода во II триместре

    Свободный эстриол в сыворотке крови

    Эстриол - главный стероидный гормон, синтезируемый плацентой. Содержание эстриола в крови беременной коррелирует с активностью надпочечников плода. Эстриол проникает в кровоток беременной, где можно определить концентрацию его в свободном состоянии. При нормально развивающейся беременности синтез эстриола повышается в соответствии с увеличением срока беременности и ростом плода (таблица 14).

    Таблица 14. Концентрации эстриола в сыворотке крови женщины в динамике физиологической беременности

    Срок беременности, неделя

    Медиана концентрации эстриола, нмоль/л

    Референтные величины эстриола, нмоль/л

    При патологии (выраженные пороки развития ЦНС у плода, врожденные пороки сердца, синдром Дауна, задержка роста плода, гипоплазия надпочечников плода, внутриутробная смерть плода) концентрация свободного страдиола в сыворотке крови беременной снижается.

    Значения медиан концентрации свободного эстрадиола в сыворотке крови для скринига врожденных пороков развития во II триместре беременности приведены в таблице 15.

    Таблица 15. Значения медиан концентрации свободного эстрадиола в сыворотке крови для скринига врожденных пороков развития во II триместре беременности

    При синдроме Дауна и Эдвардса концентрация свободного эстрадиола обычно составляет 0,7 МоМ.

    В заключение отметим, что широкое внедрение полноценной ИФА диагностики в клиническую практику существенно повысит эффективность диагностики и лечения пациентов с нарушениями репродуктивной системы.

    Цена: по запросу

    Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

    Производитель: Хема-медика

    Страна: Россия

    Ед. изм.: набор

    Вид упаковки: картонная коробка

    Артикул: K217

    Описание

    Количественное определение концентрации прогестерона в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа


    Функциональное назначение

    Определение прогестерона основано на использовании конкурентного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к прогестерону. Прогестерон из образца конкурирует c конъюгированным прогестероном за связывание с антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски обратно пропорциональна концентрации прогестерона в исследуемом образце. Концентрацию прогестерона в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания прогестерона в калибровочных пробах

    Технические характеристики

    Метод: твердофазный иммуноферментный анализ.
    Проба: сыворотка, плазма крови.
    Специфичность 100%.
    Чувствительность: минимальная достоверно определяемая концентрация не превышает 0,5 нмоль/л.
    Коэффициент вариации результатов не превышает 8%.
    Линейность: в диапазоне концентраций 1-300 нмоль/л ± 10%.
    Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 40 исследуемых образцов, 7 калибровочных проб и 1 пробы контрольной сыворотки (всего 96 определений).
    Состав набора:
    1. Планшет 96-луночный полистироловый, стрипированный, готов к использованию - 1 шт.
    2. Калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека, содержащие известные количества прогестерона - 0; 1; 3; 10; 30; 100; 300 нмоль/л, готовы к использованию (калибровочная проба 0 нмоль/л - 2 мл, остальные - по 0.8 мл каждая) прозрачные жидкости пурпурного цвета (калибровочная проба 0 - прозрачная бесцветная жидкость) - 7 шт.
    3. Контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержанием прогестерона, готова к использованию, прозрачная бесцветная жидкость, 0,8 мл х 1 флакон.
    4. Конъюгат, готов к использованию, прозрачная жидкость пурпурного цвета, 22 мл х 1 флакон.
    5. Раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ), готов к использованию,прозрачная бесцветная жидкость, 11 мл х 1 флакон.
    6. Концентрат отмывочного раствора, 21х-кратный, прозрачная бесцветная жидкость, 22 мл х 1 флакон.
    7. Стоп-реагент, готов к использованию, прозрачная бесцветная жидкость, 11 мл х 1 флакон.
    8. Бумага для заклеивания планшета - 2 шт.
    9. Инструкция по применению - 1 шт.
    10. Паспорт контроля качества - 1 шт.
    Набор хранить при температуре +2…+8 °C в течение всего срока годности, указанного на упаковке, замораживание недопустимо. Приготовленный отмывочный раствор хранить при комнатной температуре (+18…+25 °C) не более 5 суток или при температуре +2…+8 °C не более 30 суток. Калибровочная сыворотка после вскрытия пригодна в течение 2 месяцев.
    Величину оптической плотности измеряют при длине волны 450 нм.
    Зарегистрировано в Росздравназдзор.